Name: high frequency ultrasound for the analysis of fetal and placental development in vivo
Uploaded: 2018-11-08T14:30:00
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Molte grazie per l'azienda di Imaging dello strumento (soprattutto a Magdalena Steiner, Katrin Suppelt e Sandra Meyer) per il loro supporto piacevole e veloce e per rispondere a tutte le nostre domande riguardanti il sistema di Imaging e il suo utilizzo subito e completamente. Siamo grati al Prof Hans-Reimer Rodewald e Dr. Thorsten Feyerabend (DKFZ Heidelberg, Germania) per fornire la colonia di Cpa3. Inoltre, ringraziamo Stefanie Langwisch, chi era incaricato delle colonie di mouse e chi ha generato le immagini nella figura 1.
Il lavoro e il sistema di Imaging sono stati finanziati mediante sovvenzioni dalla Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) a A.C.Z (ZE526/6-1 e AZ526/6-2) che erano progetti incorporati nei DFG priorità programma 1394 "mastociti nella salute e nella malattia."

Tutti i metodi descritti qui sono stati approvati dal "Landesverwaltungsamt Sachsen Anhalt: 42502-2-1296UniMD."
1. procedura sperimentale
<ol><li>Compagno di 6 a 8-settimana-vecchio femmina MC-carenti C57BL/6J-Cpa3Cre /+ (Cpa3Cre /+) topi e MC-sufficiente C57BL/6J-Cpa3+/+ (controlli di Colonia; Cpa3+/+) con i maschi BALB/c.</li>
	<li>Definire il giorno di gestazione (gd) 0 dopo la co...

