Name: high frequency ultrasound for the analysis of fetal and placental development in vivo
Uploaded: 2018-11-08T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo at JoVE.com

Vielen Dank an die Imaging Instrument Company (insbesondere für Magdalena Steiner, Katrin Suppelt und Sandra Meyer) für ihre angenehme und schnelle Unterstützung und alle unsere Fragen bezüglich der Imaging-System und dessen Nutzung unverzüglich und vollständig zu beantworten. Wir sind dankbar, Prof. Hans-Reimer Rodewald und Dr. Thorsten Feyerabend (DKFZ Heidelberg, Deutschland) für die Bereitstellung der Cpa3-Kolonie. Darüber hinaus bedanken wir uns bei Stefanie Langwisch, wer war verantwortlich für die Maus-Kolonien und generiert, die die Bilder in Abbildung 1.
Die Arbeit und das Imaging System wurden durch Zuschüsse von der Deutschen Forschungsgemeinschaft (DFG), A.C.Z. (ZE526/6-1 und AZ526/6-2) finanziert, die Projekte eingebettet in die DFG Priorität Programm 1394 "Mastzellen in Gesundheit und Krankheit."

Alle hier beschriebene Methoden wurden durch genehmigt die "Landesverwaltungsamt Sachsen Anhalt: 42502-2-1296UniMD."
(1) experimentelle Verfahren
<ol><li>6 bis 8 Wochen alten weiblichen MC-defizienten C57BL/6J-Cpa3 PaarenCre /+ (Cpa3Cre /+) Mäuse und MC-ausreichend C57BL/6J-Cpa3+/+ (Kolonie Kontrollen; Cpa3+/+) mit BALB/c Männchen.</li>
	<li>Definieren des Schwangerschaft Tages (gd...

