Name: automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant
Uploaded: 2019-11-27T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

Arbetet finansierades av Crafoordska stiftelsen (TM och PN), statens forskningsstipendium (PN, TM), Vetenskapsrådet (PN) och Groschinsky Foundation (TM, PN).

Etikkommittén vid Lunds universitet godkände insamling av venöst blod från friska frivilliga i enlighet med Helsingforsdeklarationen (2013/728). Alla volontärer gav sitt skriftliga informerade samtycke.
1. isolering av perifera Blodneutrofiler med Densitetsgradientcentrifugering
<ol><li>Samla in humant venöst blod i tuber som innehåller heparin och låt rören nå rumstemperatur. Anmärkning: minst 16 mL blod från en frisk givare krävs för att ge en tillräckligt stor cellpellet...

<ol>
	<li>Nauseef, W. M., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+at+work.">Neutrophils at work.</a> Nature Immunology. 15 (7), 602-611 (2014).</li><li>Borregaard, N., Cowland, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Granules+of+the+human+neutrophilic+polymorphonuclear+leukocyte.">Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte.</a> Blood. 89 (10), 3503-3521 (1997).</li><li>Nordenfelt, P., Tapper, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phagosome+dynamics+during+phagocytosis+by+neutrophils.">Phagosome dynamics during phagocytosis by neutrophils.</a> Journal of Leukocyte Biology. 90 (2), 271-284 (2011).</li><li>Brinkmann, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+kill+bacteria.">Neutrophil extracellular traps kill bacteria.</a> Science. 303 (5663), 1532-1535 (2004).</li><li>Sorensen, O. E., Borregaard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+-+the+dark+side+of+neutrophils.">Neutrophil extracellular traps - the dark side of neutrophils.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (5), 1612-1620 (2016).</li><li>Yipp, B. G., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETosis:+how+vital+is+it?.">NETosis: how vital is it?.</a> Blood. 122 (16), 2784-2794 (2013).</li><li>Jorch, S. K., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+role+for+neutrophil+extracellular+traps+in+noninfectious+disease.">An emerging role for neutrophil extracellular traps in noninfectious disease.</a> Nature Medicine. 23 (3), 279-287 (2017).</li><li>Fuchs, T. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+cell+death+program+leads+to+neutrophil+extracellular+traps.">Novel cell death program leads to neutrophil extracellular traps.</a> J Cell Biol. 176 (2), 231-241 (2007).</li><li>Mohanty, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mechanism+for+NETosis+provides+antimicrobial+defense+at+the+oral+mucosa.">A novel mechanism for NETosis provides antimicrobial defense at the oral mucosa.</a> Blood. 126 (18), 2128-2137 (2015).</li><li>Hakkim, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+the+Raf-MEK-ERK+pathway+is+required+for+neutrophil+extracellular+trap+formation.">Activation of the Raf-MEK-ERK pathway is required for neutrophil extracellular trap formation.</a> Nature Chemical Biology. 7 (2), 75-77 (2011).</li><li>Brinkmann, V., Goosmann, C., Kuhn, L. I., Zychlinsky, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+quantification+of+in+vitro+NET+formation.">Automatic quantification of in vitro NET formation.</a> Frontiers in Immunology. 3, 413 (2012).</li><li>Coelho, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+determination+of+NET+(neutrophil+extracellular+traps)+coverage+in+fluorescent+microscopy+images.">Automatic determination of NET (neutrophil extracellular traps) coverage in fluorescent microscopy images.</a> Bioinformatics. 31 (14), 2364-2370 (2015).</li><li>Mohanty, T., Sorensen, O. E., Nordenfelt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NETQUANT:+Automated+Quantification+of+Neutrophil+Extracellular+Traps.">NETQUANT: Automated Quantification of Neutrophil Extracellular Traps.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1999 (2017).</li><li>Kaplan, M. J., Radic, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps:+double-edged+swords+of+innate+immunity.">Neutrophil extracellular traps: double-edged swords of innate immunity.</a> Journal of Immunology. 189 (6), 2689-2695 (2012).</li><li>Cedervall, J., Olsson, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunity+Gone+Astray+-+NETs+in+Cancer.">Immunity Gone Astray - NETs in Cancer.</a> Trends in Cancer. 2 (11), 633-634 (2016).</li><li>Ginley, B. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computational+detection+and+quantification+of+human+and+mouse+neutrophil+extracellular+traps+in+flow+cytometry+and+confocal+microscopy.">Computational detection and quantification of human and mouse neutrophil extracellular traps in flow cytometry and confocal microscopy.</a> Scientific Reports. 7 (1), 17755 (2017).</li></ol>