<ol>
	<li>Abramowicz, J. S., Kremkau, F. W., Merz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraschall+in+der+Geburtshilfe:+Kann+der+F&#246;tus+die+Ultraschallwelle+h&#246;ren+und+die+Hitze+sp&#252;ren?.">Ultraschall in der Geburtshilfe: Kann der F&#246;tus die Ultraschallwelle h&#246;ren und die Hitze sp&#252;ren?.</a> Ultraschall in der Medizin. 33 (3), 215-217 (1980).</li><li>Jones, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echolocation.">Echolocation.</a> Current Biology. 15 (13), R484-R488 (2005).</li><li>Simmons, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sonar+receiver+of+the+bat.">The sonar receiver of the bat.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 188, 161-174 (1971).</li><li>Zala, S. M., Reitschmidt, D., Noll, A., Balazs, P., Penn, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-dependent+modulation+of+ultrasonic+vocalizations+in+house+mice+(Mus+musculus+musculus).">Sex-dependent modulation of ultrasonic vocalizations in house mice (Mus musculus musculus).</a> Public Library of Science ONE. 12 (12), e0188647 (2017).</li><li>W&#246;hr, M., Seffer, D., Schwarting, R. K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+Socio-Affective+Communication+in+Rats+through+Playback+of+Ultrasonic+Vocalizations.">Studying Socio-Affective Communication in Rats through Playback of Ultrasonic Vocalizations.</a> Current Protocols in Neuroscience. 75, 1-8 (2016).</li><li>Hasiniaina, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+frequency/ultrasonic+communication+in+a+critically+endangered+nocturnal+primate,+Claire's+mouse+lemur+(Microcebus+mamiratra).">High frequency/ultrasonic communication in a critically endangered nocturnal primate, Claire's mouse lemur (Microcebus mamiratra).</a> American Journal of Primatology. , e22866 (2018).</li><li>Yeo, L., Romero, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Color+and+power+Doppler+combined+with+Fetal+Intelligent+Navigation+Echocardiography+(FINE)+to+evaluate+the+fetal+heart.">Color and power Doppler combined with Fetal Intelligent Navigation Echocardiography (FINE) to evaluate the fetal heart.</a> Ultrasound in Obstetrics &amp; Gynecology. 50 (4), 476-491 (2017).</li><li>Teichholz, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiography+in+valvular+heart+disease.">Echocardiography in valvular heart disease.</a> Progress in Cardiovascular Diseases. 17 (4), 283-302 (1975).</li><li>Zechner, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lungensonographie+in+der+Akut-+und+Intensivmedizin.">Lungensonographie in der Akut- und Intensivmedizin.</a> Der Anaesthesist. 61 (7), 608-617 (2012).</li><li>Blank, W., Schuler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sonografie+der+Schilddr&#252;se+-+Update+2017.">Sonografie der Schilddr&#252;se - Update 2017.</a> Praxis. 106 (12), 631-640 (2017).</li><li>Hansen, K. L., Nielsen, M. B., Ewertsen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonography+of+the+Kidney:+A+Pictorial+Review.">Ultrasonography of the Kidney: A Pictorial Review.</a> Diagnostics. 6 (1), (2015).</li><li>Older, R. A., Watson, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound+anatomy+of+the+normal+male+reproductive+tract.">Ultrasound anatomy of the normal male reproductive tract.</a> Journal of Clinical Ultrasound. 24 (8), 389-404 (1996).</li><li>Reeves, J. J., Rantanen, N. W., Hauser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transrectal+real-time+ultrasound+scanning+of+the+cow+reproductive+tract.">Transrectal real-time ultrasound scanning of the cow reproductive tract.</a> Theriogenology. 21 (3), 485-494 (1984).</li><li>Sharma, M., Somani, P., Sunkara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+gall+bladder+by+endoscopic+ultrasound.">Imaging of gall bladder by endoscopic ultrasound.</a> World Journal of Gastrointestinal Endoscopy. 10 (1), 10-15 (2018).</li><li>Weskott, H. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultraschall+in+der+Diagnostik+maligner+Lymphome.">Ultraschall in der Diagnostik maligner Lymphome.</a> Der Radiologe. 52 (4), 347-359 (2012).</li><li>Shirinifard, A., Thiagarajan, S., Johnson, M. D., Calabrese, C., Sablauer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+Absolute+Blood+Perfusion+in+Mice+Using+Dynamic+Contrast-Enhanced+Ultrasound.">Measuring Absolute Blood Perfusion in Mice Using Dynamic Contrast-Enhanced Ultrasound.</a> Ultrasound in Medicine &amp; Biology. 43 (8), 1628-1638 (2017).</li><li>Quaia, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+tissue+perfusion+by+contrast-enhanced+ultrasound.">Assessment of tissue perfusion by contrast-enhanced ultrasound.</a> European Radiology. 21 (3), 604-615 (2011).</li><li>Saw, S. N., Poh, Y. W., Chia, D., Biswas, A., Zaini Mattar, C. N., Yap, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+hemodynamic+wall+shear+stresses+in+human+umbilical+vessels+from+normal+and+intrauterine+growth+restricted+pregnancies.">Characterization of the hemodynamic wall shear stresses in human umbilical vessels from normal and intrauterine growth restricted pregnancies.</a> Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. , (2018).</li><li>Kessler, J., Rasmussen, S., Godfrey, K., Hanson, M., Kiserud, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+growth+restriction+is+associated+with+prioritization+of+umbilical+blood+flow+to+the+left+hepatic+lobe+at+the+expense+of+the+right+lobe.">Fetal growth restriction is associated with prioritization of umbilical blood flow to the left hepatic lobe at the expense of the right lobe.</a> Pediatric Research. 66 (1), 113-117 (2009).</li><li>Laurin, J., Lingman, G., Mars&#225;l, K., Persson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+blood+flow+in+pregnancies+complicated+by+intrauterine+growth+retardation.">Fetal blood flow in pregnancies complicated by intrauterine growth retardation.</a> Obstetrics and Gynecology. 69 (6), 895-902 (1987).</li><li>Arduini, D., Rizzo, G., Romanini, C., Mancuso, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+blood+flow+velocity+waveforms+as+predictors+of+growth+retardation.">Fetal blood flow velocity waveforms as predictors of growth retardation.</a> Obstetrics and Gynecology. 70 (1), 7-10 (1987).</li><li>Meyer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chymase-producing+cells+of+the+innate+immune+system+are+required+for+decidual+vascular+remodeling+and+fetal+growth.">Chymase-producing cells of the innate immune system are required for decidual vascular remodeling and fetal growth.</a> Scientific Reports. 7, 45106 (2017).</li><li>Meyer, N., Sch&#252;ler, T., Zenclussen, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Ablation+of+Uterine+Natural+Killer+Cells+and+Uterine+Mast+Cells+in+Mice+Leads+to+Poor+Vascularization+and+Abnormal+Doppler+Measurements+That+Compromise+Fetal+Well-being.">Simultaneous Ablation of Uterine Natural Killer Cells and Uterine Mast Cells in Mice Leads to Poor Vascularization and Abnormal Doppler Measurements That Compromise Fetal Well-being.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1913 (2017).</li><li>Evans, D. H., Jensen, J. A., Nielsen, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasonic+color+Doppler+imaging.">Ultrasonic color Doppler imaging.</a> Interface Focus. 1 (4), 490-502 (2011).</li></ol>

