Name: using robotic systems to process and embed colonic murine samples for histological analyses
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
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हम IRCCS Policlinico अस्पताल के पैथोलॉजी विभाग, तकनीकी सहायता के लिए मिलान और पशुपालन में सहायता के लिए िीईओ पशु सुविधा का धंयवाद ।

पशु प्रक्रियाओं इतालवी स्वास्थ्य मंत्रालय द्वारा अनुमोदित (प्रमाणन. 127/15, 27/13) और ऑन्कोलॉजी IACUC के यूरोपीय संस्थान के पशु देखभाल दिशानिर्देश (संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति) के बाद किया गया
1. ?...

<ol>
	<li>Gibson-Corley, K. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+Integration+of+the+Histology+Core+Laboratory+in+Translational+Research.">Successful Integration of the Histology Core Laboratory in Translational Research.</a> Journal of histotechnology. 35, 17-21 (2012).</li><li>Olivier, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+modified+species+in+research:+Opportunities+and+challenges+for+the+histology+core+laboratory.">Genetically modified species in research: Opportunities and challenges for the histology core laboratory.</a> Journal of histotechnology. 35, 63-67 (2012).</li><li>Gibson-Corley, K. N., Olivier, A. K., Meyerholz, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+for+valid+histopathologic+scoring+in+research.">Principles for valid histopathologic scoring in research.</a> Veterinary pathology. 50, 1007-1015 (2013).</li><li>Stolfi, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+interleukin-21+in+the+regulation+of+colitis-associated+colon+cancer.">Involvement of interleukin-21 in the regulation of colitis-associated colon cancer.</a> The Journal of experimental medicine. 208, 2279-2290 (2011).</li><li>Begley, C. G., Ellis, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+development:+Raise+standards+for+preclinical+cancer+research.">Drug development: Raise standards for preclinical cancer research.</a> Nature. 483, 531-533 (2012).</li><li>Peters, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A Practical Guide to Frozen Section Technique. , (2010).</li><li>Rosai, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Rosai and Ackerman's Surgical Pathology. , (2011).</li><li>Blumberg, R. S., Saubermann, L. J., Strober, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+mucosal+inflammation+and+their+relation+to+human+inflammatory+bowel+disease.">Animal models of mucosal inflammation and their relation to human inflammatory bowel disease.</a> Current opinion in immunology. 11, 648-656 (1999).</li><li>Wirtz, S., Neufert, C., Weigmann, B., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemically+induced+mouse+models+of+intestinal+inflammation.">Chemically induced mouse models of intestinal inflammation.</a> Nature. 2, 541-546 (2007).</li><li>Kaser, A., Zeissig, S., Blumberg, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+bowel+disease.">Inflammatory bowel disease.</a> Annual review of immunology. 28, 573-621 (2010).</li><li>Cribi&#249;, F. M., Burrello, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+an+automated+inclusion+system+for+the+histological+analysis+of+murine+tissue+samples:+A+feasibility+study+in+DSS-induced+chronic+colitis.">Implementation of an automated inclusion system for the histological analysis of murine tissue samples: A feasibility study in DSS-induced chronic colitis.</a> European Journal of Inflammation. 16, 1-12 (2018).</li></ol>

हम histopathologic विश्लेषण के लिए murine ऊतकों की तैयारी के दौरान अलग स्वचालित कदम का उपयोग । इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य तकनीकी संकेत प्रदान करने के लिए reproducibility और पूरी प्रक्रिया के मानकीकरण बढ़ाने के लिए, इस प्रकार अं?...