Netto bildning är ett relativt Nytillskott till de olika neutrofila i4 och det har varit en märkbar våg av intresse att studera innebörden av nät i ett brett spektrum av forskningsområden5,7,14,15. Förvärv av bilder med hjälp av Immunofluorescensmikroskopi och efterföljande bildbaserad kvantifiering är en allmänt använd metod för att kvantifiera näten. Det...

Neutrofiler är avgörande medlare av medfödda värd försvar svar mot en mängd olika mikrobiella patogener1. De utför sina antimikrobiella funktioner genom att släppa sina granulat som innehåller ett brett spektrum av antimikrobiella proteiner2, producerar reaktiva syreradikaler (ros) och hypoklorit1, och genom fagocytos3. Dessutom har Brinkmann et al. 4 beskrivna neutrofila extracellulära fällor (Nets) som en ny mekanism genom vilken neutrofiler fälla och eliminera invaderande patogener. Sedan deras upptäckt lite över ett decennium sedan4, nät har varit inblandade i en mängd olika infektiösa5,6 och icke-infektiösa7 morbidities. NET formation är en aktiv process och resulterar i extrudering av kromatin DNA belagd med granule-härledda antimikrobiella proteiner8. Några av de viktigaste förändringarna i cellulära och nukleär morfologi i samband med netto bildning inkluderar förlust av nukleär morfologi, kromatin avkondensering, mobilisering av granule proteiner från cytoplasman till kärnan och en ökning av den nukleära och cellulära diameter8,9.
Den Web-liknande nät, som kan visas som diffusa strukturer något större än cellen eller som strukturer flera gånger större än en enda neutrofila betraktas som indikatorer på netosis5,10. Med hjälp av fluorescensmikroskopi kan nät detekteras genom att sondera DNA med en fluorescerande sond som 4 ', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) och genom immunofluorescensfärgning mot NET-bundna proteiner som neutrofila elastase. Kvantifiering av överlappande Färgnings områden för DNA och NET-bundna proteiner bestämmer den totala ytan under NETs i en bild11.
Ett antal bildanalys alternativ finns tillgängliga för att utföra fluorescensbildbaserad kvantifiering av Nets11,12. Men dessa programalternativ presentera begränsningar i att inte vara användarvänliga och/eller helt automatiserad. I denna artikel, vi visar driften av NETQUANT13, en fritt tillgänglig app som kan utföra opartisk helt automatiserad immunofluorescensmikroskopi BILDBASERAD nettokvantifiering. Appen har ett användarvänligt grafiskt gränssnitt (GUI) och kan utföra Single-cell analys. Programvaran kvantifierar NETosis i en bild genom att upptäcka de morfologiska förändringarna i området av DNA-NET-bunden markör, kromatin dekondensation tillhörande deformation av kärnan och ökning av DNA: NET-bundet protein förhållande. Sammantaget tillåter de multipla netto definitionskriterierna en strikt nettokvantifiering över flera datamängder på ett förutsättningslös sätt.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Heparinised plastic tubes</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>367885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lymphoprep</td>
			<td>Axis-Shield</td>
			<td>114547</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI-1640 with L-Glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11835-030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.547.004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15mL conical flasks</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>62.554.002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-well Tissue culture plates</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10626491</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>#1 Coverslips 10mm</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>CS10100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slides</td>
			<td>Menzel Glaser</td>
			<td>631-0098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary anti-human elastase</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>DAKO rabbit 1373, contract immunization</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary fluorophore conjugated goat anti-rabbit</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>A-11072, A-11070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PROLONG-Gold Antifade reagent with DAPI</td>
			<td>Life technologies</td>
			<td>P36930</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G9023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>79346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Ti-E Epifluorescence microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CCD camera</td>
			<td>Andor Zyla</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plan Apochromat 20x, 40x objectives</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windows 10</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>macOS Sierra 10.12</td>
			<td>Apple</td>
			<td></td>
			<td>Operating system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

