Name: platelet-based detection of nitric oxide in blood by measuring vasp phosphorylation
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation at JoVE.com

Detta arbete finansierades av NIH intramurala bidrag till Dr Alan N. Schechter.

Obs: Blodprov erhölls från NIH Blodbanken (IRB godkända protokoll: 99-CC-0168).
1. blod provberedning
Obs: För att undvika trombocytaktivering, dra blod sakta och blanda försiktigt med citrat genom att vända rör flera gånger.
<ol><li>
Trombocyt-rich plasma (PRP) förberedelse
	<ol>
<li>Rita 30 – 50 mL blod med 20 G eller större diameter nål och tillsätt i ett rör som innehål...

<ol>
	<li>Huang, K. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+reaction+between+nitrite+and+deoxyhemoglobin.+Reassessment+of+reaction+kinetics+and+stoichiometry.">The reaction between nitrite and deoxyhemoglobin. Reassessment of reaction kinetics and stoichiometry.</a> Journal of Biological Chemistry. 280 (35), 31126-31131 (2005).</li><li>Cosby, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitrite+reduction+to+nitric+oxide+by+deoxyhemoglobin+vasodilates+the+human+circulation.">Nitrite reduction to nitric oxide by deoxyhemoglobin vasodilates the human circulation.</a> Nature Medicine. 9 (12), 1498-1505 (2003).</li><li>Mo, E., Amin, H., Bianco, I. H., Garthwaite, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kinetics+of+a+cellular+nitric+oxide/cGMP/phosphodiesterase-5+pathway.">Kinetics of a cellular nitric oxide/cGMP/phosphodiesterase-5 pathway.</a> Journal of Biological Chemistry. 279 (5), 26149-26158 (2004).</li><li>Park, J. W., Piknova, B., Nghiem, K., Lozier, J. N., Schechter, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+effect+of+nitrite+on+coagulation+processes+demonstrated+by+thromboelastography.">Inhibitory effect of nitrite on coagulation processes demonstrated by thromboelastography.</a> Nitric oxide. 40, 45-51 (2014).</li><li>Wajih, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+red+blood+cell+S-nitrosation+in+nitrite+bioactivation+and+its+modulation+by+leucine+and+glycose.">The role of red blood cell S-nitrosation in nitrite bioactivation and its modulation by leucine and glycose.</a> Redox Biology. 8, 415-421 (2016).</li><li>Akrawinthawong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+flow+cytometric+analysis+of+the+inhibition+of+platelet+reactivity+due+to+nitrite+reduction+by+deoxygenated+erythrocytes.">A flow cytometric analysis of the inhibition of platelet reactivity due to nitrite reduction by deoxygenated erythrocytes.</a> PLoS One. 9 (3), e92435 (2014).</li><li>Friebe, A., Koesling, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+nitric+oxide-sensitive+guanylyl+cyclase.">Regulation of nitric oxide-sensitive guanylyl cyclase.</a> Circulation Research. 93 (2), 96-105 (2003).</li><li>Srihirun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+inhibition+by+nitrite+is+dependent+on+erythrocytes+and+deoxygenation.">Platelet inhibition by nitrite is dependent on erythrocytes and deoxygenation.</a> PLoS One. 7 (1), e30380 (2012).</li><li>Smolenski, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+and+regulation+of+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+serine+239+phosphorylation+in+vitro+and+in+intact+cells+using+a+phosphospecific+monoclonal+antibody.">Analysis and regulation of vasodilator-stimulated phosphoprotein serine 239 phosphorylation in vitro and in intact cells using a phosphospecific monoclonal antibody.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (32), 20029-20035 (1998).</li><li>Burkhart, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+first+comprehensive+and+quantitative+analysis+of+human+platelet+protein+composition+allows+the+comparative+analysis+of+structural+and+functional+pathways.">The first comprehensive and quantitative analysis of human platelet protein composition allows the comparative analysis of structural and functional pathways.</a> Blood. 120 (15), e73-e82 (2012).</li><li>Parakaw, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+inhibition+and+increased+phosphorylated+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+following+sodium+nitrite+inhalation.">Platelet inhibition and increased phosphorylated vasodilator-stimulated phosphoprotein following sodium nitrite inhalation.</a> Nitric oxide. 66, 10-16 (2017).</li><li>Srihirun, S., Piknova, B., Sibmooh, N., Schechter, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphorylated+vasodilator-stimulated+phosphoprotein+(P-VASPSer239)+in+platelets+is+increased+by+nitrite+and+partially+deoxygenated+erythrocytes.">Phosphorylated vasodilator-stimulated phosphoprotein (P-VASPSer239) in platelets is increased by nitrite and partially deoxygenated erythrocytes.</a> PLoS One. 13 (3), e0193747 (2018).</li><li>Mal Cortese-Krott, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+soluble+guanylate+cyclase+in+RBCs:+preserved+activity+in+patients+with+coronary+artery+disease.">Identification of a soluble guanylate cyclase in RBCs: preserved activity in patients with coronary artery disease.</a> Redox Biology. 14, 328-337 (2018).</li><li>Abel, K., Mieskes, G., Walter, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dephosphorylation+of+the+focal+adhesion+protein+VASP+in+vitro+and+in+intact+human+platelets.">Dephosphorylation of the focal adhesion protein VASP in vitro and in intact human platelets.</a> FEBS letter. 370 (3), 184-188 (1995).</li></ol>

