Name: digital analysis of immunostaining of zw10 interacting protein in human lung tissues
Uploaded: 2019-05-01T13:00:00
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このプロジェクトは、中国国家自然財団(No. 81500151、81400121、81270607、81541027、81501352)と湖北省自然財団(2017CFB631号)によって支援されました。著者らは、グオ・チン、チャン・ミン、李ホイ、武漢グーグル・バイオリティ・テクノロジー社の同僚たちに対し、技術サポートに感謝の意を表明した。著者はまた、言語編集のためのムハンマド・ジャマールに感謝します。

ここに記載されているすべての方法は、武漢大学の中南病院と武漢大学の人民病院の倫理委員会によって承認されています.
1. IHCスライドの作成
<ol><li>リン酸緩衝生理食べ物(PBS)に4%のパラホルムアルデヒドにヒト肺組織断片(約3x3cm)を室温(RT)で24時間浸漬して肺組織サンプルを固定する。</li>
	<li>80%、95%、100%エタノールを室温でそれぞれ15分、20分、20分間脱水します。最...

<ol>
	<li>Endo, H., Ikeda, K., Urano, T., Horie-Inoue, K., Inoue, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Terf/TRIM17+stimulates+degradation+of+kinetochore+protein+ZWINT+and+regulates+cell+proliferation.">Terf/TRIM17 stimulates degradation of kinetochore protein ZWINT and regulates cell proliferation.</a> The Journal of Biochemistry. 151 (2), 139-144 (2012).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Zwint-1+specifies+localization+of+Zeste+White+10+to+kinetochores+and+is+essential+for+mitotic+checkpoint+signaling.">Human Zwint-1 specifies localization of Zeste White 10 to kinetochores and is essential for mitotic checkpoint signaling.</a> Journal of Biological Chemistry. 279 (52), 54590-54598 (2004).</li><li>Lin, Y. T., Chen, Y., Wu, G., Lee, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hec1+sequentially+recruits+Zwint-1+and+ZW10+to+kinetochores+for+faithful+chromosome+segregation+and+spindle+checkpoint+control.">Hec1 sequentially recruits Zwint-1 and ZW10 to kinetochores for faithful chromosome segregation and spindle checkpoint control.</a> Oncogene. 25 (52), 6901-6914 (2006).</li><li>Ying, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+Zwint+predicts+poor+prognosis+and+promotes+the+proliferation+of+hepatocellular+carcinoma+by+regulating+cell-cycle-related+proteins.">Overexpression of Zwint predicts poor prognosis and promotes the proliferation of hepatocellular carcinoma by regulating cell-cycle-related proteins.</a> OncoTargets and Therapy. 11, 689-702 (2018).</li><li>Yuan, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinformatic+analysis+of+prognostic+value+of+ZW10+interacting+protein+in+lung+cancer.">Bioinformatic analysis of prognostic value of ZW10 interacting protein in lung cancer.</a> OncoTargets and Therapy. 11, 1683-1695 (2018).</li><li>Higgins, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applications+and+challenges+of+digital+pathology+and+whole+slide+imaging.">Applications and challenges of digital pathology and whole slide imaging.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 90 (5), 341-347 (2015).</li><li>Webster, J. D., Dunstan, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+and+automated+image+analysis:+considerations+and+opportunities+in+the+practice+of+pathology.">Whole-slide imaging and automated image analysis: considerations and opportunities in the practice of pathology.</a> Veterinary Pathology. 51 (1), 211-223 (2014).</li><li>Al-Janabi, S., Huisman, A., van Diest, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology:+current+status+and+future+perspectives.">Digital pathology: current status and future perspectives.</a> Histopathology. 61 (1), 1-9 (2012).</li><li>Bonomi, P. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictive+biomarkers+for+response+to+EGFR-directed+monoclonal+antibodies+for+advanced+squamous+cell+lung+cancer.">Predictive biomarkers for response to EGFR-directed monoclonal antibodies for advanced squamous cell lung cancer.</a> Annals of Oncology. 29 (8), 1701-1709 (2018).