Name: ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies
Uploaded: 2019-02-15T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Bu eser NIH NEI R01 EY024942, araştırma önlemek körlük, şehir dışında Üniversitesi Tıbbi sınırsız Araştırma Fonu tarafından desteklenmiştir ve aslanlar bölge 20-Y. mikroskobu ve görüntü analizi parafin bölümlerin mikroskobu özünde gerçekleştirilen ve histolojik slayt hazırlama Biorepository ve Sina Dağı, Icahn Tıp Fakültesi Patoloji özünde gerçekleştirildi.

1. organ kültür
<ol><li>
Hazırlıklar
	<ol>
<li>Agar çözüm aşağıdaki gibi hazırlayın. Küçük bir şişeye %1 agar ve DMEM-F12 1 mg/mL sığır kolajen hazırlamak ilâ 20 mL. Sıcak plaka üzerinde kaynamaya getir. Çözüm 50 mL konik tüp içine koymak. Tüp güçlendirilerek gelen çözüm tutmak için sıcak tabakta su banyosu yerleştirin.</li>
		<li>İlave serum-ücretsiz medya (SSFM) göre sağlanan Malzemeler tablokompozisyon hazırlamak. Not: S...

Bu iletişim kuralı bir doğal tabakalı 3D ortamda yara iyileşmesi eğitim için bir modeli açıklar. Bir ara içinde vivo çalışmalar arasındaki hücre kültürü olarak organ kültür kullanımı yanı sıra canlı hayvanlar üzerinde azalan bakiyeli yönergeleri maliyeti önemli ölçüde azaltır. Diğer 3D modelleri kollajen jelleri birincil insan kornea fibroblastlar2 ya da bu aynı hücrelere yapılan kendi kendine sentezleme dahil olmak üzere alana büyük fayda hayvan kaynaklı co...

