Name: visualizing and tracking endogenous mrnas in live drosophila melanogaster egg chambers
Uploaded: 2019-06-04T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualizing and Tracking Endogenous mRNAs in Live Drosophila melanogaster Egg Chambers at JoVE.com

हम ऑसकर-MS2 के लिए Salvatore A.E. Marras (सार्वजनिक स्वास्थ्य अनुसंधान संस्थान केंद्र, Rutgers विश्वविद्यालय) के संश्लेषण, लेबलिंग और आणविक बीकन के शुद्धिकरण के लिए धन्यवाद, और डैनियल सेंट जॉन्स्टन (गर्दन संस्थान, कैम्ब्रिज विश्वविद्यालय) के लिए MCP-GFP ट्रांसजेनिक मक्खी स्टॉक. इस काम को एक राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन केअर अवार्ड 1149738 और डीपीबी को व्यावसायिक स्टाफ कांग्रेस-CUNY पुरस्कार द्वारा समर्थित किया गया था।

1. लाइव सेल इमेजिंग के लिए MBs के डिजाइन
<ol><li>
mfold सर्वर (http://unafold.rna.albany.edu/?q=mfold/RNA-Folding-Form) से "RNA फार्म" का उपयोग कर MRNA लक्ष्य की माध्यमिक संरचना की भविष्यवाणी करने के लिए लक्ष्य आरएनए अनुक्रम मोड़ें।
	<ol>
<li>फास्टा प?...

