Name: mechanisms underlying gut hormone secretion using the isolated perfused rat small intestine
Uploaded: 2019-02-26T13:30:00
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इस काम के लिए एक अप्रतिबंधित अनुदान द्वारा समर्थन किया गया था प्रो जेंस मूल चयापचय अनुसंधान (नोवो nordisk फाउंडेशन, डेनमार्क), के लिए novo nordisk फाउंडेशन से एक अलग अनुदान के लिए novo nordisk केंद्र से कृंतक परफ्यूजन अध्ययन (अनुदान सं । NNF15OC0016574), यूरोपीय अनुसंधान परिषद (अनुदान सं 695069) और अनुसंधान, प्रौद्योगिकीविकास, और प्रदर्शन गतिविधियों (अनुदान no. २६६४०८) के रूप में अच्छी तरह के रूप में एक postdoc के लिए सातवीं रूपरेखा कार्यक्रम से प्रो holst के लिए एक अनुदान लुंडबेक फाउंडेशन (R264-2017-3492) से रूण ई. कुहरे को अनुदान । हम सावधान प्रूफरीडिंग के लिए jenna ई. हंट और कैरोलिन एफ deacon धंयवाद ।

सभी अध्ययनों डेनिश पशु प्रयोगों से अनुमति के साथ आयोजित किया गया निरीक्षणालय (2013-15-2934-00833) और स्थानीय नैतिक समिति, डेनिश कानून के दिशा निर्देशों के अनुसार पशु प्रयोग शासी (१९८७) और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्...

