Name: in vitro method to control concentrations of halogenated gases in cultured alveolar epithelial cells
Uploaded: 2018-10-23T14:30:00
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저자 인정 오베르뉴 지역 위원회 ("프로그램 누 보 Chercheur 드 라 지구의 오베르뉴" 2013) 및 프랑스 직원 회 드 라 검색 방향 Générale 드 L'Offre 드 Soins "(프로그램 드 검색 Translationnelle en 건강" ANR-13-PRTS-0010)는 보조금에 대 한. Funders 연구 디자인, 실시, 및 분석 하거나이 문서의 준비에 아무런 영향을 미치지를 했다.

1. 폐 포 상피 세포 (hAELVi)의 문화
<ol><li>녹고<ol>
<li>15 mL 플라스틱 튜브에 재배 준비-사용 인간의 폐 포 상피 (huAEC) 매체의 4 mL를 플라스틱 하 고 신속 하 게 따뜻한 물 목욕 (37 ° C)에 유리병을 녹여.</li>
		<li>5 분 동안 200 x g에서 튜브 centrifuging 전에 매체의 4 mL를 포함 하는 15 mL 플라스틱 튜브에 해 동된 세포 현 탁 액을 전송.</li>
		<li>상쾌한 발음 하 고 재배 매체의 5 mL와 함께 셀 펠 릿 resuspend. 다음,...

<ol>
	<li>Bellani, G., Laffey, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology,+Patterns+of+Care,+and+Mortality+for+Patients+With+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome+in+Intensive+Care+Units+in+50+Countries.">Epidemiology, Patterns of Care, and Mortality for Patients With Acute Respiratory Distress Syndrome in Intensive Care Units in 50 Countries.</a> JAMA:T Journal of the American Medical Association. 315 (8), 788-800 (2016).</li><li>Thompson, B. T., Chambers, R. C., Liu, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Respiratory+Distress+Syndrome.">Acute Respiratory Distress Syndrome.</a> The New England Journal of Medicine. 377 (6), 562-572 (2017).</li><li>Weiser, T. G., Regenbogen, S. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+Ameliorates+Acute+Lung+Injury+by+Preserving+Epithelial+Tight+Junction+Integrity.">Isoflurane Ameliorates Acute Lung Injury by Preserving Epithelial Tight Junction Integrity.</a> Anesthesiology. (2), 377-388 (2015).</li><li>Jabaudon, M., Boucher, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sevoflurane+for+Sedation+in+ARDS:+A+Randomized+Controlled+Pilot+Study.">Sevoflurane for Sedation in ARDS: A Randomized Controlled Pilot Study.</a> American Journal of Respiratory and Critical. , (2016).</li><li>Blondonnet, R., Audard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RAGE+inhibition+reduces+acute+lung+injury+in+mice.">RAGE inhibition reduces acute lung injury in mice.</a> Scientific Reports. 7 (1), (2017).</li><li>Jabaudon, M., Blondonnet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+Receptor+for+Advanced+Glycation+End-Products+Predicts+Impaired+Alveolar+Fluid+Clearance+in+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome.">Soluble Receptor for Advanced Glycation End-Products Predicts Impaired Alveolar Fluid Clearance in Acute Respiratory Distress Syndrome.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 192 (2), 191-199 (2015).</li><li>Jabaudon, M., Blondonnet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+Forms+and+Ligands+of+the+Receptor+for+Advanced+Glycation+End-Products+in+Patients+with+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome:+An+Observational+Prospective+Study.">Soluble Forms and Ligands of the Receptor for Advanced Glycation End-Products in Patients with Acute Respiratory Distress Syndrome: An Observational Prospective Study.</a> PloS One. 10 (8), e0135857 (2015).</li><li>Kuehn, A., Kletting, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+alveolar+epithelial+cells+expressing+tight+junctions+to+model+the+air-blood+barrier.">Human alveolar epithelial cells expressing tight junctions to model the air-blood barrier.</a> ALTEX. 33 (3), 251-260 (2016).</li><li>Yue, T., Roth Z'graggen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postconditioning+with+a+volatile+anaesthetic+in+alveolar+epithelial+cells+in+vitro.">Postconditioning with a volatile anaesthetic in alveolar epithelial cells in vitro.</a> The European Respiratory Journal: Official Journal of the European Society for Clinical Respiratory Physiology. 31 (1), 118-125 (2008).</li><li>Suter, D., Spahn, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunomodulatory+effect+of+sevoflurane+in+endotoxin-injured+alveolar+epithelial+cells.">The immunomodulatory effect of sevoflurane in endotoxin-injured alveolar epithelial cells.</a> Anesthesia and Analgesia. (3), 638-645 (2007).</li><li>Schl&#228;pfer, M., Leutert, A. C., Voigtsberger, S., Lachmann, R. A., Booy, C., Beck-Schimmer, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sevoflurane+reduces+severity+of+acute+lung+injury+possibly+by+impairing+formation+of+alveolar+oedema.">Sevoflurane reduces severity of acute lung injury possibly by impairing formation of alveolar oedema.</a> Clinical and Experimental Immunology. (1), 125-134 (2012).</li><li>Nickalls, R. W. D., Mapleson, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+iso-MAC+charts+for+isoflurane,+sevoflurane+and+desflurane+in+man.">Age-related iso-MAC charts for isoflurane, sevoflurane and desflurane in man.</a> British Journal of Anaesthesia. 91 (2), 170-174 (2003).</li><li>Bourdeaux, D., Sautou-Miranda, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+assay+of+plasma+sevoflurane+and+its+metabolite+hexafluoroisopropanol+by+headspace+GC-MS.">Simple assay of plasma sevoflurane and its metabolite hexafluoroisopropanol by headspace GC-MS.</a> Journal of Chromatography. B, Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 878 (1), 45-50 (2010).</li><li>Eger, E. I., Saidman, L. 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M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Richmond+Agitation+Sedation+Scale+According+To+Alveolar+Concentration+of+Sevoflurane+During+a+Sedation+With+Sevoflurane+in+Icu+Patients.">Evaluation of Richmond Agitation Sedation Scale According To Alveolar Concentration of Sevoflurane During a Sedation With Sevoflurane in Icu Patients.</a> Intensive Care Medicine Experimental. 3 (Suppl 1), (2015).</li><li>Goolaerts, A., Pellan-Randrianarison, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+media+from+mesenchymal+stromal+cells+restore+sodium+transport+and+preserve+epithelial+permeability+in+an+in+vitro+model+of+acute+alveolar+injury.">Conditioned media from mesenchymal stromal cells restore sodium transport and preserve epithelial permeability in an in vitro model of acute alveolar injury.</a> American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 306 (11), L975-L985 (2014).</li></ol>

