Name: a novel approach to monitoring graft neovascularization in the human gingiva
Uploaded: 2019-01-12T13:00:00
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Este trabalho foi realizado em parte do apoio pelo fundo de pesquisa científica húngara, sob K112364 de número de Grant, pelo Ministério das capacidades humanas, programa de excelência de ensino superior para Universidade Semmelweis, módulo de pesquisa de terapia e pelo húngaro a Nacionais de investigação, desenvolvimento e inovação Office KFI_16-1-2017-0409.

O método relatado foi empregado em um ensaio clínico, que foi concedido a aprovação ética do Comitê húngara do registo de saúde e centro de treinamento (número de aprovação: OTIG/034310/2014).
1. LSCI Setup
<ol><li>Ligue o computador e periféricos.</li>
	<li>Liga o aparelho LSCI para ser usado com o interruptor no painel traseiro.</li>
	<li>Permitir que o instrumento aquecer durante pelo menos 5 min. O instrumento está pronto para medição, quando ambos os LEDs no painel trasei...

O objetivo deste estudo foi apresentar uma nova técnica para monitorar a neovascularização de um enxerto na gengiva humana. De acordo com nossos resultados anteriores, LSCI avalia a perfusão de sangue da gengiva com boa repetibilidade e reprodutibilidade9, quando implementação rigorosa de cada etapa do protocolo planejada como uma exigência fundamental é atendida. LSCI é considerado como uma técnica semi-quantitativa que requer calibração periodicamente para assegurar a exatidão e a e...

Monitoramento de mudanças de longo prazo da microcirculação gengival humana em uma situação clínica é um tema quente em cirurgia oral e periodontal. No entanto, a avaliação confiável de perfusão pode ser difícil. Existem apenas alguns métodos que não invasiva medir as mudanças na circulação de sangue da mucosa humana. Dois destes empregam um feixe do laser1,2,3,4, mas de uma maneira diferente. Laser doppler flowmetry (LDF) faz uso do Doppler shift em um laser de feixe5,6, enquanto o contraste de speckle laser imagem método (LSCI) se baseia no padrão do salpico o retroespalhados de luz de laser para medir a velocidade do sangue vermelho células7.
LDF mede apenas em um único ponto, e reprodutível padronização da posição dos sensores é uma tarefa difícil mas desejável. Outro problema é que a sonda do LDF é pequena em diâmetro (1 mm2). Medição em pontos predeterminados antes da cirurgia é muito específico e pode ser cego para alterações circulatórias no pós-operatório, enquanto o edema, a remoção de tecido, movimento de tecido ou a prótese implantada causar alterações significativas na geometria de pós-operatório dos afetados tecidos moles. A distância de medição da LDF é menos de 1 mm, que proíbe o uso de uma tala dental com um buraco predeterminado para a sonda em caso de alteração volumétrica do tecido. LSCI não requer ferramentas especiais para localização e pode medir em áreas de vários cm2. Como resultado, a cicatrização pode ser seguido em todo o sítio cirúrgico. Além disso, LSCI pode exibir perfusão sanguínea em imagens codificadas por cores em uma fração de segundo, com uma resolução de até 20 μm.
O dispositivo LSCI apresentado neste artigo é usado principalmente para aplicações de pesquisa animal onde alta resolução em áreas pequenas de medição é desejada. No entanto, uma vez que a estrutura e histologia da mucosa oral humana são diferentes de área para área (anexado a gengiva, gengiva marginal, mucosa vestibular), circulação sanguínea também é heterogêneo8. Portanto, de alta resolução LSCI tem uma vantagem grande sobre LSCI resolução normal, que geralmente é usado em testes em humanos.
O instrumento LSCI emprega um laser invisível (comprimento de onda de 785 nm). O feixe é divergiu para iluminar a área de medição, criando um padrão de salpico. O padrão do salpico na área iluminada de imagens de uma câmera CCD. A câmera CCD usada neste sistema tem uma área de imagem ativa de 1386 x 1034 pixels e sua resolução é entre 20 a 60 µm/pixel, dependendo do tamanho da área de medição e na configuração do software (baixa, média, alta). Pode levar imagens a uma velocidade de 16 quadros por segundo, ou até mais, até 100 quadros por segundo, se o tamanho da imagem é reduzido. Perfusão sanguínea é calculado pelo software interno. Análise de variações no padrão do salpico e quantifica o contraste. O fluxo resultante é cor codificada para produzir uma imagem de perfusão. De acordo com nossos resultados anteriores, LSCI avalia a perfusão de sangue da gengiva com boa repetibilidade e reprodutibilidade9. Isto implica que é uma ferramenta confiável para monitorar alterações na microcirculação da mucosa oral, não só em experiências de curto prazo, mas também durante estudos de longo prazo para controlar a progressão da doença ou ferimento cura10.
Neste trabalho, apresentamos um relato de caso clínico para demonstrar que a alta resolução espacial de LSCI torna possível revelar o padrão de neovascularização de um enxerto de colágeno xenogénica. Além disso, neste caso indica que LSCI, devido à sua alta confiabilidade, poderia com sensibilidade detectar variação individual. Isto é importante como significativa variação anatômica local e um fundo diferente sistêmico entre os casos torna difícil padronizar a intervenção cirúrgica em ensaios clínicos de cirurgia periodontal.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>PeriCam PSI-HR</td>
			<td>Perimed AB, Stockholm, Sweden</td>
			<td></td>
			<td>The PeriCam PSI System is an imaging system based on LASCA technology (LAser Speckle Contrast Analysis). The system measures superficial blood perfusion over large areas at fast capture rates. This makes it ideal for investigations of both the spatial and temporal dynamics of microcirculation in almost any tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PIMSoft</td>
			<td>Perimed AB, Stockholm, Sweden</td>
			<td></td>
			<td>PIMSoft is a data acquisition and analysis software, intended for use together with the PeriCam PSI System and the PeriScan PIM 3 System, for measurement and imaging of superficial blood perfusion.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Geistlich Mucograft</td>
			<td>Geistlich, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td>It&#39;s a unique 3D collagne matrix designed specifically for soft tissue regeneration. It&#39;s indicated for the gain of keratinized tissue and recession coverage.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Omron M4</td>
			<td>Omron Healthcare Inc., Kyoto, Japan</td>
			<td></td>
			<td>Blood pressure monitor, which gives accurate readings.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon D5200</td>
			<td>Nikon Corportation, Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td>Taking intra oral photos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MS Excel</td>
			<td>Microsoft Corporation, Redmond, Washington, USA</td>
			<td></td>
			<td>The software used for data management</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBM SPSS Statistics 25</td>
			<td>IBM Corp., Armonk, NY, USA</td>
			<td></td>
			<td>The software used for statistical analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel approach to monitoring graft neovascularization in the human gingiva