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	<li>Rindi, G., Leiter, A. B., Kopin, A. S., Bordi, C., Solcia, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+&amp;#34;normal&amp;#34;+endocrine+cell+of+the+gut:+changing+concepts+and+new+evidences.">The &amp;#34;normal&amp;#34; endocrine cell of the gut: changing concepts and new evidences.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1014, 1-12 (2004).</li><li>Brighton, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+Acids+Trigger+GLP-1+Release+Predominantly+by+Accessing+Basolaterally+Located+G+Protein-Coupled+Bile+Acid+Receptors.">Bile Acids Trigger GLP-1 Release Predominantly by Accessing Basolaterally Located G Protein-Coupled Bile Acid Receptors.</a> Endocrinology. 156, 3961-3970 (2015).</li><li>Kuhre, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+acids+are+important+direct+and+indirect+regulators+of+the+secretion+of+appetite-+and+metabolism-regulating+hormones+from+the+gut+and+pancreas.">Bile acids are important direct and indirect regulators of the secretion of appetite- and metabolism-regulating hormones from the gut and pancreas.</a> Molecular Metabolism. , (2018).</li><li>Roberge, J. N., Brubacker, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretion+of+Proglucagon-Derived+Peptides+in+Response+to+Intestinal+Luminal+Nutrients.">Secretion of Proglucagon-Derived Peptides in Response to Intestinal Luminal Nutrients.</a> Endocrinology. 128, 3169-3174 (1991).</li><li>Brubaker, P. L., Schloos, J., Drucker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+glucagon-like+peptide-1+synthesis+and+secretion+in+the+GLUTag+enteroendocrine+cell+line.">Regulation of glucagon-like peptide-1 synthesis and secretion in the GLUTag enteroendocrine cell line.</a> Endocrinology. 139, 4108-4114 (1998).</li><li>Jacobsen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+Gastrointestinal+Hormone+Responses,+Insulin+Sensitivity,+and+Beta-Cell+Function+Within+2+Weeks+After+Gastric+Bypass+in+Non-diabetic+Subjects.">Changes in Gastrointestinal Hormone Responses, Insulin Sensitivity, and Beta-Cell Function Within 2 Weeks After Gastric Bypass in Non-diabetic Subjects.</a> Obesity Surgery. 22, 1084-1096 (2012).</li><li>Kuhre, R. E., Frost, C. R., Svendsen, B., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+glucose-stimulated+GLP-1+secretion+from+perfused+rat+small+intestine.">Molecular mechanisms of glucose-stimulated GLP-1 secretion from perfused rat small intestine.</a> Diabetes. 64, 370 (2014).</li><li>Svendsen, B., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+gut+hormone+secretion.+Studies+using+isolated+perfused+intestines.">Regulation of gut hormone secretion. Studies using isolated perfused intestines.</a> Peptides. 77, 47-53 (2016).</li><li>Ratner, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Peripheral+Neurotensin+on+Appetite+Regulation+and+Its+Role+in+Gastric+Bypass+Surgery.">Effects of Peripheral Neurotensin on Appetite Regulation and Its Role in Gastric Bypass Surgery.</a> Endocrinology. 157, 3482-3492 (2016).</li><li>Wewer Albrechtsen, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+glucagon+secretion+in+mice+and+rats+revealed+using+a+validated+sandwich+ELISA+for+small+sample+volumes.">Dynamics of glucagon secretion in mice and rats revealed using a validated sandwich ELISA for small sample volumes.</a> American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 311, E302-E309 (2016).</li><li>Vilsboll, T., Agerso, H., Krarup, T., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Similar+elimination+rates+of+glucagon-like+peptide-1+in+obese+type+2+diabetic+patients+and+healthy+subjects.">Similar elimination rates of glucagon-like peptide-1 in obese type 2 diabetic patients and healthy subjects.</a> The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 88, 220-224 (2003).</li><li>Windelov, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+is+it+so+difficult+to+measure+glucagon-like+peptide-1+in+a+mouse?.">Why is it so difficult to measure glucagon-like peptide-1 in a mouse?.</a> Diabetologia. 60, 2066-2075 (2017).</li><li>Gorboulev, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Na+-d-glucose+Cotransporter+SGLT1+is+Pivotal+for+Intestinal+Glucose+Absorption+and+Glucose-Dependent+Incretin+Secretion.">Na+-d-glucose Cotransporter SGLT1 is Pivotal for Intestinal Glucose Absorption and Glucose-Dependent Incretin Secretion.</a> Diabetes. 61, 187-196 (2012).</li><li>Kuhre, R. E., Bechmann, L. E., Wewer Albrechtsen, N. J., Hartmann, B., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+stimulates+neurotensin+secretion+from+the+rat+small+intestine+by+mechanisms+involving+SGLT1+and+GLUT2,+leading+to+cell+depolarization+and+calcium+influx.">Glucose stimulates neurotensin secretion from the rat small intestine by mechanisms involving SGLT1 and GLUT2, leading to cell depolarization and calcium influx.</a> American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 308, E1123-E1130 (2015).</li><li>Kuhre, R. E., Christiansen, C. B., Saltiel, M. Y., Wewer Albrechtsen, N. J., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+relationship+between+glucose+absorption+and+glucose-stimulated+secretion+of+GLP-1,+neurotensin,+and+PYY+from+different+intestinal+segments+in+the+rat.">On the relationship between glucose absorption and glucose-stimulated secretion of GLP-1, neurotensin, and PYY from different intestinal segments in the rat.