Name: digital analysis of immunostaining of zw10 interacting protein in human lung tissues
Uploaded: 2019-05-01T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Digital Analysis of Immunostaining of ZW10 Interacting Protein in Human Lung Tissues at JoVE.com

Ce projet a été soutenu par la National Natural Foundation of China (No. 81500151, 81400121, 81270607, 81541027, et 81501352) et la Natural Foundation of Hubei Province (Chine) (No. 2017CFB631). Les auteurs expriment leur gratitude à Guo Qin, Chang Min, Li Hui, et leurs collègues de Wuhan Google Biological Technology Co., LTD pour leur soutien technique. Les auteurs remercient également Muhammad Jamal pour l'édition linguistique.

Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvées par le Comité d'éthique de l'hôpital Zhongnan de l'Université de Wuhan et l'hôpital Renmin de l'Université de Wuhan.
1. Préparation des diapositives IHC
<ol><li>Fixez l'échantillon de tissu pulmonaire en immergeant le fragment de tissu pulmonaire humain (environ 3 x 3 cm) dans 4 % de paraformaldéhyde dans de la saline tamponnée de phosphate (PBS) pendant 24 h à température ambiante (RT).</li>
	<li>Déshydrater le tissu en 8...

<ol>
	<li>Endo, H., Ikeda, K., Urano, T., Horie-Inoue, K., Inoue, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Terf/TRIM17+stimulates+degradation+of+kinetochore+protein+ZWINT+and+regulates+cell+proliferation.">Terf/TRIM17 stimulates degradation of kinetochore protein ZWINT and regulates cell proliferation.</a> The Journal of Biochemistry. 151 (2), 139-144 (2012).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Zwint-1+specifies+localization+of+Zeste+White+10+to+kinetochores+and+is+essential+for+mitotic+checkpoint+signaling.">Human Zwint-1 specifies localization of Zeste White 10 to kinetochores and is essential for mitotic checkpoint signaling.</a> Journal of Biological Chemistry. 279 (52), 54590-54598 (2004).</li><li>Lin, Y. T., Chen, Y., Wu, G., Lee, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hec1+sequentially+recruits+Zwint-1+and+ZW10+to+kinetochores+for+faithful+chromosome+segregation+and+spindle+checkpoint+control.">Hec1 sequentially recruits Zwint-1 and ZW10 to kinetochores for faithful chromosome segregation and spindle checkpoint control.</a> Oncogene. 25 (52), 6901-6914 (2006).</li><li>Ying, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+Zwint+predicts+poor+prognosis+and+promotes+the+proliferation+of+hepatocellular+carcinoma+by+regulating+cell-cycle-related+proteins.">Overexpression of Zwint predicts poor prognosis and promotes the proliferation of hepatocellular carcinoma by regulating cell-cycle-related proteins.</a> OncoTargets and Therapy. 11, 689-702 (2018).</li><li>Yuan, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinformatic+analysis+of+prognostic+value+of+ZW10+interacting+protein+in+lung+cancer.">Bioinformatic analysis of prognostic value of ZW10 interacting protein in lung cancer.</a> OncoTargets and Therapy. 11, 1683-1695 (2018).</li><li>Higgins, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+and+challenges+of+digital+pathology+and+whole+slide+imaging.">Applications and challenges of digital pathology and whole slide imaging.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 90 (5), 341-347 (2015).</li><li>Webster, J. D., Dunstan, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+and+automated+image+analysis:+considerations+and+opportunities+in+the+practice+of+pathology.">Whole-slide imaging and automated image analysis: considerations and opportunities in the practice of pathology.</a> Veterinary Pathology. 51 (1), 211-223 (2014).</li><li>Al-Janabi, S., Huisman, A., van Diest, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology:+current+status+and+future+perspectives.">Digital pathology: current status and future perspectives.</a> Histopathology. 61 (1), 1-9 (2012).