Eftersom trombocyter aktiveras lätt, skonsam hantering av trombocyt-innehållande prover krävs. Snabb pipettering och kraftig skakning bör undvikas. Trombocythämmare såsom prostacyklin (SGB2) kan användas för att förhindra trombocytaktivering; Detta kan emellertid påverka vissa signalvägar inuti blodplättarna. För beredning av trombocyter pellets, vi lägger till ACD trombocytantal upphängningarna och använder lågt varvtal centrifugering.
Nylagade trombocyter i PRP ha...

Trombocyter är små skivformiga cellen fragment härrör från megakaryocyter som är viktiga för blodets koagulering. Koagulering kaskad initieras av olika bioaktiva molekyler (såsom kollagen eller ADP), släppt efter skadan av kärlväggen. Blod koagulering process kan ändras, bland olika effektorer av kväveoxid (NO). Nej, produceras naturligt av däggdjursceller, är en av de mest mångsidiga fysiologiska signalerna. Det fungerar som en potent vasodilator, signalsubstans och immunmodulator, för att nämna några av dess många funktioner. I blodet, inget också hjälper till att reglera omfattningen av blodproppar genom att hämma trombocytaggregationen. En av de mest sannolika källorna för NO i blodomloppet är nitrit, en oorganisk Jon som har visat sig fungera som en föregångare av NO. Reagera med röda blodkroppar (RBC), nitrit reduceras till NO och deoxyHb oxideras till methemoglobin (metHb)1. NR släppt från röda blodkroppar är vasoaktiva och orsakar vasorelaxation2. Denna nitrit minskning väg är en suppleant ingen generation väg, agerar tillsammans med och kompletterar den klassiska ingen generation sökväg av endothelial kväveoxid syntas på hypoxisk villkor.
Trombocyter själva är inte kunna reducera nitrit till NO men är mycket känsliga för sin närvaro. I intakt trombocyter, inte i nanomolar utbudet ökar cGMP (EG50 = 10 nM) och fosforylering av VASP (EG50 = 0,5 nM)3. Trombocyter kan därför tjäna som ett utmärkt sensor av nitrit minskning av röda blodkroppar och ingen utsättning i blod. Det finns flera metoder som direkt kan mäta omfattningen av trombocytaktivering - såsom aggregometry och thromboelastography (TEG)4,5. Dessa metoder kräver dock dyra specialiserade instrumentering och ganska stora mängder material. Det är också möjligt att övervaka händelser nedströms, efter NO frisätts från RBC, använda ändringarna i trombocytantal ytan proteinuttryck – till exempel P-selektin6. Nej är också känt att öka mängden av cGMP i trombocyter7. Tidigare använde vi cGMP att övervaka något utsläpp i blodet efter nitrit reduktion av syrefattigt RBC8. Detta visade sig vara en mycket känslig metod; cGMP är en kortlivad molekyl dock och dess upptäckt handlar om omfattande arbete. En annan möjlighet, beskrivs i protokollet presenteras, använder fosforylering av de vasodilaterande-stimulerad phospho (VASP)-protein för att upptäcka förekomsten av NO i blod. VASP är ett substrat av protein kinase G aktiveringen, som är fosforyleras vid samspelet med nr via sGC/cGMP vägen9. Detekterbara VASP fosforylering inträffar vid mycket låg nr koncentrationer, som kunde göra blodplättar en mycket känslig detektor av ingen närvaro i blodet. VASP uttrycks mycket i trombocyter, men inte i andra blodkroppar, vilket gör för att följa selektivt de händelser som involverar trombocyter10.
Det huvudsakliga målet med detta protokoll är att beskriva metoden i detalj för detektion av inga utsläpp i helblod med dess interaktion med trombocyter genom övervakning VASP fosforylering11,12. Den beskrivna metoden möjliggör tidig upptäckt av låg ingen koncentrationer - teoretiskt i intervallet nanomolar vilket gör protokolls känsligare än cGMP beslutsamhet, på grund av användning av standard Western blot teknik kan uppnås i de flesta laboratorium inställningar.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Tri-sodium citrate</td>
			<td>Supply by NIH blood bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Supply by NIH blood bank</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7528-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl; sodium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S-7653 1kg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4; sodium phosphate monobasic, monohydrate</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>7892-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl; potassium chloride</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>6858</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3; sodium bicarbonate</td>
			<td>Mallinckrodt Chemical</td>
			<td>7412-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES; N-[2-Hydroxyethyl]piperazine-N&#39;-[-ethanesulfonic acid]</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3375-500g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2 (1 M); magnesium chloride</td>
			<td>Quality Biology</td>
			<td>351-033-721</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2; calcium chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5080-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nalgene Narrow-mouth HDPE Economy bottles</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>2089-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Red septum stopper NO.29</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>FB57877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO2-; sodium nitrite</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2252-500G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRIZMA Base; Tris[hydroxymethyl]aminomethane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8524-250G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40; 4-Nonylphenyl-polyethylene glycol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>74385-1L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease inhibitor cocktail set III</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>539134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phospho-VASP (Ser239) antibody</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>3114</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VASP antibody</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>3112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GAPDH (14C10) Rabbit mAb</td>
			<td>Cell signaling technology</td>
			<td>2118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-mercaptoethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M-6250-10ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L)</td>
			<td>Jackson Immuno Research Laboratories</td>
			<td>111-035-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clarity Western ECL Substrate</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>1705060-200ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO-oximeter (ABL 90 flex)</td>
			<td>Radiometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