<ol>
	<li>Tyagi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+intracellular+RNA+distribution+and+dynamics+in+living+cells.">Imaging intracellular RNA distribution and dynamics in living cells.</a> Nature Methods. 6 (5), 331-338 (2009).</li><li>Bao, G., Rhee, W. J., Tsourkas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+probes+for+live-cell+RNA+detection.">Fluorescent probes for live-cell RNA detection.</a> Annual Reviews of Biomedical Engineering. 11, 25-47 (2009).</li><li>Mannack, L. V., Eising, S., Rentmeister, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+techniques+for+visualizing+RNA+in+cells.">Current techniques for visualizing RNA in cells.</a> F1000Research. 5, (2016).</li><li>Larson, D. R., Zenklusen, D., Wu, B., Chao, J. A., Singer, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+observation+of+transcription+initiation+and+elongation+on+an+endogenous+yeast+gene.">Real-time observation of transcription initiation and elongation on an endogenous yeast gene.</a> Science. 332 (6028), 475-478 (2011).</li><li>Bertrand, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+ASH1+mRNA+particles+in+living+yeast.">Localization of ASH1 mRNA particles in living yeast.</a> Molecular Cell. 2 (4), 437-445 (1998).</li><li>Garcia, J. F., Parker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MS2+coat+proteins+bound+to+yeast+mRNAs+block+5'+to+3'+degradation+and+trap+mRNA+decay+products:+implications+for+the+localization+of+mRNAs+by+MS2-MCP+system.">MS2 coat proteins bound to yeast mRNAs block 5' to 3' degradation and trap mRNA decay products: implications for the localization of mRNAs by MS2-MCP system.</a> RNA. 21 (8), 1393-1395 (2015).</li><li>Bratu, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+beacons:+Fluorescent+probes+for+detection+of+endogenous+mRNAs+in+living+cells.">Molecular beacons: Fluorescent probes for detection of endogenous mRNAs in living cells.</a> Methods in Molecular Biology. 319, 1-14 (2006).</li><li>Bratu, D. P., Cha, B. J., Mhlanga, M. M., Kramer, F. R., Tyagi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+the+distribution+and+transport+of+mRNAs+in+living+cells.">Visualizing the distribution and transport of mRNAs in living cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the Unites States of America. 100 (23), 13308-13313 (2003).</li><li>Tyagi, S., Kramer, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+beacons:+probes+that+fluoresce+upon+hybridization.">Molecular beacons: probes that fluoresce upon hybridization.</a> Nature Biotechnology. 14 (3), 303-308 (1996).</li><li>Chen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+molecular+beacon-based+approach+for+live-cell+imaging+of+RNA+transcripts+with+minimal+target+engineering+at+the+single-molecule+level.">A molecular beacon-based approach for live-cell imaging of RNA transcripts with minimal target engineering at the single-molecule level.</a> Scientific Reports. 7 (1), 1550 (2017).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplex+detection+of+microRNAs+by+combining+molecular+beacon+probes+with+T7+exonuclease-assisted+cyclic+amplification+reaction.">Multiplex detection of microRNAs by combining molecular beacon probes with T7 exonuclease-assisted cyclic amplification reaction.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 409 (1), 107-114 (2017).</li><li>Baker, M. B., Bao, G., Searles, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+quantification+of+specific+microRNA+using+molecular+beacons.">In vitro quantification of specific microRNA using molecular beacons.</a> Nucleic Acids Research. 40 (2), e13 (2012).</li><li>Ko, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+color-tunable+molecular+beacon+to+sense+miRNA-9+expression+during+neurogenesis.">A color-tunable molecular beacon to sense miRNA-9 expression during neurogenesis.</a> Scientific Reports. 4, 4626 (2014).</li><li>Vet, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiplex+detection+of+four+pathogenic+retroviruses+using+molecular+beacons.">Multiplex detection of four pathogenic retroviruses using molecular beacons.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the Unites States of America. 96 (11), 6394-6399 (1999).</li><li>Li, J., Cao, Z. C., Tang, Z., Wang, K., Tan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+beacons+for+protein-DNA+interaction+studies.">Molecular beacons for protein-DNA interaction studies.</a> Methods in Molecular Biology. 429, 209-224 (2008).</li><li>Li, W. M., Chan, C. M., Miller, A. L., Lee, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+Functional+Roles+of+Molecular+Beacon+as+a+MicroRNA+Detector+and+Inhibitor.">Dual Functional Roles of Molecular Beacon as a MicroRNA Detector and Inhibitor.</a> Journal of Biological Chemistry. 292 (9), 3568-3580 (2017).</li><li>Kuang, T., Chang, L., Peng, X., Hu, X., Gallego-Perez, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Beacon+Nano-Sensors+for+Probing+Living+Cancer+Cells.">Molecular Beacon Nano-Sensors for Probing Living Cancer Cells.</a> Trends in Biotechnology. 35 (4), 347-359 (2017).</li><li>Ban, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-genetic+Purification+of+Ventricular+Cardiomyocytes+from+Differentiating+Embryonic+Stem+Cells+through+Molecular+Beacons+Targeting+IRX-4.">Non-genetic Purification of Ventricular Cardiomyocytes from Differentiating Embryonic Stem Cells through Molecular Beacons Targeting IRX-4.</a> Stem Cell Reports. 5 (6), 1239-1249 (2015).</li><li>Hadjinicolaou, A. V., Demetriou, V. L., Emmanuel, M. A., Kakoyiannis, C. K., Kostrikis, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+beacon-based+real-time+PCR+detection+of+primary+isolates+of+Salmonella+Typhimurium+and+Salmonella+Enteritidis+in+environmental+and+clinical+samples.">Molecular beacon-based real-time PCR detection of primary isolates of Salmonella Typhimurium and Salmonella Enteritidis in environmental and clinical samples.