</li><li>Bonomi, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictive+biomarkers+for+response+to+EGFR-directed+monoclonal+antibodies+for+advanced+squamous+cell+lung+cancer.">Predictive biomarkers for response to EGFR-directed monoclonal antibodies for advanced squamous cell lung cancer.</a> Annals of Oncology. 29 (8), 1701-1709 (2018).</li><li>Villalobos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ERCC1+assessment+in+upfront+treatment+with+and+without+cisplatin-based+chemotherapy+in+stage+IIIB/IV+non-squamous+non-small+cell.">ERCC1 assessment in upfront treatment with and without cisplatin-based chemotherapy in stage IIIB/IV non-squamous non-small cell.</a> Medical Oncology. 35 (7), 106 (2018).</li><li>Griffin, J., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+clinical+use:+where+are+we+now+and+what+is+holding+us+back?.">Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back?.</a> Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).</li><li>Huisman, A., Looijen, A., van den Brink, S. M., van Diest, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+a+fully+digital+pathology+slide+archive+by+high-volume+tissue+slide+scanning.">Creation of a fully digital pathology slide archive by high-volume tissue slide scanning.</a> Human Pathology. 41 (5), 751-775 (2010).</li><li>Gray, A., Wright, A., Jackson, P., Hale, M., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+histochemical+stains+using+whole+slide+imaging:+development+of+a+method+and+demonstration+of+its+usefulness+in+laboratory+quality+control.">Quantification of histochemical stains using whole slide imaging: development of a method and demonstration of its usefulness in laboratory quality control.</a> Journal of Clinical Pathology. 68 (3), 192-199 (2015).</li><li>Hofman, F. M., Taylor, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemistry.">Immunohistochemistry.</a> Current Protocols in Immunology. 103, (2013).</li><li>Ramos-Vara, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+and+Methods+of+Immunohistochemistry.">Principles and Methods of Immunohistochemistry.</a> Methods in Molecular Biology. 1641, 115-128 (2017).</li><li>Otali, D., Fredenburgh, J., Oelschlager, D. K., Grizzle, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standard+tissue+as+a+control+for+histochemical+and+immunohistochemical+staining.">A standard tissue as a control for histochemical and immunohistochemical staining.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 91 (5), 309-326 (2016).</li><li>Clarke, E. L., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colour+in+digital+pathology:+a+review.">Colour in digital pathology: a review.</a> Histopathology. 70 (2), 153-163 (2017).</li><li>Potts, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+drug+discovery+and+development:+multisite+integration.">Digital pathology in drug discovery and development: multisite integration.</a> Drug Discovery Today. 14 (19-20), 935-941 (2009).</li><li>Tabata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+at+primary+pathological+diagnosis:+Validation+of+whole-slide+imaging-based+primary+pathological+diagnosis+at+twelve+Japanese+academic+institutes.">Whole-slide imaging at primary pathological diagnosis: Validation of whole-slide imaging-based primary pathological diagnosis at twelve Japanese academic institutes.</a> Pathology International. 67 (11), 547-554 (2017).</li><li>Saco, A., Bombi, J. A., Garcia, A., Ram&#237;rez, J., Ordi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Status+of+Whole-Slide+Imaging+in+Education.">Current Status of Whole-Slide Imaging in Education.</a> Pathobiology. 83 (2-3), 79-88 (2016).</li><li>Griffin, J., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+clinical+use:+where+are+we+now+and+what+is+holding+us+back?.">Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back?.</a> Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).</li></ol>

