Name: ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies
Uploaded: 2019-02-15T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af NIH-NEI R01 EY024942, forskning for at forebygge blindhed, Upstate medicinske universitet ubegrænset forskningsmidler, og Lions distrikt 20-Y. mikroskopi og billedanalyse af paraffinsnit blev udført kernen mikroskopi og histologiske dias forberedelse blev udført på Biorepository og patologi CORE på Icahn School of Medicine på Mount Sinai.

1. orgel kultur
<ol><li>
Præparater
	<ol>
<li>Forberede agar løsning som følger. I en lille kolbe, forberede 1% agar og 1 mg/mL bovine kollagen i DMEM-F12 op til 20 mL. Bring i kog på en varm tallerken. Sætte løsningen i en 50 mL konisk slange. Sted rør i et vandbad på en varmeplade til at holde løsningen fra solidifying.</li>
		<li>Forberede suppleres med serum-gratis medier (SSFM) pr sammensætning fremgår af Tabel af materialer. Bemærk: Den nødvendige...

Denne protokol beskriver en model for at studere sårheling i en stratificeret 3D natur. Brug af orgel kultur som en mellemting mellem cellekultur og in vivo-undersøgelser reducerer omkostninger samt reducere procedurer på levende dyr. Andre 3D modeller har været til stor gavn for feltet herunder selv syntetisere kollagen geler fremstillet af primære menneskelige hornhinde fibroblaster2 eller disse samme celler der er indlejret i geler fremstillet af dyr-afledte collagens31</...

