Name: novel object recognition and object location behavioral testing in mice on a budget
Uploaded: 2018-11-20T15:00:00
Duration: 5 min 57 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget at JoVE.com

Эта работа финансировалась R00 NS089938 из низ и начальное финансирование от хронической травмы мозга и открытия темы в университете штата Огайо EDK.

<ol>
	<li>Krakauer, J. W., Ghazanfar, A. A., Gomez-Marin, A., Maclver, M. A., Poeppel, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroscience+Needs+Behavior:+Correcting+a+Reductionist+Bias.">Neuroscience Needs Behavior: Correcting a Reductionist Bias.</a> Neuron. 93 (3), 480-490 (2017).</li><li>Lange, F., Seer, C., Kopp, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cognitive+flexibility+in+neurological+disorders:+Cognitive+components+and+event-related+potentials.">Cognitive flexibility in neurological disorders: Cognitive components and event-related potentials.</a> Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 83, 496-507 (2017).</li><li>Barnett, J. H., Blackwell, A. D., Sahakian, B. J., Robbins, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Paired+Associates+Learning+(PAL)+Test:+30+Years+of+CANTAB+Translational+Neuroscience+from+Laboratory+to+Bedside+in+Dementia+Research.">The Paired Associates Learning (PAL) Test: 30 Years of CANTAB Translational Neuroscience from Laboratory to Bedside in Dementia Research.</a> Current Topics in Behavioral Neuroscience. 28, 449-474 (2016).</li><li>Eichenbaum, H., Otto, T., Cohen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hippocampus-what+does+it+do?.">The hippocampus-what does it do?.</a> Behavioral and Neural Biology. 57 (1), 2-36 (1992).</li><li>Bartsch, T., Wulff, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hippocampus+in+aging+and+disease:+From+plasticity+to+vulnerability.">The hippocampus in aging and disease: From plasticity to vulnerability.</a> Neuroscience. 19 (309), 1-16 (2015).</li><li>Smith, B. M., Yao, X., Chen, K. S., Kirby, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Larger+Social+Network+Enhances+Novel+Object+Location+Memory+and+Reduces+Hippocampal+Microgliosis+in+Aged+Mice.">A Larger Social Network Enhances Novel Object Location Memory and Reduces Hippocampal Microgliosis in Aged Mice.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 10 (142), 1-16 (2018).</li><li>Chieffi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise+Influence+on+Hippocampal+Function:+Possible+Involvement+of+Orexin-A.">Exercise Influence on Hippocampal Function: Possible Involvement of Orexin-A.</a> Frontiers in Physiology. 14 (8), 85 (2017).</li><li>Garth, A., Roeder, I., Kempermann, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mice+in+an+enriched+environment+learn+more+flexibly+because+of+adult+hippocampal+neurogenesis.">Mice in an enriched environment learn more flexibly because of adult hippocampal neurogenesis.</a> Hippocampus. 26 (2), 261-271 (2016).</li><li>Brown, R. E., Stanford, L., Schellinck, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+standardized+behavioral+tests+for+knockout+and+mutant+mice.">Developing standardized behavioral tests for knockout and mutant mice.</a> Institute for Laboratory Animal Research Journal. 41 (3), 163-174 (2000).</li><li>Barker, G. R., Warburton, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=When+is+the+hippocampus+involved+in+recognition+memory?.">When is the hippocampus involved in recognition memory?.</a> Journal of Neuroscience. 31 (29), 10721-10731 (2011).</li><li>Savage, S., Ma, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+behavior+testing:+memory.">Animal behavior testing: memory.</a> British Journal of Anaesthesia. 113 (1), 6-9 (2015).</li><li>Fanselow, M. S., Dong, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+the+dorsal+and+ventral+hippocampus+functionally+distinct+structures?.">Are the dorsal and ventral hippocampus functionally distinct structures?.</a> Neuron. 65 (1), 7-19 (2010).</li><li>Vogel-Ciernia, A., Wood, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Examining+object+location+and+object+recognition+memory+in+mice.">Examining object location and object recognition memory in mice.</a> Current Protocols in Neuroscience. 69, 1-17 (2014).