Yaralanma, travma ya da enfeksiyon sonucu kornea skarlasma opaklıklar ve kalıcı görme kaybı zayıflatıcı için yol açabilir. Böylece, terapötik müdahale için yönlendirilebilir yolları tanımlamak için kritik bir ihtiyaç vardır. Mevcut tedavi seçenekleri sınırlı ve dünya çapında hastalar için erişilebilir değildir öncelikle kornea nakillerine oluşur. İnsan (Şekil 1) ve hayvan kornealar-ebilmek var olmak kullanmak için 2D ve 3D hücre kültürü çalışmaları1,2. İnsan kadavra kornealar nakil için uygun değildir göz bankaları veya merkezi doku bankaları (Ulusal hastalık araştırma değişim (NDRI)) elde edilebilir ve hayvan gözleri bir mezbaha elde edilebilir. Birincil kornea epitel hücreleri, stromal fibroblastlar ve daha yakın, endotel hücreleri, izole ve olması için yara iyileşmesi bu dokularda gelen kültürlü ve toksikoloji3,4,5çalışmalar. Göz hastalığı kör moleküler temelini anlamak önemi ek olarak, çalışma için bir önemli model sistemi kornea doku ve kültür primer hücre yeteneği erişilebilirliğini yaptı. Korneanın normal kornea şeffaf ve opaklıklar veya fibrotik izleri (6' gözden) belirli türden yaralar oluşturmak gibi yara izi üzerinde ajanların etkileri test etmek için idealdir. Birkaç vivo içinde kornea yara iyileşme modelleri Ayrıca kapsamlı çalışmalar1yara izi için kullanılmıştır. Daha az kullanılan eski olmuştur vivo kornea yara burada ayrıntılı olarak açıklayan şifa modeli7,8 . Bu yöntemin skarlasma sonuçları çok hücreli bir 3D fibrotik yapımcıları ile karakterize ölçmek için hedeftir kornea ex vivo modeli sistemi.
Bu epitelyal membran normalde ihlal etmediği yaralama kornea epitel 24-72 h9içinde kapanır. Yakında yaralama sonra hücreleri epitel kenarında yayılan ve ücretsiz epitel yüzeye epitel bariyer fonksiyonu yeniden kurmak için geçiş yapma başlayın. Bu etkinlik ardışık olarak kornea bazal hücre çoğalması etkinleştirme tarafından ilk ve, bir sonraki aşamada, kurtarma epitel hücre kitle10,11ulaşmak için dış limbal bölgede bulunan öncü hücrelerinin içinde gelir. Bu yaralar kez skarlasma olmaksizin iyilesmektedir. Ancak, membran kez stroma nüfuz bir yara yara oluşumu1sonuç. Kornea stromal yaralama sonra stroma farklılaştırılmış ikamet stromal hücreler kemik iliği türevi fibrocytes12,13,14gibi birden çok kökenli hücreleri ile doldurulur. Fibrotik yara iyileştirici bir yara myofibroblasts sebat karakterizedir. Bu patolojik myofibroblasts integrinler odak yapışıklıklar, contractile α-düz kas aktin (α-SMA) stres lifleri ve hücre dışı matriks (ECM) yerel etkinleştirme birikimi ile artan yapışma göstermek-münzevi gizli dönüştürme büyüme faktörü-beta (TGFβ). Epitel mezenkimal geçiş (EMT), bilinen, türetilmiş epitel hücreleri farklılaşma da oluşumu6scar için katkıda bulunabilir.
Yaralama sonra hücre farklılaşma ve Apoptozis arasında hassas bir denge olduğunu. Trombosit-türevi büyüme faktörü (PDGF) ve TGFβ gelen gözyaşları ve epitel myofibroblast farklılaşma, TGFβ harekete geçirmek, sürekli otokrin döngüsünü inducing stroma, banyo yapma gibi membran ihlali nedeniyle, büyüme faktörleri ve salgı dağınık fibrotik ECM15,16. İyileşmiş yara myofibroblasts sebat haze ve kornea (Şekil 2) skarlasma teşvik etmektedir. Ancak, regeneratively iyileşmiş yara myofibroblasts geliştirmek rağmen onlar apoptose ve böylece yok olan veya önemli ölçüde azaltılmış numarası (başvuru6,10dakika sonra gözden) iyileşmiş doku. Böylece, fibrotik skarlasma araştırma en azından kısmen aşırı myofibroblast geliştirme veya myofibroblast sebat17,18önlemek molekülleri hedefleme üzerinde odaklanmıştır. Çünkü tüm dokularda19skarlasma ve fibrotik hastalığında myofibroblast sebat karakterize, kornea fibrozis genel hücresel mekanizmaları incelemek için bir model sistem olarak yararlı olabilir.
Modeli sistemimizde bir trephine hala içinde iken dünya denilen silindirik bir bıçak ile kornea yaralı. İnsan ve domuz kornealar yaralı ya da bir 6 veya 7 mm trephine ile; tavşan kornealar için 6 mm trephine tercih edilir. Domuz kornea insan kornea boyutunda benzer. Uygun maliyetli ve çok sayıda hazır oldukları için domuz kornealar rutin olarak organ kültür için kullanılır. Ayrıca, antikorlar ve insan ile tepki için yapılan çift sürekli olarak domuz7ile cross-reacted. Yaralama sonra kornealar limbus ile dünya üzerinden olduğu gibi kesilir ve bir agar/kollajen üzerinde temel monte. Kornealar serum serbest ortamda kültürlenir Ayrıca fibroblast proliferasyonu ve ECM ifade20benzetimi yapmak için C vitamini stabilize. Ne serum eklenmesi ne de büyüme faktörleri myofibroblast oluşumu7ikna etmek için ihtiyaç vardır. Kornealar düzenli olarak sabit ve histoloji için kültür iki hafta sonra işlenir. Gen nakavt veya yara iyileşmesi üzerinde bir ajan etkilerini test etmek için yara ile siRNA yarada7 yaralama sonra tedavi edilebilir veya çözünür bir ajan medya için sırasıyla8eklenebilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10-010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen Strep&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>91670049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Collagen Solution</td>
			<td>Advance Biomatrix</td>
			<td>5005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pig eyes with lids attached&#160;</td>
			<td>Pel-freeze, Arkansas</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6.0 mm trephine&#160;</td>
			<td>Katena</td>
			<td>K28014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Blade&#160;</td>
			<td>Personna</td>
			<td>0.009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small scissor</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>895110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>08953-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kim Wipes&#160;</td>
			<td>Kimberly-Clark&#8482; 34120</td>
			<td>06-666</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm cell culture dishes&#160;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>08-772B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplemented Serum- Free media (SSFM)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Add all of the following components to DMEM/F-12:&#160; ITS, RPMI, Glutathione, L-Glutamine, MEM Non essential amino acids, MEM Sodium Pyruvate, ABAM, Gentamicin, Vitamin C.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM/F-12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ITS Liquid Media Supplement&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I3146</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 Vitamins Solution&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R7256</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutathione</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G6013</td>
			<td>Use at 1 &#181;g/mL. Freeze aliquots; do not reuse after thawing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% L-glutamine solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25030-081</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Non-essential amino acids solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM Sodium pyruvate solution&#160;</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11360</td>
			<td>1 M Stocks (1000X) and freeze in single use aliquits.&#160; Use from freezer each time media is made.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABAM&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A7292</td>
			<td>100X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>30-005-CR</td>
			<td>200X</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin C&#160;</td>
			<td>Wako</td>
			<td>070-0483</td>
			<td>2-0-aD Glucopyranosyl-Ascorbic Acid. 1 mM stocks (1000x)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Iodine&#160;</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>SI86-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Path Cassettes&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum (NGS)</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>005-000-121</td>
			<td>We use 3% NGS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mounting Media&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safe Clear&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>314-629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl Alcohol</td>
			<td>Ultra Pure</td>
			<td>200CSGP</td>
			<td>200 Proof, diluted at 100%, 70%, 50%)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP327</td>
			<td>10mM, pH 6.4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>M10742500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bluing agent&#160;</td>
			<td>Ricca Chemical Company</td>
			<td>220-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% Triton X-100</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>9002-93-1</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.1% Tween 20&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>BP337</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3% Hydrogen Peroxide&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>H324</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAB Kit&#160;</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar&#160;</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>BP1423-500</td>
			<td>Agar solution: prepare 1% agar and 1 mg/mL bovine collagen in DMEM-F12 up to 20 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td>Bermis</td>
			<td>13-374-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moist Chamber</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Use any chamber, cover it with wet Wipe Tissue and then put a layer of Parafilm over it.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2000</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiagen RNAprotect Cell Reagent</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>&#160;76104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ambion PureLink RNA Mini Kit</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>12183018A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Fibronectin-EDA Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F6140</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-alpha smooth muscle actin Antibody</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2547 or C6198 (cy3 conjugated)</td>
			<td>1:200 Diluted in 3% normal goat serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Permafluor&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>TA-030-FM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36931</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>62-6520</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for a-SMA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgM (H+L) Secondary Antibody, HRP&#160;</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>PA1-85999</td>
			<td>1:100 diluted in 3% normal goat serum (for FN-EDA, DAB staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gt anti -MS IgG (H+L) Secondary Antibody, Cy3&#160;</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>115-165-146</td>
			<td>1:200 Diluted in&#160; 3% normal goat serum (for a-SMA, Fluorescence staining)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Zeiss Axioplan2&#160;</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPOT-2</td>
			<td colspan="2">Diagnostic Instruments, Sterling Heights, Michigan</td>
			<td>CCD camera</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo corneal organ culture model for wound healing studies