Utilizzando il nostro sistema di ultrasuono, abbiamo dimostrato la restrizione della crescita fetale nelle madri MC/NK-carenti da gd10 su. Inoltre, a gd10 e 12, abbiamo osservato ridotte dimensioni placentari e alle gd14 l'assenza o la reversione del flusso diastolico fine in UmAs di alcuni feti dei topi uMC/uNK-carenti. Questo segno di scarsa vascolarizzazione è stato associato con un indice di resistenza significativa delle arterie che indica IUGR. Risultati confermano il ruolo importante di uMCs e uNKs in gravidanza ...

L'ultrasuono è le onde sonore con frequenze di sopra della gamma udibile dell'orecchio umano, superiore a circa 20 kHz1. Animali come i pipistrelli, Galles, delfini2,3,4di topi, ratti5e mouse lemuri6 tutti utilizzare gli ultrasuoni per orientamento o comunicazione. Gli esseri umani prendono vantaggio degli ultrasuoni per diverse applicazioni tecniche e mediche. Un apparecchio a ultrasuoni è in grado di creare l'onda sonora e distribuire e rappresentano il segnale. Se l'ultrasuono incontra un ostacolo, il suono si riflette, assorbito o può passare attraverso di essa. L'applicazione degli ultrasuoni come un metodo di imaging, chiamato l'ecografia, viene utilizzato per l'analisi dei tessuti organici in medicina umana o veterinaria come il cuore (ecocardiografia)7,8, polmone9, ghiandola tiroide10 , reni11e urinario e riproduttivo12,13; rilevamento di calcoli biliari14 e tumori15; e la valutazione di aspersione di vasi sanguigni o organi16,17. Ultrasuono è un metodo standard di cura prenatale durante la gravidanza e disabilità dello sviluppo fetale o i danni possono essere riconosciuti presto. In particolare, la crescita di un feto è strettamente monitorata ad intervalli regolari per riconoscere un possibile IUGR. Infine, il flusso di sangue fetale possa essere monitorato, come questo può sottolineare la crescita restrizioni18,19,20,21.
Un vantaggio importante di formazione immagine di ultrasuono rispetto ad altri metodi come la radiografia è innocuità del suono dei tessuti da analizzare. Questo metodo facile e veloce è non invasiva, indolore e può essere utilizzato un numero di volte. L'esborso iniziale di un apparecchio a ultrasuoni è costoso; Tuttavia, i materiali di consumo necessari sono a buon mercati. Il sistema a ultrasuoni utilizzato in questo manoscritto è adatto per una gamma di modelli animali (cioè, topi e pesce) mentre per gli esseri umani un apparecchio a ultrasuoni richiede una frequenza di 3-15 mHz, una frequenza di 15-70 mHz è richiesta per i topi.
Il presente manoscritto descrive un protocollo per l'utilizzo di B-mode, modo di doppler di colore e modo di doppler di onda di impulso. La descrizione comprende la preparazione dei topi come pure prestazioni, acquisizione dati e archiviazione. Questo metodo è stato ceppi murini applicata con successo per diversi giorni a tutti gestazionale e può essere utilizzato per indagare lo sviluppo fetale e placenta così come i parametri del sangue materno e fetale. Qui, tutte le applicazioni sono spiegate basata sui nostri studi che impiegano incinto topi MC/NK-carenti e controllo.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="758">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">LEAF anti-Maus CD122 (IL-2Rb)</td>
			<td style="width:204px;">BioLegend</td>
			<td style="width:151px;">123204</td>
			<td style="width:187px;">Klon TM-&#946;1; 500 &#181;g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vevo 2100 System</td>
			<td>&#160;FujiFilm VisualSonics Inc.</td>
			<td style="width:151px;"></td>
			<td>Transducer&#160;MS550D-0421</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vevo LAB Software</td>
			<td>&#160;FujiFilm VisualSonics Inc.</td>
			<td style="width:151px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>PZN: 6497131</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Electrode gel</td>
			<td>Parker</td>
			<td>12_8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Surgical tape</td>
			<td>3M Transpore</td>
			<td>1527-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye cream</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>PZN: 1578675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cotton tipped applicators</td>
			<td>Raucotupf</td>
			<td>11969</td>
			<td>100 pieces</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Depilatory cream</td>
			<td>Reckitt Benckiser</td>
			<td>2077626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Compresses</td>
			<td>Nobamed Paul Danz AG</td>
			<td>856110</td>
			<td>10 x 10 cm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ultrasound gel</td>
			<td>Gello GmbH</td>
			<td>246000</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high frequency ultrasound for the analysis of fetal and placental development in vivo

