Name: digital analysis of immunostaining of zw10 interacting protein in human lung tissues
Uploaded: 2019-05-01T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Digital Analysis of Immunostaining of ZW10 Interacting Protein in Human Lung Tissues at JoVE.com

Dette projekt blev støttet af Kinas nationale naturlige fundament (nr. 81500151, 81400121, 81270607, 81541027 og 81501352) og det naturlige fundament for Hubei-provinsen (Kina) (no. 2017CFB631). Forfatterne udtrykker deres påskønnelse af Guo Qin, Chang min, Li Hui, og deres kolleger på Wuhan Google Biological Technology Co., LTD for deres tekniske support. Forfatterne takker også Muhammad Jamal for sprog redningen.

Alle metoder, der er beskrevet her, er blevet godkendt af det etiske udvalg af Zhongnan Hospital på Wuhan University og Renmin Hospital i Wuhan University.
1. klargøring af IHC-slides
<ol><li>Løs lunge vævsprøven ved at fordybe det humane lunge vævs fragment (ca. 3 x 3 cm) i 4% PARAFORMALDEHYD i fosfat bufferet saltvand (PBS) i 24 timer ved stuetemperatur (RT).</li>
	<li>Dehydrat vævet i 80%, 95%, og 100% ethanol i 15 min, 20 min, og 20 min, henholdsvis ved stuetemperatur. Endelig sæ...

