Name: in vitro method to control concentrations of halogenated gases in cultured alveolar epithelial cells
Uploaded: 2018-10-23T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells at JoVE.com

Yazarlar kabul Auvergne bölge Konseyi ("programı Nouveau Chercheur de la Région Auvergne" 2013) ve Fransız Agence Nationale de la Recherche ve yön Générale de L'Offre de Soins ("programı de Recherche Translationnelle tr Santé" ANR-13-PRTS-0010) hibe için. Fon çalışma tasarım, davranış ve analiz veya bu makalenin hazırlanmasında hiçbir etkisi vardı.

1. kültür alveoler epitel hücresi (hAELVi)
<ol><li>Çözdürme<ol>
<li>Ekimi kullanıma hazır insan alveoler epitel (huAEC) orta 15 mL plastik tüp içinde 4 mL pipet ve hızlı bir şekilde önceden ısıtılmış su banyosu (37 ° C) şişede çözülme.</li>
		<li>Çözdürülen hücre süspansiyon orta 4 mL tüp 200 x g 5 min için de centrifuging önce içeren bir 15 mL plastik tüp aktarın.</li>
		<li>Süpernatant Aspire edin ve hücre Pelet yetiştirme ortamının 5 mL ile resuspend. Ardından hücreleri bi...