La numérisation de diapositives entières devient un sujet brûlant pour sa numérisation robuste et la production d'images de haute qualité à des fins cliniques et de recherche11,12,13. Les images peuvent être produites par des microscopes à balayage en quelques minutes11,12,13. En appliquant cette méthodologie, nous avons obtenu...

ZW10 protéine d'interaction (ZWINT) est un composant nécessaire du complexe kinetochore qui est impliqué dans le point de contrôle de fuseau mitotique1,2,3. Il a été rapporté que l'épuisement de ZWINT conduit à la ségrégation prématurée aberrante de chromosome1,2,3. Des études récentes ont suggéré que ZWINT est impliqué dans la pathogénie des tumeurs multiples en favorisant la prolifération des cellules tumorales4,5. Nous avons précédemment rapporté la surexpression de ZWINT dans le cancer du poumon5. Il a été largement admis que l'analyse des diapositives par les pathologistes utilisant CLM est longue et non quantitative6,7,8. En outre, la détérioration des glissières en verre stockées pourrait rendre impossible de rétracter les diapositives précédemment créées. La nouvelle méthode d'imagerie numérique à glissière (WSI) par ordinateur peut surmonter ces limites6,7,8.
À cette fin, nous décrivons une méthodologie de l'immunostaining de ZWINT dans les tissus humains de cancer du poumon, couplée à la numérisation numérique de glissement entier et à l'analyse d'image basée sur le logiciel. Le principal avantage de cette méthodologie est la production de résultats concordants avec CLM. Cette technologie peut être largement utilisée dans les domaines de la notation pathologique de la coloration de l'hématoxylin-éosine (H et E) et IHC, de la fluorescence in situ hybridation (FISH), des microréseaux tissulaires (TMA) et de la découverte et du développement de médicaments.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Pannoramic MIDI</td>
			<td>3D HISTECH</td>
			<td>Cat: PMIDI-040709</td>
			<td>An automated digital slide scanner with a remarkable feature set :12-slide capacity, fluorescence scanning, and many more.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QuantCenter</td>
			<td>3D HISTECH</td>
			<td>Downloaded from the official website of the company</td>
			<td>The framework for 3DHISTCH&#39;s image analysis applications.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA RM2235</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>Cat: 14050038604</td>
			<td>The enhanced precision of the new accessories will add convenience to block to knife approach as well as specimen orientation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-human Anti-ZWINT antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat: ab197794</td>
			<td>Immunohistochemical analysis of ZWINT in human lung tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-rabbit secondary antibody</td>
			<td>Wuhan Goodbio Technology</td>
			<td>Cat:GB23303-1</td>
			<td>Secondary antibody for IHC staining.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline</td>
			<td>Wuhan Goodbio Technology</td>
			<td>Cat:G0002</td>
			<td>A solution containing a phosphate buffer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OLYMPUS CX23</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td>Cat:6M87620</td>
			<td>Microscope for detection of H&#38;E or IHC slides.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethylbenzene</td>
			<td>Shanghai Lingfeng Chemical Reagent</td>
			<td>Cat:1330-20-7</td>
			<td>A colorless, flammable fluid used as a solvent and clarifying agent in the preparation of tissue sections for microscopic study.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Staining Solution</td>
			<td>Wuhan Servicebio technology</td>
			<td>Cat:G1039</td>
			<td>It is commonly used for histologic studies, oftern colors the nuclei of cells blue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>Baitg</td>
			<td>Cat:2005-64-5</td>
			<td>It is a polysorbate-type nonionic surfactant formed by the ethoxylation of sorbitan before the addition of lauric acid. It is used as a deterent and emulsifier in pharmacological applications.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid repair liquid</td>
			<td>Wuhan Servicebio technology</td>
			<td>Cat:G1202</td>
			<td>Is is used to repair antigen after fixation during IHC procedure.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA ASP200s</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14048043626</td>
			<td>It was designed for routine and research histopathology of up to 200 cassettes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA Arcadia H</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14039354103</td>
			<td>It is a heated paraffin embedding station and allows for simple operation and precise control, resulting in improved quality, a smooth workflow and reliability.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA Arcadia C</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14039354102</td>
			<td>It is a cold plate holding more than 60/65 cassettes on its large working surface. It was designed with an environment adaptive control module to make sure the operating temperature is always stabilized at -6&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaseViewer Software</td>
			<td>3DHISTECH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

digital analysis of immunostaining of zw10 interacting protein in human lung tissues

Le but de cette étude est d'introduire une méthodologie de l'immunostaining des tissus pulmonaires humains, suivie d'une analyse numérique et d'une analyse d'images. La numérisation numérique est un moyen rapide de numériser une pile de diapositives et de produire des images numériques de haute qualité. Il peut produire des résultats concordants avec la microscopie lumineuse conventionnelle (CLM) par des pathologistes. En outre, la disponibilité d'images numériques permet que la même diapositive peut être observée simultanément par plusieurs personnes. En outre, les images numériques des diapositives peuvent être stockées dans une base de données, ce qui signifie que la détérioration à long terme des diapositives en verre est évitée. Les limites de cette technique sont les suivantes. Tout d'abord, il a besoin de tissus préparés de haute qualité et l'immunohistochimie originale (IHC) glisse sans aucun dommage ou résidu de scellant excédentaire. Deuxièmement, les secteurs de tumeur ou nontumor devraient être spécifiés par les pathologistes expérimentés avant l'analyse utilisant le logiciel, afin d'éviter n'importe quelle confusion au sujet de la tumeur ou des secteurs nontumorpendants pendant la notation. Troisièmement, l'opérateur doit contrôler la reproduction des couleurs tout au long du processus de numérisation dans l'imagerie de diapositives entières.

