Name: mechanisms underlying gut hormone secretion using the isolated perfused rat small intestine
Uploaded: 2019-02-26T13:30:00
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이 작품에 의해 지원 되었다 무제한 그랜트 교수 옌스 Juul 홀스트 하 Novo Nordisk 센터에서 기본적인 대사 연구 (Novo Nordisk 기초, 덴마크), Novo Nordisk 설치류 관류 연구 (no를 부여 하 고 재단법인에서 별도 부여에 대 한 NNF15OC0016574), 유럽 연구 위원회 (그랜트 no.695069) 및 theEuropean 조합에서 교수 홀스트에 부여의 한 postdoc로 7 프레임 워크 및 프로그램을 위한 연구, TechnologicalDevelopment, 논증 활동 (보조금 번호 266408) Lundbeck 재단 (R264-2017-3492)에서 룬 E. Kuhre를 부여 합니다. 우리 주의 교정에 대 한 제 나 E. 헌트와 캐롤 린 F. 디 감사합니다.

모든 연구는 덴마크 동물 실험 검사자 (2013-15-2934-00833)와 덴마크 입법 동물 실험 (1987 년)와 국가 통치의 지침에 따라 지역 윤리 위원회 허가 실시 했다 건강 (출판물 번호 85-23)의 학회.
1. 실험 동물
<ol><li>남성 Wistar 쥐 (250 g)와 가져오고, ad libitum 액세스 표준 차 우와 물를 가진 감 금 소 당 2 집 12시 12분에 유지 h 빛 어두운 주기에. 우리의 동물 시설 처리 비 물 및 Alrtromin 설치?...

