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8.1K Views
•
08:28 min
November 2nd, 2018
DOI :
10.3791/58619-v
Chapters
0:04
Title
0:43
Generate Samples for Imaging
2:13
Set up Microscope for Imaging
3:57
Acquire FRET-FRAP Data
6:53
Results: Vinculin Force-Sensitive Dynamics at the Focal Adhesion
7:52
Conclusion
Transcript
这种方法可以回答机械生物学领域的关键问题,例如力如何在细胞内以及细胞之间及其环境之间传播和感知。这项技术的主要优点是,它允许访问分子量表信息,了解蛋白质如何对活细胞原生环境中的机械力的反应。虽然这种方法已特别应用于研究焦粘附蛋白文库林,它也可以应用于其他机械敏感的蛋白质,如塔林,卡德林或内斯帕林。
此方法的可视化演示至关重要,因为正确的成像设置是困难的,但对于分析的成功是必要的。从所需单元类型中张力传感器构造的稳定表达式开始此过程,如文本协议中详述的。要准备细胞播种的基板,请获
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Summary
在这里, 我们提出了一个协议, 同时使用 förster 共振能量转移的张力传感器来测量光漂白后的蛋白质负荷和荧光恢复, 以测量蛋白质动力学, 从而能够测量对力敏感的测量活细胞内的蛋白质动力学。
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