Name: bovine mammary gland biopsy techniques
Uploaded: 2018-12-23T13:00:00
Duration: 14 min 53 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bovine Mammary Gland Biopsy Techniques at JoVE.com

Это исследование было поддержано национальной программы питания животных и Virginia Tech. Технической помощи г-жа Тара Pilonero, доктор Джули Settlage и доктор Izabelle Тейшейра благодарностью.

<ol>
	<li>Khatun, M., Sorensen, P., Ingvartsen, K. L., Bjerring, M., Rontved, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+combined+liver+and+udder+biopsying+on+the+acute+phase+response+of+dairy+cows+with+experimentally+induced+E.+coli+mastitis.">Effects of combined liver and udder biopsying on the acute phase response of dairy cows with experimentally induced E. coli mastitis.</a> Animal. 7 (10), 1721-1730 (2013).</li><li>Buitenhuis, B., Rontved, C. M., Edwards, S. M., Ingvartsen, K. L., Sorensen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+depth+analysis+of+genes+and+pathways+of+the+mammary+gland+involved+in+the+pathogenesis+of+bovine+Escherichia+coli-mastitis.">In depth analysis of genes and pathways of the mammary gland involved in the pathogenesis of bovine Escherichia coli-mastitis.</a> BMC Genomics. 12, 130 (2011).</li><li>Nickerson, S. C., Akers, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+Gland+|+Anatomy.">Mammary Gland | Anatomy.</a> Fuquay JW, Fox PF and McSweeney PLH (eds.), Encyclopedia of Dairy Sciences, Second Edition. 3, 328-337 (2011).</li><li>Akers, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+100-Year+Review:+Mammary+development+and+lactation.">A 100-Year Review: Mammary development and lactation.</a> Journal of Dairy Science. 100 (12), 10332-10352 (2017).</li><li>Ruegg, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+100-Year+Review:+Mastitis+detection,+management,+and+prevention1.">A 100-Year Review: Mastitis detection, management, and prevention1.</a> Journal of Dairy Science. 100 (12), 10381-10397 (2017).</li><li>Zhao, X., Lacasse, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mammary+tissue+damage+during+bovine+mastitis:+Causes+and+control.">Mammary tissue damage during bovine mastitis: Causes and control.</a> Journal of Animal Science. 86 (13), 57-65 (2008).</li><li>Knight, C. H., Hillerton, J. E., Teverson, R. M., Winter, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biopsy+of+the+bovine+mammary+gland.">Biopsy of the bovine mammary gland.</a> British Veterinary Journal. 148 (2), 129-132 (1992).</li><li>Lima, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+bovine+mammary+gland+biopsy+and+increased+milking+frequency+on+post-procedure+udder+health,+histology,+and+milk+yield.">Effects of bovine mammary gland biopsy and increased milking frequency on post-procedure udder health, histology, and milk yield.</a> Animal. 10 (5), 838-846 (2016).</li><li>Farr, V. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+the+routine+biopsy+of+bovine+mammary+tissue.">An improved method for the routine biopsy of bovine mammary tissue.</a> Journal of Dairy Science. 79 (4), 543-549 (1996).</li><li>Weng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Short+communication:+Repeated+mammary+tissue+collections+during+lactation+do+not+alter+subsequent+milk+yield+or+composition.">Short communication: Repeated mammary tissue collections during lactation do not alter subsequent milk yield or composition.</a> Journal of Dairy Science. 100 (10), 8422-8425 (2017).</li><li>Peterson, D. G., Matitashvili, E. A., Bauman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diet-induced+milk+fat+depression+in+dairy+cows+results+in+increased+trans-10,+cis-12+CLA+in+milk+fat+and+coordinate+suppression+of+mRNA+abundance+for+mammary+enzymes+involved+in+milk+fat+synthesis.">Diet-induced milk fat depression in dairy cows results in increased trans-10, cis-12 CLA in milk fat and coordinate suppression of mRNA abundance for mammary enzymes involved in milk fat synthesis.</a> Journal of Nutrition. 133 (10), 3098-3102 (2003).</li><li>Baumgard, L. H., Matitashvili, E., Corl, B. A., Dwyer, D. A., Bauman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=trans-10,+cis-12+conjugated+linoleic+acid+decreases+lipogenic+rates+and+expression+of+genes+involved+in+milk+lipid+synthesis+in+dairy+cows.">trans-10, cis-12 conjugated linoleic acid decreases lipogenic rates and expression of genes involved in milk lipid synthesis in dairy cows.</a> Journal of Dairy Science. 85 (9), 2155-2163 (2002).</li><li>Kasraeian, S., Allison, D. C., Ahlmann, E. R., Fedenko, A. N., Menendez, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+fine-needle+aspiration,+core+biopsy,+and+surgical+biopsy+in+the+diagnosis+of+extremity+soft+tissue+masses.">A comparison of fine-needle aspiration, core biopsy, and surgical biopsy in the diagnosis of extremity soft tissue masses.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 468 (11), 2992-3002 (2010).</li><li>de Lima, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+technique+for+repeated+biopsies+of+the+mammary+gland+in+dairy+cows+allotted+to+Latin-square+design+studies.">A new technique for repeated biopsies of the mammary gland in dairy cows allotted to Latin-square design studies.</a> Canadian Journal of Veterinary Research-Revue Canadienne De Recherche Veterinaire. 80 (3), 225-229 (2016).</li><li>Ollier, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+intact+rapeseeds+or+sunflower+oil+in+high-forage+or+high-concentrate+diets+affects+milk+yield,+milk+composition,+and+mammary+gene+expression+profile+in+goats.">Whole intact rapeseeds or sunflower oil in high-forage or high-concentrate diets affects milk yield, milk composition, and mammary gene expression profile in goats.</a> Journal of Dairy Science. 92 (11), 5544-5560 (2009).</li><li>Soberon, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+increased+milking+frequency+on+metabolism+and+mammary+cell+proliferation+in+Holstein+dairy+cows.">Effects of increased milking frequency on metabolism and mammary cell proliferation in Holstein dairy cows.</a> Journal of Dairy Science. 93 (2), 565-573 (2010).</li></ol>