우리의 프로토콜 sevoflurane isoflurane 등 할로겐화 마 취 에이전트의 정확한 분수를 셀을 노출 하는 쉬운 방법을 설명 합니다. 또한, 우리가 여기에 보고-처음으로-가스 분수와 sevoflurane와 문화 매체 자체 내부 isoflurane의 농도 사이의 엄격한 상관 관계. 지금이 근본적인 단계 안전 하 게 우리의 밀폐 챔버를 사용 하 여 인간의 폐 포 상피 세포의 경작된 단층에 이러한 할로겐화 대리인의 효과 연구 하도?...

급성 호흡 곤란 증후군 (아즈) 확산 치경 부상, 폐 부 종, 그리고 hypoxemic 호흡기 장애를 특징으로하는 임상 증후군 이다. 아즈 환자 실 (ICU) 입원의 10% 이상 및 기계 환기를 필요로 하는 중 환자 실 환자의 약 25%를 나타냅니다, 하지만 그것은 여전히 35-451의 병원 사망률과 임상에 대 한 인식 아래 도전. 강렬한 연구에도 불구 하 고 날짜는 효과적인 아즈 약리학 적인 치료 또는 예방의 식별 하지 못했습니다. 아즈에 있는 사망에 기여 하는 두 가지 주요 기능: 장애인 치경 유체 클리어런스 (AFC) (즉, 말 초 폐 일에서 치경 부 종 액체의 바꾸 인된 재흡수) 및 심한 염증2. 이후 아즈 사망률 높은 유지, 현재 사업 또한 기본 예방;를 포함 해야 한다 그러나, 핵심 과제 아즈 개발 것입니다 누구에 아즈 했다 방해 하는 경우 도움이 될 것 이라고 누가 위험 환자를 식별 하는.
Sevoflurane 등 isoflurane, 휘발성 할로겐화 마 취약 수술 실에서 전신 마 취를 제공 하기 위해 널리 사용 됩니다. 세계 전반, 주요 수술 시 매년 230 백만 이상 환자 전신 마 취와 기계 환기3, 필요 하 고 수술 후 폐 합병증 저하 임상 결과 의료 이용4 . Propofol 대신 sevoflurane 사용 하 여 향상 된 폐 염증 환자의 흉부 수술 및 수술 후 폐 합병증5아즈 등 부작용에 상당한 감소와 연관 되었다. 마찬가지로, 전처리와 isoflurane 아즈6,7의 실험 동물 모델에서 호흡 역학, 산소, 그리고 hemodynamics 보호 효과 했다. 폐 합병증에 유사한 감소는 흡입 마 취 에이전트 보여주는 메타-분석, 최근 관찰 되었습니다 더 연구는 흡입 제의 noncardiac 수술에서 결과에 영향을 해결 하기 위해 보증 하 고, 비록-로 정 맥 마 취에 반대-심장 수술8에 대 한 사망률 감소와 크게 관련 있다.
중 환자 실 환자를 방지 하거나 치료 폐 손상의 진정에 대 한 휘발성 에이전트의 사용에 대 한 특정 예비 데이터 부족. 그러나, 여러 시련은 이제 흡입된 sevoflurane의 안전과 효능 중 환자 실 환자의 진정에 대 한 지원과 전 임상 연구 흡입된 sevoflurane 및 isoflurane7,9 감소, 가스 교환 개선 치경 부 종, 그리고 아즈의 실험 모델에서 약하게 염증. 또한, sevoflurane isoflurane 꽉 접합 단백질11의 변조를 통해 치경 모 세관 방 벽의 무결성을 유지 하는 반면 유형 II 상피 세포 손상10을 완화 합니다. 그러나, 더 연구는 어느 정도 흡입된 sevoflurane와 isoflurane 장기 보호의 실험적인 증거는 인 간에 게 번역 될 수 있는 확인 필요 합니다. 첫 번째 단일 센터 무작위로 제어-재판 (RCT) 우리 그룹에서 발견 아즈 환자에서 흡입된 sevoflurane의 초기 사용 향상 된 산소, 일부 프로-염증 성 마커 및 감소 된 폐 상피의 감소 된 수준에 연관 손상, 플라즈마와 치경 유체12고급 glycation 엔드 제품 (sRAGE)에 대 한 수용 체의 수용 성 형태의 레벨에 의해 평가.
함께 찍은, 폐 상해에 sevoflurane 및 isoflurane의 유익한 효과 여러 생물 학적 경로 또는 업무 프로세스 분노 경로에 종속 된 즉 치경 유체 클리어런스 (AFC), 상피 부상, 가리킬 수 있습니다. 핵 요인 (NF)의 전-κB, 및 대 식 세포 활성화. 또한, sevoflurane 분노 단백질 자체의 식 영향을 미칠 수 있습니다. 우리의 연구 팀과 다른 사람에 의해 이전 연구 아즈 동안 치조 염증과 폐 상피 부상/수리에 분노에 대 한 중추적인 역할을 지원, 하기 때문에 우리는 변환 메커니즘의 이해를 제공 하는 실험 모델 설계 폐 상해 및 복구13,,1415sevoflurane. Sevoflurane 및 isoflurane의 생체 외에서 효과 주변 폐, hAELVi (인간 폐 포 상피 LentiVirus의 공기-혈액 장벽 공부 하도록 특별히 설계 된 새로운 인간의 폐 포 상피 1 차 셀 라인에 조사 했다 불후의 명작), 치경 유형-같은 특성 기능 단단한 접속점16를 포함 하 여.