<ol>
	<li>Rindi, G., Leiter, A. B., Kopin, A. S., Bordi, C., Solcia, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+&amp;#34;normal&amp;#34;+endocrine+cell+of+the+gut:+changing+concepts+and+new+evidences.">The &amp;#34;normal&amp;#34; endocrine cell of the gut: changing concepts and new evidences.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1014, 1-12 (2004).</li><li>Brighton, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+Acids+Trigger+GLP-1+Release+Predominantly+by+Accessing+Basolaterally+Located+G+Protein-Coupled+Bile+Acid+Receptors.">Bile Acids Trigger GLP-1 Release Predominantly by Accessing Basolaterally Located G Protein-Coupled Bile Acid Receptors.</a> Endocrinology. 156, 3961-3970 (2015).</li><li>Kuhre, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bile+acids+are+important+direct+and+indirect+regulators+of+the+secretion+of+appetite-+and+metabolism-regulating+hormones+from+the+gut+and+pancreas.">Bile acids are important direct and indirect regulators of the secretion of appetite- and metabolism-regulating hormones from the gut and pancreas.</a> Molecular Metabolism. , (2018).</li><li>Roberge, J. N., Brubacker, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretion+of+Proglucagon-Derived+Peptides+in+Response+to+Intestinal+Luminal+Nutrients.">Secretion of Proglucagon-Derived Peptides in Response to Intestinal Luminal Nutrients.</a> Endocrinology. 128, 3169-3174 (1991).</li><li>Brubaker, P. L., Schloos, J., Drucker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+glucagon-like+peptide-1+synthesis+and+secretion+in+the+GLUTag+enteroendocrine+cell+line.">Regulation of glucagon-like peptide-1 synthesis and secretion in the GLUTag enteroendocrine cell line.</a> Endocrinology. 139, 4108-4114 (1998).</li><li>Jacobsen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+Gastrointestinal+Hormone+Responses,+Insulin+Sensitivity,+and+Beta-Cell+Function+Within+2+Weeks+After+Gastric+Bypass+in+Non-diabetic+Subjects.">Changes in Gastrointestinal Hormone Responses, Insulin Sensitivity, and Beta-Cell Function Within 2 Weeks After Gastric Bypass in Non-diabetic Subjects.</a> Obesity Surgery. 22, 1084-1096 (2012).</li><li>Kuhre, R. E., Frost, C. R., Svendsen, B., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+glucose-stimulated+GLP-1+secretion+from+perfused+rat+small+intestine.">Molecular mechanisms of glucose-stimulated GLP-1 secretion from perfused rat small intestine.</a> Diabetes. 64, 370 (2014).</li><li>Svendsen, B., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+gut+hormone+secretion.+Studies+using+isolated+perfused+intestines.">Regulation of gut hormone secretion. Studies using isolated perfused intestines.</a> Peptides. 77, 47-53 (2016).</li><li>Ratner, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Peripheral+Neurotensin+on+Appetite+Regulation+and+Its+Role+in+Gastric+Bypass+Surgery.">Effects of Peripheral Neurotensin on Appetite Regulation and Its Role in Gastric Bypass Surgery.</a> Endocrinology. 157, 3482-3492 (2016).</li><li>Wewer Albrechtsen, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+glucagon+secretion+in+mice+and+rats+revealed+using+a+validated+sandwich+ELISA+for+small+sample+volumes.">Dynamics of glucagon secretion in mice and rats revealed using a validated sandwich ELISA for small sample volumes.</a> American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 311, E302-E309 (2016).</li><li>Vilsboll, T., Agerso, H., Krarup, T., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Similar+elimination+rates+of+glucagon-like+peptide-1+in+obese+type+2+diabetic+patients+and+healthy+subjects.">Similar elimination rates of glucagon-like peptide-1 in obese type 2 diabetic patients and healthy subjects.</a> The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. 88, 220-224 (2003).</li><li>Windelov, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+is+it+so+difficult+to+measure+glucagon-like+peptide-1+in+a+mouse?.">Why is it so difficult to measure glucagon-like peptide-1 in a mouse?.</a> Diabetologia. 60, 2066-2075 (2017).</li><li>Gorboulev, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Na+-d-glucose+Cotransporter+SGLT1+is+Pivotal+for+Intestinal+Glucose+Absorption+and+Glucose-Dependent+Incretin+Secretion.">Na+-d-glucose Cotransporter SGLT1 is Pivotal for Intestinal Glucose Absorption and Glucose-Dependent Incretin Secretion.</a> Diabetes. 61, 187-196 (2012).</li><li>Kuhre, R. E., Bechmann, L. E., Wewer Albrechtsen, N. J., Hartmann, B., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+stimulates+neurotensin+secretion+from+the+rat+small+intestine+by+mechanisms+involving+SGLT1+and+GLUT2,+leading+to+cell+depolarization+and+calcium+influx.">Glucose stimulates neurotensin secretion from the rat small intestine by mechanisms involving SGLT1 and GLUT2, leading to cell depolarization and calcium influx.</a> American Journal of Physiology Endocrinology and Metabolism. 308, E1123-E1130 (2015).</li><li>Kuhre, R. E., Christiansen, C. B., Saltiel, M. Y., Wewer Albrechtsen, N. J., Holst, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+relationship+between+glucose+absorption+and+glucose-stimulated+secretion+of+GLP-1,+neurotensin,+and+PYY+from+different+intestinal+segments+in+the+rat.">On the relationship between glucose absorption and glucose-stimulated secretion of GLP-1, neurotensin, and PYY from different intestinal segments in the rat.