Kornea kapsamlı bir model sistem olarak yara iyileşmesi çalışma kullanılmaya başlanmıştır. Yeteneği oluşturmak ve iki boyutlu (2D) ve üç boyutlu (3D) kültür birincil memeli hücrelerinde kullanmak sadece kornea biyoloji hakkında aynı zamanda şifa, myofibroblast biyoloji ve genel olarak yara yara hakkında bilgi hazinesi üretti . Protokol amacı skarlasma karakterize myofibroblast geliştirme miktarının bir tahlil sistemidir. Biz domuz gözleri kullanarak bir kornea organ kültür ex vivo modeli göstermek. Yarası bu ön keratectomy içinde kornealar hala dünya içinde bir trephine olarak adlandırılan bir dairesel bıçakla yaralı. Bir fiş yaklaşık 1/3 ön kornea epitel, membran ve stroma ön parçası gibi kaldırılır. Yaralama sonra kornealar dünyanın gelen kesmek, kollajen/agar üste monte ve stabilize hücre çoğalması ve hücre dışı matriks salgılanmasını artırmak için C vitamini ile desteklenmiş serum özgür ortamda iki haftadır ikamet fibroblastlar tarafından kültürlü. Myofibroblasts anterior stroma içinde aktivasyonu iyileşmiş kornea belirgindir. Bu model yara kapatma, myofibroblasts ve fibrotik işaretleri ve toksikoloji çalışmaları için tahlil için kullanılabilir. Buna ek olarak, küçük molekül inhibitörleri yanı sıra lipit-aracılı siRNA transfection gen nakavt için etkileri bu sistemi test edilebilir.

İmmünhistokimya olduğunu kullanılan birincil tahlil eski başarısını çözümlemek için şifa deney vivo yara. Şekil 4 epitel ve denetim doku (Şekil 4A, 4B) ön stroma gösteriyor. Altı saat sonra yaralama, epitel (Şekil 4 c, 4 D) yapıldı. Beklendiği gibi yaralama sonra altı gün epitel (4E rakam, 4F) reg...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies at JoVE.com

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

Eski bir protokol vivo kornea organ kültür model çalışmaları şifa yara açıklanan için yararlı. Bu modeli sistem rejeneratif iyileşmesine katkıda bulunmak üzere ajanlar veya ilaç toksisitesi organize 3D çok hücreli ortamında etkilerini değerlendirmek için kullanılabilir.

