Name: ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies
Uploaded: 2019-02-15T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado por NEI NIH R01 EY024942, investigación para prevenir la ceguera, Upstate médica Universidad Libre fondos de investigación, y leones distrito 20-Y. microscopía y análisis de imágenes de secciones de la parafina se realizaron en el centro de microscopía y preparación de los portaobjetos histológico fue realizado en el biorepositorio y la base de la patología en la Facultad de medicina de Icahn en el Monte Sinaí.

1. cultivo
<ol><li>
Preparaciones
	<ol>
<li>Preparar la solución de agar como sigue. En un matraz pequeño, preparar agar al 1% y 1 mg/mL de colágeno bovino en DMEM-F12 hasta 20 mL. Lleve a ebullición sobre una placa caliente. Poner la solución en un tubo cónico de 50 mL. Coloque el tubo en un baño de agua en un plato caliente para impedir la solidificación de la solución.</li>
		<li>Preparar medios libres de suero suplementados (SSFM) según la composición en la Tabla de materiales</s...

Este protocolo describe un modelo para el estudio de la cicatrización de heridas en un entorno 3D estratificado natural. Uso de cultivo como intermediario entre la cultura de célula y estudios in vivo reduce significativamente los costos, así como reducir procedimientos en animales vivos. Otros modelos 3D han sido de gran beneficio para el campo, incluyendo la síntesis de geles de colágeno de fibroblastos corneales humanas primaria2 o estas mismas células embebidas en geles de colágenos ori...

