Name: antimicrobial synergy testing by the inkjet printer-assisted automated checkerboard array and the manual time-kill method
Uploaded: 2019-04-18T12:30:00
Duration: 12 min 3 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Antimicrobial Synergy Testing by the Inkjet Printer-assisted Automated Checkerboard Array and the Manual Time-kill Method at JoVE.com

Thea Бреннан-Krohn было поддержано, Юнис Кеннеди Шрайвер национального института здоровья ребенка и детских инфекционных заболеваний человеческого развития исследований обучения Грант (T32HD055148), Национальный институт аллергии и инфекционных заболеваний (Грант) обучение T32AI007061), Бостон Детская больница управления из факультет Факультет карьеры развития стипендий и Национальный институт аллергии и инфекционных заболеваний карьеры премии в области развития (1K08AI132716). J.E.K. была поддержана национального института аллергии и инфекционных заболеваний национальных институтов здоровья под номером R33 AI119114 премии. Содержание является исключительно ответственности авторов и не обязательно отражают официальную точку зрения национальных институтов здоровья.

<ol>
	<li>Temkin, E., Adler, A., Lerner, A., Carmeli, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbapenem-resistant+Enterobacteriaceae:+Biology,+epidemiology,+and+management.">Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae: Biology, epidemiology, and management.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 1323 (1), 22-42 (2014).</li><li>Spellberg, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+future+of+antibiotics.">The future of antibiotics.</a> Critical Care. 18 (3), (2014).</li><li>Spellberg, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epidemic+of+antibiotic-resistant+infections:+a+call+to+action+for+the+medical+community+from+the+Infectious+Diseases+Society+of+America.">The epidemic of antibiotic-resistant infections: a call to action for the medical community from the Infectious Diseases Society of America.</a> Clinical infectious diseases an official publication of the Infectious Diseases Society of America. 46 (2), 155-164 (2008).</li><li>Elemam, A., Rahimian, J., Doymaz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+evaluation+of+antibiotic+synergy+for+polymyxin+B-resistant+carbapenemase-producing+Klebsiella+pneumoniae.">In vitro evaluation of antibiotic synergy for polymyxin B-resistant carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae.</a> Journal of Clinical Microbiology. 48 (10), 3558-3562 (2010).</li><li>Poirel, L., Kieffer, N., Nordmann, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+evaluation+of+dual+carbapenem+combinations+against+carbapenemase-producing+Enterobacteriaceae.">In vitro evaluation of dual carbapenem combinations against carbapenemase-producing Enterobacteriaceae.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 71 (1), 156-161 (2016).</li><li>Odds, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergy,+antagonism,+and+what+the+chequerboard+puts+between+them.">Synergy, antagonism, and what the chequerboard puts between them.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 52, (2003).</li><li>Zusman, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+and+meta-analysis+of+in+vitro+synergy+of+polymyxins+and+carbapenems.">Systematic review and meta-analysis of in vitro synergy of polymyxins and carbapenems.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 57 (10), 5104-5111 (2013).</li><li>Clock, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+activity+of+doripenem+alone+and+in+multi-agent+combinations+against+extensively+drug-resistant+Acinetobacter+baumannii+and+Klebsiella+pneumoniae.">In vitro activity of doripenem alone and in multi-agent combinations against extensively drug-resistant Acinetobacter baumannii and Klebsiella pneumoniae.</a> Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 76 (3), 343-346 (2013).</li><li>Hirsch, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+antimicrobial+combinations+for+Klebsiella+pneumoniae+carbapenemase-producing+K.+pneumoniae.">Assessment of antimicrobial combinations for Klebsiella pneumoniae carbapenemase-producing K. pneumoniae.</a> Journal of Infectious Diseases. 207 (5), 786-793 (2013).</li><li>T&#228;ngd&#233;n, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+double-+and+triple-antibiotic+combinations+for+VIM-+and+NDM-producing+klebsiella+pneumoniae+by+in+vitro+time-kill+experiments.">Evaluation of double- and triple-antibiotic combinations for VIM- and NDM-producing klebsiella pneumoniae by in vitro time-kill experiments.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 58 (3), 1757-1762 (2014).</li><li>Tascini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+activity+of+colistin+plus+rifampin+against+colistin-resistant+kpc-producing+klebsiella+pneumoniae.">Synergistic activity of colistin plus rifampin against colistin-resistant kpc-producing klebsiella pneumoniae.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 57 (8), 3990-3993 (2013).