Ardannelse i hornhinden som følge af skade, traume eller infektion kan føre til invaliderende opaciteter og permanent synstab. Der er således et kritisk behov for at identificere veje, der kan målrettes for terapeutisk intervention. Nuværende behandlingsmuligheder er begrænset og består primært af cornea transplantationscentre, som ikke er tilgængelige for patienter i hele verden. Både menneskelige (figur 1) og animalske hornhinder kan udnyttes til 2D og 3D cellekultur studier1,2. Menneskelige Kadaver hornhinder ikke egnet til transplantation kan fås fra øjet banker eller centraliseret vævsbanker (nationale sygdom forskning Interchange (NDRI)), og dyrs øjne kan fås fra et slagteri. Primære hornhinde epitelceller, stromale fibroblaster og mere for nylig, endotelceller, kan isoleres og kulturperler fra disse væv for sårheling og toksikologiske undersøgelser3,4,5. Ud over betydningen af forståelse af det molekylære grundlag af blændende øjensygdom, gjort adgangen til væv og evnen til at kultur primærelementer hornhinden en vigtig modelsystem for undersøgelse. Hornhinden er ideel til at teste virkningerne af agenter på ardannelse som normale hornhinden er gennemsigtig og visse typer af sår oprette opaciteter eller fibrotisk ar (gennemgik i6). Flere i vivo hornhinde sår healing modeller har også udnyttet flittigt for ardannelse undersøgelser1. Mindre udnyttede har været i ex vivo hornhinde sår healing model7,8 der er beskriver i detaljer her. Målet med denne metode er at kvantificere ardannelse resultater karakteriseret ved fibrotisk beslutningstagere i en 3D flercellede hornhinde ex vivo modelsystem.
Hornhindens epitel sårede, der ikke overstiger den epitel basalmembranen normalt lukker inden for 24-72 h9. Snart efter sårede starte celler på kanten af epitel spredning og overflytning i epitelial gratis overfladen, for at genoprette epitel barriere funktion. Denne aktivitet er sekventielt efterfulgt af aktivering af cornea basalcelle spredning først, og i en senere fase, forløber celler beliggende på ydre limbal zone at opnå tilbagebetaling af epitelcelle masse10,11. Disse sår helbrede ofte uden ardannelse. Dog resulterer et sår, der trænger ind basalmembranen i stroma ofte i ar dannelse1. Efter hornhindens stroma sårede, er stroma befolket med celler af flere oprindelse herunder differentierede bosiddende stromale celler samt knoglemarv-afledte fibrocytes12,13,14. Fibrotisk ardannelse er karakteriseret af persistens af myofibroblasts i en helbredende såret. Disse patologiske myofibroblasts vise øget friktion gennem akkumulering af integriner i fokale sammenvoksninger, kontraktile α-glat-muskel aktin (α-SMA) stress fibre og lokal aktivering af ekstracellulære matrix (ECM)-afsondret latent-omdanne vækst faktor-beta (TGFβ). Differentiering af epitel-afledte celler, kendt som epitelial mesenchymale overgangen (EMT), kan også bidrage til at ar dannelse6.
Der er en hårfin balance mellem Celledifferentiering og apoptose efter såret. På grund af brud i basalmembranen, vækst faktorer såsom Trombocyt-afledt vækst faktor (PDGF) og TGFβ fra tårer og epitel bade stroma, inducerende myofibroblast differentiering, en vedvarende autocrine løkke i TGFβ aktivisering, og den sekretion af uorganiseret fibrotisk ECM15,16. Persistens af myofibroblasts i det helede sår fremmer haze og ardannelse i hornhinden (figur 2). Dog i regeneratively helede sår selvom myofibroblasts udvikle, de apoptose og dermed er fraværende eller væsentligt reduceret i antal i de helbredt væv (gennemgik i reference6,10). Forskning på fibrotisk ardannelse har således fokuseret i det mindste delvis på målretning molekyler, der forhindrer overdreven myofibroblast udvikling eller myofibroblast persistens17,18. Fordi myofibroblast persistens kendetegner både ardannelse og fibrotisk sygdom i alle væv19, kan hornhinden være nyttig som et modelsystem til at studere almindelige cellulære mekanismer af fibrose.
I vores modelsystem, er hornhinden såret med en cylindrisk kniv kaldet en trephine mens stadig i verden. Menneskelige og gris hornhinder kan blive såret med enten en 6 eller 7 mm trephine; for kanin hornhinder foretrækkes en 6 mm trephine. Gris hornhinden er nogenlunde samme størrelse som den menneskelige hornhinden. Fordi de er omkostningseffektive og let tilgængelige i stort tal, er svin hornhinder rutinemæssigt anvendes for orgel kultur. Derudover har antistoffer og siRNAs gjort at reagere med menneskelige konsekvent cross-reacted med gris7. Efter at have såret, hornhinder er skåret fra hele kloden med limbus intakt og monteret på en agar/kollagen base. Hornhinder er kulturperler i serumfrit media plus stabiliseret vitamin C for at simulere fibroblast spredning og ECM deposition20. Hverken tilsætning af serum eller vækstfaktorer er nødvendige for at fremkalde myofibroblast dannelse7. Hornhinder er rutinemæssigt fast og forarbejdet til histologi efter to ugers kultur. Gen knockdown eller afprøve virkningerne af en agent for sårheling, såret kan behandles med siRNA i såret efter såret7 eller en opløselig agent kan føjes til medierne, henholdsvis8.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10-010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>91670049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Collagen Solution</td>
			<td>Advance Biomatrix</td>
			<td>5005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pig eyes with lids attached&#160;</td>
			<td>Pel-freeze, Arkansas</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm trephine&#160;</td>
			<td>Katena</td>
			<td>K28014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade&#160;</td>
			<td>Personna</td>
			<td>0.009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small scissor</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>895110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>08953-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kim Wipes&#160;</td>
			<td>Kimberly-Clark&#8482; 34120</td>
			<td>06-666</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm cell culture dishes&#160;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplemented Serum- Free media (SSFM)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add all of the following components to DMEM/F-12:&#160; ITS, RPMI, Glutathione, L-Glutamine, MEM Non essential amino acids, MEM Sodium Pyruvate, ABAM, Gentamicin, Vitamin C.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ITS Liquid Media Supplement&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I3146</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 Vitamins Solution&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R7256</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutathione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6013</td>
			<td>Use at 1 &#181;g/mL. Freeze aliquots; do not reuse after thawing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% L-glutamine solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030-081</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-essential amino acids solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Sodium pyruvate solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11360</td>
			<td>1 M Stocks (1000X) and freeze in single use aliquits.&#160; Use from freezer each time media is made.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABAM&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7292</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>30-005-CR</td>
			<td>200X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin C&#160;</td>
			<td>Wako</td>
			<td>070-0483</td>
			<td>2-0-aD Glucopyranosyl-Ascorbic Acid. 1 mM stocks (1000x)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Iodine&#160;</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>SI86-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Path Cassettes&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum (NGS)</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>005-000-121</td>
			<td>We use 3% NGS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Media&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe Clear&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>314-629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Alcohol</td>
			<td>Ultra Pure</td>
			<td>200CSGP</td>
			<td>200 Proof, diluted at 100%, 70%, 50%)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP327</td>
			<td>10mM, pH 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>M10742500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluing agent&#160;</td>
			<td>Ricca Chemical Company</td>
			<td>220-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% Triton X-100</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>9002-93-1</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1% Tween 20&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP337</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3% Hydrogen Peroxide&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>H324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Kit&#160;</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar&#160;</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>BP1423-500</td>
			<td>Agar solution: prepare 1% agar and 1 mg/mL bovine collagen in DMEM-F12 up to 20 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bermis</td>
			<td>13-374-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moist Chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use any chamber, cover it with wet Wipe Tissue and then put a layer of Parafilm over it.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiagen RNAprotect Cell Reagent</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>&#160;76104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambion PureLink RNA Mini Kit</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>12183018A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Fibronectin-EDA Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F6140</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle actin Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2547 or C6198 (cy3 conjugated)</td>
			<td>1:200 Diluted in 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permafluor&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>62-6520</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for a-SMA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgM (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>PA1-85999</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for FN-EDA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, Cy3&#160;</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>115-165-146</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum (for a-SMA, Fluorescence staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Zeiss Axioplan2&#160;</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPOT-2</td>
			<td colspan="2">Diagnostic Instruments, Sterling Heights, Michigan</td>
			<td>CCD camera</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies

Hornhinden er blevet brugt flittigt som et modelsystem til at studere sårheling. Evnen til at generere og udnytte primære pattedyrsceller i to-dimensionelle (2D) og tre-dimensionelle (3D) kultur har genereret et væld af oplysninger ikke blot om hornhinde biologi, men også om sår healing, myofibroblast biologi, og ardannelse i almindelighed . Målet med protokollen er en assay system til kvantificering af myofibroblast udvikling, der kendetegner ardannelse. Vi demonstrere en hornhinde orgel kultur ex vivo model ved hjælp af gris øjne. I denne forreste keratectomy sår, såret hornhinder stadig i verden med en cirkulær blade kaldes en trephine. Et stik af ca 1/3 af den forreste hornhinden er fjernet, herunder epitel, basalmembranen og den forreste del af stroma. Efter såret, er hornhinder skåret fra hele kloden, monteret på et kollagen/agar base og kulturperler i to uger suppleret serum gratis medium med stabiliseret vitamin C at forøge celleproliferation og ekstracellulære matrix sekretion af hjemmehørende fibroblaster. Aktivering af myofibroblasts i den forreste stroma er tydelig i helede hornhinden. Denne model kan bruges til at analyse sår lukning, udvikling af myofibroblasts og fibrotisk markører og til toksikologiske undersøgelser. Derudover kan virkningerne af lille molekyle hæmmere samt lipid-medieret siRNA Transfektion for gen knockdown testes i dette system.