पिछले दशकों में, कई प्रयोगात्मक मॉडल मानव रोगों के लिए अग्रणी रोगजनक तंत्र काटना करने के लिए विकसित किया गया है1,2. आदेश में एक रोग की गंभीरता का आकलन करने के लिए, शोधकर्ताओं ने एक इलाज के प्रभाव का मूल्यांकन करना होगा और कोशिकाविज्ञान और ऊतकवैज्ञानिक स्थापत्य विविधताओं या सूजन की मात्रा3का अध्ययन । उन प्रयोगात्मक मॉडल पर प्रदर्शन करने के लिए, विस्तृत histopathological विश्लेषण की जरूरत है, अक्सर murine और मानव नमूने की तुलना4,5.
इसके अतिरिक्त, मानव नमूने सामांयतः संसाधित और मानकीकृत histopathological मानदंड और तरीकों के माध्यम से histopathology कोर सुविधाओं और अनुभवी मानव पैथोलॉजिस्ट द्वारा बनाए गए हैं । इसके विपरीत, murine ऊतकों आमतौर पर तय कर रहे हैं, एंबेडेड और histopathological प्रोटोकॉल के सीमित अनुभव के साथ शोधकर्ताओं ने विश्लेषण किया । गुणवत्ता और histopathological परीक्षा की विश्वसनीयता उच्च गुणवत्ता वाले ऊतक वर्गों की तैयारी के साथ शुरू होता है । कई कारकों समीक्षकों को बढ़ाने या निर्धारण, macroscopic अनुभाग, प्रसंस्करण, आयल embedding, और6,7के embedding सहित अंतिम विश्लेषण की गुणवत्ता में कमी करने के लिए योगदान करते हैं ।
नमूने के हेरफेर को शामिल इन सभी अंश मैनुअल त्रुटियों के अधीन हैं, नमूनों की मैनुअल embedding सहित और, एक हद तक कम करने के लिए, मैनुअल microtome अनुभाग और धुंधला । वर्तमान में, ऊतकवैज्ञानिक मूल्यांकन के लिए murine ऊतक तैयार करने की पूरी प्रक्रिया प्रोटोकॉल है कि प्रयोगशाला से प्रयोगशाला और मैनुअल प्रोटोकॉल के लिए बदलती है पर निर्भर करता है । इस अध्ययन का लक्ष्य murine histopathological परीक्षा में त्रुटियों और परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए मानकीकृत स्वचालित प्रोटोकॉल को लागू करने के लिए है ।
हमारे ज्ञान के लिए, हम यहां पूरी तरह से स्वचालित ऊतक प्रसंस्करण और murine ऊतकों के ऊतकवैज्ञानिक मूल्यांकन के लिए embedding के लिए पहली प्रोटोकॉल का वर्णन; मानव नमूनों के विश्लेषण के लिए इन पैथोलॉजी इकाइयों में नियमित रूप से उपयोग किया जाता है । विधि की व्यवहार्यता का एक व्यावहारिक उदाहरण के रूप में, आंतों की सूजन का एक murine मॉडल का विश्लेषण किया गया है, यानी, जीर्ण कोलाइटिस मॉडल पीने के पानी में dextran सोडियम सल्फेट (DSS) के दोहराया प्रशासन की वजह से8 ,9. इस प्रयोगात्मक सेटिंग बारीकी से मानव भड़काऊ आंत्र रोगों (आईबीडी)10 के बाद से जैसा दिखता है DSS-इलाज जानवरों आंतों की सूजन के लक्षण प्रदर्शन, जैसे, वजन घटाने, ढीला मल या दस्त, और बृहदांत्र के साथ ही फाइब्रोसिस का छोटा 8,9,11. के रूप में मानव आईबीडी रोगियों के लिए मनाया, DSS उपचार एक जटिल रोग पाठ्यक्रम उत्पन्न करता है । इस संदर्भ में, विस्तृत ऊतकवैज्ञानिक मूल्यांकन ऊतक वास्तुकला के गहन परिवर्तन को समझने के लिए आवश्यक हैं । इस प्रकार, नमूना तैयारी की गुणवत्ता में वृद्धि के लिए वर्णित प्रोटोकॉल का कार्यांवयन murine प्रयोगात्मक सेटिंग्स के लिए ऊतकवैज्ञानिक और immunohistochemical विश्लेषण की व्याख्या पर निर्भर शोधकर्ताओं को लाभ हो सकता है । Murine मानव रोगों के प्रयोगात्मक मॉडल ऊतक वास्तुकला के परिवर्तन शामिल, सेलुलर ऊतक घुसपैठ या विभिन्न ऊतकों और अंगों में सूजन की उपस्थिति (आंत, मस्तिष्क, जिगर, त्वचा) की वृद्धि की गुणवत्ता का उपयोग कर सकते histopathological परीक्षा के लिए सैंपल तैयार ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Absolute Ethanol anhydrous</td>
			<td>Carlo Erba</td>
			<td>414605</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absolute ETOH</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td>02860-1L</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium Potassium Sulfate</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>A6435</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aniline Blue</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>415049</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>carbol Fuchsin</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>C4165</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD11b (clone M1/70)</td>
			<td>TONBO biosciences</td>
			<td>35-0112-U100</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD20 IHC (clone SA275A11)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>150403</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD3 (17A2)</td>
			<td>TONBO biosciences</td>
			<td>35-0032-U100</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD4 (GK1.5)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>552051</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45.2 (clone 104)</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>109837</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD8 (53-6.7)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>553031</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citrate Buffer pH 6 10X</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>C9999</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dab</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 1X</td>
			<td>Microgem</td>
			<td>L0615-500</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DSS</td>
			<td>TdB Consultancy</td>
			<td>DB001</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>E9884</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EnVision Flex Peroxidase-Blocking Reagent</td>
			<td>DAKO</td>
			<td></td>
			<td>compreso in GV80011-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EnVision Flex Substrate</td>
			<td>DAKO</td>
			<td></td>
			<td>compreso in GV80011-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EnVision Flex/HRP</td>
			<td>DAKO</td>
			<td></td>
			<td>compreso in GV80011-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EnVision Flex+ Rat Linker</td>
			<td>DAKO</td>
			<td></td>
			<td>compreso in GV80011-2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>VWR</td>
			<td>1.09844</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>F4/80 (clone BM8)</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>123108</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin</td>
			<td>PanReac</td>
			<td>2,529,311,215</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glacial acetic acid</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>71251</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat-anti-Rat-HRP</td>
			<td>Agilent DAKO</td>
			<td>P0448</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haematoxylin</td>
			<td>DIAPATH</td>
			<td>C0303</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LEICA Rotary microtome (RM2255)</td>
			<td>Leica</td>
			<td>RM2255</td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ly6g (clone 1A8)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>551459</td>
			<td>antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mercury II Oxide</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>203793</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Omnis Clearify Clearing Agent</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>CACLEGAL</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Omnis EnVision Flex TRS</td>
			<td>DAKO</td>
			<td>GV80011-2</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orange G</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>O3756</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraffin</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>7052</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peloris</td>
			<td>LEICA</td>
			<td></td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percoll</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>P4937</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640 without L-Glutamine</td>
			<td>Microgem</td>
			<td>L0501-500</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>STS020</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Teck Paraform Sectionable Cassette</td>
			<td>SAKURA</td>
			<td>7022</td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek Automated paraffin embedder</td>
			<td>Sakura</td>
			<td></td>
			<td>equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>J.T.Baker</td>
			<td>8080.1000</td>
			<td>reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using robotic systems to process and embed colonic murine samples for histological analyses