Авторы не имеют ничего сообщать.

Ядро и иглы биопсии методы были описаны в этот протокол9,16. Для обеих процедур требуется подробную оценку здоровья животных и заболеваемости маститом14 до биопсии. Для исследовательских целей следует избегать выполнения технику в животных с явными признаками воспаления или инфекционных заболеваний. Это позволит уменьшить риск осложнений во время и после биопсии. Все биопсии инструменты и устройства должны быть чистыми, дезинфекции и стерилизации, чтобы избежать загрязнения биопсии узла. Перед процедурой необходимой для сведения к минимуму хирургические сайт инфекции (SSI). В общем SSI ассоциируется с животных заболеваемости, потеряли производительности и более высокие издержки производства в молочных коров. Исследованиях сообщалось ранее для предотвращения SSI благодаря биопсии, включая стрижки волос вокруг сайта разрез, мытье области биопсии, чтобы удалить загрязнения9,14и с помощью антисептических агентов (70% спирта, йод хирургические методы скраб,9, 2% хлоргексидин ацетата раствор14, 10% повидон йода8) для подготовки кожи. В некоторых исследованиях введение антибиотиков был принят в течение7 или сразу же после биопсии9; Однако антибиотикотерапия не использовался в работе, и не наблюдалось никаких инфекций биопсии узла. Для предотвращения загрязнения биоптатов ран, хвост должны быть закреплены для предотвращения контакта с биопсии узла до тех пор, пока применяется аэрозоль повязку. В этом протоколе скрепки удаляются около 10-14 d после биопсии.
До основных биопсии важно правильно настроить инструмент и прикрепить его к дрель; Выберите скорость медленного вращения, выберите вперед вращение и не используйте обратный режим сверла. Во время процедуры важно использовать цифровые давление на обе стороны разреза для держать края кожи друг от друга и имеют достаточно долго разрез, чтобы разрешить вход инструмент без обращения к коже или соединительной ткани. Если эта процедура не выполняется, перетащите по краям разреза во время вращения основной инструмент биопсии могут возникнуть и вызвать травмы тканей дополнительные кожи, который увеличит риск инфекции и может задержать заживление ран. Нынешние процедуры биопсии, описанные в настоящем протоколе были исполнены хирургом совет сертифицированных крупных животных. Процедуры были выполнены успешно (рис. 5). Обе методики являются относительно легко и быстро выполнять по сравнению с процедурой хирургического иссечения.
Кровотечение из биопсии узла являются общими после биопсии молочных коров8,9,10,14мг. В настоящем Протоколе, кровотечение наблюдается было минимальным (рис. 4), который может быть за счет применения адекватных (сильный) давление на рану сразу же после процедуры. Требуется сильное давление для по крайней мере 20 минут, и это может потребоваться для более чем 30 мин в некоторых случаях. Если от умеренной до тяжелой кровотечение наблюдается после применения давления к месту биопсии, то рекомендуется продолжать давление, и сразу же связаться с ветеринаром.
Как гемостаза является важным фактором для снижения заболеваемости корова, одно исследование упакованы гемостаза колодки в биопсии узла для контроля кровотечения9. Однако использование системы гемостаза колодки таким образом имеет высокий потенциальный риск для микробиологического загрязнения в среде ферм. Другое исследование14 применяется ручной давление к месту биопсии между повторных биопсий и после биопсии кожи и закрытия, а льда на сайте для по крайней мере 2 ч после биопсии. В настоящем Протоколе сильное давление, применяемое к месту биопсии для 20-25 мин был достаточным для остановки кровотечения.
Техника успешного биопсии должно привести к минимальной крови в молоке, которая сохраняется в течение короткого периода времени после процедуры. Чтобы избежать прерывания секрецию молока во время молока разочарование и мастит инфекции, интрамаммарное тромбы следует удалить вручную, зачистки от биопсию квартал10,14. В настоящем Протоколе крови было отмечено в молоке до 48 ч после биопсии. Однако в исследовании, которое используется большее количество животных, крови в молоке было отмечено в большинстве коров для менее чем за 6 дней. После 6 дней8несколько животных показали крови в молоке. По этой причине ежедневные наблюдения вида молока необходим для 6 d после процедуры. Животные не проявляют никаких признаков мастита инфекции, когда образец большой ткани было получено14. Однако предыдущие исследования, которое выполняло повторных биопсий на то же самое животное, с помощью иглы нашел что мастит инфекция заболеваемости был примерно на 12% после процедуры8. В настоящем Протоколе ни животных были визуальные признаки инфекции клинический мастит после процедуры. Также есть небольшой шанс, что после биопсии могут быть инфицированы место разреза.
Tolazoline гидрохлорид, препарат, который отменяет эффекты седации, должны быть доступны в случае передозировки от Ксилазина. Чрезмерной дозы Ксилазина может вызвать отек легких. Клинические признаки отека легких включают дыхательная недостаточность, тяжелая одышка, затруднению дыхания, кашель и пенистой мокроты. Если наблюдаются признаки отека легких, рекомендуется использовать для отмены действия квалификаторов Ксилазина tolazine (2-4 мг/кг веса тела).
Настоящий Протокол описывает метод для выполнения биопсии иглы и ядро биопсии. В целом преимущество биопсии ядро по сравнению с иглы биопсия является больше ткани образца (0,75 до 1 g)9 с минимальное негативное воздействие на здоровье вымени. Биопсия иглы-это менее инвазивный метод, чем основной инструмент биопсии. Однако несколько биопсии пытается получить большее количество ткани с помощью иглы биопсия процедура может увеличить риск крупных кровотечения после процедуры, а также сгустки крови в молоке. Обе методики вызвало минимальные корова заболеваемости и легко были достигнуты с минимальной подготовки хирургического персонала. Краткосрочные изменения в ежедневных надой молока (8-10% снижение) и его состав9 и снижение потребления корма14 ожидается после ядра и иглы биопсий, соответственно. Ограничения процедуры биопсии иглы являются небольшой объем ткани удалены с иглой. Инструмент должен быть активирован только тогда, когда игла находится в пределах ткани, чтобы быть биопсию и множественные попытки часто необходимы для получения достаточного количества ткани, который увеличивает риск крови в молоке и мастит после процедуры. Ограничения биопсии ядра включают в себя более высокий риск кровотечения после процедуры, если большое количество ткани (> 200 мг) получается. Кроме того средство биопсии более трудно собрать, требующие надлежащей подготовки перед использованием.

