Name: ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies
Uploaded: 2019-02-15T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Detta arbete stöds av NIH-NEI R01 EY024942, forskning för att förhindra blindhet, Upstate Medical University obegränsad forskningsmedel, och Lions distrikt 20-Y. mikroskopi och bildanalys av paraffin avsnitt utfördes vid mikroskopi kärnan och histologisk bild förberedelse utfördes vid Biorepository och patologi CORE vid Icahn School of Medicine vid berget Sinai.

1. orgelkultur
<ol><li>
Förberedelser
	<ol>
<li>Bered agar enligt följande. I en liten kolv, förbereda 1% agar och 1 mg/mL bovint kollagen i DMEM-F12 upp till 20 mL. Föra för att koka på en värmeplatta. Sätta lösningen till en 50 mL konisk rör. Placera röret i vattenbad på en värmeplatta att hålla lösningen från stelnar.</li>
		<li>Förbereda kompletterade serum-fria medier (SSFM) enligt den sammansättning som anges i Tabellen för material. Obs: De...

Det här protokollet beskriver en modell för att studera sårläkning i en naturlig stratifierat 3D miljö. Användning av orgelkultur intermediär mellan cellkultur och in vivo-studier signifikant minskar kostnader samt minska förfaranden på levande djur. Andra 3D-modeller har varit till stor nytta för fältet inklusive själv syntetisera kollagen geler gjorda av primära mänskliga korneal fibroblaster2 eller dessa samma celler som inbäddade i geler gjort från animaliska kollagen<sup class...