<ol>
	<li>Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraschall+in+der+Geburtshilfe:+Kann+der+F&#246;tus+die+Ultraschallwelle+h&#246;ren+und+die+Hitze+sp&#252;ren?.">Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der F&#246;tus die Ultraschallwelle h&#246;ren und die Hitze sp&#252;ren?.</a> Ultraschall in der Medizin. 33 (3), 215-217 (1980).</li><li>Jones, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echolocation.">Echolocation.</a> Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).</li><li>Simmons, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sonar+receiver+of+the+bat.">The sonar receiver of the bat.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 188, 161-174 (1971).</li><li>Zala, S. M., Reitschmidt, D., Noll, A., Balazs, P., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-dependent+modulation+of+ultrasonic+vocalizations+in+house+mice+(Mus+musculus+musculus).">Sex-dependent modulation of ultrasonic vocalizations in house mice (Mus musculus musculus).</a> Public Library of Science ONE. 12 (12), e0188647 (2017).</li><li>W&#246;hr, M., Seffer, D., Schwarting, R. K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+Socio-Affective+Communication+in+Rats+through+Playback+of+Ultrasonic+Vocalizations.">Studying Socio-Affective Communication in Rats through Playback of Ultrasonic Vocalizations.</a> Current Protocols in Neuroscience. 75, 1-8 (2016).</li><li>Hasiniaina, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+frequency/ultrasonic+communication+in+a+critically+endangered+nocturnal+primate,+Claire's+mouse+lemur+(Microcebus+mamiratra).">High frequency/ultrasonic communication in a critically endangered nocturnal primate, Claire's mouse lemur (Microcebus mamiratra).</a> American Journal of Primatology. , e22866 (2018).</li><li>Yeo, L., Romero, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Color+and+power+Doppler+combined+with+Fetal+Intelligent+Navigation+Echocardiography+(FINE)+to+evaluate+the+fetal+heart.">Color and power Doppler combined with Fetal Intelligent Navigation Echocardiography (FINE) to evaluate the fetal heart.</a> Ultrasound in Obstetrics &amp; Gynecology. 50 (4), 476-491 (2017).</li><li>Teichholz, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiography+in+valvular+heart+disease.">Echocardiography in valvular heart disease.</a> Progress in Cardiovascular Diseases. 17 (4), 283-302 (1975).</li><li>Zechner, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lungensonographie+in+der+Akut-+und+Intensivmedizin.">Lungensonographie in der Akut- und Intensivmedizin.</a> Der Anaesthesist. 61 (7), 608-617 (2012).</li><li>Blank, W., Schuler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonografie+der+Schilddr&#252;se+-+Update+2017.">Sonografie der Schilddr&#252;se - Update 2017.</a> Praxis. 106 (12), 631-640 (2017).</li><li>Hansen, K. L., Nielsen, M. B., Ewertsen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+of+the+Kidney:+A+Pictorial+Review.">Ultrasonography of the Kidney: A Pictorial Review.</a> Diagnostics. 6 (1), (2015).</li><li>Older, R. A., Watson, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+anatomy+of+the+normal+male+reproductive+tract.">Ultrasound anatomy of the normal male reproductive tract.</a> Journal of Clinical Ultrasound. 24 (8), 389-404 (1996).</li><li>Reeves, J. J., Rantanen, N. W., Hauser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transrectal+real-time+ultrasound+scanning+of+the+cow+reproductive+tract.">Transrectal real-time ultrasound scanning of the cow reproductive tract.</a> Theriogenology. 21 (3), 485-494 (1984).</li><li>Sharma, M., Somani, P., Sunkara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+gall+bladder+by+endoscopic+ultrasound.">Imaging of gall bladder by endoscopic ultrasound.</a> World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 10 (1), 10-15 (2018).</li><li>Weskott, H. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraschall+in+der+Diagnostik+maligner+Lymphome.">Ultraschall in der Diagnostik maligner Lymphome.</a> Der Radiologe. 52 (4), 347-359 (2012).</li><li>Shirinifard, A., Thiagarajan, S., Johnson, M. D., Calabrese, C., Sablauer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+Absolute+Blood+Perfusion+in+Mice+Using+Dynamic+Contrast-Enhanced+Ultrasound.">Measuring Absolute Blood Perfusion in Mice Using Dynamic Contrast-Enhanced Ultrasound.</a> Ultrasound in Medicine &amp; Biology. 43 (8), 1628-1638 (2017).</li><li>Quaia, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+tissue+perfusion+by+contrast-enhanced+ultrasound.">Assessment of tissue perfusion by contrast-enhanced ultrasound.</a> European Radiology. 21 (3), 604-615 (2011).</li><li>Saw, S. N., Poh, Y. W., Chia, D., Biswas, A., Zaini Mattar, C. N., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+hemodynamic+wall+shear+stresses+in+human+umbilical+vessels+from+normal+and+intrauterine+growth+restricted+pregnancies.">Characterization of the hemodynamic wall shear stresses in human umbilical vessels from normal and intrauterine growth restricted pregnancies.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. , (2018).</li><li>Kessler, J., Rasmussen, S., Godfrey, K., Hanson, M., Kiserud, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+growth+restriction+is+associated+with+prioritization+of+umbilical+blood+flow+to+the+left+hepatic+lobe+at+the+expense+of+the+right+lobe.">Fetal growth restriction is associated with prioritization of umbilical blood flow to the left hepatic lobe at the expense of the right lobe.</a> Pediatric Research. 66 (1), 113-117 (2009).</li><li>Laurin, J., Lingman, G., Mars&#225;l, K., Persson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+blood+flow+in+pregnancies+complicated+by+intrauterine+growth+retardation.">Fetal blood flow in pregnancies complicated by intrauterine growth retardation.</a> Obstetrics and Gynecology. 69 (6), 895-902 (1987).</li><li>Arduini, D., Rizzo, G., Romanini, C., Mancuso, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+blood+flow+velocity+waveforms+as+predictors+of+growth+retardation.">Fetal blood flow velocity waveforms as predictors of growth retardation.</a> Obstetrics and Gynecology. 70 (1), 7-10 (1987).</li><li>Meyer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chymase-producing+cells+of+the+innate+immune+system+are+required+for+decidual+vascular+remodeling+and+fetal+growth.">Chymase-producing cells of the innate immune system are required for decidual vascular remodeling and fetal growth.</a> Scientific Reports. 7, 45106 (2017).</li><li>Meyer, N., Sch&#252;ler, T., Zenclussen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Ablation+of+Uterine+Natural+Killer+Cells+and+Uterine+Mast+Cells+in+Mice+Leads+to+Poor+Vascularization+and+Abnormal+Doppler+Measurements+That+Compromise+Fetal+Well-being.">Simultaneous Ablation of Uterine Natural Killer Cells and Uterine Mast Cells in Mice Leads to Poor Vascularization and Abnormal Doppler Measurements That Compromise Fetal Well-being.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1913 (2017).</li><li>Evans, D. H., Jensen, J. A., Nielsen, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+color+Doppler+imaging.">Ultrasonic color Doppler imaging.</a> Interface Focus. 1 (4), 490-502 (2011).</li></ol>