Биопсия является процедура урожай основной раздел ткани от субъектов для медицинских или исследовательских целях. Это минимально инвазивных и широко используется техника для сбора ткани как альтернатива эвтаназии1 разрешить анализ ответов тканей для лечения или других факторов, представляющих интерес. Образцы тканей молочной железы крупного рогатого скота (мг) имеют важное значение для молочных исследований для изучения выражения гена и белков, гистология, Организации клеточных органелл, сигнальные пути и метаболические процессы в ответ на изменения в управлении или окружающей среды. Кроме того для диагностики и исследования некоторых инфекционных заболеваний, как бычий мастит, вызванных бактериальной инфекции2необходима мг ткани.
Вымени скота содержит четыре отдельных желез и каждая железы содержит независимый молока секреторной системы коллективно называемые паренхимы. Альвеолы, воздуховодов и соединительной ткани присутствуют в молочной паренхимы. Альвеолы, микроскопические сферически полых структур, которые состоят из эпителиальных клеток на внутренней поверхности (люминал) и специализированные миоэпителиальных клеток на наружной поверхности (базальный). Альвеолы отвечают за синтез и секрецию молока. Фиброзной соединительной ткани, в паренхиме может отделить Группа альвеол от других групп альвеолы, и каждая группа называется долька3. Несколько факторов могут повлиять на развитие и функции, включая физиологии животных, питание, управление, генетика и окружающей среды4мг. Мастит также является критическим фактором, который негативно влияет на качество функции и молоко мг5. Токсины, выпущенное mastitic патогены могут привести к повреждению альвеолы и вызвать некроз в результате биохимических и гистологические изменения в ткани мг6. Таким образом гистология и метаболические процессы каждого альвеолы или дольки в мг может быть значительно отличается от других. Таким образом биопсия, которые являются репрезентативных выборок всего молочной железы являются желательными. Небольшие биопсии может захватить только один дольки или отдельных альвеола, ограничивая результирующий научных или диагностическую информацию. Для исследовательских целей, надо осознавать, что Биопсия молочной железы предоставляет снимок» ткани характеристики но биопсия не может адекватно характеризовать всего молочной функции в отсутствие смете всего молочной железы массы.
Несколько инструментов биопсии были разработаны за последние 30 лет для использования человеком. В настоящее время адаптации этих документов доступны для использования с животными. Для молочного скота были получены образцы мг тканей, с использованием различных методов, включая хирургическое иссечение (тупой рассечение)7, биопсия иглы1,8и ядро биопсии инструменты9,10. Таким образом методы биопсии мг в молочных коров перешли от процедур с использованием лежачие седация с хирургическое рассечение, с помощью электрокоагуляции гемостаз в 1992 году7 коллекцию ключевых биопсий под постоянный седации9, 10,,1112. Хирургическая биопсия это инвазивный метод, который может быть дорогим и имеют более высокий уровень осложнений, например, гематомы, ранение проблемы, и опухоль распространилась13. В настоящее время ядро биопсии и биопсия иглы (также известный как биопсия tru Отрежьте) были широко приняты как альтернативу хирургической биопсии. Преимущества ядро и иглы биопсий, по сравнению с хирургической биопсии включают в себя: процедура является минимально инвазивной; Основные осложнения редки; Общая анестезия не требуется; процедура является relativley быстрого; время восстановления короткий; есть минимальные негативные последствия для здоровья вымени, а только краткосрочные последствия молока урожайность и композиция8,9,10; и стоимость меньше, чем Хирургическая биопсия13.
Одна процедура биопсии ядро, описанной в 1996 году используется стерильные, канюли из нержавеющей стали с съемным убирающимся лезвием для удаления представитель количество ткани из бычьего мг без общей анестезии9,10,11 ,12. Во время процедуры инструмент был прикреплен к дрель для создания низкой скорости, вращательное движение, который аккуратно вырезать основной ткани как инструмент был перемещен в ткани. Преимущество было больше ткани образец (70 мм x 4 мм в диаметре, около 0,75 до 1 g) 9. Недавнее исследование10 показали, что процедуры биопсии, описанной V. C. Farret al. 9 могут быть использованы для выполнения повторных мг ткани коллекции без негативного воздействия на производительность и вымени здоровья кормящих молочных коров. Совсем недавно в молочных коров, чтобы оценить повторных биопсий мг, с использованием больших троакара (31 см длиной, наружный диаметр 9,5 мм, внутренний диаметр 8 мм) с вакуумом, применяется к внутренней нержавеющей стали канюля для сбора биопсии было проведено исследование14 . Этот метод используется седации (Ксилазина) и местной анестезии (2% лидокаин гидрохлорид).
Биопсия иглы является другой метод для сбора ткани молочной железы. Несколько исследований приняли эту технику. Одно исследование1 используются седативные препараты (Детомидина) и местной анестезии (1% лидокаина) в процедуре. После биопсии коров получил профилактического лечения антибиотиками. Молочной железы был вручную массируют до и после доения. Кровь в молоке наблюдалось до 84 ч после биопсии. Объем и состав молока были затронуты для короткого периода времени. Недавно исследование используется биопсия иглы для выполнения повторных биопсий мг в молочных коров8. Седативный эффект (1% acepromazine, внутримышечно) и местной анестезии (2% лидокаин гидрохлорид, подкожно) вводили животным. Животные не получают интрамаммарное препаратами или антибиотиками перед или после процедуры, и не было никаких признаков инфекции в месте биопсии в послеоперационный период. В этом исследовании неоднократные говядину мг биопсий, с помощью иглы несовершеннолетних отрицательно сказалось на молока производства и вымени здоровья дойных коров. В общем биопсия иглы, как представляется, менее инвазивный метод, чем основной инструмент биопсии. Однако как отмечалось ранее, важно для биопсии технику урожай репрезентативной выборки ткани мг. Ограничение биопсия иглы является, что небольшое количество рогатого мг ткани получается (около 20-25 мг)8,15.