</li><li>Villalobos, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ERCC1+assessment+in+upfront+treatment+with+and+without+cisplatin-based+chemotherapy+in+stage+IIIB/IV+non-squamous+non-small+cell.">ERCC1 assessment in upfront treatment with and without cisplatin-based chemotherapy in stage IIIB/IV non-squamous non-small cell.</a> Medical Oncology. 35 (7), 106 (2018).</li><li>Griffin, J., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+clinical+use:+where+are+we+now+and+what+is+holding+us+back?.">Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back?.</a> Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).</li><li>Huisman, A., Looijen, A., van den Brink, S. M., van Diest, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+a+fully+digital+pathology+slide+archive+by+high-volume+tissue+slide+scanning.">Creation of a fully digital pathology slide archive by high-volume tissue slide scanning.</a> Human Pathology. 41 (5), 751-775 (2010).</li><li>Gray, A., Wright, A., Jackson, P., Hale, M., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+histochemical+stains+using+whole+slide+imaging:+development+of+a+method+and+demonstration+of+its+usefulness+in+laboratory+quality+control.">Quantification of histochemical stains using whole slide imaging: development of a method and demonstration of its usefulness in laboratory quality control.</a> Journal of Clinical Pathology. 68 (3), 192-199 (2015).</li><li>Hofman, F. M., Taylor, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemistry.">Immunohistochemistry.</a> Current Protocols in Immunology. 103, (2013).</li><li>Ramos-Vara, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+and+Methods+of+Immunohistochemistry.">Principles and Methods of Immunohistochemistry.</a> Methods in Molecular Biology. 1641, 115-128 (2017).</li><li>Otali, D., Fredenburgh, J., Oelschlager, D. K., Grizzle, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+standard+tissue+as+a+control+for+histochemical+and+immunohistochemical+staining.">A standard tissue as a control for histochemical and immunohistochemical staining.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 91 (5), 309-326 (2016).</li><li>Clarke, E. L., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colour+in+digital+pathology:+a+review.">Colour in digital pathology: a review.</a> Histopathology. 70 (2), 153-163 (2017).</li><li>Potts, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+drug+discovery+and+development:+multisite+integration.">Digital pathology in drug discovery and development: multisite integration.</a> Drug Discovery Today. 14 (19-20), 935-941 (2009).</li><li>Tabata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+at+primary+pathological+diagnosis:+Validation+of+whole-slide+imaging-based+primary+pathological+diagnosis+at+twelve+Japanese+academic+institutes.">Whole-slide imaging at primary pathological diagnosis: Validation of whole-slide imaging-based primary pathological diagnosis at twelve Japanese academic institutes.</a> Pathology International. 67 (11), 547-554 (2017).</li><li>Saco, A., Bombi, J. A., Garcia, A., Ram&#237;rez, J., Ordi, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Status+of+Whole-Slide+Imaging+in+Education.">Current Status of Whole-Slide Imaging in Education.</a> Pathobiology. 83 (2-3), 79-88 (2016).</li><li>Griffin, J., Treanor, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Digital+pathology+in+clinical+use:+where+are+we+now+and+what+is+holding+us+back?.">Digital pathology in clinical use: where are we now and what is holding us back?.</a> Histopathology. 70 (1), 134-145 (2017).</li></ol>