우리의 체 외에서 조사 설계를 준비 하는 동안 (예를 들어, "흡입된" sevoflurane 또는 isoflurane 노출 공기 액체 인터페이스에서 폐 포 상피 세포의 문화, 우리가 이해에서 이전에 게시 하는 연구 sevoflurane의 분수는만 "공기" 인터페이스17,,1819 표준 모니터 (임상 설정에서 사용 되는 유사한)을 사용 하 여 평가 되었습니다. 할로겐화 에이전트 농도 일반적으로 최소 치경 농도 (MAC) 값에 따라 선택 되었다 (예를 들어, 인간, sevoflurane에 대 한 0.5, 1.1, 및 2.2 vol %, 0.25, 0.5, 및 1 맥 대표 isoflurane, 0.6, 0.8, 각각;에 대 한 고 1.3 vol % 각각 0.25, 0.5, 및 1 맥 대표)20. 실제로, sevoflurane 및 isoflurane 농도 문화 매체 자체, 따라서 이전 실험 모델/계기의 타당성을 제한에서 조사 적 있다. 또한, 대부분 실험 후 공기 혼합 포함 sevoflurane 내부 플러시 했다 밀봉 했다 혐 기성 병 사용. 우리의 목표는 "생리" 조건 하에서 폐 포 상피 세포를 공부 하는, 우리는 같은 혐 기성 상태가 최적의 않을 수 있습니다 및 긴 실험 기간와 호환 되지 않을 것 이라고 믿 었 다. 따라서, 우리 공기 액체 인터페이스에 문화 세포에 우리의 자신의 시스템을 개발 하 고 정확한 제어 "공기" 분수 및 이러한 에이전트에 대 한 "중간" 농도 제공의 목표로 할로겐화 대리인 (sevoflurane 및 isoflurane)에 그들을 노출. 우리의 의견에 보고 하지 않은 문학에 날짜,이 실험 단계 이전에 어떤 더 생체 외에서 조사 sevoflurane 및 isoflurane 필수입니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Sevoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td>Performing experiments using sevoflurane or isoflurane while being pregnant should be strongly discouraged</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>Performing experiments using sevoflurane or isoflurane while being pregnant should be strongly discouraged</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Alveolar Epithelial cells</td>
			<td>InScreenex</td>
			<td>INS-CI-1015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>huAEC Medium (ready-to-use)</td>
			<td>InScreenex</td>
			<td>INS-ME-1013-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic machine circuit</td>
			<td>Drager</td>
			<td>Fabius</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas analyzer</td>
			<td>Drageer</td>
			<td>Vamos Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic gas filter</td>
			<td>SedanaMedical</td>
			<td>FlurAbsord</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated Humifier</td>
			<td>Fisher&#38;Paykel</td>
			<td>MR850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber</td>
			<td>Curver</td>
			<td>00012-416-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatography coupled with mass detection</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA, USA</td>
			<td>Trace 1310 with TSQ 8000evo</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fused-silica column (30 m x 1.4 &#181;m, 0.25 mm ID)</td>
			<td>Restek, Lisses, France</td>
			<td>Rxi-624Sil MS</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro method to control concentrations of halogenated gases in cultured alveolar epithelial cells