Ex vivo kornea Organ kültür modeli için yaranın çalışmaları

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Bu makalede, üç boyutlu, çok hücreli organ kültürü model sisteminde yaralamayı nitelemede kullanılan basit bir yöntem tanımlanmıştır. Biz domuz gözleri kullanarak bunu, ama gözleri aşina olmasa bile, bu titret yapabilirsiniz. Genel bir bakış olarak, domuz gözleri aldık, küreleri kestik, korneada epitelden geçen dairesel bir yara yaptık ve stromanın yaklaşık üçte biri.Korneayı kesip, bir Agar tabanına monte edip, bu yapıyı kuvöze yerleştiriyoruz. Doku korneada bir yara izi oluşturarak dolacak. Herhangi bir büyüme faktörü, hatta serum eklemek gerekmez.Bu serumsuz ortamda yapılır. Bu korneada yapılmasına rağmen, genel olarak fibrotik iyileşme için bir model sistemi olarak kullanılabilir. Yara izi sırasında aktive olan hücresel yolların çoğu sistemler arasında benzer olduğu gibi.Bir biyogüvenlik başlık olarak, bir etanol temizlenmiş doğrama tahtası üzerinde kapak tan küre kaldırmak için düz kenar cerrahi bıçak kullanın, ve her gözaşırı yağ dokusu kaldırmak. Temizlenmiş küreyi posteriora'da forcep'lerle tutarak gözü hemen PBS'ye daldırın ve ardından %10 iyotta üç hızlı düşüş ve PBS'de iki hızlı dalış yapın. Sonra kornea temas etmeden gergin bir kornea yüzeyine ulaşmak için yeterli basınç ile sarmak için temiz bir laboratuvar dokusu ile çevreye doğru göz sarın.Altı milimetrelik bir trephine kullanarak, tüm kornea boyunca tam kalınlıkta yara yapmadan korneanın merkezinde ön stroma epitel nüfuz, ve yara derinleştirmek için ışık basıncı uygularken trephine 180 derece saat yönünde ve saat yönünün tersine beş kez döndürmek. Yara, bir doku flebininin forsepsle kaldırılmasına izin verecek kadar derin olduğunda, yara marjı içindeki ön korneayı kaldırmaya devam ederken kapağı dünyaya paralel kesmek için cerrahi bir bıçak kullanın. Flepin tamamı çıkarıldığında korneanın merkezinde dairesel bir yara bulunmalıdır.Kornea hasat laboratuvar dokusu ile göz kavramak ve limbus ve doku toplama dahil kornea kenarından bir milimetre uzaklıkta küçük bir kesi yapmak için bir cerrahi bıçak kullanın. Küçük, keskin makas kullanarak ince limbus tutmak için kornea boyunca bir milimetre marjı tutarak dünya çapında kesi devam ediyor. Sonra kornea yerleştirin, yara tarafı aşağı, bir 60 milimetre, ya da PBS bir mililitre içeren 100 milimetre çanak.Kornea monte etmek için, bir fincan oluşturmak için kornea epitel tarafı tutmak için forseps iki çift kullanın ve fincan dolana kadar kornea içine ısıtılmış agar çözüm eklemek için steril bir transfer pipet kullanın. Agar sertleştikten sonra korneayı 60 milimetrelik yeni bir tabak agar tarafına dikkatlice yerleştirin ve tabağı bir kapakla kapatın. Daha sonra her kornea tabağına, hücre kültürü kuvözde 37 santigrat derecede %5 karbondioksit içeren bir hava-sıvı arabiriminde korneabakımı yapmak için dört mililitre ekserumsuz ortam ekleyin ve dokuları sulu tutmak için çanaktaki şartlı ortamdan bir damla serumsuz ortamla günde bir damla kornea yüzeylerini ıslatın.Gen nakavt için, azaltılmış serum minimum temel orta 50 mikrolitre ve transfeksiyon reaktif iki mikrolitre ile küçük müdahale veya siRNa beş mikrolitre karıştırın. Kornea başına azaltılmış serum orta 50 mikrolitre ile. Beş dakika sonra, birlikte iki karışımları karıştırın ve her siRNA karışımı azaltılmış serum minimum orta 200 mikrolitre ekleyin.Sonra pipet siRNA çözeltileri her yara üzerine akıllıca düşer. Sonra korneaları kuvöze koy. Üç saat sonra, kornea yüzeylerinden siRNA yıkamak için her çanak orta kullanın, ve taze takviye serum ücretsiz orta artı antibiyotikler ile her çanak koşullu orta değiştirin.Sonra kornea kültürlerini hücre kültürü kuluçka makinesine geri döndürün ve iki hafta kuluçkaya yatırın. Yaralandıktan altı saat sonra kornea epiteli yok. Yaralandıktan altı gün sonra epitel yeniden büyür.Alfa düz kas aktin ile floresan amino boyama arka stroma ön yara marjı boyunca aktif miyofibroblastlar bir gradyan ortaya koymaktadır. Alfa düz kas aktin için immüno-histokimyasal boyama yaralı artı kontrol siRNA kornea alfa düz kas aktin protein ekspresyonunda dramatik bir artış ortaya koymaktadır. Yaralanmamış ve hedef protein siRNA ile karşılaştırıldığında tedavi, yaralı kornea.Benzer şekilde, fibronektin ekstra etki A siRNA tedavi yaralı kornea lar yaralanmamış ve hedef protein siRNA tedavi yaralı kornea ile karşılaştırıldığında upregulated olduğunu. Hedef proteinin başarılı bir şekilde yıkılacağını gösteriyor. Ayrıca, özellikle hedef protein hedefleyen toksin ile yaralı korneaların tedavisi yeniden epitelizasyon önler ve nitel hücre ölümü ile sonuçlanır, düzensiz bir matris, ve stromal vacuoles toksin konsantrasyonu tahlili iyileşme teşvik etmez düşündürmektedir.Sonuç olarak, bu işlemi denerken bıçağı keserken dokuya paralel tutmayı unutmamak önemlidir, böylece küreye nüfuz etmez. Kimyasal yanık veya epitel kazıma dahil olmak üzere bu titretile farklı yaralama teknikleri kullanılabilir. Ayrıca epitel iyileşir ve ne oranda belirlemek için ilaç toksisite tahlilleri için kullanılabilir.Bu bir maliyet tasarrufu ex vivo, in vivo yara iyileşme çalışmaları öncesinde olabilir organ kültürü model sistemidir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Murine Model of Wound Healing

