Name: orthotopic injection of breast cancer cells into the mice mammary fat pad
Uploaded: 2019-01-20T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad at JoVE.com

लेखकों को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (अनुदान सं ८१८७३१११, ८१६७३९२४, ८१७७४०३९, ८१५०३५१७), बीजिंग प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (अनुदान नहीं ७१७२०९५, ७१६२०८४, ७१६२०८३), और Xu ज़िया के बीजिंग अस्पताल के फाउंडेशन का शुक्रिया अदा करना चाहूंगा पारंपरिक चीनी चिकित्सा (अनुदान नहीं, xx201701) । हम प्रो चांग-Zhen लियू, प्रयोगात्मक अनुसंधान केंद्र, चीनी चिकित्सा विज्ञान के चीन अकादमी से, bioluminescent छवियों के लिए धंयवाद ।

पशु प्रयोगों के प्रावधान और चीनी प्रायोगिक पशु प्रशासन कानून के आम सिफारिश के अनुसार आयोजित किया गया और पशु देखभाल और राजधानी चिकित्सा विश्वविद्यालय के उपयोग समिति की संस्था द्वारा अनुमोदित किया गय?...

<ol>
	<li>Torre, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+cancer+statistics.">Global cancer statistics.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 65 (2), 87-108 (2012).</li><li>Rashid, O. M., Takabe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+exploring+the+pharmacokinetics+of+breast+cancer+therapies.">Animal models for exploring the pharmacokinetics of breast cancer therapies.</a> Expert Opinion on Drug Metabolism &amp; Toxicology. 11 (2), 221-230 (2015).</li><li>Wagner, K. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+breast+cancer:+quo+vadis,+animal+modeling.">Models of breast cancer: quo vadis, animal modeling.</a> Breast Cancer Research. 6 (1), 31-38 (2004).</li><li>Horas, K., Zheng, Y., Zhou, H., Seibel, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+breast+cancer+metastasis+to+bone:+opportunities+and+limitations.">Animal models for breast cancer metastasis to bone: opportunities and limitations.</a> Cancer Investigation. 33 (9), 459-468 (2015).</li><li>Kawaguchi, T., Foster, B. A., Young, J., Takabe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Update+of+Patient-Derived+Xenograft+Model+for+Translational+Breast+Cancer+Research.">Current Update of Patient-Derived Xenograft Model for Translational Breast Cancer Research.</a> Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. 22 (2), 131-139 (2017).</li><li>Wright, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+of+breast+cancer+bone+metastasis.">Murine models of breast cancer bone metastasis.</a> BoneKEy Reports. 5, 804 (2016).</li><li>Cassidy, J. W., Batra, A. S., Greenwood, W., Bruna, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-derived+tumour+xenografts+for+breast+cancer+drug+discovery.">Patient-derived tumour xenografts for breast cancer drug discovery.</a> Endocrine-Related Cancer. 23 (12), T259-T270 (2016).</li><li>Stiedl, P., Grabner, B., Zboray, K., Bogner, E., Casanova, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+cancer+using+genetically+engineered+mice.">Modeling cancer using genetically engineered mice.</a> Methods in Molecular Biology. 1267, 3-18 (2015).</li><li>Menezes, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+engineered+mice+as+experimental+tools+to+dissect+the+critical+events+in+breast+cancer.">Genetically engineered mice as experimental tools to dissect the critical events in breast cancer.</a> Advances in Cancer Research. 121, 331-382 (2014).</li><li>Talmadge, J. E., Singh, R. K., Fidler, I. J., Raz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+models+to+evaluate+novel+and+conventional+therapeutic+strategies+for+cancer.">Murine models to evaluate novel and conventional therapeutic strategies for cancer.</a> The American Journal of Pathology. 170 (3), 793-804 (2007).</li><li>Spaw, M., Anant, S., Thomas, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stromal+contributions+to+the+carcinogenic+process.">Stromal contributions to the carcinogenic process.</a> Molecular Carcinogenesis. 56 (4), 1199-1213 (2017).</li><li>Joyce, J. A., Pollard, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+metastasis.">Microenvironmental regulation of metastasis.