</li><li>Ammassari-Teule, M., Passino, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dorsal+hippocampus+is+selectively+involved+in+the+processing+of+spatial+information+even+in+mice+with+a+genetic+hippocampal+dysfunction.">The dorsal hippocampus is selectively involved in the processing of spatial information even in mice with a genetic hippocampal dysfunction.</a> Psychobiology. 25 (2), 118-125 (1997).</li><li>Le Merrer, J., Rezai, X., Scherrer, G., Becker, J. A., Kieffer, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+hippocampus-dependent+and+facilitated+striatum-dependent+behaviors+in+mice+lacking+the+delta+opioid+receptor.">Impaired hippocampus-dependent and facilitated striatum-dependent behaviors in mice lacking the delta opioid receptor.</a> Neuropsychopharmacology. 38 (6), 1050-1059 (2013).</li><li>Hattiangady, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Object+location+and+object+recognition+memory+impairments,+motivation+deficits+and+depression+in+a+model+of+Gulf+War+illness.">Object location and object recognition memory impairments, motivation deficits and depression in a model of Gulf War illness.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 8, 78 (2014).</li><li>Oliveira, A. M., Hawk, J. D., Abel, T., Havekes, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-training+reversible+inactivation+of+the+hippocampus+enhances+novel+object+recognition+memory.">Post-training reversible inactivation of the hippocampus enhances novel object recognition memory.</a> Learning and Memory. 17 (3), 155-160 (2010).</li><li>Cohen, S. J., Stackman, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+rodent+hippocampal+involvement+in+the+novel+object+recognition+task.">Assessing rodent hippocampal involvement in the novel object recognition task.</a> Behavioral Brain Research. 285, 105-117 (2014).</li><li>Cohen, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Rodent+Hippocampus+Is+Essential+for+Nonspatial+Object+Memory.">The Rodent Hippocampus Is Essential for Nonspatial Object Memory.</a> Current Biology. 23 (17), 1685-1690 (2013).</li><li>Sorge, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+exposure+to+males,+including+men,+causes+stress+and+related+analgesia+in+rodents.">Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents.</a> Nature Methods. 11 (6), 629-632 (2014).</li><li>Ennaceur, A., Delacour, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+one-trial+test+for+neurobiological+studies+of+memory+in+rats.+1:+Behavioral+data.">A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats. 1: Behavioral data.</a> Behavioral Brain Research. 31 (1), 47-49 (1988).</li><li>Leger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Object+recognition+test+in+mice.">Object recognition test in mice.</a> Nature Protocols. 8 (12), 2531-2537 (2013).</li><li>Wolf, A., Bauer, B., Abner, E. L., Ashkenazy-Frolinger, T., Hartz, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Comprehensive+Behavioral+Test+Battery+to+Assess+Learning+and+Memory+in+129S6/Tg2576+Mice.">A Comprehensive Behavioral Test Battery to Assess Learning and Memory in 129S6/Tg2576 Mice.</a> Public Library of Science ONE. 11 (1), e0147733 (2016).</li><li>Ennaceur, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One-trial+object+recognition+in+rats+and+mice:+methodological+and+theoretical+issues.">One-trial object recognition in rats and mice: methodological and theoretical issues.</a> Behavioural Brain Research. 215, 244-254 (2010).</li><li>Lueptow, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+Object+Recognition+Test+for+the+Investigation+of+Learning+and+Memory+in+Mice.">Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (126), e55718 (2017).</li><li>Wasserstein, R. L., Lazar, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ASA's+Statement+on+p-Values:+Context,+Process,+and+Purpose.">The ASA's Statement on p-Values: Context, Process, and Purpose.</a> The American Statistician. 70 (2), 129-133 (2016).</li><li>Ranstam, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+the+P-value+culture+is+bad+and+confidence+intervals+a+better+alternative.">Why the P-value culture is bad and confidence intervals a better alternative.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 20 (8), 805-808 (2012).</li></ol>

Авторы не имеют ничего сообщать.