Mit unserem Ultraschallsystem haben wir bewiesen fetale Wachstumsretardierung bei MC/NK-defizienten Müttern aus gd10 auf. Darüber hinaus bei gd10 und 12, wir beobachteten reduzierte plazentare Abmessungen und bei gd14 das Fehlen oder die Umkehrung der Ende diastolischer Strömung in die UmAs einige Föten von uMC/uNK-defizienten Mäusen. Dieses Zeichen der schlechten Vaskularisation war verbunden mit einem nennenswerten Widerstand Index der Arterien IUGR angibt. Ergebnisse bestätigen die wichtige Rolle der uMCs und uN...

Ultraschall ist Schallwellen mit Frequenzen oberhalb des hörbaren Bereiches des menschlichen Ohres, größer als etwa 20 kHz1. Tiere wie Fledermäuse, Wales, Delfine2,3, Mäuse4, Ratten5und Maus Lemuren6 alle verwenden Ultraschall zur Orientierung oder Kommunikation. Menschen nutzen des Ultraschalls für verschiedene technische und medizinische Anwendungen. Ein Ultraschallgerät kann die Schallwelle zu erstellen und zu verteilen und repräsentieren das Signal. Wenn Ultraschall auf ein Hindernis stösst, der Klang wird reflektiert, absorbiert oder kann durch sie gehen. Die Anwendung von Ultraschall als ein bildgebendes Verfahren, Sonographie, genannt dient zur Analyse von organischen Geweben in der Human- oder Veterinärmedizin wie das Herz (Echokardiographie)7,8, Lunge9, Schilddrüse10 , Nieren11und urinausscheidenden und reproduktiven Traktate12,13; Erkennung von Gallensteinen14 und Tumoren15; und Bewertung der Durchblutung der Gefäße oder Organe16,17. Ultraschall ist eine Standardmethode in Vorsorgeuntersuchungen während der Schwangerschaft und fetalen Entwicklungsstörungen oder Beeinträchtigungen frühzeitig erkannt werden können. Insbesondere wird das Wachstum des Fötus in regelmäßigen Abständen zu erkennen, eine mögliche IUGR überwacht. Schließlich kann fetalen Durchblutung überwacht werden, da das Wachstum Einschränkungen18,19,20,21hinweisen kann.
Ein großer Vorteil der Ultraschall-Bildgebung im Vergleich zu anderen Methoden wie Röntgen ist der Klang Harmlosigkeit der Gewebe analysiert werden. Diese einfache und schnelle Methode ist nicht invasiv, schmerzlos, und kann eine Anzahl von Zeiten verwendet. Die Anschaffungskosten ein Ultraschallgerät ist teuer; Allerdings sind die Verbrauchsmaterialien benötigt billig. In diesem Manuskript verwendete Ultraschall-System eignet sich für eine Reihe von Tiermodellen (d. h. Mäuse und Fische) während ein Ultraschallgerät für den Menschen eine Frequenz von 3-15 mHz erfordert, eine Frequenz von 15-70 mHz ist erforderlich für Mäuse.
Das vorliegende Manuskript beschreibt ein Protokoll für die Verwendung von B-Mode, doppler Farbmodus und Puls-Wave doppler-Modus. Die Beschreibung beinhaltet die Vorbereitung von Mäusen als auch Leistung, Datenerfassung und Speicherung. Diese Methode wurde erfolgreich angewandte, verschiedene Mausstämme überhaupt Schwangerschafts Tage und kann zur fetalen und plazentaren Entwicklung sowie mütterlichen und fetalen Blutparameter zu untersuchen. Hier werden alle Anwendungen basierend auf unsere Studien mit schwangeren MC/NK-defizienten und Kontrolle Mäuse erklärt.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="758">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb)</td>
			<td style="width:204px;">BioLegend</td>
			<td style="width:151px;">123204</td>
			<td style="width:187px;">Klon TM-&#946;1; 500 &#181;g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vevo 2100 System</td>
			<td>&#160;FujiFilm VisualSonics Inc.</td>
			<td style="width:151px;"></td>
			<td>Transducer&#160;MS550D-0421</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vevo LAB Software</td>
			<td>&#160;FujiFilm VisualSonics Inc.</td>
			<td style="width:151px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>PZN: 6497131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Electrode gel</td>
			<td>Parker</td>
			<td>12_8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical tape</td>
			<td>3M Transpore</td>
			<td>1527-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye cream</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>PZN: 1578675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cotton tipped applicators</td>
			<td>Raucotupf</td>
			<td>11969</td>
			<td>100 pieces</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Depilatory cream</td>
			<td>Reckitt Benckiser</td>
			<td>2077626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Compresses</td>
			<td>Nobamed Paul Danz AG</td>
			<td>856110</td>
			<td>10 x 10 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ultrasound gel</td>
			<td>Gello GmbH</td>
			<td>246000</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high frequency ultrasound for the analysis of fetal and placental development in vivo