</a> Nature Reviews Cancer. 9 (4), 239-252 (2009).</li><li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hallmarks+of+cancer:+the+next+generation.">Hallmarks of cancer: the next generation.</a> Cell. 144 (5), 646-674 (2011).</li><li>Yano, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor-targeting+adenovirus+OBP-401+inhibits+primary+and+metastatic+tumor+growth+of+triple-negative+breast+cancer+in+orthotopic+nude-mouse+models.">Tumor-targeting adenovirus OBP-401 inhibits primary and metastatic tumor growth of triple-negative breast cancer in orthotopic nude-mouse models.</a> Oncotarget. 7 (51), 85273-85282 (2016).</li><li>Kocaturk, B., Versteeg, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+injection+of+breast+cancer+cells+into+the+mammary+fat+pad+of+mice+to+study+tumor+growth.">Orthotopic injection of breast cancer cells into the mammary fat pad of mice to study tumor growth.</a> Journal of Visualized Experiments. (96), e51967 (2015).</li><li>Tavera-Mendoza, L. E., Brown, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+less+invasive+method+for+orthotopic+injection+of+breast+cancer+cells+into+the+mouse+mammary+gland.">A less invasive method for orthotopic injection of breast cancer cells into the mouse mammary gland.</a> Lab Animal. 51 (1), 85-88 (2017).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+murine+breast+tumor+model+by+subcutaneous+or+orthotopic+implantation.">Establishment of a murine breast tumor model by subcutaneous or orthotopic implantation.</a> Oncology Letters. 15 (5), 6233-6240 (2018).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gubenyiliu+II+Inhibits+Breast+Tumor+Growth+and+Metastasis+Associated+with+Decreased+Heparanase+Expression+and+Phosphorylation+of+ERK+and+AKT+Pathways.">Gubenyiliu II Inhibits Breast Tumor Growth and Metastasis Associated with Decreased Heparanase Expression and Phosphorylation of ERK and AKT Pathways.</a> Molecules. 22 (5), (2017).</li><li>Kwon, Y. S., Lee, K. S., Chun, S. Y., Jang, T. J., Nam, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppressive+effects+of+a+proton+beam+on+tumor+growth+and+lung+metastasis+through+the+inhibition+of+metastatic+gene+expression+in+4T1+orthotopic+breast+cancer+model.">Suppressive effects of a proton beam on tumor growth and lung metastasis through the inhibition of metastatic gene expression in 4T1 orthotopic breast cancer model.</a> International Journal of Oncology. 49 (1), 336-342 (2016).</li><li>Kalra, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validating+the+use+of+a+luciferase+labeled+breast+cancer+cell+line,+MDA435LCC6,+as+a+means+to+monitor+tumor+progression+and+to+assess+the+therapeutic+activity+of+an+established+anticancer+drug,+docetaxel+(Dt)+alone+or+in+combination+with+the+ILK+inhibitor,+QLT0267.">Validating the use of a luciferase labeled breast cancer cell line, MDA435LCC6, as a means to monitor tumor progression and to assess the therapeutic activity of an established anticancer drug, docetaxel (Dt) alone or in combination with the ILK inhibitor, QLT0267.</a> Cancer Biology &amp; Therapy. 11 (9), 826-838 (2011).</li><li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+metastatic+mouse+models+for+anticancer+drug+discovery+and+evaluation:+a+bridge+to+the+clinic.">Orthotopic metastatic mouse models for anticancer drug discovery and evaluation: a bridge to the clinic.</a> Investigational New Drugs. 17 (4), 343-359 (1999).</li><li>Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-derived+orthotopic+xenografts:+better+mimic+of+metastasis+than+subcutaneous+xenografts.">Patient-derived orthotopic xenografts: better mimic of metastasis than subcutaneous xenografts.</a> Nature Reviews Cancer. 15, 451 (2015).</li></ol>

इस अध्ययन में प्रयुक्त कोशिकाएं 4T1-luc2, murine ट्रिपल-नेगेटिव स्तन कैंसर की कोशिकाओं के साथ luciferase लेबलिंग, जो उनके अत्यधिक इनवेसिव प्रकृति के कारण दवाओं के अर्बुदरोधी और antimetastatic प्रभाव के निवेश के लिए एक उपयोगी उ...