全体スライドスキャンは、臨床および研究目的のためのその堅牢なスキャンと高品質の画像の生産のためのホットな話題になりつつあります11,12,13.画像は分11、12、13の分以内にスライドスキャン顕微鏡によって作り出すことができる。この方法論を応?...

ZW10相互作用タンパク質(ZWINT)は、有糸性スピンドルチェックポイント1、2、3に関与するキネトコレ複合体の必要な成分である。ZWINTの枯渇は異常な早期染色体分離1、2、3につながることが報告されている。最近の研究は、ZWINTが腫瘍細胞4、5の増殖を促進することによって複数の腫瘍の病因に関与していることを示唆している。我々は以前に肺癌5におけるZWINTの過剰発現を報告した。CLMを用いる病理学者によるスライドの分析は時間がかかり、定量的な6、7、8ではないことが広く受け入れられている。また、保存されたガラススライドの劣化は、以前に作成したスライドを撤回することが不可能になる場合があります。コンピュータベースのデジタル全スライドイメージング(WSI)の新しい方法は、これらの制限を克服することができます 6,7,8.
この目的のために、ヒト肺癌組織におけるZWINTの免疫染色の方法論を、スライド全体のデジタルスキャンとソフトウェアベースの画像解析と組み合わせて説明する。この方法論の主な利点は、CLM との一致した結果の生産です。この技術は、ヘマトキシリン-エオシン染色(H&E)およびIHC、その場ハイブリダイゼーションにおける蛍光(FISH)、組織マイクロアレイ(TMA)、および創薬および開発の病理学的スコアリングの分野で広く使用することができる。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Pannoramic MIDI</td>
			<td>3D HISTECH</td>
			<td>Cat: PMIDI-040709</td>
			<td>An automated digital slide scanner with a remarkable feature set :12-slide capacity, fluorescence scanning, and many more.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QuantCenter</td>
			<td>3D HISTECH</td>
			<td>Downloaded from the official website of the company</td>
			<td>The framework for 3DHISTCH&#39;s image analysis applications.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA RM2235</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>Cat: 14050038604</td>
			<td>The enhanced precision of the new accessories will add convenience to block to knife approach as well as specimen orientation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-human Anti-ZWINT antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>Cat: ab197794</td>
			<td>Immunohistochemical analysis of ZWINT in human lung tissue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-rabbit secondary antibody</td>
			<td>Wuhan Goodbio Technology</td>
			<td>Cat:GB23303-1</td>
			<td>Secondary antibody for IHC staining.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline</td>
			<td>Wuhan Goodbio Technology</td>
			<td>Cat:G0002</td>
			<td>A solution containing a phosphate buffer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OLYMPUS CX23</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td>Cat:6M87620</td>
			<td>Microscope for detection of H&#38;E or IHC slides.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethylbenzene</td>
			<td>Shanghai Lingfeng Chemical Reagent</td>
			<td>Cat:1330-20-7</td>
			<td>A colorless, flammable fluid used as a solvent and clarifying agent in the preparation of tissue sections for microscopic study.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin Staining Solution</td>
			<td>Wuhan Servicebio technology</td>
			<td>Cat:G1039</td>
			<td>It is commonly used for histologic studies, oftern colors the nuclei of cells blue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>Baitg</td>
			<td>Cat:2005-64-5</td>
			<td>It is a polysorbate-type nonionic surfactant formed by the ethoxylation of sorbitan before the addition of lauric acid. It is used as a deterent and emulsifier in pharmacological applications.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid repair liquid</td>
			<td>Wuhan Servicebio technology</td>
			<td>Cat:G1202</td>
			<td>Is is used to repair antigen after fixation during IHC procedure.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA ASP200s</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14048043626</td>
			<td>It was designed for routine and research histopathology of up to 200 cassettes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA Arcadia H</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14039354103</td>
			<td>It is a heated paraffin embedding station and allows for simple operation and precise control, resulting in improved quality, a smooth workflow and reliability.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA Arcadia C</td>
			<td>Leica</td>
			<td>Cat: 14039354102</td>
			<td>It is a cold plate holding more than 60/65 cassettes on its large working surface. It was designed with an environment adaptive control module to make sure the operating temperature is always stabilized at -6&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaseViewer Software</td>
			<td>3DHISTECH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

digital analysis of immunostaining of zw10 interacting protein in human lung tissues

本研究の目的は、ヒト肺組織の免疫染色の方法論を導入し、その後にスライド全体のデジタルスキャンと画像解析を行うことを目的とする。デジタルスキャンは、スライドのスタックをスキャンし、高品質でデジタル画像を生成するための迅速な方法です。それは病理学者によって従来の軽い顕微鏡ー(CLM)と一致した結果を作り出すことができる。さらに、デジタル画像の可用性により、同じスライドを複数の人が同時に観察することが可能になります。また、スライドのデジタル画像をデータベースに保存できるため、ガラススライドの長期的な劣化を回避できます。この手法の制限事項は次のとおりです。まず、それは良質の準備されたティッシュおよび元の免疫組織化学(IHC)の損傷または余分なシーラント残渣なしで滑る必要がある。第二に、腫瘍または非腫瘍領域は、スコアリング中に腫瘍または非腫瘍領域に関する混乱を避けるために、ソフトウェアを使用して分析する前に経験豊富な病理学者によって指定されるべきである。第三に、オペレータは、全スライドイメージングにおけるデジタル化プロセス全体の色再現を制御する必要があります。

ZWINTの発現レベルは、14の扁平上皮癌(ScC)および14の腺癌(ADC)を含む28組の非小細胞肺癌(NSCLC)検体(腫瘍および隣接する非腫瘍組織)で、IHCによって測定された。スライドの全スライドデジタルスキャンは、高品質のデジタル画像を提供しました(図1A)。その結果、肺癌のHスコアは、隣接する非癌組織(P< 0.0001、両尾t-test)よりも有意に高かった(<strong cla...

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Digital Analysis of Immunostaining of ZW10 Interacting Protein in Human Lung Tissues

ヒト肺組織におけるZW10相互作用タンパク質の免疫染色のデジタル解析

ZW10相互作用タンパク質(ZWINT)は、人工スピンドルチェックポイントおよび癌の病因に関与する。ここでは、ヒト肺癌組織におけるZWINTの免疫染色の方法論を紹介し、続いてスライド全体のデジタルスキャンと画像解析を行う。この方法論は、高品質のデジタル画像と信頼性の高い結果を提供することができます。

The purpose of this study is to introduce a methodology of the immunostaining of human lung tissues, followed by whole-slide digital scanning and image ...

