Name: automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant
Uploaded: 2019-11-27T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

이 작품은 Crafoord 재단 (TM 및 PN), 스웨덴 정부 연구 보조금 (PN, TM), 스웨덴 연구 위원회 (PN) 및 그로신스키 재단 (TM, PN)에 의해 지원되었다.

룬드 대학의 윤리위원회는 헬싱키 선언 (2013/728)에 따라 건강한 자원 봉사자로부터 정맥 혈액의 수집을 승인했다. 모든 자원봉사자들은 서면으로 동의를 구했습니다.
1. 밀도 그라데이션 원심분리를 사용하여 말초 혈액 호중구의 분리
<ol><li>헤파린을 포함하는 관에 있는 인간적인 정맥 혈액을 수집하고 관이 실온에 도달할 수 있도록 하십시오. 참고: 건강한 기증자로부터 ?...

<ol>
	<li>Nauseef, W. M., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+at+work.">Neutrophils at work.</a> Nature Immunology. 15 (7), 602-611 (2014).</li><li>Borregaard, N., Cowland, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granules+of+the+human+neutrophilic+polymorphonuclear+leukocyte.">Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte.</a> Blood. 89 (10), 3503-3521 (1997).</li><li>Nordenfelt, P., Tapper, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phagosome+dynamics+during+phagocytosis+by+neutrophils.">Phagosome dynamics during phagocytosis by neutrophils.</a> Journal of Leukocyte Biology. 90 (2), 271-284 (2011).</li><li>Brinkmann, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+kill+bacteria.">Neutrophil extracellular traps kill bacteria.</a> Science. 303 (5663), 1532-1535 (2004).</li><li>Sorensen, O. E., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+-+the+dark+side+of+neutrophils.">Neutrophil extracellular traps - the dark side of neutrophils.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (5), 1612-1620 (2016).</li><li>Yipp, B. G., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETosis:+how+vital+is+it?.">NETosis: how vital is it?.</a> Blood. 122 (16), 2784-2794 (2013).</li><li>Jorch, S. K., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+role+for+neutrophil+extracellular+traps+in+noninfectious+disease.">An emerging role for neutrophil extracellular traps in noninfectious disease.</a> Nature Medicine. 23 (3), 279-287 (2017).</li><li>Fuchs, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+cell+death+program+leads+to+neutrophil+extracellular+traps.">Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps.</a> J Cell Biol. 176 (2), 231-241 (2007).</li><li>Mohanty, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mechanism+for+NETosis+provides+antimicrobial+defense+at+the+oral+mucosa.">A novel mechanism for NETosis provides antimicrobial defense at the oral mucosa.</a> Blood. 126 (18), 2128-2137 (2015).</li><li>Hakkim, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+Raf-MEK-ERK+pathway+is+required+for+neutrophil+extracellular+trap+formation.">Activation of the Raf-MEK-ERK pathway is required for neutrophil extracellular trap formation.</a> Nature Chemical Biology. 7 (2), 75-77 (2011).</li><li>Brinkmann, V., Goosmann, C., Kuhn, L. I., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+quantification+of+in+vitro+NET+formation.">Automatic quantification of in vitro NET formation.</a> Frontiers in Immunology. 3, 413 (2012).</li><li>Coelho, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+determination+of+NET+(neutrophil+extracellular+traps)+coverage+in+fluorescent+microscopy+images.">Automatic determination of NET (neutrophil extracellular traps) coverage in fluorescent microscopy images.</a> Bioinformatics. 31 (14), 2364-2370 (2015).</li><li>Mohanty, T., Sorensen, O. E., Nordenfelt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETQUANT:+Automated+Quantification+of+Neutrophil+Extracellular+Traps.">NETQUANT: Automated Quantification of Neutrophil Extracellular Traps.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1999 (2017).</li><li>Kaplan, M. J., Radic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps:+double-edged+swords+of+innate+immunity.">Neutrophil extracellular traps: double-edged swords of innate immunity.</a> Journal of Immunology. 189 (6), 2689-2695 (2012).</li><li>Cedervall, J., Olsson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+Gone+Astray+-+NETs+in+Cancer.">Immunity Gone Astray - NETs in Cancer.</a> Trends in Cancer. 2 (11), 633-634 (2016).</li><li>Ginley, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+detection+and+quantification+of+human+and+mouse+neutrophil+extracellular+traps+in+flow+cytometry+and+confocal+microscopy.">Computational detection and quantification of human and mouse neutrophil extracellular traps in flow cytometry and confocal microscopy.</a> Scientific Reports. 7 (1), 17755 (2017).</li></ol>