Nous avons mesuré les niveaux d'expression de ZWINT dans 28 paires de spécimens de cancer du poumon de non-petite cellule (NSCLC) (tumeur et tissus nontumor adjacents), y compris 14 carcinomes squamous de cellules (SCC) et 14 adénocarcinomes (ADCs), par IHC. La numérisation numérique complète des diapositives a fourni des images numériques de haute qualité (Figure 1A). Les résultats ont montré que le score H du cancer du poumon était signi...

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Digital Analysis of Immunostaining of ZW10 Interacting Protein in Human Lung Tissues

Analyse numérique de l'immunostaining de ZW10 Interagir les protéines dans les tissus pulmonaires humains

La protéine interagissante ZW10 (ZWINT) participe au point de contrôle mitotique de fuseau et à la pathogénie du carcinome. Ici, nous introduisons une méthodologie de l'immunostaining de ZWINT dans les tissus humains de cancer du poumon, suivie de la numérisation numérique des diapositives entières et de l'analyse d'image. Cette méthodologie peut fournir des images numériques de haute qualité et des résultats fiables.

The purpose of this study is to introduce a methodology of the immunostaining of human lung tissues, followed by whole-slide digital scanning and image ...

Cette méthode peut aider à répondre aux questions clés dans le pathologique et l’immunohistochimie. Le principal avantage de cette technique est que plus rapide et qui produit des médias numériques de haute qualité. Commencez par fixer un échantillon de tissu de kung de trois par trois centimètres dans 4%paraformaldéhyde pendant 24 heures à température ambiante.Le lendemain, déshydrater le tissu dans des immersions ascendantes d’éthanol à température ambiante, suivie de trois immersions en 100% xylène pendant 20 minutes par traitement. Après la dernière immersion de xylène, placez le tissu dans la paraffine de 63 degrés Celsius pendant 30 minutes, suivi d’une deuxième immersion de 45 minutes dans la paraffine fraîche de 63 degrés Celsius, puis changez la paraffine une fois de plus pour une incubation finale d’une heure. Lorsque la paraffine s’est refroidie, utilisez un microtome rotatif pour acquérir cinq sections micrométriques d’épaisseur de l’échantillon de tissu intégré à la paraffine, capturant les sections sur des glissières poly-L-lysine de 20 microgrammes par millilitre.Pour le déwaxing, placez les glissières dans un four à 65 degrés Celsius pendant deux heures, suivies d’une immersion dans le diméthylbenzene pendant 15 minutes et de trempage à 100% xylène pendant 15 minutes, puis réhydratez les diapositives dans une série descendante d’immersion d’éthanol. Pour la réparation des antigènes, placez les glissières dans une boîte antigène-réparation et ajoutez 300 millilitres de liquide de réparation d’acide citrique à la boîte. Chauffer la boîte dans un four à micro-ondes à puissance élevée pendant deux minutes, puis chauffer à basse puissance pour maintenir l’ébullition pendant six minutes.Lorsque les glissières ont refroidi à température ambiante, lavez les échantillons de tissus avec trois lavages de 0,01 molaire PBS de cinq minutes dans un shaker rotatif à température ambiante. Pour éliminer la peroxyde endogène, incuber les glissières avec 3% de peroxyde d’hydrogène dans de l’eau double-distillée pendant 30 minutes dans une boîte humide à température ambiante. À la fin de l’incubation, lavez les glissières comme démontré et branchez toute liaison non spécifique sur chaque section avec 100 microlitres de sérum de chèvre à 10 % pendant 39 minutes à 37 degrés Celsius.Ensuite, étiquetez les tissus avec 100 microlitres d’anticorps anti-ZWINT par glissière à quatre degrés Celsius pendant la nuit, suivi de trois lavages en 0,01 molaire PBS. Après le dernier lavage, incuber les toboggans avec un anticorps secondaire approprié pendant 30 minutes à 37 degrés Celsius, suivi de trois lavages de 0,01 molaire PBS. Après le dernier lavage, ajouter les toboggans à 300 microlitres de DAB frais pendant 10 minutes, suivi d’un lavage de 10 secondes avec de l’eau du robinet à température ambiante.Les compteurs tachent les tissus avec la solution de coloration d’hématoxyline pendant deux minutes à température ambiante, suivis du lavage dans l’eau du robinet pendant 15 minutes, puis déshydratent à nouveau le tissu dans des immersions ascendantes d’éthanol, suivis de deux immersions de 15 minutes dans le xylène à température