Ärrbildning i hornhinnan som härrör från skada, trauma eller infektion kan leda till försvagande opaciteter och permanent synbortfall. Således finns det ett kritiskt behov att identifiera vägar som kan vara måltavlan för terapeutisk intervention. Aktuella behandlingsalternativ är begränsad och består främst av hornhinnans transplantationer, som inte är tillgängliga för patienter över hela världen. Både mänskliga (figur 1) och animaliska hornhinnor kan utnyttjas för 2D och 3D cellkultur studier1,2. Mänskliga cadaver hornhinnor inte lämpar sig för transplantation kan erhållas från ögat banker eller centraliserad vävnadsbanker (nationella sjukdom forskning Interchange (NDRI)), och djurs ögon kan erhållas från ett slakteri. Primära korneal epitelceller, stromal fibroblaster och mer nyligen, endotelceller, kan vara isolerade och odlade från dessa vävnader för sårläkning och toxikologiska studier3,4,5. Förutom vikten av att förstå den molekylära basen för bländande ögonsjukdom, har tillgängligheten av vävnad och förmågan att kultur primära celler gjort hornhinnan en viktigt modellsystem för studien. Hornhinnan är idealisk för att testa effekterna av agenter på ärrbildning som normala hornhinnan är transparent och vissa typer av sår skapa opacitet eller fibrotisk ärr (ses i6). Flera i vivo korneal sår helande modeller har också använts flitigt för ärrbildning studier1. Mindre utnyttjas har varit ex vivo korneal sår helande modell7,8 som är beskriva i detalj här. Målet med denna metod är att kvantifiera ärrbildning resultat kännetecknas av fibrotiska beslutsfattare i en 3D flercelliga korneal ex vivo modellsystem.
Hornhinnans epitel skadade som inte strider mot epitelial basalmembranet normalt stängs inom 24-72 h9. Snart efter såra börja cellerna vid kanten av epitelet sprida och migrera till den epitelial yta, återupprätta epitelial barriärfunktion. Denna aktivitet är sekventiellt följt av aktivering av hornhinnans basal cell spridning först och i ett senare skede, av prekursorceller som ligger vid yttre limbala zonen att uppnå återvinning av epitelial cell massa10,11. Dessa sår läker ofta utan ärrbildning. Dock resulterar ett sår som penetrerar basalmembranet i stroma ofta i ärr bildas1. Efter hornhinnans stromal såra, fylls stroma med celler av flera ursprung inklusive differentierad bosatt stromaceller samt benmärg-derived fibrocytes12,13,14. Fibrotiska ärrbildning kännetecknas av ihållande myofibroblaster i ett läkande sår. Dessa patologiska myofibroblaster påvisa ökad vidhäftning genom ansamling av integriner i focal sammanväxningar, kontraktila α-smooth aktin (α-SMA) stress muskelfibrer och lokal aktivering av extracellulär matrix (ECM)-binds latent-omvandla tillväxtfaktor-beta-(TGFβ). Differentiering av epitelial-derived celler, som kallas epitelial mesenkymala övergång (EMT), kan också bidra till att ärr bildning6.
Det finns en känslig balans mellan celldifferentiering och apoptos efter såra. På grund av överträdelsen i basalmembranet, tillväxt faktorer såsom trombocyt-derived tillväxt factor (PDGF) och TGFβ från tårar och epitelet bada stroma, förmå myofibroblast differentiering, en ihållande autokrin loop av TGFβ aktiveringen, och den utsöndringen av oorganiserad fibrotiska ECM15,16. Varaktigheten av myofibroblaster i läkta såret främjar haze och ärrbildning på hornhinnan (figur 2). Dock i regeneratively läkt sår även om myofibroblaster utvecklar, de apoptose och därmed är frånvarande eller avsevärt minskat i antal i läkta vävnaden (ses i referens6,10). Forskning om fibrotiska ärrbildning fokuserat således åtminstone delvis på inriktning molekyler som förhindrar överdriven myofibroblast utveckling eller myofibroblast persistens17,18. Eftersom myofibroblast persistens präglar både ärrbildning och fibrotisk sjukdom i alla vävnader19, kan hornhinnan vara användbart som modellsystem studera allmänna cellulära mekanismer av fibros.
I vår modellsystem såras hornhinnan med cylindriska blad kallas en trephine samtidigt i hela världen. Människa och gris hornhinnor kan vara sårad med antingen en 6 eller 7 mm trephine; för kanin hornhinnor föredras en 6 mm trephine. Gris hornhinnan är samma storlek som mänskliga hornhinnan. Eftersom de är kostnadseffektiva och lätt tillgängliga i stort antal, används rutinmässigt gris hornhinnor för orgelkultur. Antikroppar och siRNAs gjorde att reagera med mänskliga har dessutom konsekvent cross-reacted med pig7. Efter såra, skärs hornhinnor från hela världen med limbus intakt och monterad på en agar/kollagen bas. Hornhinna är odlade i serumfritt media plus stabiliserad vitamin C för att simulera fibroblast spridning och ECM nedfall20. Varken tillägg av serum eller tillväxtfaktorer behövs för att framkalla myofibroblast bildande7. Hornhinnor är rutinmässigt fast och behandlas för histologi efter två veckor av kultur. För genen knockdown att testa effekterna av en agent på sårläkning, såret kan behandlas med siRNA i såret efter såra7 eller en löslig agent kan läggas till media, respektive8.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10-010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>91670049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Collagen Solution</td>
			<td>Advance Biomatrix</td>
			<td>5005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pig eyes with lids attached&#160;</td>
			<td>Pel-freeze, Arkansas</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm trephine&#160;</td>
			<td>Katena</td>
			<td>K28014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade&#160;</td>
			<td>Personna</td>
			<td>0.009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small scissor</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>895110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>08953-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kim Wipes&#160;</td>
			<td>Kimberly-Clark&#8482; 34120</td>
			<td>06-666</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm cell culture dishes&#160;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplemented Serum- Free media (SSFM)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add all of the following components to DMEM/F-12:&#160; ITS, RPMI, Glutathione, L-Glutamine, MEM Non essential amino acids, MEM Sodium Pyruvate, ABAM, Gentamicin, Vitamin C.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ITS Liquid Media Supplement&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I3146</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 Vitamins Solution&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R7256</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutathione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6013</td>
			<td>Use at 1 &#181;g/mL. Freeze aliquots; do not reuse after thawing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% L-glutamine solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030-081</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-essential amino acids solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Sodium pyruvate solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11360</td>
			<td>1 M Stocks (1000X) and freeze in single use aliquits.&#160; Use from freezer each time media is made.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABAM&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7292</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>30-005-CR</td>
			<td>200X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin C&#160;</td>
			<td>Wako</td>
			<td>070-0483</td>
			<td>2-0-aD Glucopyranosyl-Ascorbic Acid. 1 mM stocks (1000x)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Iodine&#160;</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>SI86-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Path Cassettes&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum (NGS)</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>005-000-121</td>
			<td>We use 3% NGS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Media&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe Clear&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>314-629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Alcohol</td>
			<td>Ultra Pure</td>
			<td>200CSGP</td>
			<td>200 Proof, diluted at 100%, 70%, 50%)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP327</td>
			<td>10mM, pH 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>M10742500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluing agent&#160;</td>
			<td>Ricca Chemical Company</td>
			<td>220-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% Triton X-100</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>9002-93-1</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1% Tween 20&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP337</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3% Hydrogen Peroxide&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>H324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Kit&#160;</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar&#160;</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>BP1423-500</td>
			<td>Agar solution: prepare 1% agar and 1 mg/mL bovine collagen in DMEM-F12 up to 20 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bermis</td>
			<td>13-374-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moist Chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use any chamber, cover it with wet Wipe Tissue and then put a layer of Parafilm over it.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiagen RNAprotect Cell Reagent</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>&#160;76104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambion PureLink RNA Mini Kit</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>12183018A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Fibronectin-EDA Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F6140</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle actin Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2547 or C6198 (cy3 conjugated)</td>
			<td>1:200 Diluted in 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permafluor&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>62-6520</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for a-SMA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgM (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>PA1-85999</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for FN-EDA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, Cy3&#160;</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>115-165-146</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum (for a-SMA, Fluorescence staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Zeiss Axioplan2&#160;</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPOT-2</td>
			<td colspan="2">Diagnostic Instruments, Sterling Heights, Michigan</td>
			<td>CCD camera</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies

Hornhinnan har använts flitigt som modellsystem studera sårläkning. Förmågan att generera och använda primära däggdjursceller i två dimensionell (2D) och tre dimensionell (3D) kultur har genererat en mängd information inte bara om hornhinnan biologi men också om såret läka, myofibroblast biologi, och ärrbildning i allmänhet . Syftet med protokollet är ett analyssystem för att kvantifiera myofibroblast utveckling, som kännetecknar ärrbildning. Vi visar en hornhinnan orgel kultur ex vivo modell med grisen ögon. I denna främre keratectomy sår, såras hornhinnor fortfarande i Globen med cirkulära blad kallas en trephine. En propp av ungefär 1/3 av främre hornhinnan tas bort bland annat epitelet och basalmembranet den främre delen av stroma. Efter såra, är hornhinnor skär från Globen, monterad på en kollagen/agar base och odlade i två veckor i kompletteras-serum gratis medium med stabiliserad vitamin C att öka cellproliferation och extracellulär matrix sekretion av bosatta fibroblaster. Aktivering av myofibroblaster i främre stroma är tydligt i läkta hornhinnan. Denna modell kan användas till assay sårslutning, utvecklingen av myofibroblaster och fibrotiska markörer, och för toxikologiska studier. Dessutom kan effekterna av liten molekyl-hämmare samt lipid-medierad siRNA transfection för genen knockdown testas i detta system.

Immunhistokemi är primära analysen utnyttjas för att analysera framgången för ex vivo sår helande experiment. Figur 4 illustrerar de epitel och främre stroma i kontroll vävnad (figur 4A, 4B). Sex timmar efter såra, var epitelet frånvarande (figur 4 c, 4 D). Sex dagar efter såra som förväntat, hade epitelet växt ut (figur 4E...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

Ett protokoll för en ex vivo korneal orgel kultur modell användbar för sårläkning studier beskrivs. Denna modell-systemet kan användas för att bedöma effekterna av agenter för att främja regenerativ läkning eller drog toxicitet i en organiserad 3D flercelliga miljö.

