Name: automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant
Uploaded: 2019-11-27T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

Arbeidet ble finansiert av Crafoord Foundation (TM og PN), svensk stats forskningsstipend (PN, TM), svensk forskningsråd (PN) og Groschinsky Foundation (TM, PN).

Etikk komitéen i Lunds universitet godkjente innsamlingen av venøs blod fra friske frivillige i samsvar med Declaration of Helsinki (2013/728). Alle frivillige gitt deres skriftlige informert samtykke.
1. isolering av perifere blod nøytrofile bruke Density-gradient sentrifugering
<ol><li>Samle humant venøs blod i rør som inneholder heparin og la rørene å nå romtemperatur. Merk: minst 16 mL blod fra en sunn donor er nødvendig for å gi en tilstrekkelig stor celle pellet.</li>
	<li...

<ol>
	<li>Nauseef, W. M., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+at+work.">Neutrophils at work.</a> Nature Immunology. 15 (7), 602-611 (2014).</li><li>Borregaard, N., Cowland, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granules+of+the+human+neutrophilic+polymorphonuclear+leukocyte.">Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte.</a> Blood. 89 (10), 3503-3521 (1997).</li><li>Nordenfelt, P., Tapper, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phagosome+dynamics+during+phagocytosis+by+neutrophils.">Phagosome dynamics during phagocytosis by neutrophils.</a> Journal of Leukocyte Biology. 90 (2), 271-284 (2011).</li><li>Brinkmann, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+kill+bacteria.">Neutrophil extracellular traps kill bacteria.</a> Science. 303 (5663), 1532-1535 (2004).</li><li>Sorensen, O. E., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+-+the+dark+side+of+neutrophils.">Neutrophil extracellular traps - the dark side of neutrophils.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (5), 1612-1620 (2016).</li><li>Yipp, B. G., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETosis:+how+vital+is+it?.">NETosis: how vital is it?.</a> Blood. 122 (16), 2784-2794 (2013).</li><li>Jorch, S. K., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+role+for+neutrophil+extracellular+traps+in+noninfectious+disease.">An emerging role for neutrophil extracellular traps in noninfectious disease.</a> Nature Medicine. 23 (3), 279-287 (2017).</li><li>Fuchs, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+cell+death+program+leads+to+neutrophil+extracellular+traps.">Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps.</a> J Cell Biol. 176 (2), 231-241 (2007).</li><li>Mohanty, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mechanism+for+NETosis+provides+antimicrobial+defense+at+the+oral+mucosa.">A novel mechanism for NETosis provides antimicrobial defense at the oral mucosa.</a> Blood. 126 (18), 2128-2137 (2015).</li><li>Hakkim, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+Raf-MEK-ERK+pathway+is+required+for+neutrophil+extracellular+trap+formation.">Activation of the Raf-MEK-ERK pathway is required for neutrophil extracellular trap formation.</a> Nature Chemical Biology. 7 (2), 75-77 (2011).</li><li>Brinkmann, V., Goosmann, C., Kuhn, L. I., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+quantification+of+in+vitro+NET+formation.">Automatic quantification of in vitro NET formation.</a> Frontiers in Immunology. 3, 413 (2012).</li><li>Coelho, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+determination+of+NET+(neutrophil+extracellular+traps)+coverage+in+fluorescent+microscopy+images.">Automatic determination of NET (neutrophil extracellular traps) coverage in fluorescent microscopy images.</a> Bioinformatics. 31 (14), 2364-2370 (2015).</li><li>Mohanty, T., Sorensen, O. E., Nordenfelt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETQUANT:+Automated+Quantification+of+Neutrophil+Extracellular+Traps.">NETQUANT: Automated Quantification of Neutrophil Extracellular Traps.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1999 (2017).</li><li>Kaplan, M. J., Radic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps:+double-edged+swords+of+innate+immunity.">Neutrophil extracellular traps: double-edged swords of innate immunity.</a> Journal of Immunology. 189 (6), 2689-2695 (2012).</li><li>Cedervall, J., Olsson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+Gone+Astray+-+NETs+in+Cancer.">Immunity Gone Astray - NETs in Cancer.</a> Trends in Cancer. 2 (11), 633-634 (2016).</li><li>Ginley, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+detection+and+quantification+of+human+and+mouse+neutrophil+extracellular+traps+in+flow+cytometry+and+confocal+microscopy.">Computational detection and quantification of human and mouse neutrophil extracellular traps in flow cytometry and confocal microscopy.</a> Scientific Reports. 7 (1), 17755 (2017).</li></ol>

Netto formasjon er et relativt nylig tillegg til de ulike nøytrofile armamentarium4 og det har vært en merkbar bølge av interesse å studere konsekvensen av garn i et bredt spekter av forskningsområder5,7,14,15. Anskaffelse av bilder ved hjelp av Immunofluorescence mikroskopi og påfølgende bildebasert kvantifisering er en mye brukt metode for å kvantifisere NETs. ...