Formazione immagine di ultrasuono è un metodo diffuso usato per rilevare anomalie organo e tumori in tessuti umani e animali. Il metodo è non invasiva, innocua e indolore, e l'applicazione è facile, veloce e può essere fatto ovunque, anche con dispositivi mobili. Durante la gravidanza, l'imaging ad ultrasuoni come standard viene utilizzato per monitorare attentamente lo sviluppo del feto. La tecnica è importante valutare la restrizione della crescita intrauterina (IUGR), una complicazione della gravidanza con breve e lungo termine conseguenze di salute per la madre ed il feto. Comprensione del processo di IUGR è indispensabile per lo sviluppo di strategie terapeutiche efficaci.
Il sistema a ultrasuoni utilizzato in questo manoscritto è un apparecchio a ultrasuoni prodotto per l'analisi di piccoli animali e può essere utilizzato in vari campi di ricerca, compresa la ricerca di gravidanza. Qui descriviamo l'utilizzo del sistema per l'analisi in vivo dei feti da natural killer (NK) delle cellule/delle cellule di albero (MC)-carenti le madri che partoriscono cuccioli crescita-limitata. Il protocollo comprende la preparazione del sistema, manipolazione dei topi prima e durante le misurazioni e l'utilizzo di B-mode, doppler modalità colore e modo di doppler di onda di impulso. Dimensione fetale, placentare e rifornimento di sangue al feto sono stati analizzati. Abbiamo trovato l'impianto ridotte dimensioni e più piccole placente in topi NK/MC-carenti da metà gestazione in poi. Inoltre, MC/NK-carenza è stata associata all'assenza e invertito il flusso diastolico fine il fetale umbilicalis di Arteria(UmA) e un indice di elevata resistenza. I metodi descritti nel protocollo possono essere utilizzati facilmente per argomenti di ricerca correlati e non correlati.

Singoli componenti del sistema ad ultrasuoni utilizzati in questo manoscritto sono mostrati nella Figura 1. La figura 2 Mostra rappresentante immagini ecografiche acquisite in B-mode a gd5, 8, 10 e 12 (B) e misura di zona corrispondente impianto risultati (A), dimostrando una zona significativa riduzione impianto di anti-CD122-trattati Cpa3Cre / + topi da gd10 in poi.
<p class="jov...