Immunhistokemi er den primære assay udnyttet til at analysere succesen af ex vivo sår healing eksperiment. Figur 4 viser epitel og anterior stroma i kontrol væv (figur 4A, 4B). Seks timer efter sårede, var epitel fraværende (figur 4 c, 4 D). Seks dage efter såret som forventet, havde epitel regrown (figur 4E, 4F). ...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

En protokol til en ex vivo hornhinde orgel kultur model nyttigt for sårheling undersøgelser er beskrevet. Denne modelsystem kan bruges til at vurdere virkningerne af agenter til at fremme regenerativ heling eller lægemiddeltoksicitet i en organiseret 3D flercellede miljø.

Ex Vivo sårheling hornhinde orgel kultur Model for undersøgelser

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Dette papir beskrev en simpel metode til at analysere sår i en tre-dimensionel, multi-cellulære organ kultur model system. Vi gør dette ved hjælp af gris øjne, men selvom du ikke er bekendt med øjne, kan du gøre denne analyse. Som et overblik, modtog vi svin øjne, skåret ud glober, lave et cirkulært sår i hornhinden, der går gennem epitel og omkring en tredjedel af stroma.Vi skærer hornhinden, og montere den på en Agar base, og sætte denne konstruktion i kuvøse. Vævet vil udfylde skabe et ar i hornhinden. Du behøver ikke at tilføje nogen vækstfaktorer, eller endda serum.Dette gøres i serum-fri medier. Selv om dette udføres i hornhinden, det kan bruges som en model system til fibrotisk heling i almindelighed. Som mange af de cellulære veje, der aktiveres under ardannelse er ens mellem systemer.I en biosikkerhedshætte skal du bruge en lige kant kirurgisk klinge til at fjerne kloden fra låget på et ethanolrensede skærebræt og fjerne det overskydende fedtvæv fra hvert øje. Holde den rensede globus posteriort med snævler straks dyppe øjet i PBS efterfulgt af tre hurtige dips i 10% jod, og to hurtige dips i PBS. Derefter wrap øjet circumferentially med en ren lab væv til wrap med nok pres for at opnå en stram hornhinde overflade uden at kontakte hornhinden.Ved hjælp af en seks millimeter trephin, trænge ind i epitel i den forreste stroma i midten af hornhinden uden at gøre en fuld tykkelse sår gennem hele hornhinden, og rotere trephine 180 grader med uret og mod uret fem gange, mens du anvender let tryk for at uddybe såret. Når såret er dybt nok til at tillade en væv flap, der skal løftes med scer, bruge en kirurgisk klinge til at skære flappen parallelt med kloden, samtidig med at løfte den forreste hornhinde inden for sårmarginen. Når hele flappen er fjernet, skal et cirkulært sår placeres i midten af hornhinden.At høste hornhinden gribe øjet med lab væv, og bruge en kirurgisk klinge til at gøre et lille snit en millimeter væk fra kanten af hornhinden til at omfatte limbus og væv indsamling. Ved hjælp af små, skarpe saks fortsætte snittet rundt om i verden at holde en millimeter margin over hornhinden for at holde limbus i takt. Derefter placeres hornhinden, sårsiden ned, i en 60 millimeter, eller 100 millimeter skål, der indeholder en milliliter PBS.At montere hornhinden, bruge to par kraftvænsker til at holde hornhinden epitel-side op for at skabe en kop, og bruge en steril overførsel pipette til at tilføje varmet agar opløsning i hornhinden, indtil koppen er fuld. Efter agar hærder, omhyggeligt placere hornhinden i en ny 60 millimeter plade agar-side ned og dække pladen med et låg. Derefter tilsættes fire milliliter suppleret serumfrit medium til hver plade af hornherne, der opretholder hornhinden ved en luft-væske-grænseflade ved den limbale grænse i en cellekulturinkubator ved 37 grader celsius i 5 % kuldioxid, og fugter hornhinden en gang dagligt med en dråbe suppleret serumfrit medium fra det konditionerede medium i skålen for at holde vævet hydreret.For gen knockdown blandes fem mikroliter af små interfererende eller siRNa med 50 mikroliter reduceret serum minimum vigtigt medium og to mikroliter af transfektion reagens. Med 50 mikroliter af reduceret serum medium per hornhinde. Efter fem minutter blandes de to blandinger sammen, og der tilsættes 200 mikroliter reduceret serum minimum medium til hver siRNA blanding.Derefter pipette siRNA løsninger falde klogt på hvert sår. Sæt derefter hornhinden i kuvøsen. Efter tre timer, bruge mediet i hver skål til at vaske siRNA fra hornhinden overflader, og erstatte den konditionerede medium i hver skål med frisk suppleret serum gratis medium plus antibiotika.Derefter returnere hornhinden kulturer til cellekultur inkubator, og inkubere i to uger. Seks timer efter såret, hornhinden epitel er fraværende. Seks dage efter såret, epitel regrows.Fluorescens amino farvning med alpha glat muskel actin afslører en gradient af aktive myofibroblaster langs sårmarginen fra den forreste til bageste stroma. Immuno-histokemiske farvning for alpha glat muskel actin afslører en dramatisk stigning i alpha glat muskel actin protein udtryk i såret plus kontrol siRNA hornherne. Sammenlignet med udpolerede og mål protein siRNA behandlet, sårede hornherne.Tilsvarende er fibronectin ekstra domæne A upregulated i siRNA behandlet sårede hornherne sammenlignet med afviklet og mål protein siRNA behandlet sårede hornherne. Demonstrere en vellykket banke ned af målet protein. Endvidere, behandling af de sårede hornherne med toksinet, at uspecifikke mål målet protein forhindrer re-epitelisering og resulterer i kvalitativcelledød, en uorganiseret matrix, og stromale vakuoler tyder på, at toksinet ikke fremmer heling ved koncentrationen analyseres.Afslutningsvis, mens du forsøger denne procedure er det vigtigt at huske at holde bladet parallelt med vævet, mens skæring, så det ikke trænger ind i kloden. Forskellige sår teknikker kan anvendes med denne analyse, herunder kemisk brænde eller epitel skrabe. Det kan også bruges til lægemiddeltoksicitet assays at afgøre, om epitel heler og med hvilken hastighed.Dette er en omkostningsbesparende ex vivo, organkultur model system, der kan gå forud for din in vivo sårheling undersøgelser.