</li><li>Paul, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+therapy+for+carbapenem-resistant+Gram-negative+bacteria.">Combination therapy for carbapenem-resistant Gram-negative bacteria.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 69 (9), 2305-2309 (2014).</li><li>Rafailidis, P. I., Falagas, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Options+for+treating+carbapenem-resistant+Enterobacteriaceae.">Options for treating carbapenem-resistant Enterobacteriaceae.</a> Current Opinion in Infectious Diseases. 27 (6), 479-483 (2014).</li><li>Smith, K. P., Kirby, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Verification+of+an+automated,+digital+dispensing+platform+for+at-will+broth+microdilution-based+antimicrobial+susceptibility+testing.">Verification of an automated, digital dispensing platform for at-will broth microdilution-based antimicrobial susceptibility testing.</a> Journal of Clinical Microbiology. 54 (9), 2288-2293 (2016).</li><li>Brennan-Krohn, T., Truelson, K., Smith, K. P., Kirby, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+Synergistic+Activity+of+Antimicrobial+Combinations+Against+Carbapenem-Resistant+Enterobacteriaceae+Using+Inkjet+Printer-Based+Technology.">Screening for Synergistic Activity of Antimicrobial Combinations Against Carbapenem-Resistant Enterobacteriaceae Using Inkjet Printer-Based Technology.</a> J Antimicrob Chemother. 72 (10), 2775-2781 (2017).</li><li>Brennan-Krohn, T., Pironti, A., Kirby, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+Activity+of+Colistin-Containing+Combinations+against+Colistin-Resistant+Enterobacteriaceae.">Synergistic Activity of Colistin-Containing Combinations against Colistin-Resistant Enterobacteriaceae.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. , (2018).</li><li>Falagas, M. E., Kasiakou, S. K., Saravolatz, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colistin:+The+Revival+of+Polymyxins+for+the+Management+of+Multidrug-Resistant+Gram-Negative+Bacterial+Infections.">Colistin: The Revival of Polymyxins for the Management of Multidrug-Resistant Gram-Negative Bacterial Infections.</a> Clinical Infectious Diseases. 40 (9), 1333-1341 (2005).</li><li>Nation, R. L., Li, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colistin+in+the+21st+century.">Colistin in the 21st century.</a> Current Opinion in Infectious Diseases. 22 (6), 535-543 (2009).</li><li>Ah, Y. -. M., Kim, A. -. J., Lee, J. -. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colistin+resistance+in+Klebsiella+pneumoniae.">Colistin resistance in Klebsiella pneumoniae.</a> International Journal of Antimicrobial Agents. 44 (1), 8-15 (2014).</li><li>Bratu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carbapenemase-producing+Klebsiella+pneumoniae+in+Brooklyn,+NY:+Molecular+epidemiology+and+in+vitro+activity+of+polymyxin+B+and+other+agents.">Carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae in Brooklyn, NY: Molecular epidemiology and in vitro activity of polymyxin B and other agents.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 56 (1), 128-132 (2005).</li><li>Barth, N., Ribeiro, V. B., Zavasckid, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+activity+of+polymyxin+B+plus+imipenem,+meropenem,+or+tigecycline+against+KPC-2-producing+Enterobacteriaceae+with+high+MICs+for+these+antimicrobials.">In vitro activity of polymyxin B plus imipenem, meropenem, or tigecycline against KPC-2-producing Enterobacteriaceae with high MICs for these antimicrobials.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 59 (6), 3596-3597 (2015).</li><li>MacLowry, J., Jaqua, M., Selepak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detailed+methodology+and+implementation+of+a+semiautomated+serial+dilution+microtechnique+for+antimicrobial+susceptibility+testing.">Detailed methodology and implementation of a semiautomated serial dilution microtechnique for antimicrobial susceptibility testing.</a> Appl Microbiol. 20 (1), 46-53 (1970).</li><li>Brennan-Krohn, T., Smith, K. P., Kirby, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+poisoned+well:+Enhancing+the+predictive+value+of+antimicrobial+susceptibility+testing+in+the+era+of+multidrug+resistance.">The poisoned well: Enhancing the predictive value of antimicrobial susceptibility testing in the era of multidrug resistance.</a> Journal of Clinical Microbiology. 55 (8), 2304-2308 (2017).</li><li>Doern, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=When+does+2+plus+2+equal+5?+A+review+of+antimicrobial+synergy+testing.">When does 2 plus 2 equal 5? A review of antimicrobial synergy testing.</a> Journal of Clinical Microbiology. 52 (12), 4124-4128 (2014).</li><li>CLSI. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing. 28th ed. CLSI supplement M100. , (2018).</li><li>CLSI. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Approved Standard - Tenth Edition. CLSI document M07-A10. , (2015).</li><li>Clinical and Laboratory Standards Institute. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> M07: Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically, 11th Edition. , (2018).</li><li>Clinical and Laboratory Standards Institute. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods for determining bactericidal activity of antimicrobial agents; approved guideline M26-A. 19 (18), 7 (1999).</li><li>Naghili, H., Tajik, H., Mardani, K., Razavi Rouhani, S. M., Ehsani, A., Zare, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+drop+plate+technique+for+bacterial+enumeration+by+parametric+and+nonparametric+tests.">Validation of drop plate technique for bacterial enumeration by parametric and nonparametric tests.</a> Veterinary research forum. 4 (3), 179-183 (2013).</li><li>Chen, C. Y., Nace, G. W., Irwin, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+6x6+drop+plate+method+for+simultaneous+colony+counting+and+MPN+enumeration+of+Campylobacter+jejuni,+Listeria+monocytogenes,+and+Escherichia+coli.">A 6x6 drop plate method for simultaneous colony counting and MPN enumeration of Campylobacter jejuni, Listeria monocytogenes, and Escherichia coli.</a> Journal of Microbiological Methods. 55 (2), 475-479 (2003).</li><li>Queenan, A. M., Foleno, B., Gownley, C., Wira, E., Bush, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Inoculum+and+Activity+in+AmpC-+and+Extended-Spectrum+(ESBL)-Producing+Escherichia+coli+and+Klebsiella+pneumoniae+Clinical+Isolates+Tested+by+Using+NCCLS+ESBL+Methodology.">Effects of Inoculum and Activity in AmpC- and Extended-Spectrum (ESBL)-Producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae Clinical Isolates Tested by Using NCCLS ESBL Methodology.</a> Journal of Clinical Microbiology. 42 (1), 269-275 (2004).</li><li>Smith, K. P., Kirby, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Inoculum+Effect+in+the+Era+of+Multidrug+Resistance:+Minor+Differences+in+Inoculum+Have+Dramatic+Effect+on+Minimal+Inhibitory+Concentration+Determination.">The Inoculum Effect in the Era of Multidrug Resistance: Minor Differences in Inoculum Have Dramatic Effect on Minimal Inhibitory Concentration Determination.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. , (2018).</li><li>Leber, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergism+Testing:+Broth+Microdilution+Checkerboard+and+Broth+Macrodilution+Methods.">Synergism Testing: Broth Microdilution Checkerboard and Broth Macrodilution Methods.</a> Clinical Microbiology Procedures Handbook, Fourth Edition. , (2016).</li><li>Leber, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time-Kill+Assay+for+Determining+Synergy.">Time-Kill Assay for Determining Synergy.</a> Clinical Microbiology Procedures Handbook, Fourth Edition. , (2016).</li><li>Hindler, J. A., Humphries, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colistin+MIC+variability+by+method+for+contemporary+clinical+isolates+of+multidrug-resistant+gram-negative+bacilli.">Colistin MIC variability by method for contemporary clinical isolates of multidrug-resistant gram-negative bacilli.</a> Journal of Clinical Microbiology. 51 (6), 1678-1684 (2013).</li><li>Sutherland, C. A., Nicolau, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=To+add+or+not+to+add+Polysorbate+80:+Impact+on+colistin+MICs+for+clinical+strains+of+Enterobacteriaceae+and+Pseudomonas+aeruginosa+and+quality+controls.">To add or not to add Polysorbate 80: Impact on colistin MICs for clinical strains of Enterobacteriaceae and Pseudomonas aeruginosa and quality controls.</a> Journal of Clinical Microbiology. 52 (10), 3810 (2014).</li><li>Fuchs, P. C., Barry, a. L., Brown, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Susceptibility+testing+quality+control+studies+with+fosfomycin+tromethamine.">Susceptibility testing quality control studies with fosfomycin tromethamine.</a> European journal of clinical microbiology &amp; infectious diseases official publication of the European Society of Clinical Microbiology. 16 (7), 538-540 (1997).</li><li>Leber, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimum+Bactericidal+Concentration+Testing.">Minimum Bactericidal Concentration Testing.</a> Clinical Microbiology Procedures Handbook, Fourth Edition. 5.14.1.11. , (2016).</li><li>Cai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+activity+of+polymyxin+B+in+combination+with+various+antibiotics+against+extensively+drug-resistant+Enterobacter+cloacae+with+decreased+susceptibility+to+polymyxin+B.">In vitro activity of polymyxin B in combination with various antibiotics against extensively drug-resistant Enterobacter cloacae with decreased susceptibility to polymyxin B.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 60 (9), 5238-5246 (2016).</li><li>Bulman, Z. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymyxin+combinations+combat+Escherichia+coli+harboring+mcr-1+and+blaNDM-5:+Preparation+for+a+postantibiotic+Era.">Polymyxin combinations combat Escherichia coli harboring mcr-1 and blaNDM-5: Preparation for a postantibiotic Era.</a> mBio. 8 (4), (2017).</li></ol>