<ol>
	<li>Endo, H., Ikeda, K., Urano, T., Horie-Inoue, K., Inoue, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Terf/TRIM17+stimulates+degradation+of+kinetochore+protein+ZWINT+and+regulates+cell+proliferation.">Terf/TRIM17 stimulates degradation of kinetochore protein ZWINT and regulates cell proliferation.</a> The Journal of Biochemistry. 151 (2), 139-144 (2012).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Zwint-1+specifies+localization+of+Zeste+White+10+to+kinetochores+and+is+essential+for+mitotic+checkpoint+signaling.">Human Zwint-1 specifies localization of Zeste White 10 to kinetochores and is essential for mitotic checkpoint signaling.</a> Journal of Biological Chemistry. 279 (52), 54590-54598 (2004).</li><li>Lin, Y. T., Chen, Y., Wu, G., Lee, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hec1+sequentially+recruits+Zwint-1+and+ZW10+to+kinetochores+for+faithful+chromosome+segregation+and+spindle+checkpoint+control.">Hec1 sequentially recruits Zwint-1 and ZW10 to kinetochores for faithful chromosome segregation and spindle checkpoint control.</a> Oncogene. 25 (52), 6901-6914 (2006).</li><li>Ying, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+Zwint+predicts+poor+prognosis+and+promotes+the+proliferation+of+hepatocellular+carcinoma+by+regulating+cell-cycle-related+proteins.">Overexpression of Zwint predicts poor prognosis and promotes the proliferation of hepatocellular carcinoma by regulating cell-cycle-related proteins.</a> OncoTargets and Therapy. 11, 689-702 (2018).</li><li>Yuan, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinformatic+analysis+of+prognostic+value+of+ZW10+interacting+protein+in+lung+cancer.">Bioinformatic analysis of prognostic value of ZW10 interacting protein in lung cancer.</a> OncoTargets and Therapy. 11, 1683-1695 (2018).</li><li>Higgins, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+and+challenges+of+digital+pathology+and+whole+slide+imaging.">Applications and challenges of digital pathology and whole slide imaging.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 90 (5), 341-347 (2015).</li><li>Webster, J. D., Dunstan, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+and+automated+image+analysis:+considerations+and+opportunities+in+the+practice+of+pathology.">Whole-slide imaging and automated image analysis: considerations and opportunities in the practice of pathology.</a> Veterinary Pathology. 51 (1), 211-223 (2014).</li><li>Al-Janabi, S., Huisman, A., van Diest, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology:+current+status+and+future+perspectives.">Digital pathology: current status and future perspectives.</a> Histopathology. 61 (1), 1-9 (2012).</li><li>Bonomi, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictive+biomarkers+for+response+to+EGFR-directed+monoclonal+antibodies+for+advanced+squamous+cell+lung+cancer.">Predictive biomarkers for response to EGFR-directed monoclonal antibodies for advanced squamous cell lung cancer.</a> Annals of Oncology. 29 (8), 1701-1709 (2018).</li><li>Villalobos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ERCC1+assessment+in+upfront+treatment+with+and+without+cisplatin-based+chemotherapy+in+stage+IIIB/IV+non-squamous+non-small+cell.">ERCC1 assessment in upfront treatment with and without cisplatin-based chemotherapy in stage IIIB/IV non-squamous non-small cell.</a> Medical Oncology. 35 (7), 106 (2018).</li><li>Griffin, J., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+clinical+use:+where+are+we+now+and+what+is+holding+us+back?.">Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back?.</a> Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).</li><li>Huisman, A., Looijen, A., van den Brink, S. M., van Diest, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+a+fully+digital+pathology+slide+archive+by+high-volume+tissue+slide+scanning.">Creation of a fully digital pathology slide archive by high-volume tissue slide scanning.</a> Human Pathology. 41 (5), 751-775 (2010).</li><li>Gray, A., Wright, A., Jackson, P., Hale, M., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+histochemical+stains+using+whole+slide+imaging:+development+of+a+method+and+demonstration+of+its+usefulness+in+laboratory+quality+control.">Quantification of histochemical stains using whole slide imaging: development of a method and demonstration of its usefulness in laboratory quality control.</a> Journal of Clinical Pathology. 68 (3), 192-199 (2015).</li><li>Hofman, F. M., Taylor, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemistry.">Immunohistochemistry.</a> Current Protocols in Immunology. 103, (2013).</li><li>Ramos-Vara, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+and+Methods+of+Immunohistochemistry.">Principles and Methods of Immunohistochemistry.</a> Methods in Molecular Biology. 1641, 115-128 (2017).</li><li>Otali, D., Fredenburgh, J., Oelschlager, D. K., Grizzle, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standard+tissue+as+a+control+for+histochemical+and+immunohistochemical+staining.">A standard tissue as a control for histochemical and immunohistochemical staining.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 91 (5), 309-326 (2016).</li><li>Clarke, E. L., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colour+in+digital+pathology:+a+review.">Colour in digital pathology: a review.</a> Histopathology. 70 (2), 153-163 (2017).</li><li>Potts, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+drug+discovery+and+development:+multisite+integration.">Digital pathology in drug discovery and development: multisite integration.</a> Drug Discovery Today. 14 (19-20), 935-941 (2009).</li><li>Tabata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+at+primary+pathological+diagnosis:+Validation+of+whole-slide+imaging-based+primary+pathological+diagnosis+at+twelve+Japanese+academic+institutes.">Whole-slide imaging at primary pathological diagnosis: Validation of whole-slide imaging-based primary pathological diagnosis at twelve Japanese academic institutes.</a> Pathology International. 67 (11), 547-554 (2017).</li><li>Saco, A., Bombi, J. A., Garcia, A., Ram&#237;rez, J., Ordi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Status+of+Whole-Slide+Imaging+in+Education.">Current Status of Whole-Slide Imaging in Education.</a> Pathobiology. 83 (2-3), 79-88 (2016).</li><li>Griffin, J., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+clinical+use:+where+are+we+now+and+what+is+holding+us+back?.">Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back?.</a> Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).</li></ol>

Hel-slide scanning er ved at blive et varmt emne for sin robuste scanning og produktion af høj kvalitet billeder til kliniske og forskningsformål11,12,13. Billeder kan produceres ved slide-scanning mikroskoper inden for minutter11,12,13. Ved at anvende denne metode, vi opnåede billeder af høj kvalitet til ZWINT IHC slides og sammenl...