</a> Physiological Reports. 5, (2017).</li><li>Svendsen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+analysis+of+cosecretion+and+coexpression+of+gut+hormones+from+male+rat+proximal+and+distal+small+intestine.">An analysis of cosecretion and coexpression of gut hormones from male rat proximal and distal small intestine.</a> Endocrinology. 156, 847-857 (2015).</li><li>Goldspink, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+insights+into+the+detection+of+free+fatty+and+bile+acids+by+ileal+glucagon-like+peptide-1+secreting+cells.">Mechanistic insights into the detection of free fatty and bile acids by ileal glucagon-like peptide-1 secreting cells.</a> Molecular Metabolism. 7, 90-101 (2018).</li><li>Sun, E. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+Controlling+Glucose-Induced+Glp-1+Secretion+in+Human+Small+Intestine.">Mechanisms Controlling Glucose-Induced Glp-1 Secretion in Human Small Intestine.</a> Diabetes. , (2017).</li><li>Kuhre, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptide+production+and+secretion+in+GLUTag,+NCI-H716+and+STC-1+cells:+a+comparison+to+native+L-cells.">Peptide production and secretion in GLUTag, NCI-H716 and STC-1 cells: a comparison to native L-cells.</a> Journal of Molecular Endocrinology. 56, 11 (2016).</li><li>Reimann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+sensing+in+L+cells:+a+primary+cell+study.">Glucose sensing in L cells: a primary cell study.</a> Cell Metabolism. 8, 532-539 (2008).</li><li>Reimann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+and+functional+role+of+voltage+gated+cation+conductances+in+the+glucagon-like+peptide-1+secreting+GLUTag+cell+line.">Characterization and functional role of voltage gated cation conductances in the glucagon-like peptide-1 secreting GLUTag cell line.</a> The Journal of Physiology. 563, 161-175 (2005).</li><li>Kuhre, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fructose+stimulates+GLP-1+but+not+GIP+secretion+in+mice,+rats+and+humans.">Fructose stimulates GLP-1 but not GIP secretion in mice, rats and humans.</a> American journal of physiology. Gastrointestinal and Liver Physiology. 306, G622-G630 (2014).</li><li>Reimann, F., Tolhurst, G., Gribble, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=G-Protein-Coupled+Receptors+in+Intestinal+Chemosensation.">G-Protein-Coupled Receptors in Intestinal Chemosensation.</a> Cell Metabolism. 15, 421-431 (2012).</li><li>Parker, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+underlying+bile+acid-stimulated+glucagon-like+peptide-1+secretion.">Molecular mechanisms underlying bile acid-stimulated glucagon-like peptide-1 secretion.</a> British Journal of Pharmacology. 165, 414-423 (2012).</li><li>Petersen, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+L+cells+in+mouse+and+human+small+intestine+organoids.">Generation of L cells in mouse and human small intestine organoids.</a> Diabetes. 63, 410-420 (2014).</li><li>Parker, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predominant+role+of+active+versus+facilitative+glucose+transport+for+glucagon-like+peptide-1+secretion.">Predominant role of active versus facilitative glucose transport for glucagon-like peptide-1 secretion.</a> Diabetologia. 55, 2445-2455 (2012).</li><li>Roberts, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Human+and+Murine+Enteroendocrine+Cells+by+Transcriptomic+and+Peptidomic+Profiling.">Comparison of Human and Murine Enteroendocrine Cells by Transcriptomic and Peptidomic Profiling.</a> Diabetes. , (2019).</li><li>Reimann, F., Gribble, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose-Sensing+in+Glucagon-Like+Peptide-1-Secreting+Cells.">Glucose-Sensing in Glucagon-Like Peptide-1-Secreting Cells.</a> Diabetes. 51, 2757-2763 (2002).</li><li>Drucker, D. J., Jin, T., Asa, S. L., Young, T. A., Brubaker, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+proglucagon+gene+transcription+by+protein+kinase-A+in+a+novel+mouse+enteroendocrine+cell+line.">Activation of proglucagon gene transcription by protein kinase-A in a novel mouse enteroendocrine cell line.</a> Molecular Endocrinology. 8, 1646-1655 (1994).</li><li>Svendsen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GLP1-+and+GIP-producing+cells+rarely+overlap+and+differ+by+bombesin+receptor-2+expression+and+responsiveness.">GLP1- and GIP-producing cells rarely overlap and differ by bombesin receptor-2 expression and responsiveness.</a> The Journal of Endocrinology. 228, 39-48 (2016).</li><li>Bak, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specificity+and+sensitivity+of+commercially+available+assays+for+glucagon-like+peptide-1+(GLP-1):+implications+for+GLP-1+measurements+in+clinical+studies.">Specificity and sensitivity of commercially available assays for glucagon-like peptide-1 (GLP-1): implications for GLP-1 measurements in clinical studies.</a> Diabetes, Obesity &amp; Metabolism. 16, 1155-1164 (2014).</li><li>Jacobsen, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+gastric+bypass+surgery+on+glucose+absorption+and+metabolism+during+a+mixed+meal+in+glucose-tolerant+individuals.">Effects of gastric bypass surgery on glucose absorption and metabolism during a mixed meal in glucose-tolerant individuals.</a> Diabetologia. 56, 2250-2254 (2013).</li></ol>