Marcar con una cicatriz en la córnea debidos a lesión, trauma o infección puede conducir a debilitante opacidad y pérdida de visión permanente. Así, hay una necesidad crítica para identificar los caminos que pueden ser objeto de intervención terapéutica. Opciones actuales de tratamiento son limitadas y consisten principalmente en trasplantes córneas, que no son accesibles a los pacientes en todo el mundo. Humanos (figura 1) y córneas animales pueden ser utilizadas para 2D y estudios de cultivo celular 3D1,2. No apto para trasplante de córneas de cadáver humano pueden obtenerse de bancos de ojos o de bancos de tejidos centralizada (nacional enfermedad investigación intercambio (NDRI)), y los ojos animales pueden obtenerse en un matadero. Las células epiteliales corneales primarias, fibroblastos estromales y más recientemente, las células endoteliales, pueden aisladas y cultivadas de estos tejidos para la cicatrización de Toxicología estudios y3,4,5. Además de la importancia de comprender la base molecular de ceguera ojo, la accesibilidad del tejido y la capacidad de las células primarias de cultura ha hecho la córnea un sistema modelo importante para el estudio. La córnea es ideal para probar los efectos de los agentes en la cicatrización de la córnea normal es transparente y ciertos tipos de heridas crean opacidades o cicatrices fibróticas (revisadas en6). Varios en vivo herida corneal cicatrización modelos también se han utilizado extensivamente para estudios1marcar con una cicatriz. Menos utilizado ha sido el ex vivo cornea herida curativo modelo7,8 que se describen en detalle aquí. El objetivo de este método es cuantificar resultados de cicatrización caracterizados por los fabricantes fibróticos en un 3D multicelulares córnea ex sistema de modelo vivo.
Heridas epiteliales corneales que no romper la membrana basal epitelial normalmente se cierra en 24-72 h9. Pronto después de la herida, las células en el borde del epitelio comienzan separarse y migrar a la superficie epitelial libre, para restablecer la función barrera epitelial. Esta actividad es seguida secuencialmente por la activación de la proliferación celular basal corneal primero y, en una etapa posterior, de células precursoras, ubicado en la zona limbal externa para lograr la recuperación de la célula epitelial masiva10,11. A menudo estas heridas sanan sin dejar cicatrices. Sin embargo, una herida que penetra la membrana del sótano en el estroma, a menudo resulta en la formación de cicatriz1. Después de herir stromal córnea, el estroma se rellena con las células de múltiples orígenes como distinguidas residente células stromal y fibrocitos médula ósea12,13,14. Marcar con una cicatriz fibrótica se caracteriza por la persistencia de myofibroblasts en una herida curativa. Estos miofibroblastos patológicos demuestran mayor adherencia a través de la acumulación de las integrinas en adherencias focales, fibras de tensión contráctil del músculo liso de la α actina (α-SMA) y la activación local de la matriz extracelular (ECM)-secuestrado latente de la transformación del factor de crecimiento beta (TGFβ). La diferenciación de las células epiteliales derivadas, conocido como epitelio de transición mesenquimal (EMT), también puede contribuir a la formación6la cicatriz.
Hay un delicado equilibrio entre la diferenciación celular y apoptosis después de herir. Debido a la brecha en la membrana basal, factores de crecimiento como el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) y TGFβ de lágrimas y el epitelio bañan del estroma, induce diferenciación de miofibroblastos, un bucle autocrino sostenida de la activación de TGFβ y la secreción de desorganizado fibrótica ECM15,16. La persistencia de los miofibroblastos en la herida curada promueve haze y marcar con una cicatriz en la córnea (figura 2). Sin embargo, en re-generativa curado la herida aunque desarrollar myofibroblasts, apoptose y así son ausentes o significativamente reducidas en número en el tejido curado (revisado en la referencia6,10). Así, investigación sobre cicatrización fibrótica ha enfocado al menos en parte dirigidos a moléculas que impiden el desarrollo excesivo de miofibroblastos o miofibroblastos persistencia17,18. Debido a persistencia de miofibroblastos caracteriza enfermedad cicatrización y fibrótica en todos los tejidos19, la córnea puede ser útil como un sistema modelo para estudiar los mecanismos celulares generales de fibrosis.
En nuestro sistema modelo, la córnea es herida con una cuchilla cilíndrica llamada trépano mientras que todavía en el mundo. Humano y córneas de cerdo pueden ser heridas con cualquiera de los dos un 6 o 7 mm trépano; para córneas de conejo un trépano de 6 mm se prefiere. La córnea de cerdo es similar en tamaño a la córnea humana. Porque son rentables y fácilmente disponibles en números grandes, córneas de cerdo se utilizan habitualmente para el cultivo. Además, constantemente han inducían anticuerpos y siRNAs hicieron reaccionar con humanos con cerdo7. Después de herir, córneas se cortan del globo con el limbo intactas y montado en una base de agar/colágeno. Las córneas son cultivadas en medios libres de suero además de estabilizaron de vitamina C para simular la proliferación del fibroblasto y la deposición de ECM20. La adición de suero ni factores de crecimiento son necesarias para inducir la formación de miofibroblastos7. Córneas son rutinariamente fijadas y procesadas para histología después de dos semanas de la cultura. Por caída de gene, o para probar los efectos de un agente en la cicatrización de la herida, la herida puede ser tratada con siRNA en la herida después de herir a7 o un agente soluble puede añadirse a los medios de comunicación, respectivamente8.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10-010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>91670049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Collagen Solution</td>
			<td>Advance Biomatrix</td>
			<td>5005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pig eyes with lids attached&#160;</td>
			<td>Pel-freeze, Arkansas</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm trephine&#160;</td>
			<td>Katena</td>
			<td>K28014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade&#160;</td>
			<td>Personna</td>
			<td>0.009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small scissor</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>895110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>08953-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kim Wipes&#160;</td>
			<td>Kimberly-Clark&#8482; 34120</td>
			<td>06-666</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm cell culture dishes&#160;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplemented Serum- Free media (SSFM)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add all of the following components to DMEM/F-12:&#160; ITS, RPMI, Glutathione, L-Glutamine, MEM Non essential amino acids, MEM Sodium Pyruvate, ABAM, Gentamicin, Vitamin C.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ITS Liquid Media Supplement&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I3146</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 Vitamins Solution&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R7256</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutathione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6013</td>
			<td>Use at 1 &#181;g/mL. Freeze aliquots; do not reuse after thawing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% L-glutamine solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030-081</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-essential amino acids solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Sodium pyruvate solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11360</td>
			<td>1 M Stocks (1000X) and freeze in single use aliquits.&#160; Use from freezer each time media is made.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABAM&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7292</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>30-005-CR</td>
			<td>200X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin C&#160;</td>
			<td>Wako</td>
			<td>070-0483</td>
			<td>2-0-aD Glucopyranosyl-Ascorbic Acid. 1 mM stocks (1000x)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Iodine&#160;</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>SI86-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Path Cassettes&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum (NGS)</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>005-000-121</td>
			<td>We use 3% NGS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Media&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe Clear&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>314-629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Alcohol</td>
			<td>Ultra Pure</td>
			<td>200CSGP</td>
			<td>200 Proof, diluted at 100%, 70%, 50%)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP327</td>
			<td>10mM, pH 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>M10742500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluing agent&#160;</td>
			<td>Ricca Chemical Company</td>
			<td>220-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% Triton X-100</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>9002-93-1</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1% Tween 20&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP337</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3% Hydrogen Peroxide&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>H324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Kit&#160;</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar&#160;</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>BP1423-500</td>
			<td>Agar solution: prepare 1% agar and 1 mg/mL bovine collagen in DMEM-F12 up to 20 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bermis</td>
			<td>13-374-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moist Chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use any chamber, cover it with wet Wipe Tissue and then put a layer of Parafilm over it.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiagen RNAprotect Cell Reagent</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>&#160;76104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambion PureLink RNA Mini Kit</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>12183018A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Fibronectin-EDA Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F6140</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle actin Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2547 or C6198 (cy3 conjugated)</td>
			<td>1:200 Diluted in 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permafluor&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>62-6520</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for a-SMA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgM (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>PA1-85999</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for FN-EDA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, Cy3&#160;</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>115-165-146</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum (for a-SMA, Fluorescence staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Zeiss Axioplan2&#160;</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPOT-2</td>
			<td colspan="2">Diagnostic Instruments, Sterling Heights, Michigan</td>
			<td>CCD camera</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies

La córnea se ha utilizado extensivamente como modelo para el estudio de la cicatrización de heridas. La capacidad de generar y utilizar las células primarias de mamíferas en dos dimensiones (2D) y tres dimensiones cultura de (3D) ha generado una riqueza de información sobre biología corneal sobre la herida cura, biología de miofibroblastos y cicatrices en general . El objetivo del protocolo es un sistema de análisis para cuantificar el desarrollo de miofibroblastos, que caracteriza a marcar con una cicatriz. Demostramos un órgano córneo cultura vivo ex modelo con ojos de cerdo. En este anterior keratectomy herida, córneas todavía en el mundo son heridas con una cuchilla circular que se llama un trépano. Se quita un tapón de aproximadamente 1/3 de la córnea anterior incluyendo el epitelio, la membrana del sótano y la parte anterior del estroma. Después de herir, córneas son corta del mundo, montadas sobre una base de colágeno/agar y cultivadas durante dos semanas en medio libre de suero complementado con estabilizado vitamina C para aumentar la proliferación celular y la secreción de matriz extracelular por los fibroblastos residentes. Activación de miofibroblastos en el tejido conectador anterior es evidente en la córnea curada. Este modelo puede utilizarse para análisis de encierro de la herida, el desarrollo de miofibroblastos y marcadores fibróticos y para estudios de Toxicología. Además, los efectos de los inhibidores de molécula pequeña como transfección mediada por lípidos siRNA por caída de gene se pueden probar en este sistema.

Inmunohistoquímica es el principal análisis utilizado para analizar el éxito de la ex vivo herida curativo experimento. Figura 4 muestra el epitelio y el estroma anterior en tejido de control (Figura 4A, 4B). Seis horas después de herir, el epitelio estaba ausente (figura 4, 4D). Seis días después de la herida como se esperaba, el epitelio había vuelto a crece...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

Un protocolo para un ex vivo modelo de cultura órgano córneo es útil para estudios de cicatrización se describe. Este sistema modelo puede utilizarse para evaluar los efectos de agentes para promover la curación regenerativa o toxicidad de la droga en un ambiente organizado de multicelular 3D.