급성 호흡 곤란 증후군 (아즈)은 장애인된 치경 유체 허가와 심한 염증 확산 치경 상해의 증후군. 환자 실 (ICU) 환자의 진정 sevoflurane 등 isoflurane, 할로겐화 대리인의 사용은 가스 교환을 향상, 치경 부 종 감소 고 아즈 동안 염증 감소 수 있습니다. 그러나, 폐 손상을 방지 하거나 치료 중 환자 실에서 지속적인 진정에 대 한 흡입 제의 사용에 대 한 데이터 부족입니다. "생리" 조건 하에서 폐 포 상피 세포에 할로겐화 대리인의 효과 연구, 우리는 공기 액체 인터페이스에 문화 세포에 쉽게 시스템을 설명 하 고 정확한 제어 "공기" 분수를 제공 하는 할로겐화 요원에 게 노출 하 고 이러한 에이전트의 "매체" 농도 우리는 인간의 폐 포 상피 불멸 하 게 셀 접시 sevoflurane 또는 isoflurane 마 취 기계 회로 의해 제공 지속적인 가스 교류를 사용 하 여 정확한, 제어 부분에 노출 될 수 밀봉된 밀폐 챔버 개발. 세포는 24 시간 동안 sevoflurane의 4%와 isoflurane의 1%에 노출 되었다. 가스 질량 분석은 매체에 녹아 할로겐화 대리인의 농도 결정 하기 위해 수행 되었다. 후 첫 번째 시간, sevoflurane 및 매체에서 isoflurane 농도 했다 251 mg/L 및 25 mg/L, 각각. Sevoflurane와 isoflurane의 농도 나타내는 곡선 고원 노출 후 1 시간에 도달와 함께 시간이 지남에, 유사한 과정을 보여 중간에 녹아.
이 프로토콜은 sevoflurane 또는 isoflurane에서 생체 외에서 아즈 중 상피 폐 상해에 관련 된 메커니즘에 대 한 우리의 이해를 개선 하 고 테스트에 대 한 새로운 치료의 농도 정확 하 고 제어를 도달 하도록 특별히 설계 된는 증후군입니다.