Ex Vivo sårläkning korneal orgel kultur modell för studier

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Detta papper beskrivs en enkel metod för assaying såra i en tredimensionell, multi-cellulära organ kultur modell system. Vi gör detta genom att använda gris ögon, men även om du inte är bekant med ögon, kan du göra denna analys. Som översikt fick vi svin ögon, skär ut glober, göra ett cirkulärt sår i hornhinnan som går genom epitelet och ungefär en tredjedel av stroma.Vi skär ut hornhinnan, och montera den på en Agar bas, och sätta denna konstruktion i inkubatorn. Vävnaden kommer att fylla i att skapa ett ärr i hornhinnan. Du behöver inte lägga till några tillväxtfaktorer, eller ens serum.Detta görs i serumfria medier. Även om detta utförs i hornhinnan, kan den användas som ett modellsystem för fibrotisk läkning i allmänhet. Så många av de cellulära vägar som aktiveras under ärrbildning är liknande mellan system.I en biosäkerhetshuva, använd en rak kant kirurgiskt blad för att ta bort världen från locket på en etanol-rengjord skärbräda, och ta bort överflödig fettvävnad från varje öga. Hålla den rengjorda globen posteriort med tuppar omedelbart doppa ögat i PBS följt av tre snabba dips i 10%jod, och två snabba dips i PBS. Linda sedan ögat omkrets med en ren lab vävnad att linda med tillräckligt tryck för att uppnå en spänd hornhinnans yta utan att kontakta hornhinnan.Med hjälp av en sex millimeter trefin, penetrera epitelet i främre stroma i mitten av hornhinnan utan att göra en full tjocklek sår genom hela hornhinnan, och rotera trefin 180 grader medurs och moturs fem gånger samtidigt som man tillämpar lätt tryck för att fördjupa såret. När såret är tillräckligt djupt för att en vävnadslucka ska kunna lyftas med tärnor, använd ett kirurgiskt blad för att skära klaffen parallellt med globen samtidigt som du fortsätter att lyfta den främre hornhinnan inom sårmarginalen. När hela klaffen har tagits bort, bör ett cirkulärt sår vara beläget i mitten av hornhinnan.För att skörda hornhinnan greppa ögat med labbet vävnad, och använda ett kirurgiskt blad för att göra ett litet snitt en millimeter bort från kanten av hornhinnan att inkludera limbus och vävnad insamling. Med hjälp av små, skarpa saxar fortsätta snittet runt om i världen hålla en millimeter marginal över hornhinnan för att hålla limbus i takt. Placera sedan hornhinnan, sår-sidan ner, i en 60 millimeter, eller 100 millimeter maträtt som innehåller en milliliter PBS.För att montera hornhinnan, använd två par tpålett för att hålla hornhinnan epitel-sidan upp för att skapa en kopp, och använda en steril överföring pipett för att lägga värmd agar lösning i hornhinnan tills koppen är full. Efter agar härdar, försiktigt placera hornhinnan i en ny 60 millimeters platta agar-sida ner och täck plattan med lock. Tillsätt sedan fyra milliliter kompletterat serumfritt medium till varje platta av hornhinnor upprätthålla hornhinnor vid en luft-flytande gränssnitt vid limbal gränsen i en cellkultur inkubator på 37 grader celsius i 5%koldioxid, och vätning hornhinnans ytor en gång dagligen med en droppe kompletterat serumfritt medium från det konditionerade mediet i skålen för att hålla vävnaderna hydrerade.För gen knockdown, blanda fem mikroliter av små störande eller siRNa med 50 mikroliter av reducerade serum minsta väsentliga medium och två mikroliter av transfection reagens. Med 50 mikroliter av reducerat serummedium per hornhinna. Efter fem minuter, blanda de två blandningarna tillsammans, och tillsätt 200 mikroliter av reducerat serum minimimedium till varje siRNA-blandning.Sedan pipettera siRNA-lösningarna släppa klokt på varje sår. Lägg sedan hornhinnorna i inkubatorn. Efter tre timmar, använd mediet i varje maträtt för att tvätta siRNA från hornhinnans ytor, och ersätta det konditionerade mediet i varje maträtt med färska kompletterade serum fria medium plus antibiotika.Sedan tillbaka hornhinnans kulturer till cellkulturen inkubator, och inkubera i två veckor. Sex timmar efter att ha sårat är hornhinneeptel frånvarande. Sex dagar efter såra, epitel återväxer.Fluorescens amino färgning med alfa glatt muskel aktin avslöjar en gradient av aktiva myofibroblasts längs såret marginal från främre till bakre stroma. Immuno-histochemical färgning för alfa glatt muskel aktin avslöjar en dramatisk ökning av alfa glatt muskel aktin protein uttryck i sårade plus kontroll siRNA hornhinnor. Jämfört med ovävda och mål protein siRNA behandlas, sårade hornhinnor.Likaså är fibronectin extra domän A upregulated i siRNA behandlade sårade hornhinnor jämfört med ovävda och mål protein siRNA behandlade sårade hornhinnor. Demonstrerar en lyckad knock down av målproteinet. Vidare, behandling av de sårade hornhinnan med toxinet som nonspecifically mål målet proteinet förhindrar re-epithelialization och resulterar i kvalitativ celldöd, en oorganiserad matris och stromal vacuoles tyder på att toxinet inte främjar läkning vid koncentrationen assayed.Sammanfattningsvis, medan du försöker detta förfarande är det viktigt att komma ihåg att hålla bladet parallellt med vävnaden medan du skär, så att den inte penetrera världen. Olika såra tekniker kan användas med denna analys, inklusive kemisk brännskada eller epitelial skrapa. Det kan också användas för läkemedelstoxicitet assays att avgöra om epitelet läker och i vilken takt.Detta är en kostnadsbesparingar ex vivo, orgel kultur modell system som kan föregå din in vivo sårläkning studier.