<ol>
	<li>Bellani, G., Laffey, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology,+Patterns+of+Care,+and+Mortality+for+Patients+With+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome+in+Intensive+Care+Units+in+50+Countries.">Epidemiology, Patterns of Care, and Mortality for Patients With Acute Respiratory Distress Syndrome in Intensive Care Units in 50 Countries.</a> JAMA:T Journal of the American Medical Association. 315 (8), 788-800 (2016).</li><li>Thompson, B. T., Chambers, R. C., Liu, K. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Respiratory+Distress+Syndrome.">Acute Respiratory Distress Syndrome.</a> The New England Journal of Medicine. 377 (6), 562-572 (2017).</li><li>Weiser, T. G., Regenbogen, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+estimation+of+the+global+volume+of+surgery:+a+modelling+strategy+based+on+available+data.">An estimation of the global volume of surgery: a modelling strategy based on available data.</a> The Lancet. (9633), 139-144 (2008).</li><li>Khuri, S. F., Henderson, W. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determinants+of+long-term+survival+after+major+surgery+and+the+adverse+effect+of+postoperative+complications.">Determinants of long-term survival after major surgery and the adverse effect of postoperative complications.</a> Annals of Surgery. 242 (3), 341-343 (2005).</li><li>De Conno, E., Steurer, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic-induced+improvement+of+the+inflammatory+response+to+one-lung+ventilation.">Anesthetic-induced improvement of the inflammatory response to one-lung ventilation.</a> Anesthesiology. 110 (6), 1316-1326 (2009).</li><li>Fu, H., Sun, M., Miao, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+different+concentrations+of+isoflurane+pretreatment+on+respiratory+mechanics,+oxygenation+and+hemodynamics+in+LPS-induced+acute+respiratory+distress+syndrome+model+of+juvenile+piglets.">Effects of different concentrations of isoflurane pretreatment on respiratory mechanics, oxygenation and hemodynamics in LPS-induced acute respiratory distress syndrome model of juvenile piglets.</a> Experimental Lung Research. 41 (8), 415-421 (2015).</li><li>Reutershan, J., Chang, D., Hayes, J. K., Ley, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+isoflurane+pretreatment+in+endotoxin-induced+lung+injury.">Protective effects of isoflurane pretreatment in endotoxin-induced lung injury.</a> Anesthesiology. (3), 511-517 (2006).</li><li>Uhlig, C., Bluth, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Volatile+Anesthetics+on+Mortality+and+Postoperative+Pulmonary+and+Other+Complications+in+Patients+Undergoing+Surgery:+A+Systematic+Review+and+Meta-analysis.">Effects of Volatile Anesthetics on Mortality and Postoperative Pulmonary and Other Complications in Patients Undergoing Surgery: A Systematic Review and Meta-analysis.</a> Anesthesiology: The Journal of the American Society of Anesthesiologists. 124 (6), 1230-1245 (2016).</li><li>Li, Q. F., Zhu, Y. S., Jiang, H., Xu, H., Sun, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+preconditioning+ameliorates+endotoxin-induced+acute+lung+injury+and+mortality+in+rats.">Isoflurane preconditioning ameliorates endotoxin-induced acute lung injury and mortality in rats.</a> Anesthesia and Analgesia. (5), 1591-1597 (2009).</li><li>Voigtsberger, S., Lachmann, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sevoflurane+ameliorates+gas+exchange+and+attenuates+lung+damage+in+experimental+lipopolysaccharide-induced+lung+injury.">Sevoflurane ameliorates gas exchange and attenuates lung damage in experimental lipopolysaccharide-induced lung injury.</a> Anesthesiology. (6), 1238-1248 (2009).</li><li>Englert, J. A., Macias, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isoflurane+Ameliorates+Acute+Lung+Injury+by+Preserving+Epithelial+Tight+Junction+Integrity.">Isoflurane Ameliorates Acute Lung Injury by Preserving Epithelial Tight Junction Integrity.</a> Anesthesiology. (2), 377-388 (2015).</li><li>Jabaudon, M., Boucher, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sevoflurane+for+Sedation+in+ARDS:+A+Randomized+Controlled+Pilot+Study.">Sevoflurane for Sedation in ARDS: A Randomized Controlled Pilot Study.</a> American Journal of Respiratory and Critical. , (2016).</li><li>Blondonnet, R., Audard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RAGE+inhibition+reduces+acute+lung+injury+in+mice.">RAGE inhibition reduces acute lung injury in mice.</a> Scientific Reports. 7 (1), (2017).</li><li>Jabaudon, M., Blondonnet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+Receptor+for+Advanced+Glycation+End-Products+Predicts+Impaired+Alveolar+Fluid+Clearance+in+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome.">Soluble Receptor for Advanced Glycation End-Products Predicts Impaired Alveolar Fluid Clearance in Acute Respiratory Distress Syndrome.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 192 (2), 191-199 (2015).</li><li>Jabaudon, M., Blondonnet, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soluble+Forms+and+Ligands+of+the+Receptor+for+Advanced+Glycation+End-Products+in+Patients+with+Acute+Respiratory+Distress+Syndrome:+An+Observational+Prospective+Study.">Soluble Forms and Ligands of the Receptor for Advanced Glycation End-Products in Patients with Acute Respiratory Distress Syndrome: An Observational Prospective Study.</a> PloS One. 10 (8), e0135857 (2015).</li><li>Kuehn, A., Kletting, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+alveolar+epithelial+cells+expressing+tight+junctions+to+model+the+air-blood+barrier.">Human alveolar epithelial cells expressing tight junctions to model the air-blood barrier.</a> ALTEX. 33 (3), 251-260 (2016).</li><li>Yue, T., Roth Z'graggen, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postconditioning+with+a+volatile+anaesthetic+in+alveolar+epithelial+cells+in+vitro.">Postconditioning with a volatile anaesthetic in alveolar epithelial cells in vitro.</a> The European Respiratory Journal: Official Journal of the European Society for Clinical Respiratory Physiology. 31 (1), 118-125 (2008).</li><li>Suter, D., Spahn, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+immunomodulatory+effect+of+sevoflurane+in+endotoxin-injured+alveolar+epithelial+cells.">The immunomodulatory effect of sevoflurane in endotoxin-injured alveolar epithelial cells.</a> Anesthesia and Analgesia. (3), 638-645 (2007).</li><li>Schl&#228;pfer, M., Leutert, A. C., Voigtsberger, S., Lachmann, R. A., Booy, C., Beck-Schimmer, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sevoflurane+reduces+severity+of+acute+lung+injury+possibly+by+impairing+formation+of+alveolar+oedema.">Sevoflurane reduces severity of acute lung injury possibly by impairing formation of alveolar oedema.</a> Clinical and Experimental Immunology. (1), 125-134 (2012).</li><li>Nickalls, R. W. D., Mapleson, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+iso-MAC+charts+for+isoflurane,+sevoflurane+and+desflurane+in+man.">Age-related iso-MAC charts for isoflurane, sevoflurane and desflurane in man.</a> British Journal of Anaesthesia. 91 (2), 170-174 (2003).</li><li>Bourdeaux, D., Sautou-Miranda, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+assay+of+plasma+sevoflurane+and+its+metabolite+hexafluoroisopropanol+by+headspace+GC-MS.">Simple assay of plasma sevoflurane and its metabolite hexafluoroisopropanol by headspace GC-MS.</a> Journal of Chromatography. B, Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 878 (1), 45-50 (2010).</li><li>Eger, E. I., Saidman, L. J., Brandstater, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimum+alveolar+anesthetic+concentration.">Minimum alveolar anesthetic concentration.</a> Anesthesiology. 26 (6), 756-763 (1965).</li><li>Perbet, S., Fernandez-Canal, C., Pereira, B., Cardot, J. M., Bazin, J. E., Constantin, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+Richmond+Agitation+Sedation+Scale+According+To+Alveolar+Concentration+of+Sevoflurane+During+a+Sedation+With+Sevoflurane+in+Icu+Patients.">Evaluation of Richmond Agitation Sedation Scale According To Alveolar Concentration of Sevoflurane During a Sedation With Sevoflurane in Icu Patients.</a> Intensive Care Medicine Experimental. 3 (Suppl 1), (2015).</li><li>Goolaerts, A., Pellan-Randrianarison, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditioned+media+from+mesenchymal+stromal+cells+restore+sodium+transport+and+preserve+epithelial+permeability+in+an+in+vitro+model+of+acute+alveolar+injury.">Conditioned media from mesenchymal stromal cells restore sodium transport and preserve epithelial permeability in an in vitro model of acute alveolar injury.</a> American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 306 (11), L975-L985 (2014).</li></ol>