Sevoflurane 시간이 지남에 매체에 녹아, isoflurane의 농도 각각 표 1 과 표 2에 보고 됩니다.
매체에서 sevoflurane 및 isoflurane 농도의 과정 동안 유사 했다. 할로겐화 대리인의 필요한 농도 설정 된 후에 즉시 농도 1 시간 동안 상승 했다. 고원 다음에 도달 했다는 할로겐화 에이전트의 중지 될 때까지 유지. 관리...

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In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells

우리 소설을 테스트 하 고 상피 폐 상해에 관련 된 메커니즘에 대 한 우리의 이해를 향상 sevoflurane 또는 isoflurane에서 생체 외에서 의 농도 정확 하 고 제어를 도달 하도록 특별히 설계 된 쉬운 프로토콜 설명 급성 호흡 곤란 증후군에 대 한 요법입니다.

생체 외에서 교양된 폐 포 상피 세포에서 할로겐화 가스의 농도 제어 하는 방법

Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is a syndrome of diffuse alveolar injury with impaired alveolar fluid clearance and severe inflammation. The ...

이 방법은 폐 상해의 연구 필드에 있는 중요한 질문에 대답하고 급성 호흡 곤란 증후군을 위한 잠재적인 새로운 치료로 할로겐화한 외래를 시험하는 것과 같은 복구를 도울 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 세포를 배양하고 정확하고 통제 된 농도에 도달하기 위해 할로겐화 된 제제에 노출하는 매우 간단한 방법에 의존한다는 것입니다. 밀폐 챔버를 구성하려면 6.5 리터의 용량의 밀폐 폴리 프로필렌 상자를 사용합니다.상자의 측면 벽의 하단에 2.5 센티미터 직경 구멍을 드릴. 그런 다음 가스 공기 혼합물 입력 파이프 역할을 하는 녹색 마크가 있는 골판지 튜브를 삽입합니다. 그리고 실리콘으로 밀봉.다음으로, 반대쪽 측면 벽의 상단에 2.5 센티미터 직경으로 두 번째 구멍을 드릴. 빨간색 마크가 있는 다른 골판지 튜브를 삽입하고 가스 공기 혼합물 출력 파이프역할을 하는 숯 필터와 연결합니다. 그런 다음 실리콘으로 밀봉하십시오.그런 다음 벽의 중앙에 직경 4mm로 단단한 구멍을 뚫습니다. 회전하는 남성 미끼 잠금 장치로 매니폴드에 연결된 짧은 주입 튜브를 삽입합니다. 가스 분석기에 연결하고 실리콘으로 밀봉합니다.그런 다음 밀폐 챔버 내부에 디지털 온도계를 배치합니다. 실험실 추출기 후드 아래에서 마취 기계 회로를 사용자 지정하여 이산화탄소로 아산화질소 가스 라인을 전환합니다. 가열된 가습기를 마취기계와 밀폐챔버 사이의 파이프에 삽입하여 가스 흐름 혼합물을 섭씨 약 37도로 데워보겠습니다.녹색 표시 골판지 튜브와 밀폐 챔버를 사용자 정의 마취 기계 회로에 연결합니다. 다음으로, 37°C로 설정된 핫 플레이트에 밀폐 챔버를 놓습니다. 인간 폐포 상피 세포를 포함하는 6개의 우물 판을 밀폐 챔버에 넣고 뚜껑을 밀봉합니다.가스 유량을 조절하여 CO2의 5%를 빠르게 얻습니다. 그런 다음 할로겐화 제 증발기와 원하는 백분율을 조정합니다. 목표 값이 달성되면 신선한 가스 유속속도를 분당 1리터로 줄입니다.밀폐 챔버는 실험에 필요한 한 이 가스 유량으로 유지될 수 있다. 매체에서 세보플루란과 이소플루란 농도의 과정은 시간이 지남에 따라 유사했다. 할로겐화제의 농도가 설정된 직후, 농도는 첫 번째 시간 동안 상승했다.그런 다음 할로겐화 제의 투여가 중단될 때까지 고원에 도달했습니다. 투여 중단 후, 농도는 1 시간 이내에 감소. 여기에 가스 분석기에 의해 측정된 밀폐 챔버에서 시간이 지남에 따라 할로겐화 제의 분획이 도시되어 있습니다.이 절차는 상대적으로 저렴하 고 연구원 전에 밀 폐 챔버를 조작 한 적이 있는 경우에 채택 하기 매우 쉽습니다. 이 절차에 따라, 단백질 및 RNA 정량화, 면역 형광, 단백질 투과성 및 무료 수송의 측정과 같은 다른 방법은 상피 폐 손상 및 그 해상도 동안 할로겐화 제의 특정 효과에 대한 질문에 대답하기 위해 수행 될 수있다. 개발 후, 이 기술은 ARDS 도중 상피 폐 상해에 관련되었던 기계장치를 추가 공부하고 새로운 치료를 시험하기 위하여 급성 호흡 곤란 증후군의 필드에 있는 연구를 위한 도로를 포장할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