</a> Physiological Reports. 5, (2017).</li><li>Svendsen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+analysis+of+cosecretion+and+coexpression+of+gut+hormones+from+male+rat+proximal+and+distal+small+intestine.">An analysis of cosecretion and coexpression of gut hormones from male rat proximal and distal small intestine.</a> Endocrinology. 156, 847-857 (2015).</li><li>Goldspink, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+insights+into+the+detection+of+free+fatty+and+bile+acids+by+ileal+glucagon-like+peptide-1+secreting+cells.">Mechanistic insights into the detection of free fatty and bile acids by ileal glucagon-like peptide-1 secreting cells.</a> Molecular Metabolism. 7, 90-101 (2018).</li><li>Sun, E. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+Controlling+Glucose-Induced+Glp-1+Secretion+in+Human+Small+Intestine.">Mechanisms Controlling Glucose-Induced Glp-1 Secretion in Human Small Intestine.</a> Diabetes. , (2017).</li><li>Kuhre, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptide+production+and+secretion+in+GLUTag,+NCI-H716+and+STC-1+cells:+a+comparison+to+native+L-cells.">Peptide production and secretion in GLUTag, NCI-H716 and STC-1 cells: a comparison to native L-cells.</a> Journal of Molecular Endocrinology. 56, 11 (2016).</li><li>Reimann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+sensing+in+L+cells:+a+primary+cell+study.">Glucose sensing in L cells: a primary cell study.</a> Cell Metabolism. 8, 532-539 (2008).</li><li>Reimann, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+and+functional+role+of+voltage+gated+cation+conductances+in+the+glucagon-like+peptide-1+secreting+GLUTag+cell+line.">Characterization and functional role of voltage gated cation conductances in the glucagon-like peptide-1 secreting GLUTag cell line.</a> The Journal of Physiology. 563, 161-175 (2005).</li><li>Kuhre, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fructose+stimulates+GLP-1+but+not+GIP+secretion+in+mice,+rats+and+humans.">Fructose stimulates GLP-1 but not GIP secretion in mice, rats and humans.</a> American journal of physiology. Gastrointestinal and Liver Physiology. 306, G622-G630 (2014).</li><li>Reimann, F., Tolhurst, G., Gribble, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=G-Protein-Coupled+Receptors+in+Intestinal+Chemosensation.">G-Protein-Coupled Receptors in Intestinal Chemosensation.</a> Cell Metabolism. 15, 421-431 (2012).</li><li>Parker, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+underlying+bile+acid-stimulated+glucagon-like+peptide-1+secretion.">Molecular mechanisms underlying bile acid-stimulated glucagon-like peptide-1 secretion.</a> British Journal of Pharmacology. 165, 414-423 (2012).</li><li>Petersen, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+L+cells+in+mouse+and+human+small+intestine+organoids.">Generation of L cells in mouse and human small intestine organoids.</a> Diabetes. 63, 410-420 (2014).</li><li>Parker, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predominant+role+of+active+versus+facilitative+glucose+transport+for+glucagon-like+peptide-1+secretion.">Predominant role of active versus facilitative glucose transport for glucagon-like peptide-1 secretion.</a> Diabetologia. 55, 2445-2455 (2012).</li><li>Roberts, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Human+and+Murine+Enteroendocrine+Cells+by+Transcriptomic+and+Peptidomic+Profiling.">Comparison of Human and Murine Enteroendocrine Cells by Transcriptomic and Peptidomic Profiling.</a> Diabetes. , (2019).</li><li>Reimann, F., Gribble, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose-Sensing+in+Glucagon-Like+Peptide-1-Secreting+Cells.">Glucose-Sensing in Glucagon-Like Peptide-1-Secreting Cells.</a> Diabetes. 51, 2757-2763 (2002).</li><li>Drucker, D. J., Jin, T., Asa, S. L., Young, T. A., Brubaker, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+proglucagon+gene+transcription+by+protein+kinase-A+in+a+novel+mouse+enteroendocrine+cell+line.">Activation of proglucagon gene transcription by protein kinase-A in a novel mouse enteroendocrine cell line.</a> Molecular Endocrinology. 8, 1646-1655 (1994).</li><li>Svendsen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GLP1-+and+GIP-producing+cells+rarely+overlap+and+differ+by+bombesin+receptor-2+expression+and+responsiveness.">GLP1- and GIP-producing cells rarely overlap and differ by bombesin receptor-2 expression and responsiveness.</a> The Journal of Endocrinology. 228, 39-48 (2016).</li><li>Bak, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specificity+and+sensitivity+of+commercially+available+assays+for+glucagon-like+peptide-1+(GLP-1):+implications+for+GLP-1+measurements+in+clinical+studies.">Specificity and sensitivity of commercially available assays for glucagon-like peptide-1 (GLP-1): implications for GLP-1 measurements in clinical studies.</a> Diabetes, Obesity &amp; Metabolism. 16, 1155-1164 (2014).</li><li>Jacobsen, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+gastric+bypass+surgery+on+glucose+absorption+and+metabolism+during+a+mixed+meal+in+glucose-tolerant+individuals.">Effects of gastric bypass surgery on glucose absorption and metabolism during a mixed meal in glucose-tolerant individuals.</a> Diabetologia. 56, 2250-2254 (2013).</li></ol>

