Name: novel object recognition and object location behavioral testing in mice on a budget
Uploaded: 2018-11-20T15:00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget at JoVE.com

यह काम ओहियो राज्य विश्वविद्यालय में क्रोनिक मस्तिष्क चोट और खोज विषयों से EDK को NIH और बीज वित्त पोषण से R00 NS089938 द्वारा वित्त पोषित किया गया ।

<ol>
	<li>Krakauer, J. W., Ghazanfar, A. A., Gomez-Marin, A., Maclver, M. A., Poeppel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroscience+Needs+Behavior:+Correcting+a+Reductionist+Bias.">Neuroscience Needs Behavior: Correcting a Reductionist Bias.</a> Neuron. 93 (3), 480-490 (2017).</li><li>Lange, F., Seer, C., Kopp, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+flexibility+in+neurological+disorders:+Cognitive+components+and+event-related+potentials.">Cognitive flexibility in neurological disorders: Cognitive components and event-related potentials.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 83, 496-507 (2017).</li><li>Barnett, J. H., Blackwell, A. D., Sahakian, B. J., Robbins, T. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hippocampus-what+does+it+do?.">The hippocampus-what does it do?.</a> Behavioral and Neural Biology. 57 (1), 2-36 (1992).</li><li>Bartsch, T., Wulff, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hippocampus+in+aging+and+disease:+From+plasticity+to+vulnerability.">The hippocampus in aging and disease: From plasticity to vulnerability.</a> Neuroscience. 19 (309), 1-16 (2015).</li><li>Smith, B. M., Yao, X., Chen, K. S., Kirby, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Larger+Social+Network+Enhances+Novel+Object+Location+Memory+and+Reduces+Hippocampal+Microgliosis+in+Aged+Mice.">A Larger Social Network Enhances Novel Object Location Memory and Reduces Hippocampal Microgliosis in Aged Mice.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 10 (142), 1-16 (2018).</li><li>Chieffi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise+Influence+on+Hippocampal+Function:+Possible+Involvement+of+Orexin-A.">Exercise Influence on Hippocampal Function: Possible Involvement of Orexin-A.</a> Frontiers in Physiology. 14 (8), 85 (2017).</li><li>Garth, A., Roeder, I., Kempermann, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+in+an+enriched+environment+learn+more+flexibly+because+of+adult+hippocampal+neurogenesis.">Mice in an enriched environment learn more flexibly because of adult hippocampal neurogenesis.</a> Hippocampus. 26 (2), 261-271 (2016).</li><li>Brown, R. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Examining+object+location+and+object+recognition+memory+in+mice.">Examining object location and object recognition memory in mice.</a> Current Protocols in Neuroscience. 69, 1-17 (2014).</li><li>Ammassari-Teule, M., Passino, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dorsal+hippocampus+is+selectively+involved+in+the+processing+of+spatial+information+even+in+mice+with+a+genetic+hippocampal+dysfunction.">The dorsal hippocampus is selectively involved in the processing of spatial information even in mice with a genetic hippocampal dysfunction.</a> Psychobiology. 25 (2), 118-125 (1997).</li><li>Le Merrer, J., Rezai, X., Scherrer, G., Becker, J. A., Kieffer, B. 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D., Abel, T., Havekes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-training+reversible+inactivation+of+the+hippocampus+enhances+novel+object+recognition+memory.">Post-training reversible inactivation of the hippocampus enhances novel object recognition memory.</a> Learning and Memory. 17 (3), 155-160 (2010).</li><li>Cohen, S. J., Stackman, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+rodent+hippocampal+involvement+in+the+novel+object+recognition+task.">Assessing rodent hippocampal involvement in the novel object recognition task.</a> Behavioral Brain Research. 285, 105-117 (2014).</li><li>Cohen, S. 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L., Ashkenazy-Frolinger, T., Hartz, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Comprehensive+Behavioral+Test+Battery+to+Assess+Learning+and+Memory+in+129S6/Tg2576+Mice.">A Comprehensive Behavioral Test Battery to Assess Learning and Memory in 129S6/Tg2576 Mice.</a> Public Library of Science ONE. 11 (1), e0147733 (2016).</li><li>Ennaceur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-trial+object+recognition+in+rats+and+mice:+methodological+and+theoretical+issues.">One-trial object recognition in rats and mice: methodological and theoretical issues.</a> Behavioural Brain Research. 215, 244-254 (2010).</li><li>Lueptow, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Object+Recognition+Test+for+the+Investigation+of+Learning+and+Memory+in+Mice.">Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (126), e55718 (2017).</li><li>Wasserstein, R. L., Lazar, N. 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लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