Ultraschall-Bildgebung ist eine weit verbreitete Methode zur Erkennung von Organanomalien und Tumoren im menschlichen und tierischen Geweben. Die Methode ist nicht invasiv, harmlos und schmerzlos, und die Anwendung ist einfach, schnell und überall, auch mit mobilen Geräten durchgeführt werden kann. Während der Schwangerschaft ist Ultraschall-Bildgebung standardgemäß zur fetalen Entwicklung aufmerksam verfolgen. Die Technik ist wichtig, intrauterine Wachstumsretardierung (IUGR), eine Komplikation der Schwangerschaft mit kurz- und langfristigen gesundheitlichen Folgen für die Mutter und Fötus zu bewerten. Verständnis des Prozesses der IUGR ist unverzichtbar für die Entwicklung von wirksamerer Therapiestrategien.
Das Ultraschallsystem verwendet in diesem Manuskript ist ein Ultraschallgerät für die Analyse von kleinen Tieren hergestellt und kann in verschiedenen Forschungsbereichen, einschließlich der Schwangerschaft verwendet werden. Hier beschreiben wir die Nutzung des Systems für in Vivo Analyse der Feten von natürlichen killer (NK) Zelle/Mastzellen (MC)-mangelhafte Mütter das Wachstum eingeschränkt Welpen gebären. Das Protokoll beinhaltet die Vorbereitung des Systems, Umgang mit den Mäusen vor und während der Messungen und die Verwendung von den B-Modus, Farb-doppler-Modus und Puls-Wave doppler-Modus. Fetale Größe, plazentare Größe und Blut-Versorgungsmaterial zu den Fötus wurden analysiert. Wir fanden reduzierte Implantation Größen und kleinere Plazenta in NK/MC-defizienten Mäusen von Mid Schwangerschaft ab. Darüber hinaus MC/NK-Mangel war abwesend zugeordnet und umgekehrt Ende diastolischer Strömung in der fetalen Arteria Umbilicalis(UmA) und einen erhöhten Widerstand-Index. Die im Protokoll beschriebenen Methoden können leicht für Verwandte und nicht verwandte Forschungsthemen verwendet werden.

Einzelkomponenten der Ultraschall-System verwendet in dieser Handschrift sind in Abbildung 1dargestellt. Abbildung 2 zeigt Vertreter Ultraschallbilder im B-Modus zu gd5, 8, 10 und 12 (B) und entsprechenden Implantation Flächenmessung Ergebnisse (A), zeigen einen deutliche reduzierte Implantation Bereich erworben Anti-CD122-behandelten Cpa3Cre / + Mäuse aus gd10 ab.
<p class="jove...

Watch this Scientific Journal Video about High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo at JoVE.com

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Hier beschreiben wir die Technik der Hochfrequenz-Ultraschall zur in Vivo Analyse der Feten bei Mäusen. Diese Methode ermöglicht das Follow-up von Föten und die Analyse der plazentaren Parameter sowie mütterlichen und fetalen Durchblutung während der gesamten Schwangerschaft.

Hochfrequenz-Ultraschall für die Analyse der fetalen und plazentaren Entwicklung In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