격리 된 끼얹는다 쥐 소장 역학과 분자 메커니즘을 자세히 공부 하는 창 자 호르몬 분 비를 기본 허용 하는 강력한 연구 공구 이다. 이 모델을 사용 하 여 데이터의 성공적인 생산을 위한 가장 중요 한 단계는 수술입니다. 용기의 처리는 필연적으로 내장에 손상을 발생 하 고 그러므로 지켜져야 한다 절대 최소. 심지어 더 중요 한 것은, 작업의 속도 mesenteric 동맥에 카 테 테 르 배치에 대 한 시간에 ?...

용기는1식욕 조절 영양소의 흡수 및 영양 처리, 장 성장 규제 15 개 이상의 다른 펩 티 드 호르몬을 생산 하는 신체의 가장 큰 내 분 비 기관 이다. 창 자 호르몬, 따라서, 많은 기본적인 생리 적 과정에 참여 이며 분 비와 각 호르몬의 분 비를 제어 하는 분자 세부의 이러한 패턴을 이해 따라서 우리의 기본 생리에 대 한 중요 한 이해 하 고 소화 관 호르몬 작업;의 변환 측면을 해결 하기 위한 하지만 어떻게 하나 밑에 창 자 호르몬 분 비 분자 감지 메커니즘을 공부할 수 있습니다? 일반적으로, 호르몬 분 비 절연된 용기 준비 또는 창 자 호르몬 분 비 1 차 셀 문화에서 그대로 유기 체 (인간 또는 실험 동물), 공부 될 수 있다 또는 셀 문화2,3, 를 불멸 하 게 4 , 5 , 6. 우리의 선호 모델은 격리 끼얹는다 쥐 소장, 최적의 시간 해상도 (분 비 속도 든 지도 결정 될 수 있다 자세히 공부 창 자 호르몬의 분 비를 허용 하는 생리 적으로 관련 모델 두 번째도 기본), 결과 가능성이 vivo에서 상황7양도. 여기, 우리이 절차를 수행 하는 방법에 대 한 상세한 프로토콜을 제공 하지만 먼저 우리는 창 자 호르몬 분 비, 혜택 및 분리 끼얹는다 쥐 소장에 비해이 모델의 한계를 포함 하 여 공부를 위한 다른 방법을 논의할 예정 이다.
만약 하나의 소원을 특정 화합물 특정 창 자 호르몬의 분 비 조절 여부 설정, 연구 인간의 궁극적인 목표는. 따라서, 화합물 비보 나 (perfusions)에 설치류에 하나 또는 여러 개의 창 자 호르몬의 분 비에 좋은 효과 보여줍니다 또는 호르몬에서 분 비 세포 (세포 선 또는 1 차 셀),이 효과만 의학 및 인간 생리학에 관련 된 경우 확인할 수 있습니다. 인간. 그러나, 인간에서 수행할 수 있는 연구의 유형에 대 한 명확한 한계가 있다 그리고 vivo에서 연구 실험 동물에는, 따라서, 종종 이러한 연구에 대 한 최고의 두 번째 옵션. 생쥐와 쥐가 그들의 편리한 크기, 저렴 한 비용 및 유전자의 구체적인 연구 질문에 참여 하 고 의심 하는 유전자를 변경 하는 옵션 때문에 아마도 가장 자주 사용 된 실험 동물 (예를 들어, 특정 전송 밖 노크 또는 수용 체)입니다. 일반적으로, vivo에서 모델 순수 그대로 되 혜택 하지만 몇 가지 제한이 있다. 가장 중요 한 것은, 작은 설치류, 특히 마우스의 크기가 제한 요소, 창 자 호르몬 정량화에 대 한 대부분의 분석 요구 20 µ L 플라즈마 (그리고 종종 훨씬 더), 적어도 의미의 혈액의 100 µ L 복제 철회 되어야 하는 정량화입니다. 따라서, 그건 단지 거의 샘플 해당 기준선 샘플 하 고 하나 또는 두 개의 후 자극 샘플 (20 g의 마우스에 총 혈액 량은 ~1.4 mL)을 얻을 수 있습니다. 따라서, 잠재적인 분 비 응답 (예를 들어, 빠르게 또는 늦게 발생 응답) 따라서 놓칠 수 있습니다.
관류 모델에서이 문제를 극복, 볼륨 큰 샘플으로 가져온 (유량: 7.5 mL/min) 컬렉션으로 빠르고 짧은 지속 응답은 보고 되지 보장 하기 위해 필요에 따라 조정 될 수 있다 (우리는 수집 모든 분 샘플)7 . 또 다른 문제 설치류에서 vivo 연구에서 대부분 소화 관 호르몬은 더욱 빠르게 제거 또는 보다 인간8,9,10, 이후 생 화 확 적인 분석을 복잡 하 게 수 있는 대사. 예를 들어, 우리가 보여준 GLP-1은 인간에서 보다 더 빠른 속도로 쥐에서 물질 대사로 변화 (T1/2 는 1-2 분11)와, 더 중요 한 것은 N 맨끝 분열에 의해 뿐만 아니라 쥐에 GLP-1의 분열을 포함 하 dipeptidyl-peptidase-4 (DPP4) (이 인 간에 있는 주요 GLP-1 타락 효소), 효소 중립 endopeptidase 24.1112분열을 추가. 도 GLP-1 (7-36amide)의 그대로 isoform 또는 기반 DPP-4 죽 습 isoform (9-39amide), GLP-1의 정량화에 대 한 현재 상업적인 분석 훨씬 쥐 분 비 GLP-1를 과소 평가 하 고 결과 오해의 소지가 발생할 따라서, 12. 격리 끼얹는다 쥐 소장에서 분 비 호르몬의 대사 대부분 제거 또는 현저 하 게 감소, 플라즈마 중재 저하를 피할 수 있기 때문에 (때문에 간/신장/폐 추출/저하를 방지 perfusate는 수집 용기를 떠날 때).
물론, 중요 한 통찰력은 유전자 변형된 동물, 예를 들어, 나트륨 포도 당 운송업 자 1 녹아웃 쥐13의 사용에 의해 생성 될 수 있습니다 하지만 종종 분 비에 관여 하는 분자 센서의 상세한 평가 필요 이온 채널 분자 전송기 및 다른 G 단백질 결합 된 수용 체 세포내 단백질에 이르기까지 여러 분자 사이트의 고려 사항. 예를 들어, 우리는 9 다른 분자 사이트의 활동 분자 센서 GLP-1 분 비 포도 당 자극7에 대 한 책임을 탈피 할 때 대상. 유사한 조사 가능한 vivo에서 사용 하는 화합물 중 일부는 불특정 또는 유해한 치명적인 효과 않을 것 이다. 예를 들어, perfused 용기를 사용할 때는 가능 했다의 역할 뿐 아니라 2-4-dinitrophenol7,14 ATP 형성을 차단 하 여 neurotensin GLP-1의 분 비에 대 한 세포내 포도 당 대사의 역할을 평가 하 담 즙 산에 대 한 전압 개폐 칼슘 채널 자극 GLP-1, NT 및 PYY 분 비3. 실제로, 높게 유독한 나트륨 채널 차단제 테트로도톡신 관류 연구에 성공적으로 적용할 수 있습니다. 마지막으로, 관류 모델에 그것 평가 될 수 있다 직접 어디에 특정 화합물 자극 특정 호르몬의 분 비로 탐정 수 있습니다 간단 하 게 선택 하 고 perfuse, 원하는 영역을 준비 하 고 동시에 그것은 조사 수 있습니다. 여부는 자극 분자 센서의 활성화에 의해 내장3,,1516의 luminal 또는 혈관에서 분 비를 발생합니다.
기본 창 자 호르몬 분 비에 의해 공부 또한 수 분 비 메커니즘 사용 (인체 조직 포함), 창 자 조직 조각의 불후의 명작 (쥐)에서 일반적으로 기본 장 문화 호르몬 셀 라인 (마우스 또는 인간의 기원), 창 자에 의해 은닉 조직은 Ussing 약 실에서 또는 organoids (마우스에서 가장 자주 둘 다)2,3,,45,6,,1718거치. 장 perfusions에 비해, 인간의 직감 조각, 기본 세포 배양 및 세포에 대 한 연구 수행을 기술적으로 쉽게 데이터를 생성 하는 빠르고 저렴 방법 하지만 직감 조각의 연구 신선한 인간의 창 자에 대 한 액세스를 필요로 하는 물론 표본입니다. 그러나,이 모델에는 정상 세포의 양극 화 현상이 용기 분자 센서의 정상적인 활성화를 평가 하기 위해이 모델을 사용할 수 없습니다 고 흡수 프로세스 또한 공부 될 수 있는 본질적으로 손실 됩니다. 또한, 이러한 연구 결과 일반적으로 정적 외피 고용 (에 대 한 여러 h)는 매우 비 생리 적 이며 상관이 세포의 정상적인 분 비 역학, secreted 제품 제거 되지 않습니다 및 따라서 피드백 영향을 미칠 수 있기 때문에 호르몬의 분 비 반면, perfused 소장에서 분 비 및 흡수 분자는 효율적으로 제거 점 막 미세 혈관에 의해 vivo에서, transmucosal 그라디언트 흡수와 분 비는 정상 속도로 발생할 수 있습니다 그래서 유지 됩니다 보장은. 또한, 셀 문화 그들의 네이티브 enteroendocrine 셀 근원, 그들은 여전히 수 있지만 그들은 더 이상 펩 티 드 콘텐츠 측면에서 네이티브 셀의 대표 분자 센서, 표현의 의미에서 dedifferentiated 할 수 없습니다. 질문에 호르몬 분 비. 이것은, 예를 들어, GLP-1 은닉 세포 라인19에 대 한 경우입니다.