ZW10 interagerende protein (zwint) er en nødvendig bestanddel af kinetochore-komplekset, som er involveret i den mitotiske spindel checkpunkt1,2,3. Det er blevet rapporteret, at nedbrydningen af zwint fører til afvigende for tidlig kromosom adskillelse1,2,3. Nylige undersøgelser har antydet, at zwint er involveret i patogenesen af flere tumorer ved at fremme udbredelsen af tumorceller4,5. Vi har tidligere rapporteret overekspression af ZWINT i lungekræft5. Det er blevet almindeligt accepteret, at analysen af dias af patologer ved hjælp af CLM er tidskrævende og ikke kvantitativ6,7,8. Desuden kan forværringen af lagrede glas slides gøre det umuligt at trække tidligere oprettede slides. Den nye metode til computerbaseret digital helslide Imaging (wsi) kan overvinde disse begrænsninger6,7,8.
Til dette formål beskriver vi en metodologi for immun farvning af ZWINT i humant lungekræft væv, kombineret med hel-slide digital scanning og software-baseret billedanalyse. Den største fordel ved denne metode er at fremstilling af konkordant resultater med CLM. Denne teknologi kan anvendes i vid udstrækning i områder med patologisk scoring af hematoxylin-eosin farvning (H & E) og IHC, fluorescens in situ hybridisering (fisk), vævs mikroarrays (TMA), og Drug opdagelse og udvikling.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Pannoramic MIDI</td>
			<td>3D HISTECH</td>
			<td>Cat: PMIDI-040709</td>
			<td>An automated digital slide scanner with a remarkable feature set :12-slide capacity, fluorescence scanning, and many more.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QuantCenter</td>
			<td>3D HISTECH</td>
			<td>Downloaded from the official website of the company</td>
			<td>The framework for 3DHISTCH&#39;s image analysis applications.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA RM2235</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>Cat: 14050038604</td>
			<td>The enhanced precision of the new accessories will add convenience to block to knife approach as well as specimen orientation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-human Anti-ZWINT antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat: ab197794</td>
			<td>Immunohistochemical analysis of ZWINT in human lung tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-rabbit secondary antibody</td>
			<td>Wuhan Goodbio Technology</td>
			<td>Cat:GB23303-1</td>
			<td>Secondary antibody for IHC staining.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline</td>
			<td>Wuhan Goodbio Technology</td>
			<td>Cat:G0002</td>
			<td>A solution containing a phosphate buffer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OLYMPUS CX23</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td>Cat:6M87620</td>
			<td>Microscope for detection of H&#38;E or IHC slides.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethylbenzene</td>
			<td>Shanghai Lingfeng Chemical Reagent</td>
			<td>Cat:1330-20-7</td>
			<td>A colorless, flammable fluid used as a solvent and clarifying agent in the preparation of tissue sections for microscopic study.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Staining Solution</td>
			<td>Wuhan Servicebio technology</td>
			<td>Cat:G1039</td>
			<td>It is commonly used for histologic studies, oftern colors the nuclei of cells blue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>Baitg</td>
			<td>Cat:2005-64-5</td>
			<td>It is a polysorbate-type nonionic surfactant formed by the ethoxylation of sorbitan before the addition of lauric acid. It is used as a deterent and emulsifier in pharmacological applications.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid repair liquid</td>
			<td>Wuhan Servicebio technology</td>
			<td>Cat:G1202</td>
			<td>Is is used to repair antigen after fixation during IHC procedure.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA ASP200s</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14048043626</td>
			<td>It was designed for routine and research histopathology of up to 200 cassettes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA Arcadia H</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14039354103</td>
			<td>It is a heated paraffin embedding station and allows for simple operation and precise control, resulting in improved quality, a smooth workflow and reliability.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA Arcadia C</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14039354102</td>
			<td>It is a cold plate holding more than 60/65 cassettes on its large working surface. It was designed with an environment adaptive control module to make sure the operating temperature is always stabilized at -6&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaseViewer Software</td>
			<td>3DHISTECH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

digital analysis of immunostaining of zw10 interacting protein in human lung tissues