D300 цифровой дозатор и связанные материалы были предоставлены Текан (Morrisville, NC). Текан имел никакой роли в дизайна исследования, сбор/интерпретация данных, подготовка рукописи или решение опубликовать.

Распространение с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) бактериальных патогенов, особенно МЛУ грамотрицательных бактерий как carbapenem устойчивостью Enterobacteriaceae (КРР), оставил клиницисты все более ограниченные возможности для успешного антибактериальные терапия 1, проблема усугубляется медленными темпами Роман антибактериальным препаратом открытие2,3. Антимикробной синергии, в котором два препарата, используемые в сочетании оказывают эффект больше, чем добавка, предлагает возможность спасения существующие антибиотики для использования в лечения МЛУ бактерий, даже когда эти бактерии устойчивы к одной или обеих антибиотики индивидуально. Методы, описанные в настоящем документе предоставляют два взаимодополняющих методов экстракорпорального синергии, тестирование, что, когда используются вместе, позволяют следователям эффективно экран антимикробных комбинаций интереса для доказательства синергизма деятельности (автоматизированная клетчатый метод массива) и затем для дальнейшей оценки Кинетика ингибирования и убийства, продемонстрировал многообещающие комбинации, выявленных на стадии отбора (ручной метод время kill).
Один из наиболее часто используемых методов тестирования в лабораторных условиях синергизма является шахматным массив assay, модификация испытаний минимальная концентрация тормозной (MIC) в котором изолировать ингибиторная активность двух различных антибиотиков против бактериальных тестируются в диапазоне концентрации комбинации4,5. Если два препараты оказывают более чем добавка активность, когда используются вместе, комбинация считается синергетический6. Однако Настройка массива клетчатый вручную включает серию вычислений и разбавления и дозирования шаги, которые уязвимы для человеческой ошибки и трудоемким. Эти ограничения имели эффект ограничения использования синергии, тестирование прежде всего к ретроспективной оценки небольшого числа антибиотиков комбинаций и бактериальных изолятов, и результаты не всегда были последовательными среди исследований7, 8,9,10,11. Кроме того сложность взаимодействия тестирования способствует его отсутствия в лаборатории клинической микробиологии и практически полное отсутствие в пробирке синергии проверочных данных клинических исследований сочетание терапии12, 13.
В целях повышения эффективности и пропускную способность метода массив шахматной доски, мы сделали использовать автоматизированные методики тестирования MIC ранее разработанных в нашей лаборатории, которая использует технологии струйной печати для точно и последовательно отказаться от небольших объемов антибиотик запасов раствора в скважины в микротитровальных пластины14. Платформа устраняет необходимость для сложных вычислений и дозирования несколько шагов. Соответствующее программное обеспечение вычисляет и распределяет соответствующие объемы антибиотиков для создания двумерных клетчатый массива, если пользователь просто вводит диапазон желаемых концентраций и Стоковый раствор концентрации антибиотиков. Мы изначально проверили этот метод к коллекции CRE изолятов15 и впоследствии были сосредоточены на тестирование колистина содержащих комбинаций для деятельности с колистина устойчивостью изолятов16. Колистин является препарат последней инстанции, как правило, зарезервированы для использования в лечении МЛУ грамотрицательных патогенов17,18и колистину сопротивления преобразоватям уже МЛУ бактерий почти Пан стойкие19, что делает их идеальными кандидаты для развития новых терапевтических стратегий с использованием наркотиков, к которым они нечувствительны к индивидуально. Мы обнаружили, что сочетание колистина и антибиотик миноциклин ингибитор синтеза белка очень высокий уровень взаимодействия, даже против штаммов, которые были устойчивы к каждому из этих препаратов индивидуально, предположительно, потому что колистина оказывает subinhibitory permeabilizing эффект на даже колистина резистентных бактерий. Мы выбрали эту комбинацию, чтобы использовать в качестве примера в этой статье. Следует отметить тестирование взаимодействия может также использоваться для оценки для повышения эффективности двух препаратов, которые оба эффективные индивидуально.
Метод массива автоматизированных клетчатый способствует быстрой и высок объём синергии тестирования. Однако метод массива шахматной доски имеют ограничения. Изменение пробирного MIC он предоставляет данные только на ингибирование роста бактерий и не убийство, а он не предоставляет данные по воздействию антибиотиков со временем. Напротив ручной производительность времени убить синергии анализов является более трудоемким, но предоставляет информацию о торможении и убийства за 24 ч время курс20,21. Мы использовали время убить анализа на меньшее количество изолятов для подтверждения нашей шахматной массив результатов и определить, являются ли синергетических комбинаций, которые мы определили также бактерицидное.