Эффективное когнитивных тестов изолировать и оценить функцию нейронных регионов конкретных мозга путем изучения поведения в контролируемой среде1. В организме человека конкретные задачи были разработаны для оценки эффективности целенаправленных мозга регионов, таких как Висконсин карта, Сортировка задач для префронтальной функции или парные associates обучения тест (Кембридж нейропсихологического тестирования автоматизированных батареи Кембриджский университет) для гиппокампа функция2,3. Эти тесты предназначены для изучения функций мозга конкретных регионов в организме человека путем оценки поведения, которые в результате нейронной активности этих регионов. Конечная цель наиболее биомедицинских исследований является улучшение здоровья человека; Однако многие исследования функции мозга здоровья или болезни не могут выполняться этически с человека участников. Для исследований, которые не могут использовать человека участников мелкие грызуны, такие как мышей зачастую модель выбора. С помощью мыши модели позволяет для прямого контроля над экспериментальных манипуляций включая изменения экспрессии генов, индукции травмы или даже модуляции схемы активности через optogenetic методов. Поведенческое тестирование мышей, похож на человека тестирования, стремится оценить влияние экспериментальной переменных на функции мозга путем измерения поведения, которые полагаются на конкретных регионах.
Гиппокамп является необходимая структура для формирования памяти в4люди и грызунов. Говоря более конкретно гиппокамп играет важную роль в декларативных памяти с участием реляционных представлений, но не процедурный, которая опирается на моторные центры мозга4. Функция гиппокампа памяти был в центре внимания исследования во многих областях нейронауки, потому что это изысканно чувствительна к возмущений. Отрицательные возмущения, начиная от длительного стресса и старения приступы и инсульт, связаны с гиппокампа повреждения5. В отличие от позитивного вмешательства, такие как социальное взаимодействие, физической окружающей среды обогащения или упражнения, улучшить гиппокампа функции6,,78. Грызун исследования с правильное тестирование гиппокампа памяти может выявить понимание молекулярных и клеточных медиаторов памяти, а также последствия различных экологических мероприятий на гиппокампа функции.
Грызунов были разработаны несколько тестов для изучения гиппокамп зависимых обучения и памяти9,10,11. Они могут быть широко подразделяются на задачи, которые требуют стимул с эмоциональной валентности добиться изменения в поведении и задачи, которые привлекают на грызунов предпочтения расследовать новые стимулы11. Например, контекстная страх кондиционирования, пары неприятный раздражитель (фут шок) с экологический контекст и потом памяти тесты для контекста, измеряя страх индуцированной замораживания поведение-9,11. Лабиринт Морриса воды и ее сухой коллегой, Барнс лабиринт, использовать негативные внешние подкрепление для продвижения пространственного обучения4,11. В каждом конкретном случае грызуны стремятся уйти от отрицательной ситуации, погружают в холодную воду или воздействию на ярко освещенной платформе, соответственно. Радиальный/консольный торцовочный лабиринт, напротив, полагается на положительное подкрепление, как животные используют природные пищевое поведение, в сочетании с пространственной памяти для извлечения мелких продовольственной награды4,11. Эти задачи используются широко и дали фундаментальные знания о гиппокампа памяти. Однако отрицательных и положительных внешних подкрепления или страхом заставить стимулы как шок добавить эмоциональной составляющей в эти поведенческие тесты, которые в некоторых случаях может быть нежелательным. К примеру дорсальной и вентральной гиппокампах связаны с отдельными функциями, пространственной памяти против эмоционального регулирования, соответственно12. Тесты, которые полагаются на эмоциональной реакции на стимулы не может точно отражать нарушения пространственной памяти если функции брюшной гиппокампа эмоционального регулирования также затронуты.
OLT-это простой и эффективный тест, который представляет собой меру пространственной памяти гиппокамп зависимых13. Задача опирается на встроенные предпочтение животного новизна без дополнительных внешних подкрепления и поэтому обычно можно избежать осложнений, связанных с дифференциальной эмоциональные реакции13. Настоящий Протокол для OLT представлена для мышей, но он эффективен также в крыс если размеры оборудования масштабируются надлежащим образом. Протокол состоит из акклиматизации мыши Арена открытым поле тестирование и затем позволяет ему расследовать 2 объектов связи с пространственными аллюзиями окружающей среды. Мышь затем удаляется от арены, и во время задержки (интервал между пробной или ITI), один из объектов перемещается. После ITI мыши вновь на арену и позволено свободно исследовать. В общем мыши предпочитают новизны, и если они помнят расположение объектов от их первоначального воздействия, они будут тратить больше времени расследование перемещенного объекта. Животные с гиппокампа поражения нарушениями пространственной контекстного обучения и следовательно продемонстрировать нет предпочтения для объектов в романе месте14,15.