Formålet med denne undersøgelse er at indføre en metodologi for immun farvning af humant lunge væv, efterfulgt af hele dias digital scanning og billedanalyse. Digital scanning er en hurtig måde at scanne en stak af slides og producere digitale billeder med høj kvalitet. Det kan producere samstemmende resultater med konventionel lys mikroskopi (CLM) af patologer. Desuden gør tilgængeligheden af digitale billeder det muligt, at det samme dias kan observeres samtidigt af flere mennesker. Desuden kan digitale billeder af dias gemmes i en database, hvilket betyder, at den langsigtede forringelse af glas glider undgås. Begrænsningerne af denne teknik er som følger. For det første har det brug for forberedt væv af høj kvalitet og de originale Immunhistokemi (IHC) slides uden nogen skade eller overskydende tætningsmiddel rester. Anden, tumor eller nontumor områder bør specificeres af erfarne patologer før analysen ved hjælp af software, for at undgå enhver forvirring om tumoren eller nontumor områder under scoring. For det tredje skal operatøren styre farvegengivelsen i hele digitaliseringsprocessen i hele slide Imaging.

Vi målte udtrykket niveauer af ZWINT i 28 par af ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) prøver (tumor og tilstødende nontumor væv), herunder 14 planocellecarcinomer (SCCs) og 14 adenocarcinomer (ADCs), af IHC. Den digitale scanning af diasene på hele diaset leverede digitale billeder af høj kvalitet (figur 1a). Resultaterne viste, at H-score for lungekræft var signifikant højere end for tilstødende noncancer væv (P < 0,0001, to-sidet t</em...

Watch this Scientific Journal Video about Digital Analysis of Immunostaining of ZW10 Interacting Protein in Human Lung Tissues at JoVE.com

Digital Analysis of Immunostaining of ZW10 Interacting Protein in Human Lung Tissues

Digital analyse af immun farvning af ZW10 interagerende protein i humant lunge væv

ZW10 interagerende protein (ZWINT) deltager i mitotisk spindel check point og patogenesen af carcinoma. Her introducerer vi en metodologi for immun farvning af ZWINT i humant lungekræft væv, efterfulgt af den digitale scanning af hele dias og billedanalyse. Denne metode kan levere digitale billeder af høj kvalitet og pålidelige resultater.

The purpose of this study is to introduce a methodology of the immunostaining of human lung tissues, followed by whole-slide digital scanning and image ...