Ex Vivo modelo de cultura órgano córneo para la curación de heridas estudios

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Este documento describe un método simple para el ensayo de heridas en un sistema de modelo tridimensional de cultivo de órganos multidimensionales y multidimensionales. Hacemos esto usando ojos de cerdo, pero incluso si usted no está familiarizado con los ojos, usted puede hacer este ensayo. Como visión general, recibimos ojos porcinos, cortamos los globos, hicimos una herida circular en la córnea que atraviesa el epitelio y alrededor de un tercio del estroma.Cortamos la córnea, y la montamos en una base de agar, y ponemos esta construcción en la incubadora. El tejido se llenará creando una cicatriz en la córnea. No es necesario añadir ningún factor de crecimiento, o incluso suero.Esto se hace en medios sin suero. Aunque esto se realiza en la córnea, se puede utilizar como un sistema modelo para la curación de fibromas en general. Como muchas de las vías celulares que se activan durante la cicatrización son similares entre los sistemas.En una capucha de bioseguridad, utilice una cuchilla quirúrgica de borde recto para extraer el globo de la tapa de una tabla de cortar limpiada con etanol y eliminar el exceso de tejido graso de cada ojo. Sosteniendo el globo limpio posteriormente con fórceps inmediatamente sumergir el ojo en PBS seguido de tres caídas rápidas en 10%yodo, y dos caídas rápidas en PBS. Luego envuelva el ojo circunferencialmente con un tejido de laboratorio limpio para envolver con suficiente presión para lograr una superficie de córnea tensa sin tener en contacto con la córnea.Usando una trebenta de seis milímetros, penetra el epitelio en el estroma anterior en el centro de la córnea sin hacer una herida de espesor completo a través de toda la córnea, y gira la trepa 180 grados en el sentido de las agujas del reloj y en el sentido contrario a las agujas del reloj cinco veces mientras aplicas presión ligera para profundizar la herida. Cuando la herida es lo suficientemente profunda como para permitir que un colgajo de tejido sea levantado con fórceps, utilice una cuchilla quirúrgica para cortar la solapa paralela al globo mientras continúa levantando la córnea anterior dentro del margen de la herida. Cuando se haya quitado toda la colgajo, se debe ubicar una herida circular en el centro de la córnea.Para cosechar la córnea, agarra el ojo con el tejido de laboratorio, y usa una cuchilla quirúrgica para hacer una pequeña incisión a un milímetro del borde de la córnea para incluir el limbo y la colección de tejidos. Usando tijeras pequeñas y afiladas continúa la incisión alrededor del globo manteniendo un margen milimétrico a través de la córnea para mantener el limbo en tacto. A continuación, coloque la córnea, del lado de la herida hacia abajo, en un plato de 60 milímetros o 100 milímetros que contenga un mililitro de PBS.Para montar la córnea, utilice dos pares de fórceps para sostener el lado epitelial de la córnea hacia arriba para crear una taza, y utilice una pipeta de transferencia estéril para agregar solución de agar caliente en la córnea hasta que la copa esté llena. Después de que el agar se endurezca, coloque cuidadosamente la córnea en una nueva placa de 60 milímetros lado agar hacia abajo y cubra la placa con una tapa. Luego agregue cuatro mililitros de medio libre de suero suplementado a cada plato de córneas manteniendo las córneas en una interfaz aire-líquido en el borde del limbar en una incubadora de cultivo celular a 37 grados centígrados en 5%dióxido de carbono, y humedeciendo las superficies corneales una vez al día con una gota de medio libre de suero suplementado del medio acondicionado en el plato para mantener los tejidos hidratados.Para el derribo genético, mezcle cinco microlitros de pequeña interferencia o siRNa con 50 microlitros de medio esencial mínimo sérico reducido y dos microlitros de reactivo de transfección. Con 50 microlitros de medio sérico reducido por córnea. Después de cinco minutos, mezcle las dos mezclas y agregue 200 microlitros de medio mínimo sérico reducido a cada mezcla de siRNA.A continuación, pipetear las soluciones de siRNA caen sabiamente sobre cada herida. A continuación, poner las córneas en la incubadora. Después de tres horas, utilice el medio de cada plato para lavar el siRNA de las superficies corneales, y reemplace el medio acondicionado en cada plato con un medio libre de suero fresco suplementado más antibióticos.Luego devuelva los cultivos corneales a la incubadora de cultivo celular, e incubar durante dos semanas. Seis horas después de la herida, el epitelio corneal está ausente. Seis días después de la herida, el epitelio vuelve a crecer.La tinción de aminoácidos de fluorescencia con actina muscular lisa alfa revela un gradiente de miofibroblastos activos a lo largo del margen de la herida desde el estroma anterior hasta el posterior. La tinción inmuno-histoquímica para la actina muscular lisa alfa revela un aumento dramático en la expresión de proteína de actina muscular lisa alfa en heridos además de córneas de siRNA de control. En comparación con el siRNA de proteína no asado y objetivo tratado, las córneas heridas.Del mismo modo, el dominio adicional de fibronectina A está regulado al al ras en las córneas heridas tratadas con arINE en comparación con las córneas heridas tratadas con siRNA con proteínas no asanadas y diana. Demostrar un derribo exitoso de la proteína objetivo. Además, el tratamiento de las córneas heridas con la toxina que ataca inespecíficamente a la proteína diana previene la ree epitelización y resulta en la muerte celular cualitativa, una matriz desorganizada y vacuolas estromales que sugieren que la toxina no promueve la curación en la concentración ensayada.En conclusión, al intentar este procedimiento es importante recordar mantener la hoja paralela al tejido durante el corte, para que no penetre en el globo. Con este ensayo se pueden emplear diferentes técnicas de hiriente, como quemaduras químicas o raspaduras epiteliales. También se puede utilizar para ensayos de toxicidad de drogas para determinar si el epitelio sana y a qué velocidad.Este es un sistema de modelo de cultivo de órganos ex vivo que puede preceder a sus estudios de cicatrización de heridas in vivo.