Bizim iletişim kuralı bir halojenlenmiş anestezik Ajan, sevoflurane veya isoflurane gibi hassas bir kısmını yapan hücreleri göstermek için kolay bir yöntem açıklanır. Ayrıca, biz burada rapor — ilk kez — gaz kesir ve sevoflurane ve kültür ortamı içinde isoflurane konsantrasyon arasında sıkı bir ilişki. Bu temel adım şimdi güvenli bir şekilde bizim hava geçirmez odası kültürlü monolayer insan alveoler epitel hücrelerinin içinde halojenlenmiş bu ajanların etkileri çalışma kullanmak...

Akut Respiratuar distress Sendromu (ARDS) yaygın alveoler yaralanma, akciğer ödemi ve hypoxemic solunum yetmezliği ile karakterize klinik bir sendrom var. Yoğun bakım ünitesi (ICU) kabul fazla % 10 ve mekanik havalandırma gerektiren ICU hastaların yaklaşık % 25 ARDS temsil eder, hala 35-%451bir hastane ölüm oranı ile klinisyenler için altında tanınan bir sorun olsa da. Yoğun araştırma rağmen bugüne kadar bir etkili ARDS farmakolojik tedavi veya önleme başarısız oldu. İki yeni özellikler katkıda ARDS mortalite için: Engelliler alveoler sıvı izni (AFC) (Yani, alveoler ödem sıvısı distal akciğer hava sahaları üzerinden değişmiş rezorpsiyonu) ve şiddetli inflamasyon2. ARDS ölüm oranı yüksek kalır beri geçerli girişimler de birincil korunma içermelidir; Ancak, önemli bir sorun risk altındaki hastalarda ARDS geliştirmek için büyük olasılıkla olduğunu ve ARDS ve eğer kim yararlanacak belirlemektir.
Sevoflurane ve isoflurane, gibi uçucu halojenlenmiş anestezikler ameliyathanede genel anestezi sağlamak için yaygın olarak kullanılır. Dünya çapında, her yıl önemli bir ameliyat geçiren 230 milyondan fazla hasta genel anestezi ve mekanik havalandırma3gerektirir ve pulmoner komplikasyonlar Ģunları klinik sonuçlar ve sağlık kullanımı4 olumsuz . Sevoflurane propofol yerine kullanımı Gelişmiş akciğer iltihabı göğüs cerrahisi ve ARDS ve pulmoner komplikasyonlar Ģunları5gibi olumsuz olayların önemli düşüşler uygulanan hastalarda ile ilişkili idi. Benzer şekilde, Önarıtma isoflurane ile solunum mekaniği, oksijen ve hemodinami koruyucu etkileri ARDS6,7' nin deneysel hayvan modellerinde vardı. Her ne kadar daha fazla çalışmaları inhale ajanlar noncardiac cerrahi sonuçlar üzerine etkisini gidermek için garanti altındadır, pulmoner komplikasyonlara benzer bir düşüş bir meta-bu inhale anestezik ajanların gösteren analizi, son zamanlarda gözlenmiştir — olarak intravenöz anestezi için karşı — önemli ölçüde mortalite kalp cerrahisi8için bir azalma ile ilişkili olan.
Uçucu ajanlar kullanımı önlemek veya tedavi akciğer hasarı ICU hastaların sedasyon için hakkında belirli olası veri eksik. Ancak, çeşitli denemeler şimdi etkinlik ve inhale sevoflurane Emanet ICU hastalar sedasyon için destekler ve preklinik çalışmalar göstermiştir inhale sevoflurane ve isoflurane7,9 gaz değişimi geliştirmek, azaltmak alveoler ödem ve ARDS deneysel modelleri attenuate iltihabı. Ayrıca, İsoflurane modülasyon sıkı kavşak protein11aracılığıyla alveoler-kılcal bariyer bütünlüğünü korur, ancak sevoflurane tip II epitel hücre hasarı10, azaltıcı etkendir. Ancak, daha fazla çalışmaları ne ölçüde organ koruma inhale sevoflurane ve isoflurane deneysel kanıt insanlar için tercüme olabilir doğrulamak için ihtiyaç vardır. İlk tek-merkezi kontrollü-randomize (RCT) bizim grup hastalarda ARDS inhale sevoflurane erken kullanımı geliştirilmiş oksijenlenme, düşük düzeyde bazı pro-inflamatuar işaretleri ve azaltılmış akciğer epitel ile ilişkili bulundu , plazma ve alveoler sıvı12' çözünür formun gelişmiş glikasyondan son-ürünleri (sRAGE) için reseptör düzeyleri tarafından değerlendirildi zarar.