NET 형성은 다양한 호중구 armamentarium4에 비교적 최근에 첨가되어 있으며 광범위한 연구 영역5,7,14,15에서NET의 의미를 연구하는 데 관심이 눈에 띄게 급증하고 있다. 면역형 광현미경 검사법 및 후속 이미지 기반 정량화를 사용하여 이미지를 획득하는 것은 NET를 정량화하는 데 널리 사?...

호중구는 다양한 미생물 병원균에 대한 선천적 숙주 방어 반응의 중요한중재자1. 그들은 항균 단백질2의넓은 배열을 포함하는 그들의 과립을 풀어 놓음으로써 그들의 항균 기능을 실행합니다 2, 반응성 산소 종 (ROS) 및 hypochlorite1을일으키고, 식세포증3를통해. 또한, 브링크만 외. 4 호중구 세포 외 트랩 (NETs)을 호중구가 침입 병원체를 트랩하고 제거하는 새로운 메커니즘으로 기술했습니다. 그들의 발견 이십 년 전 조금 10 년 전부터 4,NETs는 감염성5,6 및 비 감염성7 이환의 다양한에서 연루되었습니다. NET 형성은 과립 유래 항균 단백질로 코팅된 염색질 DNA의 압출을 초래하는 활성 과정 및8. NET 형성과 관련된 세포 및 핵 형태학의 주요 변화 중 일부는 핵 형태, 크로마틴 데톤 덴션의 손실, 세포질에서 핵으로의 과립 단백질의 동원 및 핵 및 세포 직경의 증가를 포함한다8,9.
상기 웹형 NET는 세포보다 약간 큰 확산 구조또는 단일 호중구보다 몇 배 더 큰 구조로서 나타날 수 있는 NETosis5,10의지표로 간주된다. 형광 현미경 검사법을 사용하여, NET는 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)와 같은 형광 프로브로 DNA를 조사하고 호중구 엘라스타아제와 같은 순 결합 단백질에 대한 면역 형광 염색에 의해 검출될 수 있습니다. DNA 및 NET 결합 단백질에 대한 염색의 중첩 영역의 정량화는 이미지11에서NETs 아래의 전체 영역을 결정한다.
다양한 이미지 분석 옵션을 사용하여NET1,12의형광 이미지 기반 정량화를 수행할 수 있습니다. 그러나 이러한 소프트웨어 옵션은 사용자 친화적이거나 완전히 자동화되지 않는 데 한계가 있습니다. 이 문서에서는, 우리는 NETQUANT13의작동을 보여줍니다, 편견 완전 자동화 된 면역 형광 현미경 현미경 이미지 기반 의 NET 정량화를 수행 할 수있는 자유롭게 사용할 수있는 응용 프로그램. 이 앱은 사용자 친화적인 그래픽 인터페이스(GUI)를 가지며 단일 셀 분석을 수행할 수 있습니다. 이 소프트웨어는 DNA-NET 결합 마커, 염색질 데톤 데톤 형성 관련 변형 및 DNA의 증가:NET 결합 단백질 비율의 영역에서 형태학적 변화를 검출함으로써 이미지에서 NETosis를 정량화합니다. 종합하면 여러 NET 정의 기준을 통해 여러 데이터 세트에 대해 공정한 방식으로 엄격한 NET 정량화를 수행할 수 있습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Heparinised plastic tubes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>367885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lymphoprep</td>
			<td>Axis-Shield</td>
			<td>114547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 with L-Glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11835-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well Tissue culture plates</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10626491</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#1 Coverslips 10mm</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>CS10100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>631-0098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary anti-human elastase</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>DAKO rabbit 1373, contract immunization</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary fluorophore conjugated goat anti-rabbit</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>A-11072, A-11070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PROLONG-Gold Antifade reagent with DAPI</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>P36930</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G9023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>79346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Ti-E Epifluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td>Andor Zyla</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plan Apochromat 20x, 40x objectives</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows 10</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>macOS Sierra 10.12</td>
			<td>Apple</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant

호중구 세포 외 트랩 (NETs)은 DNA와 과립 유래 항균 단백질로 구성된 웹과 같은 항균 구조입니다. 면역형광 현미경 검사법 및 이미지 기반 정량화 방법은 호중구 세포외 트랩 형성을 정량화하는 중요한 도구로 남아 있습니다. 그러나, 현재 NET를 정량화하기 위해 이용 가능한 면역형광 기반 방법에 대한 주요 제한사항이 있다. 이미지 기반 NET 정량화의 수동 방법은 종종 주관적이며 오류가 발생하기 쉽고 사용자, 특히 경험이 없는 사용자에게는 지루합니다. 또한 현재 사용 가능한 정량화 소프트웨어 옵션은 반자동이거나 작동 전에 교육이 필요합니다. 여기서, 우리는 NETQUANT라고 불리는 NET 형성을 평가하기 위해 자동화된 면역형광 기반 이미지 정량화 방법의 구현을 입증한다. 이 소프트웨어는 사용하기 쉽고 사용자 친화적 인 그래픽 사용자 인터페이스 (GUI)를 가지고 있습니다. 그것은 표면적 및 DNA의 증가와 같은 생물학적으로 관련된 매개 변수를 고려합니다: NET 마커 단백질 비율 및 핵 변형은 NET 형성을 정의합니다. 또한,이 도구는 자유롭게 사용할 수있는 응용 프로그램과 함께 내장되어 있으며, 단일 셀 해상도 정량화 및 분석을 할 수 있습니다.

5 x 105 호중구/mL을 12웰 플레이트에 놓은 커버슬립에 시드하고 20 nM PMA로 자극하거나 150분 동안 자극되지 않은 상태로 방치하였습니다. 샘플은 1 차 토끼 항 인간 호중구 엘라스타아제 항체, 이차 염소 항 토끼 불소 공화 항체 및 DAPI-DNA를 얼룩지게 하는 형광 표지된 염료를 사용하여 염색하였다(자세한 내용은 물질 표 참조). 최소 5개의 심상을 epifluorescen...

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Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT

여기에서는 면역형광 이미지에서 NET를 정량화하기 위한 완전 자동 소프트웨어 옵션인 NEUTrophil 세포 외 트랩(NET)을 생성하고 NETQUANT를 운영하기 위한 프로토콜을 제시합니다.

NETQUANT를 사용한 호중구 세포외 트랩의 자동 이미지 기반 정량화

Neutrophil extracellular traps (NETs) are web-like antimicrobial structures consisting of DNA and granule derived antimicrobial proteins. ...