platelet-based detection of nitric oxide in blood by measuring vasp phosphorylation

Trombocyter är ansvarig för korrekt blodkoagulation blodkomponenter. Deras funktion är hårt reglerad av olika vägar. En av de mest potenta vasoaktiva ämnen, kväveoxid (NO), kan också fungera som en kraftfull hämmare av trombocytaggregationen. Direkt är ingen upptäckt i blod mycket utmanande på grund av dess höga reaktivitet med cell-fritt hemoglobin som begränsar ingen halveringstid att millisekunden spänna. För närvarande utifrån inga ändringar efter insatser beräknas endast uppmätta förändringar av nitrit och nitrat (medlemmar i nitrat-nitrit-NO metabolism). Men exakt, dessa mätningar är ganska svårt att tolka gentemot faktiska utan ändringar, på grund av den naturligt höga baslinjen nitrit och nitrat i nivåer som är flera tiopotenser högre än förväntade förändringar av inga själv. Därför är utvecklingen av direkt och enkla metoder som gör det möjligt för en att upptäcka nr direkt efterlängtad. Detta protokoll adresser en potentiell användning av blodplättar som en mycket känslig ingen sensor i blod. Det beskriver inledande trombocytantal rika plasma (PRP) och tvättade trombocytantal preparat och användningen av nitrit och syrefattigt röda blodkroppar som ingen generatorer. Fosforylering av VASP på Serin 239 (P-VASPSer239) används för att upptäcka förekomsten av NO. Det faktum att VASP proteinet uttrycks mycket i trombocyter och att det snabbt är fosforyleras då ingen är närvarande leder till en unik möjlighet att använda denna väg att direkt detektera ingen närvaro i blodet.

Venösa blodprov har pO2 värden mellan 50-80 mmHg. Syrebrist av helium minskar snabbt pO2 till 25 mmHg inom 10 min. ökad syrebrist tid något ytterligare minskningar pO2. Dock ökade tiden för syrebrist leder också till avsevärt ökade nivåer av cellfria hemoglobin (bestäms av samtidig Oximeter, visuellt sett på bild 2 som alltmer rödfärgning av plasma) (Figur 2A-B). Ök...

Watch this Scientific Journal Video about Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation at JoVE.com

Platelet-based Detection of Nitric Oxide in Blood by Measuring VASP Phosphorylation

Här presenterar vi ett protokoll för att åtgärda den potentiella användningen av trombocyter som en mycket känslig kväveoxid sensor i blod. Det beskriver inledande trombocytantal förberedelse och användning av nitrit och syrefattigt röda blodkroppar som kväveoxid generatorer.