</a> BMC Microbiology. 9, 97 (2009).</li><li>McLaughlin, J. M., Bratu, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+melanogaster+Oogenesis:+An+Overview.">Drosophila melanogaster Oogenesis: An Overview.</a> Methods in Molecular Biology. 1328, 1-20 (2015).</li><li>Bastock, R., St Johnston, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+oogenesis.">Drosophila oogenesis.</a> Current Biology. 18 (23), R1082-R1087 (2008).</li><li>Rongo, C., Gavis, E. R., Lehmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+oskar+RNA+regulates+oskar+translation+and+requires+Oskar+protein.">Localization of oskar RNA regulates oskar translation and requires Oskar protein.</a> Development. 121 (9), 2737-2746 (1995).</li><li>Mhlanga, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+colocalisation+of+oskar+mRNA+and+trans-acting+proteins+revealed+by+quantitative+imaging+of+the+Drosophila+oocyte.">In vivo colocalisation of oskar mRNA and trans-acting proteins revealed by quantitative imaging of the Drosophila oocyte.</a> PLoS One. 4 (7), e6241 (2009).</li><li>Bayer, L. V., Omar, O. S., Bratu, D. P., Catrina, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PinMol:+Python+application+for+designing+molecular+beacons+for+live+cell+imaging+of+endogenous+mRNAs.">PinMol: Python application for designing molecular beacons for live cell imaging of endogenous mRNAs.</a> bioRxiv. , (2018).</li><li>Marras, S. A., Kramer, F. R., Tyagi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficiencies+of+fluorescence+resonance+energy+transfer+and+contact-mediated+quenching+in+oligonucleotide+probes.">Efficiencies of fluorescence resonance energy transfer and contact-mediated quenching in oligonucleotide probes.</a> Nucleic Acids Research. 30 (21), e122 (2002).</li><li>Bratu, D. P., Catrina, I. E., Marras, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tiny+molecular+beacons+for+in+vivo+mRNA+detection.">Tiny molecular beacons for in vivo mRNA detection.</a> Methods in Molecular Biology. 714, 141-157 (2011).</li><li>Dean, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+(pulling)+of+needles+for+gene+delivery+by+microinjection.">Preparation (pulling) of needles for gene delivery by microinjection.</a> Cold Spring Harbor. 2006 (7), (2006).</li><li>Alami, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+transport+of+TDP-43+mRNA+granules+is+impaired+by+ALS-causing+mutations.">Axonal transport of TDP-43 mRNA granules is impaired by ALS-causing mutations.</a> Neuron. 81 (3), 536-543 (2014).</li><li>Jackson, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+of+Hairpin+DNA-Functionalized+Gold+Nanoparticles+for+Imaging+mRNA+in+Living+Cells.">Applications of Hairpin DNA-Functionalized Gold Nanoparticles for Imaging mRNA in Living Cells.</a> Methods in Enzymology. 572, 87-103 (2016).</li><li>Zimyanin, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+oskar+mRNA+transport+reveals+the+mechanism+of+posterior+localization.">In vivo imaging of oskar mRNA transport reveals the mechanism of posterior localization.</a> Cell. 134 (5), 843-853 (2008).</li><li>Catrina, I. E., Marras, S. A., Bratu, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tiny+molecular+beacons:+LNA/2'-O-methyl+RNA+chimeric+probes+for+imaging+dynamic+mRNA+processes+in+living+cells.">Tiny molecular beacons: LNA/2'-O-methyl RNA chimeric probes for imaging dynamic mRNA processes in living cells.</a> ACS Chemical Biology. 7 (9), 1586-1595 (2012).</li><li>Chen, A. K., Behlke, M. A., Tsourkas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+cytosolic+delivery+of+molecular+beacon+conjugates+and+flow+cytometric+analysis+of+target+RNA.">Efficient cytosolic delivery of molecular beacon conjugates and flow cytometric analysis of target RNA.</a> Nucleic Acids Research. 36 (12), e69 (2008).</li><li>Nitin, N., Santangelo, P. J., Kim, G., Nie, S., Bao, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptide-linked+molecular+beacons+for+efficient+delivery+and+rapid+mRNA+detection+in+living+cells.">Peptide-linked molecular beacons for efficient delivery and rapid mRNA detection in living cells.</a> Nucleic Acids Research. 32 (6), e58 (2004).</li><li>Chen, A. K., Behlke, M. A., Tsourkas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Avoiding+false-positive+signals+with+nuclease-vulnerable+molecular+beacons+in+single+living+cells.">Avoiding false-positive signals with nuclease-vulnerable molecular beacons in single living cells.</a> Nucleic Acids Research. 35 (16), e105 (2007).</li><li>Bevilacqua, P. C., Ritchey, L. E., Su, Z., Assmann, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-Wide+Analysis+of+RNA+Secondary+Structure.">Genome-Wide Analysis of RNA Secondary Structure.</a> Annual Review of Genetics. 50, 235-266 (2016).</li><li>Mhlanga, M. M., Vargas, D. Y., Fung, C. W., Kramer, F. R., Tyagi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=tRNA-linked+molecular+beacons+for+imaging+mRNAs+in+the+cytoplasm+of+living+cells.">tRNA-linked molecular beacons for imaging mRNAs in the cytoplasm of living cells.</a> Nucleic Acids Research. 33 (6), 1902-1912 (2005).</li><li>Eliceiri, K. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+imaging+software+tools.">Biological imaging software tools.</a> Nature Methods. 9 (7), 697-710 (2012).</li><li>Bolte, S., Cordelieres, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+guided+tour+into+subcellular+colocalization+analysis+in+light+microscopy.">A guided tour into subcellular colocalization analysis in light microscopy.</a> Journal of Microscopy. 224 (Pt 3), 213-232 (2006).</li><li>Trcek, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+germ+granules+are+structured+and+contain+homotypic+mRNA+clusters.">Drosophila germ granules are structured and contain homotypic mRNA clusters.</a> Nature Commununications. 6, 7962 (2015).</li></ol>