प्रभावी संज्ञानात्मक परीक्षण को अलग और एक नियंत्रित वातावरण में व्यवहार की जांच द्वारा विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों के तंत्रिका कार्य का आकलन1. मनुष्यों में, विशिष्ट कार्य ऐसे विस्कॉंसिन कार्ड के रूप में सामने समारोह या युग्मित एसोसिएट्स कैंब्रिज Neuropsychological परीक्षण स्वचालित बैटरी की परीक्षा के लिए छंटाई कार्य के रूप में लक्षित मस्तिष्क क्षेत्रों, के प्रदर्शन का आकलन करने के लिए डिजाइन किया गया है ( CANTAB) हिप्पोकैम्पस फ़ंक्शन के लिए2,3. इन परीक्षणों के व्यवहार का आकलन है कि उन क्षेत्रों के तंत्रिका गतिविधि से परिणाम द्वारा मनुष्यों में विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों के कार्यों का अध्ययन करने के लिए डिज़ाइन कर रहे हैं । सबसे अधिक जैव चिकित्सा अनुसंधान के अंत लक्ष्य मानव स्वास्थ्य के सुधार है; हालांकि, स्वास्थ्य या रोग में मस्तिष्क समारोह के कई अध्ययनों नैतिक रूप से मानव प्रतिभागियों के साथ प्रदर्शन नहीं किया जा सकता । अध्ययन के लिए है कि मानव प्रतिभागियों का उपयोग नहीं कर सकते, चूहों जैसे छोटे कुतर अक्सर पसंद के मॉडल हैं । माउस मॉडल का प्रयोग जीन की अभिव्यक्ति के परिवर्तन सहित प्रयोगात्मक जोड़तोड़ पर प्रत्यक्ष नियंत्रण के लिए अनुमति देता है, चोट या optogenetic तकनीक के माध्यम से सर्किट गतिविधि के भी मॉडुलन की प्रेरण । चूहों के व्यवहार का परीक्षण, मानव परीक्षण के लिए इसी तरह, व्यवहार है कि विशिष्ट क्षेत्रों पर निर्भर को मापने के द्वारा मस्तिष्क समारोह पर प्रयोगात्मक चर के प्रभाव का आकलन करना है.
हिप्पोकैम्पस मानव में स्मृति गठन के लिए एक आवश्यक संरचना है और4कुतर । अधिक विशेष रूप से, हिप्पोकैम्पस declarative संबंध प्रतिनिधित्व शामिल स्मृति में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, लेकिन प्रक्रियात्मक स्मृति है, जो4मस्तिष्क के मोटर केंद्रों पर निर्भर नहीं है । हिप्पोकैम्पस स्मृति समारोह तंत्रिका विज्ञान के कई क्षेत्रों में अध्ययन का ध्यान केंद्रित किया गया है क्योंकि यह गड़बड़ी के लिए अति संवेदनशील है । लंबे समय तक तनाव और बरामदगी और स्ट्रोक के लिए उंर बढ़ने से लेकर नकारात्मक perturbations हिप्पोकैम्पस नुकसान के साथ जुड़े रहे है5। इसके विपरीत, सकारात्मक हस्तक्षेप, जैसे सामाजिक संपर्क, भौतिक पर्यावरण संवर्धन, या व्यायाम, हिप्पोकैम्पस समारोह6,7,8में सुधार होगा । हिप्पोकैम्पस स्मृति के उचित परीक्षण के साथ कुतर अध्ययन सेलुलर और स्मृति के आणविक मध्यस्थों में अंतर्दृष्टि प्रकट कर सकते है और साथ ही हिप्पोकैम्पस समारोह पर विभिंन पर्यावरणीय हस्तक्षेप के प्रभाव ।
कुतर में, कई परीक्षणों हिप्पोकैम्पस-निर्भर सीखने और स्मृति9,10,11का अध्ययन करने के लिए विकसित किया गया है । वे मोटे तौर पर कार्य में विभाजित किया जा सकता है कि भावनात्मक प्रसार के साथ एक उत्तेजना की आवश्यकता के लिए व्यवहार में परिवर्तन लाना, और कार्य है कि कुतर वरीयता पर आकर्षित उपंयास उत्तेजनाओं11की जांच । प्रासंगिक डर कंडीशनिंग, उदाहरण के लिए, जोड़े एक अप्रिय उत्तेजना एक पर्यावरणीय संदर्भ के साथ (पैर सदमे) और फिर बाद में डर-प्रेरित ठंड व्यवहार9,11को मापने के संदर्भ के लिए स्मृति परीक्षण । मॉरिस पानी भूलभुलैया और उसके सूखे समकक्ष, बार्ंस भूलभुलैया, नकारात्मक बाहरी सुदृढीकरण का उपयोग करने के लिए स्थानिक सीखना4,11को बढ़ावा देने के । प्रत्येक मामले में, कुतर एक aversive स्थिति से बचने की तलाश, ठंडे पानी में डूबे या एक चमकीले रूप से जलाया मंच पर उजागर किया जा रहा है, क्रमशः । इसके विपरीत में रेडियल एआरएम भूलभुलैया, सकारात्मक सुदृढीकरण पर निर्भर करता है के रूप में जानवरों प्राकृतिक चारा स्थानिक स्मृति के साथ मिलकर व्यवहार का उपयोग छोटे खाद्य पुरस्कार प्राप्त करने के लिए4,11. इन कार्यों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है और हिप्पोकैम्पस स्मृति के बारे में मूलभूत ज्ञान प्राप्त है । हालांकि, नकारात्मक और सकारात्मक बाहरी सुदृढीकरण या सदमे की तरह उत्तेजना उत्प्रेरण इन व्यवहार परीक्षणों जो कुछ मामलों में अवांछनीय हो सकता है के लिए एक भावनात्मक घटक जोड़ें । उदाहरण के लिए, पृष्ठीय और ventral hippocampi विशिष्ट कार्यों के साथ जुड़े रहे हैं, स्थानिक स्मृति बनाम भावनात्मक विनियमन, क्रमशः12. परीक्षण है कि उत्तेजनाओं के लिए एक भावनात्मक प्रतिक्रिया पर निर्भर सटीक स्थानिक स्मृति को प्रतिबिंबित नहीं कर सकते है अगर ventral हिप्पोकैम्पस भावनात्मक विनियमन कार्य भी प्रभावित होते हैं ।
OLT एक सरल और प्रभावी परीक्षण है कि हिप्पोकैम्पस-निर्भर स्थानिक स्मृति13का एक उपाय प्रदान करता है । कार्य अतिरिक्त बाहरी सुदृढीकरण के बिना नवीनता के लिए एक जानवर आंतरिक वरीयता पर निर्भर करता है और इसलिए आम तौर पर अंतर भावनात्मक प्रतिक्रियाओं13के साथ जुड़े जटिलताओं से बचने कर सकते हैं । OLT के लिए वर्तमान प्रोटोकॉल चूहों के लिए प्रस्तुत किया गया है, लेकिन यह भी चूहों में प्रभावी है अगर उपकरणों के आयामों को उचित पैमाने पर कर रहे हैं । प्रोटोकॉल एक खुले क्षेत्र परीक्षण के मैदान के लिए एक माउस acclimating के होते है और फिर यह स्थानिक पर्यावरण cues के संबंध में 2 वस्तुओं की जांच करने की अनुमति । माउस तो क्षेत्र से हटा दिया है, और एक देरी के दौरान (अंतर परीक्षण अंतराल या आईटीआई), वस्तुओं में से एक ले जाया जाता है । आईटीआई के बाद, माउस के क्षेत्र को पुनः शुरू है और स्वतंत्र रूप से पता लगाने की अनुमति दी । सामांय में, चूहों नवीनता पसंद करते हैं, और अगर वे अपने प्रारंभिक प्रदर्शन से वस्तुओं के स्थान याद है, वे और अधिक समय बिताना ले जाया वस्तु की जांच करेंगे । हिप्पोकैम्पस घावों के साथ जानवरों स्थानिक प्रासंगिक सीखने बिगड़ा है और फलस्वरूप उपंयास स्थान14,15में वस्तुओं के लिए कोई प्राथमिकता प्रदर्शित करता है ।
