Name: ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies
Uploaded: 2019-02-15T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av NIH-NEI R01 EY024942, forskning for å hindre blindhet, storbyen medisinske universitet ubegrenset forskningsmidler, og Lions distriktet 20-Y. mikroskopi og bildeanalyse av parafinsnitt ble utført mikroskopi kjernen og histologiske lysbildet forberedelse ble utført på Biorepository og patologi kjernen ved Icahn School of Medicine i Sinai.

1. organ kultur
<ol><li>
Forberedelser
	<ol>
<li>Forberede agar løsning som følger. I en liten bolle, forberede 1% agar og 1 mg/mL bovin kollagen i DMEM-F12 opptil 20 mL. Bringe ved en kokeplate. Sette løsningen i en 50 mL konisk rør. Sett røret i et vannbad i en varm plate å holde løsningen fra styrket.</li>
		<li>Forberede supplert serum-frie medier (SSFM) som sammensetningen i Tabellen for materiale. Merk: Den nødvendige mengden av SSFM være forberedt, a...

Denne protokollen beskriver en modell for å studere sårheling i en naturlig lagdelt 3D-miljø. Bruk av orgel kultur som et mellomledd mellom cellekultur og i vivo studier reduserer kostnader samt redusere prosedyrer på levende dyr. Andre 3D-modeller har vært til stor nytte for feltet inkludert selv syntetisere kollagen gels laget av primære menneskelig hornhinnen fibroblaster2 eller disse samme cellene innebygd i gels laget av animalske collagens31. Orgel kultur modell...