Оба клетчатый массив и время убить синергии методы предоставляют ценную информацию о деятельности комбинации препаратов и особенно полезны в оценке потенциальных роман терапевтических вариантов высокой устойчивостью бактериальных патогенов. Методы также имеют внутренние ограничения. Метод разбавления MIC Стандартный microbroth имеет ряд известных ожидаемые ошибки 1 два раза разрежения22, которая увеличивается, когда два препараты тестируются вместе в массиве шахматной доски. Стандартное определение синергии, которая считает, что сочетание синергетический только если препараты действуют вместе в одной четверти их соответствующих ОПГВ6, учитывает это ожидалось изменчивости, но такой изменчивости (который, как полагают, в результате от комбинации биологических и технических колебаний23) неизбежно генерирует неуверенно о надежности результатов синергии. Отсутствие установленных стандартов контроля качества для тестирования взаимодействия также является ограничение тока. Возможно наиболее существенное ограничение всех методов тестирования взаимодействия является отсутствие установленной корреляции между результаты in vitro и клинических исходов при комбинации используются для лечения пациентов24. Проще и более быстрого взаимодействия тестирования методов, например метод массива автоматизированных шахматной доски, описанных здесь, может способствовать интеграции в пробирке синергии, тестирование в рамках клинических испытаний или других оценок исходы для того, чтобы лучше характеризовать отношения между в vitro и in vivo последствия в будущем.
Автоматизированный клетчатый массива метод, который мы представляем здесь предлагает вариант для высокопроизводительного скрининга различных комбинаций и позволяет для быстрой оценки комбинаций необычных, «высокого риска высокая награда» без крупных инвестиций времени и ресурсы. Время убить метод, который мы впоследствии доказать, может обеспечить дополнительную вспомогательную информацию о синергических деятельности комбинации и может помочь, характеризовать его бактерицидная активность и антибактериальные кинетики.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Escherichia coli strain ATCC 25922</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>25922</td>
			<td>QC strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5 mL microcentrifuge tubes</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1605-0000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 L 0.22 &#181;m bottle-top filter</td>
			<td>Thermo Scientific Nalgene</td>
			<td>597-4520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12 mm x 75 mm borosilicate glass round bottom culture tubes</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>14-961-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL conical tubes</td>
			<td>Phenix</td>
			<td>SS-PH15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 x 100 mm or 15 x 150 mm Mueller Hinton agar plates</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>R01620 or R04050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 mm stainless steel closures for 25 x 150 mm glass culture tubes</td>
			<td>Bellco</td>
			<td>2005-02512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 x 150 mm borosilicate glass round bottom culture tubes</td>
			<td>Bellco</td>
			<td>2011-25150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>348-well sterile clear, flat-bottom, untreated microplates with lids</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>781186</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL conical tubes</td>
			<td>Phenix</td>
			<td>SS-PH50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL sterile reagent reservoirs</td>
			<td>Corning</td>
			<td>4870</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 deep well polypropylene microplate with 2 mL wells</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>12-566-612</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well sterile clear, round-bottom, untreated microplates with lids</td>
			<td>Evergreen</td>
			<td>222-8032-01R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cation adjusted Mueller Hinton broth</td>
			<td>BD Diagnostics</td>
			<td>212322</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Colistin sulfate</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>J60915</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D300e Control Software</td>
			<td>HP/Tecan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DensiCHEK Plus McFarland reader</td>
			<td>bioM&#233;rieux</td>
			<td>21250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel spreadsheet software</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra long SHARP 10 &#181;L Precision Barrier Tips</td>
			<td>Denville Scientific</td>
			<td>P1096-FR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HP D300 digital dispenser</td>
			<td>HP/Tecan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HP D300 T8+ cassettes</td>
			<td>HP/Tecan</td>
			<td>30097370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minocycline hydrochloride</td>
			<td>Chem-Impex</td>
			<td>14302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Picus 12-channel 10-300 &#181;L pipette</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>735461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polysorbate 20</td>
			<td>Fisher Bioreagents</td>
			<td>BP-337</td>
			<td>Brand name: Tween 20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Fisher Chemical</td>
			<td>S271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrophotometer</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>Infinite M1000 PRO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xplorer 12-channel 50-1200 &#181;L pipette</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>2231000328</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