OLT может использоваться самостоятельно или в сочетании с дополнительным тест памяти, которая опирается на нейронной активности от нескольких областях мозга, Роман объект задачи распознавания (Норт). Норт идентичен OLT до этапа тестирования, когда один из объектов заменяется Роман объекта вместо переносится в новое местоположение. Как и в случае с OLT, мышей с хорошей памятью объектов спонтанно предпочитают расследование Роман объект. В отличие от объекта местоположение памяти, которая опирается на гиппокампа субстратов, объект признание памяти, как представляется, полагаться на различных регионов мозга и участие гиппокамп является нестабильной. Многие исследования доклад, что гиппокампа поражения или инактивации не влияет на роман объект предпочтение10,13,16,17, в то время как другие найти противоположные18,19. Однако это все еще часто используемых задач для оценки функции общей памяти в грызунов.
Протокола, представленные здесь очерчивает шаги в инициировании и осуществлении OLT и Норт, оба из которых используют тестирование открытое поле Арена. Коммерчески доступные поведенческих испытательное оборудование может быть непомерно, особенно для небольших лабораторий. Этот протокол включает в себя дизайн и простых шагов для построения Аренас доме при минимальных затратах и без специальных инструментов. Кроме того этот протокол детали идеально поведенческих тестирования области, включая размещение Аренас, контекстные подсказки и запись видео системы, которая закладывает основу для осуществления протоколов OLT и Норт. Представитель как успешных, так и недостатки исследований результаты, подчеркивая важность оптимизации все материалы и процедуры для каждого исследования.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Описание</td>
			<td>Параметр</td>
			<td>Количество</td>
		</tr>
<tr>
<td>Часть A: акриловый лист - непрозрачный белый (0,635 см х 40 см х 40,64 см)</td>
			<td>Маршрутизируемое края</td>
			<td>2</td>
		</tr>
<tr>
<td>Часть B: акриловый лист - непрозрачный белый (0,635 см х 40 см х 41,91 см)</td>
			<td>Маршрутизируемое края</td>
			<td>2</td>
		</tr>
<tr>
<td>Часть C: акриловый лист - непрозрачный белый (0,635 см x 41.91 см x 41,91 см)</td>
			<td>Маршрутизируемое края</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>Акрилик цемента (1 pt).</td>
			<td>NA</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>16 калибровочных гипо аппликатор</td>
			<td>NA</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>Сочетание площадь</td>
			<td>NA</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>HD веб-камера</td>
			<td>NA</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>Программное обеспечение захвата видео</td>
			<td>NA</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>USB 2.0 Удлинительный кабель</td>
			<td>NA</td>
			<td>1</td>
		</tr>
<tr>
<td>Кабель канал</td>
			<td>NA</td>
			<td>1</td>
		</tr>
</tbody></table>Таблица 1: Подробный список материалов и оборудования, необходимых для поведенческого тестирования.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Sign White - 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td>1/4&#34; x 15.75&#34; x 15.75&#34; with Routed Edges</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sign White - 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td>1/4&#34; x 15.75&#34; x 16.5&#34; with Routed Edges</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sign White - 9% Translucent and Opaque Colored Cast Acrylic (Chemcast)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td>1/4&#34; x 16.5&#34; x 16.5&#34; with Routed Edges</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TAP Acryllic Cement (1 pt.)</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>16 Gauge Hypo Applicator</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Debut Video Capture Software Pro Edition</td>
			<td>NCH Software</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stanely SAE/Metric Comb Square</td>
			<td>Grainger</td>
			<td>6R171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Logitech Pro Stream Webcam C922x</td>
			<td>CDW</td>
			<td>4429927</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Belkin 16&#39; USB 2.0 Active Extension Cable</td>
			<td>CDW</td>
			<td>570691</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Panduit Pan-Way LD Surface Raceway (8&#39;)</td>
			<td>CDW</td>
			<td>300902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spatial/Environmental Cues</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Objects for testing</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double-sided tape</td>
			<td>Variable</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