Trombocyt-baserad detektion av kväveoxid i blodet genom att mäta VASP fosforylering

Platelets are the blood components responsible for proper blood clotting. Their function is highly regulated by various pathways. One of the most potent ...

Detta protokoll behandlar den potentiella användningen av blodplättar som mycket känslig kväveoxid sensor både in vitro och in vivo inom blodet. Ökad fosforylerad Vasodilator-Stimulerad Fosfoprotein eller P-VASP serin 239 i trombocyter kväveoxid har vissa fördelar, inklusive en förmåga att upptäcka förekomsten av kväveoxid i nanomolar lineages. Inom två timmar efter insamling av 30 till 50 milliliter helblod från en frisk givare, tillsätt fem milliliter alikvoter av blodet i lämpligt antal av 15 milliliter koniska rör för centrifugeringen.Använd en plastöverföringspipett för att noggrant samla upp den blodplättsrika plasman från supernatanternas övre del. Pellet de plasmarika blodplättarna med en andra centrifugering och tvätta försiktigt pelletsen i fem milliliter CGS buffert. Centrifugera vid 400 g i 10 minuter vid rumstemperatur.I slutet av centrifugeringen, resuspend pellets i tre milliliter av modifierad Tyrode buffert. Använd en hemocytometer för räkning och justera blodplättsupphängenas densitet till tre gånger 10 till åttonde cellerna per milliliter i färsk Tyrodebuffert. Inkubera sedan trombocytupphängningar i en timme vid 37 grader Celsius.Under tiden samla de röda blodkropparna från de plattfria plasmaskikten i helblodsproverna genom centrifugering följt av fyra tvättar i fem milliliter PBS per tvätt. Efter den sista tvätten, kassera supernatanterna och blanda de röda blodkropparna med en milliliter av de plasmarika blodplättarna vid lämplig experimentell hematokrit i polypropylenflaskor som är stängda med gummiproppar. Sätt in en nål ansluten till en heliumgastank i varje septa och sätt in 26 gauge nålar för att göra gasuttag.Sedan långsamt snurra flaskorna i rumstemperatur och använd en oximeter för att mäta det partiella syretrycket för övervakning av deoxygenationsprocessen. Syrets hastighet minskar är beroende av heliumflödet och omrörningshastigheten. Därför bör tiden för syresättning optimeras innan du påbörjar ett experiment eftersom detta är mycket beroende av geometrin hos den experimentella inställningen.För nitritreduktion med röda blodkroppar, använd en mikrosyring för att injicera nitrit genom septum i de deoxygenerade proverna av PRP och RBCs så att en 10 mikromolar slutlig koncentration uppnås. Inkubera proverna i minst 10 minuter vid 37 grader Celsius och överför en milliliter av varje prov till ett mikrocentrifugrör för centrifugering. Överför 300 mikroliter av trombocytupphängning från den övre delen av supernatanterna till nya mikrocentrifugrör och tillsätt sur citratdextros till varje rör vid ett ett till nio-förhållande.Centrifugera trombocyterna igen och resuspend pelletsen i 80 mikroliter av iskall lysbuffert som innehåller proteashämmare cocktail tre till varje rör. Därefter laddar du 15 mikrogram protein från varje prov till två separata 10%SDS-PAGE geler. Kör gelerna på 120 volt i 1,3 timmar.Vid slutet av körningen överför du gelerna till enskilda natrouscellulosamembran och blockerar eventuell ospecifik bindning med en lämplig volym på 5%fettfri torr mjölk. Inkubera membranen med lämpliga primära antikroppar över natten vid fyra grader Celsius följt av märkning med en lämplig sekundär pepparrädisa peroxidas antikropp i 45 minuter vid rumstemperatur. Utsätt sedan membranen med en imager för att kvantifiera banddensiteten med ett lämpligt bildanalysprogram.Friska venösa blodprover har partiella syretrycksvärden mellan 50 till 80 millimeter kvicksilver. Deoxgenation genom helium minskar snabbt grundpressen av syre till 25 millimeter kvicksilver inom 10 minuter. Ytterligare minskning av partiellt syretryck kan uppnås med en ökad deoxygenation tid.Ökad deoxygenation leder till ökade nivåer av hemolys som indikeras av allt rödare färgplasma. Detta är en effekt av deoxygenation och orsakas inte av omrörning själv som framgår av bristen på hemolys i prover som rörs utan helium. Både Vasodilator-Stimulerad Fosfoprotein eller VASP och Fosforylerat-VASP-uttrycksnivåer i trombocyter minskade med ökande hematokrit i deoxygenerade prover som detekteras av western blot.Behandling med en kortlivad kväveoxiddonator ökar fosforylerat vasodilaterande-stimulerat fosfoproteinuttryck i trombocyter inom 10 sekunder efter behandling. Vidare förblev nivåerna av fosforylerat-VASP eller P-VASP stabila upp till 10 minuter efter inkubation av NO-givaren med trombocytrikt plasma som visar att det finns tillräckligt med tid för att separera RBCs från trombocyter utan att påverka befintliga P-VASP-nivåer. Nitrit ökar också trombocytens P-VASP-nivåer i närvaro av deoxygenerade RBC..Här förhållandet mellan P-VASP till totalt VASP beror på nivån av hematokrit. VASP uttrycks högt i trombocyt och det är snabbt fosforylerat i närvaro av kväveoxid. Därför ger detta protokoll en metod för att studera induktion av kväveoxid av olika fysiologiska stimuli.Med denna metod har vi framgångsrikt använt ökad P-VASP i trombocyt som markör för kväveoxidstimulering genom inhalerad nitrit in vivo. Glöm inte att arbeta med trombocyt med ett biologiskt exemplar alltid ska utföras med hjälp av lämplig personlig skyddsutrustning.