Arrdannelse i hornhinnen som følge av skade, traumer eller infeksjon kan føre til ødeleggende grumsete og permanent synstap. Dermed er det et kritisk behov for å identifisere veier som kan være mål for terapeutisk intervensjon. Gjeldende handling valgmulighetene er begrenset, og består hovedsakelig av hornhinnen transplantasjoner, som ikke er tilgjengelig for pasienter over hele verden. Både menneskelige (figur 1) og dyr hornhinner kan utnyttes for 2D og 3D cellekultur studier1,2. Menneskelige cadaver hornhinner uegnet for transplantasjon kan fås fra øye banker eller sentralisert bankene (nasjonal sykdom forskning Interchange (NDRI)), og dyr øyne kan fås fra en abattoir. Primære hornhinnen epitelceller, stromal fibroblaster og mer nylig endotelceller, kan være isolert og kultivert fra disse vev for sårheling og toksikologi studier3,4,5. I tillegg til viktigheten av å forstå molekylær grunnlag av blinding øyesykdom, har tilgjengelighet av vev og evnen å kultur primære celler gjort hornhinnen en viktig modellsystem for studier. Hornhinnen er ideelle for å teste effekten av agenter på arrdannelse normalt hornhinnen er gjennomsiktig og visse typer sår opprette tetthet eller fibrotiske arr (omtalt i6). Flere i vivo hornhinnen sår helbredelse modeller har også vært mye benyttet for arrdannelse studier1. Mindre utnyttet er ex vivo hornhinnen sår helbredelse modell7,8 som er beskrive i detalj her. Målet med denne metoden er å tallfeste arrdannelse resultater preget av fibrotiske beslutningstakere i en 3D flercellet hornhinnen ex vivo modellsystem.
Hornhinnen epithelial såret som ikke bryter epithelial kjelleren membranen normalt stenger i 24-72 h9. Snart etter såret begynner cellene på kanten av epitel å spre og migrere til epithelial gratis overflaten, gjenopprette epithelial barriere-funksjonen. Denne aktiviteten er sekvensielt etterfulgt aktiveringen av hornhinnen basal celle spredning først, og i en senere fase, forløper celler i sonen for ytre limbal å oppnå utvinning av epitelial cellen masse10,11. Disse sår leges ofte uten arrdannelse. Men resulterer et sår som trenger kjelleren membranen inn stroma ofte i arr formasjon1. Etter hornhinnen stromal såret, fylles stroma med celler i flere opprinnelse inkludert differensierte bosatt stromal celler som Ben margtransplantasjon-avledet fibrocytes12,13,14. Fibrotiske arrdannelse er preget av for myofibroblasts i en healing sår. Disse patologisk myofibroblasts viser økt vedheft gjennom akkumulering av integrins fokal adhesjon, kontraktile α-glatt muskel utgangen (α-SMA) stress fiber og lokal aktivering av ekstracellulær matrix (EFM)-sequestered latent-omforming vekst faktor-beta (TGFβ). Differensiering av epitelial-avledet celler, kalles epithelial mesenchymal overgang (EMT), kan også bidra til å arr formasjon6.
Det er en hårfin balanse mellom celledifferensiering og apoptose etter såret. På grunn av brudd i kjelleren membranen, vekst faktorer som blodplater-avledet vekst faktor (PDGF) og TGFβ fra tårer og epitel bade stroma, inducing myofibroblast differensiering, en vedvarende autocrine løkke av TGFβ aktivisering, og utskillelsen av uorganisert fibrotiske ECM15,16. For myofibroblasts i såret leget fremmer dis og arrdannelse i hornhinnen (figur 2). Men i regeneratively helbredet sår selv om myofibroblasts utvikle, de apoptose og dermed er fraværende eller betydelig redusert i antall i helbredet vev (omtalt i referanse6,10). Dermed fokusert forskning på fibrotiske arr minst delvis på målretting molekyler som hindrer overdreven myofibroblast utvikling eller myofibroblast utholdenhet17,18. Fordi myofibroblast utholdenhet preger både arrdannelse og fibrotiske sykdom i alle vev19, kan hornhinnen være nyttig som en modell å studere generell cellulære mekanismer av fibrose.
I vår modellsystem, er hornhinnen såret med en sylindrisk blad kalt en trephine mens du fremdeles er i verden. Mennesker og gris hornhinner kan bli såret med enten en 6 eller 7 mm trephine; kanin hornhinner foretrekkes en 6 mm trephine. Gris hornhinnen ligner i størrelse på menneskelig hornhinnen. Fordi de er kostnadseffektiv og lett tilgjengelig i store antall, brukes gris hornhinner rutinemessig for orgel kultur. Videre har antistoffer og siRNAs laget for å reagere med human konsekvent cross-reacted med gris7. Etter såret, hornhinner er kuttet fra hele verden med limbus intakt og montert på en agar/kollagen base. Hornhinnen er kultivert i serum-free media pluss stabilisert vitamin C for å simulere fibroblast spredning og ECM deponering20. Verken tillegg av serum eller vekst faktorer er nødvendig for å indusere myofibroblast formasjon7. Hornhinner rutinemessig fast og behandlet for histology etter to uker med kultur. For gen knockdown, eller å teste effekten av en agent på sårheling, såret kan behandles med siRNA i såret etter såret7 eller en løselig agent kan legges til media, henholdsvis8.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10-010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>91670049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Collagen Solution</td>
			<td>Advance Biomatrix</td>
			<td>5005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pig eyes with lids attached&#160;</td>
			<td>Pel-freeze, Arkansas</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm trephine&#160;</td>
			<td>Katena</td>
			<td>K28014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade&#160;</td>
			<td>Personna</td>
			<td>0.009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small scissor</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>895110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>08953-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kim Wipes&#160;</td>
			<td>Kimberly-Clark&#8482; 34120</td>
			<td>06-666</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm cell culture dishes&#160;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplemented Serum- Free media (SSFM)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add all of the following components to DMEM/F-12:&#160; ITS, RPMI, Glutathione, L-Glutamine, MEM Non essential amino acids, MEM Sodium Pyruvate, ABAM, Gentamicin, Vitamin C.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ITS Liquid Media Supplement&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I3146</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 Vitamins Solution&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R7256</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutathione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6013</td>
			<td>Use at 1 &#181;g/mL. Freeze aliquots; do not reuse after thawing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% L-glutamine solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030-081</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-essential amino acids solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Sodium pyruvate solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11360</td>
			<td>1 M Stocks (1000X) and freeze in single use aliquits.&#160; Use from freezer each time media is made.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABAM&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7292</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>30-005-CR</td>
			<td>200X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin C&#160;</td>
			<td>Wako</td>
			<td>070-0483</td>
			<td>2-0-aD Glucopyranosyl-Ascorbic Acid. 1 mM stocks (1000x)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Iodine&#160;</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>SI86-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Path Cassettes&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum (NGS)</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>005-000-121</td>
			<td>We use 3% NGS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Media&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe Clear&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>314-629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Alcohol</td>
			<td>Ultra Pure</td>
			<td>200CSGP</td>
			<td>200 Proof, diluted at 100%, 70%, 50%)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP327</td>
			<td>10mM, pH 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>M10742500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluing agent&#160;</td>
			<td>Ricca Chemical Company</td>
			<td>220-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% Triton X-100</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>9002-93-1</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1% Tween 20&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP337</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3% Hydrogen Peroxide&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>H324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Kit&#160;</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar&#160;</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>BP1423-500</td>
			<td>Agar solution: prepare 1% agar and 1 mg/mL bovine collagen in DMEM-F12 up to 20 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bermis</td>
			<td>13-374-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moist Chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use any chamber, cover it with wet Wipe Tissue and then put a layer of Parafilm over it.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiagen RNAprotect Cell Reagent</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>&#160;76104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambion PureLink RNA Mini Kit</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>12183018A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Fibronectin-EDA Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F6140</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle actin Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2547 or C6198 (cy3 conjugated)</td>
			<td>1:200 Diluted in 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permafluor&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>62-6520</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for a-SMA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgM (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>PA1-85999</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for FN-EDA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, Cy3&#160;</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>115-165-146</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum (for a-SMA, Fluorescence staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Zeiss Axioplan2&#160;</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPOT-2</td>
			<td colspan="2">Diagnostic Instruments, Sterling Heights, Michigan</td>
			<td>CCD camera</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies

Hornhinnen er brukt mye som en modell for å studere sårtilheling. Muligheten til å utvikle og anvende primære pattedyrceller i to-dimensjonale (2D) og tre-dimensjonale (3D) kultur har generert et vell av informasjon ikke bare om hornhinnen biologi, men også om sår helbredelse, myofibroblast biologi, og arrdannelse generelt . Målet med protokollen er en analysen for kvantifisere myofibroblast utvikling, som preger arrdannelse. Viser vi hornhinnen orgel kultur ex vivo modell med gris øyne. I denne fremre keratectomy sår, er hornhinner fortsatt i verden såret med en sirkulær blad kalt en trephine. En plugg av ca 1/3 av fremre hornhinnen fjernes inkludert epitel, kjelleren membranen og den fremre delen av stroma. Etter såret, hornhinner kuttet fra globe, montert på en kollagen/agar base og kultivert for to uker i supplert serum gratis medium med stabilisert vitamin C for å øke celle spredning og ekstracellulær matrix sekresjon av bosatt fibroblaster. Aktivering av myofibroblasts i fremre stroma er tydelig i helbredet hornhinnen. Denne modellen kan brukes til analysen såret nedleggelse, utvikling av myofibroblasts og fibrotiske markører og toksikologi studier. I tillegg kan effekten av lite molekyl hemmere samt lipid-formidlet siRNA transfection for genet knockdown testes i dette systemet.

Immunohistochemistry er den primære analysen utnyttet analysere suksessen til ex vivo sår helbredelse eksperiment. Figur 4 viser epitel og fremre stroma i kontroll vev (figur 4A, 4B). Seks timer etter at såret, var epitel fraværende (figur 4C, 4 D). Seks dager etter såret som forventet, hadde epitel regrown (figur 4E, 4F</st...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

En protokoll for en ex vivo hornhinnen orgel kultur modell nyttig for sårheling studier er beskrevet. Modell systemet kan brukes til å vurdere effekten av agenter å fremme regenerativ helbredelse eller medikament toksisitet i organisert 3D flercellet miljø.

