Name: platelet-based detection of nitric oxide in blood by measuring vasp phosphorylation
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation at JoVE.com

Dette arbeidet ble finansiert av NIH intramural tilskudd til Dr. Alan N. Schechter.

Merk: Blodprøver ble innhentet fra NIH blod bank (IRB godkjent protokollen: 99-CC-0168).
1. blod prøve forberedelse
Merk: For å unngå Platederivert aktivisering, trekke blod sakte og bland forsiktig med citrate ved å snu røret flere ganger.
<ol><li>
Blodplater-rich plasma (PRP) forberedelse
	<ol>
<li>Tegne 30-50 mL blod med en 20 G eller større diameter nål og Legg i et rør som in...

<ol>
	<li>Huang, K. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+reaction+between+nitrite+and+deoxyhemoglobin.+Reassessment+of+reaction+kinetics+and+stoichiometry.">The reaction between nitrite and deoxyhemoglobin. Reassessment of reaction kinetics and stoichiometry.</a> Journal of Biological Chemistry. 280 (35), 31126-31131 (2005).</li><li>Cosby, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitrite+reduction+to+nitric+oxide+by+deoxyhemoglobin+vasodilates+the+human+circulation.">Nitrite reduction to nitric oxide by deoxyhemoglobin vasodilates the human circulation.</a> Nature Medicine. 9 (12), 1498-1505 (2003).</li><li>Mo, E., Amin, H., Bianco, I. H., Garthwaite, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+a+cellular+nitric+oxide/cGMP/phosphodiesterase-5+pathway.">Kinetics of a cellular nitric oxide/cGMP/phosphodiesterase-5 pathway.</a> Journal of Biological Chemistry. 279 (5), 26149-26158 (2004).</li><li>Park, J. W., Piknova, B., Nghiem, K., Lozier, J. N., Schechter, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+effect+of+nitrite+on+coagulation+processes+demonstrated+by+thromboelastography.">Inhibitory effect of nitrite on coagulation processes demonstrated by thromboelastography.</a> Nitric oxide. 40, 45-51 (2014).</li><li>Wajih, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+red+blood+cell+S-nitrosation+in+nitrite+bioactivation+and+its+modulation+by+leucine+and+glycose.">The role of red blood cell S-nitrosation in nitrite bioactivation and its modulation by leucine and glycose.</a> Redox Biology. 8, 415-421 (2016).</li><li>Akrawinthawong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+flow+cytometric+analysis+of+the+inhibition+of+platelet+reactivity+due+to+nitrite+reduction+by+deoxygenated+erythrocytes.">A flow cytometric analysis of the inhibition of platelet reactivity due to nitrite reduction by deoxygenated erythrocytes.</a> PLoS One. 9 (3), e92435 (2014).</li><li>Friebe, A., Koesling, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+nitric+oxide-sensitive+guanylyl+cyclase.">Regulation of nitric oxide-sensitive guanylyl cyclase.</a> Circulation Research. 93 (2), 96-105 (2003).</li><li>Srihirun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+inhibition+by+nitrite+is+dependent+on+erythrocytes+and+deoxygenation.">Platelet inhibition by nitrite is dependent on erythrocytes and deoxygenation.</a> PLoS One. 7 (1), e30380 (2012).</li><li>Smolenski, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+and+regulation+of+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+serine+239+phosphorylation+in+vitro+and+in+intact+cells+using+a+phosphospecific+monoclonal+antibody.">Analysis and regulation of vasodilator-stimulated phosphoprotein serine 239 phosphorylation in vitro and in intact cells using a phosphospecific monoclonal antibody.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (32), 20029-20035 (1998).</li><li>Burkhart, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+first+comprehensive+and+quantitative+analysis+of+human+platelet+protein+composition+allows+the+comparative+analysis+of+structural+and+functional+pathways.">The first comprehensive and quantitative analysis of human platelet protein composition allows the comparative analysis of structural and functional pathways.</a> Blood. 120 (15), e73-e82 (2012).</li><li>Parakaw, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+inhibition+and+increased+phosphorylated+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+following+sodium+nitrite+inhalation.">Platelet inhibition and increased phosphorylated vasodilator-stimulated phosphoprotein following sodium nitrite inhalation.</a> Nitric oxide. 66, 10-16 (2017).</li><li>Srihirun, S., Piknova, B., Sibmooh, N., Schechter, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorylated+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+(P-VASPSer239)+in+platelets+is+increased+by+nitrite+and+partially+deoxygenated+erythrocytes.">Phosphorylated vasodilator-stimulated phosphoprotein (P-VASPSer239) in platelets is increased by nitrite and partially deoxygenated erythrocytes.</a> PLoS One. 13 (3), e0193747 (2018).</li><li>Mal Cortese-Krott, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+soluble+guanylate+cyclase+in+RBCs:+preserved+activity+in+patients+with+coronary+artery+disease.">Identification of a soluble guanylate cyclase in RBCs: preserved activity in patients with coronary artery disease.</a> Redox Biology. 14, 328-337 (2018).</li><li>Abel, K., Mieskes, G., Walter, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dephosphorylation+of+the+focal+adhesion+protein+VASP+in+vitro+and+in+intact+human+platelets.">Dephosphorylation of the focal adhesion protein VASP in vitro and in intact human platelets.</a> FEBS letter. 370 (3), 184-188 (1995).</li></ol>