그것은, 그러므로, 우리의 의견 1 차 셀 문화 또는 셀 라인 연구는 심사 목적 및 수행 vivo에서 수 없는 형식 실험을 수행 하기 위한 또는 고립 된 perfused에 가장 적합. 예를 들어, 기본 세포 배양 및 세포 선 문화의 진정한 힘은 그 세포내 이차 메신저 (예: 캘리포니아2 +, 캠프, NAD(P)H)는 실시간으로 모니터링할 수 있습니다 그리고 수 있습니다 세포를 은닉 하는 호르몬의 전기 신호 20,,2122조사. 또한, siRNA 최저 할 수 있습니다, 특정 억제제 사용할 수20,,2122,,2324없는 경우에 특히 유용. 창 자 조직 Ussing 챔버에 장착 하는 쥐에서 최근 사용 되었습니다 담 즙 산 자극된 GLP-1 분 비, 장 organoids (쥐)에서 동안 기본 분자 메커니즘을 공부 하 고 인간의 직감 조각 또한 공부에 대 한 사용 되었습니다는 창 자 호르몬 분 비17,25의 분자 세부 사항. 반면 되 전 혜택 편광2 이러한 모델의 모든 정적 외피를 포함 한다. 그러나 인간의 직감 조각에 대 한 연구는, 설치류, 보다는 오히려 인간, 조직 7TM 수용 체의 조직 식에서 종 차이부터 중요 한을 사용 하 여 혜택 및 분자 운송업 자 다른 분자 감지 경로 사이 발생할 수 있습니다. 종입니다. 사실,이 분야에서 대부분 데이터 돼지, 쥐 또는 쥐에 대 한 연구에 의해 생성 되었습니다 하 고 이러한 연구 결과 인 간에 게 전송 될 수 있습니다 여부 애매 남아. 그러나 그것은,, 기초가 GLP-1 분 비를 자극 하는 포도 당 분자 감지 메커니즘 마우스, 쥐, 사람, 사이 비슷한 것 처럼 안심 하 고 transcriptomic 및 마우스 및 인간의 L-셀 프로 파일링 peptidomic 공개 강한 글로벌 2 개의 종의7,18,,2627사이의 유사성.
그러나 끼얹는다 고립 된 쥐 작은 창 자,, 또한 고려해 야 하는 몇 가지 제한이 있다. 가장 중요 한 것은, 주어진된 분 비 응답 결과에서 대상된 호르몬 생성 세포의 시험 물질에 의해 직접 활성화 또는 오히려은 인해 발생 하는지 확인 간접 메커니즘 수 아니다. 예를 들어, KCl는 즉시 perfused 내장7, GLP-1의 분 비를 증가 하지만 알 수 없는 남아 여부이 직접 도발은 L 셀의 결과 또는 L-세포 주변 신경의 도발은 또는 효과의 결과 paracrine 자극/저 해제를 동시에 발표 했다. Perfused 내장을 사용 하 여 기본 분 비 하는 분자 메커니즘을 명료 하 게 하는 연구에서 발생, 따라서 항상 넣을 수 컨텍스트 설정 하는 기능을 증가 하기 위하여 다른 더 구체적인 모델에서 얻은 데이터와 인과 관계입니다. 예를 들어, 포도 당 자극 GLP-1 분 비 및 기본 마우스 L 세포 GLP-1 은닉 셀 라인 GLUTag,2829 에서 포도 당 운송업 자 (SGLT1 및 GLUT2)의 활동에 따라 달라 집니다. 분 비20, GLP-1 분 비 포도 당 자극은 크게 L 셀에 포도의 직접 행동에 의해 중재 가능성이 다는 것을 의미를 약하게 또한 끼얹는다 쥐 소장에이 전송기를 차단. 격리 perfused 내장의 또 다른 중요 한 한계 지질 중 일부 그들의 hydrophobicity 인해 공부 하기 어려운 것입니다. 지질 소화 (지방산, diacyl glycerols, lysophosphatidylglycerols, 등)의 최종 제품을 조사 하 고 준비 다시 esterify 수 있습니다 있지만 지질 intra-cellularly 그리고 아마도 그들을 팩을로 chylomicrons, 세포와 그들의 후속 글귀는 villi의 lacteals에 의해 chylomicrons 전송 중단 됩니다 때문에 격리 된 림프 흐름을 보안 수 없습니다. 대부분, 따라서 지질 흡수 중단 됩니다 일단 흡수 제품 셀에 축적 하는 시작. 생체 외에서 셀 시스템은 지질 연구에도 덜 적합 분극의 그들의 부족 때문에. 물론,이 제한만 흡수 되 고는 lacteals 통해 전송 하는 지질에 대 한 관련, 그 창 자 혈관을 통해 흡수 하는 반면 정상적으로 처리 될 가능성이 있다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chemicals for perfusion buffer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.12018.0500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride dihydrate (CaCl2 x 2 H2O)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>102382</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran 70</td>
			<td>Pharmacosmos</td>
			<td>40014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fumaric acid disodium salt (C4H2Na2O4)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F9642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose (C6H12O6)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>108342</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate hepatahydrate (MgSO4)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>105886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potasium chloride (KCl)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>104936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium dihydrogen phosphate (KH2PO4)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>104873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyruvic acid sodium salt (C3H3NaO4)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>106619</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate (NaHCO3)</td>
			<td>Merck</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>106404</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium L-glutamate monohydrate (C5H8NNaO4 x H2O)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>106445</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion equitment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Universial perfusion system</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>732316</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BASIC UNIT UNIPER UP-100, TYPE 834</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Roller Pump, with four channels</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>730100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Windkessel</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>732068</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermostatic Circulator,Bath Volume 3L, 230V/50Hz</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>730125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating table, heated on tripod stand, type 873</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>733776</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula with basked, OD= 2.0mm, ID= 1.0mm</td>
			<td>Harvard Bioscience, Inc.</td>
			<td>733313</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mechanisms underlying gut hormone secretion using the isolated perfused rat small intestine