antimicrobial synergy testing by the inkjet printer-assisted automated checkerboard array and the manual time-kill method

Как ставки возбудителей с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) продолжают расти, опережает развитие новых противомикробных препаратов, новые подходы к лечению МЛУ бактерий становится необходимостью. Один из таких подходов является комбинированной терапии, в которой два или более антибиотики используются вместе для лечения инфекции, против которого один или оба из препаратов могут оказаться неэффективными одиночку. Когда два препарата, в сочетании, оказывают более чем аддитивный эффект, они считаются синергизма. In vitro исследования синергизма деятельности является важным первым шагом в оценке возможных эффективность комбинации препаратов. Были разработаны два основных в пробирке синергии методы тестирования: массив шахматной доски и убить время исследования. В этой статье, мы представляем метод массива автоматизированных шахматной доски, который использует технологию струйной печати увеличить эффективность и точность этой техники, а также метод Стандартный ручной время убить синергии. Автоматизированный клетчатый массив может служить пробирного высокопроизводительного скрининга, в то время как ручной исследование времени убить предоставляет дополнительные, дополнительные данные о синергетический активности и убийства.
Шахматная доска массив является модификацией стандартной минимальной концентрации тормозной (MIC) тестирование, в котором бактерии инкубировали с антибиотиками в концентрации различных комбинаций и оценены для ингибирования роста после ночи инкубации. Ручной производительность массива шахматной доски требует кропотливого и подверженных ошибкам серии расчетов и разведения. В методе автоматизированных представлены здесь, расчет и дозирования требуемый антибиотик запасов решение, которое томов автоматизированы с помощью струйного принтера технологии. В assay время убить синергии бактерии инкубировали с антибиотиками интерес, как вместе, так и индивидуально и отведать интервалами в течение 24 ч для количественных культуры. Результаты можно определить ли сочетание синергических и является ли это бактерицидными и представить данные о торможении и уничтожение бактерий с течением времени.