OLT स्वतंत्र रूप से या स्मृति का एक अतिरिक्त परीक्षण है कि कई मस्तिष्क क्षेत्रों से तंत्रिका गतिविधि पर ड्रॉ के साथ संयोजन में इस्तेमाल किया जा सकता है, उपंयास वस्तु मांयता कार्य (NORT) । NORT जब तक कि एक नए स्थान पर ले जाया जा रहा है के बजाय एक वस्तुओं के एक उपंयास वस्तु से बदल दिया है, जब तक परीक्षण चरण, OLT के समान है । के रूप में OLT के साथ मामला है, वस्तुओं की अच्छी स्मृति के साथ चूहों अनायास उपंयास वस्तु की जांच पसंद करेंगे । वस्तु स्थान स्मृति, जो हिप्पोकैम्पस सब्सट्रेट पर काफी निर्भर करता है के विपरीत, वस्तु मान्यता स्मृति मस्तिष्क क्षेत्रों की एक किस्म पर भरोसा करने के लिए प्रकट होता है और हिप्पोकैम्पस की भागीदारी अस्थिर है. कई अध्ययनों से रिपोर्ट है कि हिप्पोकैम्पस घावों या निष्क्रियता को प्रभावित नहीं करते उपंयास वस्तु वरीयता10,13,16,17, जबकि अंय18,19विपरीत लगता है । तथापि, यह अभी भी एक सामांय रूप से इस्तेमाल किया काम है कुतर में जनरल मेमोरी समारोह का मूल्यांकन ।
प्रोटोकॉल यहां प्रस्तुत की शुरुआत में शामिल कदम रूपरेखा बनाती और OLT और NORT, दोनों जिनमें से एक खुले क्षेत्र परीक्षण के मैदान का उपयोग क्रियांवित । व्यावसायिक रूप से उपलब्ध व्यवहार परीक्षण उपकरण विशेष रूप से छोटे प्रयोगशालाओं के लिए लागत-निषेध, हो सकता है । इस प्रोटोकॉल डिजाइन और सरल करने के लिए कम से कम कीमत पर और विशेष उपकरणों के बिना घर में अखाड़े का निर्माण कदम भी शामिल है । इसके अलावा, इस प्रोटोकॉल आदर्श व्यवहार परीक्षण क्षेत्र, क्षेत्र, प्रासंगिक cues, और वीडियो रिकॉर्डिंग प्रणाली है कि OLT और NORT प्रोटोकॉल के कार्यांवयन के लिए मंच सेट सहित के स्थान का ब्यौरा । सफल के लिए प्रतिनिधि परिणाम के रूप में के रूप में अच्छी तरह से दोषपूर्ण अध्ययन प्रस्तुत कर रहे हैं, सभी सामग्री और प्रत्येक अध्ययन के लिए प्रक्रियाओं के अनुकूलन के महत्व पर बल ।
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>विवरण</td>
			<td>विकल्प</td>
			<td>मात्रा</td>
		</tr>
<tr>
<td>भाग एक: ऐक्रेलिक शीट-अपारदर्शी सफेद (०.६३५ cm x ४० cm x ४०.६४ cm)</td>
			<td>रूट किए गए किनारों</td>
			<td>2</td>
		</tr>
<tr>
<td>भाग बी: ऐक्रेलिक शीट-अपारदर्शी सफेद (०.६३५ cm x ४० cm x ४१.९१ cm)</td>
			<td>रूट किए गए किनारों</td>
			<td>2</td>
		</tr>
<tr>
<td>भाग सी: ऐक्रेलिक शीट-अपारदर्शी सफेद (०.६३५ cm x ४१.९१ cm x ४१.९१ cm)</td>
			<td>रूट किए गए किनारों</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>Acryllic सीमेंट (1 pt.)</td>
			<td>ना</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>16 गेज Hypo Applicator</td>
			<td>ना</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>संयोजन स्क्वायर</td>
			<td>ना</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>HD वेब कैमरा</td>
			<td>ना</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>वीडियो कैप्चर सॉफ्टवेयर</td>
			<td>ना</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>यूएसबी २.० एक्सटेंशन केबल</td>
			<td>ना</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>केबल नाली</td>
			<td>ना</td>
			<td>1</td>
		</tr>
</tbody></table>तालिका 1: सामग्री और व्यवहार परीक्षण के लिए आवश्यक उपकरणों की मद सूची ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Sign White - 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td>1/4&#34; x 15.75&#34; x 15.75&#34; with Routed Edges</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sign White - 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td>1/4&#34; x 15.75&#34; x 16.5&#34; with Routed Edges</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sign White - 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td>1/4&#34; x 16.5&#34; x 16.5&#34; with Routed Edges</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TAP Acryllic Cement (1 pt.)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16 Gauge Hypo Applicator</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debut Video Capture Software Pro Edition</td>
			<td>NCH Software</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stanely SAE/Metric Comb Square</td>
			<td>Grainger</td>
			<td>6R171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Logitech Pro Stream Webcam C922x</td>
			<td>CDW</td>
			<td>4429927</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Belkin 16&#39; USB 2.0 Active Extension Cable</td>
			<td>CDW</td>
			<td>570691</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Panduit Pan-Way LD Surface Raceway (8&#39;)</td>
			<td>CDW</td>
			<td>300902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spatial/Environmental Cues</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objects for testing</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double-sided tape</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel object recognition and object location behavioral testing in mice on a budget