novel object recognition and object location behavioral testing in mice on a budget

Этологических соответствующих поведенческое тестирование является важнейшим компонентом любого исследования, которое использует мышь модели для изучения когнитивных эффектов различных физиологических и патологических изменений. Задачи расположения объекта (OLT) и Роман объект признание (Норт) являются две эффективные поведенческие задачи, обычно используется для выявления функции и относительного здоровья мозга конкретных регионов в памяти. Хотя оба этих испытаний использовать присущие предпочтение мышей за новизну выявить памяти для ранее сталкивались с объектов, OLT главным образом оценивает пространственного обучения, которая опирается на деятельность гиппокампа. Норт, напротив, оценивает непространственный обучения идентификации объекта, который опирается на несколько областей мозга. Обе эти задачи требуют тестирования открытое поле Арена, объекты с эквивалентной ценности для мышей, соответствующие экологические сигналы и запись видео оборудования и программного обеспечения. Коммерчески доступных систем, в то время, как это удобно, может быть дорогостоящим. Эта рукопись деталей простых и экономически эффективных метода для построения Аренас и настройка оборудования, необходимых для выполнения OLT и Норт. Кроме того рукопись описывает эффективного тестирования протокола, который включает в себя OLT и Норт и предоставляет типичные методы для сбора данных и анализа, а также представителя результаты. Успешное завершение этих испытаний может обеспечить ценную информацию в памяти функции различных систем модель мыши и оценки базовой нейронных регионов, которые поддерживают эти функции.

