Name: in vitro method to control concentrations of halogenated gases in cultured alveolar epithelial cells
Uploaded: 2018-10-23T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells at JoVE.com

लेखक Auvergne क्षेत्रीय परिषद ("कार्यक्रम नोव्यू Chercheur de la Région Auvergne" २०१३) और फ्रेंच Agence नेशनल डे ला सभ्य और दिशा Générale de L'Offre de Soins ("कार्यक्रम de सभ्य Translationnelle en Santé" स्वीकार करते हैं ANR-13-PRTS-0010) के लिए अनुदान । funders अध्ययन डिजाइन, आचरण में कोई प्रभाव नहीं था, और विश्लेषण या इस लेख की तैयारी में ।

1. वायुकोशीय उपकला कोशिकाओं की संस्कृति (hAELVi)
<ol><li>विगलन<ol>
<li>पिपेट 4 मिलीलीटर खेती के लिए तैयार-उपयोग मानव वायुकोशीय उपकला (huAEC) एक 15 मिलीलीटर प्लास्टिक ट्यूब में मध्यम और जल्दी से एक गरम पानी स्नान (३७ डिग्री ?...

<ol>
	<li>Bellani, G., Laffey, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology,+Patterns+of+Care,+and+Mortality+for+Patients+With+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome+in+Intensive+Care+Units+in+50+Countries.">Epidemiology, Patterns of Care, and Mortality for Patients With Acute Respiratory Distress Syndrome in Intensive Care Units in 50 Countries.</a> JAMA:T Journal of the American Medical Association. 315 (8), 788-800 (2016).</li><li>Thompson, B. T., Chambers, R. C., Liu, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Respiratory+Distress+Syndrome.">Acute Respiratory Distress Syndrome.</a> The New England Journal of Medicine. 377 (6), 562-572 (2017).</li><li>Weiser, T. G., Regenbogen, S. 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K., Ley, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+isoflurane+pretreatment+in+endotoxin-induced+lung+injury.">Protective effects of isoflurane pretreatment in endotoxin-induced lung injury.</a> Anesthesiology. (3), 511-517 (2006).</li><li>Uhlig, C., Bluth, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Volatile+Anesthetics+on+Mortality+and+Postoperative+Pulmonary+and+Other+Complications+in+Patients+Undergoing+Surgery:+A+Systematic+Review+and+Meta-analysis.">Effects of Volatile Anesthetics on Mortality and Postoperative Pulmonary and Other Complications in Patients Undergoing Surgery: A Systematic Review and Meta-analysis.</a> Anesthesiology: The Journal of the American Society of Anesthesiologists. 124 (6), 1230-1245 (2016).</li><li>Li, Q. F., Zhu, Y. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+Ameliorates+Acute+Lung+Injury+by+Preserving+Epithelial+Tight+Junction+Integrity.">Isoflurane Ameliorates Acute Lung Injury by Preserving Epithelial Tight Junction Integrity.</a> Anesthesiology. (2), 377-388 (2015).</li><li>Jabaudon, M., Boucher, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sevoflurane+for+Sedation+in+ARDS:+A+Randomized+Controlled+Pilot+Study.">Sevoflurane for Sedation in ARDS: A Randomized Controlled Pilot Study.</a> American Journal of Respiratory and Critical. , (2016).</li><li>Blondonnet, R., Audard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RAGE+inhibition+reduces+acute+lung+injury+in+mice.">RAGE inhibition reduces acute lung injury in mice.</a> Scientific Reports. 7 (1), (2017).</li><li>Jabaudon, M., Blondonnet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+Receptor+for+Advanced+Glycation+End-Products+Predicts+Impaired+Alveolar+Fluid+Clearance+in+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome.">Soluble Receptor for Advanced Glycation End-Products Predicts Impaired Alveolar Fluid Clearance in Acute Respiratory Distress Syndrome.