Ex Vivo sårtilheling hornhinnen Organ kultur modell for studier

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Dette papiret beskrev en enkel metode for analyse av såret i et tredimensjonalt, multicellulært organkulturmodellsystem. Vi gjør dette ved å bruke griseøyne, men selv om du ikke er kjent med øynene, kan du gjøre denne analysen. Som en oversikt fikk vi svineøyne, kuttet ut globusene, gjør et sirkulært sår i hornhinnen som går gjennom epitelet og omtrent en tredjedel av stroma.Vi kuttet ut hornhinnen, og monterer den på en Agar-base, og legger denne konstruksjonen i inkubatoren. Vevet vil fylle ut å skape et arr i hornhinnen. Du trenger ikke å legge til noen vekstfaktorer, eller til og med serum.Dette gjøres i serumfrie medier. Selv om dette utføres i hornhinnen, kan den brukes som et modellsystem for fibrotisk helbredelse generelt. Så mange av de cellulære banene som aktiveres under arrdannelse, er like mellom systemene.I en biosikkerhetshette bruker du et rett kant kirurgisk blad for å fjerne kloden fra lokket på et etanolsent skjærebrett, og fjern overflødig fettvev fra hvert øye. Holder den rengjorte kloden bakre med tang umiddelbart dyppe øyet i PBS etterfulgt av tre raske dips i 10% jod, og to raske dips i PBS. Pakk deretter øyet omkrets med et rent laboratorievev for å vikle med nok trykk for å oppnå en stram hornhinneoverflate uten å kontakte hornhinnen.Ved hjelp av en seks millimeter trephine, trenge inn i epitelet i fremre stroma i midten av hornhinnen uten å gjøre en full tykkelse sår gjennom hele hornhinnen, og rotere trephine 180 grader med klokken og mot klokken fem ganger mens du bruker lett trykk for å utdype såret. Når såret er dypt nok til at en vevklaff løftes med tang, bruk et kirurgisk blad til å kutte klaffen parallelt med kloden mens du fortsetter å løfte den fremre hornhinnen innenfor sårmarginen. Når hele klaffen er fjernet, skal et sirkulært sår være plassert i midten av hornhinnen.For å høste hornhinnen gripe øyet med laboratorievevet, og bruk et kirurgisk blad for å lage et lite snitt en millimeter unna kanten av hornhinnen for å inkludere limbus og vevsamling. Ved hjelp av liten, skarp saks fortsette snittet rundt om i verden holde en millimeter margin over hornhinnen for å holde limbus i takt. Plasser deretter hornhinnen, sårsiden ned, i en 60 millimeter, eller 100 millimeter tallerken som inneholder en milliliter PBS.For å montere hornhinnen, bruk to par tang for å holde hornhinnen epitelsiden opp for å lage en kopp, og bruk en steril overføringpipette for å legge til oppvarmet agarløsning i hornhinnen til koppen er full. Etter at agaren er herdet, legg forsiktig hornhinnen i en ny 60 millimeter plate agar-side ned og dekk platen med et lokk. Tilsett deretter fire milliliter med supplert serumfritt medium til hver tallerken hornhinner som opprettholder hornhinnen ved et luftvæskegrensesnitt ved limbalgrensen i en cellekulturinkubator ved 37 grader celsius i 5% karbondioksid, og fukter hornhinnens overflater en gang daglig med en dråpe supplert serumfritt medium fra det conditionte mediet i parabolen for å holde vevet hydrert.For genbanke ned, bland fem mikroliter små forstyrrende eller siRNa med 50 mikroliter med redusert serum minimum essensiell medium og to mikroliter transfection reagens. Med 50 mikroliter med redusert serummedium per hornhinnen. Etter fem minutter, bland de to blandingene sammen, og tilsett 200 mikroliter med redusert serum minimumsmedium til hver siRNA-blanding.Deretter pipette siRNA løsninger slippe klokt på hvert sår. Legg deretter hornhinnen i inkubatoren. Etter tre timer, bruk mediet i hver tallerken for å vaske siRNA fra hornhinnens overflater, og erstatte det bedede mediet i hver tallerken med friskt supplert serumfritt medium pluss antibiotika.Deretter returnerer hornhinnen kulturer til cellekulturinkubatoren, og inkubere i to uker. Seks timer etter såret er hornhinnen epitelet fraværende. Seks dager etter såret vokser epitelet tilbake.Fluorescens amino farging med alfa glatt muskel actin avslører en gradient av aktive myofibroblaster langs sårmarginen fra fremre til bakre stroma. Immuno-histokjemisk farging for alfa glatt muskel actin avslører en dramatisk økning i alfa glatt muskel actin protein uttrykk i såret pluss kontroll siRNA hornhinnen. Sammenlignet med uavundte og målprotein siRNA behandlet, sårede hornhinnen.Tilsvarende er fibronectin ekstra domene A oppregulert i siRNA behandlet sårede hornhinnen sammenlignet med viklet og mål protein siRNA behandlet sårede hornhinnen. Viser en vellykket knock down av målet protein. Videre forhindrer behandling av de sårede hornhinnen med toksinet som ikke spesifikt retter seg mot målproteinet re-epitelialisering og resulterer i kvalitativ celledød, en uorganisert matrise og stromale vakuoler som tyder på at toksinet ikke fremmer helbredelse ved den analyserte konsentrasjonen.Til slutt, mens du prøver denne prosedyren er det viktig å huske å holde bladet parallelt med vevet mens du kutter, slik at det ikke trenger inn i kloden. Ulike sårteknikker kan brukes med denne analysen, inkludert kjemisk brenning eller epitelskrap. Det kan også brukes til narkotika toksisitet analyser for å avgjøre om epitelet helbreder og i hvilken hastighet.Dette er en kostnadsbesparelser ex vivo, organ kultur modell system som kan gå foran in vivo sår healing studier.