Drosophila अंडे कक्षों में अंतर्जात MRNA तस्करी का लाइव दृश्य अब आसानी से PinMol सॉफ्टवेयर के साथ डिजाइन किया जा सकता है, जो विशिष्ट, कुशल, और nuclease प्रतिरोधी MBs, के उपयोग पर निर्भर करता है। MBs एक लक्ष्य MRNA के भीतर अद?...

कोशिका जीव विज्ञान अध्ययन है कि स्थानिक और लौकिक संकल्प के साथ गतिशील घटनाओं कल्पना फ्लोरोसेंट आधारित लाइव सेल इमेजिंग तकनीक के विकास के द्वारा संभव बनाया गया है. वर्तमान में, विवो एमएमआरएनए दृश्य में प्रौद्योगिकियों के माध्यम से हासिल किया जाता है जो आरएनए एप्टीमर-प्रोटीन इंटरैक्शन पर आधारित होती हैं, आरएनए एप्टीमर-प्रेरित फ्लोरोसेंट कार्बनिक रंगों और न्यूक्लिक एसिड जांच के अनीलन1,2, 3. वे सभी उच्च विशिष्टता, संवेदनशीलता और संकेत-से-पृष्ठभूमि अनुपात प्रदान करते हैं। हालांकि, आरएनए aptamer केंद्रित दृष्टिकोण व्यापक आनुवंशिक हेरफेर की आवश्यकता है, जहां एक transgene कृत्रिम संरचनात्मक रूपांकनों कि प्रोटीन या कार्बनिक डाई बाइंडिंग के लिए आवश्यक हैं के साथ एक आरएनए व्यक्त करने के लिए इंजीनियर है. उदाहरण के लिए, MS2/MCP प्रणाली एक transgene के सह-अभिव्यक्ति की आवश्यकता है एक आरएनए निर्माण बैक्टीरियोफेज MS2 कोट प्रोटीन (MCP) के लिए बाध्यकारी अनुक्रम के कई अग्रानुक्रम दोहराता युक्त व्यक्त, और एक और transgene एक फ्लोरोसेंट प्रोटीन एन्कोडिंग एमसीपी 4,5के लिए जुड़े . आरएनए में इस तरह के माध्यमिक संरचनात्मक रूपांकनों के अलावा, एक भारी फ्लोरोसेंटी टैग प्रोटीन के साथ, चिंता व्यक्त की है कि देशी आरएनए प्रक्रियाओं प्रभावित हो सकता है6. एक तकनीक है कि इस चिंता का समाधान और अतिरिक्त अद्वितीय लाभ प्रदान करता है न्यूक्लिक एसिड आधारित दृष्टिकोण, आणविक बीकन (MBs) है. एम बी अंतर्जात एमआरएनए के मल्टीप्लेक्स का पता लगाने के लिए अनुमति देते हैं, एकल न्यूक्लिओटाइड विविधताओं के भेदभाव, और लक्ष्य MRNA7,8के साथ संकरीकरण के तेजी से गतिकीय. एम बी ओलिगोन्यूक्लिओटाइड जांच कर रहे हैं जो एक बार वे अपने लक्ष्यों को संकरित करने के बाद एक फ्लोरोजेनिक अनुरूप परिवर्तन से गुजरने से पहले एक शंकाबाल पिन गुना में रहते हैं (चित्र 1 सी)9. कई समूहों दोनों गैर-कोडिंग आरएनए (microRNAs और lncRNAs)10,11,12,13, आरएनए रेट्रोवायरस14 और गतिशील डीएनए प्रोटीन का पता लगाने के लिए MBs का उपयोग करने में सफलता मिली है बातचीत15| वे सफलतापूर्वक विभिन्न जीवों और ऊतकों में इमेजिंग के लिए नियोजित किया गया है, जैसे ज़ेब्राफ़िश भ्रूण16, न्यूरॉन्स13, ट्यूमर ऊतक17, भेद कार्डियोमायोसाइट्स18, और साल्मोनेला 19.
यहाँ हम एक माइक्रोस्कोपी सेट अप है कि सक्रिय आणविक परिवहन के गतिशील रेंज पर कब्जा करने के लिए पर्याप्त है के साथ मिलकर रहने वाले डी मेलेनोगैस्टर अंडे कक्षों में अंतर्जात MRNAs के लिए डिजाइन, वितरण और पता लगाने के दृष्टिकोण का वर्णन. डी मेलेनोगैस्टर अंडा चैम्बर ने विकास अध्ययनों की एक विस्तृत श्रृंखला के लिए एक आदर्श बहुकोशिकीय मॉडल प्रणाली के रूप में कार्य किया है, प्रारंभिक जर्मलाइन स्टेम सेल डिवीजन और मातृ जीन अभिव्यक्ति से खंडीय शरीर योजना20के उत्पादन के लिए, 21| अंडे कक्षों आसानी से अलग कर रहे हैं, बड़े और पारदर्शी, और पूर्व vivo विश्लेषण के घंटे का सामना करने में सक्षम, उन्हें अत्यधिक इमेजिंग प्रयोगों के लिए अनुकूल बना रही है. बहुत काम सक्रिय रूप से अनुवाद किया जा रहा से पहले असतत subcellular क्षेत्रों के लिए मातृ प्रतिलिपि के असममित स्थानीयकरण पर ध्यान केंद्रित किया है. विशेष रूप से, oskar MRNA स्थानीयकरण और oocyte के पीछे पोल पर इसके बाद अनुवाद एक कसकर विनियमित तरीके से एक घातक bicaudal भ्रूण phenotype22से बचने के लिए होना चाहिए. ऑस्कर एनआरएनए को 15 जर्मलाइन कोशिकाओं में लिखा जाता है, जिसे नर्स कोशिकाएं कहा जाता है, और सक्रिय रूप से कोशिकाद्रव्यी पुलों के माध्यम से ले जाया जाता है, जिसे वलय नहरों कहा जाता है, अंडाणु में, जर्मलाइन कोशिका जो परिपक्व अंडा बन जाती है और अंततः निषेचित होती है (चित्र 1क ). गतिशील भर्ती और oskar MRNP से करने के लिए और से प्रोटीन कारकों के आदान-प्रदान के बारे में पहले से ही उपलब्ध जानकारी की काफी राशि, अपनी लंबी दूरी की intracellular यात्रा के साथ, oskar अध्ययन करने के लिए एक पसंदीदा उम्मीदवार बनाते हैं MRNA जीवन चक्र की कई प्रक्रियाओं. MBs MRNA स्थानीयकरण की प्रक्रिया के बारे में विवरण खुलासा करने और प्रोटीन कारकों है कि Drosophila oogenesis के दौरान MRNA परिवहन को नियंत्रित करने के विनियमन और समारोह को समझने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है. विशेष रूप से, नर्स कोशिकाओं में MBs microin्यइजेक्टिंग और लाइव सेल इमेजिंग प्रयोगों प्रदर्शन द्वारा, अंतर्जात mRNAs की ट्रैकिंग संभव है8,23.
यहाँ प्रस्तुत रोडमैप एक पूरी प्रक्रिया के कदम प्रदान करता है, एक जीवित सेल इमेजिंग प्रयोग बाहर ले जाने से MBs का उपयोग कर, इमेजिंग डेटा प्राप्त करने के लिए, डेटा विश्लेषण प्रदर्शन करने के लिए अपने मूल सेलुलर वातावरण में अंतर्जात MRNA ट्रैक. कदम संशोधित किया जा सकता है और आगे अपने स्वयं के प्रयोगशाला सेटिंग के भीतर अन्य ऊतकों / सेल प्रकार के साथ काम कर रहे शोधकर्ताओं की जरूरतों को पूरा करने के लिए अनुकूलित.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Spectrofluorometer</td>
			<td>Fluoromax-4 Horiba-Jobin Yvon</td>
			<td>n/a</td>
			<td>Photon counting spectrofluorometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quartz cuvette</td>
			<td>Fireflysci (former Precision Cells Inc.)</td>
			<td>701MFL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5 tweezer</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>501985</td>
			<td>Thin tweezers are very important to separate out the individual egg chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halocarbon oil 700</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H8898</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover slip No.1 22 x 40mm</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48393-048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting microscope</td>
			<td>Leica MZ6 Leica Microsystems Inc.</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 fruit fly anesthesia pad</td>
			<td>Genesee Scienific</td>
			<td>59-114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCL pH7.5</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>1185-53-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>7791-18-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>7647-14-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinning disc confocal microscope</td>
			<td>Leica DMI-4000B inverted microscope equipped with Yokogawa CSU 10 spinning disc Leica Microsystems Inc.</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamamatsu C9100-13 ImagEM EMCCD camera</td>
			<td>Hamamatsu</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PatchMan NP 2 Micromanipulator</td>
			<td>Eppendorf Inc.</td>
			<td>920000037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FemtoJet Microinjector</td>
			<td>Eppendorf Inc.</td>
			<td>920010504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection needle: Femtotips II</td>
			<td>Eppendorf Inc.</td>
			<td>930000043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loading tip: 20ul Microloader</td>
			<td>Eppendorf Inc.</td>
			<td>930001007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Cover glasses no. 1 or 1.5, 22x40mm</td>
			<td>VWR</td>
			<td>48393-026; 48393-172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry yeast</td>
			<td>Any grocery store</td>
			<td>n/a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Computer, &#62; 20 GB RAM</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Although processing can be carried out on most computers, higher capabilities will increase the speed of the processing</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualizing and tracking endogenous mrnas in live drosophila melanogaster egg chambers