마우스 폐 삽관 법의 간단한 방법

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

연구

의학

Cytotoxic Efficacy of Photodynamic Therapy in Osteosarcoma Cells In Vitro

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골육종 세포의 광 역학 치료의 세포 독성 효능<em&gt; 체외</em

In recent years, there has been the difficulty in finding more effective therapies against cancer with less systemic side effects. Therefore Photodynamic ...

In vitro Method to Observe E-selectin-mediated Interactions Between Prostate Circulating Tumor Cells Derived From Patients and Human Endothelial Cells

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환자와 인간의 내피 세포에서 파생 된 전립선 순환 종양 세포 사이에 E-셀렉틴 매개 상호 작용을 관찰하는 시험 관내 방법에

Metastasis is a process in which tumor cells shed from the primary tumor intravasate blood vascular and lymphatic system, thereby, gaining access to ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

췌장암 새로운 치료 전략을 개발하기위한 전지 특성 줄기 공부

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

인간 종양 이종 이식에서 마우스 세포의 고갈은 크게 대상 세포의 다운 스트림 분석을 향상

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Studying the Role of Alveolar Macrophages in Breast Cancer Metastasis

유방암 전이에 폐포 대 식세포의 역할을 공부

This paper describes the application of the syngeneic model of breast cancer (4T1) to the studies on a role of pulmonary alveolar macrophages in cancer ...

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

포스 콜린 유발 장내 Organoids에 붓기 일 :<em&gt; 체외</em&gt; 분석 낭포 성 섬유증 환자의 약물 반응을 평가하기위한

Recently-developed cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-modulating drugs correct surface expression and/or function of the mutant ...

A Method for Quantifying Upper Limb Performance in Daily Life Using Accelerometers

가속도계를 사용하여 일상 생활에서 상지 성능을 정량화하는 방법

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. ...

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During In Vitro Wound Healing

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During  In Vitro Wound Healing

현미경 기반 방법을 생체 외에서 상처 치유 중 상피 세포 이동의 평가 대 한

Cell migration is a mandatory aspect for wound healing. Creating artificial wounds on research animal models often results in costly and complicated ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

각 막에 대 한 모델로 눈 버와 각 막 상피 마모 상처 치유

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...