Nøytrofile er avgjørende meglere av medfødt vert forsvaret svar mot en rekke mikrobielle patogener1. De utfører sine antimikrobielle funksjoner ved å slippe sine granulater inneholder et bredt utvalg av antimikrobielle proteiner2, produsere reaktive oksygen arter (ros) og natriumhypokloritt1, og gjennom fagocytose3. I tillegg Brinkmann et al. 4 beskrevet nøytrofile ekstracellulære feller (Nets) som en roman mekanisme der nøytrofile felle og eliminere invaderende patogener. Siden deres oppdagelse litt over et ti år siden4, har Nets vært innblandet i et bredt utvalg av smittsomme5,6 og ikke-smittsomme7 morbidities. NET formasjon er en aktiv prosess og resulterer i ekstrudering av kromatin DNA belagt med granule-avledet antimikrobielle proteiner8. Noen av de viktigste endringene i cellulære og kjernefysiske morfologi forbundet med netto formasjon inkluderer tap av kjernefysisk morfologi, kromatin decondensation, mobilisering av granule proteiner fra cytoplasma til kjernen og en økning i kjernefysiske og cellulære diameter8,9.
De Web-lignende garn, som kan vises som diffuse strukturer litt større enn cellen eller som strukturer flere ganger større enn en enkelt nøytrofile regnes som indikatorerpå NETosis. Ved hjelp av fluorescens mikroskopi, kan NETs oppdages ved å undersøke DNA med en fluorescerende sonde som 4 ', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) og ved immunofluorescence farging mot netto bundne proteiner som nøytrofile elastase. Kvantifisering av overlappende områder av farging for DNA og NET-Bound proteiner bestemmer det totale arealet under NETs i et bilde11.
En rekke bildeanalyse alternativer er tilgjengelige for å utføre fluorescens bildebasert kvantifisering av garn11,12. Bortsett fra disse programvare valgmulighetene gave begrensninger inne ikke tilværelse bruker-vennlig og/eller fullt ut automatisert. I denne artikkelen viser vi driften av NETQUANT13, en fritt tilgjengelig app som kan utføre upartiske helautomatisk immunofluorescence mikroskopi bilde-basert net kvantifisering. Programmet har et brukervennlig grafisk grensesnitt (GUI) og kan utføre enkelt celle analyse. Programvaren kvantifiserer NETosis i et bilde ved å detektere de morfologiske endringene i området DNA-NET-Bound markør, kromatin decondensation tilhørende deformasjon av kjernen og økning i DNA: NET-Bound protein ratio. Til sammen gir flere NET definisjons kriterier strenge NET-kvantifisering på tvers av flere datasett på en upartisk måte.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Heparinised plastic tubes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>367885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lymphoprep</td>
			<td>Axis-Shield</td>
			<td>114547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 with L-Glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11835-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well Tissue culture plates</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10626491</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#1 Coverslips 10mm</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>CS10100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>631-0098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary anti-human elastase</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>DAKO rabbit 1373, contract immunization</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary fluorophore conjugated goat anti-rabbit</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>A-11072, A-11070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PROLONG-Gold Antifade reagent with DAPI</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>P36930</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G9023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>79346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Ti-E Epifluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td>Andor Zyla</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plan Apochromat 20x, 40x objectives</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows 10</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>macOS Sierra 10.12</td>
			<td>Apple</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant

Nøytrofile ekstracellulære feller (NETs) er Web-lignende antimikrobielle strukturer bestående av DNA og granule avledet antimikrobielle proteiner. Immunofluorescence mikroskopi og bildebasert kvantifisering metoder er fortsatt viktige verktøy for å quantitate nøytrofile ekstracellulære felle formasjon. Det er imidlertid viktige begrensninger for de immunofluorescence metodene som for øyeblikket er tilgjengelige for kvantifisere NETs. Manuelle metoder for avbildningsbasert NET kvantifisering er ofte subjektive, utsatt for feil og kjedelige for brukere, spesielt ikke-erfarne brukere. Også for øyeblikket tilgjengelige programvarealternativer for kvantifisering er enten semi-automatisk eller krever opplæring før drift. Her viser vi implementeringen av en automatisert immunofluorescence bilde kvantifisering metode for å evaluere NET-formasjonen kalt NETQUANT. Programvaren er enkel å bruke og har en brukervennlig grafisk brukergrensesnitt (GUI). Det anser biologisk relevante parametre som en økning i areal og DNA: NET markør protein ratio, og kjernefysisk deformasjon å definere NET formasjon. Videre er dette verktøyet bygget som en fritt tilgjengelig app, og gir mulighet for én celle oppløsning kvantifisering og analyse.