여기에서 우리는 NETS 및 면역 불경심 심상을 정량화하기 위한 완전 자동화된 접근 방식인 NETQUANT를 제시합니다. 이렇게 하면 연구원이 여러 사용자와 조건에 의해 생성된 데이터에서 유사한 이미지 분석을 만드는 데 도움이 됩니다. 이 기술의 장점은 사용의 용이성, 단일 셀 데이터 분석, NET 형성을 평가하는 여러 기준 및 여러 이미지의 편견없는 분석입니다.분석 소프트웨어를 설치하고 엽니다. 최신 버전은 제노도 GitHub 아카이브 또는 Nordonfelt Lab 웹 사이트에서 찾을 수 있습니다. 설정 탭에서 원본 메뉴에서 경로 경로 경로를 클릭하여 분석을 위한 원본 폴더를 선택합니다.분석할 이미지 시퀀스를 포함하는 폴더를 선택합니다. 다시 대상 메뉴에서 get 경로 옵션을 클릭하고 이미지 분석 다음 데이터를 저장하기 위한 대상 폴더를 선택합니다. 다음으로, 별도의 채널 이미지를 사용하는 경우, DNA 채널이 핵 DNA 얼룩에 대응할 수 있도록 채널 폴더의 이름을 지정하고, NET 채널은 이미지에서 호중구 엘라스타제 얼룩을 묘사한다.또한 컨트롤 이미지 파일을 포함하는 폴더의 이름을 컨트롤로 지정합니다. 그런 다음 로드 이미지 정보 버튼을 클릭하고 이미지 메타데이터를 소프트웨어에 로드합니다. 그런 다음 채널 순서 하위 메뉴에서 이미지에 포함된 올바른 채널 순서를 선택합니다.이렇게 하면 우발적인 불일치를 방지할 수 있습니다. 이제 준비 된 데이터 버튼을 클릭하여 원시 데이터에서 기본 이미지 속성을 얻고 이미지를 변환합니다. 그런 다음 변환된 이미지가 샘플 유형 하위 메뉴에 나타납니다.샘플 유형 메뉴를 클릭하고 하위 메뉴에서 이미지를 선택하고 디스플레이 이미지 데이터를 클릭하여 DNA 및 호중구 세포 외 트랩 또는 NET 채널로 분할된 이미지를 각각 표시합니다. 세포를 각각의 채널로 분할하려면 분할 방법 탭을 선택하고 DNA 및 NET 채널 모두에 대한 메서드 하위 메뉴에서 메서드를 선택합니다. 분할의 기본 방법은 적응으로 설정되며 권장되는 설정입니다.다른 옵션은 글로벌 에지 및 chanverse를 포함한 소프트웨어에서 사용할 수 있습니다. 밀접하게 배치 된 세포 또는 NET를 구별하는 데 도움이되는 분수령 옵션도 포함되어 있습니다. 또한 세분화 탭에서 세그먼트 제어 샘플 옵션을 클릭합니다.그런 다음 샘플 유형 하위 메뉴에서 PMA를 선택하고 배치 옵션을 클릭하여 데이터 집합에 포함된 모든 이미지의 세분화를 시작합니다. 다음으로, 샘플 유형 메뉴에서 이미지를 선택하고 디스플레이 이미지 데이터 버튼을 클릭하여 DNA 및 NET 마스크가 생성된 후 세분화에 대한 바이너리 이미지 마스크를 시각화하고 검증합니다. 이제 분석 탭에서 결정 임계값 버튼을 클릭하여 제어 샘플을 분석합니다.그런 다음, 오른쪽에, PMA로 샘플 유형을 변경하고 자극 된 샘플의 분석을 완료하기 위해 세포 속성 얻기 버튼을 클릭합니다. 다음으로, 샘플 유형 하위 메뉴에서 이미지를 선택하고 디스플레이 이미지 데이터 버튼을 클릭하여 오버레이 및 셀 수 및 NET 형성 셀을 이미지에 표시합니다. 먼저 샘플 유형 하위 메뉴에서 샘플을 선택합니다.개별 이미지는 분석을 위해 샘플 유형 하위 메뉴에서 선택하거나 배치 옵션을 선택하여 이미지의 전체 배치를 분석할 수 있습니다. 선택한 경우 분석 NETs 버튼을 클릭하여 분석을 완료합니다. NET 기준을 수동으로 조정하여 지정된 샘플에 대해 최적의 결과를 얻을 수 있습니다.식별된 NET를 원본 이미지와 비교하여 식별 품질을 평가합니다. 이 단계가 완료되면 데이터 집합의 모든 이미지에 NET 기준을 적용할 수 있습니다. NET 기준에 대한 모든 변경 사항은 모든 제어 샘플에도 동시에 적용됩니다.이미지 수, 이미지당 셀 수 및 이미지당 NET의 백분율이 표시되는 셀 데이터 하위 메뉴의 데이터 요약을 검사합니다. 출력 탭을 입력하여 결과 출력을 선택하고 봅니다. 출력 의 형태를 선택하고 출력 결과 버튼을 클릭하여 제어 및 PMA 처리 샘플 분석에서 생성된 다양한 데이터 출력을 탐색하고 비교합니다.다음으로 결과 데이터 테이블 CSV 파일을 실행하여 단일 셀 데이터를 탐색하고 결과 PDF 파일을 클릭하여 샘플에서 NET 영역 분포 및 DNA 대 NET 비율을 시각화합니다. 빨간색 선은 그래프의 임계값을 나타냅니다. 마지막으로 결과를 클릭하여 분포 파일을 이동하여 DNA의 순 영역 과 모양을 결정합니다.여기서, 제어 호중구의 15개의 심상 및 PMA 자극호성 호중구의 15개의 심상이 10분 이내에 분석되었다. 세포의 총 수는 계산되었고, 호중구 세포 외 트랩을 가진 세포의 백분율은 이 문서에서 설명된 자동화된 정량화 방법을 사용하여 결정되었다. 이러한 결과는 PMA 자극호중구가 더 큰 면적, 핵 변형의 증가, 대조군 샘플보다 더 높은 DNA 대 순 비율을 가지고 있음을 보여줍니다.3D 그래프로 결합하면 PMA 자극 샘플은 제어 샘플보다 조임 그룹화 영역을 표시하는 경향이 있습니다. 절차를 시도하는 동안 워크플로우가 여러 기부자를 사용하여 테스트되었지만 사용자가 개별 데이터 집합에 따라 소프트웨어 매개 변수를 적절하게 결정하는 것이 좋습니다.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Neutrophil Extracellular Traps: How to Generate and Visualize Them