पृथक perfused चूहा छोटी आंत एक शक्तिशाली अनुसंधान उपकरण है कि गतिशीलता और आणविक आंत हार्मोन स्राव अंतर्निहित तंत्र विस्तार से अध्ययन करने की अनुमति देता है । इस मॉडल के साथ डेटा के सफल उत्पादन के लिए सबसे म?...

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chemicals for perfusion buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.12018.0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate (CaCl2 x 2 H2O)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>102382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran 70</td>
			<td>Pharmacosmos</td>
			<td>40014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fumaric acid disodium salt (C4H2Na2O4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F9642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose (C6H12O6)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>108342</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate hepatahydrate (MgSO4)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>105886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potasium chloride (KCl)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>104936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium dihydrogen phosphate (KH2PO4)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>104873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyruvic acid sodium salt (C3H3NaO4)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>106619</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate (NaHCO3)</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>106404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium L-glutamate monohydrate (C5H8NNaO4 x H2O)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>106445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion equitment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Universial perfusion system</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>732316</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BASIC UNIT UNIPER UP-100, TYPE 834</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roller Pump, with four channels</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>730100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windkessel</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>732068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermostatic Circulator,Bath Volume 3L, 230V/50Hz</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>730125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating table, heated on tripod stand, type 873</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>733776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula with basked, OD= 2.0mm, ID= 1.0mm</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>733313</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mechanisms underlying gut hormone secretion using the isolated perfused rat small intestine

आंत शरीर का सबसे बड़ा अंतःस्रावी अंग है, जो 15 से अधिक विभिन्न पेप्टाइड हार्मोन का उत्पादन करता है जो भूख और भोजन का सेवन, पाचन, पोषक तत्व अवशोषण और वितरण को विनियमित करते हैं, और पोस्ट-पर्डियल ग्लूकोज भ्रमण करते हैं । आणविक तंत्र को समझना जो आंत हार्मोन स्राव को विनियमित करता है, आंत हार्मोन फिजियोलॉजी को समझने और अनुवाद करने के लिए मौलिक है । परंपरागत रूप से, आंत हार्मोन स्राव अंतर्निहित तंत्र या तो vivo में अध्ययन कर रहे हैं (प्रयोगात्मक जानवरों या मनुष्यों में) या आंत हार्मोन स्रावित प्राथमिक श्लेष्मल सेल संस्कृतियों या सेल लाइनों का उपयोग. यहां, हम आंत हार्मोन स्राव का अध्ययन करने के लिए एक वैकल्पिक विधि के रूप में एक अलग perfused चूहे छोटी आंत परिचय । इस मॉडल के गुण हैं कि यह बरकरार पेट पर निर्भर करता है, जिसका अर्थ है कि यह विवो अध्ययन में स्राव के लिए जिम्मेदार भौतिक रूप से महत्वपूर्ण मापदंडों के सबसे recapitulates, म्यूकोसल ध्रुवीकरण सहित, paracrine रिश्तों और मार्गों छिड़काव/ इसके अलावा, और विवो अध्ययन में विपरीत, पृथक perfused चूहे छोटी आंत लगभग पूरा प्रयोगात्मक नियंत्रण और स्राव के प्रत्यक्ष आकलन के लिए अनुमति देता है । इन विट्रो अध्ययनों के विपरीत, यह दोनों परिमाण और स्राव की गतिशीलता का अध्ययन करने के लिए और महत्वपूर्ण सवालों का पता करने के लिए संभव है, जैसे कि क्या उत्तेजकता अलग आंत हार्मोन के स्राव का कारण, आंत के किस तरफ से (luminal या संवहनी) स्राव है उत्तेजित, और विस्तार आणविक सेंसर स्रावी प्रतिक्रिया अंतर्निहित में विश्लेषण करने के लिए. इसके अलावा, तैयारी आंतों के अवशोषण और जिम्मेदार ट्रांसपोर्टरों सहित आंतों के अवशोषण की गतिशीलता के बारे में जानकारी के अध्ययन के लिए एक शक्तिशाली मॉडल है ।