स्तन कैंसर दुनिया भर में महिला मृत्युदर का प्रमुख कारण है. अपनी उत्तरोत्तर बढ़ती घटनाओं के साथ, स्तन कैंसर जन स्वास्थ्य के लिए एक गंभीर चुनौती बन गया है1. Murine कैंसर मॉडल नैदानिक और नैदानिक अध्ययन के बीच अच्छा पुल हैं, और एक अच्छी नकल Murine रोग मॉडल रोग और दवा पर अनुसंधान की सटीकता में वृद्धि होगी ।
प्राथमिक ट्यूमर विकास घातक रोग की प्रगति शुरू होता है, जबकि मेटास्टेसिस और जटिलताओं ज्यादातर कैंसर रोगियों में मौत और गरीब जीवन के गुणों का मुख्य कारण हैं । कई murine मॉडल मानव स्तन कैंसर की विकृति की नकल करने के लिए उपयोग किया जाता है2,3,4। Xenograft मॉडल व्यापक रूप से रोग पात्रों को समझने के लिए और सुरक्षा और प्रभावकारिता5,6,7के लिए दवाओं स्क्रीन करने के लिए कैंसर के अध्ययन के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं । आनुवंशिक रूप से इंजीनियर चूहों (मणि) के लिए कुछ oncogenes या ट्यूमर शमन करनेवाला जीन8लक्ष्यीकरण द्वारा मानव स्तन कैंसर की नकल उत्पंन कर रहे हैं । मणि कैंसर की प्रगति में जीन की भूमिका को समझने के लिए एक अपेक्षाकृत सरल और वर्दीधारी पृष्ठभूमि है; हालांकि, कृत्रिम वातावरण और पृष्ठभूमि मेटास्टेसिस विकृति और संबंधित चिकित्सा9की जांच करने के लिए सीमित हैं । मानव कैंसर की कोशिकाओं, हालांकि मानव रोग सुविधाओं के साथ, केवल प्रतिरक्षा की कमी चूहों में प्रत्यारोपित किया जा सकता है, और ट्यूमर-मेजबान प्रतिरक्षा बातचीत की कमी पक्षपातपूर्ण परिणाम10के लिए नेतृत्व कर सकते हैं ।
जहां ठोस ट्यूमर शुरू रोग11,12,13के जैविक और रोग पात्रों पर सीधा प्रभाव पड़ता है । के बाद से कैंसर की प्रगति ट्यूमर कोशिकाओं के बीच बातचीत के जटिल परिणाम है, stromal कोशिकाओं, इम्यूनोलॉजी कोशिकाओं, भड़काऊ कोशिकाओं, विकास कारकों, और teases, प्राथमिक सीटू में प्रत्यारोपित ट्यूमर बेहतर अंतर्दृष्टि प्रदान करेगा और नकल कैंसर प्रक्रिया रासायनिक एजेंटों या ट्यूमर कोशिकाओं के एक चमड़े के नीचे इंजेक्शन द्वारा प्रेरित ट्यूमर की तुलना में अधिक सही है । रासायनिक ट्यूमर के लिए प्रेरित किया एजेंटों शोधकर्ताओं और पर्यावरण के लिए हानिकारक हो सकता है और यहां तक कि कुछ देशों में मना कर रहे हैं । एक स्तन वसा पैड पर्यावरण के अभाव के कारण, एक चमड़े के नीचे इंजेक्शन के रोग प्रगति असली स्तन कैंसर रोगियों, जिसका कैंसर के उद्भव और स्तन वसा पैड से परेशान में है कि के साथ अलग हो सकता है । चमड़े के नीचे इंजेक्शन के नुकसान ट्यूमर के विकास का अध्ययन करने के लिए orthotopic मॉडल के उपयोग को प्रोत्साहित करते हैं । पूर्व अनुसंधान में, उच्च मेटास्टेटिक एमडीए-एमबी-२३१ ट्यूमर, सात orthotopic प्रत्यारोपण के बाद विकसित, इंजेक्शन स्थान के महत्व का संकेत दिया14. हाल ही में, स्तन के कैंसर की कोशिकाओं के orthotopic शल्य चिकित्सा के साथ स्तन वसा पैड में आरोपण15,16की सूचना दी थी । स्तन पैड पर्यावरण के साथ, ट्यूमर विकास और दूर के अंगों में प्रवास रोग प्रासंगिक साइटों पर स्तन कैंसर की पूरी प्रक्रिया को कवर, जो इस मॉडल मानव रोगों की प्रगति की एक लघु बनाता है । हालांकि, सर्जरी के बाद, त्वचा स्वतः ही ठीक है, जो सामांय स्तन कैंसर व्युत्पत्ति और पूर्वाग्रह परिणामों के साथ हस्तक्षेप के संभावित जोखिम ले सकते है प्रयास करता है ।
हम कुछ स्तन कैंसर के मॉडल की तुलना में है और एक ंयूनतम इनवेसिव orthotopic स्तन कैंसर प्रगति17,18पर दवाओं के संभावित प्रभाव की जांच मॉडल की स्थापना की । इस अध्ययन में, कैसे एक सरल, कम इनवेसिव रास्ते में स्तन वसा पैड में स्तनों के कैंसर की कोशिकाओं इंजेक्षन करने के लिए orthotopically पर एक वीडियो प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया है । सर्जरी के बिना यह orthotopic इंजेक्शन विधि कई मायनों में लाभप्रद है । सबसे पहले, आपरेशन सरल और तेजी से है, के बारे में 1 माउस प्रति मिनट । दूसरा, प्राथमिक ट्यूमर सही रोग साइटों पर शुरू घावों के साथ, यह ट्यूमर के विकास से स्तन कैंसर प्रगति के पूरे tumorigenic प्रक्रिया को शामिल किया गया अंय अंगों मेटास्टेसिस है, जो अध्ययन के लिए एक अच्छा प्रयोगात्मक पशु मॉडल प्रदान करता है ट्यूमर कोशिकाओं और ट्यूमर microenvironment की बातचीत । इसके अलावा, यह स्तन कैंसर के सभी चरणों में उपचार के प्रभाव का अनुमान लगाने के लिए एक मूल्यवान मॉडल हो सकता है । इस विधि के लक्ष्य को अधिकतम रूप से मानव स्तन कैंसर प्रगति की नकल करने के लिए एक पशु मॉडल प्रदान करने के लिए है ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:652px;" width="653">