Почти все исследования использовала сочетание α-2 агониста седации и местной анестезии8,9,10, является ли биопсии через иглу или больших ядро. Говядину мг большинство нервных окончаний, связанные с кожи. Иннервация Паренхиматозный ткани является главным образом через рецепторы стрейч с редким типом нервных волокон для выявления острых хирургических боли. В результате физиологические механизмы боли из-за хирургической манипуляции мг-через кожу и подкожные3 и не глубоких тканей, таких как Паренхиматозный ткани. Таким образом для процедуры биопсии, необходимо только локально анестезировать кожи и подкожной ткани, как проникновение местного анестетика в более глубокие ткани не значительно уменьшить хирургические боль. После соответствующей подготовки области биопсии животных дискомфорта является, прежде всего, связанные с сдержанность.
Коллекция больших керна могут увеличить образование гематом и увеличить риск заражения в паренхиме мг. Таким образом периоперационную протоколы часто включают в себя администрация парентеральных антибиотиков7, хотя это не универсалии8. Достижения гемостаза является также важным фактором для снижения заболеваемости коровы. В вышеупомянутом исследовании с использованием большое ядро биопсии инструмент14, ручной давления был применен к месту биопсии и бюстгальтер корова была использована для прикладывать лед на раны, по крайней мере 2 часа после процедуры. Несмотря на большое количество ткани собирают были обнаружены лишь незначительные сокращения в корма потребления и молока урожайность, и процедура повторяется каждые три недели без негативного воздействия на здоровье коровы.
Исследователи, выполняя мг биопсии молочных коров нужно рассматривать диагностических и аналитических качество результате биопсии, простота технику и коровы заболеваемости. Точное и заранее спланированной хирургические методы необходимы для достижения этих целей. На сегодняшний день исследования биопсия мг сосредоточились на описания результатов биопсии, в отличие от описания сама, техника биопсии и описания для молочных коров не хватает достаточно подробной для того, чтобы разрешить репликацию. Таким образом цель этой работы заключалась в описать биопсия иглы и больших основных методов биопсии достаточно подробно, чтобы разрешить репликацию безопасных и гуманных мг биопсии крупного рогатого скота.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1122px;" width="1120">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">70% Isopropyl alcohol&#160;</td>
			<td style="width:242px;">Walmart&#160;</td>
			<td style="width:123px;">565106257</td>
			<td style="width:306px;">1 L</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Aerosol spray to kill and repel flies</td>
			<td style="width:242px;">MWI</td>
			<td>14339</td>
			<td>1 bottle (if necessary)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Biopsy needles, 12 G &#215; 16 cm</td>
			<td style="width:242px;">C. R. Bard</td>
			<td style="width:123px;">MN1216</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Butterfly infusion set (18 G needle)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-258087</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cell culture dishes</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">08-772E</td>
			<td>4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Cordless drill (low speed)</td>
			<td style="width:242px;">Hitachi&#160;</td>
			<td style="width:123px;">&#160;DS10DFL&#160;</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Core biopsy instrument, Farr et al. (1996)</td>
			<td style="width:242px;"></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>2, custom metal fabrication. To request the tool contact the authors.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Cows</td>
			<td style="width:242px;"></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>cattle healthy</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Flunixin meglumine</td>
			<td style="width:242px;">MWI/VetOne</td>
			<td style="width:123px;">501018</td>
			<td>1.1 to 2.2 mg/kg of body weight</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Folding table&#160;&#160;</td>
			<td style="width:242px;">Amazon</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Forceps</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">09-753-50</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Gloves non-sterile&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">17-200-845</td>
			<td>9, size dependent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Hard brush&#160;</td>
			<td style="width:242px;">Sullivan Supply</td>
			<td style="width:123px;">18270</td>
			<td>1, to wash the cows</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Head gate&#160;</td>
			<td style="width:242px;"></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>1, customized for dairy cows</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Lidocaine hydrochloride 2% injectable&#160;</td>