फ्लोरोसेंट आधारित इमेजिंग तकनीक, प्रकाश माइक्रोस्कोपी में विकास के साथ संयोजन में, कैसे सेल जीवविज्ञानी लाइव सेल इमेजिंग अध्ययन का संचालन क्रांति की है. RNAs का पता लगाने के लिए तरीके बहुत विस्तार किया है के बाद से मौलिक अध्ययन जीन अभिव्यक्ति विनियमन के लिए साइट-विशिष्ट MRNA स्थानीयकरण से जुड़े. गतिशील MRNA प्रक्रियाओं अब दृष्टिकोण है कि mRNAs का पता लगाने के माध्यम से कल्पना की जा सकती है, माइक्रोस्कोपी सेट अप है कि काफी तेजी से आणविक व्यवहार के गतिशील रेंज पर कब्जा करने के साथ युग्मित. आण्विक बीकन प्रौद्योगिकी एक संकरीकरण-आधारित दृष्टिकोण है जो जीवित कोशिकाओं में अंतर्जात प्रतिलिपिओं का प्रत्यक्ष पता लगाने में सक्षम है। आण्विक बीकन हैं हेयरपिन के आकार का, आंतरिक रूप से मज्जशीतन, एकल न्यूक्लिओटाइड विभेदकारी न्यूक्लिक एसिड जांच, जो केवल एक अद्वितीय लक्ष्य अनुक्रम के लिए संकरीकरण पर fluoresce. जब उन्नत फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी और उच्च संकल्प इमेजिंग के साथ युग्मित, वे एक mRNAs के intracellular आंदोलन के स्थानिक और लौकिक ट्रैकिंग प्रदर्शन करने के लिए सक्षम. हालांकि इस तकनीक अंतर्जात प्रतिलिपि का पता लगाने में सक्षम एकमात्र तरीका है, सेल जीवविज्ञानियों अभी तक पूरी तरह से लाइव सेल इमेजिंग के लिए इस तरह की जांच डिजाइन करने में कठिनाइयों के कारण इस तकनीक को गले नहीं लगाया है. एक नया सॉफ्टवेयर अनुप्रयोग, PinMol,सबसे अच्छा कुशलता से एक जीवित सेल के भीतर MRNA लक्ष्य क्षेत्रों को संकरित करने के लिए उपयुक्त जांच के बढ़ाया और तेजी से डिजाइन के लिए अनुमति देता है. इसके अलावा, उच्च संकल्प, वास्तविक समय छवि अधिग्रहण और वर्तमान, खुला स्रोत छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर एक परिष्कृत डेटा उत्पादन के लिए अनुमति देते हैं, जटिलता की एक बेहतर मूल्यांकन करने के लिए अग्रणी गतिशील MRNA के जीवन चक्र में शामिल प्रक्रियाओं अंतर्निहित.
यहाँ हम डिजाइन और Drosophila melanogaster अंडे कक्षों में आणविक बीकन देने के लिए एक व्यापक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं. अंतर्जात मातृ MRNAs के प्रत्यक्ष और अत्यधिक विशिष्ट पता लगाने और दृश्य कताई डिस्क confocal माइक्रोस्कोपी के माध्यम से किया जाता है. इमेजिंग डेटा संसाधित और Icy सॉफ्टवेयर में वस्तु का पता लगाने और ट्रैकिंग का उपयोग कर mRNAs, जो ले जाया जाता है और oocyte के भीतर विशेष क्षेत्रों के लिए स्थानीयकृत के गतिशील आंदोलन के बारे में विवरण प्राप्त करने के लिए विश्लेषण किया है।