Birlikte ele alındığında, sevoflurane ve isoflurane yararlı etkileri akciğer yaralanma üzerinde birden fazla biyolojik yollar veya öfke yolu üzerinde bağımlı olan fonksiyonel işlemleri yani alveoler sıvı izni (AFC), epitel yaralanma işaret edebilir, Nükleer faktör (NF) translocation-κB ve makrofaj harekete geçirmek. Buna ek olarak, sevoflurane ifade öfke protein etkileyebilir. Araştırma ekibimiz ve diğerleri tarafından önceki araştırma çok önemli roller için öfke alveoler inflamasyon ve akciğer epitel yaralanma/onarım sırasında ARDS destekler beri biz mekanizmaları translasyonel bir anlayış sağlamak için deneysel bir model tasarlanmıştır Sevoflurane akciğer hasarı ve onarım13,14,15dakika sonra. HAELVi (insan alveoler epitel LentiVirus periferik akciğerin hava-kan bariyerini eğitim için özel olarak tasarlanmış bir roman insan alveoler epitel birincil hücre çizgide sevoflurane ve isoflurane vitro etkileri incelenmiş , fonksiyonel sıkı kavşak16dahil olmak üzere alveoler tip ben gibi özellikleri ile ölümsüzleşmiş).
Bizim vitro araştırmalar tasarım hazırlanırken (Örneğin, "inhale" sevoflurane veya isoflurane maruz kalma ile hava-sıvı arayüzey, alveoler epitel hücreleri kültürleri, anladık üzerinden daha önce yayınlanan bu çalışmalar sevoflurane kesirler yalnızca standart monitör (bir klinik ortamda kullanılanlara benzer) kullanma "hava" arabirimi17,18,19 değerlendirildi. Halojenli Ajan konsantrasyonları genellikle en az alveoler konsantrasyon (MAC) değerlerine göre seçildi (Örneğin, insanlarda, sevoflurane için 0.5, 1.1 ve 2.2 vol % 0.25, 0.5 ve 1 MAC, temsil eden, isoflurane, 0,6, 0.8, için sırasıyla; ve 1.3 vol % 0.25, 0.5 ve 1 MAC, sırasıyla temsil eden)20. Gerçekten de, sevoflurane ve isoflurane konsantrasyonları asla kültür böylece önceki deneysel modeller/aletler geçerliliğini sınırlayıcı ortamda kendisi, araştırdı. Ayrıca, çoğu deneyler hava karışımı içeren sevoflurane içinde oraya atılıp sifon çekilmiş sonra mühürlü bir anaerobik kavanoz kullanılır. Amacımız alveoler epitel hücreleri "fizyolojik" koşullar altında çalışmaya olduğu gibi anaerobik bir duruma en uygun olmayabilir ve uzun deneysel süreleri ile uyumlu olmaz inanıyordu. Bu nedenle, bizim sistemimizde kültür hücreleri vasıl hava-sıvı arayüzey için geliştirilen ve acentelere halojenli (sevoflurane ve isoflurane) hassas kontrollü "hava" kesirler ve bu aracılar için "Orta" konsantrasyonu sağlamak amacı ile karşılaşmazlar. Bize göre bugüne kadar literatürde bildirilmiştir değil, bu deneysel adım önce herhangi bir ilave vitro araştırmalar sevoflurane ve isoflurane zorunludur.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Sevoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td></td>
			<td>Performing experiments using sevoflurane or isoflurane while being pregnant should be strongly discouraged</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Virbac</td>
			<td></td>
			<td>Performing experiments using sevoflurane or isoflurane while being pregnant should be strongly discouraged</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Alveolar Epithelial cells</td>
			<td>InScreenex</td>
			<td>INS-CI-1015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>huAEC Medium (ready-to-use)</td>
			<td>InScreenex</td>
			<td>INS-ME-1013-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic machine circuit</td>
			<td>Drager</td>
			<td>Fabius</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas analyzer</td>
			<td>Drageer</td>
			<td>Vamos Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthetic gas filter</td>
			<td>SedanaMedical</td>
			<td>FlurAbsord</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated Humifier</td>
			<td>Fisher&#38;Paykel</td>
			<td>MR850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chamber</td>
			<td>Curver</td>
			<td>00012-416-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatography coupled with mass detection</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, San Jose, CA, USA</td>
			<td>Trace 1310 with TSQ 8000evo</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fused-silica column (30 m x 1.4 &#181;m, 0.25 mm ID)</td>
			<td>Restek, Lisses, France</td>
			<td>Rxi-624Sil MS</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vitro method to control concentrations of halogenated gases in cultured alveolar epithelial cells