			<td style="width:242px;">MWI/VetOne</td>
			<td style="width:123px;">510212</td>
			<td>6 mL was used,&#160; from 3 to 8 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Livestock body wash</td>
			<td style="width:242px;">eZall Technologies</td>
			<td style="width:123px;">39384</td>
			<td>1, to wash the cows</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Needle 18 G&#160; (1 to 1/5&#8220;)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-821-15A</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Needle 20 G (1 to 1/5&#8220;)</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">14-815-526</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate buffered saline (0.9%)</td>
			<td style="width:242px;">Fisher</td>
			<td style="width:123px;">20-012-043</td>
			<td>1 L</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Povidone Iodine ointment</td>
			<td style="width:242px;">Jeffers</td>
			<td>#VED1A</td>
			<td>500 g (if necessary)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Povidone iodine scrub solution (0.75% iodine)</td>
			<td style="width:242px;">MWI/VetOne</td>
			<td style="width:123px;">510094</td>
			<td>1 L</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Reusable biopsy instrument&#160;</td>
			<td style="width:242px;">C. R. Bard</td>
			<td style="width:123px;">MG1522</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Rope halter</td>
			<td style="width:242px;">Nasco farm and ranch</td>
			<td style="width:123px;">C10852</td>
			<td>2, cow size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Scalpel blades (#10)</td>
			<td style="width:242px;">MWI</td>
			<td style="width:123px;">033870</td>
			<td>2</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Scalpel holders (#3)</td>
			<td style="width:242px;">MWI</td>
			<td style="width:123px;">602008</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Self seal autoclave pouch 10 x 5.5 in.</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">19-130-0038</td>
			<td>1 case of 800</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Sterile cotton gauze sponges</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">22-037-986</td>
			<td>4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Sterile gauze pads</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">19-090-735</td>
			<td>4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Sterile surgical gloves&#160;</td>
			<td style="width:242px;">Surgical gloves</td>
			<td style="width:123px;">19-166-679</td>
			<td>3,&#160; size dependent</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Sterile surgical towels</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">50-118-0339</td>
			<td>6</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Stethoscope</td>
			<td style="width:242px;">Littmann Master Classic II</td>
			<td style="width:123px;">1392</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Surgical clipper</td>
			<td style="width:242px;">Oster A5</td>
			<td style="width:123px;">078005-010-003</td>
			<td>1, preparation of the animal for biopsy</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Surgical clipper blades (#40 )</td>
			<td style="width:242px;">Oster&#160;</td>
			<td style="width:123px;">78919-016</td>
			<td>1, preparation of the animal for biopsy</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Surgical staple remover</td>
			<td style="width:242px;">MWI</td>
			<td style="width:123px;">541</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Surgical stapler pre-loaded</td>
			<td style="width:242px;">MWI</td>
			<td style="width:123px;">17713</td>
			<td>5</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Syringes of 10 mL</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>14-823-224</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Syringes of 2 mL</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-028854</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Syringes of 20 mL</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-034507</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Syringes of 5 mL</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>22-028855</td>
			<td>3</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Thermometer</td>
			<td style="width:242px;">Agri-Pro Enterprises Inc</td>
			<td style="width:123px;">72000</td>
			<td>1</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Tolazine hydrochloride</td>
			<td style="width:242px;">Akorn Animal Health</td>
			<td style="width:123px;">61311-486-10</td>
			<td>2 to 4 mg/kg of body weight (if necessary)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tweezer&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td style="width:123px;">14-955-025</td>
			<td>1, for handle the tissue sample</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Water hose</td>
			<td style="width:242px;">Miracle-Gro, Walmart</td>
			<td style="width:123px;">554990501</td>
			<td>1, to wash the cows</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:451px;">Water-resistant aerosol bandage (aluminum powder 40 mg)</td>
			<td style="width:242px;">MWI</td>
			<td style="width:123px;">010728</td>
			<td>1 bottle&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazine hydrochloride</td>
			<td style="width:242px;">MWI/VetOne</td>
			<td style="width:123px;">510650</td>
			<td>0.01 to 0.05 mg/kg of body weight</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bovine mammary gland biopsy techniques