	<tbody>
		<tr height="48">
			<td height="48" style="height:49px;width:149px;">anesthesia machine</td>
			<td style="width:235px;">Midmark Corporation, Dayton, OH, USA</td>
			<td style="width:96px;">Matrx VMS</td>
			<td style="width:172px;">anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:149px;">In-Vivo Imaging System</td>
			<td style="width:235px;">PerkinElmer</td>
			<td style="width:96px;">IVIS Spectrum</td>
			<td style="width:172px;">used for bioluminescence detecion</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:149px;">&#160;isoflurane</td>
			<td style="width:235px;">Hebei yipin chemical reagents&#160; company</td>
			<td style="width:96px;">O21400</td>
			<td style="width:172px;">anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:149px;">1 ml syringe</td>
			<td style="width:235px;">Becton,Dickinson and&#160; Company</td>
			<td style="width:96px;">A257</td>
			<td style="width:172px;">cell injection</td>
		</tr>
		<tr height="48">
			<td height="48" style="height:49px;width:149px;">digital caliper</td>
			<td style="width:235px;">Shang Hai Shen Han Measuring Tools Co., Ltd.</td>
			<td style="width:96px;">S-H</td>
			<td style="width:172px;">volume measurement</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:149px;">tramadol</td>
			<td style="width:235px;">Mundipharma company</td>
			<td style="width:96px;">-</td>
			<td style="width:172px;">pain killer</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:149px;">D-luciferin</td>
			<td style="width:235px;">Gold Biotechnology Inc.</td>
			<td style="width:96px;">LUCK-1G</td>
			<td style="width:172px;">used for bioluminescence detecion</td>
		</tr>
		<tr height="51">
			<td height="51" style="height:52px;width:149px;">The primary antibody against cluster of differentiation (CD) 31</td>
			<td style="width:235px;">Abcam</td>
			<td style="width:96px;">&#160;ab28364</td>
			<td style="width:172px;">used for MVD detection</td>
		</tr>
		<tr height="66">
			<td height="66" style="height:67px;width:149px;">hematoxylin and eosin staining kit</td>
			<td style="width:235px;">&#160;Beijing Zhong Shan Jinqiao Biotechnology Co., Ltd.</td>
			<td style="width:96px;">ZLI-9615</td>
			<td style="width:172px;">histology&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:149px;">hair removal cream</td>
			<td style="width:235px;">Veet</td>
			<td style="width:96px;">-</td>
			<td style="width:172px;">hair removal cream</td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:149px;">Carbomer Eye Gel</td>
			<td style="width:235px;">Dr.GerhardMannChem-Pharm.FabrikGmbH</td>
			<td style="width:96px;">-</td>
			<td style="width:172px;">ophthalmic ointment</td>
		</tr>
		<tr height="59">
			<td height="59" style="height:59px;">sewing needle</td>
			<td style="width:235px;">Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.&#160;</td>
			<td>17U0302J</td>
			<td style="width:172px;">suture</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