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 192 (2), 191-199 (2015).</li><li>Jabaudon, M., Blondonnet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+Forms+and+Ligands+of+the+Receptor+for+Advanced+Glycation+End-Products+in+Patients+with+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome:+An+Observational+Prospective+Study.">Soluble Forms and Ligands of the Receptor for Advanced Glycation End-Products in Patients with Acute Respiratory Distress Syndrome: An Observational Prospective Study.</a> PloS One. 10 (8), e0135857 (2015).</li><li>Kuehn, A., Kletting, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+alveolar+epithelial+cells+expressing+tight+junctions+to+model+the+air-blood+barrier.">Human alveolar epithelial cells expressing tight junctions to model the air-blood barrier.</a> ALTEX. 33 (3), 251-260 (2016).</li><li>Yue, T., Roth Z'graggen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postconditioning+with+a+volatile+anaesthetic+in+alveolar+epithelial+cells+in+vitro.">Postconditioning with a volatile anaesthetic in alveolar epithelial cells in vitro.</a> The European Respiratory Journal: Official Journal of the European Society for Clinical Respiratory Physiology. 31 (1), 118-125 (2008).</li><li>Suter, D., Spahn, D. 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W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+iso-MAC+charts+for+isoflurane,+sevoflurane+and+desflurane+in+man.">Age-related iso-MAC charts for isoflurane, sevoflurane and desflurane in man.</a> British Journal of Anaesthesia. 91 (2), 170-174 (2003).</li><li>Bourdeaux, D., Sautou-Miranda, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+assay+of+plasma+sevoflurane+and+its+metabolite+hexafluoroisopropanol+by+headspace+GC-MS.">Simple assay of plasma sevoflurane and its metabolite hexafluoroisopropanol by headspace GC-MS.</a> Journal of Chromatography. B, Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 878 (1), 45-50 (2010).</li><li>Eger, E. I., Saidman, L. J., Brandstater, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimum+alveolar+anesthetic+concentration.">Minimum alveolar anesthetic concentration.</a> Anesthesiology. 26 (6), 756-763 (1965).</li><li>Perbet, S., Fernandez-Canal, C., Pereira, B., Cardot, J. M., Bazin, J. E., Constantin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Richmond+Agitation+Sedation+Scale+According+To+Alveolar+Concentration+of+Sevoflurane+During+a+Sedation+With+Sevoflurane+in+Icu+Patients.">Evaluation of Richmond Agitation Sedation Scale According To Alveolar Concentration of Sevoflurane During a Sedation With Sevoflurane in Icu Patients.</a> Intensive Care Medicine Experimental. 3 (Suppl 1), (2015).</li><li>Goolaerts, A., Pellan-Randrianarison, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+media+from+mesenchymal+stromal+cells+restore+sodium+transport+and+preserve+epithelial+permeability+in+an+in+vitro+model+of+acute+alveolar+injury.">Conditioned media from mesenchymal stromal cells restore sodium transport and preserve epithelial permeability in an in vitro model of acute alveolar injury.</a> American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 306 (11), L975-L985 (2014).</li></ol>