निर्धारित करने की क्षमता है कि क्या एक दिया उत्तेजना ब्याज की आंत हार्मोन के स्राव का कारण बनता है एक स्थिर आधारभूत स्राव पर निर्भर करता है. इसके अलावा, अगर उत्तेजना के लिए कोई प्रतिक्रिया ?...

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Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

अलग perfused चूहे छोटी आंत का उपयोग आंत हार्मोन स्राव अंतर्निहित तंत्र

यहां, हम एक शक्तिशाली और शारीरिक के लिए आंत हार्मोन स्राव अंतर्निहित आणविक तंत्र और आंतों के अवशोषण का अध्ययन मॉडल वर्तमान-पृथक perfused चूहे छोटी आंत ।

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

विधि हम यहां विकसित किया है निकला है हमारे काम में बेहद उपयोगी हो, पेट से हार्मोन के स्राव के आणविक तंत्र का पता लगाने की कोशिश कर रहा है, लेकिन यह भी पोषक तत्वों के अवशोषण, और दोनों के बीच युग्मन । इस अत्यधिक शारीरिक तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि आंत में आंत छोड़ दिया जाता है, जबकि विस्तृत अध्ययन की अनुमति देता है जो आमतौर पर केवल इन विट्रो मॉडल के भीतर किया जाता है। सबसे पहले चूहे को गर्म ऑपरेटिंग टेबल पर रखें, अंगुली चुटकी के जवाब की कमी की पुष्टि करें, और पेट की गुहा को बेनकाब करने के लिए त्वचा और पेरिटोनियल एक्ससेशन बनाएं।पेट के टर्मिनल क्षेत्र को बेनकाब करने के लिए छोटी आंत को साइड में ले जाएं। और पेट में आपूर्ति वाले वैक्यूलेचर को लिगेट करें। धीरे-धीरे कोलन निकालें, टर्मिनल क्षेत्र से शुरू होते हैं, और छोटी आंत की ओर बढ़ते हैं, ऊतक को आइसोटोनिक नमकीन के साथ हाइड्रेटिंग करते हैं, और आवश्यक रूप से कनेक्टिव ऊतक को हटाने के लिए कपास झाड़ू का उपयोग करते हैं।जब सभी कोलन को हटा दिया गया है, तो छोटे आंतों के ल्यूमेन के समीपस्थ छोर में प्लास्टिक ट्यूबिंग का 15 सेंटीमीटर टुकड़ा डालें, और टांके के साथ ट्यूबिंग को सुरक्षित करें। फिर एक 10 मिलीलीटर सिरिंज और एक सिरिंज पंप का उपयोग करने के लिए ध्यान से कमरे के तापमान आइसोटोनिक खारा के साथ एक 25 मिलीलीटर प्रति मिनट प्रवाह दर पर छोटी आंत फ्लश । जब ऊतक काइम से खाली हो गया है, ऊतकों को समायोजित करें ताकि ऊपरी मेसेनेटिक धमनी सुलभ हो और धमनी को बेनकाब करने के लिए कनेक्टिव ऊतक और वसा ऊतक को हटा दें।पोर्टल नस के तहत मेसेंटेरिक धमनी और दो टांके के तहत दो टांके रखने के लिए ठीक बिंदु संदंश का उपयोग करें। पर्फ्यूजन बफर के साथ एक रोलिंग पंप से जुड़े एक प्लास्टिक 22 गेज कैथेटर भरें और मेसेंटेरिक धमनी में एक छोटे से छेद को काटने के लिए सर्जिकल कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करें, तुरंत चीरा में कैथेटर डालने। धमनी में एक छेद काटने के दो मिनट के भीतर कैथेटर डालें, अन्यथा आंत की संभावना इस्कीमिक क्षति से पीड़ित होगी।जैसे ही कैथेटर एक सीवन के साथ सुरक्षित किया गया है, रोलिंग पंप शुरू करने के लिए एक ७.