Akut Respiratuar distress Sendromu (ARDS) Engelli alveoler sıvı temizlik ve şiddetli inflamasyon ile yaygın alveoler yaralanma sendromu var. Sevoflurane veya isoflurane, gibi halojenlenmiş ajanlar kullanımı yoğun bakım ünitesi (ICU) hastaların sedasyon için gaz değişimi geliştirmek, alveoler ödem azaltmak ve enflamasyon sırasında ARDS azalt. Ancak, inhale ajanlar kullanımı sürekli sedasyon bakımda tedavi etmek ya da akciğer hasarı önlemek için veri eksik. Halojenli ajanların etkileri "fizyolojik" koşullar altında alveoler epitel hücreleri üzerinde çalışmaya, kültür hücrelere hava-sıvı arayüzü kolay bir sistem tarif ve hassas kontrollü "hava" kesirler sağlamak için halojenlenmiş acentelere tanıttığını ve Bu aracılar için "Orta" konsantrasyonları. Hangi insan alveoler epitel ölümsüzleştirdi hücreleri ile plakalar sevoflurane veya bir anestezik makine devre tarafından sağlanan bir sürekli gaz akışı kullanarak isoflurane kesin, kontrollü bir kısmını maruz olabilir kapalı bir hava geçirmez odası geliştirdik. Hücreleri sevoflurane % 4'ü ve isoflurane % 1'için 24 saat boyunca maruz kalmışlar. Gaz kütle spektrometresi ortamda çözünmüş halojenlenmiş ajanların konsantrasyonu belirlemek için gerçekleştirildi. Sonraki ilk saat, sevoflurane ve orta isoflurane konsantrasyonları 251 mg/L 25 mg/L, idi. Sevoflurane ve isoflurane konsantrasyonları temsil eden eğrileri maruz kaldıktan sonra bir saatte ulaştı bir plato ile zaman içinde benzer dersler gösterdi ortamda çözünmüş.
Bu iletişim kuralı sevoflurane veya isoflurane vitro mekanizmaları epitel akciğer hasarı ARDS sırasında katılan anlayışımızı geliştirmek ve yeni tedaviler için sınamak için hassas ve kontrollü konsantrasyonları ulaşmak için özel olarak tasarlanmıştır sendromu.