Laser do salpico contraste de imagem (LSCI) é um método novo para medir perfusão sanguínea superficial em grandes áreas. Desde que é não-invasivo e evita o contato direto com a área de medição, é apropriado para monitorar as mudanças do fluxo de sangue durante a cicatrização de feridas em pacientes humanos. Vestibuloplasty é a cirurgia periodontal para o vestíbulo oral, com o objetivo de restaurar a profundidade vestibular com alargamento simultâneo da gengiva queratinizada. Neste caso clínico especial, um retalho de espessura dividida foi elevado no primeiro pré-molar superior e uma matriz de colagénio xenogénica foi adaptado ao leito receptor resultante. LSCI foi usado para monitorar a re - e neovascularização da prótese e a mucosa circundante durante um ano. Um protocolo é introduzido para o ajuste correto da medição da microcirculação na mucosa oral, destacando as dificuldades e possíveis falhas.
O estudo de caso clínico apresentado demonstrou que — seguindo o protocolo apropriado — LSCI é um método adequado e confiável para acompanhar a microcirculação em uma cura ferida na mucosa bucal humana e dá informações úteis sobre a integração do enxerto.

Vestibuloplasty é a cirurgia periodontal para o vestíbulo oral, com o objetivo de aumentar a profundidade do vestibular, a zona da gengiva queratinizada e espessura de tecidos moles para o aprimoramento estético e função. O retalho de espessura dividida reposicionado apicalmente combinado com uma matriz de colágeno é um procedimento de vestibuloplasty usados com frequência. Matriz de colagénio xenogénica é uma alternativa viável para enxerto gengival autógeno para aumentar a ...

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A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva

Uma nova abordagem para o monitoramento de neovascularização de enxerto na gengiva humana

Este estudo apresenta um protocolo para medição da microcirculação em mucosa oral humana por imagens de contraste de salpico do laser. O acompanhamento da cicatrização após vestibuloplasty combinado com um enxerto de colágeno xenogénica é apresentado um caso clínico.

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids ...