На рисунке 3 приведены примеры типичных положительные и отрицательные результаты, полученные с мужского и женского пола взрослых мышей C57Bl/6, используя этот протокол6. Интерпретация данных OLT и Норт всегда применяется к статистические данные группы (см. обсуждение ниже). Исследование времени для одной мыши не может толковаться как памяти или нехватка памяти. Однако работы группы мышей (т.е., несколько образцов) можно сравнить с другими группами или фиксированной шансы уровни с помощью статистических испытаний. Во время типичного учебные разбирательства группы мышей не показывают значительное предпочтение в среднем для любой из объектов как они оба одинаково Роман и не имеют каких-либо неразрывно отрицательное или положительное значение для мышей (Рисунок 3А и 3Б). Если статистические данные группы мышей показывают значительное предпочтение одного объекта над другим во время обучения, эти объекты не должны использоваться в потому что присущие предпочтение/страх будет смешивать результаты в последующих судебных разбирательств. Кроме того, время полного расследования всех мышей должны соответствовать минимальным стандартам (традиционно набора на 20 секунд21) и следует сравнить с убедитесь, что нет базовых разницы в расследования, которые могут повлиять на последующие тесты памяти.
Во время OLT память для расположения объекта отражается мышей, в среднем они тратят значительно больше, чем 50% от времени всего расследования с перемещенного объекта (рис. 3A). Если время всего расследования отдельных мышей различаются, результаты лучше изображается как дискриминации индекс для объектов (рис. 3B). Значительное увеличение индекса средней дискриминации в рисунке 3B указывает, что мыши больше времени с объекта после того, как она переехала. Ли измеряется увеличением процент времени или дискриминации индекс, увеличение исследование объекта после его перемещения предполагает, что мышей запомнить, где объект находился в процессе обучения.
Последний судебный процесс настоящего Протокола оценивает объект признание памяти. Пример с одной группе мышей демонстрирует высокий средний процент времени расследования (рис. 3 c) а также позитивной дискриминации индекс (рис. 3D) по сравнению с фиксированной управления значения 50% и 0, соответственно. Как с OLT данными, если есть существенные различия в общее расследование время между отдельными мышей, индекс дискриминации является вероятно метод лучше для визуализации данных. 3E рисунке показан пример сравнения 2-группа в Норт и некоторые из статистической осложнений, которые могут возникнуть в ходе этих испытаний (см. обсуждение). В то время как один t тест для группы B показывает расследование значительно выше 50%, то же тест, Группа не. Этот вывод не означает, что A и B отличаются друг от друга. Чтобы определить группу различия, должны выполняться отдельные двух непараметрические Манна-Уитни тест сравнение групп B в A. Двухвыборочный непараметрический тест Манна-Уитни этой представительной группы данных показывает никакого существенного различия (p = 0,66) между двумя группами в процентах от времени расследования новых объектов.
OLT и Норт очень чувствительны к внутренней стоимости объектов и тщательное тестирование объекта эквивалентности необходима для того, что есть нет встроенных предвзятости, что может сбить с толку результаты. Рисунок 3F и 3 G показывают пример неправильного объекта выделения. В пилотного тестирования образца размером 4 мышей показало тенденцию к тратить меньше, чем 50% времени расследования с объектом при паре против объект B (Рисунок 3F). Когда эти объекты были затем использованы в Норт с объектом A как Роман объект и больше размер выборки 16, мышей провел значительно меньше, чем 50% времени расследования с объектом A (рис. 3 g). Это отвращение к объекту Роман легко узнаваемые здесь как технический изъян в эксперименте и иллюстрирует почему пилотного тестирования объектов для присущих предпочтение/отвращение имеет важное значение.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58593/58593fig3.jpg"> Рисунок 3: поведенческие данные тестирования с дикого типа взрослых мышей C57Bl/6. (A) сравнение процента всего расследования время перемещения объекта в ходе подготовки судебного разбирательства против OLT показывает значительное увеличение расследования, после перемещения объекта. p < 0,0001, парный t тест. (B) представитель результаты расследования перемещенного объекта во время обучения и испытания Олт, отображается как индекс дискриминации также свидетельствуют о значительном увеличении в исследование объекта после его перемещения. p < 0,0001, парный t тест. (C) процент всего расследования время Роман объекта в Норт показывает значительное предпочтение для изучения новых объектов. ** p = 0,0024, один образец t тест против. 50%. (D) представитель результаты для Роман объект расследования в Норт, отображается как индекс дискриминации аналогично отдают предпочтение для изучения новых объектов. ** p = 0,0024, один образец t тест против 0. (E) представитель результаты анализа Норт, с участием двух различных групп мышей. Группа B значительно отличается от 50% на один t тест (** p = 0,0024), но не группа A (p = 0.5837). В отдельный анализ, для сравнения групп, двухвыборочный тест Манна-Уитни используется из-за неравномерного группы размеров и найдена статистически значимого различия в расследовании (p = 0,66, ns). (F) процент времени с объектом во время проверки испытаний в небольшой размер выборки показывает тенденцию к отвращение к объекту. p = 0.2159, один образец t теста. (G) с большим размером выборки и объект из (F) используется в качестве объекта роман в Норт, обнаруживается значительное отвращение к объекту, даже если это новый объект. * p = 0.0270, один образец t теста. Это пример технического сбоя в выделенных объектов. Данные представлены как средний ± SEM. данных из панелей, C-E взяты из предыдущей публикации6. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58593/58593fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget at JoVE.com

Novel Object Recognition and Object Location Behavioral Testing in Mice on a Budget

Здесь мы предоставляем протокол, который включает подробные инструкции для создания экономических расположения мышиных объекта и Роман объект признание поведенческого тестирования, включая дизайн, стоимость и строительство необходимого оборудования, а также выполнение тестирования поведенческих, сбора данных и анализа.