Denne metode kan hjælpe med at besvare centrale spørgsmål i patologisk og immunhisemitri. Den største fordel ved denne teknik er, at hurtigere nok, og som producerer digitale medier med høj kvalitet. Begynd med at fastsætte en tre-af-tre centimeter kung vævsprøve i 4% paraformaldehyd i 24 timer ved stuetemperatur.Den næste dag, dehydrere vævet i stigende ethanol nedsænkning ved stuetemperatur, efterfulgt af tre nedsænkninger i 100% xylen i 20 minutter pr behandling. Efter den sidste xylen nedsænkning, placere vævet i 63-graders Celsius paraffin i 30 minutter, efterfulgt af en anden 45-minutters nedsænkning i frisk 63-graders Celsius paraffin, derefter ændre paraffin en gang mere for en endelig en time inkubation. Når paraffinen er afkølet, anvendes en roterende mikrotom til at anskaffe fem mikrometer tykke dele af den paraffininddelte vævsprøve og opfange sektionerne på 20 mikrogram pr. milliliter poly-L-lysinbelagte objektglas.For dewaxing, placere dias i en 65-graders Celsius ovn i to timer, efterfulgt af nedsænkning i dimethylbenzen i 15 minutter og iblødsætning i 100% xylen i 15 minutter, derefter rehydrere dias i en faldende ethanol nedsænkning serie. Til reparation af antigen skal du placere objektglassene i en antigenreparationsboks og lægge 300 milliliter citronsyrereparationsvæske til kassen. Varm kassen i en mikrobølgeovn ved høj effekt i to minutter, efterfulgt af opvarmning ved lav effekt for at opretholde kogning i seks minutter.Når objektglassene er afkølet til stuetemperatur, vaskes vævsprøverne med tre fem minutters 0,01 molar PBS vaskes i en roterende shaker ved stuetemperatur. For at eliminere den endogene peroxidase inkuberes objektglassene med 3%hydrogenperoxid i dobbeltdestilleret vand i 30 minutter i en våd kasse ved stuetemperatur. Ved inkubationens afslutning vaskes objektglassene som påvist, og der sættes en uspecifik binding på hver sektion med 100 mikroliter på 10 % gedeser i 39 minutter ved 37 grader Celsius.Dernæst mærke væv med 100 mikroliter af anti-ZWINT antistof pr dias ved fire grader Celsius natten over, efterfulgt af tre vasker i 0,01 kindtand PBS. Efter den sidste vask inkuberes objektglassene med et passende sekundært antistof i 30 minutter ved 37 grader Celsius efterfulgt af tre 0,01 molar PBS vasker. Efter den sidste vask tilsættes objektglassene til 300 mikroliter frisk DAB i 10 minutter efterfulgt af en 10-sekunders vask med vand fra hanen ved stuetemperatur.Tællere pletter væv med hæmatoxylin farvning opløsning i to minutter ved stuetemperatur, efterfulgt af vask i postevand i 15 minutter, derefter dehydrere vævet igen i stigende ethanol nedsænkning, efterfulgt af to 15-minutters nedsænkning i xylen ved stuetemperatur. Efter den sidste 100% ethanol nedsænkning monteres sektionerne med 15 mikroliter af en 5% xylen i neutral gummiopløsning og dæk hver vævsprøve med et dækglas. Ved automatisk scanning af sektionerne med hele diaset skal du først lade objektglassene tørre ved stuetemperatur i 12 timer for at udtørre vævsprøverne.Vælg derefter Brightfield manuelt i den automatiske scanner med hele dias, og indtast den manuelle scanningsgrænseflade. Revider navnet på diasene, og vælg en lagersti til billederne. Angiv scanningsområdet, og vælg scanningseksemplerne ved hjælp af indstillingen Brugersættærskler.Tærsklen er omkring 50 med en scanning-område ekspansion værdi på 200 mikrometer. Indstil scanningsfokusværdien, og vælg Automatisk fokus- og enkeltlagstilstand, indlæs derefter diasene på arbejdsstationen, og start den automatiske scanning. Når alle diasene er blevet scannet, skal du gemme billederne til senere analyse.Hvis du vil analysere billederne af sektionerne i lungevævet, skal du åbne den histopatologiske billedanalysesoftware og vælge Lokal computer for at åbne filen med scanningsdataene. Vælg det relevante zoomniveau, og brug Til/fra-farvejustering til at indstille farven til den optimale kontrast, og cirklen og navnd cirklen af interesse for hvert billede. Vælg derefter QC under plugins. Scenariegeneratoren dukker op.Vælg Density Quant, og juster registreringslinjen. Juster scoreniveauerne, indtil farveintensiteten i de cirkelinddene områder svarer til de oprindelige billeders, og gem og navn på modellen som en ny fil, anvend derefter modellen på andre dias, og vælg Valgt anmærkning for at lade softwaren automatisk beregne APE-scoren for de områder, der er af interesse for hvert billede. Hel-slide digital scanning af lungevæv dele af tumor og tilstødende ikke-tumor væv fra ikke-småcellet lungekræft prøver producerer digitale billeder af høj kvalitet.APE scores beregnet ud fra disse typer af lungekræft prøver er typisk betydeligt højere end dem, der bestemmes for de tilstødende ikke-kræft væv. Desuden bestemmes ZWINT-ekspressionsniveauerne i planocellulære karcinomvævssektioner ofte at være signifikant højere end dem, der måles i abnocarcinomvævsprøver. Mens du forsøger denne procedure, Det er vigtigt at huske at forberede med høj kvalitet af tumor eller tumor områder under fremstilling af patologisk scanning.Efter denne procedure kan der udføres andre metoder til mikroskopi for at besvare yderligere spørgsmål. Hverken eller anden metode til patologisk scanning. Efter denne teknik banede vejen for forskere inden for patologisk scanning for at udforske digital diagnostik i forskningsformål.Glem ikke, at arbejde med paraformaldehyd kan være yderst farligt og forholdsregler såsom masker bør altid tages, mens du udfører denne procedure.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