Говядину молочной железы Биопсия позволяет исследователям собирать образцы тканей для изучения клеточной биологии, включая экспрессии генов, гистологический анализ, сигнальные пути и перевод белка. Эта статья описывает два способа для биопсии молочной железы крупного рогатого скота (мг). Три здоровых Гольштейн молочных коров являются субъектами. До биопсий коровы были доят и впоследствии сдержанными в желоб крупного рогатого скота. Анальгетик (flunixin меглумин, 1,1 до 2,2 мг/кг массы тела) осуществлялось через югулярной внутривенного [IV] инъекции 15-20 мин предварительного для биопсии. Для постоянного седации, Ксилазина гидрохлорид (0,01-0,05 мг/кг массы тела) было впрыснуто через копчиковый сосуды 5-10 мин до процедуры. После того, как надлежащим образом седативные, биопсии узла асептически подготовлен и локально невосприимчивы с 6 мл 2% лидокаин гидрохлорид через подкожные инъекции. С помощью асептического технику, 2-3 см вертикальный разрез был сделан с помощью скальпеля число 10. Ядро и иглы инструменты биопсии были использованы. Основной инструмент биопсии прикрепляются к дрель и вставляется в мг тканей через разрез с помощью действия clock-wise дрель. Средство биопсия иглы вручную был вставлен в разрез сайта. Сразу же после процедуры помощник оказывало давление на сайте разрез для 20-25 мин с использованием стерильных полотенце для достижения гемостаза. Нержавеющая сталь хирургического скобы были использованы против Кожный разрез. Скобы были удалены 10 дней после процедуры. Основные преимущества ядро и иглы биопсия является, что оба подхода являются минимально инвазивных процедур, которые могут выполняться безопасно в здоровых коров. Надой молока после биопсии был неизменным. Эти процедуры требуют восстановления короткое время и привести к меньшим риском осложнений. Конкретные ограничения могут включать кровотечение после биопсии и инфекции на сайте биопсии. Применение этих методов включают коллекции тканей для клинической диагностики и исследовательских целей, например культуры главной ячейки.