5 x 105 nøytrofile/ml ble sådd på coverslips plassert i en 12-brønn plate og stimulert med enten 20 nM PMA eller venstre unstimulated for 150 min. Prøvene ble deretter farget ved hjelp av primære kanin anti-humant nøytrofile elastase antistoffer, sekundære geit anti-kanin fluoroforen bøyd antistoffer og DAPI-en fluorescensmerkete merket fargestoff som flekker DNA (se tabell over materialer for detaljer). Et minimum av 5 bilder ble deretter kjøpt ved h...

Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT

Her presenterer vi en protokoll for generering av nøytrofile ekstracellulære feller (NETs) og drift av NETQUANT, et helautomatisk programvare alternativ for kvantifisering av NETs i immunofluorescence bilder.

Automatisert image-basert kvantifisering av nøytrofile ekstracellulære feller bruke NETQUANT

Neutrophil extracellular traps (NETs) are web-like antimicrobial structures consisting of DNA and granule derived antimicrobial proteins. ...

Her presenterer vi NETQUANT, en helautomatisk tilnærming for å kvantifisere NETS- og immunofluorescence-bilder. Dette vil hjelpe forskere med å lage sammenlignbare bildeanalyser fra data generert av flere brukere og forhold. Fordelene med denne teknikken er brukervennligheten, encellede dataanalyse, flere kriterier for å evaluere NET-formasjon og en objektiv analyse av flere bilder.Installer og åpne analyseprogramvaren. En oppdatert versjon finner du på Zenodo GitHub-arkivet, eller Nordonfelt Labs nettsted. I kategorien oppsett velger du en kildemappe for analyse ved å klikke alternativet hent bane på kildemenyen.Velg mappen som inneholder bildesekvensene som skal analyseres. Igjen, klikk på hent bane alternativet i målmenyen, og velg målmappen for lagring av dataene etter bildeanalyse. Deretter, når du bruker separate kanalbilder, navngi kanalmappene slik at DNA-kanalen samsvarer med kjernefysisk DNA-flekk, og NET-kanalen viser nøytrofil elaastaseflekken i bildene.Gi også navnet på mappen som inneholder kontrollbildefilene som kontroll. Deretter klikker du knappen last inn bildeinformasjon og laster inn bildemetadataene i programvaren. Deretter velger du riktig kanalrekkefølge i bildene i undermenyen i kanalrekkefølgen.Dette bidrar til å forhindre utilsiktede uoverensstemmelser. Klikk nå på klargjør data-knappen for å hente primære bildeegenskaper fra rådata og konvertere bildene. De konverterte bildene vises deretter i undermenyen eksempeltyper.Klikk på eksempeltypemenyen, velg et bilde fra undermenyen og klikk på vis bildedata for å vise bildene delt inn i henholdsvis DNA og Neutrophil Extracellular Trap, eller NET-kanal. Hvis du vil segmentere cellene i de respektive kanalene, velger du segmenteringsmetoden og velger en metode i metodeundermenyen for både DNA- og NET-kanalene. Standardformatode for segmentering er satt til adaptiv og er den anbefalte innstillingen.Andre alternativer er tilgjengelige i programvaren, inkludert global kant og chanverse. Et vannskillealternativ er også inkludert for å bidra til å skille mellom tett plasserte celler eller NETs. Også i segmenteringsfanen klikker du på alternativet segmentkontrolleksempler.Velg deretter PMA fra undermenyen eksempeltype og klikk på batchalternativet for å starte segmentering av alle bildene som er inkludert i datasettet. Deretter velger du bildene i eksempeltypemenyen og klikker på knappen for visning av bildedata for å visualisere og validere de binære bildemaskene for både DNA- og NET-maskene som genereres etter segmentering. Nå, i analysefanen, klikker du på bestemme terskelknappen for å analysere kontrolleksemplene.Deretter, på høyre side, endre prøvetypen til PMA og klikk på få celleegenskaper knappen for å fullføre analysen av de stimulerte prøvene. Deretter velger du et bilde fra undermenyen eksempeltype og klikker på vis bildedata-knappen for å vise overlegget og antall celler og NET-formingsceller i bildet. Begynn med å velge eksemplet fra undermenyen av eksempeltype.Individuelle bilder kan velges fra undermenyen for eksempeltype for analyse, eller hele bildegruppen kan analyseres ved å velge alternativet for satsvis. Når du er valgt, klikker du på analyser NETs-knappen for å fullføre analysen. Juster NET-kriteriene manuelt for å gi optimale resultater for et gitt utvalg.Sammenlign identifiserte NETs med de opprinnelige bildene for å vurdere kvaliteten på identifikasjonen. Når dette trinnet er fullført, kan NET-kriteriene brukes på tvers av alle bildene i datasettet. Eventuelle endringer i NET-kriteriene brukes også samtidig på alle kontrolleksempler.Inspiser datasammendraget i undermenyen for celledata, der antall bilder, celleantall per bilde og prosentandel av NETs per bilde vises. Angi utdatafanen for å velge og vise resultatutdataene. Utforsk og sammenlign de ulike datautdataene som genereres fra analysen av kontroll- og PMA-behandlede prøver ved å velge utdataformen og klikke på utdataresultatknappen.Deretter starter du CSV-filen for resultatdatatabellen for å utforske encellede data og klikker på resultatene PDF-filer for å visualisere NET-områdedistribusjonen og DNA til NET-forholdet i prøvene. Den røde linjen angir terskelverdien i diagrammene. Til slutt klikker du på resultatene bivariate distribusjonsfilen for å bestemme NET-området versus formen på DNA.Her ble 15 bilder av kontroll nøytrofiler og 15 bilder av PMA-stimulerte nøytrofiler analysert på under ti minutter. Det totale antallet celler ble talt og prosentandelen av celler med Neutrophil Extracellular Traps ble bestemt ved hjelp av den automatiserte kvantifiseringsmetoden som er beskrevet i denne artikkelen. Disse resultatene viser at PMA-stimulerte nøytrofiler har et større område, en økning i kjernefysisk deformasjon og et høyere DNA til NET-forhold enn kontrollprøver.Når de kombineres i en 3D-graf, har DE PMA-stimulerte prøvene en tendens til å vise områder med strammegrupperinger enn kontrollprøvene. Mens du prøver prosedyren, er det viktig å huske at selv om arbeidsflyten ble testet ved hjelp av flere givere, anbefales det at brukeren skal bestemme programvareparameterne på riktig måte basert på det enkelte datasettet.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Neutrophil Extracellular Traps: How to Generate and Visualize Them