PinMolका उपयोग करना , कई MBs एक MRNA लक्ष्य के लिए डिजाइन किया जा सकता है (चित्र 1B-C) . संश्लेषण और शुद्धि के बाद, चयनित MBs विशेषता है और इन विट्रो विश्लेषण में उपयोग की तुलना में कर रह?...

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Visualizing and Tracking Endogenous mRNAs in Live Drosophila melanogaster Egg Chambers

यहाँ, हम आणविक बीकन का उपयोग कर रहते Drosophila melanogaster अंडे कक्ष में अंतर्जात MRNA तस्करी के दृश्य, पता लगाने, विश्लेषण और ट्रैकिंग के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं, कताई डिस्क confocal माइक्रोस्कोपी, और खुला स्रोत विश्लेषण सॉफ्टवेयर.

दृश्य और ट्रैकिंग अंतर्जात MRNAs में लाइव Drosophila मेलेनोगैस्टर अंडे मंडलों

Fluorescence-based imaging techniques, in combination with developments in light microscopy, have revolutionized how cell biologists conduct live cell ...

यह विधि ध्रुवीकृत आरएनए स्थानीयकरण के तंत्र और कार्य के बारे में आरएनए जीव विज्ञान क्षेत्र में महत्वपूर्ण प्रश्नों के उत्तर देने में मदद कर सकती है। इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि यह जीवित ऊतकों में अंतर्जात आरएनए तस्करी के वास्तविक समय के दृश्य के लिए अनुमति देता है। इस तकनीक के निहितार्थ आरएनए से संबंधित रोगों की चिकित्सा की ओर विस्तार क्योंकि यह एक नए चिकित्सीय लक्ष्यों को उजागर करने की क्षमता है ।हालांकि यह विधि फल फ्लाई अंडे के कक्ष में आरएनए प्रक्रियाओं में अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकती है, लेकिन इसे जेब्राफिश या संस्कृति कोशिकाओं जैसे अन्य प्रणालियों पर भी लागू किया जा सकता है। आम तौर पर, इस विधि के लिए नए व्यक्ति आणविक बीकन रंगमंच की सामग्री के डिजाइन और वितरण से जुड़ी चुनौतियों के कारण संघर्ष करेंगे। आणविक बीकन माइक्रोइंजेक्शन के लिए, 40X तेल उद्देश्य का चयन करें और माइक्रोस्कोप चरण पर विच्छेदित अंडे के कक्ष के साथ एक कवरस्लिप माउंट करें।मध्य से देर से विकास के चरण में एक अंडा कक्ष का पता लगाएं जो माइक्रोइंजेक्शन के लिए ठीक से उन्मुख है। फिर उचित इंजेक्शन और मुआवजे के दबाव के साथ एक माइक्रोइंजेक्टर स्थापित करें। माइक्रो मैनिपुलेटर जॉयस्टिक का उपयोग करके, तेल की बूंद में आणविक बीकन समाधान के एक माइक्रोलीटर से भरी सुई को धीरे-धीरे कम करें।देखने के क्षेत्र की परिधि की ओर ध्यान में टिप लाओ । सुई टिप से हवा को हटाने और यह सुनिश्चित करने के लिए कि सुई से प्रवाह है और सुई को घर की स्थिति में लाने के लिए एक साफ कार्य करें। अंडे के कक्ष पर ध्यान केंद्रित करने के लिए microinjected हो सकता है और सुई वापस अंडे चैंबर के किनारे के पास ध्यान में लाने के लिए ।उद्देश्य के जेड-स्थिति का एक अच्छा समायोजन करें जैसे कि नर्स कोशिकाओं से कूप कोशिकाओं को अलग करने वाली झिल्ली ध्यान में है। दो से पांच सेकंड की अवधि में आणविक बीकन के इंजेक्शन के लिए एक नर्स सेल में सुई डालें। प्रजनन योग्य माइक्रोइंजेक्शन सफलता सुनिश्चित करने के लिए, कूप कोशिकाओं और नर्स कोशिकाओं को अलग करने वाली झिल्ली पर ध्यान केंद्रित करें जिन्हें माइक्रो मैनिपुलेटर के साथ ध्यान में रखते हुए सुई की नोक लाने के दौरान इंजेक्ट किया जाएगा।जब सभी आणविक बीकन इंजेक्शन लगाए गए हों, तो धीरे-धीरे सुई को हटा दें और इसे घर की स्थिति में वापस ले लें। छवि अधिग्रहण के लिए वांछित आवर्धन के लिए उद्देश्य बदलें। फिर नए उद्देश्य के तहत अंडे के चैंबर पर ध्यान केंद्रित करें और छवि अधिग्रहण शुरू करें।आणविक बीकन का स्पॉट डिटेक्शन के लिए, इमेज जे में छवियों को खोलें छवियों को बर्फीले उपकरण में परिवर्तित करने का उपयोग करें ताकि छवियों को वापस बर्फीले में परिवर्तित किया जा सके। एक पैमाने पर बार स्वचालित रूप से ढेर पर मढ़ा जाएगा । आवश्यक के रूप में निरीक्षक खिड़की के माध्यम से स्केल बार संपादित करें।