Ethologically प्रासंगिक व्यवहार परीक्षण विभिंन शारीरिक या रोग परिवर्तन के संज्ञानात्मक प्रभाव का अध्ययन करने के लिए माउस मॉडलों का उपयोग करता है कि किसी भी अध्ययन के एक महत्वपूर्ण घटक है । वस्तु स्थान कार्य (OLT) और उपंयास वस्तु मांयता कार्य (NORT) सामांयतः दो प्रभावी व्यवहार कार्यों को आमतौर पर समारोह और विशिष्ट मस्तिष्क स्मृति में शामिल क्षेत्रों के सापेक्ष स्वास्थ्य प्रकट किया जाता है । हालांकि इन परीक्षणों के दोनों नवीनता के लिए चूहों के निहित वरीयता शोषण पहले वस्तुओं का सामना करना पड़ा के लिए स्मृति प्रकट करने के लिए, OLT मुख्य रूप से स्थानिक सीखने, जो हिप्पोकैम्पस गतिविधि पर भारी निर्भर करता है मूल्यांकन करता है । NORT, इसके विपरीत, गैर-स्थानिक वस्तु की पहचान है, जो कई मस्तिष्क क्षेत्रों पर निर्भर करता है सीखने का मूल्यांकन करता है । दोनों कार्यों के एक खुले क्षेत्र परीक्षण के क्षेत्र की आवश्यकता, चूहों को समकक्ष आंतरिक मूल्य के साथ वस्तुओं, उचित पर्यावरण cues, और वीडियो रिकॉर्डिंग उपकरण और सॉफ्टवेयर । व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रणालियों, जबकि सुविधाजनक, महंगा हो सकता है । इस पांडुलिपि विवरण के क्षेत्र के निर्माण और OLT और NORT प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक उपकरणों की स्थापना के लिए एक सरल, लागत प्रभावी तरीका है । इसके अलावा, पांडुलिपि एक कुशल परीक्षण प्रोटोकॉल है कि दोनों OLT और NORT और डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण, साथ ही प्रतिनिधि परिणामों के लिए विशिष्ट तरीके प्रदान करता है शामिल वर्णन करता है । इन परीक्षणों के सफल समापन विभिंन माउस मॉडल प्रणालियों की स्मृति समारोह में बहुमूल्य अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकते है और अंतर्निहित तंत्रिका क्षेत्रों है कि इन कार्यों का समर्थन मूल्यांकन ।