५ मिलीलीटर प्रति मिनट प्रवाह दर पर परफ्यूजन शुरू करते हैं । जब आंत और पोर्टल नस में रक्त वाहिकाओं पीला बारी, पोर्टल नस में एक छेद काट । एक धातु कैथेटर डालें, और एक और सीवन के साथ धातु कैथेटर सुरक्षित।पोर्टल नस में कैथेटर डालते समय ध्यान रखें, क्योंकि नस पतली दीवारों है। हालांकि, के रूप में गार्ड अब perfused जा रहा है, जल्दी प्रविष्टि महत्वपूर्ण नहीं है । एक मिनट के लिए पर्फ्यूजन आउटपुट एकत्र करने के बाद, वॉल्यूम को मापें और परफ्यूजन प्रेशर एक्विजिशन रिकॉर्डिंग शुरू करने के लिए दबाव रिकॉर्डिंग प्रोग्राम में निष्पादित प्रयोग पर क्लिक करें।फिर पेट को एक गीले प्रयोगशाला ऊतक के साथ कवर करें ताकि इसे सूखने से रखा जा सके, और पुष्टि करें कि आंत का डिस्टल एंड अवरुद्ध नहीं है, और एक चमकदार हैप्लॉयड बाहर निकल सकता है। ऑक्सीजन और कार्बन डाइऑक्साइड के आंशिक दबाव को मापने के लिए, अंग में प्रवेश करने से तुरंत पहले तीन तरह के स्टॉप-कॉक वाल्व के माध्यम से परफ्यूजन बफर एकत्र करें, लगभग तीन मिनट के परफ्यूजन के बाद, और कैथेटर से पोर्टल नस में डाला गया। बर्फ पर नमूनों प्लेस, और संग्रह के तुरंत बाद नमूनों को मापने के लिए एक स्वचालित रक्त गैस विश्लेषक का उपयोग करें ।पहले बेसलाइन नमूनों को प्राप्त करने के लिए एक अंश कलेक्टर का उपयोग करें। बेसलाइन संग्रह के 10 से 15 मिनट के बाद, एक सिरिंज पंप का उपयोग करने के लिए एक तीन तरह से बंद मुर्गा के माध्यम से पहले इंट्राआर्टेरियल परीक्षण उत्तेजक प्रशासन के लिए एक ३५ मिलीलीटर प्रति मिनट प्रवाह दर पर । उत्तेजना के पहले पांच मिनट से अधिक 2.5 मिलीलीटर प्रति मिनट प्रवाह दर पर वितरित प्रारंभिक उत्तेजना बोस इंजेक्शन द्वारा चमकदार उत्तेजनाएं करें, इसके बाद परीक्षण समाधान के प्रशासन द्वारा 5 मिलीलीटर प्रति मिनट प्रवाह दर पर।जैसे ही एक चमकदार उत्तेजना अवधि समाप्त हो जाती है, ल्यूमेन को पांच मिनट के लिए 2.5 मिलीलीटर प्रति मिनट प्रवाह दर पर आइसोटोनिक नमकीन के साथ फ्लश करें। फिर अगले परीक्षण पदार्थ प्रशासित होने से पहले 15 से 30 मिनट के लिए प्रति मिनट 5 मिलीलीटर पर बेसलाइन नमूने एकत्र करें। प्रयोग के अंत में, सकारात्मक नियंत्रण उत्तेजना अवधि के अंत में पांच से 10 मिनट के लिए तैयारी की जवाबदेही के लिए परीक्षण करने के लिए एक उपयुक्त, सकारात्मक नियंत्रण प्रदान करें, एकत्र करने और अतिरिक्त 10 से 15 मिनट के आधारभूत नमूनों का उपयोग करें।यहां अच्छी गुणवत्ता वाले डेटा का एक उदाहरण दिखाया गया है, जो ग्लूकागन-जैसे पेप्टाइड-1 या जीएलपी-1 का प्रदर्शन करता है, जो एक मिनट के अंतराल पर एकत्र किए गए एक अलग छिद्रित चूहे की छोटी आंत से स्राव है। बेसल स्थितियों के तहत, स्राव स्थिर था, जबकि परीक्षण उत्तेजना और सकारात्मक नियंत्रण के प्रशासन से पहले और बाद में, एक मजबूत गुप्त प्रतिक्रिया स्पष्ट थी। एक अलग पराफत चूहा छोटी आंत से प्राप्त ये जीएलपी-1 स्राव डेटा बेसल स्थितियों में मापा जाने वाला एक अस्थिर स्राव के साथ खराब गुणवत्ता का होता है जो परीक्षण के दौरान ऊपर की ओर बहती है जो परीक्षण पदार्थ प्रशासन या सकारात्मक नियंत्रण से असंबंधित प्रतीत होती है।