मानव रोगों की समझ बहुत पशु मॉडलों के अध्ययन के लिए धंयवाद विस्तार किया गया है । बहरहाल, प्रयोगात्मक मॉडल के histopathological मूल्यांकन के रूप में कठोर है कि मानव नमूनों के लिए आवेदन के रूप में की जरूरत है । दरअसल, विश्वसनीय और सटीक निष्कर्ष ड्राइंग गंभीर रूप से ऊतक अनुभाग तैयारी की गुणवत्ता से प्रभावित है । यहां, हम murine ऊतकों के histopathological विश्लेषण के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन है कि प्रक्रिया के दौरान कई स्वचालित कदम लागू करता है, प्रारंभिक तैयारी से murine नमूनों की आयल embedding के लिए । स्वचालित प्रक्रियाओं से कठोर प्रोटोकॉल मानकीकरण के माध्यम से methodological चर की कमी murine रोग विश्लेषण की समग्र विश्वसनीयता में वृद्धि करने के लिए योगदान देता है । विशेष रूप से, इस प्रोटोकॉल स्वचालित प्रसंस्करण और एंबेडिंग रोबोट प्रणालियों के उपयोग का वर्णन, नियमित रूप से ऊतक प्रसंस्करण और मानव नमूनों की आयल embedding के लिए इस्तेमाल किया, आंतों की सूजन के murine नमूनों की प्रक्रिया । हम निष्कर्ष है कि murine ऊतकों की histopathological परीक्षा की विश्वसनीयता मानकीकृत और स्वचालित तकनीक की शुरूआत पर काफी बढ़ जाती है ।

पीने के पानी में DSS के दोहराया प्रशासन द्वारा प्रेरित प्रयोगात्मक जीर्ण कोलाइटिस आंत्र सूजन बारीकी से मानव आईबीडी8,9जैसी की एक murine मॉडल है । चित्रा 1 , DSS-प्रेर?...