Siden blodplater aktiveres lett, forsiktig håndtering av blodplater inneholder eksempler er nødvendig. Rask pipettering og kraftig risting bør unngås. Blodplater-hemmere som prostasyklin (PGI2) kan brukes til å hindre Platederivert aktivering; Dette kan imidlertid påvirke noen signalveier inne blodplater. For utarbeidelse av blodplater pellets, vi legger til ACD Platederivert suspensjoner og bruker lav hastighet sentrifugering.
Nylagde blodplater i PRP har en levetid span, opp...

Blodplater er platen-formet småcellet bruddstykker avledet fra megakaryocytes som er avgjørende for blodpropp. Clotting kaskade startes av ulike bioaktive molekyler (som kollagen eller ADP), utgitt etter skaden av vaskulære veggen. Blodpropp prosessen kan endres, blant ulike effektor av nitrogenoksid (NO). Nei, naturlig produsert av pattedyrceller, er en av de mest allsidige fysiologiske signalene. Det fungerer som en potent vasodilator, nevrotransmitter og immun modulator, for å nevne noen av sine mange funksjoner. I blodet, ikke også bidrar til å regulere omfanget av blodpropp begrenser trombocyttaggregasjon. En av de mest sannsynlig ikke i blodet er nitritt, et uorganiske ion som har vist seg å fungere som en forløper for. Reagerer med røde blodceller (RBCs), nitritt reduseres til Nei og deoxyHb er oksidert til methemoglobin (metHb)1. INGEN løslatt fra RBCs er vasoactive og forårsaker vasorelaxation2. Denne nitritt reduksjon veien er en alternativ ingen generasjon veien, opptrer sammen med og utfyller den klassiske ingen generasjon bane av endothelial nitrogenoksid syntase på hypoxic forhold.
Blodplater seg er ikke kjøpedyktig nedskrive nitritt til nei men er svært følsomme for sin tilstedeværelse. Intakt blodplater, ikke i nanomolar området øker cGMP (EF50 = 10 nM) og fosforylering av VASP (EF50 = 0,5 nM)3. Derfor kan blodplater tjene som en utmerket sensor nitritt reduksjon av RBCs og ingen utslipp til blod. Det finnes flere metoder som direkte kan måle Platederivert aktivisering - som aggregometry og thromboelastography (TEG)4,5. Men krever metodene dyre spesialiserte instrumentering og ganske store mengder materiale. Det er også mulig å overvåke hendelser nedstrøms, etter nei frigis fra RBCs, bruke endringene i blodplater overflaten protein uttrykk – for eksempel P-selectin6. IKKE er også kjent for å øke mengden av cGMP i blodplater7. Tidligere brukte vi cGMP overvåke ingen utslipp til blod etter nitritt reduksjon av deoxygenated RBC8. Dette viste seg for å være en svært følsom; men cGMP er et kortvarig molekyl og oppdagelsen innebærer omfattende arbeid. En annen mulighet, beskrevet i presentert protokollen, bruker fosforylering i vasodilator-stimulert phospho (VASP)-protein for å oppdage tilstedeværelsen av nei i blodet. VASP er et medium av protein kinase G aktivisering, hvilke er fosforylert på samspill med nei gjennom sGC/cGMP veien9. Synlig VASP fosforylering forekommer svært lav uten konsentrasjoner, som kan gjøre blodplater en svært følsom detektor ingen tilstedeværelse i blodet. VASP er svært uttrykt i blodplater, men ikke i andre blod celler, som kan følge selektivt hendelsene som involverer blodplater10.
Hovedmålet med denne protokollen er å beskrive metoden i detalj for påvisning av ingen utslipp i hele blod med dets interaksjon med blodplater ved å overvåke VASP fosforylering11,12. Metoden beskrevet oppdages tidlig lav ingen konsentrasjoner - teoretisk sett i området nanomolar, som gjør den nåværende protokollen mer følsom enn cGMP besluttsomhet, på grunn av bruk av standard Western blot teknikker oppnåelig i de fleste laboratorium innstillinger.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tri-sodium citrate</td>
			<td>Supply by NIH blood bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Supply by NIH blood bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7528-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl; sodium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S-7653 1kg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4; sodium phosphate monobasic, monohydrate</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>7892-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl; potassium chloride</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>6858</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3; sodium bicarbonate</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>7412-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES; N-[2-Hydroxyethyl]piperazine-N&#39;-[-ethanesulfonic acid]</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3375-500g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2 (1 M); magnesium chloride</td>
			<td>Quality Biology</td>
			<td>351-033-721</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2; calcium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5080-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nalgene Narrow-mouth HDPE Economy bottles</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>2089-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red septum stopper NO.29</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>FB57877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO2-; sodium nitrite</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2252-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIZMA Base; Tris[hydroxymethyl]aminomethane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8524-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40; 4-Nonylphenyl-polyethylene glycol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>74385-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease inhibitor cocktail set III</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>539134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phospho-VASP (Ser239) antibody</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>3114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VASP antibody</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>3112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAPDH (14C10) Rabbit mAb</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>2118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M-6250-10ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td>Jackson Immuno Research Laboratories</td>
			<td>111-035-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clarity Western ECL Substrate</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>1705060-200ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO-oximeter (ABL 90 flex)</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