Research

JoVE Journal

Medicine

Analytical Techniques for Assaying Nitric Oxide Bioactivity

Analytiska tekniker för analys av kväveoxid Bioaktivitet

Nitric oxide (NO) is a diatomic free radical that is extremely short lived in biological systems (less than 1 second in circulating blood)1. NO may be ...

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR (qPCR)

MicroRNA Detection in Prostate Tumors by Quantitative Real-time PCR qPCR

MikroRNA Detektion av prostatatumörer genom kvantitativ realtids-PCR (qPCR)

MicroRNAs (miRNAs) are single-stranded, 18&#x2013;24 nucleotide long, non-coding RNA molecules. They are involved in virtually every cellular process ...

Cerenkov Luminescence Imaging (CLI) for Cancer Therapy Monitoring

Cerenkov Luminescence Imaging CLI for Cancer Therapy Monitoring

Cerenkov Luminiscens Imaging (CLI) för cancerbehandling övervakning

In  molecular imaging, positron emission tomography (PET) and optical imaging (OI)  are two of the most important and thus most widely used modalities1-3. ...

5/6th Nephrectomy in Combination with High Salt Diet and Nitric Oxide Synthase Inhibition to Induce Chronic Kidney Disease in the Lewis Rat

5/6th Nefrektomi i kombination med hög salthalt kost och kväveoxidsyntas Inhibition att inducera kronisk njursjukdom i Lewis Rat

Chronic kidney disease (CKD) is a global problem. Slowing CKD progression is a major health priority. Since CKD is characterized by complex derangements ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Fosfor-31-magnetisk resonansspektroskopi: ett verktyg för att mäta<em&gt; In Vivo</em&gt; Mitochondrial oxidativ fosforylering Kapacitet i human skelettmuskel

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro och In Vivo upptäckt av Mitophagy i mänskliga celler, C. Elegansoch möss

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Rutinmässig Screening metod för mikropartiklar i trombocyttransfusioner

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Synthesis, Characterization, and Application of Superparamagnetic Iron Oxide Nanoprobes for Extrapulmonary Tuberculosis Detection

Syntes, karakterisering och tillämpning av superparamagnetiska järnoxid nanosonder för extrapulmonary tuberkulos Upptäckt

A molecular imaging probe comprising superparamagnetic iron oxide (SPIO) nanoparticles and Mycobacterium tuberculosis surface antibody (MtbsAb) was ...

Endotoxin Activity Assay for the Detection of Whole Blood Endotoxemia in Critically Ill Patients

Endotoxin aktivitet analys för detektion av helblod endotoxemia hos kritiskt sjuka patienter

Lipopolysaccharide, also known as endotoxin, is a fundamental component of gram-negative bacteria and plays a crucial role in the development of sepsis ...

A Novel Inhalation Mask System to Deliver High Concentrations of Nitric Oxide Gas in Spontaneously Breathing Subjects

Ett nytt inhalationsmasksystem för att leverera höga koncentrationer av kväveoxidgas hos spontant andande ämnen

Nitric Oxide (NO) is administered as gas for inhalation to induce selective pulmonary vasodilation. It is a safe therapy, with few potential risks even if ...