चित्रा 3 विशिष्ट सकारात्मक और नकारात्मक पुरुष और महिला वयस्क C57Bl/6 इस प्रोटोकॉल6का उपयोग कर चूहों के साथ प्राप्त परिणामों के उदाहरण प्रदान करता है । OLT और NORT डेटा की व्याख्या हमेशा एक समूह के एकीकृत डेटा पर लागू होती है (नीचे चर्चा देखें). किसी एकल माउस के लिए जांच समय स्मृति या स्मृति की कमी के रूप में नहीं समझा जा सकता । हालांकि, चूहों के एक समूह के प्रदर्शन (यानी, कई नमूने) अन्य समूहों की तुलना में या निश्चित मौका स्तर सांख्यिकीय परीक्षण का उपयोग करने के लिए किया जा सकता है. एक ठेठ प्रशिक्षण परीक्षण के दौरान, चूहों के समूहों के लिए या तो वस्तुओं के लिए औसत पर एक महत्वपूर्ण प्राथमिकता नहीं दिखा के रूप में वे दोनों समान रूप से उपंयास रहे है और किसी भी आंतरिक रूप से नकारात्मक या सकारात्मक मूल्य नहीं है चूहों (चित्रा 3 और बी) । यदि चूहों के एक समूह का समग्र डेटा प्रशिक्षण के दौरान एक दूसरे पर एक वस्तु के लिए महत्वपूर्ण प्राथमिकता दिखाने के लिए, इन वस्तुओं का इस्तेमाल नहीं किया जाना चाहिए क्योंकि कि अंतर्निहित वरीयता/ साथ ही, सभी चूहों की कुल जांच समय एक न्यूनतम मानक (पारंपरिक रूप से 20 सेकंड21पर सेट) को पूरा करना होगा और यह सुनिश्चित करें कि स्मृति के क्रमिक परीक्षणों को प्रभावित कर सकते हैं कि जांच में कोई आधारभूत अंतर नहीं है की तुलना की जानी चाहिए ।
OLT के दौरान, ऑब्जेक्ट स्थान के लिए स्मृति ले जाया गया ऑब्जेक्ट (आंकड़ा 3) के साथ कुल जांच समय के औसत से काफी अधिक ५०% पर चूहों के खर्च से परिलक्षित होता है । यदि व्यक्तिगत चूहों की कुल जांच समय बहुत भिंनता है, परिणाम बेहतर वस्तुओं के लिए एक भेदभाव सूचकांक के रूप में चित्रित कर रहे है (चित्र बी) । चित्रा बी में औसत भेदभाव सूचकांक में उल्लेखनीय वृद्धि इंगित करता है कि चूहों के बाद इसे स्थानांतरित कर दिया था वस्तु के साथ और अधिक समय बिताया । प्रतिशत समय या भेदभाव सूचकांक, वस्तु की जांच में वृद्धि के बाद यह स्थानांतरित कर दिया है कि चूहों जहां वस्तु प्रशिक्षण के दौरान स्थित था याद में वृद्धि से मापा चाहे ।
इस प्रोटोकॉल के अंतिम परीक्षण ऑब्जेक्ट मांयता स्मृति का आकलन है । चूहों के एक समूह के साथ एक प्रतिनिधि उदाहरण के लिए जांच समय (चित्रा3 सी) के एक उच्च औसत प्रतिशत के रूप में अच्छी तरह से सकारात्मक भेदभाव सूचकांक (चित्रा 3d) ५०% और 0, क्रमशः के निश्चित नियंत्रण मूल्यों की तुलना में प्रदर्शित करता है । OLT डेटा के साथ के रूप में, यदि व्यक्तिगत चूहों के बीच कुल जांच समय में महत्वपूर्ण परिवर्तनशीलता है, भेदभाव सूचकांक संभावना है कि इस डेटा को कल्पना करने के लिए बेहतर तरीका है । चित्रा 3E NORT में एक 2-समूह की तुलना और कुछ सांख्यिकीय जटिलताओं कि इन परीक्षणों में पैदा कर सकते है (चर्चा देखें) के एक उदाहरण से पता चलता है । एक नमूना टी परीक्षण समूह बी के लिए काफी ५०% से ऊपर जांच दिखाता है, जबकि एक समूह के लिए एक ही परीक्षण नहीं करता है । इस खोज का मतलब यह नहीं है कि A और B एक दूसरे से अलग हैं । समूह अंतर निर्धारित करने के लिए, एक अलग दो-नमूना नॉन-पैरामीट्रिक मान-Whitney परीक्षण B करने के लिए समूह की तुलना किया जाना चाहिए । इस प्रतिनिधि समूह डेटा का एक दो-नमूना गैर-पैरामीट्रिक मान-Whitney परीक्षण कोई महत्वपूर्ण अंतर दिखाता है (p = ०.६६) दो समूहों के बीच उपंयास ऑब्जेक्ट जांच समय के प्रतिशत में ।