platelet-based detection of nitric oxide in blood by measuring vasp phosphorylation

Blodplater er blod komponentene ansvarlig for riktig blodpropp. Deres funksjon er sterkt regulert av ulike veier. En av de mest potente vasoactive agentene, nitrogenoksid (NO), kan også fungere som en kraftig inhibitor av trombocyttaggregasjon. Direkte er ingen oppdagelsen i blodet svært utfordrende på grunn av sin høye kryssreaksjon med celle-fri hemoglobin som begrenser ikke half-life millisekund området. Foreløpig basert ingen endringer etter tiltak er bare beregnet på målt endringer av nitrite og nitrate (medlemmer av nitrat-nitritt-ingen metabolske veien). Men nøyaktig, disse målingene er ganske vanskelig å tolke vis en vis faktiske uten endringer, på grunn av det naturlig høye planlagte nitritt og nitrate høyder som er flere størrelsesordener høyere enn forventede endringene ikke seg selv. Derfor er utviklingen av direkte og enkelt metoder som ville tillate en å oppdage ingen direkte lang forfallen. Denne protokollen adresser en potensiell bruk av blodplater som et ingen sensor i blodet. Det beskriver første Platederivert rik plasma (PRP) og vasket Platederivert forberedelser og bruk av nitrite og deoxygenated røde blod celler som ingen generatorer. Fosforylering av VASP på serine 239 (P-VASPSer239) brukes til å oppdage tilstedeværelsen av nr. At VASP protein er svært uttrykt i blodplater og at det er raskt fosforylert når nei finnes fører til en unik mulighet til å bruke denne veien til direkte merker ingen tilstedeværelse i blodet.

Venøse blodprøver har pO2 verdier mellom 50-80 mmHg. Deoxygenation av helium synker raskt pO2 til 25 mmHg innen 10 minutter økt deoxygenation gang litt videre nedgang pO2. Men økte tiden av deoxygenation fører også til betydelig økte nivåer av celle-fri hemoglobin (bestemmes av co oksymeter, visuelt sett på figur 2 som stadig rød coloration plasma) (Figur 2A-B). Økt hem...