हमारे प्रोटोकॉल halogenated संवेदनाहारी एजेंट, जैसे sevoflurane या isoflurane का एक सटीक अंश करने के लिए कक्षों को अरक्षित करने के लिए एक आसान विधि का वर्णन करता है । इसके अलावा, हम यहां रिपोर्ट-पहली बार के लिए-दोनों के बीच एक...

तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम (ARDS) फैलाना वायुकोशीय चोट, फेफड़ों की सूजन, और hypoxemic श्वसन विफलता द्वारा विशेषता एक नैदानिक सिंड्रोम है । हालांकि ARDS गहन देखभाल इकाई के 10% से अधिक का प्रतिनिधित्व करता है (आईसीयू) प्रवेश और आईसीयू के लगभग 25% यांत्रिक वेंटिलेशन की आवश्यकता के रोगियों, यह अभी भी चिकित्सकों के लिए एक के अंतर्गत मांयता प्राप्त चुनौती है, 35-45%1के एक अस्पताल मृत्यु दर के साथ । गहन अनुसंधान के बावजूद, एक प्रभावी ARDS औषधीय चिकित्सा या रोकथाम की पहचान की तारीख में विफल रहा है । दो प्रमुख विशेषताएं ARDS में मृत्यु दर में योगदान: बिगड़ा वायुकोशीय द्रव निकासी (एएफसी) (यानी, वायुकोशीय शोफ द्रव के बाहर फेफड़े के airspaces से बदल अवशोषण) और गंभीर सूजन2. चूंकि ARDS मृत्युदर अधिक बनी हुई है, वर्तमान पहलों में प्राथमिक रोकथाम भी शामिल होनी चाहिए; हालांकि, एक प्रमुख चुनौती में जोखिम वाले रोगियों की पहचान करना है जिनमें ARDS विकसित होने की संभावना है और अगर ARDS को रोका गया तो लाभ होगा ।
अस्थिर halogenated निश्चेतक, जैसे sevoflurane और isoflurane, व्यापक रूप से ऑपरेटिंग कमरे में सामान्य संज्ञाहरण प्रदान करने के लिए उपयोग किया जाता है । दुनिया भर में, अधिक से अधिक २३०,०००,००० हर साल मेजर सर्जरी के दौर से गुजर रोगियों सामान्य संज्ञाहरण और यांत्रिक वेंटिलेशन3की आवश्यकता, और पश्चात फुफ्फुसीय जटिलताओं प्रतिकूल नैदानिक परिणाम और स्वास्थ्य देखभाल के उपयोग को प्रभावित4 . propofol के बजाय sevoflurane के उपयोग वक्ष शल्य चिकित्सा और प्रतिकूल घटनाओं में महत्वपूर्ण कमी के दौर से गुजर रोगियों में फेफड़े की सूजन में सुधार के साथ जुड़ा हुआ था, जैसे ARDS और पश्चात फुफ्फुसीय जटिलताओं5. इसी तरह, isoflurane के साथ उपचार श्वसन यांत्रिकी, ऑक्सीजन, और ARDS6,7के प्रायोगिक पशु मॉडलों में hemodynamics पर सुरक्षात्मक प्रभाव पड़ा । हालांकि आगे के अध्ययन के लिए हृदय शल्य चिकित्सा, फुफ्फुसीय जटिलताओं में एक समान कमी में परिणामों पर सांस एजेंटों के प्रभाव का पता वारंट है हाल ही में एक मेटा में मनाया गया है विश्लेषण, कि सांस संवेदनाहारी एजेंटों का प्रदर्शन-के रूप में नसों में संज्ञाहरण के लिए विरोध किया-काफी हृदय शल्य चिकित्सा के लिए मृत्यु दर में कमी के साथ जुड़े रहे हैं8.
आईसीयू रोगियों को रोकने या फेफड़ों की क्षति का इलाज करने के लिए बेहोशी की बात के लिए अस्थिर एजेंटों के उपयोग के बारे में विशिष्ट संभावित डेटा की कमी है । हालांकि, कई परीक्षणों अब आईसीयू रोगियों की बेहोशी के लिए साँस sevoflurane की प्रभावकारिता और सुरक्षा का समर्थन, और नैदानिक अध्ययनों से पता चला है कि साँस sevoflurane और isoflurane7,9 सुधार गैस विनिमय, कम वायुकोशीय शोफ, और ARDS के प्रयोगात्मक मॉडल में सूजन क्षीणन । इसके अतिरिक्त, sevoflurane कम प्रकार द्वितीय उपकला कोशिका क्षति10, जबकि isoflurane तंग जंक्शन प्रोटीन11के मॉडुलन के माध्यम से वायुकोशीय-केशिका बाधा की अखंडता का कहना है. हालांकि, आगे के अध्ययन के लिए किस हद तक सांस sevoflurane और isoflurane से अंग संरक्षण के प्रायोगिक सबूत मनुष्यों के लिए अनुवाद किया जा सकता है सत्यापित करने की जरूरत है । हमारे समूह से एक पहली एकल केंद्र यादृच्छिक नियंत्रित परीक्षण (RCT) पाया कि ARDS के साथ रोगियों में साँस sevoflurane के प्रारंभिक उपयोग में सुधार ऑक्सीजन के साथ जुड़ा हुआ था, कुछ समर्थक भड़काऊ मार्कर के कम स्तर, और कम फेफड़ों उपकला क्षति, के रूप में उंनत glycation अंत के लिए रिसेप्टर के घुलनशील रूप के स्तर के द्वारा मूल्यांकन-उत्पादों (sRAGE) प्लाज्मा में और वायुकोशीय द्रव12.
