Name: platelet-based detection of nitric oxide in blood by measuring vasp phosphorylation
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
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この作品は、Dr アラン N. シェクターに NIH 学内助成金によって賄われていた。

注:血液採取 NIH 血液銀行 (IRB 承認プロトコル: 99 CC 0168)。
1. 血液試料調製方法
注:血小板の活性化を避けるためには、ゆっくりの血を引く、数回チューブを反転でクエン酸と軽く混ぜます。
<ol><li>
多血小板血漿 (PRP)
	<ol>
<li>20 G またはより大きい径の針を使用して血液の 30-50 mL を描画し、管内 ...

<ol>
	<li>Huang, K. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+reaction+between+nitrite+and+deoxyhemoglobin.+Reassessment+of+reaction+kinetics+and+stoichiometry.">The reaction between nitrite and deoxyhemoglobin. Reassessment of reaction kinetics and stoichiometry.</a> Journal of Biological Chemistry. 280 (35), 31126-31131 (2005).</li><li>Cosby, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitrite+reduction+to+nitric+oxide+by+deoxyhemoglobin+vasodilates+the+human+circulation.">Nitrite reduction to nitric oxide by deoxyhemoglobin vasodilates the human circulation.</a> Nature Medicine. 9 (12), 1498-1505 (2003).</li><li>Mo, E., Amin, H., Bianco, I. H., Garthwaite, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+a+cellular+nitric+oxide/cGMP/phosphodiesterase-5+pathway.">Kinetics of a cellular nitric oxide/cGMP/phosphodiesterase-5 pathway.</a> Journal of Biological Chemistry. 279 (5), 26149-26158 (2004).</li><li>Park, J. W., Piknova, B., Nghiem, K., Lozier, J. N., Schechter, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+effect+of+nitrite+on+coagulation+processes+demonstrated+by+thromboelastography.">Inhibitory effect of nitrite on coagulation processes demonstrated by thromboelastography.</a> Nitric oxide. 40, 45-51 (2014).</li><li>Wajih, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+red+blood+cell+S-nitrosation+in+nitrite+bioactivation+and+its+modulation+by+leucine+and+glycose.">The role of red blood cell S-nitrosation in nitrite bioactivation and its modulation by leucine and glycose.</a> Redox Biology. 8, 415-421 (2016).</li><li>Akrawinthawong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+flow+cytometric+analysis+of+the+inhibition+of+platelet+reactivity+due+to+nitrite+reduction+by+deoxygenated+erythrocytes.">A flow cytometric analysis of the inhibition of platelet reactivity due to nitrite reduction by deoxygenated erythrocytes.</a> PLoS One. 9 (3), e92435 (2014).</li><li>Friebe, A., Koesling, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+nitric+oxide-sensitive+guanylyl+cyclase.">Regulation of nitric oxide-sensitive guanylyl cyclase.</a> Circulation Research. 93 (2), 96-105 (2003).</li><li>Srihirun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+inhibition+by+nitrite+is+dependent+on+erythrocytes+and+deoxygenation.">Platelet inhibition by nitrite is dependent on erythrocytes and deoxygenation.</a> PLoS One. 7 (1), e30380 (2012).</li><li>Smolenski, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+and+regulation+of+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+serine+239+phosphorylation+in+vitro+and+in+intact+cells+using+a+phosphospecific+monoclonal+antibody.">Analysis and regulation of vasodilator-stimulated phosphoprotein serine 239 phosphorylation in vitro and in intact cells using a phosphospecific monoclonal antibody.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (32), 20029-20035 (1998).</li><li>Burkhart, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+first+comprehensive+and+quantitative+analysis+of+human+platelet+protein+composition+allows+the+comparative+analysis+of+structural+and+functional+pathways.">The first comprehensive and quantitative analysis of human platelet protein composition allows the comparative analysis of structural and functional pathways.</a> Blood. 120 (15), e73-e82 (2012).</li><li>Parakaw, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+inhibition+and+increased+phosphorylated+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+following+sodium+nitrite+inhalation.">Platelet inhibition and increased phosphorylated vasodilator-stimulated phosphoprotein following sodium nitrite inhalation.</a> Nitric oxide. 66, 10-16 (2017).</li><li>Srihirun, S., Piknova, B., Sibmooh, N., Schechter, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorylated+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+(P-VASPSer239)+in+platelets+is+increased+by+nitrite+and+partially+deoxygenated+erythrocytes.">Phosphorylated vasodilator-stimulated phosphoprotein (P-VASPSer239) in platelets is increased by nitrite and partially deoxygenated erythrocytes.</a> PLoS One. 13 (3), e0193747 (2018).</li><li>Mal Cortese-Krott, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+soluble+guanylate+cyclase+in+RBCs:+preserved+activity+in+patients+with+coronary+artery+disease.">Identification of a soluble guanylate cyclase in RBCs: preserved activity in patients with coronary artery disease.</a> Redox Biology. 14, 328-337 (2018).</li><li>Abel, K., Mieskes, G., Walter, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dephosphorylation+of+the+focal+adhesion+protein+VASP+in+vitro+and+in+intact+human+platelets.">Dephosphorylation of the focal adhesion protein VASP in vitro and in intact human platelets.</a> FEBS letter. 370 (3), 184-188 (1995).</li></ol>