Watch this Scientific Journal Video about Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation at JoVE.com

Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation

Her presenterer vi en protokoll for å løse potensielle bruk av blodplater som en svært følsom nitrogenoksid sensor i blodet. Det beskriver første Platederivert forberedelse og bruk av nitrite og deoxygenated røde blod celler som nitrogenoksid generatorer.

Blodplater-basert oppdagelsen av nitrogenoksid i blodet ved å måle VASP fosforylering

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent ...

Denne protokollen tar for seg potensiell bruk av blodplater som svært følsom nitrogenoksidsensor både in vitro og in vivo i blodet. Økt fosforylert vasodilator-stimulert fosfoprotein eller P-VASP serine 239 i blodplater nitrogenoksid har noen fordeler, inkludert en evne til å oppdage tilstedeværelsen av nitrogenoksid i nanomolar avstamninger. Innen to timer etter å ha samlet 30 til 50 milliliter fullblod fra en sunn donor, tilsett fem milliliter aliquots av blodet i riktig antall 15 milliliter koniske rør for sentrifugering.Bruk en plastoverføringspipette til å forsiktig samle blodplaterikt plasma fra den øvre delen av supernativa. Pellet de plasmarike blodplatene med en ny sentrifugering og vask forsiktig pellets i fem milliliter CGS-buffer. Sentrifuge ved 400 g i 10 minutter ved romtemperatur.På slutten av sentrifugeringen, resuspend pellets i tre milliliter modifisert Tyrode buffer. Bruk et hemocytometer for å telle og justere tettheten av blodplatesuspensjonene til tre ganger 10 til åttende celler per milliliter i fersk Tyrode-buffer. Deretter inkubere blodplateopphengene i en time ved 37 grader Celsius.I mellomtiden samler du de røde blodcellene fra de platefrie plasmalagene i fullblodsprøvene ved sentrifugering etterfulgt av fire vasker i fem milliliter PBS per vask. Etter siste vask, kast supernativa og bland de røde blodlegemene med en milliliter av de plasmarike blodplatene ved passende eksperimentell hematocrit i polypropylenflasker lukket med gummipropper. Sett inn en nål koblet til en heliumgasstank i hver septa og sett inn 26 gauge nåler for å lage gassuttak.Virvle deretter flaskene langsomt ved romtemperatur og bruk et oksymeter for å måle det delvise oksygentrykket for overvåking av deoksygeneringsprosessen. Oksygenreduksjonshastigheten er avhengig av heliumstrømningshastigheten og omrøringshastigheten. Derfor bør oksygeneringstiden optimaliseres før du begynner et eksperiment, da dette er svært avhengig av geometrien til det eksperimentelle oppsettet.For reduksjon av røde blodlegemer, bruk en mikrosyring til å injisere nitritt gjennom septumet i deoksygenerte prøvene av PRP og RBC-er slik at en 10 mikromos endelige konsentrasjon oppnås. Inkuber prøvene i minst 10 minutter ved 37 grader Celsius og overfør en milliliter av hver prøve til et mikrocentrifugerør for sentrifugering. Overfør 300 mikroliter blodplateoppheng fra den øvre delen av supernativa til nye mikrocentrifugerør og tilsett syresitratdekstrose til hvert rør med ett til ni-forhold.Sentrifuger blodplatene igjen og resuspend pellets i 80 mikroliter iskald lysis buffer som inneholder protease hemmer cocktail tre til hvert rør. Deretter laster du 15 mikrogram protein fra hver prøve til to separate 10% SDS-PAGE geler. Kjør gelene på 120 volt i 1, 3 timer.På slutten av løpet overfører du gelene til individuelle lystgasshinner og blokkerer eventuelle uspesifikke bindinger med et passende volum på 5% ikke-fett tørr melk. Inkuber membranene med passende primære antistoffer over natten ved fire grader Celsius etterfulgt av merking med et passende sekundært heste reddikperoksidaseantistoff i 45 minutter ved romtemperatur. Eksponer deretter membranene med en imager for å kvantifisere båndtettheten med et passende bildeanalyseprogram.Friske venøse blodprøver har delvis oksygentrykkverdier mellom 50 og 80 millimeter kvikksølv. Deoxgenation av helium reduserer raskt det delvise trykket av oksygen til 25 millimeter kvikksølv innen 10 minutter. Ytterligere reduksjon av delvis oksygentrykk kan oppnås med økt deoksygeneringstid.Økt deoksygenering fører til økte nivåer av hemolyse som indikert av stadig rød fargeplasma. Dette er en effekt av deoksygenering og er ikke forårsaket av å røre seg selv som indikert av mangel på hemolyse i prøver rørt uten helium. Både vasodilator-stimulert fosfoprotein eller VASP og fosforylert-VASP uttrykksnivåer i blodplater redusert med økende hematokrit i deoxygenated prøver som påvist av vestlige blot.Behandling med en kortvarig nitrogenoksiddonor øker fosforylert vasodilatorstimulert fosfoproteinuttrykk i blodplater innen 10 sekunder etter behandling. Videre forble nivåene av Fosforylert-VASP eller P-VASP stabile opptil 10 minutter etter inkubasjon av NO-donoren med blodplaterikt plasma som indikerer at det er tilstrekkelig tid for å skille RBC-er fra blodplater uten å påvirke eksisterende P-VASP-nivåer. Nitritt øker også blodplater P-VASP nivåer i nærvær av deoxygenated RBC.Her avhenger forholdet mellom P-VASP og total VASP av nivået av hematokrit. VASP er sterkt uttrykt i blodplate og det er raskt fosforylert i nærvær av nitrogenoksid. Derfor gir denne protokollen en metode for å studere induksjon av nitrogenoksid av ulike fysiologiske stimuli.Med denne metoden har vi med hell brukt økt P-VASP i blodplate som markør for nitrogenoksidstimulering ved inhalert nitritt in vivo. Ikke glem at det alltid skal utføres å arbeide med blodplate med en biologisk prøve ved hjelp av riktig personlig verneutstyr.