Рисунок 1A представляет сетку из шахматной массив взаимодействия эксперимент, в котором миноциклин в концентрации 0-32 мкг/мл был в сочетании с колистина в концентрациях 0-16 мкг/мл и тестируются штамм E. coli 0494 FDA-CDC. Значения представляют собой спектрофотометрические чтений на оптической плотности 600 Нм (600OD). Колодцы с ОД600 значения ниже 0,07 (что соответствует никакого роста путем визуального осмотра) являются затененные красный, а скважин с ОД600 значений 0,07 (что соответствует росту путем визуального осмотра) тенистый зеленый. Для каждого препарата минимальный тормозной концентрация (MIC; жирным шрифтом) является низкая концентрация препарата, который подавляет рост бактерий. Для миноциклин это 32 мкг/мл, и для Колистин, это 8 мкг/мл. Затенение сохраняется на рисунке 1B, но значения в пределах скважин, в которых рост ингибируется заменяются значениями индекса (FICя) дробная ингибирующее концентрации. Они определяются следующим образом: в каждой скважине, индекс дробных ингибирующее концентрации (FIC) каждого препарата рассчитывается путем деления концентрация антибиотика в что хорошо наркотиков микрофон, и FICя рассчитывается путем суммирования двух FICs. Колодцы с ФИКя значение 0,5, который считается отсечки для синергии, указаны с сломанной линии границы, и колодец с ФИКя стоимостном (0.094) является полужирным. Потому что минимальное значение FICя в пределах синергетический, комбинация считается синергетический.
Рисунок 2A и 2B рисунок Показать сетки аналогичны в рисунке 1A и 1B рисунок, но в этом случае комбинация не демонстрируют синергии против испытания изоляции (K. pneumoniae изолировать BIDMC 4), потому что Минимальная FICя на котором рост ингибируется это 1, которая является > 0.5.
Рисунок 3 показывает показания оптической плотности сетки синергии шахматной доски, в которой несколько пропущенные скважин произошло (Enterobacter cloacae комплекс изолировать BIDMC 27). Пропущенные скважин, колодцев, в которых бактериальный рост ингибируется несмотря на присутствие бактерий на соседних скважинах с более высокими концентрациями антибиотика. Это явление, которое знаны, что происходит в стандартный микрофон тестирования также, вероятно, из-за биологической вариативности в характеристики роста бактерий от хорошо хорошо и чувствительность некоторых антибиотиков на небольшие различия в бактериальных посевным материалом23 , 31 , 32. Если более чем один пропущенных хорошо произошло в массиве шахматной доски, мы отброшены результаты и повторил assay.
Рисунок 4 представляет примеры результатов времени убить синергии трех комбинаций тестируются K. pneumoniae изолировать BIDMC 32. Колонии графов указаны на логарифмической шкале на y-оси и время в часах, на x-оси. Разница между начальной посевным материалом в пробирку, содержащую комбинации препарата и концентрация бактерий в трубку на 24 ч иллюстрируется красный бар и номер, а разница между концентрация бактерий на 24 часа между трубки содержащие комбинацию и трубка, содержащая наиболее активных только один агент иллюстрируется Голубой бар и номер. На рисунке 4A показано результаты с колистина и миноциклин; Эта комбинация была синергетический (разница между концентрации бактерий подвергаются комбинации и наиболее активных агента только ≥2 журнала10 кое/мл на 24 ч) и бактерицидным (сокращение от начиная с посевным материалом для концентрации на 24 h ≥3 журнала10 CFU/mL). Рисунок 4B показывает результаты с колистина и клиндамицин, сочетание, которое было синергетический но не бактерицидное. Эта комбинация препятствует росту бактерий, которые ни наркотиков сделал самостоятельно, но не убить их. Рисунок 4 c показывает результаты от комбинации колистина и эритромицин, который был бактерицидной ни синергетический.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58636/58636fig1.jpg"> Рисунок 1: Шахматная доска массив результатов демонстрации синергизма (Миноциклин + колистина тестируются E. coli штамм 0494 FDA-CDC). (A) спектрофотометрические индикации и роста интерпретации массива шахматной доски. Значения в ячейках, оптическая плотность чтений на 600 Нм (600OD). Клетки с ОД600 значения ниже 0,07 (соответствующий рост не путем визуального осмотра) являются затененные красный, в то время как клетки с ОД600 значений 0,07 (соответствует росту путем визуального осмотра), тенистый зеленый. Расчет индекса, (FICя) дробная ингибирующее концентрации (B). Затенение, указывающий роста или рост не был сохранен. Значения для колистина и миноциклин вдоль x- и y-оси, соответственно, теперь представляют дробных ингибирующее концентрации (ФИК), или отношение концентрации препарата в этом столбце или строке (минимальная концентрация тормозной MIC) этого наркотика в одиночку. В каждой ячейке значение FICя, или сумма FICs двух препаратов в этом хорошо. Большой сломанной граничит с линии поле заключает скважин с ФИКя 0.5. Граничит с толстым ячейки указывает колодец с низким FICя в котором рост ингибируется, или минимум FICя. Поскольку минимальная FICя 0,5, комбинация считается синергетический. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58636/58636fig1large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58636/58636fig2.jpg"> Рисунок 2: Результаты массив шахматной комбинации, которые не демонстрируют синергии (Миноциклин + колистина тестируются K. pneumoniae изолировать BIDMC 4). (A) оптическая плотность значения на 600 Нм и роста интерпретации клетчатый массив результатов, как указано на рисунке 1A. (B) дробная ингибирующее концентрации расчет индекса (FICя) как указано на рисунке 1A. Потому что минимальный FICя > 0.5, сочетание не считается синергизма. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58636/58636fig2large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58636/58636fig3.jpg"> Рисунок 3: Шахматная доска массив результатов, которые нечитаемое из-за пропущенных скважин (Миноциклин + колистина тестируются энтеробактер cloacae комплекс изолировать BIDMC 27). Оптическая плотность значения на 600 Нм и роста интерпретации клетчатый массив результатов, как указано на рисунке 1A. Демонстрируются некоторые пропущенные скважин, в которых бактериальный рост ингибируется несмотря на присутствие роста в соседних скважин с более высокими концентрациями антибиотика. Результаты не поддаются интерпретации и эксперимент должен быть повторен. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58636/58636fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/58636/58636fig4.jpg"> Рисунок 4: Время убить синергизма результаты трех комбинаций тестируются K. pneumoniae изолировать BIDMC 32. Колонии графов указаны на логарифмической шкале на y-оси и время в часах, на x-оси. Разница между концентрация бактерий в комбинации в 24 ч и начальный посевным материалом в трубе иллюстрируется красный бар и номер. Если сокращение от начиная с посевным материалом для концентрации на 24 ч ≥3 журнала10 кое/мл, комбинация считается бактерицидное. Разница между концентрация бактерий на 24 часа между трубка, содержащая сочетание и трубка, содержащая наиболее активных только один агент иллюстрируется Голубой бар и номер; Если есть ≥2 журнала10 кое/мл сокращения, комбинация считается синергетический. (A) колистина (КНТ) + миноциклин (мин), сочетание, синергетический и бактерицидным. (B) колистина + Клиндамицин (CLI), сочетание, синергетический, но не бактерицидное. (C) колистина + Эритромицин (ERY), сочетание, что бактерицидной ни синергетический. Эти результаты были первоначально опубликованы в рамках исследования синергизма деятельности с колистина комбинации с колистина устойчивостью Enterobacteriaceae, в котором мы показали, что колистина был синергетический с рядом антибиотики, которые активны в отдельности только (например, клиндамицин) или главным образом (например, эритромицин) против грамположительных бактерий16. (Обратите внимание, что эритромицин синергетический, шахматная доска массив против штамма показано, но не по времени убить, поэтому он был выбран здесь как пример сочетании.) Мы предположили, что Колистин, который известен действовать permeabilization грамотрицательных наружной мембраны, оказывает sub-inhibitory permeabilizing эффект на Колистин устойчивых грамотрицательных бактерий, позволяя запись таких наркотиков, как Клиндамицин, обычно нельзя ввести грамотрицательные клетки. Панель (A) этот показатель был изменен с Бреннан-Krohn, Pironti и Кирби 201816, copyright © Американское общество микробиологии, антимикробным агентам и химиотерапии, 62(10), 2018, pii: e00873-18, doi: 10.1128/AAC.00873-18. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/58636/58636fig4large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Antimicrobial Synergy Testing by the Inkjet Printer-assisted Automated Checkerboard Array and the Manual Time-kill Method at JoVE.com