automated image-based quantification of neutrophil extracellular traps using netquant

Neutrofila extracellulära fällor (nät) är webb-liknande antimikrobiella strukturer som består av DNA och granule härledda antimikrobiella proteiner. Immunofluorescensmikroskopi och bildbaserade kvantifieringsmetoder är fortfarande viktiga verktyg för att kvantifiera neutrofila extracellulär fälla formation. Det finns dock viktiga begränsningar för de immunofluorescensbaserade metoder som för närvarande finns tillgängliga för kvantifiering av nät. Manuella metoder för bildbaserad NETTOKVANTIFIERING är ofta subjektiva, benägna att fel och tråkiga för användare, särskilt icke-erfarna användare. Även för närvarande finns tillgängliga programalternativ för kvantifiering antingen halvautomatiska eller kräver utbildning före operationen. Här demonstrerar Vi implementeringen av en automatiserad immunofluorescensbaserad bildkvantifieringsmetod för att utvärdera NETTOBILDNINGEN som kallas NETQUANT. Programvaran är enkel att använda och har ett användarvänligt grafiskt användargränssnitt (GUI). Den anser biologiskt relevanta parametrar såsom en ökning av ytan och DNA: netto markör protein förhållande, och nukleär deformation för att definiera netto bildning. Dessutom, detta verktyg är byggd som en fritt tillgänglig app, och möjliggör Single-cell upplösning kvantifiering och analys.

5 x 105 neutrofiler/ml var seedade på täckglas placeras i en 12-brunn tallrik och stimuleras med antingen 20 nm PMA eller lämnas ostimulerad för 150 min. Proverna färgas sedan med primär kanin anti-human neutrofila elastase antikroppar, sekundär get anti-kanin fluorophore konjugerade antikroppar och DAPI-en överföras märkt färg som fläckar DNA (se tabellen av material för detaljer). Ett minimum av 5 bilder förvärvades sedan med hjälp av ett epif...

Watch this Scientific Journal Video about Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT at JoVE.com

Automated Image-Based Quantification of Neutrophil Extracellular Traps Using NETQUANT

Här presenterar vi ett protokoll för att generera neutrofila extracellulära fällor (NETs) och drift NETQUANT, en helautomatisk programvara alternativ för kvantifiering av nät i immunofluorescensbilder.

Automatiserad bildbaserad kvantifiering av neutrofila extracellulära fällor med NETQUANT

Neutrophil extracellular traps (NETs) are web-like antimicrobial structures consisting of DNA and granule derived antimicrobial proteins. ...