용기는 식욕과 음식 섭취, 소화, 영양소의 흡수와 분포, 및 포스트 높은가격순 포도 여행 15 개 이상의 다른 펩 티 드 호르몬을 생산 하는 신체의 가장 큰 내 분 비 기관 이다. 창 자 호르몬 분 비를 조절 하는 분자 메커니즘을 이해 하는 것은 이해 하 고 소화 관 호르몬 생리학 번역에 대 한 기본적 이다. 전통적으로, 기본 창 자 호르몬 분 비 메커니즘 (실험 동물 또는 인간)에서 vivo에서 공부 하거나 또는 문화 셀 또는 셀 라인 점 막 창 자 호르몬 분 비 기본을 사용 하 여. 여기, 창 자 호르몬 분 비를 공부 하기 위한 대체 방법으로 격리 된 끼얹는다 쥐 소장을 소개 합니다. 이 모델의 미 덕은 그것은 생리 적으로 중요 한 매개 변수 vivo에서 학문, 점 막 분극, paracrine 관계의 노선 등에서 분 비에 대 한 책임의 대부분을이 의미 그대로 직감에 의존 관류/자극 노출입니다. 또한, 그리고 vivo에서 연구와는 달리 거의 완전 한 실험 제어 및 분 비의 직접 평가 대 한 격리 끼얹는다 쥐 소장 수 있습니다. 달리 생체 외에서 학문, 그것은 크기와 주소 중요 한 질문, 어떤 자극 원인 용기 (luminal 또는 혈관)의 측면에서 분 비는 다른 소화 관 호르몬의 분 비와 분 비의 역학을 공부 하 자극, 분 비 응답 기본 세부 분자 센서에서 분석 하 고. 또한, 준비 책임 전송기를 포함 하 여 장내 흡수의 역학에 관한 내용과 장내 흡수의 연구에 대 한 강력한 모델입니다.