Diese Methode ist sehr wichtig, um Schlüsselfragen in den Bereichen Onkologie, Neurobiologie, Kardiologie und Fetalentwicklung zu beantworten, und natürlich ist sie auch im Bereich der Reproduktionsforschung wichtig. Die Hauptvorteile dieser Technik sind, dass sie nicht-invasiv, schmerzlos, einfach, schnell ist und die Nachbeobachtung von Föten an relevanten Gestationszeitpunkten während der Schwangerschaft ermöglicht. Schalten Sie mindestens eine halbe Stunde vor dem Bildgebungsverfahren das Ultraschallsystem, die beheizte Plattform und den Gelwärmer ein.Öffnen Sie eine neue Studie oder eine neue Serie in einer vorhandenen Studie im Browser. Geben Sie alle erforderlichen Informationen in das Studieninfofenster ein. Klicken Sie auf OK, und bestätigen Sie, dass das Bildgebungsfenster im B-Modus angezeigt wird.Wenn der Ultraschall bereit ist, bestätigen Sie einen Mangel an Reaktion auf Zehenkneifen in einer anästhesierten Maus, und tragen Salbe auf die Augen des Tieres. Legen Sie einen Tropfen Elektrogel auf jeden der 4 Kupferabschnitte der beheizten Plattform und befestige die Pfoten an den elektrogelbeschichteten Abschnitten der Plattform. Entfernen Sie das Haar aus dem Bauch des Tieres mit Enthaarungscreme und einem Wattestäbchen, waschen Sie die Creme nach einer Minute mit einer wassergetränkten Kompresse von der enthaarten Haut.Dann vorgewärmtes Ultraschallgel auf den exponierten Bereich auftragen. Ein Grund für die geringe Signalintensität kann die geringe Menge an Gel zwischen der Maus und dem Ultraschallstrahl sein. Für eine gute Signalqualität ist unserer Erfahrung nach eine recht große Gelmenge notwendig.Wenn das Tier bereit ist, legen Sie den Messumformer über die Blase für den Einsatz als Bezugspunkt, und bewegen Sie den Heizplattformtisch nach links und rechts des Bauches, um die fetalen Implantationen im 2D-B-Modus zu verfolgen, indem Sie den Messumformer oder die Plattform nach Bedarf anpassen, bis die erste Implantation auf dem Bildschirm in seiner größten Größe sichtbar ist. Wählen Sie Bildbeschriftung aus, und geben Sie einen Namen für die Bilddatei ein. Passen Sie die Position des Bildes an, bis der Blutfluss innerhalb der Arteria umbilicalis der Plazenta sichtbar ist, und speichern Sie einen einzelnen Rahmen oder Cineloop für Plazentamessungen.Für Farb-Doppler-Bildgebung, um die Richtung des Blutflusses zu bestimmen, drücken Sie die Farbe-Taste, und verwenden Sie den Trackball, um das Farbfeld an die entsprechende Position zu verschieben, indem Sie auf Aktualisieren klicken, um die Größe des Feldes bei Bedarf anzupassen. Wenn das Feld die richtige Größe hat, klicken Sie auf Auswählen, und speichern Sie das Bild als experimentell geeignet. Für gepulste Welle Doppler Quantifizierung des Blutflusses durch die Gefäße, lokalisieren Sie den Bereich des Interesses in der Farbe Doppler Erfassungsmodus und klicken Sie auf Pulswelle.Es wird eine gestrichelte Linie angezeigt. Bewegen Sie die Linie auf das Blutgefäß von Interesse und verwenden Sie den Doppler Winkelknopf, um den Winkel der Linie anzupassen, um mit dem Blutfluss auszurichten. Bei gepulsten Wellen-Doppler-Messungen ist es wichtig, den Winkel zwischen der Richtung des Blutflusses und dem Ultraschallstrahl zu beobachten.Zu hohe Winkel oder unterschiedliche Winkel zwischen Tieren im selben Experiment können zu ungenauen Geschwindigkeitsmessungen führen. Klicken Sie dann auf Aktualisieren und speichern Sie cineloop der angezeigten Doppler-Linien im gepulsten Wave-Doppler-Erfassungsfenster. Um die Daten zu überprüfen, klicken Sie auf Studienverwaltung, scrollen Sie zum von Interesse interessierten Miniaturbild, doppelklicken Sie auf Aktualisieren, klicken Sie dann erneut auf Studienverwaltung, und klicken Sie auf Schließen, um das Browserfenster zu schließen, um die Datenerfassung abzuschließen und eine aufgezeichnete Serie zu speichern.Um die Daten zu exportieren, verbinden Sie eine Festplatte, klicken Sie auf Exportieren nach, um eine oder mehrere Datenreihen zu markieren, und wählen Sie den Speicherplatz für das Kopieren der Daten auf die Festplatte aus. Hier werden repräsentative Ultraschallbilder gezeigt, die im B-Modus an den Gestationstagen 5, 8, 10 und 12 aufgenommen wurden, und die entsprechenden Implantationsflächenmessergebnisse, die eine signifikante Reduktion des Implantationsbereichs bei anti-CD122 behandelten Mastzell-defizienten Mäusen ab dem 10. Tag der Schwangerschaft zeigen. Die B-Modus-Bildgebung erleichtert die Abbildung und Messung einzelner Teile einer Implantation.Beispielsweise weisen anti-CD122 behandelte Mastzell-Mangeltiere eine signifikante Verringerung der Plazentafläche, Dicke und des Durchmessers im Vergleich zu unbehandelten Mäusen an den Gestationstagen 10 und 12 auf. Im Gegensatz dazu sind die Plazentafläche und der Durchmesser zwischen den Gruppen am 14. Schwangerschaftstag und der Plazentadicke ähnlich, was eine signifikante Zunahme der anti-CD122 behandelten transgenen Tiere im Vergleich zu unbehandelten Mäusen am 14. Tag der Schwangerschaft darstellt. Die pulsierte Wellen-Doppler-Bildgebung der Arteria uterina zur Messung der systolischen Spitzengeschwindigkeit und der diastolischen Geschwindigkeit sowie der berechnete Widerstandsindex zeigen ähnliche Werte zwischen den behandelten und unbehandelten Tieren.Der Resistenzindex der Arteria umbilicalis bei anti-CD122 behandelten Mastzellmangeltieren ist jedoch im Vergleich zu unbehandelten Mäusen signifikant erhöht. Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig zu bedenken, dass Sie dies jeden zweiten Tag statt jeden Tag tun sollten, um den Stress und das Risiko einer wiederholten Narkotisierung der Tiere zu vermeiden. Im Anschluss an dieses Verfahren können weitere Messungen wie 3D-Messung, Visualisierung und Quantifizierung der Gewebebewegung im Zeitverlauf, Blutdruckmessungen und auch Ultraschall-geführte Injektionen durchgeführt werden.Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Methode den Weg für Ärzte und Forscher im Bereich der Geburtshilfe und vorgeburtlichen Versorgung, weil es möglich ist, die fetale Entwicklung zu verfolgen und mögliche Anomalien während der Schwangerschaft zu erkennen.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Contrast Imaging in Maus Embryonen Verwendung von Hochfrequenz-Ultraschall