この方法は、病理学的および免疫組織化学における重要な質問に答える助けとなる。この技術の主な利点は、十分に速く、高品質のデジタルメディアを生成することです。室温で24時間4%パラホルムアルデヒドに3〜3センチメートルのカン組織サンプルを固定することから始めます。翌日、室温でエタノール浸漬を上にして組織を脱水し、その後100%キシレンに3回浸漬して1回の処理を20分間行う。最後のキシレン浸漬の後、組織を63°Cパラフィンに30分間入れ、続いて新鮮な63°Cパラフィンに2回目の45分浸漬を行い、パラフィンをもう一度交換して最後の1時間のインキュベーションを行います。パラフィンが冷却されたら、ロータリーミクロトームを使用してパラフィン埋め込み組織サンプルの5マイクロメートル厚いセクションを取得し、20マイクログラム/ミリリットルポリL-リジンコーティングスライド上のセクションをキャプチャします。脱蝋の場合は、スライドを65度の摂氏オーブンに2時間置き、続いてジメチルベンゼンを15分間浸漬し、100%キシレンに15分間浸し、降順エタノール浸漬シリーズでスライドを水分補給します。抗原修復のために、スライドを抗原修復ボックスに入れ、300ミリリットルのクエン酸修復液を箱に加えます。箱を電子レンジで2分間高火で加熱し、続いて低火で加熱して6分間沸騰させます。スライドが室温まで冷却されたら、室温で回転式シェーカーで3つの5分0.01モルPBS洗浄で組織サンプルを洗浄します。内因性ペルオキシダーゼを排除するために、室温で湿った箱に30分間二重蒸留水で3%過酸化水素でスライドをインキュベートします。インキュベーションの最後に、示されているようにスライドを洗浄し、10%ヤギ血清の100マイクロリットルを摂氏37度で39分間各セクションに非特異的結合を差し込みます。次に、一晩で4°Cでスライドあたり100マイクロリットルの抗ZWINT抗体で組織にラベルを付け、続いて0.01モルPBSで3回のスリングを行います。最後の洗浄後、適切な二次抗体を使用して適切な二次抗体を30分間摂氏37度でインキュベートし、続いて0.01モルPBS洗浄を3回行います。最後の洗浄の後、スライドを300マイクロリットルの新鮮なDABに10分間加え、続いて室温で水道水で10秒間洗浄します。カウンターは、室温で2分間ヘマトキシリン染色溶液で組織を染色し、続いて水道水で15分間洗浄し、次に再び上昇エタノール浸漬で組織を脱水し、続いて室温でキシレンに2つの15分間浸漬します。最後の100%エタノール浸漬後、中性ガム溶液中の5%キシレンの15マイクロリットルでセクションを取り付け、カバーガラスで各組織サンプルをカバーします。セクションの自動全スライドスキャンの場合、まずスライドが室温で12時間乾燥して組織サンプルを乾燥させます。次に、自動スライドスキャナーで、手動でBrightfieldを選択し、手動スキャンインターフェースを入力します。スライドの名前を変更し、画像の保存場所を選択します。スキャン領域を設定し、ユーザー設定のしきい値オプションを使用してスキャンサンプルを選択します。しきい値は約50で、スキャン領域拡張値は200マイクロメートルです。スキャンフォーカス値を設定し、[自動フォーカスと単層モード]を選択し、スライドをワークステーションにロードして自動スキャンを開始します。すべてのスライドをスキャンしたら、後で分析するために画像を保存します。肺組織切片の画像を解析するには、組織病理学的画像解析ソフトウェアを開き、ローカルコンピュータを選択してスキャンデータを含むファイルを開きます。適切なズームレベルを選択し、[色調整の切り替え]を使用して色を最適なコントラストに設定し、各画像の対象領域を円で囲んで名前を付けます。次に、プラグインの下で、QCを選択します。シナリオビルダーがポップアップ表示されます。密度クオントを選択し、検出バーを調整します。円の領域の染色強度が元の画像と類似するまでスコアレベルを調整し、モデルを新しいファイルとして保存して名前を付け、モデルを他のスライドに適用して[選択された注釈]を選択して、各画像の対象領域の APE スコアを自動的に計算します。腫瘍の肺組織切片の全スライドデジタルスキャンと非小細胞肺癌検体からの隣接する非腫瘍組織のデジタルスキャンは、高品質のデジタル画像を生成する。これらのタイプの肺癌サンプルから計算されたAPEスコアは、典型的には、隣接する非癌組織について決定されたものよりも有意に高い。さらに、扁平上皮癌組織切片におけるZWINT発現レベルは、しばしば、アブノ癌組織サンプルで測定されたものよりも有意に高いと判断される。この手順を試みる間、病理学的スキャンを行う際に腫瘍または腫瘍領域の高品質で準備することを忘れないでください。この手順に従って、顕微鏡の他の方法は、追加の質問に答えるために行うことができます。病理学的スキャンのためのまたは異なる方法ではない。この技術の後、病理学的スキャンの分野の研究者が研究目的でデジタル診断を探求する道を開いた。パラホルムアルデヒドを使用すると非常に危険であり、マスクなどの予防措置は、常にこの手順を実行している間に取られるべきであることを忘れないでください。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