В настоящем Протоколе ядро биопсии техника производства образец ткани 200-600 мг пока биопсия иглы произведенные образцы 10-30 мг на биопсии. Животные были замечены два раза в день в течение 10 d после процедуры. Осложнений не произошло во время процедуры или в послеоперационный период, с жизненно важных параметров коров, оставаясь в пределах нормы (средняя частота дыхания = ± 31.4 7.04 (SD) вдохов в минуту, Средняя ЧСС = 75.9 ± 8,9 ударов в мин и в среднем ректальной температуры = ± 38.2 0,68 ° C, рис. 3).
После ручного давления на области биопсии для достижения гемостаза (около 25 минут) открытая рана показал минимальное кровотечение (рис. 4). Коров кормят ту же диету ad libitum, и животные находились в том же учреждении жилья в послеоперационный период. Животные не показывать признаки инфекции в месте биопсии; Существует без боли, кровотечение, отеки, дренажа или повышенной температуры (рис. 5). Рана зажила в течение 8-10 d биопсии (рис. 5 c).
Одно животное разработал незначительных раздражение из-за раны, потерев на 8 день после процедуры. Эта корова лечили очистки биопсии узла, используя повидон йод раствор и 70% изопропиловый спирт. Из нержавеющей стали скобы были удалены, чтобы позволить дренажа и повидон йод мазь (1%) был применен дважды в день на сайте биопсии для 2-3 d. Раздражение кожи исчез 2 d после применения мази повидон йод, и Рана зажила без дальнейших осложнений.
Сгустки крови были удалены вручную, зачистки молока от биопсию квартала до машинного доения. В настоящем Протоколе для до трех доений (около 36 ч) после биопсии было отмечено наличие сгустков крови в молоке. Крови загрязнение молока наблюдалось до 48 ч после биопсии. Существовали не визуальные различия между основной и иглы биопсий относительно количество крови в молоке. Животные не показали значительное снижение надой молока после процедуры (рис. 6). Средняя молока состав был 4,37% жира, 3,34% белка и 4.64% лактозы. Средняя молока счетчик соматических клеток (SCC) было меньше, чем 200000 клеток / мл.
Полученные ткани мг может использоваться для различных научно-исследовательских целей, таких как начальных клеточных культур (рис. 7).
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig3.jpg"> Рисунок 3 . Оценка показателей здоровья животных после говядину молочной железы биопсия. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a> 
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig4v2.jpg"> Рисунок 4 . Внешний вид сайта биопсии после ручного давления был применен к области биопсии для достижения гемостаза. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig4large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig5.jpg"> Рисунок 5 . Биопсия сайт фотографии. (A) биопсии сайта 3 d после процедуры. (B) биопсии сайта 6 d после процедуры. (C) биопсии сайте 10 d после процедуры, иллюстрирующая, что рана была адекватно зажила. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig5large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig6.jpg"> Рисунок 6 . Ежедневное производство молока до и после биопсии молочной железы крупного рогатого скота (n = 3 коров). Линейная модель оценкам, что за 10 дней до биопсии животных производится 23.35 кг молока в день. Надой молока существенно не изменяется (P > 0,05) от 10 дней до 10 дней после биопсии, хотя небольшое увеличение надоев было отмечено (увеличение 0,0005 кг/d молока каждый день от 10 дней до биопсии). Три животных были использованы в настоящем Протоколе; одно животное было биопсию дважды (животное 1: основные биопсии на левой стороне вымени и иглы биопсии на правой стороне вымени) и два животных некогда биопсию (животных 2 и 3: только на правой стороне вымени, с помощью процедуры ядра или иглы). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig6large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58602/58602fig7.jpg"> Рисунок 7 . Представитель образы культуры первичной говядину эпителиальных клеток молочной. Шкалы бар-100 мкм. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58602/58602fig7large.jpg" target="_blank">пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Bovine Mammary Gland Biopsy Techniques at JoVE.com