दोनों OLT और NORT वस्तुओं के आंतरिक मूल्य और वस्तु तुल्यता का गहन परीक्षण करने के लिए अत्यधिक संवेदनशील है सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक है कि कोई आंतरिक पूर्वाग्रह है कि परिणाम मिल सकता है । चित्रा 3F और 3 जी अनुचित वस्तु चयन का एक उदाहरण दिखाते हैं । 4 का एक नमूना आकार के साथ एक प्रायोगिक परीक्षण में, चूहों एक वस्तु के साथ जांच समय के कम से ५०% खर्च करने की दिशा में एक प्रवृत्ति दिखाया जब वस्तु बी (चित्रा 3F) के खिलाफ युग्मित । जब इन वस्तुओं तो एक NORT में उपंयास वस्तु और 16 का एक बड़ा नमूना आकार के रूप में एक वस्तु के साथ प्रयोग किया गया, चूहों काफी कम जांच समय के ५०% से वस्तु एक (चित्रा 3 जी) के साथ बिताया । उपंयास वस्तु को इस घृणा को आसानी से यहां पहचानने प्रयोग और मिसाल में एक तकनीकी दोष के रूप में क्यों अंतर्निहित वरीयता के लिए वस्तुओं के पायलट परीक्षण/
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58593/58593fig3.jpg"> चित्र 3: जंगली प्रकार वयस्क C57Bl के साथ व्यवहार परीक्षण डेटा/ (क) OLT बनाम प्रशिक्षण परीक्षण के दौरान स्थानांतरित वस्तु के प्रतिशत कुल जांच समय की तुलना में जांच में उल्लेखनीय वृद्धि से पता चलता है, के बाद वस्तु चले गए । p < ०.०००१, युग्मित t-परीक्षण । (ख) एक भेदभाव सूचकांक के रूप में प्रदर्शित प्रशिक्षण और OLT परीक्षणों के दौरान स्थानांतरित वस्तु जांच के लिए प्रतिनिधि परिणाम इसी तरह यह ले जाया जाता है के बाद वस्तु की जांच में एक महत्वपूर्ण वृद्धि दिखा । p < ०.०००१, युग्मित t-परीक्षण । (ग) NORT में उपंयास वस्तु के प्रतिशत कुल जांच समय उपंयास वस्तु की जांच के लिए महत्वपूर्ण वरीयता दिखाता है । * * पी = ०.००२४, एक नमूना टी परीक्षण बनाम। ५०% । (घ) एक भेदभाव सूचकांक के रूप में प्रदर्शित NORT में उपंयास वस्तु जांच के लिए प्रतिनिधि परिणाम इसी तरह उपंयास वस्तु की जांच के लिए वरीयता दिखाओ । * * पी = ०.००२४, एक नमूना टी परीक्षण बनाम 0 । (ङ) एक NORT विश्लेषण के प्रतिनिधि परिणाम दो चूहों के विभिंन समूहों को शामिल । समूह B काफी ५०% से एक-नमूना t-परीक्षण (* * p = ०.००२४) से भिन्न है, लेकिन समूह A (p = ०.५८३७) नहीं है । एक अलग विश्लेषण में, समूहों की तुलना करने के लिए, एक दो-नमूना मान-Whitney परीक्षण असमान समूह आकार के कारण उपयोग किया जाता है और जांच में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं पाया जाता है (p = ०.६६, ns) । (च) एक छोटे नमूने के आकार में मांयता परीक्षणों के दौरान एक वस्तु के साथ प्रतिशत समय के लिए वस्तु से बचने के प्रति एक प्रवृत्ति से पता चलता है । पी = ०.२१५९, एक नमूना टी परीक्षण । (छ) एक बड़ा नमूना आकार और वस्तु से (च) एक NORT में एक उपंयास वस्तु के रूप में इस्तेमाल के साथ, वस्तु के लिए एक महत्वपूर्ण घृणा पाया जाता है, भले ही यह उपंयास वस्तु है । * पी = ०.०२७०, एक नमूना टी परीक्षण । यह ऑब्जेक्ट चयन में तकनीकी विफलता का एक उदाहरण है । डाटा मतलब ± SEM के रूप में प्रस्तुत कर रहे हैं । पैनलों से डेटा सी-ई पिछले एक प्रकाशन6से अनुकूलित कर रहे हैं । <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58593/58593fig3large.jpg" target="_blank">कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।</a>