Роман объект признание и расположение объекта, поведенческое тестирование у мышей на бюджет

Ethologically relevant behavioral testing is a critical component of any study that uses mouse models to study the cognitive effects of various ...

Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы о регулировании памяти. Например, мы определяем роль специфических белков в памяти, тестируя трансгенных мышей нокаутом в этих задачах. Основным преимуществом этого метода является то, что это быстрый и экономически эффективный способ проведения тестирования памяти в любой лаборатории.Демонстрация конструкции арены имеет решающее значение, так как растворитель сварки даст сильные результаты только в том случае, если выполняется с осторожностью. Начните с приобретения пяти листов акрила, акрилового цемента и 16-го калибра гипоаппликатора. Снимите защитное бумажное покрытие с акриловых листов.Затем сухой подходят все материалы, чтобы подтвердить, что размеры являются правильными. Затем соберите и загрузите шприц акриловым цементом. Выровняйте длинный край внешней стены с верхним краем основания и убедитесь, что они перпендикулярны друг другу с помощью комбинации или квадрат машиниста.Затем используйте шприц, чтобы применить небольшой и устойчивый шарик цемента непосредственно в угол двух частей, соединенных. Держите две части на месте в течение пяти минут, пока они не будут первоначально установлены. Повторите те же шаги, чтобы прикрепить другую внешнюю стену к основанию.Затем прикрепите две внутренние стены, по одной за раз, основание акриловым цементом. Наконец, используйте шприц, чтобы применить небольшой и устойчивый шарик цемента непосредственно в угол в настоящее время формируется внешней стеной и внутренней стеной. Начните сеанс привыкания, разделив мышей на группы по четыре человека и разумите их в отдельных чистых клетках.Затем возьмите с собой в испытательный зал одну группу мышей и дайте им акклиматизироваться в течение не менее 30 минут. После акклиматизации начните записывать видео. Поместите каждую мышь на арену, обращенную к стенам угла выпуска, и позвольте мышам свободно исследовать арены в течение шести минут.Затем прекратите запись видео и верните мышей в свои чистые клетки для хранения во время межюсюсного интервала. Очистите все арены с животными объекта рекомендуется методы очистки, такие как вытирая с 70% этанола, чтобы свести к минимуму обонятельные сигналы. Наконец, после завершения в общей сложности трех сеансов привыкания, вернуть всех мышей в свои домашние клетки.Через 24 часа, принести ту же группу мышей в испытательный зал, и позволить им акклиматизироваться к испытательному залу, по крайней мере 30 минут, как это было сделано до привыкания сессий в предыдущий день. Провести учебное испытание с использованием двух объектов, размещенных на арене. Прикрепить объекты с двусторонним лентой шесть на шесть сантиметров от двух не-релиз углы, так что они уравновешиваются на арене.Разрешить мышам исследовать арену и объекты свободно в течение 10 минут. Затем прекратите видеозапись. Поместите мышей обратно в свои чистые клетки проведения в течение 20 минут, и очистить районы с этанолом.Затем, чтобы выполнить задачу определения местоположения объекта OLT, переместите один из объектов, используемых в учебном испытании, в новый угол, не выпускаемый, и прикрепите объект в шести сантиметрах от каждой стены этого угла с помощью двухсторонней ленты. Повторите ту же видеозапись мышей в этом районе в течение 10 минут, как описано ранее. Наконец, чтобы выполнить задачу распознавания новых объектов NORT, замените объект, который не был перемещен во время OLT с новым объектом, и прикрепите новый объект в шести сантиметрах от двух стен угла с двусторонним лентой.Повторите ту же видеозапись мышей в этом районе в течение 10 минут, как описано ранее. Во время OLT память о местоположении объекта отражается группой мышей, расходуя, в среднем, значительно больше времени с объектом после его перемещается. Это также может быть представлено как увеличение индекса дискриминации.В NORT память о местоположении объекта отражается группой мышей, тратя, в среднем, значительно более 50% времени исследования с новым объектом или показывая индекс дискриминации значительно больше нуля. Ключевое значение имеет выбор объектов, для которых мыши не имеют присущих нам предпочтений. Например, в экспериментальном тесте с размером выборки из четырех, мыши показали тенденцию к тратить менее 50% времени исследования с объектом А, когда в паре с объектом B.When объект был затем использован в качестве нового объекта в NORT, с большим размером выборки 16, мыши провели значительно меньше, чем 50% времени исследования с объектом A.Эти данные свидетельствуют о присущей отвращение к объекту A.During этой процедуры , важно помнить, чтобы тщательно очистить все объекты и арены между использованием.В этом методе исследование объектов может быть засовыно вручную исследователями или с использованием коммерческого программного обеспечения. Программное обеспечение имеет более высокие первоначальные затраты, но, после калибровки, может сэкономить время и финансовые ресурсы в долгосрочной перспективе.