फिर मूल स्टैक से स्केल बार को हटाने के लिए लेयर टैब के नीचे स्केल बार के लिए आई आइकन को निष्क्रिय करें। डिटेक्शन और ट्रैकिंग, डिटेक्शन और स्पॉट डिटेक्टर का चयन करें, और वर्तमान अनुक्रम इनपुट डिटेक्शन की पुष्टि करें और चैनल शून्य को इनपुट और प्रीप्रोसेसिंग मापदंडों के लिए क्रमशः चुना जाता है। डिटेक्टर के लिए, विश्लेषण करने के लिए ढेर में पर्याप्त जेड-स्लाइस न होने पर ही 3डी तरंगदैर्ध्य के बल उपयोग का उपयोग करके अंधेरे पृष्ठभूमि पर उज्ज्वल स्थान का पता लगाएं।बड़े स्थानों के लिए अधिक पैमाने को जोड़ने के लिए तराजू और संवेदनशीलता का चयन करें और इस बात की पुष्टि करें कि अनुक्रम से ब्याज का क्षेत्र ब्याज के क्षेत्र के लिए निर्धारित है। फ़िल्टर करने के लिए, पुष्टि करें कि कोई फ़िल्टरिंग सेट नहीं की गई है और आउटपुट के तहत उपयुक्त फ़ाइल प्रारूप का चयन करें। यदि स्पॉट डिटेक्टर परिणामों को ट्रैकिंग विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया जाना है, स्विमिंग पूल के लिए निर्यात का चयन करें ।कोलोकैलाइजेशन एनालिसिस के लिए दूसरे चैनल के लिए स्पॉट डिटेक्शन दोहराएं। आणविक बीकन स्पॉट को ट्रैक करने के लिए, स्पॉट डिटेक्शन के लिए समान मापदंडों का उपयोग करके डिटेक्शन और ट्रैकिंग, ट्रैकिंग, स्पॉट ट्रैकिंग का चयन करें और स्पॉट डिटेक्टर चलाएं। अनुमान मापदंडों पर क्लिक करें और पैरामीटर अनुमान पॉपअप विंडो में वांछित लक्ष्य गति का चयन करें।इसके बाद रन ट्रैकिंग पर क्लिक करें। पटरियों की कल्पना करने के लिए, पता लगाने और ट्रैकिंग, ट्रैकिंग, और ट्रैक प्रबंधक का चयन करें। रंग ट्रैक प्रोसेसर के लिए, पटरियों के लिए एक रंग का चयन करें और चुनें।ऐड ट्रैक प्रोसेसर से, ट्रैक प्रोसेसर टाइम क्लिप चुनें। चेक क्लिपर विंडो में, वर्तमान समय बिंदु से पहले और बाद में दिखाए जाने वाले डिटेक्शन की संख्या दर्ज करें। एक्सएमएल ट्रैक फ़ाइल के रूप में ट्रैक जानकारी सहेजें और परिणामों का स्क्रीनशॉट प्राप्त करने के लिए कैमरा आइकन का उपयोग करें।जेड-दिशा के साथ स्टैक को प्रोजेक्ट करने के लिए, प्लगइन खोजने के लिए खोज बार का उपयोग करें और ड्रॉपडाउन मेनू से अधिकतम प्रक्षेपण का चयन करें। इंस्पेक्टर विंडो में, इमेज को मनचाए ओरिएंटेशन में एडजस्ट करने और घुमाए गए इमेज का स्क्रीनशॉट हासिल करने के लिए सीक्वेंस टैब, कैनवास और रोटेशन का चयन करें। फिर ब्याज के क्षेत्र का चयन करें, ब्याज के 2D क्षेत्र, ब्याज आकार के क्षेत्र का चयन करें, और फसल के लिए छवि पर ब्याज के क्षेत्र का चयन करें ।टाइमस्टैंप ओवरले प्लगइन स्थापित करें और टाइमस्टैंप को कैसे रखें और प्रारूप में निर्देशों के लिए पॉपअप विंडो में निर्देशों का पालन करते हुए एक टाइमस्टैंप जोड़ें। समय अंतराल को बदलने या जोड़ने के लिए, अनुक्रम गुण विंडो में संपादित करें। निरीक्षक खिड़की में लेयर टैब के नीचे स्केल बार को वापस जोड़ने के लिए आई आइकन को सक्रिय करें।फिर टाइमस्टैंप किए गए परिणामों का स्क्रीनशॉट प्राप्त करें और झगड़ा और एवीआई दोनों प्रारूपों में छवि को सहेजें। इस विधि का उपयोग करते हुए, ओजेनेसिस के विभिन्न चरणों में और विशेष रूप से मध्य ऊजेनेसिस के बाद आणविक बीकन के माध्यम से अंतर्जात ंrnAs के परिवहन और स्थानीयकरण पैटर्न की कल्पना करना संभव है। जब व्यक्तिगत रूप से एक ही चरण अंडे कक्षों में इंजेक्शन, अलग ओस्कर विशिष्ट आणविक बीकन स्थानीयकरण का एक ही पैटर्न मौजूद है ।एक नर्स सेल के साइटोप्लाज्म में इंजेक्ट किए गए आणविक बीकन स्वतंत्र रूप से आसन्न नर्स कोशिकाओं के साथ-साथ ओसाइट में फैलजाएंगे। इस प्रकार, बीकन अपने लक्ष्यों के साथ संकरण करने और माइक्रोइंजेक्शन साइट की तुलना में अन्य साइटों पर फ्लोरेसेंस सिग्नल उत्पन्न करने में सक्षम हैं। मिड ऊजेनेसिस में ओस्कर जीएफपी ट्रांसजेनिक अंडे कक्षों में, अधिग्रहण डेटा के विश्लेषण से आनुवंशिक रूप से इंजीनियर जीएफपी टैग किए गए ओस्कर एमआरएनए के फ्लोरेसेंस सिग्नल के फ्लोरेसेंस सिग्नल के लिए व्यापक कोलोकैलाइजेशन से पता चलता है।इसके अलावा, नर्स सेल और ओसाइट साइटोप्लाज्म दोनों में लंबी दूरी के परिवहन के लिए ओस्कर एमआरएनए प्रक्षेप पथ निर्धारित करने के लिए 5डी स्टैक का और विश्लेषण किया जा सकता है। इसके विकास के बाद, इस तकनीक ने आरएनए जीव विज्ञान के क्षेत्र में शोधकर्ताओं के लिए ड्रोसोफिला अंडा कक्ष में अंतर्जात मातृ एमआरएनए परिवहन और स्थानीयकरण का पता लगाने का मार्ग प्रशस्त किया।