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Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

यहां हम एक प्रोटोकॉल है जो murine वस्तु स्थान और उपंयास वस्तु मांयता व्यवहार परीक्षण के किफायती स्थापना के लिए व्यापक निर्देश शामिल है प्रदान करते हैं, डिजाइन, लागत सहित, और आवश्यक उपकरणों के निर्माण के साथ ही व्यवहार परीक्षण, डेटा संग्रह, और विश्लेषण का निष्पादन ।

उपंयास वस्तु मांयता और वस्तु स्थान एक बजट पर चूहों में व्यवहार परीक्षण

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

इस विधि स्मृति विनियमन के बारे में महत्वपूर्ण सवालों के जवाब में मदद कर सकते हैं । उदाहरण के लिए, हम इन कार्यों में ट्रांसजेनिक नॉकआउट चूहों का परीक्षण करके स्मृति में विशिष्ट प्रोटीन की भूमिका निर्धारित करते हैं। इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि यह किसी भी प्रयोगशाला में स्मृति परीक्षण कराने का एक तेजी से और लागत प्रभावी तरीका है।अखाड़ा निर्माण का प्रदर्शन महत्वपूर्ण है, क्योंकि सॉल्वेंट वेल्डिंग केवल मजबूत परिणाम निकलेगा यदि देखभाल के साथ प्रदर्शन किया जाता है। एक्रेलिक, एक्रेलिक सीमेंट, और एक 16 गेज हाइपो एप्लिकेटर की पांच चादरें प्राप्त करके शुरू करें। एक्रेलिक शीट्स से प्रोटेक्टिव पेपर कोटिंग निकालें।फिर सूखी फिट सभी सामग्री की पुष्टि करने के लिए कि आकार सही हैं । इसके बाद, एक्रेलिक सीमेंट के साथ सिरिंज को इकट्ठा करें और लोड करें। आधार के शीर्ष किनारे के साथ एक बाहर की दीवार के लंबे किनारे को संरेखित करें और यह सुनिश्चित करें कि वे एक संयोजन या मशीनिस्ट स्क्वायर का उपयोग करके एक दूसरे के लंबवत हैं।फिर सिरिंज का उपयोग करने के लिए सीमेंट का एक छोटा और स्थिर मनका सीधे दो टुकड़ों के कोने में शामिल किया जा रहा है लागू करते हैं । दो टुकड़ों को पांच मिनट तक रखें जब तक कि वे शुरू में सेट न हो जाएं। आधार के लिए अन्य बाहर की दीवार संलग्न करने के लिए एक ही कदम दोहराएं।फिर, दो आंतरिक दीवारों को संलग्न करें, एक समय में, एक्रेलिक सीमेंट के साथ आधार। अंत में, सिरिंज का उपयोग करने के लिए सीधे कोने में सीमेंट का एक छोटा और स्थिर मनका लागू करने के लिए अब बाहर की दीवार और अंदर की दीवार से गठन किया जा रहा है । चूहों को चार के समूहों में विभाजित करके आदत सत्र शुरू करें, और उन्हें व्यक्तिगत साफ होल्डिंग पिंजरों में रखें।इसके बाद, परीक्षण कक्ष में चूहों के एक समूह को लाएं और उन्हें कम से कम 30 मिनट तक स्वीकार करने की अनुमति दें। अभिनंदन के बाद, वीडियो रिकॉर्ड करना शुरू करें। रिलीज कॉर्नर की दीवारों का सामना कर रहे क्षेत्र में प्रत्येक माउस रखें, और चूहों को छह मिनट के लिए स्वतंत्र रूप से एरेनास का पता लगाने की अनुमति दें।फिर, वीडियो रिकॉर्ड करना बंद करें, और अंतर-परीक्षण अंतराल के दौरान चूहों को उनके साफ पकड़े हुए पिंजरों में वापस करें। पशु सुविधा के साथ सभी एरेनास को साफ करें सफाई विधियों की सिफारिश की, जैसे घ्राण संकेतों को कम करने के लिए 70% इथेनॉल के साथ पोंछना। अंत में, कुल तीन आदत सत्रों को पूरा करने के बाद, सभी चूहों को उनके घर पिंजरों में वापस करें।24 घंटे के बाद, चूहों के एक ही समूह को परीक्षण कक्ष में लाएं, और उन्हें कम से कम 30 मिनट के लिए परीक्षण कक्ष में प्रवेश करने की अनुमति दें, जैसा कि पिछले दिन आदत सत्रों से पहले किया गया था। क्षेत्र में रखी दो वस्तुओं का उपयोग कर प्रशिक्षण परीक्षण का संचालन करें। दो गैर रिलीज कोनों से छह सेंटीमीटर दूर दो तरफा टेप के साथ वस्तुओं प्रत्यय, इस तरह है कि वे क्षेत्र में प्रतिसंतुलित कर रहे हैं ।