Bovine Mammary Gland Biopsy Techniques

Методы биопсии молочной железы крупного рогатого скота

Эта статья представляет говядину молочной железы биопсия с помощью инструментов биопсии ядро и иглы. Собранный ткани может использоваться для культуры клеток или оценить молочной физиологии и метаболизм, включая экспрессии генов, выражение протеина, модификации белков, иммуногистохимии и концентрации метаболитов.

Bovine mammary gland biopsies allow researchers to collect tissue samples to study cell biology including gene expression, histological analysis, ...

Research

JoVE Journal

Biology

Mouse Mammary Epithelial Cells form Mammospheres During Lactogenic Differentiation

Мышь эпителиальных клеток молочной форме Mammospheres Во лактогенный Дифференциация

A phenotypic measure commonly used to determine the degree of lactogenic differentiation in mouse mammary epithelial cell cultures is the formation of ...

Dendra2 Photoswitching through the Mammary Imaging Window

Dendra2 Photoswitching через окно молочной изображений

In the last decade, intravital microscopy of breast tumors in mice and rats at single-cell resolution1-4  has resulted in important insights into ...

Mammary Epithelial Transplant Procedure

Молочные Эпителиальные Процедура трансплантации

This article describes and compares the fat pad clearance procedure developed by DeOme KB et al.1 and the sparing procedure developed by Brill B et al.2, ...

Changes in Mammary Gland Morphology and Breast Cancer Risk in Rats

Изменения в молочной железы Морфология и риск рака молочной железы у крыс

Studies in rodent models of breast cancer show that exposures to dietary/hormonal factors during the in utero and pubertal periods, when the mammary gland ...

Evaluation of Mammary Gland Development and Function in Mouse Models

Оценка молочной железы развития и функции в моделях мыши

The human mammary gland is composed of 15-20 lobes that secrete milk into a branching duct system opening at the nipple. Those lobes are themselves ...

Aseptic Laboratory Techniques: Plating Methods

Асептики лаборатории: Покрытие методы

Microorganisms are present on all inanimate surfaces creating ubiquitous sources of possible contamination in the laboratory. Experimental success relies ...

Intraductal Injection for Localized Drug Delivery to the Mouse Mammary Gland

Внутрипротоковый впрыска для локализованной доставки лекарств к молочной железы мыши

Herein we describe a protocol to deliver various reagents to the mouse mammary gland via intraductal injections. Localized drug delivery and knock-down of ...

Manipulating the Murine Lacrimal Gland

Манипулируя мышиной слезной железы

The lacrimal gland (LG) secretes aqueous tears necessary for maintaining the structure and function of the cornea, a transparent tissue essential for ...

Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

Непрямой иммунофлюоресценции на замороженные Разделы молочной железы мыши

Indirect immunofluorescence is used to detect and locate proteins of interest in a tissue. The protocol presented here describes a complete and simple ...

Isolation of Intact, Whole Mouse Mammary Glands for Analysis of Extracellular Matrix Expression and Gland Morphology

Изоляция нетронутыми, весь мыши молочных желез для анализа выражения внеклеточного матрикса и морфология железы

The goal of this procedure was to harvest the #4 abdominal mammary glands from female nulliparous mice in order to assess ECM expression and ductal ...