Ex Vivo Imaging of Resident CD8 T Lymphocytes in Human Lung Tumor Slices Using Confocal Microscopy

Ex Vivoひと肺腫瘍内常駐 cd8 陽性 T リンパ球の画像スライス共焦点顕微鏡を用いた

CD8 T cell are key players in the fight against cancer. In order for CD8 T cells to kill tumor cells they need to enter into the tumor, migrate within the ...

The Establishment of a Lung Colonization Assay for Circulating Tumor Cell Visualization in Lung Tissues

肺組織に腫瘍のセルの視覚化を循環させるため肺植民地化アッセイの確立

Metastasis is the major cause of cancer death. The role of circulating tumor cells (CTCs) in promoting cancer metastasis, in which lung colonization by ...

Detection of a CDH1 Rare Transcript Variant in Fresh-frozen Gastric Cancer Tissues by Chip-based Digital PCR

Detection of a CDH1 Rare Transcript Variant in Fresh-frozen Gastric Cancer Tissues by Chip-based Digital PCR

チップを使ったデジタル PCR による新鮮凍結胃癌組織内CDH1まれなトラン スクリプト変種の検出

CDH1a, a non-canonical transcript of the CDH1 gene, has been found to be expressed in some gastric cancer (GC) cell lines, whereas it is absent in normal ...

Desthiobiotin-Streptavidin-Affinity Mediated Purification of RNA-Interacting Proteins in Mesothelioma Cells

Desthiobiotin ストレプトアビジンの親和性による中皮腫細胞の RNA 結合タンパク質の精製

The in vitro RNA-pulldown is still largely used in the first steps of protocols aimed at identifying RNA-binding proteins that recognize specific RNA ...

Elastic Staining on Paraffin-embedded Slides of pT3N0M0 Gastric Cancer Tissue

pT3N0M0胃癌組織のパラフィン埋め込みスライド上の弾性染色

The elastic lamina, which is usually located in the sub-mesothelial layer, adjacent to the peritoneum mesothelial cells, is amphiphilic on hematoxylin and ...

Droplet Digital TRAP (ddTRAP): Adaptation of the Telomere Repeat Amplification Protocol to Droplet Digital Polymerase Chain Reaction

Droplet Digital TRAP ddTRAP: Adaptation of the Telomere Repeat Amplification Protocol to Droplet Digital Polymerase Chain Reaction

液滴デジタルトラップ (ddTRAP): 液滴デジタルポリメラーゼ連鎖反応へのテロメア反復増幅プロトコルの適応

The telomere repeat amplification protocol (TRAP) is the most widely used assay to detect telomerase activity within a given a sample. The polymerase ...

Radiosensitivity of Cancer Stem Cells in Lung Cancer Cell Lines

肺癌細胞株における癌幹細胞の放射線感受性

The presence of cancer stem cells (CSCs) has been associated with relapse or poor outcomes after radiotherapy. Studying radioresistant CSCs may provide ...

Preparation of Mitochondria from Ovarian Cancer Tissues and Control Ovarian Tissues for Quantitative Proteomics Analysis

卵巣癌組織からのミトコンドリアの調製と定量プロテオミクス解析のためのコントロール卵巣組織

Ovarian cancer is a common gynecologic cancer with high mortality but unclear molecular mechanism. Most ovarian cancers are diagnosed in the advanced ...

Detection of Lung Tumor Progression in Mice by Ultrasound Imaging

超音波画像によるマウスにおける肺腫瘍の進行の検出

With ~1.6 million victims per year, lung cancer contributes tremendously to the worldwide burden of cancer. Lung cancer is partly driven by genetic ...

Pathological Analysis of Lung Metastasis Following Lateral Tail-Vein Injection of Tumor Cells

腫瘍細胞の横尾静脈注入後の肺転移の病理学的解析

Metastasis, the primary cause of morbidity and mortality for most cancer patients, can be challenging to model preclinically in mice. Few spontaneous ...