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High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Qui descriviamo la tecnica degli ultrasuoni ad alta frequenza per l'analisi in vivo dei feti in topi. Questo metodo consente il follow-up dei feti e l'analisi dei parametri placentari come pure il flusso di sangue materno e fetale durante la gravidanza.

Ultrasuono ad alta frequenza per l'analisi dello sviluppo fetale e placentare In Vivo

Ultrasound imaging is a widespread method used to detect organ anomalies and tumors in human and animal tissues. The method is non-invasive, harmless, and ...

Questo metodo è molto importante per rispondere a domande chiave nei settori dell'oncologia, della neuro-biologia, della cardiologia e dello sviluppo fetale, e naturalmente è anche importante nell'area della ricerca riproduttiva. I principali vantaggi di questa tecnica sono che non è invasiva, indolore, facile, veloce e consente il follow-up dei feti nei punti di tempo gestazionali rilevanti durante la gravidanza. Almeno mezz'ora prima della procedura di imaging, accendere il sistema ad ultrasuoni, la piattaforma riscaldata e lo scalda gel.Aprire un nuovo studio o una nuova serie in uno studio esistente nel browser. Immettere tutte le informazioni richieste nella finestra delle informazioni di studio. Fare clic su OK e verificare che venga visualizzata la finestra di imaging in modalità B.Quando l'ecografia è pronta, confermare la mancanza di risposta al dito del dito in un topo anestetizzato e applicare un unguento agli occhi dell'animale. Posizionare una goccia di elettro gel su ciascuna delle 4 sezioni di rame della piattaforma riscaldata e fissare le zampe alle sezioni rivestite di gel elettrico della piattaforma. Rimuovere i capelli dall'addome dell'animale con crema depilatoria e un batuffolo di cotone, lavando la crema dalla pelle depilata dopo un minuto con un impacco imbevuto d'acqua.Quindi applicare il gel ad ultrasuoni preri riscaldato sull'area esposta. Una delle ragioni della bassa intensità del segnale può essere la bassa quantità di gel posta tra il mouse e il fascio ultrasonico. Nella nostra esperienza, una quantità piuttosto grande di gel è necessaria per una buona qualità del segnale.Quando l'animale è pronto, posizionare il trasduttore sopra la vescica per utilizzarlo come punto di riferimento e spostare il tavolo della piattaforma di riscaldamento ai lati sinistro e destro dell'addome per tracciare gli impianti fetali in modalità B 2D, regolando il trasduttore o la piattaforma se necessario fino a quando il primo impianto non è visibile sullo schermo, alle sue dimensioni più grandi. Selezionare Etichetta immagine e immettere un nome per il file di immagine. Regolare la posizione dell'immagine, fino a quando il flusso sanguigno all'interno dell'arteria ombelicale della placenta è in vista, e conservare un singolo fotogramma o cineloop per misurazioni placentari.Affinché l'imaging Doppler a colori determini la direzione del flusso sanguigno, premere il pulsante Colore e utilizzare la trackball per spostare la casella di colore nella posizione appropriata, facendo clic su Aggiorna per regolare le dimensioni della scatola in base alle esigenze. Quando la casella ha le dimensioni corrette, fare clic su Seleziona e archiviare l'immagine come appropriata in modo sperimentale. Per la quantificazione doppler dell'onda pulsata del flusso sanguigno attraverso i vasi, individuare la regione di interesse nella modalità di acquisizione Doppler del colore e fare clic su Pulse Wave.Apparirà una linea tratteggiata. Spostare la linea sul vaso sanguigno di interesse e utilizzare la manopola dell'angolo Doppler per regolare l'angolo della linea per allinearlo al flusso sanguigno. Per le misurazioni Doppler ad onda pulsata, è importante guardare l'angolo tra la direzione del flusso sanguigno e il fascio ultrasonico.Angoli troppo alti o angoli diversi tra gli animali nello stesso esperimento possono portare a misurazioni imprecise della velocità. Quindi, fate clic su Aggiorna (Update) e memorizzate il cineloop delle linee Doppler visualizzate nella finestra di acquisizione Doppler ad onda pulsata. Per esaminare i dati, fare clic su Gestione studi, scorrere fino all'immagine di anteprima di interesse e fare doppio clic su Aggiorna, quindi di nuovo su Gestione studi e quindi su Chiudi per chiudere la finestra del browser per completare l'acquisizione dei dati e salvare una serie registrata.Per esportare i dati, connettere un disco rigido, fare clic su Esporta in, per contrassegnare una o più serie di dati e selezionare lo spazio di archiviazione per copiare i dati sul disco rigido. Qui vengono mostrate immagini ecografiche rappresentative acquisite in modalità B nei giorni gestazionali 5, 8, 10 e 12 e i corrispondenti risultati di misurazione dell'area di impianto, rivelando una significativa riduzione dell'area di impianto nei topi anti-CD122 trattati carenti di mast cellulari dal giorno gestazionale 10 in poi. L'imaging in modalità B facilita l'imaging e la misurazione di singole parti di un impianto.Ad esempio, gli animali carenti di mast-cell trattati anti-CD122 dimostrano una significativa riduzione dell'area placentare, dello spessore e del diametro rispetto ai topi non trattati nei giorni gestazionali 10 e 12. Al contrario, l'area placentare e il diametro sono simili tra i gruppi al giorno gestazionale 14 e lo spessore placentare, un aumento significativo degli animali transgenici trattati anti-CD122 rispetto ai topi non trattati nel giorno gestazionale 14. L'imaging Doppler ad onda pulsata dell'arteria uterina per la misurazione della velocità sistolica di picco e della velocità diastolica, e l'indice di resistenza calcolato, rivelano valori simili tra gli animali trattati e non trattati.L'indice di resistenza dell'arteria ombelicale negli animali carenti di masto cell trattati anti-CD122, tuttavia, è significativamente aumentato rispetto ai topi non trattati. Durante il tentativo di questa procedura, è importante tenere a mente che dovresti farlo a giorni diversi da ogni giorno, per evitare lo stress e il rischio di narcotizzazione ripetitiva degli animali. Seguendo questa procedura, è possibile eseguire altre misurazioni, come la misurazione 3D, la visualizzazione e la quantificazione del movimento dei tessuti nel tempo, misurazioni della pressione sanguigna e anche iniezioni guidate da ultrasuoni.Dopo il suo sviluppo, questo metodo ha spianato la strada a medici e ricercatori nell'area dell'assistenza ostetrica e prenatale, perché è possibile seguire lo sviluppo fetale e riconoscere possibili anomalie durante la gravidanza.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