orthotopic injection of breast cancer cells into the mice mammary fat pad

एक उचित पशु मॉडल रोगों की एक बेहतर समझ के लिए महत्वपूर्ण है । विभिंन तरीकों द्वारा स्थापित पशु मॉडल (चमड़े के नीचे इंजेक्शन, xenografts, आनुवंशिक हेरफेर, रासायनिक रिएजेंट प्रेरण, आदि) विभिंन रोग अक्षर है और के कुछ पहलुओं की जांच में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते है रोगों. हालांकि कोई एक मॉडल पूरी तरह से पूरे मानव रोग प्रगति की नकल कर सकते हैं, एक उचित stromal वातावरण के साथ orthotopic अंगों रोग मॉडल रोगों को समझने और संभावित दवाओं के लिए स्क्रीनिंग में एक अपूरणीय भूमिका निभाते हैं । इस अनुच्छेद में, हम वर्णन कैसे स्तन वसा पैड में एक सरल, कम इनवेसिव, और आसान करने के लिए संभाल रास्ता, और दूर के अंगों के लिए मेटास्टेसिस का पालन में स्तनों के कैंसर कोशिकाओं प्रत्यारोपण के लिए । प्राथमिक ट्यूमर के विकास की उचित सुविधाओं के साथ, स्तन और निप्पल रोग परिवर्तन, और अन्य अंगों ' मेटास्टेसिस की एक उच्च घटना, इस मॉडल को अधिकतम रूप से मानव स्तन कैंसर प्रगति की नकल । सीटू मेंप्राइमरी ट्यूमर ग्रोथ, लंबे समय तक मेटास्टेसिस, और ब्रेस्ट कैंसर के ट्यूमर microenvironment इस मॉडल का इस्तेमाल करके जांच की जा सकती है ।

एक सफल इंजेक्शन के बाद, बाहर सतह दौर केंद्र के रूप में निप्पल के साथ एक सफेद पारदर्शी फ्लैट क्षेत्र (चित्रा 1) मनाया जा सकता है । प्राथमिक ट्यूमर वृद्धि ट्यूमर की मात्रा और रहने वा?...

Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad at JoVE.com 

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad (Video) | JoVE 

यहां, हम एक सरल, कम इनवेसिव, और आसान करने के लिए संभाल में स्तन वसा पैड में छाती कैंसर कोशिकाओं प्रत्यारोपण के लिए एक प्रोटोकॉल मौजूद, और एक उचित स्तन वसा पैड वातावरण के साथ इस माउस orthotopic स्तन कैंसर मॉडल के विभिंन पहलुओं की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता कैंसर.

स्तन कैंसर कोशिकाओं के चूहों स्तन वसा पैड में Orthotopic इंजेक्शन

A proper animal model is crucial for a better understanding of diseases. Animal models established by different methods (subcutaneous injections, ...