血小板は、簡単にアクティブ化されるので穏やかな血小板を含む処理のサンプルが必要です。高速ピペッティングおよび活発な動揺は避けるべきであります。プロスタサイクリン (PGI2) などの抗血小板薬は血小板活性化; を防ぐために使用できます。ただし、血小板内のいくつかのシグナル伝達経路に影響可能性があります。血小板ペレットの準備、我々 は血小板の懸濁液に ACD を追?...

血小板は、血液凝固に不可欠な巨核球から派生した小円盤状細胞の破片です。凝固のカスケードは、血管壁の損傷後にリリース (コラーゲンまたは ADP) など様々 な生理活性物質によって開始されます。一酸化窒素 (NO) によるさまざまなエフェクターの中では、血液の凝固作用を変更できます。いいえ、自然哺乳類細胞で産生されるは、最も汎用的な生体信号の一つです。それは、強力な血管拡張、神経伝達物質、免疫の変調器は、その多くの機能のいくつかの名前として機能します。、血流のないまた血小板凝集を抑制することによって血液凝固の程度を調節するのに役立ちます。血流における NO のほとんどの源の 1 つは亜硝酸、NO の前駆体として示されている無機イオン赤い血球 (赤血球) と反応して、亜硝酸は NO に減り、deoxyHb 酸化されてメトヘモグロビン (metHb)1。赤血球からリリース NO は血管作動性と介する2が発生します。この亜硝酸還元経路一緒に行動し、低酸素状態で内皮の一酸化窒素合成酵素によって古典的な生成パスなしを補完、代替をない生成経路です。
血小板自体に亜硝酸を減らすことができないが、その存在に非常に敏感であります。そのまま血小板でない、ナノモル範囲増加する cGMP (EC50 = 10 nM) と VASP のリン酸化 (EC50 = 0.5 nM)3。したがって、血小板は赤血球と血にないリリースによる亜硝酸還元の優秀なセンサーとして役立つかもしれない。血小板活性化 - aggregometry、トロンボエラストグラフィー (TEG) などの程度を直接測定することができますいくつかの方法があります4,5。ただし、これらのメソッドは高価な専門的な計測と材料のかなり大量に必要です。それはまたイベントを監視することが可能、下流の後から解放される赤血球、血小板の表面タンパク質発現-6P-セレクチン ・ タンパクなどの変更を使用しています。いいえ血小板7で cGMP の量を増やすことも知られています。以前は、cGMP を使用して脱酸素化赤血球8で亜硝酸還元後血液中にリリースを監視にありません。これは、証明には非常に敏感な方法;ただし、cGMP は短寿命分子、その検出は、広範な労力を伴います。別の可能性、提示のプロトコルで説明されている血管拡張刺激リン (VASP) のリン酸化を使用して-血液中の NO の存在を検出するタンパク質。SGC/-cgmp 系9までなしとの相互作用によってリン酸化蛋白質キナーゼ G 活性化の基板です。非常に低いなしで発生するリン酸化 VASP 検出濃度、血小板の血液でない存在の非常に敏感な検出器を作ることができます。VASP は血小板で高発現してが、他の血液細胞のない血小板10事件に従う選択可能します。
このプロトコルの主な目的は、VASP リン酸化11,12を監視することによって血小板との相互作用を使用して全血における NO 放出を検出するための方法について詳細に説明することです。この方法により早期に低濃度 - 理論的に議定書はほとんどの研究室で達成可能な標準的な西部のしみの技術の使用のための cGMP 定量より敏感、ナノモル範囲で設定。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tri-sodium citrate</td>
			<td>Supply by NIH blood bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Supply by NIH blood bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7528-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl; sodium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S-7653 1kg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4; sodium phosphate monobasic, monohydrate</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>7892-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl; potassium chloride</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>6858</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3; sodium bicarbonate</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>7412-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES; N-[2-Hydroxyethyl]piperazine-N&#39;-[-ethanesulfonic acid]</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3375-500g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2 (1 M); magnesium chloride</td>
			<td>Quality Biology</td>
			<td>351-033-721</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2; calcium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5080-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nalgene Narrow-mouth HDPE Economy bottles</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>2089-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red septum stopper NO.29</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>FB57877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO2-; sodium nitrite</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2252-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIZMA Base; Tris[hydroxymethyl]aminomethane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8524-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40; 4-Nonylphenyl-polyethylene glycol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>74385-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease inhibitor cocktail set III</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>539134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phospho-VASP (Ser239) antibody</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>3114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VASP antibody</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>3112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAPDH (14C10) Rabbit mAb</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>2118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M-6250-10ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td>Jackson Immuno Research Laboratories</td>
			<td>111-035-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clarity Western ECL Substrate</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>1705060-200ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO-oximeter (ABL 90 flex)</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

platelet-based detection of nitric oxide in blood by measuring vasp phosphorylation