High Frequency Ultrasound for the Analysis of Fetal and Placental Development In Vivo

Contrast Imaging in Mouse Embryos Using High-frequency Ultrasound

Contrast Imaging in embrioni di topo Utilizzo ad alta frequenza Ultrasound

Ultrasound contrast-enhanced imaging can convey essential quantitative information regarding tissue vascularity and perfusion and, in targeted ...

Ricerca

Biologia dello sviluppo

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Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Analisi computazionale della linea germinale Caenorhabditis elegans di studiare la distribuzione dei Nuclei, le proteine ed il citoscheletro

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Intravenous and Intra-amniotic In Utero Transplantation in the Murine Model

Endovenosa e Intra-amniotic nell'Utero trapianto nel modello murino

In utero transplantation (IUT) is a unique and versatile mode of therapy that can be used to introduce stem cells, viral vectors, or any other substances ...

High-Frequency Ultrasound Echocardiography to Assess Zebrafish Cardiac Function

Ecocardia ad ultrasuoni ad alta frequenza per valutare la funzione cardiaca del pesce zebra

The zebrafish (Danio rerio) has become a very popular model organism in cardiovascular research, including human cardiac diseases, largely due to its ...

Transuterine Fetal Tracheal Occlusion Model in Mice

Modello di occlusione tracheale fetale transuterina nei topi

Fetal tracheal occlusion (TO), an established treatment modality, promotes fetal lung growth and survival in severe congenital diaphragmatic hernia (CDH). ...