Antimicrobial Synergy Testing by the Inkjet Printer-assisted Automated Checkerboard Array and the Manual Time-kill Method

Тестирования антимикробной взаимодействия используется для оценки эффекта два или больше антибиотиков, используемых в комбинации и обычно выполняется одним из двух способов: Шахматная доска массив или время убить assay. Здесь мы представляем автоматизированной, струйный принтер помощь клетчатый массив синергии технику и классические время убить синергизма исследования.

Антимикробной Синергия испытаний струйный принтер с помощью автоматизированных клетчатый массив и ручной метод время kill

As rates of multidrug-resistant (MDR) pathogens continue to rise, outpacing the development of new antimicrobials, novel approaches to treatment of MDR ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Antimicrobial Susceptibility Testing of Mycobacterium Tuberculosis Complex for First and Second Line Drugs by Broth Dilution in a Microtiter Plate Format

Чувствительности к антимикробным препаратам комплексного туберкулеза Mycobacterium для первого и второго ряда путем разведения в бульоне Формат планшет

The rapid detection of antimicrobial resistance is important in the effort to control the increase in resistant Mycobacterium 
tuberculosis (Mtb). ...

One-day Workflow Scheme for Bacterial Pathogen Detection and Antimicrobial Resistance Testing from Blood Cultures

Однодневный рабочий процесс Схема бактериальных патогенов обнаружения и антимикробной сопротивления из крови культур

Bloodstream infections are associated with high mortality rates because of the probable manifestation of sepsis, severe sepsis and septic shock1. ...

Assessing Hepatic Metabolic Changes During Progressive Colonization of Germ-free Mouse by 1H NMR Spectroscopy

Assessing Hepatic Metabolic Changes During Progressive Colonization of Germ-free Mouse by 1H NMR Spectroscopy

Оценка изменения Печеночная Метаболический Во Прогрессивная Колонизация зародыш без мыши по 1 Н-ЯМР-спектроскопии

It is well known that gut bacteria contribute significantly to the host homeostasis, providing a range of benefits such as immune protection and vitamin ...

Multiplex PCR Assay for Typing of Staphylococcal Cassette Chromosome Mec Types I to V in Methicillin-resistant Staphylococcus aureus

Multiplex PCR Assay for Typing of Staphylococcal Cassette Chromosome Mec Types I to V in Methicillin-resistant Staphylococcus aureus

??????????? ??? ??? ??????????? ??????????????? ??????? ????????? ??? ????? I ?? V ? ??????????-??????????<em&gt; ?????????? ???????????</em

Staphylococcal Cassette Chromosome mec (SCCmec) typing  is a very important molecular tool for understanding the epidemiology and  clonal strain ...

Analysis of the Epithelial Damage Produced by Entamoeba histolytica Infection

Analysis of the Epithelial Damage Produced by Entamoeba histolytica Infection

Анализ ущерба эпителиальных Продюсеры<em&gt; Entamoeba гистолитика</em&gt; Инфекция

Entamoeba histolytica is the causative agent of human amoebiasis, a major cause of diarrhea and hepatic abscess in tropical countries. Infection is ...

High Throughput, Real-time, Dual-readout Testing of Intracellular Antimicrobial Activity and Eukaryotic Cell Cytotoxicity

Высокая пропускная способность, в режиме реального времени, двойного считывания Тестирование внутриклеточного антимикробной активности и эукариотической клетки цитотоксичность

Traditional measures of intracellular antimicrobial activity and eukaryotic cell cytotoxicity rely on endpoint assays. Such endpoint assays require ...

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

The Ex Vivo Colon Organ Culture and Its Use in Antimicrobial Host Defense Studies

<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Colon органной культуры и ее использование в Антимикробная хост оборонных исследований

The intestine displays an architecture of repetitive crypt structures consisting of different types of epithelial cells, lamina propia containing immune ...

Isolation, Characterization, and Purification of Macrophages from Tissues Affected by Obesity-related Inflammation

Изоляция, характеристика и очистки макрофагов из пострадавших от связанных с ожирением воспаление тканей

Obesity promotes a chronic inflammatory state that is largely mediated by tissue-resident macrophages as well as monocyte-derived macrophages. ...

Printed Glycan Array: A Sensitive Technique for the Analysis of the Repertoire of Circulating Anti-carbohydrate Antibodies in Small Animals

Печатные Glycan массив: Чувствительной технологией для анализа репертуар циркулирующих антител анти углеводов в мелких животных

The repertoire of circulating anti-carbohydrate antibodies of a given individual is often associated with its immunological status. Not only the ...

Automated Behavioral Analysis of Large C. elegans Populations Using a Wide Field-of-view Tracking Platform

Automated Behavioral Analysis of Large C. elegans Populations Using a Wide Field-of-view Tracking Platform

Автоматизированная поведенческого анализа больших C. elegans населения с помощью широкого поля зрения отслеживания платформа

Caenorhabditis elegans is a well-established animal model in biomedical research, widely employed in functional genomics and ageing studies. To assess the ...