주어진된 자극 하면 관심의 창 자 호르몬의 분 비 여부를 결정 하는 기능 꾸준한 기준선 분 비에 의존 합니다. 또한, 자극에 대 한 응답이 관찰 되는 경우 긍정적인 통제에 대 일 분 비 응답 분명 테스트 자극에 응답의 부족 응답의 일반적인 부족을 반영 하지 않는다는 것을 제외 하 여야 합니다. 그림 2A 와 2B 좋은 품질 데이터;의 예를 보?...

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Mechanisms Underlying Gut Hormone Secretion Using the Isolated Perfused Rat Small Intestine

창 자 호르몬 분 비는 격리를 사용 하 여 기본 메커니즘 끼얹는다 쥐 소장

여기, 우리는 기본 창 자 호르몬 분 비 및 장내 흡수 분자 메커니즘 연구에 강력 하 고 생리 적 모델 제시-격리 끼얹는다 쥐 소장.

The gut is the largest endocrine organ of the body, producing more than 15 different peptide hormones that regulate appetite and food intake, digestion, ...

우리가 여기에서 개발한 방법은 창자에서 호르몬의 분비의 분자 기계장치를 찾아내기 위하여 노력하면서, 우리의 일에 있는 극단적으로 유용하다는 것을 밝혀졌습니다, 또한 양분의 흡수, 그리고 둘 사이 커플링. 이 매우 생리적인 기술의 주요 장점은 창 자가 시투에 남아 있다는 것입니다., 일반적으로 단지 생체 외 모델 내에서 수행 되는 상세한 연구를 허용 하는 동안. 먼저 가열 된 수술대에 쥐를 배치, 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인하고, 복강을 노출피부와 복막 절개를합니다.소장을 측면으로 이동하여 결장의 단말 영역을 노출시합니다. 그리고 결장에 공급 혈관을 리게이트. 점차적으로 결장추출, 말단 부위에서 시작하여 소장쪽으로 이동하여, 이소토닉 식염수로 조직을 수화하고, 필요에 따라 결합 조직을 제거하기 위해 면봉을 사용한다.모든 결장이 제거되면 15센티미터 의 플라스틱 튜브 조각을 소장 루멘의 근동 끝에 삽입하고 봉합사로 튜브를 고정하십시오. 그런 다음 10밀리리터 주사기와 주사기 펌프를 사용하여 미세한 온도 동소식 식염수로 소장을 분당 유량 25밀리리터로 조심스럽게 플러시합니다. 조직이 chyme의 비워졌을 때, 상부 장간 동맥이 접근 할 수 있도록 조직을 조정하고 동맥을 노출하기 위해 결합 조직과 지방 조직을 제거합니다.미세 한 점 집게를 사용하여 막술 동맥 아래에 두 개의 봉합사와 포털 정맥 아래에 두 봉합사를 배치하십시오. 관류 완충액으로 롤링 펌프에 부착된 플라스틱 22 게이지 카테터를 채우고 한 쌍의 수술 가위를 사용하여 장간 동맥의 작은 구멍을 자르고 즉시 카테터를 절개에 삽입합니다. 동맥에 구멍을 절단 2 분 이내에 카테터를 삽입, 그렇지 않으면 창자는 가능성이 허혈성 손상으로 고통받을 것이다.카테터가 봉합사로 고정되자마자 롤링 펌프를 시작하여 분당 7.5 밀리리터의 유량으로 관류를 시작합니다. 창자 및 포탈 정맥의 혈관이 창백해지면 포털 정맥에 구멍을 뚫습니다. 금속 카테터를 삽입하고 다른 봉합사로 금속 카테터를 고정합니다.정맥이 얇은 벽으로 바변하기 때문에 카테터를 포털 정맥에 삽입할 때 주의하십시오. 그러나 가드가 현재 침투되고 있기 때문에 빠른 삽입은 중요하지 않습니다. 1분 동안 관류 출력을 수집한 후 압력 기록 프로그램에서 볼륨을 측정하고 실험을 클릭하여 관류 압력 획득 기록을 시작합니다.그런 다음 축축한 실험실 조직으로 내장을 덮고 건조를 막고 장의 말단이 막히지 않고 발광 하플로이드가 빠져나갈 수 있는지 확인합니다. 산소와 이산화탄소의 부분 압력을 측정하기 위해, 관류의 약 3 분 후, 그리고 포털 정맥에 삽입 카테터에서 장기에 들어가기 직전에 3 방향 스톱 콕 밸브를 통해 관류 버퍼를 수집합니다. 샘플을 얼음 위에 놓고 자동 혈액 가스 분석기를 사용하여 수집 직후 샘플을 측정합니다.분수 수집기를 사용하여 첫 번째 기준선 샘플을 가져옵니다. 기준선 수집 10~15분 후, 주사기 펌프를 사용하여 분당 35밀리리터의 3방향 스톱콕을 통해 첫 번째 내동맥 내 테스트 자극제를 투여합니다. 자극의 처음 5분 동안 분당 2.5 밀리리터 의 유량으로 전달된 초기 자극 보아사에 의해 발광 자극을 수행하고, 이어서 분당 5 밀리리터의 시험 용액을 분당 유량으로 투여한다.발광 자극 기간이 지나자마자, 5분 동안 분당 2.5 밀리리터의 유량으로 동위 상색식염으로 루멘을 플러시하십시오. 그런 다음 다음 시험 물질이 투여되기 전에 분당 5 밀리리터에서 기준선 샘플을 15~30분 동안 수집합니다. 실험의 끝에서, 양성 제어 자극 기간의 끝에 베이스 라인 샘플의 추가 10 ~ 15 분, 수집 및 추가 10 10 분 동안 준비의 응답성을 테스트하기 위해 적합한 긍정적 인 제어를 관리한다.여기에 글루카곤과 같은 펩티드-1 또는 GLP-1, 1분 간격으로 수집된 고립된 퍼퓨즈 쥐의 분비등을 보여주는 양질의 데이터의 예를 나타낸다. 기저 조건하에서, 분비는 시험 자극과 긍정적인 통제의 전후 둘 다 동안 안정되었습니다, 강력한 분비 반응은 분명했습니다. 이러한 GLP-1 분비 데이터는 극한의 개구부 쥐에서 얻은 이러한 분비 데이터는 시험 약물 투여 또는 양성 대조군과 관련이 없는 것으로 보이는 방식으로 시험 전반에 걸쳐 위쪽으로 표류하는 기저 조건에서 측정된 불안정한 분비로 품질이 좋지 않다.따라서 혈관 과당 자극의 끝에서 관찰된 증가된 GLP-1 분비액이 과당 중재 반응인지 여부를 결론짓는 것은 불가능합니다. 관류 완충액이 세균 성장을 위한 우수한 매체를 제공하기 때문에 카테터를 제대로 보호하고 관류 장비를 철저히 청소하는 이 절차를 시도하면서. 이 절차에 따라, 1 차장 세포 배양의 호르몬 분비 세포주에 대한 생체외 연구와 같은 다른 방법은 순환 AMP 또는 세포 내 칼슘의 세포 내 생산을 직접 조사하기 위해 수행 될 수 있습니다.그래서 우리는 이미 영양소의 흡수와 호르몬의 분비 메커니즘 뒤에 프로세스의 수의 elucation에 대 한 지금 방법을 사용 하 고 그것은 매우 유용한 것으로 밝혀졌다. 분자 부위의 차단제 나 활성화기와 함께 일하는 것은 매우 위험할 수 있으며 실험실 코트, 장갑 및 안전 안경을 사용하는 것과 같은 예방 조치는이 절차를 수행하는 동안 항상 연기 후드를 취해야한다는 것을 잊지 마십시오.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolating and Using Sections of Bovine Mesenteric Artery and Vein as a Bioassay to Test for Vasoactivity in the Small Intestine