Yara Şifa murin Modeli

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murine Endoscopy for In Vivo Multimodal Imaging of Carcinogenesis and Assessment of Intestinal Wound Healing and Inflammation

Murin için Endoskop<em&gt; In Vivo</em&gt; Karsinojenez ve bağırsak Değerlendirilmesi Multimodaller Görüntüleme Yara İyileşmesi ve İltihap

Mouse models are widely used to study pathogenesis of human diseases and to evaluate diagnostic procedures as well as therapeutic interventions ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

Ex Vivo Normothermic karaciğer perfüzyon küçük bir hayvan Model

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

Kornea epitel aşınma oküler Burr ile bir Model olarak kornea için yara iyileşme

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

Targeting Gray Rami Communicantes in Selective Chemical Lumbar Sympathectomy

Seçmeli kimyasal Lomber sempatektomi gri Rami Communicantes hedefleme

Chemical lumbar sympathectomy (CLS) is a commonly used, minimally invasive procedure for the treatment of conditions including ischemic diseases of the ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Bir Ex Vivo doku kültürü modeli Fibrovascular komplikasyon proliferatif diyabetik retinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Scratch Migration Assay and Dorsal Skinfold Chamber for In Vitro and In Vivo Analysis of Wound Healing

In Vitro ve In Vivo In Vivo Analizi Yara İyileşmesi için Scratch Migration Tahlil ve Dorsal Skinfold Odası

Impaired cutaneous wound healing is a major concern for patients suffering from diabetes and for elderly people, and there is a need for an effective ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

Split Korneal Düğmeleri Kullanarak Bir Domuz Korneal Endotel Organ Kültür Modeli

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...

Optocardiography and Electrophysiology Studies of Ex Vivo Langendorff-perfused Hearts

Ex Vivo Langendorff perfüzyonlu Kalplerin Optokardiyografi ve Elektrofizyoloji Çalışmaları

Small animal models are most commonly used in cardiovascular research due to the availability of genetically modified species and lower cost compared to ...

An Epithelial Abrasion Model for Studying Corneal Wound Healing

Kornea Yara İyileşmesini İncelemek İçin Epitelyal Aşınma Modeli

The cornea is critical for vision, accounting for about two-thirds of the refractive power of the eye. Crucial to the role of the cornea in vision is its ...