एक साथ ले लिया, sevoflurane और फेफड़ों की चोट पर isoflurane के लाभकारी प्रभाव कई जैविक रास्ते या कार्यात्मक प्रक्रियाओं है कि क्रोध मार्ग, अर्थात् वायुकोशीय द्रव निकासी (एएफसी), उपकला चोट पर निर्भर कर रहे हैं करने के लिए बिंदु सकता है, translocation ऑफ न्यूक्लियर फैक्टर (NF)-κB, और मैक्रोफेज सक्रियण । इसके अलावा, sevoflurane क्रोध प्रोटीन की अभिव्यक्ति को प्रभावित कर सकता है । हमारे अनुसंधान टीम द्वारा पिछले अनुसंधान और दूसरों के बाद से वायुकोशीय सूजन और फेफड़े उपकला चोट में क्रोध के लिए निर्णायक भूमिकाओं का समर्थन/ARDS के दौरान मरम्मत, हम एक प्रयोगात्मक मॉडल के तंत्र का एक शोधों समझ प्रदान करने के लिए डिजाइन फेफड़ों की चोट और मरंमत13,14,15में sevoflurane । sevoflurane और isoflurane के इन विट्रो प्रभाव में एक उपंयास मानव वायुकोशीय उपकला प्राथमिक सेल लाइन विशेष रूप से परिधीय फेफड़ों के वायु रक्त बाधा का अध्ययन करने के लिए डिज़ाइन में जांच की गई, hAELVi (मानव वायुकोशीय उपकला LentiVirus अमर), वायुकोशीय प्रकार मैं कार्यात्मक तंग16जंक्शनों सहित विशेषताओं की तरह के साथ ।
जबकि हमारे इन विट्रो जांच के डिजाइन की तैयारी (जैसे, हवा में वायुकोशीय उपकला कोशिकाओं की संस्कृतियों-जोखिम के साथ तरल अंतरफलक "साँस" sevoflurane या isoflurane, हम पहले से प्रकाशित अध्ययनों से समझ में है कि sevoflurane के अंशों केवल "हवा" इंटरफेस17,18,19 मानक पर नज़र रखता है (एक नैदानिक सेटिंग में इस्तेमाल करने वालों के समान) का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया है । Halogenated एजेंट सांद्रता आमतौर पर न्यूनतम वायुकोशीय एकाग्रता (मैक) मूल्यों के अनुसार चुना गया (जैसे, मनुष्यों में, sevoflurane के लिए, ०.५, १.१, और २.२ vol%, ०.२५, ०.५ का प्रतिनिधित्व, और 1 मैक, क्रमशः isoflurane के लिए, ०.६, ०.८, और १.३ vol% का प्रतिनिधित्व ०.२५, ०.५, और 1 मैक, क्रमशः)20. वास्तव में, sevoflurane और isoflurane सांद्रता संस्कृति माध्यम में ही कभी नहीं जांच की गई है, इस प्रकार पिछले प्रयोगात्मक मॉडल की वैधता सीमित/ इसके अलावा, सबसे प्रयोगों एक anaerobic जार कि हवा के बाद सील किया गया था sevoflurane युक्त मिश्रण के अंदर फ्लश गया था । जैसा कि हमारा लक्ष्य "शारीरिक" शर्तों के तहत वायुकोशीय उपकला कोशिकाओं का अध्ययन किया गया था, हम मानते हैं कि इस तरह के एक anaerobic राज्य इष्टतम नहीं हो सकता है और लंबे प्रयोगात्मक अवधि के साथ संगत नहीं होगा. इसलिए, हम हवा में संस्कृति कोशिकाओं को अपनी प्रणाली विकसित तरल अंतरफलक और उंहें halogenated एजेंटों को बेनकाब (sevoflurane और isoflurane) सटीक नियंत्रित "हवा" भागों और इन एजेंटों के लिए "मध्यम" सांद्रता प्रदान करने के उद्देश्य के साथ । हमारी राय में, यह प्रायोगिक कदम है, जो साहित्य में तारीख को सूचित नहीं किया गया है, sevoflurane और isoflurane के इन विट्रो जांच में किसी भी आगे से पहले अनिवार्य है ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Sevoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td>Performing experiments using sevoflurane or isoflurane while being pregnant should be strongly discouraged</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>Performing experiments using sevoflurane or isoflurane while being pregnant should be strongly discouraged</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Alveolar Epithelial cells</td>
			<td>InScreenex</td>
			<td>INS-CI-1015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>huAEC Medium (ready-to-use)</td>
			<td>InScreenex</td>
			<td>INS-ME-1013-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic machine circuit</td>
			<td>Drager</td>
			<td>Fabius</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas analyzer</td>
			<td>Drageer</td>
			<td>Vamos Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic gas filter</td>
			<td>SedanaMedical</td>
			<td>FlurAbsord</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated Humifier</td>
			<td>Fisher&#38;Paykel</td>
			<td>MR850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber</td>
			<td>Curver</td>
			<td>00012-416-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatography coupled with mass detection</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA, USA</td>
			<td>Trace 1310 with TSQ 8000evo</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fused-silica column (30 m x 1.4 &#181;m, 0.25 mm ID)</td>
			<td>Restek, Lisses, France</td>
			<td>Rxi-624Sil MS</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro method to control concentrations of halogenated gases in cultured alveolar epithelial cells

तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम (ARDS) बिगड़ा वायुकोशीय द्रव निकासी और गंभीर सूजन के साथ फैलाना वायुकोशीय चोट का एक सिंड्रोम है । इस तरह के sevoflurane या isoflurane के रूप में halogenated एजेंटों के उपयोग, गहन देखभाल इकाई (आईसीयू) रोगियों गैस विनिमय में सुधार, वायुकोशीय सूजन को कम कर सकते हैं, और ARDS के दौरान सूजन क्षीणन के लिए बेहोश । हालांकि, इलाज या फेफड़ों के नुकसान को रोकने के लिए आईसीयू में लगातार बेहोशी के लिए साँस एजेंटों के उपयोग पर डेटा की कमी है । "शारीरिक" शर्तों के तहत वायुकोशीय उपकला कोशिकाओं पर halogenated एजेंटों के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए, हम हवा में संस्कृति कोशिकाओं के लिए एक आसान प्रणाली का वर्णन तरल इंटरफेस और उन्हें halogenated एजेंटों को बेनकाब करने के लिए सटीक नियंत्रित "हवा" भिन्न प्रदान करने के लिए और इन एजेंटों के लिए "मध्यम" सांद्रता । हम एक सील हवा तंग कक्ष जिसमें मानव वायुकोशीय उपकला अमर कोशिकाओं के साथ प्लेटें एक संवेदनाहारी मशीन सर्किट द्वारा प्रदान की एक सतत गैस प्रवाह का उपयोग कर sevoflurane या isoflurane के एक सटीक, नियंत्रित अंश को उजागर किया जा सकता है विकसित की है । कोशिकाओं को sevoflurane के 4% और 24 घंटे के लिए isoflurane के 1% से अवगत कराया गया । गैस मास स्पेक्ट्रोमेट्री माध्यम में भंग halogenated एजेंटों की एकाग्रता निर्धारित करने के लिए प्रदर्शन किया गया. पहले घंटे के बाद, sevoflurane और isoflurane की सांद्रता मध्यम में क्रमशः २५१ मिलीग्राम/l और 25 mg/ दोनों sevoflurane और मध्यम में भंग isoflurane की सांद्रता का प्रतिनिधित्व घटता समय के साथ समान पाठ्यक्रम दिखाया, एक पठार के साथ प्रदर्शन के बाद एक घंटे में पहुंच गया ।
इस प्रोटोकॉल विशेष रूप से ARDS के दौरान उपकला फेफड़े की चोट में शामिल तंत्र की हमारी समझ में सुधार करने के लिए और के लिए उपंयास उपचार परीक्षण करने के लिए इन विट्रो में sevoflurane या isoflurane की सटीक और नियंत्रित सांद्रता तक पहुंचने के लिए डिज़ाइन किया गया था सिंड्रोम.