इस विधि में मदद कर सकते है कैंसर के क्षेत्र में महत्वपूर्ण सवालों के जवाब के बारे में कैसे माइक्रोएनवायरमेंट ट्यूमर विकास का समर्थन करता है या कि क्या एक विशिष्ट दवा प्रभावी ढंग से स्तन कैंसर प्रगति को बाधित कर सकते हैं । ट्यूमर इंडक्शन तकनीक के मुख्य फायदे यह है कि किसी सर्जरी की जरूरत नहीं है और यह एक कम आक्रामक तरीके से है जिसमें सीटू में स्तन कैंसर स्थापित करने के लिए है। इस तकनीक का उपयोग करके, ट्यूमर कोशिकाएं उपयुक्त ऊतक वातावरण में स्तन वसा पैड के भीतर बढ़ती हैं, मानव स्तन कैंसर की प्रगति को चूहों की कोशिकाओं को चमड़े के इंजेक्शन या ज़ेनोबेड़ा की तुलना में अधिक बारीकी से नकल करती हैं।Ke-Xin काओ, हमारे तकनीशियन, और मैं, इस प्रक्रिया का प्रदर्शन करने में गन-लिन झांग की सहायता करेंगे । ऑपरेशन से पहले दिन, प्राप्तकर्ता माउस को मैन्युअल रूप से नियंत्रित करें और पशु पेट की ओर को चौथे निपल्स के चारों ओर मुंडा जाने के लिए फर तक घुमाएं। डिपिलेटरी क्रीम की पतली परत के साथ फर को पोंछें।30 से 60 सेकंड के बाद क्रीम निकालने के लिए आसुत पानी का उपयोग करें और नरम कागज तौलिए के साथ माउस सूखी। ऑपरेशन के दिन, बर्फ पर एक बाँझ माइक्रोसेंट्रफ्यूज ट्यूब में, पीबीएस एकाग्रता के प्रति मिलीलीटर पांचवीं कोशिकाओं के लिए एक दो गुना दस करने के लिए मुरीन स्तन कैंसर सेल निलंबन पतला । प्रत्येक इंजेक्शन से पहले, प्रति माउस कोशिकाओं के 50 माइक्रोलीटर के साथ, एक 45 बाय 16 सुई से लैस एक मिलीलीटर सिरिंज लोड करें।और प्रत्येक बेहोश जानवर में अंगुली चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करें । जानवर की आंखों पर मरहम लगाएं और पहले माउस के चौथे निप्पल के आसपास त्वचा को तम्बू करने के लिए चिमटी का उपयोग करें, सिरिंज का पालन करने के लिए एक सुरंग बनाने के लिए। ऊपर की ओर बेवेल के साथ सिरिंज पकड़ो और चमड़े के नीचे निप्पल से पांच से 10 मिलीमीटर पर त्वचा में प्रवेश, सुरंग के बाद जब तक सुई टिप लगभग निप्पल तक पहुंचता है ।चिमटी का उपयोग करने के लिए पहले निप्पल के आसपास त्वचा तंबू सिरिंज का पालन करने के लिए एक सुरंग बनाता है । सुई चिमटी युक्तियों के बीच में प्रवेश किया जाना चाहिए और ऊतक में निराशाजनक के बजाय उठाना चाहिए। ध्यान से सुई टिप को स्तन वसा पैड में तब तक ले जाएं जब तक कि बेवेल निप्पल के नीचे न हो जाए, और कैंसर कोशिकाओं के धीमे इंजेक्शन की अनुमति देने के लिए त्वचा के तम्बू को छोड़ दें।प्रविष्टि पर, ध्यान से सुई टिप को स्तन वसा पैड में ले जाएं जब तक कि बेवेल निप्पल के नीचे न हो जाए। और आप सही स्थान पर कोशिकाओं की डिलीवरी सुनिश्चित करने के लिए प्रतिरोध महसूस करेंगे। जब सभी कोशिकाओं को इंजेक्शन दिया गया हो, तो सुई को थोड़ा साइड में घुमाएं और सिरिंज को धीरे-धीरे वापस लें।10 से 20 सेकंड के लिए सुई घाव पर दबाव लागू करने के लिए एक कपास झाड़ू का उपयोग करें, बनाने के लिए कोई तरल पदार्थ रिसाव नहीं है । इंजेक्शन निप्पल केंद्र में निप्पल के साथ एक पारदर्शी, सफेद, सपाट क्षेत्र के रूप में दिखाई देना चाहिए। ट्यूमर की मात्रा स्थापित करने के लिए, माउस पेट की ओर को नियंत्रित करें और ट्यूमर की लंबाई और चौड़ाई को मापने के लिए एक कैलिपर का उपयोग करें।