चूहों को 10 मिनट के लिए स्वतंत्र रूप से क्षेत्र और वस्तुओं की जांच करने की अनुमति दें। इसके बाद वीडियो रिकॉर्डिंग बंद कर दें। चूहों को 20 मिनट के लिए अपने साफ पकड़े पिंजरों में वापस रखें, और इथेनॉल के साथ क्षेत्रों को साफ करें।इसके बाद, ऑब्जेक्ट लोकेशन टास्क ओएलटी करने के लिए, प्रशिक्षण परीक्षण में उपयोग की जाने वाली वस्तुओं में से एक को एक नए गैर-रिलीज कॉर्नर पर ले जाएं, और उस कोने की प्रत्येक दीवार से वस्तु को दो तरफा टेप के साथ छह सेंटीमीटर प्रत्यय करें। क्षेत्र में चूहों की एक ही वीडियो रिकॉर्डिंग को 10 मिनट के लिए दोहराएं, जैसा कि पहले वर्णित है। अंत में, उपन्यास ऑब्जेक्ट रिकग्निशन टास्क नॉर्ट करने के लिए, उस वस्तु को प्रतिस्थापित करें जिसे ओएलटी के दौरान एक उपन्यास वस्तु के साथ नहीं ले जाया गया था, और उपन्यास वस्तु को दो तरफा टेप के साथ कोने की दो दीवारों से छह सेंटीमीटर प्रत्यय करता है।क्षेत्र में चूहों की एक ही वीडियो रिकॉर्डिंग को 10 मिनट के लिए दोहराएं, जैसा कि पहले वर्णित है। OLT के दौरान, वस्तु स्थान के लिए स्मृति चूहों खर्च के एक समूह द्वारा परिलक्षित होता है, औसतन, एक वस्तु के साथ काफी अधिक समय के बाद यह चला गया है । यह भी भेदभाव सूचकांक में वृद्धि के रूप में प्रतिनिधित्व किया जा सकता है ।NORT में, वस्तु स्थान के लिए स्मृति चूहों खर्च के एक समूह द्वारा परिलक्षित होता है, औसतन, उपन्यास वस्तु के साथ जांच समय का 50% से अधिक या शून्य से काफी अधिक भेदभाव सूचकांक दिखा रहा है। जिन वस्तुओं के लिए चूहों की कोई अंतर्निहित वरीयता नहीं है, उन्हें उठाना महत्वपूर्ण है। उदाहरण के लिए, चार के एक नमूना आकार के साथ एक पायलट परीक्षण में, चूहों वस्तु के साथ जांच समय के ५०% से कम खर्च करने की दिशा में एक प्रवृत्ति दिखाया जब वस्तु बी के खिलाफ बनती है जब वस्तु एक तो एक NORT में उपंयास वस्तु के रूप में इस्तेमाल किया गया था, 16 के एक बड़े नमूना आकार के साथ, चूहों काफी कम खर्च वस्तु के साथ जांच समय के ५०% से भी कम खर्च A.इन डेटा इस प्रक्रिया के दौरान वस्तु ए के लिए अंतर्निहित घृणा का सुझाव , उपयोग के बीच सभी वस्तुओं और एरेनास को अच्छी तरह से साफ करना याद रखना महत्वपूर्ण है।इस विधि में, ऑब्जेक्ट जांच शोधकर्ताओं द्वारा या वाणिज्यिक सॉफ्टवेयर का उपयोग करके मैन्युअल रूप से रन बनाए जा सकते हैं। सॉफ्टवेयर उच्च अग्रिम लागत है, लेकिन, एक बार अंशांकित, लंबी अवधि में समय और वित्तीय संसाधनों की बचत हो सकती है ।

Research

JoVE Journal

Behavior

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Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

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Restricted, repetitive behaviors (RRBs) are a core feature of autism spectrum disorder (ASD) and disrupt the lives of affected individuals.  RRBs are ...

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The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

चूहों में Anhedonia उत्प्रेरण के लिए अप्रत्याशित जीर्ण हल्के तनाव प्रोटोकॉल

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' शिशुओं वस्तु वर्गीकरण में नेत्र ट्रैकिंग मानदंड के साथ भाषा की भूमिका को परिभाषित

Assessing infant category learning is a challenging but vital aspect of studying infant cognition. By employing a familiarization-test paradigm, we ...