Research

JoVE Journal

Behavior

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Процедура Соблюдать Context-индуцированной Возобновление павловской кондиционером Алкоголь на обращении у крыс

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

Тестирование на Запах дискриминации и привыкания у мышей

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

Asymmetric Walkway: A Novel Behavioral Assay for Studying Asymmetric Locomotion

Асимметричная дорожка: Роман Поведенческая Анализ по изучению Asymmetric Locomotion

Behavioral assays are commonly used for the assessment of sensorimotor impairment in the central nervous system (CNS). The most sophisticated methods for ...

Novel Object Exploration as a Potential Assay for Higher Order Repetitive Behaviors in Mice

Роман Исследование объекта как потенциальный тест для высокого порядка повторяющееся поведение у мышей

Restricted, repetitive behaviors (RRBs) are a core feature of autism spectrum disorder (ASD) and disrupt the lives of affected individuals.  RRBs are ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

Грызун психомоторного Бдительность Test (rPVT): Метод оценки психофизиологические качества у крыс и мышей

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Experience is Instrumental in Tuning a Link Between Language and Cognition: Evidence from 6-  to 7- Month-Old Infants' Object Categorization

Опыт Инструментальный в Tuning связь между Языком и познанием: Evidence от 6- до 7- месячной категоризации объектов неонатальной

At birth, infants not only prefer listening to human vocalizations, but also have begun to link these vocalizations to cognition: For infants as young as ...

Novel Object Recognition Test for the Investigation of Learning and Memory in Mice

Роман объект признание тест для расследования обучения и памяти у мышей

The object recognition test (ORT) is a commonly used behavioral assay for the investigation of various aspects of learning and memory in mice. The ORT is ...

The (Spatial) Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

The Spatial Memory Game: Testing the Relationship Between Spatial Language, Object Knowledge, and Spatial Cognition

Игра (пространственной) памяти: Тестирование взаимосвязи между пространственной языка, объект знаний и пространственной познания

The memory game paradigm is a behavioral procedure to explore the relationship between language, spatial memory, and object knowledge. Using two different ...

The Unpredictable Chronic Mild Stress Protocol for Inducing Anhedonia in Mice

Непредсказуемым хронический стресс мягкий протокол для стимулирования ангедония мышей

Depression is a highly prevalent and debilitating condition, only partially addressed by current pharmacotherapies. The lack of response to treatment by ...

Defining the Role Of Language in Infants' Object Categorization with Eye-tracking Paradigms

Определение роли языка в категоризации объектов новорожденных с глаз отслеживания парадигмы

Assessing infant category learning is a challenging but vital aspect of studying infant cognition. By employing a familiarization-test paradigm, we ...