ambiante. Après la dernière immersion 100% éthanol, monter les sections avec 15 microlitres d’un xylène de 5% dans la solution de gomme neutre et couvrir chaque échantillon de tissu avec un verre de couverture. Pour la numérisation automatique des sections à glissière entière, laissez d’abord sécher les glissières à température ambiante pendant 12 heures pour dessicquer les échantillons de tissus.Ensuite, dans le scanner automatique à glissière entière, sélectionnez Brightfield manuellement et entrez l’interface de numérisation manuelle. Révisons le nom des diapositives et sélectionnez un chemin de stockage pour les images. Définissez la zone de numérisation et sélectionnez les échantillons d’analyse à l’aide de l’option Seuils définis par l’utilisateur.Le seuil est d’environ 50 avec une valeur d’expansion de la zone de balayage de 200 micromètres. Définissez la valeur de mise au point de balayage et sélectionnez le mode Mise au point automatique et single layer, puis chargez les diapositives sur le poste de travail et démarrez la numérisation automatique. Lorsque toutes les diapositives ont été numérisées, enregistrez les images pour une analyse ultérieure.Pour analyser les images des sections des tissus pulmonaires, ouvrez le logiciel histopathologique d’analyse d’image et sélectionnez Local Computer pour ouvrir le fichier avec les données de numérisation. Sélectionnez le niveau de zoom approprié et utilisez Toggle Color Adjust pour définir la couleur au contraste optimal, puis encerclez et nommez les régions d’intérêt sur chaque image. Ensuite, sous plugins, sélectionnez QC. Le scenario builder apparaîtra.Sélectionnez Density Quant et ajustez la barre de détection. Ajustez les niveaux de score jusqu’à ce que l’intensité de coloration des zones encerclées soit similaire à celle des images originales, et stockez et nommez le modèle comme un nouveau fichier, puis appliquez le modèle à d’autres diapositives et sélectionnez Annotation sélectionnée pour laisser le logiciel calculer automatiquement le score APE pour les régions d’intérêt pour chaque image. Le balayage numérique de glissière entière des sections de tissu de poumon de tumeur et des tissus non tumoraux adjacents des spécimens non-petites cellules de cancer de poumon produit des images numériques d’une qualité élevée.Les scores des APE calculés à partir de ces types d’échantillons de cancer du poumon sont généralement significativement plus élevés que ceux déterminés pour les tissus non cancéreux adjacents. En outre, les niveaux d’expression de ZWINT dans les sections squamous-cellule de tissu de carcinome sont fréquemment déterminés pour être sensiblement plus élevés que ceux mesurés dans des échantillons de tissu d’abnocarcinome. Tout en essayant cette procédure, il est important de se rappeler de se préparer avec la haute qualité des secteurs de tumeur ou de tumeur pendant le balayage pathologique.Suite à cette procédure, d’autres méthodes de la microscopie peuvent être effectuées afin de répondre à d’autres questions. Ni la méthode ou la méthode différente pour la numérisation pathologique. Après cette technique a ouvert la voie pour les chercheurs dans le domaine de la numérisation pathologique pour explorer le diagnostic numérique dans le but de recherche.N’oubliez pas que travailler avec du paraformaldéhyde peut être extrêmement dangereux et des précautions telles que des masques doivent toujours être prises lors de l’exécution de cette procédure.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

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CD8 T cell are key players in the fight against cancer. In order for CD8 T cells to kill tumor cells they need to enter into the tumor, migrate within the ...

Recherche

Recherche en cancérologie

The Establishment of a Lung Colonization Assay for Circulating Tumor Cell Visualization in Lung Tissues

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Detection of a CDH1 Rare Transcript Variant in Fresh-frozen Gastric Cancer Tissues by Chip-based Digital PCR

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Détection d’une variante de transcription Rare CDH1 dans les tissus frais congelés de Cancer gastrique par puce numérique PCR

CDH1a, a non-canonical transcript of the CDH1 gene, has been found to be expressed in some gastric cancer (GC) cell lines, whereas it is absent in normal ...

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