血小板は、血液成分の適切な血凝固の責任です。その機能は様々 な経路によって厳しく規制されています。最も強力な血管作動物質、一酸化窒素 (NO) の 1 つは血小板凝集の強力な阻害剤としても機能できます。直接血液の検出はミリ秒の範囲に半減期を制限細胞遊離ヘモグロビンとの高い反応性のために非常に挑戦しません。現在、介入は推定のみ後の変更に基づいて計測された変化亜硝酸、硝酸態窒素 (硝酸亜硝酸イオン NO 代謝経路のメンバー)。ただし正確には、これらの測定値が変更なし、自然に高いベースライン亜硝酸によるヴィザヴィ実際を解釈し、硝酸塩のレベルが桁違いない自身の予想の変更よりも高いはむしろ難しい。したがって、1 つは NO を直接検出する直接、簡単な方法の開発は、長期延滞です。このプロトコルは、血でないセンサー、高感度として血小板の潜在的な使用をアドレスします。発電機なしとして初期多血小板血漿 (PRP) と洗浄血小板製剤や亜硝酸塩と脱酸素化赤血球の使用をについて説明します。VASP の 239 (P VASPSer239) セリンのリン酸化は号の存在を検出するために使用します。血小板の VASP タンパク質を高度に発現がない場合、それは急速にリン酸化があるという事実は、この経路を使用して血のない存在を直接検出するユニークな機会に します。

静脈血液サンプル pO2値 50-80 mmHg の間であります。ヘリウムによる脱酸素は、pO2 25 mmHg 増加脱酸素の時間よりも若干減少 pO210 分以内に急速に減る。ただし、脱酸素の増加時間はまた、細胞遊離ヘモグロビン (コ ・ オキシメータ、視覚的にプラズマのますます赤い着色として図 2に見られるによって決まります) の大幅上昇...

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Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation

ここでは、血小板の血液で機密性の高い一酸化窒素センサーとしての潜在的な使用に対処するためのプロトコルを提案する.一酸化窒素の発電機としての初期血小板の調製及び亜硝酸と脱酸素化赤血球の使用をについて説明します。

VASP のリン酸化を測定することによって血液中の一酸化窒素の血小板ベースの検出

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent ...