Här presenterar vi NETQUANT, en helt automatiserad metod för att kvantifiera NETS och immunofluorescens bilder. Detta kommer att hjälpa forskare att göra jämförbara bildanalys från data som genereras av flera användare och villkor. Fördelarna med denna teknik är användarvänligheten, encellig dataanalys, flera kriterier för att utvärdera NET-formation och en förutsättningsfri analys av flera bilder.Installera och öppna analysprogramvaran. En aktuell version finns på Zenodo GitHub-arkivet, eller Nordonfelt Labs webbplats. Välj en källmapp för analys på fliken Konfigurera inställningar genom att klicka på alternativet hämta sökvägen i källmenyn.Välj den mapp som innehåller de bildsekvenser som ska analyseras. Igen, klicka på alternativet hämta sökväg i målmenyn, och välj målmappen för att spara data följande bildanalys. Därefter, när du använder separata kanalbilder, namnge kanalmapparna så att DNA-kanalen motsvarar den nukleära DNA-fläcken, och NET-kanalen skildrar neutrofilatasfläcken i bilderna.Namnge också mappen som innehåller kontrollbildfilerna som kontroll. Klicka därefter på knappen för information om inläsningsbilden och läs in bildmetadatan i programvaran. Välj sedan i undermenyn kanalordning rätt kanalordning som finns i bilderna.Detta bidrar till att förhindra oavsiktliga missmatchningar. Klicka nu på knappen förbered data för att skaffa primära bildegenskaper från rådata och konvertera bilderna. De konverterade bilderna visas då i undermenyn för exempeltyper.Klicka på provtypmenyn, välj en bild från undermenyn och klicka på visa bilddata för att visa bilderna uppdelade i DNA och Neutrophil Extracellular Trap, respektive NET kanal. Om du vill segmentera cellerna i respektive kanal väljer du fliken segmenteringsmetod och väljer en metod i metodens undermeny för både DNA- och NET-kanalerna. Standardmetoden för segmentering är inställd på adaptiv och är den rekommenderade inställningen.Andra alternativ finns i programvaran inklusive global edge och chanverse. Ett vattendelare alternativ har också inkluderats för att skilja mellan nära placerade celler eller NETs. Även i segmentering fliken, klicka på alternativet segmentkontrollprover.Välj sedan PMA från exempel typ sub-menyn och klicka på batch-alternativet för att börja segmentering av alla bilder som ingår i datamängden. Därefter väljer du bilderna i menyn provtyp och klickar på knappen visa bilddata för att visualisera och validera den binära bild masker för både DNA och NET masker genererade efter segmentering. Nu, i analys fliken, klicka på knappen bestämma tröskelvärdet för att analysera kontrollproverna.Sedan, på höger sida, ändra provtyp till PMA och klicka på knappen hämta cellegenskaper för att slutföra analys av de stimulerade proverna. Därefter väljer du en bild från undermenyn provtyp och klickar på knappen visningsbilddata för att visa överlägget och antalet celler och NET-formande celler i bilden. Börja med att välja provet från delmenyn för provtyp.Enskilda bilder kan väljas från den exempeltyp undermenyn för analys eller hela partiet av bilder kan analyseras genom att välja batch alternativet. När du har valt, klicka på knappen analysera NETs för att slutföra analysen. Justera NET-villkor manuellt för att ge optimala resultat för ett givet prov.Jämför identifierade neots med de ursprungliga bilderna för att bedöma identifieringens kvalitet. När det här steget har slutförts kan NET-villkoren tillämpas över alla bilder i datauppsättningen. Alla ändringar som görs i NET-kriterierna tillämpas också samtidigt på alla kontrollprover.Inspektera datasammanfattningen i celldataundermenyn, där antalet bilder, cellantal per bild och procentuell andel av DET per bild visas. Ange fliken utdata för att välja och visa resultatet utgångar. Utforska och jämför de olika datautgångarna som genereras från analysen av kontroll- och PMA-behandlade prover genom att välja formen för utdata och klicka på knappen för utgångsresultat.Därefter lanserar resultaten datatabellEN CSV fil för att utforska encellsdata och klicka på resultaten PDF-filer för att visualisera NET områdesfördelning och DNA till NET förhållandet i proverna. Den röda linjen anger tröskelvärdets värde i graferna. Slutligen, klicka på resultaten bivariat distributionsfil för att bestämma NET området kontra formen av DNA.Här analyserades 15 bilder av kontroll neutrofiler och 15 bilder av PMA-stimulerade neutrofiler på under tio minuter. Det totala antalet celler räknades och andelen celler med Neutrofil Extracellulära fällor bestämdes med hjälp av den automatiserade kvantifieringsmetoden som beskrivs i den här artikeln. Dessa resultat visar att PMA-stimulerade neutrofiler har ett större område, en ökning av kärndeformation och ett högre DNA-förhållande till NET än kontrollprover.När de kombineras till en 3D-graf tenderar de PMA-stimulerade proverna att visa områden med åtdragande gruppföringar än kontrollproverna. Medan du försöker proceduren är det viktigt att komma ihåg att även om arbetsflödet testades med hjälp av flera givare, rekommenderas att användaren bör besluta om programvaran parametrar på lämpligt sätt baserat på den enskilda datamängden.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Neutrophil Extracellular Traps: How to Generate and Visualize Them