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Forschung

Entwicklungsbiologie

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analyse von Zebrafisch-Larven Skelettmuskel Integrität mit Evans Blue Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

A Novel Use of Three-dimensional High-frequency Ultrasonography for Early Pregnancy Characterization in the Mouse

Eine neue Verwendung des dreidimensionalen Hochfrequenz-Sonographie zur frühen Schwangerschaft Charakterisierung in der Maus

High-frequency ultrasonography (HFUS) is a common method to non-invasively monitor the real-time development of the human fetus in utero. The mouse is ...

Zika Virus Infection of Cultured Human Fetal Brain Neural Stem Cells for Immunocytochemical Analysis

Zika-Virus-Infektion der kultivierten menschlichen fetalen Gehirns neurale Stammzellen für Immunocytochemical Analyse

Human fetal brain neural stem cells are a unique non-genetically modified model system to study the impact of various stimuli on human developmental ...

Three-dimensional Rendering and Analysis of Immunolabeled, Clarified Human Placental Villous Vascular Networks

Dreidimensionale Darstellung und Analyse der Immunolabeled, geklärt menschlichen Plazenta Zotten vaskulärer Netzwerke

Nutrient and gas exchange between mother and fetus occurs at the interface of the maternal intervillous blood and the vast villous capillary network that ...

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound (30/45MHZ) System

Fetal Mouse Cardiovascular Imaging Using a High-frequency Ultrasound 30/45MHZ System

Fetale kardiovaskuläre Bildgebung mit einem Hochfrequenz-Ultraschall (30 / 45MHZ) Maus

Congenital heart defects (CHDs) are the most common cause of childhood morbidity and early mortality. Prenatal detection&#160;of the underlying molecular ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computergestützte Analyse der Keimbahn Caenorhabditis Elegans , die Verteilung der Kerne, Proteine und das Zytoskelett zu studieren

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Intravenöse und Intra-Fruchtwasser In der Gebärmutter Transplantation in den Mausmodell

In utero transplantation (IUT) is a unique and versatile mode of therapy that can be used to introduce stem cells, viral vectors, or any other substances ...

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

Hochfrequenz-Ultraschall-Echokardiographie zur Beurteilung der Herzfunktion von Zebrafischen

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

Transuterine Fetal Tracheal Occlusion Model in Mice

Transuterine Fetal Tracheal Okklusion Modell bei Mäusen

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). ...