このプロトコルは、血液中の生体内と生体内の両方で高感度一酸化窒素センサーとしての血小板の潜在的な使用に対処する。酸化血小板一酸化窒素におけるリン酸化血管拡張体刺激性ホスホ蛋白質またはP-VASPセリン239の増加は、ナノモル系統における一酸化窒素の存在を検出する能力を含むいくつかの利点を有する。健康なドナーから30〜50ミリリットルの全血を採取してから2時間以内に、遠心分離のために適切な数の15ミリリットル円錐形管に血液の5ミリリットルのアリコートを加える。プラスチック製のトランスファーピペットを使用して、上清の上部から血小板が豊富なプラズマを慎重に収集します。2番目の遠心分離を有するプラズマリッチな血小板をペレットにし、5ミリリットルのCGSバッファーでペレットを静かに洗浄する。400gで遠心分離機を室温で10分間行います。遠心分離の終わりに、改変されたタイロードバッファーの3ミリリットルにペレットを再懸濁する。血球計を使用してカウントし、血小板懸濁液の密度を新鮮なタイロードバッファーで1ミリリットル当たり8番目の細胞の3倍に調整します。その後、血小板の懸濁液を摂氏37度で1時間インキュベートします。一方、遠心分離によって全血サンプルのプレートフリー血漿層から赤血球を採取し、続いて5ミリリットルのPBSで4回の洗浄を洗浄する。最後の洗浄後、上清を捨て、ゴムストッパーで閉じたポリプロピレンボトルの適切な実験ヘマトクリットで、血漿が豊富な血小板の1ミリリットルと赤血球を混合します。ヘリウムガスタンクに接続された針を各セプタに挿入し、26個のゲージ針を挿入してガス出口を作ります。その後、室温でボトルをゆっくりと旋回し、酸素計を使用して脱酸素プロセスの監視のための部分的な酸素圧を測定します。酸素減少率は、ヘリウム流量および攪拌速度に依存する。したがって、実験を開始する前に酸素化の時間を最適化する必要があります。赤血球亜硝酸還元のために、10マイクロモルの最終濃度が達成されるように、中隔を通して亜硝酸塩をPRPおよびRBCの脱酸素サンプルに注入するためにマイクロシリンジを使用する。37°Cで少なくとも10分間サンプルをインキュベートし、各サンプルの1ミリリットルをマイクロ遠心チューブに移して遠心分離します。上清の上部から300マイクロリットルの血小板懸濁液を新しいマイクロ遠心分離チューブに移し、1~9%の割合で各チューブにクエン酸デキストロース酸を加えます。血小板を再び遠心分離し、各チューブにプロテアーゼ阻害剤カクテル3を含む氷冷ライシス緩衝液の80マイクロリットルでペレットを再懸濁する。次に、各サンプルから15マイクログラムのタンパク質を2つの別々の10%SDS-PAGEゲルにロードします。ゲルを120ボルトで1.3時間実行します。実行の終了時に、ゲルを個々の亜硝セルロース膜に移し、5%ノンファットドライミルクの適切な体積で非特異的結合を遮断する。適切な一次抗体を摂氏4度で一晩インキュベートし、その後室温で適切な二次型の大根ペルオキシダーゼ抗体を標識します。次に、膜をイメージャーで露出させ、適切な画像解析プログラムでバンド密度を定量化します。健康な静脈血球サンプルは水銀の50〜80ミリメートルの間の部分的な酸素圧力値を有する。ヘリウムによる脱oxgenationは、酸素の分圧を10分以内に25ミリメートルの水銀に急速に減少させる。さらに、脱酸素時間の増加により、分酸素圧の減少を達成できる。脱酸素の増加は、ますます赤い色の血漿によって示されるように、血化のレベルの増加につながります.これは脱酸素作用であり、ヘリウムなしで撹拌されたサンプル中のヘモ分解の欠如によって示されるようにそれ自体を攪拌することによって引き起こされない。血管拡張刺激性ホスホタンパク質またはVASPおよび血小板中のリン酸化VASP発現レベルは、いずれもウェスタンブロットによって検出された脱酸素サンプル中のヘマトクリットの増加に伴って減少した。短命の一酸化窒素ドナーによる治療は、治療後10秒以内に血小板におけるリン酸化血管拡張剤刺激リンフォ蛋白発現を増加させる。さらに、リン酸化VASPまたはP-VASPのレベルは、既存のP-VASPレベルに影響を与えることなく血小板からRBCを分離するのに十分な時間があることを示す血小板が豊富な血漿を用いたNOドナーのインキュベーション後10分まで安定したままでした。亜硝酸塩はまた、脱酸素性RBCsの存在下で血小板のP-VASPレベルを増加させる。ここでの総VASPに対するP-VASPの比率は、ヘマトクリットのレベルに依存する。VASPは血小板で高発現し、一酸化窒素の存在下で急速にリン酸化される。従って、このプロトコルは、種々の生理的刺激による一酸化窒素の誘導を研究するための方法を提供する。この方法により、生体内で亜硝酸を吸入することにより、一酸化窒素刺激のマーカーとして血小板中のP-VASPの増加を利用しました。生物学的標本で血小板を使用して作業することは、常に適切な個人保護装置を使用して行われるべきであることを忘れないでください。

Research

JoVE Journal

Medicine

Analytical Techniques for Assaying Nitric Oxide Bioactivity

一酸化窒素の生物活性をアッセイするための分析手法

Nitric oxide (NO) is a diatomic free radical that is extremely short lived in biological systems (less than 1 second in circulating blood)1. NO may be ...

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定量的リアルタイムPCR（定量PCR）による前立腺腫瘍におけるマイクロRNAの検出

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In  molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI)  are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. ...

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高塩ダイエットとルイスラットにおける慢性腎臓病を誘発するために一酸化窒素合成酵素阻害と組み合わせた5/6thの腎摘出

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

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リン-31磁気共鳴分光法：測定するためのツール<em&gt;インビボ</emヒト骨格筋における&gt;ミトコンドリア酸化的リン酸化能力

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

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In VitroとIn Vivo検出、ひと細胞、線虫、マウス Mitophagy の

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

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血小板輸血で微粒子のスクリーニング法のルーチン

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

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Endotoxin Activity Assay for the Detection of Whole Blood Endotoxemia in Critically Ill Patients

重症患者における全血エンドトキシア血症の検出に関するエンドトキシン活性アッセイ

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A Novel Inhalation Mask System to Deliver High Concentrations of Nitric Oxide Gas in Spontaneously Breathing Subjects

自然呼吸対象における高濃度の一酸化窒素ガスを送達する新規吸入マスクシステム

Nitric Oxide (NO) is administered as gas for inhalation to induce selective pulmonary vasodilation. It is a safe therapy, with few potential risks even if ...