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Using Robotic Systems to Process and Embed Colonic Murine Samples for Histological Analyses

murine ऊतक प्रसंस्करण के लिए मानकीकरण की कमी के रूप में मानव नमूनों की तुलना में murine histopathological विश्लेषण की गुणवत्ता कम कर देता है । यहां, हम murine सूजन और uninflamed बृहदांत्र ऊतकों की histopathological परीक्षा प्रदर्शन करने के लिए नियमित रूप से प्रसंस्करण और मानव नमूनों embedding के लिए इस्तेमाल किया रोबोट प्रणालियों की व्यवहार्यता दिखाने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं ।

रोबोट प्रणालियों का उपयोग करने के लिए प्रक्रिया और ऊतकवैज्ञानिक विश्लेषण के लिए बृहदांत्र Murine नमूने एंबेड

The understanding of human diseases has been greatly expanded thanks to the study of animal models. Nonetheless, histopathological evaluation of ...

यह स्वचालित प्रोटोकॉल नियमित रूप से मानव नमूनों के प्रसंस्करण और एम्बेडिंग के लिए उपयोग किए जाने वाले रोबोटिक सिस्टम के साथ मुरीन ऊतकों की हिस्टोपैथोलॉजिकल तैयारी की अनुमति देता है, जिससे नमूनों की गुणवत्ता में काफी वृद्धि होती है। इस तकनीक के मुख्य फायदे यह हैं कि यह पद्धतिगत चर की संख्या को कम करता है और यह प्रक्रियात्मक चरणों के मानकीकरण में सुधार करता है। प्रक्रिया का प्रदर्शन, फ्रांसिस्का Boggio होगा ।फ्रांसिस्का बोगसियो मेरी प्रयोगशाला में काम करने वाला एक पैथोलॉजिस्ट है। एक पेट्री डिश में एक खंडित काम की थाली पर, तटस्थ बफर फॉर्मेलिन से फिक्स्ड मुरीन पेट के ऊतकों के नमूनों को स्थानांतरित करने के लिए छोटे चिमटी का उपयोग करके शुरू करें। कोलन को 0.2 से 0.3 सेंटीमीटर टुकड़ों में काटने के लिए बाँझ स्केलपेल का उपयोग करें, और चिमटी का उपयोग एक उन्मुख पैराफिन-एम्बेडिंग कैसेट के तीन गैर-आसन्न प्लास्टिक-फैलाहुआ युक्तियों में से प्रत्येक में एक खंड रखने के लिए करें।कैसेट को बंद करने और ग्रिड को प्लास्टिक सपोर्टिंग फ्रेम में डालें करने के लिए सावधानी से चार किनारों को पुश करें। फिर, नमूने की पहचान करने और कैसेट को ग्रिड में स्थानांतरित करने के लिए सहायक फ्रेम को लेबल करें। प्रोसेसिंग से एक घंटे पहले, स्वचालित प्रोसेसर को चालू करें।जब उपकरण इंगित करता है कि पैराफिन पिघल गया है, मैन्युअल रूप से स्वचालित प्रोसेसर में धातु की टोकरी डालें। जब सभी कैसेट डाले गए हों, तो टोकरी बंद करें और रिटॉर्ट का ढक्कन खोलें। प्रोसेसर के समर्पित आवास में टोकरी डालें और रिटॉर्ट ढक्कन बंद करें।तालिका में प्रदान की गई योजना के अनुसार लागू किए जाने वाले समाधानों, समय और तापमान के अनुक्रम का चयन करने वाले कार्य प्रोटोकॉल को परिभाषित करने के लिए इंस्ट्रूमेंट कंप्यूटर पर टचस्क्रीन का उपयोग करें। कैसेट बास्केट युक्त रिटॉर्ट को प्रोटोकॉल असाइन करने के लिए समर्पित कंप्यूटर आइकन पर क्लिक करें, और स्टार्ट बटन पर क्लिक करें। जब उपकरण एक समर्पित आइकन और अलार्म टोन के साथ प्रोटोकॉल के अंत की पुष्टि करता है, तो रिटॉर्ट ढक्कन खोलें और प्रोसेसर से टोकरी निकालें।