ट्यूमर बायोल्यूमिनेसेंस पर कब्जा करने के लिए, इमेजिंग से 10 मिनट पहले माउस की गर्दन के पीछे डी-लूसिफ़ेरिन के प्रति किलोग्राम 150 मिलीग्राम इंजेक्ट करें। और उपयुक्त बायोल्यूमिनेसेंस इमेजिंग मापदंडों के तहत प्राथमिक ट्यूमर और मेटास्टेस की बायोल्यूमिनेसेंस छवियों पर कब्जा करें। उचित प्रयोगात्मक समय बिंदु पर, त्वचा से ट्यूमर को काटने के लिए कैंची का उपयोग करें।और पोस्ट-ऑपरेटिव दर्द को दूर करने के लिए सर्जिकल साइट पर एनाल्जेसिक समाधान लागू करें। फिर मानक प्रोटोकॉल के अनुसार सर्जिकल टांके के साथ त्वचा को बंद करें। पूर्ण वसूली तक निगरानी के साथ एक वार्मिंग लैंप के तहत जानवर को ठीक करने की अनुमति दें।प्राथमिक ट्यूमर को दो बराबर टुकड़ों में काटने के लिए स्केलपेल का उपयोग करें। बाद में हेमेटॉक्सीलिन और ईओसिन स्टेनिंग और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के लिए 4% पैराफॉर्मल्डिहाइड में ऊतक का आधा स्टोर करें। पश्चिमी ब्लॉटिंग या आरएनएआई अलगाव के लिए तरल नाइट्रोजन में दूसरे आधे को फ्रीज करें।उचित प्रयोगात्मक अंत बिंदु पर मानक विच्छेदन प्रोटोकॉल के अनुसार फेफड़ों की फसल और पीबीएस में अंग धोने । फिर हेमेटॉक्सीलिन और ियोसिन स्टेनिंग द्वारा मेटास्टेसिस को सत्यापित करने के लिए 4% पैराफॉर्मलडिहाइड में फेफड़ों को ठीक करें। प्राथमिक ट्यूमर विकास ट्यूमर की मात्रा और जीवित ट्यूमर सेल बायोल्यूमिनेसेंस द्वारा मापा जा सकता है, जैसा कि प्रदर्शन किया गया है।टीका के शुरुआती चरणों के दौरान मेटास्टेस नहीं मनाया जाता है क्योंकि या तो कोई माध्यमिक ट्यूमर स्थापित नहीं किया गया है, या प्राथमिक ट्यूमर के मजबूत बायोल्यूमिनेसेंट संकेत कमजोर संकेतों के साथ छोटे मेटास्टैटिक फोसी का पता लगाने में बाधा डालते हैं। रीसेक्शन के बाद, दूर के अंगों के मेटास्टैटिक फोसी से बायोल्यूमिनेसेंस सिग्नल का पता लगाया और विश्लेषण किया जा सकता है। हेमेटॉक्सीलिन और इओसिन स्टेनिंग द्वारा प्राथमिक स्तन ट्यूमर और फेफड़ों के दोनों वर्गों के आकृति विज्ञान के विश्लेषण से ट्यूमर सेल टीका लगाए गए जानवरों में उत्पीडिंग से पता चलता है जैसा कि एंटी-सीडी 31 माइक्रोवेसेल मार्कर स्टेनिंग द्वारा सबूत है।इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय, यह सुनिश्चित करना याद रखना महत्वपूर्ण है कि ट्यूमर कोशिकाओं को वितरित करने से पहले सुई टिप सही स्थान पर है। इस प्रक्रिया के बाद, पशु अल्ट्रासाउंड की तरह परमाणु, वीवो में प्राथमिक ट्यूमर के मूत्राशय पूरकता के बारे में अतिरिक्त सवालों के जवाब देने के लिए प्रदर्शन किया जा सकता है। इसके विकास के बाद, इस तकनीक ने ट्यूमरजीनेसिस के क्षेत्र में शोधकर्ताओं के लिए मार्ग प्रशस्त किया और ट्यूमरजीनेसिस में शामिल प्रमुख कारकों और रास्तों और मुरीन पशु मॉडलों में कैंसर रोधी दवा के तंत्र की खोज में दवा विकास।यह न भूलें कि आइसोफ्लुन या अन्य गैस संज्ञाहरण के साथ काम करना खुराक के लिए बेहद कठिन हो सकता है और इस प्रक्रिया को निष्पादित करते समय हमेशा सक्रिय कार्बन मास्क का उपयोग करने जैसी सावधानियां बरती जानी चाहिए।