Research

JoVE Journal

Medicine

Murine Model of Wound Healing

Modelo murino de Curación de Heridas

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Investigación

Medicina

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murino Endoscopia para<em&gt; En Vivo</em&gt; Healing Multimodal Imaging de Carcinogénesis y Evaluación de la herida y la inflamación intestinal

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

Un pequeño modelo de la perfusión hepática normotérmica Ex Vivo

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Cicatrización de heridas de abrasión epitelial corneal con rebabas Ocular como un modelo de córnea

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Targeting Gray Rami Communicantes in Selective Chemical Lumbar Sympathectomy

Targeting Communicantes grises del Rami en Sympathectomy Lumbar químico selectivo

Chemical lumbar sympathectomy (CLS) is a commonly used, minimally invasive procedure for the treatment of conditions including ischemic diseases of the ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Un modelo de cultivo de tejidos Ex Vivo para las complicaciones Fibrovascular en la retinopatía diabética proliferativa

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Scratch Migration Assay and Dorsal Skinfold Chamber for In Vitro and In Vivo Analysis of Wound Healing

Ensayo de migración de arañazos y cámara dorsal Skinfold para análisis In Vitro e In Vivo de sanación de heridas

Impaired cutaneous wound healing is a major concern for patients suffering from diabetes and for elderly people, and there is a need for an effective ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

Un modelo de cultivo de órgano endotelial Corneal porcino usando botones de córnea divididos

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Optocardiography and Electrophysiology Studies of Ex Vivo Langendorff-perfused Hearts

Estudios de Optocardiografía y Electrofisiología de Corazones Perfundidos Ex Vivo Langendorff

Small animal models are most commonly used in cardiovascular research due to the availability of genetically modified species and lower cost compared to ...

An Epithelial Abrasion Model for Studying Corneal Wound Healing

Un modelo de abrasión epitelial para estudiar la cicatrización de heridas corneales

The cornea is critical for vision, accounting for about two-thirds of the refractive power of the eye. Crucial to the role of the cornea in vision is its ...