Research

JoVE Journal

Medicine

Murine Model of Wound Healing

Murinmodell sårläkning

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murin Endoskopi för<em&gt; In Vivo</em&gt; Multimodal avbildning av Carcinogenesis och Bedömning av intestinala sårläkning och inflammation

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

En liten djurmodell för Ex Vivo Normothermic lever Perfusion

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Hornhinnans epitel nötning med okulär Burr som modell för hornhinnan sårläkning

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Targeting Gray Rami Communicantes in Selective Chemical Lumbar Sympathectomy

Inriktning grå Rami Communicantes i selektiv kemiska ländryggen Sympathectomy

Chemical lumbar sympathectomy (CLS) is a commonly used, minimally invasive procedure for the treatment of conditions including ischemic diseases of the ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Ett Ex Vivo vävnadsodling modell för fibrovaskulär komplikationer i proliferativ diabetesretinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Scratch Migration Assay and Dorsal Skinfold Chamber for In Vitro and In Vivo Analysis of Wound Healing

Scratch migration assay och dorsal skinfold kammare för in vitro-och in vivo-analys av sårläkning

Impaired cutaneous wound healing is a major concern for patients suffering from diabetes and for elderly people, and there is a need for an effective ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

En porcin hornhinnan endotelial orgel kultur modell med Split hornhinnan knappar

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Optocardiography and Electrophysiology Studies of Ex Vivo Langendorff-perfused Hearts

Optokardiografi och elektrofysiologi studier av ex vivo Langendorff-parfymera hjärtan

Small animal models are most commonly used in cardiovascular research due to the availability of genetically modified species and lower cost compared to ...

An Epithelial Abrasion Model for Studying Corneal Wound Healing

En epitelial nötningsmodell för att studera hornhinnans sårläkning

The cornea is critical for vision, accounting for about two-thirds of the refractive power of the eye. Crucial to the role of the cornea in vision is its ...