Research

JoVE Journal

Medicine

Murine Model of Wound Healing

Musemodel af Sårheling

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murin Endoskopi til<em&gt; In Vivo</em&gt; Multimodal Imaging af Carcinogenesis og vurdering af Intestinal sårheling og betændelse

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

En lille dyremodel af Ex Vivo Normothermic lever Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Hornhindens epitel slid med okulær Burr som en Model for hornhinden sårheling

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Targeting Gray Rami Communicantes in Selective Chemical Lumbar Sympathectomy

Målretning grå Rami Communicantes i selektiv kemiske lumbal Sympathectomy

Chemical lumbar sympathectomy (CLS) is a commonly used, minimally invasive procedure for the treatment of conditions including ischemic diseases of the ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

En Ex Vivo vævskultur Model for Fibrovascular komplikationer i proliferativ diabetisk retinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Scratch Migration Assay and Dorsal Skinfold Chamber for In Vitro and In Vivo Analysis of Wound Healing

Scratch migration assay og dorsale Skinfold kammer for in vitro og in vivo analyse af sårheling

Impaired cutaneous wound healing is a major concern for patients suffering from diabetes and for elderly people, and there is a need for an effective ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

En Ornesen Endothelial organ kultur model ved hjælp af Split cornea-knapper

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Optocardiography and Electrophysiology Studies of Ex Vivo Langendorff-perfused Hearts

Optokardiografi og Elektrofysiologi studier af ex vivo Langendorff-perfbrugte hjerter

Small animal models are most commonly used in cardiovascular research due to the availability of genetically modified species and lower cost compared to ...

An Epithelial Abrasion Model for Studying Corneal Wound Healing

En epitelslibningsmodel til undersøgelse af hornhindesårheling

The cornea is critical for vision, accounting for about two-thirds of the refractive power of the eye. Crucial to the role of the cornea in vision is its ...