Research

JoVE Journal

Medicine

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murine Endoskopi for<em&gt; In Vivo</em&gt; Multimodal Imaging av Carcinogenesis og vurdering av Intestinal sårheling og Betennelse

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

En liten dyr modell av Ex Vivo Normothermic lever perfusjon

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Hornhinnen Epithelial slitasje med okulær Burr som modell for hornhinnen sårtilheling

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Targeting Gray Rami Communicantes in Selective Chemical Lumbar Sympathectomy

Målretting grå Rami Communicantes i selektiv kjemiske lumbale Sympathectomy

Chemical lumbar sympathectomy (CLS) is a commonly used, minimally invasive procedure for the treatment of conditions including ischemic diseases of the ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

En Ex Vivo vev kultur modell for Fibrovascular komplikasjoner i proliferativ diabetisk retinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Scratch Migration Assay and Dorsal Skinfold Chamber for In Vitro and In Vivo Analysis of Wound Healing

Scratch Migration analysen og rygg Skinfold Chamber for in vitro og in vivo analyse av såret healing

Impaired cutaneous wound healing is a major concern for patients suffering from diabetes and for elderly people, and there is a need for an effective ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

En svin hornhinnen endothelial organ kultur modell ved hjelp av Split hornhinne knapper

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Optocardiography and Electrophysiology Studies of Ex Vivo Langendorff-perfused Hearts

Optocardiography og elektrofysiologi studier av ex vivo Langendorff-perfusert Hearts

Small animal models are most commonly used in cardiovascular research due to the availability of genetically modified species and lower cost compared to ...

An Epithelial Abrasion Model for Studying Corneal Wound Healing

En epitelal slitasje modell for å studere hornhinnen sår healing

The cornea is critical for vision, accounting for about two-thirds of the refractive power of the eye. Crucial to the role of the cornea in vision is its ...