Neutrophil granulocytes are the most abundant group of leukocytes in the peripheral blood. As professional phagocytes, they engulf bacteria and kill them ...

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolation and Handling

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps NETs Isolation and Handling

Forenklede menneske Nøytrofile Ekstracellulære Traps (NET) Isolasjon og håndtering

Neutrophil Extracellular Traps (NETs) have been recently identified as part of the neutrophil&#8217;s antimicrobial armamentarium. Apart from their role ...

Methods to Study Lipid Alterations in Neutrophils and the Subsequent Formation of Neutrophil Extracellular Traps

Metoder for å studere Lipidendringer av nøytrofile granulocytter og etterfølgende dannelse av Neutrofil Ekstracellulær feller

Lipid analysis performed by high performance thin layer chromatography (HPTLC) is a relatively simple, cost-effective method of analyzing a broad range of ...

A Simple Fluorescence Assay for Quantification of Canine Neutrophil Extracellular Trap Release

En enkel Fluorescens analyse for Kvantifisering av Canine nøytrofile ekstracellulær felle utløsning

Neutrophil extracellular traps are networks of DNA, histones and neutrophil proteins released in response to infectious and inflammatory stimuli. Although ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

Visualisere Macrophage ekstracellulære feller bruker AC Confocal mikroskopi

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...

Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy

Identifikasjon av nøytrofile ekstracellulære feller i parafininnebygd feline arteriell trombi ved hjelp av immunofluorescens mikroskopi

Neutrophil extracellular traps (NETs), composed of cell-free DNA (cfDNA) and proteins like histones and neutrophil elastase (NE), are released by ...

Morphological and Compositional Analysis of Neutrophil Extracellular Traps Induced by Microbial and Chemical Stimuli

Morfologisk og kompositorisk analyse av nøytrofile ekstracellulære feller indusert av mikrobielle og kjemiske stimuli

Neutrophils function as the first line of cellular defense in an innate immune response by employing diverse mechanisms, such as the formation of ...

Quantifying Myeloperoxidase-DNA and Neutrophil Elastase-DNA Complexes from Neutrophil Extracellular Traps by Using a Modified Sandwich ELISA

Kvantifisering av myeloperoksidase-DNA og nøytrofile elastase-DNA-komplekser fra nøytrofile ekstracellulære feller ved hjelp av en modifisert Sandwich ELISA

Certain stimuli, such as microorganisms, cause neutrophils to release neutrophil extracellular traps (NETs), which are basically web-like structures ...

Staining and Imaging to Visualize Neutrophil Extracellular Traps

Immunofluorescence Imaging of Neutrophil Extracellular Traps in Human and Mouse Tissues

Neutrophil Extracellular Traps Imaging in Human and Mouse Tissues (Video) | JoVE

Immunfluorescensavbildning av nøytrofile ekstracellulære feller i vev fra mennesker og mus

Neutrophil extracellular traps (NETs) are released by neutrophils as a response to bacterial infection or traumatic tissue damage but also play a role in ...