Research

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JoVE Journal

Cell Biology

Biology

Unit 1

Visualizing and Tracking Endogenous mRNAs in Live Drosophila melanogaster Egg Chambers

Control of Gene Expression

SCIENTISTS IN ACTION

Dissection of Larval CNS in Drosophila Melanogaster

ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में लारवल सीएनएस के विच्छेदन

The central nervous system (CNS) of Drosophila larvae is complex and poorly understood.  One way to investigate the CNS is to use immunohistochemistry to ...

High-Resolution Video Tracking of Locomotion in Adult Drosophila Melanogaster

उच्च संकल्प प्रौढ़ ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में हरकत की वीडियो ट्रैकिंग

Flies provide an important model for studying complex behavior due to the plethora of genetic tools available to researchers in this field.  Studying ...

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

Visualizing the Live Drosophila Glial-neuromuscular Junction with Fluorescent Dyes

लाइव Visualizing ड्रोसोफिला फ्लोरोसेंट रंजक के साथ जंक्शन Glial neuromuscular

Our project identified GFP labeled glial structures at the developing larval fly neuromuscular synapse. To look at development of live glial-nerve-muscle ...

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

Visualizing the Beating Heart in Drosophila

में दिल की धड़कन visualizing ड्रोसोफिला</em

The Drosophila heart has recently emerged as a good model system for examining the genetic, cellular, and molecular mechanisms underlying function in ...

Live Imaging Of Drosophila melanogaster Embryonic Hemocyte Migrations

Live Imaging Of Drosophila melanogaster Embryonic Hemocyte Migrations

के लाइव इमेजिंग ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर भ्रूण Hemocyte migrations

Many studies address cell migration using in vitro methods, whereas the physiologically relevant environment is that of the organism itself. Here we ...

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

Isolation of Drosophila melanogaster Testes

के अलगाव ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर Testes

The testes of Drosophila melanogaster provide an important model for the study of stem cell maintenance and differentiation, meiosis, and soma-germline ...

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

व्यक्तिगत तैयारी ड्रोसोफिला अंडे मंडलों लाइव इमेजिंग के लिए

Live cell imaging is an important technique applied to a number of Drosophila tissues used as models to investigate topics such as axis specification, ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

उम्र के मापन में<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Live Imaging of Apoptotic Cell Clearance during Drosophila Embryogenesis

Apoptotic सेल क्लीयरेंस की इमेजिंग के दौरान जीते<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; Embryogenesis

The  proper elimination of unwanted or aberrant cells through apoptosis and  subsequent phagocytosis (apoptotic cell clearance) is crucial for normal  ...

Maintenance of a Drosophila melanogaster Population Cage

Maintenance of a Drosophila melanogaster Population Cage

एक का रखरखाव<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em&gt; जनसंख्या केज

Large quantities of DNA, RNA, proteins and other cellular components are often required for biochemistry and molecular biology experiments. The short life ...