sevoflurane और isoflurane, जो समय के साथ मध्यम में भंग की सांद्रता, क्रमशः तालिका 1 और तालिका 2में सूचित कर रहे हैं ।
माध्यम में sevoflurane और isoflurane सांद्रता के पाठ्यक्रम समय के स?...

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In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells

हम विशेष रूप से sevoflurane या isoflurane की सटीक और नियंत्रित सांद्रता तक पहुंचने के लिए डिज़ाइन किया गया एक आसान प्रोटोकॉल का वर्णन इन विट्रो में उपकला फेफड़ों की चोट में शामिल तंत्र की हमारी समझ में सुधार करने के लिए और उपन्यास का परीक्षण करने के लिए तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम के लिए चिकित्सा ।

इन विट्रो में प्रसंस्कृत वायुकोशीय उपकला कोशिकाओं में Halogenated गैसों की सांद्रता को नियंत्रित करने के लिए विधि

Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is a syndrome of diffuse alveolar injury with impaired alveolar fluid clearance and severe inflammation. The ...

इस विधि में मदद कर सकते है फेफड़ों की चोट के अनुसंधान क्षेत्र में महत्वपूर्ण सवाल का जवाब और इस तरह के परीक्षण के रूप में परीक्षण के रूप में तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम के लिए संभावित उपंयास चिकित्सा के रूप में सहायक । इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि यह कोशिकाओं को संस्कृति और सटीक और नियंत्रित सांद्रता तक पहुंचने के लिए हैलोजेनेटेड एजेंटों को बेनकाब करने के लिए एक बहुत ही सरल विधि पर निर्भर करता है। एयरटाइट चैंबर का निर्माण करने के लिए, 6.5 लीटर की क्षमता वाले हर्मेटिक पॉलीप्रोपाइलीन बॉक्स का उपयोग करें।बॉक्स की पार्श्व दीवार के नीचे की ओर 2.5 सेंटीमीटर व्यास के छेद को ड्रिल करें। फिर हरे निशान के साथ एक नालीदार ट्यूब डालें जो गैस हवा मिश्रण इनपुट पाइप के रूप में काम करेगा। और इसे सिलिकॉन के साथ सील करें।इसके बाद, विपरीत पार्श्व दीवार के शीर्ष पक्ष पर 2.5 सेंटीमीटर व्यास के साथ एक दूसरा छेद ड्रिल करें। एक लाल निशान के साथ एक और नालीदार ट्यूब डालें और इसे चारकोल फिल्टर के साथ कनेक्ट करें जो गैस एयर मिक्सचर आउटपुट पाइप के रूप में काम करेगा। फिर इसे सिलिकॉन से सील करें।बाद में दीवार के केंद्र में चार मिलीमीटर व्यास के साथ एक तंग छेद ड्रिल करें। एक घूर्णन पुरुष लालच ताला के साथ एक कई गुना पर जुड़ा हुआ है कि छोटे जलसेक टयूबिंग डालें। इसे गैस एनालाइजर में प्लग करें और सिलिकॉन के साथ सील करें।इसके बाद एयरटाइट चैंबर के अंदर डिजिटल थर्मामीटर रखें। एक प्रयोगशाला चिमटा हुड के तहत, कार्बन डाइऑक्साइड द्वारा नाइट्रस ऑक्साइड गैस लाइन स्विच करने के लिए एक संवेदनाहारी मशीन सर्किट को अनुकूलित करें। गैस प्रवाह मिश्रण को लगभग 37 डिग्री सेल्सियस तक गर्म करने के लिए एनेस्थेटिक मशीन और एयरटाइट चैंबर के बीच पाइप में एक गर्म ह्यूमिडिफायर डालें।एयरटाइट चैंबर को हरे रंग के चिह्नित नालीदार ट्यूब के साथ अनुकूलित एनेस्थेटिक मशीन सर्किट में प्लग करें। इसके बाद, एयरटाइट चैंबर को 37 डिग्री सेल्सियस तक सेट गर्म प्लेट पर रखें। एक छह अच्छी तरह से मानव alveolar एपिथेलियल कोशिकाओं वाली प्लेट को एयरटाइट कक्ष में रखें और ढक्कन को सील करें।सीओ 2 का 5% जल्दी प्राप्त करने के लिए गैस प्रवाह दर को विनियमित करें। फिर हैलोजेनेटेड एजेंट वाष्पीकरण खोलें और वांछित प्रतिशत को समायोजित करें। एक बार लक्ष्य मूल्यों को प्राप्त कर रहे हैं, ताजा गैस प्रवाह दर प्रति मिनट एक लीटर के लिए कम ।प्रयोग के लिए आवश्यक होने तक इस गैस प्रवाह दर के साथ एयरटाइट चैंबर को बनाए रखा जा सकता है। माध्यम में सेवोफ्लुरन और आइसोफ्लुन सांद्रता के पाठ्यक्रम समय के साथ समान थे। हैलोजेनेटेड एजेंट की आवश्यक एकाग्रता सेट होने के तुरंत बाद, पहले घंटे में सांद्रता बढ़ी।इसके बाद एक पठार पहुंच गया जो हैलोजेनेटेड एजेंट के प्रशासन के बंद होने तक कायम रहा । प्रशासन के व्यवधान के बाद, एक घंटे के भीतर सांद्रता में कमी आई। यहां दिखाया गया है गैस एनालाइजर द्वारा मापा एयरटाइट चैंबर में समय के साथ हैलोजेनेटेड एजेंट के अंश हैं ।यह प्रक्रिया अपेक्षाकृत सस्ती है और यहां तक कि अपनाने में बहुत आसान है जब शोधकर्ताओं ने पहले कभी एयरटाइट चैंबर में हेरफेर नहीं किया है। इस प्रक्रिया के बाद, प्रोटीन और आरएनए क्वांटिफिकेशन, इम्यूनोफ्लोरेसेंस, प्रोटीन पारगम्यता और मुफ्त परिवहन की माप जैसे अन्य तरीकों को एपिथेलियल फेफड़ों की चोट और इसके संकल्प के दौरान हैलोजेनेटेड एजेंटों के विशिष्ट प्रभावों पर सवालों के जवाब देने के लिए किया जा सकता है। इसके विकास के बाद, यह तकनीक एआरडीएस के दौरान एपिथेलियल फेफड़ों की चोट में शामिल तंत्र का आगे अध्ययन करने और उपन्यास चिकित्सा का परीक्षण करने के लिए तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम के क्षेत्र में अनुसंधान का मार्ग प्रशस्त कर सकती है।