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures (Video) | JoVE 

उपयोग कार्यात्मक जीनोमिक्स स्क्रीनिंग कैंसर सेल उपगोल संस्कृतियों में संभावित उपन्यास ड्रग लक्ष्यों की पहचान करने के लिए

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

A Portal Vein Injection Model to Study Liver Metastasis of Breast Cancer

A Portal Vein Injection Model to Study Liver Metastasis of Breast Cancer (Video) | JoVE 

एक पोर्टल नस इंजेक्शन मॉडल का अध्ययन करने के लिए स्तन कैंसर का लिवर मेटास्टेसिस

Breast cancer is the leading cause of cancer-related mortality in women worldwide. Liver metastasis is involved in upwards of 30% of cases with breast ...

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish (Video) | JoVE 

भ्रूणीय Zebrafish में मानव स्तन कैंसर की कोशिकाओं के आक्रामक व्यवहार

In many cases, cancer patients do not die of a primary tumor, but rather because of metastasis. Although numerous rodent models are available for studying ...

Flow Cytometric Detection of Newly-formed Breast Cancer Stem Cell-like Cells After Apoptosis Reversal

Flow Cytometric Detection of Newly-formed Breast Cancer Stem Cell-like Cells After Apoptosis Reversal (Video) | JoVE 

नव गठित स्तन कैंसर के प्रवाह Cytometric का पता लगाने के Apoptosis उत्क्रमण के बाद कोशिका की तरह स्टेम सेल

Cancer recurrence has long been studied by oncologists while the underlying mechanisms remain unclear. Recently, we and others found that a phenomenon ...

Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland

Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland (Video) | JoVE 

मॉडलिंग स्तन कैंसर माउस मैमरी Gland में क्रे-एडिनोवायरस के एक इंट्राडकियल इंजेक्शन के माध्यम से

Breast cancer is a heterogeneous disease, possibly due to complex interactions between different cells of origins and oncogenic events. Mouse models are ...

Studying Triple Negative Breast Cancer Using Orthotopic Breast Cancer Model

Studying Triple Negative Breast Cancer Using Orthotopic Breast Cancer Model (Video) | JoVE 

ऑर्थोटोपिक स्तन कैंसर मॉडल का उपयोग कर ट्रिपल नकारात्मक स्तन कैंसर का अध्ययन

Triple-negative breast cancer (TNBC) is an aggressive breast cancer subtype with limited therapeutic options. When compared to patients with less ...

Rat Mammary Epithelial Cell Transplantation into the Interscapular White Fat Pad

Rat Mammary Epithelial Cell Transplantation into the Interscapular White Fat Pad (Video) | JoVE 

इंटरस्केपुलर व्हाइट फैट पैड में चूहा मैमेरी एपिथेलियल सेल प्रत्यारोपण

As early as the 1970s, researchers have successfully transplanted mammary epithelial cells into the interscapular white fat pad of rats. Grafting mammary ...

Orthotopic Transplantation of Breast Tumors as Preclinical Models for Breast Cancer

Orthotopic Transplantation of Breast Tumors as Preclinical Models for Breast Cancer (Video) | JoVE 

स्तन कैंसर के लिए प्रीक्लिनिकल मॉडल के रूप में स्तन ट्यूमर का आर्थोटोपिक प्रत्यारोपण

Preclinical models that faithfully recapitulate tumor heterogeneity and therapeutic response are critical for translational breast cancer research. ...

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells (Video) | JoVE 

भड़काऊ स्तन कैंसर कोशिकाओं के टेल-वेन इंजेक्शन के माध्यम से मस्तिष्क मेटास्टेसिस मॉडलिंग

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are ...

Mammary Epithelial and Endothelial Cell Spheroids as a Potential Functional In vitro Model for Breast Cancer Research

Mammary Epithelial and Endothelial Cell Spheroids as a Potential Functional In vitro Model for Breast Cancer Research (Video) | JoVE 

स्तन कैंसर अनुसंधान के लिए एक संभावित कार्यात्मक इन विट्रो मॉडल के रूप में मैमेरी एपिथेलियल और एंडोथेलियल सेल स्फेरॉइड

Breast cancer is the leading cause of mortality in women. The growth of breast cancer cells and their subsequent metastasis is a key factor for its ...