Research

JoVE Journal

Medicine

Analytical Techniques for Assaying Nitric Oxide Bioactivity

Analytiske teknikker analysere Nitric Oxide bioaktivitet

Nitric oxide (NO) is a diatomic free radical that is extremely short lived in biological systems (less than 1 second in circulating blood)1. NO may be ...

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR (qPCR)

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR qPCR

MikroRNA Detection i prostatakreft ved Kvantitativ Real-time PCR (qPCR)

MicroRNAs (miRNAs) are single-stranded, 18&#x2013;24 nucleotide long, non-coding RNA molecules. They are involved in virtually every cellular process ...

Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for Cancer Therapy Monitoring

Cerenkov Luminescence Imaging CLI for Cancer Therapy Monitoring

Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for Cancer Therapy Overvåking

In  molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI)  are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. ...

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

5/6th Nephrectomy i kombinasjon med høy Salt Kosthold og nitrogenoksidsyntase Hemming å indusere kronisk nyresykdom i Lewis Rat

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Fosfor-31 Magnetic Resonance spektroskopi: Et verktøy for måling<em&gt; I Vivo</em&gt; Mitokondriell oksidativ fosforylering Kapasitet i Human Skeletal Muscle

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro og i Vivo oppdagelse av Mitophagy i menneskelige celler, C. Elegansog mus

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Rutine Screening metode for Microparticles i blodplater blodoverføringer

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Synthesis, Characterization, and Application of Superparamagnetic Iron Oxide Nanoprobes for Extrapulmonary Tuberculosis Detection

Syntese, karakterisering og anvendelse av superparamagnetiske jernoksid nanoprober for ekstrapulmonal tuberkulose deteksjon

A molecular imaging probe comprising superparamagnetic iron oxide (SPIO) nanoparticles and Mycobacterium tuberculosis surface antibody (MtbsAb) was ...

Endotoxin Activity Assay for the Detection of Whole Blood Endotoxemia in Critically Ill Patients

Endotoksin aktivitet analysen for påvisning av hele blod endotoxemia i kritisk syke pasienter

Lipopolysaccharide, also known as endotoxin, is a fundamental component of gram-negative bacteria and plays a crucial role in the development of sepsis ...

A Novel Inhalation Mask System to Deliver High Concentrations of Nitric Oxide Gas in Spontaneously Breathing Subjects

Et nytt innåndingsmaskesystem for å levere høye konsentrasjoner av nitrogenoksidgass hos spontant pustende forsøkspersoner

Nitric Oxide (NO) is administered as gas for inhalation to induce selective pulmonary vasodilation. It is a safe therapy, with few potential risks even if ...