Ex Vivo Billeddannelse af hjemmehørende CD8 T-lymfocytter i menneskelige lunge Tumor skiver bruger konfokalmikroskopi

CD8 T cell are key players in the fight against cancer. In order for CD8 T cells to kill tumor cells they need to enter into the tumor, migrate within the ...

The Establishment of a Lung Colonization Assay for Circulating Tumor Cell Visualization in Lung Tissues

Etablering af en lunge kolonisering Assay for Cirkulerende Tumor Cell visualisering i lungevæv

Metastasis is the major cause of cancer death. The role of circulating tumor cells (CTCs) in promoting cancer metastasis, in which lung colonization by ...

Detection of a CDH1 Rare Transcript Variant in Fresh-frozen Gastric Cancer Tissues by Chip-based Digital PCR

Detection of a CDH1 Rare Transcript Variant in Fresh-frozen Gastric Cancer Tissues by Chip-based Digital PCR

Påvisning af en CDH1 sjældne udskrift Variant i frisk frosset gastrisk kræft væv af Chip-baserede digitale PCR

CDH1a, a non-canonical transcript of the CDH1 gene, has been found to be expressed in some gastric cancer (GC) cell lines, whereas it is absent in normal ...

Desthiobiotin-Streptavidin-Affinity Mediated Purification of RNA-Interacting Proteins in Mesothelioma Cells

Desthiobiotin-Streptavidin-affinitet medieret oprensning af RNA-interagere proteiner i Mesotheliom celler

The in vitro RNA-pulldown is still largely used in the first steps of protocols aimed at identifying RNA-binding proteins that recognize specific RNA ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

Elastisk farvning på paraffin-indlejrede slides af pT3N0M0 gastrisk Cancer væv

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Droplet Digital TRAP (ddTRAP): Adaptation of the Telomere Repeat Amplification Protocol to Droplet Digital Polymerase Chain Reaction

Droplet Digital TRAP ddTRAP: Adaptation of the Telomere Repeat Amplification Protocol to Droplet Digital Polymerase Chain Reaction

Dråbe digital TRAP (ddTRAP): tilpasning af telomere REPEAT forstærknings protokol til droplet digital polymerase kædereaktion

The telomere repeat amplification protocol (TRAP) is the most widely used assay to detect telomerase activity within a given a sample. The polymerase ...

Radiosensitivity of Cancer Stem Cells in Lung Cancer Cell Lines

Røntgen følsomhed af kræft stamceller i lungekræft cellelinjer

The presence of cancer stem cells (CSCs) has been associated with relapse or poor outcomes after radiotherapy. Studying radioresistant CSCs may provide ...

Preparation of Mitochondria from Ovarian Cancer Tissues and Control Ovarian Tissues for Quantitative Proteomics Analysis

Fremstilling af mitokondrier fra æggestokkene Cancer væv og kontrol ovarie væv til kvantitativ proteomics analyse

Ovarian cancer is a common gynecologic cancer with high mortality but unclear molecular mechanism. Most ovarian cancers are diagnosed in the advanced ...

Detection of Lung Tumor Progression in Mice by Ultrasound Imaging

Påvisning af lungetumorprogression hos mus ved ultralydsscanning

With ~1.6 million victims per year, lung cancer contributes tremendously to the worldwide burden of cancer. Lung cancer is partly driven by genetic ...

Pathological Analysis of Lung Metastasis Following Lateral Tail-Vein Injection of Tumor Cells

Patologisk analyse af lungemetasase Efter Lateral Hale-Vene Injektion af tumorceller

Metastasis, the primary cause of morbidity and mortality for most cancer patients, can be challenging to model preclinically in mice. Few spontaneous ...