Sevoflurane ve orta zaman içinde çözünmüş, isoflurane konsantrasyonları Tablo 1 ve Tablo 2, sırasıyla bildirdi.
Orta sevoflurane ve isoflurane konsantrasyonlarda derslerin zamanla benzerdi. Hemen halojenlenmiş Aracısı gerekli konsantrasyonu ayarladıktan sonra konsantrasyonları ilk saatten fazla yükseldi. Bir plato halojenlenmiş aracısının yönetim durdurulana kadar hangi kalı...

Watch this Scientific Journal Video about In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells at JoVE.com

In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells

Biz sevoflurane veya isoflurane vitro kesin ve kontrollü konsantrasyonları mekanizmaları epitel akciğer yaralanmalara dahil anlayışımızı geliştirmek ve Roman sınamak için ulaşmak için özel olarak tasarlanmış kolay bir iletişim kuralı tanımlamak Akut Respiratuar distress sendromu için terapiler.

Vitro Denetim konsantrasyonları kültürlü alveoler epitel hücrelerdeki halojenlenmiş gazların yöntemi

Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is a syndrome of diffuse alveolar injury with impaired alveolar fluid clearance and severe inflammation. The ...

Bu yöntem, akut solunum sıkıntısı sendromu için potansiyel yeni tedaviler olarak halojenli yardımcı test gibi akciğer hasarı ve onarım araştırma alanında anahtar soruya cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, hücreleri kültüre almak ve kesin ve kontrollü konsantrasyonlara ulaşmak için halojenli ajanlara maruz bırakmak için çok basit bir yönteme dayanmasın. Hava geçirmez oda inşa etmek için, 6,5 litre kapasiteli bir hermetik polipropilen kutu kullanın.Kutunun yan duvarının alt tarafında 2,5 santimetre çapında bir delik açın. Sonra gaz hava karışımı giriş borusu olarak hizmet verecek yeşil bir işareti ile oluklu bir tüp takın. Ve silikonla mühürle.Daha sonra, karşı lateral duvarın üst tarafında 2,5 santimetre çapında ikinci bir delik matkap. Kırmızı bir işaret ile başka bir oluklu tüp yerleştirin ve gaz hava karışımı çıkış borusu olarak hizmet verecek bir kömür filtresi ile bağlayın. Sonra silikon ile mühür.Daha sonra duvarın merkezinde dört milimetre çapında sıkı bir delik matkap. Dönen bir erkek yem kilidi ile bir manifoldu bağlı kısa infüzyon boru ekleyin. Bir gaz analizörüne takın ve silikonla kapatın.Daha sonra hava geçirmez odanın içine dijital bir termometre yerleştirin. Bir laboratuvar çıkarıcı başlık altında, karbondioksit ile azot oksit gaz hattı geçmek için bir anestezik makine devresi özelleştirin. Gaz akışı karışımını yaklaşık 37 santigrat dereceye ısıtmak için anestezi makinesi ile hava geçirmez oda arasındaki boruya ısıtılmış bir nemlendirici yerleştirin.Hava geçirmez hazneyi yeşil işaretli oluklu tüple özelleştirilmiş anestezik makine devresine takın. Daha sonra, 37 santigrat dereceye ayarlanmış bir sıcak plaka üzerine hava geçirmez oda yerleştirin. Hava geçirmez haznesine insan alveolar epitel hücrelerini içeren altı kuyuluk plakası yerleştirin ve kapağı kapatın.Co2'nin %5'ini hızlı bir şekilde elde etmek için gaz akış hızını düzenleyin. Sonra halojenli ajan evaporatör açın ve istenilen yüzdeyi ayarlayın. Hedef değerlere ulaşıldıktan sonra, taze gaz akış hızını dakikada bir litreye düşürün.Hava geçirmez hazne, deney için gerekli olduğu sürece bu gaz akış hızı ile korunabilir. Orta daki sevofluran ve isofluran emzit konsantrasyonlarının dersleri zaman içinde benzerdi. Halojenli ajanın gerekli konsantrasyonu ayarlandıktan hemen sonra, konsantrasyonlar ilk saat içinde yükseldi.Daha sonra halojenli ajanın yönetimi durdurulana kadar devam eden bir platoya ulaşıldı. Yönetim kesintisinden sonra konsantrasyonlar bir saat içinde azaldı. Burada gösterilen gaz analizörü tarafından ölçülen hava geçirmez odasında zaman içinde halojenli ajan fraksiyonları vardır.Bu prosedür nispeten ucuz ve araştırmacılar daha önce hava geçirmez bir oda manipüle hiç olsa bile benimsenmesi çok kolay. Bu prosedürü takiben, epitel akciğer hasarı sırasında halojenli ajanların spesifik etkileri ve çözünürlüğü ile ilgili soruları yanıtlamak için protein ve RNA nicelliği, immünfloresans, protein geçirgenliği ölçümü ve serbest taşıma gibi diğer yöntemler de uygulanabilir. Bu teknik, gelişiminden sonra ARDS sırasında epitelyal akciğer hasarına neden olan mekanizmayı daha fazla incelemek ve yeni tedavileri test etmek için akut solunum sıkıntısı sendromu alanında araştırma yapmanın önünü açabilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