Research

JoVE Journal

Medicine

In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

माउस फेफड़े इंटुबैषेण का एक सरल तरीका

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Cytotoxic Efficacy of Photodynamic Therapy in Osteosarcoma Cells In Vitro

Cytotoxic Efficacy of Photodynamic Therapy in Osteosarcoma Cells In Vitro

ऑस्टियो सार्कोमा कोशिकाओं में Photodynamic थेरेपी के साइटोटोक्सिक प्रभावकारिता<em&gt; इन विट्रो</em

In recent years, there has been the difficulty in finding more effective therapies against cancer with less systemic side effects. Therefore Photodynamic ...

In vitro Method to Observe E-selectin-mediated Interactions Between Prostate Circulating Tumor Cells Derived From Patients and Human Endothelial Cells

In vitro Method to Observe E-selectin-mediated Interactions Between Prostate Circulating Tumor Cells Derived From Patients and Human Endothelial Cells

मरीजों और मानव endothelial कोशिकाओं से व्युत्पन्न प्रोस्टेट परिसंचारी ट्यूमर कोशिकाओं के बीच ई selectin की मध्यस्थता मुलाकातों का निरीक्षण करने के लिए इन विट्रो विधि में

Metastasis is a process in which tumor cells shed from the primary tumor intravasate blood vascular and lymphatic system, thereby, gaining access to ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

अग्नाशय के कैंसर नई उपचार रणनीतियों के विकास के लिए सेल के लक्षण स्टेम का अध्ययन

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

मानव ट्यूमर Xenografts से माउस कोशिकाओं की कमी गौरतलब है कि लक्ष्य प्रकोष्ठों के डाउनस्ट्रीम विश्लेषण बढ़ाता

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Studying the Role of Alveolar Macrophages in Breast Cancer Metastasis

स्तन कैंसर मेटास्टेसिस में वायुकोशीय मैक्रोफेज की भूमिका का अध्ययन

This paper describes the application of the syngeneic model of breast cancer (4T1) to the studies on a role of pulmonary alveolar macrophages in cancer ...

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin प्रेरित आंतों में सूजन Organoids: एक<em&gt; इन विट्रो</em&gt; सिस्टिक फाइब्रोसिस रोगियों में दवा प्रतिक्रिया का आकलन करने के लिए परख

Recently-developed cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-modulating drugs correct surface expression and/or function of the mutant ...

A Method for Quantifying Upper Limb Performance in Daily Life Using Accelerometers

दैनिक जीवन में ऊपरी अंग प्रदर्शन बढ़ाता एक्सीलरोमीटर का उपयोग के लिए एक विधि

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. ...

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During In Vitro Wound Healing

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During  In Vitro Wound Healing

इन विट्रो घाव हीलिंग के दौरान उपकला कोशिका प्रवास के आकलन के लिए सूक्ष्म आधारित तरीकों

Cell migration is a mandatory aspect for wound healing. Creating artificial wounds on research animal models often results in costly and complicated ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

कॉर्निया घाव भरने के लिए एक मॉडल के रूप में आंख गड़गड़ाहट के साथ Corneal उपकला घर्षण

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...