Neutrofila Extracellulär Fällor: Hur att generera och visualisera dem

Neutrophil granulocytes are the most abundant group of leukocytes in the peripheral blood. As professional phagocytes, they engulf bacteria and kill them ...

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps (NETs) Isolation and Handling

Simplified Human Neutrophil Extracellular Traps NETs Isolation and Handling

Förenklad Human Neutrofila Extracellulär Fällor (NET) Isolering och Hantering

Neutrophil Extracellular Traps (NETs) have been recently identified as part of the neutrophil&#8217;s antimicrobial armamentarium. Apart from their role ...

Methods to Study Lipid Alterations in Neutrophils and the Subsequent Formation of Neutrophil Extracellular Traps

Metoder för att studera Lipidförändringarna i neutrofiler och efterföljande bildning av neutrofila Extracellulär Fällor

Lipid analysis performed by high performance thin layer chromatography (HPTLC) is a relatively simple, cost-effective method of analyzing a broad range of ...

A Simple Fluorescence Assay for Quantification of Canine Neutrophil Extracellular Trap Release

En enkel fluorescensanalys för kvantifiering av Canine neutrofila Extracellulär Trap Release

Neutrophil extracellular traps are networks of DNA, histones and neutrophil proteins released in response to infectious and inflammatory stimuli. Although ...

Visualizing Macrophage Extracellular Traps Using Confocal Microscopy

Visualisera makrofag extracellulära fällor med konfokalmikroskopi

A primary method used to define the presence of neutrophil extracellular traps (NETs) is confocal microscopy. We have modified established confocal ...

Identification of Neutrophil Extracellular Traps in Paraffin-Embedded Feline Arterial Thrombi using Immunofluorescence Microscopy

Identifiering av neutrofila extracellulära fällor i paraffinin embedded felintens arteriell trombi med immunofluorescensmikroskopi

Neutrophil extracellular traps (NETs), composed of cell-free DNA (cfDNA) and proteins like histones and neutrophil elastase (NE), are released by ...

Morphological and Compositional Analysis of Neutrophil Extracellular Traps Induced by Microbial and Chemical Stimuli

Morfologisk och kompositionell analys av neutrofila extracellulära fällor inducerade av mikrobiella och kemiska stimuli

Neutrophils function as the first line of cellular defense in an innate immune response by employing diverse mechanisms, such as the formation of ...

Quantifying Myeloperoxidase-DNA and Neutrophil Elastase-DNA Complexes from Neutrophil Extracellular Traps by Using a Modified Sandwich ELISA

Kvantifiering av myeloperoxidas-DNA och neutrofila elastas-DNA-komplex från neutrofila extracellulära fällor med hjälp av en modifierad sandwich-ELISA

Certain stimuli, such as microorganisms, cause neutrophils to release neutrophil extracellular traps (NETs), which are basically web-like structures ...

Staining and Imaging to Visualize Neutrophil Extracellular Traps

Immunofluorescence Imaging of Neutrophil Extracellular Traps in Human and Mouse Tissues

Neutrophil Extracellular Traps Imaging in Human and Mouse Tissues (Video) | JoVE

Immunofluorescensavbildning av neutrofila extracellulära fällor i vävnader från människa och mus

Neutrophil extracellular traps (NETs) are released by neutrophils as a response to bacterial infection or traumatic tissue damage but also play a role in ...