호중구 세포 트랩 : 그들을 생성 및 시각화하는 방법

Neutrophil granulocytes are the most abundant group of leukocytes in the peripheral blood. As professional phagocytes, they engulf bacteria and kill them ...

연구

면역학 및 감염병학

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolation and Handling

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps NETs Isolation and Handling

단순화 된 인간 호중구 세포 외 트랩 (그물)의 분리 및 처리

Neutrophil Extracellular Traps (NETs) have been recently identified as part of the neutrophil&#8217;s antimicrobial armamentarium. Apart from their role ...

Methods to Study Lipid Alterations in Neutrophils and the Subsequent Formation of Neutrophil Extracellular Traps

방법은 지질 호중구의 변경 및 호중구 세포 외 트랩의 후속 형성을 연구하기 위해

Lipid analysis performed by high performance thin layer chromatography (HPTLC) is a relatively simple, cost-effective method of analyzing a broad range of ...

A Simple Fluorescence Assay for Quantification of Canine Neutrophil Extracellular Trap Release

개 호중구 세포 외 트랩 릴리스의 정량화를위한 ​​간단한 형광 분석

Neutrophil extracellular traps are networks of DNA, histones and neutrophil proteins released in response to infectious and inflammatory stimuli. Although ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

Confocal 현미경 검사 법을 사용 하 여 대 식 세포 세포 외 트랩을 시각화

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...

Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy

면역형광 현미경을 사용하여 파라핀 내장 펠린 동맥 혈전에서 호중구 세포 외 트랩의 식별

Neutrophil extracellular traps (NETs), composed of cell-free DNA (cfDNA) and proteins like histones and neutrophil elastase (NE), are released by ...

Morphological and Compositional Analysis of Neutrophil Extracellular Traps Induced by Microbial and Chemical Stimuli

미생물 및 화학적 자극에 의해 유도 된 호중구 세포 외 트랩의 형태 학적 및 조성 분석

Neutrophils function as the first line of cellular defense in an innate immune response by employing diverse mechanisms, such as the formation of ...

Quantifying Myeloperoxidase-DNA and Neutrophil Elastase-DNA Complexes from Neutrophil Extracellular Traps by Using a Modified Sandwich ELISA

변형된 샌드위치 ELISA를 사용하여 호중구 세포외 트랩에서 Myeloperoxidase-DNA 및 Neutrophil Elastase-DNA 복합체 정량화

Certain stimuli, such as microorganisms, cause neutrophils to release neutrophil extracellular traps (NETs), which are basically web-like structures ...

Staining and Imaging to Visualize Neutrophil Extracellular Traps

Immunofluorescence Imaging of Neutrophil Extracellular Traps in Human and Mouse Tissues

Neutrophil Extracellular Traps Imaging in Human and Mouse Tissues (Video) | JoVE

인간 및 생쥐 조직에서 호중구 세포외 트랩의 면역형광 이미징

Neutrophil extracellular traps (NETs) are released by neutrophils as a response to bacterial infection or traumatic tissue damage but also play a role in ...