생물 검정으로 소 장간막 동맥과 정맥의 섹션을 분리하고 사용하면 소장에서 Vasoactivity을 테스트

Mammalian gastrointestinal systems are constantly exposed to compounds (desirable and undesirable) that can have an effect on blood flow to and from that ...

연구

의학

Glutamate and Hypoxia as a Stress Model for the Isolated Perfused Vertebrate Retina

고립 된 관류 척추 동물의 망막에 대한 스트레스 모델로 글루타민산과 저산소증

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

고립의 방법<em&gt; 전의 VIVO</em쥐 모델에서&gt; 폐 관류 : 쥐 EVLP 프로그램 개발에서 교훈을

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

<em&gt; 생체 내</em&gt; 모델은 인간의 유방암에서 호르몬 행동을 연구하기 위해

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

랑겐 돌프 - 관류 쥐 마음에 유도 및 허혈 - 재관류 손상의 평가

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart

고립 된 랫트 심장으로부터의 간질과 투과 물 수집을위한 역전 된 심장 모델

The present protocol describes a unique approach that enables the collection of cardiac transudate (CT) from the isolated, saline-perfused rat heart. ...

Evaluation of Vascular Control Mechanisms Utilizing Video Microscopy of Isolated Resistance Arteries of Rats

쥐의 고립 된 저항 동맥의 비디오 현미경을 이용 하 여 혈관 제어 메커니즘의 평가

This protocol describes the use of in vitro television microscopy to evaluate vascular function in isolated cerebral resistance arteries (and other ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

그대로 Glomeruli 성인 쥐 신장에서 분리 하는 효율적인 체질 하 방법

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...

Robot-assisted Total Mesorectal Excision and Lateral Pelvic Lymph Node Dissection for Locally Advanced Middle-low Rectal Cancer

로봇 보조 총 중각 절제술 및 측면 골반 림프절 해부 국소 고급 중간 낮은 직장 암

Since their approval for clinical use, da Vinci surgical robots have shown great advantages in gastrointestinal surgical operations, especially in complex ...

A Model of Long-Term Ventricular Fibrillation in Isolated Rat Hearts

고립 된 쥐 심장에서 장기 심실 세동의 모델

Ventricular fibrillation (VF) is a fatal arrhythmia with a high incidence in cardiac patients, but VF arrest under perfusion is a neglected method of ...