In Vitro Method to Control Concentrations of Halogenated Gases in Cultured Alveolar Epithelial Cells

A Simple Method of Mouse Lung Intubation

Fare Akciğer Entübasyonun Basit Bir Yöntem

A  simple procedure to intubate mice for pulmonary function measurements would  have several advantages in longitudinal studies with limited numbers or  ...

Cytotoxic Efficacy of Photodynamic Therapy in Osteosarcoma Cells In Vitro

Cytotoxic Efficacy of Photodynamic Therapy in Osteosarcoma Cells In Vitro

Osteosarkom Hücrelerde Fotodinamik Tedavi sitotoksik etkinliği<em&gt; In Vitro</em

In recent years, there has been the difficulty in finding more effective therapies against cancer with less systemic side effects. Therefore Photodynamic ...

In vitro Method to Observe E-selectin-mediated Interactions Between Prostate Circulating Tumor Cells Derived From Patients and Human Endothelial Cells

In vitro Method to Observe E-selectin-mediated Interactions Between Prostate Circulating Tumor Cells Derived From Patients and Human Endothelial Cells

Hastalar ve İnsan endotel hücrelerinden türetildiği Prostat dolaşımdaki tümör hücrelerinin arasında E-selektin aracılı Etkileşimleri gözlemleyin vitro Yöntemi

Metastasis is a process in which tumor cells shed from the primary tumor intravasate blood vascular and lymphatic system, thereby, gaining access to ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Pankreas Kanseri Yeni Tedavi Stratejileri Geliştirme Hücre Özellikleri Kök incelenmesi

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

İnsan Tümör ksenogratflarının gelen Fare Hücrelerinin tükenmesi Anlamlı Hedef Hücre Alt Analizi geliştirir

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Studying the Role of Alveolar Macrophages in Breast Cancer Metastasis

Meme Kanseri Metastaz alveoler makrofajlar Rolü incelenmesi

This paper describes the application of the syngeneic model of breast cancer (4T1) to the studies on a role of pulmonary alveolar macrophages in cancer ...

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin-induced Swelling in Intestinal Organoids: An In Vitro Assay for Assessing Drug Response in Cystic Fibrosis Patients

Forskolin kaynaklı bağırsak Organoids şişme: Bir<em&gt; İn Vitro</em&gt; Deney Kistik Fibrozis Hastalarında İlaç Tepki değerlendirilmesi için

Recently-developed cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)-modulating drugs correct surface expression and/or function of the mutant ...

A Method for Quantifying Upper Limb Performance in Daily Life Using Accelerometers

Ivmeölçer kullanan Günlük Yaşamda Üst Ekstremite Performans miktarının Bir Yöntem

A key reason for referral to rehabilitation services after stroke and other neurological conditions is to improve one's ability to function in daily life. ...

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During In Vitro Wound Healing

Microscopy Based Methods for the Assessment of Epithelial Cell Migration During  In Vitro Wound Healing

Mikroskopi Vitro yara iyileşmesi sırasında epitel hücre göç değerlendirilmesi için yöntemleri temel

Cell migration is a mandatory aspect for wound healing. Creating artificial wounds on research animal models often results in costly and complicated ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Kornea epitel aşınma oküler Burr ile bir Model olarak kornea için yara iyileşme

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...