A Laser Speckle Contrast Imaging, ou LSCI, pode ajudar a monitorar mudanças de longo prazo na microcirculação gengival humana na clínica para rastrear a progressão da doença individual e a cicatrização de feridas. As principais vantagens dessa técnica são que ela não é invasiva e avalia a perfusão sanguínea da gingiva com boa repetibilidade e reprodutibilidade. Este método não requer ferramentas especiais para a localização da cabeça de medição e a cicatrização da ferida pós-operatória pode ser seguida dentro de um local cirúrgico de até seis centímetros quadrados.Para a configuração de imagem de contraste de manchas a laser, ligue o computador e os periféricos e ligue o instrumento de imagem de contraste de manchas a laser. Após o instrumento ter aquecido por pelo menos cinco minutos, abra o software e coloque o paciente em uma posição supina confortável em uma cadeira dentária. Coloque uma braçadeira no braço do paciente e um travesseiro de vácuo sob a cabeça do paciente.Em seguida, deixe o paciente descansar, sem ser perturbado, por 15 minutos antes que quaisquer medidas sejam tomadas. Enquanto isso, no menu Ferramentas, selecione e clique em Editor de Projetos. Uma nova janela será aberta na qual as configurações comumente usadas podem ser salvas.Na caixa Projetos, clique em Novo para criar um novo projeto. Digite o Vestibulum e clique em OK. Na caixa Sites clique em Novo para criar um novo site. Digite o Tooth 14 e clique em OK. Sob o painel Conteúdo de:Dente 14, adicione 10 centímetros como a distância necessária para a distância de trabalho.E digite uma largura de três centímetros e uma altura de dois centímetros nas caixas de medição. Defina a resolução de densidade de ponto como Normal e a taxa de quadro para 16 imagens por segundo e selecione Tempo do menu de queda duração para definir a duração da gravação para 30 segundos. Selecione Registro sem média e defina a taxa de captura de fotos de cores para um por segundo.Em seguida, clique em Aplicar e OK para salvar os perímetros do projeto. No menu Arquivo, selecione e clique em Nova Gravação. Uma nova janela de imagem será aberta e o painel de configuração será exibido.Em Configuração de gravação, selecione Vestibulum para o Projeto e Dente 14 para o Site. Abra o menu suspenso do assunto, clique em Novo na caixa de diálogo de assunto Selecionar e digite o nome do paciente. Clique em OK e digite um nome para a gravação no campo Rec Name e o nome do operador no campo Operador.Antes de iniciar a medição da imagem de microcirculação, meça a pressão sanguínea e o pulso do paciente. E evacuar o ar do travesseiro para ajustar a posição da cabeça do paciente conforme necessário. Que o paciente abra a boca e use dois espelhos dentários para retrair suavemente os lábios.Ajuste a cabeça do instrumento para que seja paralelo à área medida da gingiva. Utilizando o laser indicador embutido de 650 nanômetros para facilitar o posicionamento do imager em relação à boca do paciente. Mova o instrumento em relação ao tecido para alcançar uma distância de trabalho de 10 centímetros.Instrua o paciente a permanecer parado durante a medição. E clique em gravar para iniciar a gravação. A cor da janela de imagem mudará para vermelho, indicando que a gravação está em andamento e o painel de configuração será substituído pelo painel Gravação.A gravação será parada automaticamente após 30 segundos, momento em que a cor da janela de imagem mudará para azul e o painel de gravação será substituído pelo painel 'Revisão'. Retire os espelhos dentários e deixe o paciente fechar a boca e engolir. Em seguida, clique em Retomar a gravação para mudar de volta para a imagem ao vivo.E repita o procedimento mais duas vezes. Após a última medição, feche o arquivo. Para analisar as imagens de contraste de manchas a laser, vá para a visão dividida no software do instrumento e defina as regiões de interesse.Na paleta de ferramentas de interesse da região, selecione a região desejada de forma de interesse e clique na opção aplicar em gravação inteira. Clique e segure o botão do mouse na imagem de intensidade para desenhar a região de interesse e arraste o ROI para o tamanho desejado. Ajuste, redimensione ou gire a região conforme necessário.Quando todas as regiões de interesse tiverem sido definidas, selecione o botão Adicionar tempo de interesse para definir períodos de tempo de interesse. Em seguida, clique e segure o gráfico na posição em que o momento de interesse deve começar e arraste o cursor para a posição final desejada. De acordo com as condições anatômicas e cirúrgicas deste estudo representativo, as regiões de interesse foram classificadas em zonas lógicas, dependendo de sua distância do centro do enxerto implantado.Nestas imagens, áreas de alta perfusão são mostradas em vermelho, enquanto áreas de baixa perfusão são mostradas em azul. Durante a primeira semana pós-operatória, as imagens de perfusão de sangue revelaram isquemia dentro da região operada que melhorou diariamente e hiperemia dentro das peri-regiões. A partir do dia 14, a área operada foi clinicamente eritâmica em paralelo com a hiperemia grave, observada nas imagens de profusão sanguínea.No terceiro mês, a ferida havia cicatrizado e a perfusão gengival foi medida perto dos níveis de circulação pré-operatória. A traçação diária dos valores de fluxo sanguíneo das zonas de borda da ferida permite o acompanhamento das alterações no fluxo sanguíneo, dentro das diferentes zonas codificadas por cores dentro do enxerto e dentro das peri-regiões da ferida. Por exemplo, os valores de fluxo sanguíneo foram semelhantes em todas as regiões de interesse dentro da região Apical do enxerto, começando com uma fase isquêmica no nono dia que foi seguida por uma fase hiperêmica de quatro meses.A técnica LSCI permite o não contato e o registro em tempo real do fluxo sanguíneo gengival, tornando-se um método adequado para o estudo da microcirculação pós-operatória, por um longo período de tempo, dentro de um sujeito humano. A anatomia vascular da gingiva é heterogênea e a variância na cicatrização da ferida é comum. A alta confiabilidade deste método permite a detecção sensível de variações individuais, que podem ser particularmente importantes em terapias personalizadas durante a micro cirurgia plástica.Uma implementação rigorosa de cada etapa do protocolo é fundamental para avaliar na perfusão sanguínea da gengiva com uma boa reprodutibilidade.

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