इसलिए यह निष्कर्ष निकालना असंभव है कि क्या संवहनी फ्रक्टोज उत्तेजना के अंत में देखा गया जीएलपी-1 स्राव एक फ्रक्टोज मध्यस्थता प्रतिक्रिया थी। कैथेटर को ठीक से सुरक्षित करने और परफ्यूजन बफर के रूप में परफ्यूजन उपकरण को अच्छी तरह से साफ करने के लिए देखभाल करने के लिए इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय बैक्टीरियल विकास के लिए एक उत्कृष्ट माध्यम प्रदान करता है। इस प्रक्रिया के बाद, प्राथमिक आंतों की कोशिका संस्कृतियों के हार्मोन-स्राव कोशिका लाइनों पर इन विट्रो अध्ययन जैसे अन्य तरीकों को सीधे चक्रीय एएमपी या इंट्रासेलुलर कैल्शियम के इंट्रासेलुलर उत्पादन की जांच करने के लिए किया जा सकता है।तो हम पहले से ही पोषक तत्वों के अवशोषण और हार्मोन के स्राव के तंत्र के पीछे प्रक्रियाओं की एक संख्या की स्पष्टता के लिए अब विधि का इस्तेमाल किया है और यह निकला है बेहद उपयोगी हो । यह न भूलें कि आणविक साइटों के ब्लॉकर्स या एक्टिवेटर के साथ काम करना बेहद खतरनाक और सावधानियां हो सकती हैं जैसे कि प्रयोगशाला कोट, दस्ताने और सुरक्षा चश्मे का उपयोग करना, इस प्रक्रिया को करते समय हमेशा एक धुएं हुड लिया जाना चाहिए।

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

एक Bioassay रूप गोजातीय Mesenteric धमनी और शिरा की धारा अलग और उपयोग करना छोटी आंत में Vasoactivity के लिए टेस्ट

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Glutamate and Hypoxia as a Stress Model for the Isolated Perfused Vertebrate Retina

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एक<em&gt; पूर्व vivo</em&gt; मॉडल मानव स्तन में हार्मोन लड़ाई अध्ययन करने के लिए

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

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संवहनी नियंत्रण चूहों के पृथक प्रतिरोध धमनियों के वीडियो माइक्रोस्कोपी का उपयोग तंत्र का मूल्यांकन

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एक कुशल Sieving विधि वयस्क चूहे गुर्दे से बरकरार Glomeruli को अलग करने के लिए

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Robot-assisted Total Mesorectal Excision and Lateral Pelvic Lymph Node Dissection for Locally Advanced Middle-low Rectal Cancer

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A Model of Long-Term Ventricular Fibrillation in Isolated Rat Hearts

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Ventricular fibrillation (VF) is a fatal arrhythmia with a high incidence in cardiac patients, but VF arrest under perfusion is a neglected method of ...