ऊतक एम्बेडिंग से एक घंटे पहले, स्वचालित एम्बेडर को चालू करें और तब तक प्रतीक्षा करें जब तक कि पैराफिन पूरी तरह से पिघल न जाए जैसा कि उपकरण पर पैराफिन बाथ थर्मामीटर द्वारा इंगित किया गया है। मैन्युअल रूप से प्रोसेसर बास्केट से एम्बेडर रैक में 32 प्रोसेस्ड कैसेट तक स्थानांतरित करें और मुख्य एम्बेडर ढक्कन खोलें। रोबोटिक सिस्टम को सिग्नल करने के लिए टचस्क्रीन का इस्तेमाल करें कि एक रैक डाला जा रहा है और इनलेट हाउसिंग ढक्कन खोलें।इनलेट आवास में चार रैक तक डालें और इनलेट आवास ढक्कन बंद करें। फिर, टेबल में इंगित एम्बेडिंग प्रक्रिया शुरू करने के लिए टचस्क्रीन का उपयोग करें। जब उपकरण समर्पित आइकन के साथ प्रोटोकॉल के अंत की पुष्टि करता है, तो आउटलेट रैक को हटा दें और मुख्य एम्बेडर ढक्कन को बंद करें।फिर, रैक से एम्बेडेड ब्लॉकों को स्टोरेज बॉक्स में स्थानांतरित करें। कोलन छोटा, और प्रो भड़काऊ जीन की कोलोनिक अभिव्यक्ति, डेक्सट्रान सोडियम सल्फेट या डीएसएस प्रेरित सूजन की उपस्थिति स्कोरिंग के लिए व्यापक रूप से उपयोग किए जाने वाले पैरामीटर हैं। आंतों के लैमिना प्रोप्रिया में भड़काऊ कोशिकाओं की घुसपैठ को भी डीएसएस उपचार द्वारा काफी बढ़ाया जाता है।एच एंड ई के रूप में स्वचालन द्वारा संसाधित अनुपचारित नमूनों के धुंधला के रूप में प्रदर्शन किया, कम घुसपैठ भड़काऊ कोशिकाओं, एपीथेलियल परिवर्तन, और DSS इलाज जानवरों से नमूनों की तुलना में म्यूकोसल वास्तुकला में परिवर्तन से पता चलता है । स्वचालित उपकरणों द्वारा किए गए मुरीन ऊतक तैयारी और एम्बेडिंग की गुणवत्ता को अतिरिक्त रूप से सीडी 20 और मैलोरी ट्राइक्रोम स्टेनिंग के लिए इम्यूनोहिस्टोकेमिकल धुंधला द्वारा पुष्टि की जा सकती है। विशेष रूप से, स्वचालित नमूना प्रसंस्करण लगातार मैनुअल विधि द्वारा संसाधित नमूनों की तुलना में हिस्टोलॉजिकल मापदंडों के उच्च अनुपात के मूल्यांकन की अनुमति देता है।स्वचालित प्रोसेसर के तैयार होने की प्रतीक्षा करने के लिए ग्रिड में ऊतक को सही ढंग से डालने का ध्यान रखें, और पैराफिन को पूरी तरह से पिघलाने का इंतजार करें। इस विधि का उपयोग मानव हिस्टोलॉजिकल नमूनों के गुण के साथ किसी भी मुरीन ऊतक का हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण करने के लिए किया जा सकता है जिसका उपयोग मानव रोगविज्ञानियों के मुरीन मॉडल में किया जाएगा। यह तकनीक पहले से ही भड़काऊ ऊतक सूजन का अध्ययन करने के लिए सफल अध्ययन किया गया है, और कोलोरेक्टल मुरीन कैंसर के मॉडल का अध्ययन करने के लिए उपयोगी होगा।चूंकि इस प्रोटोकॉल में उपयोग किए जाने वाले कुछ अभिकर् ते खतरनाक हैं, इस प्रक्रिया को करते समय हमेशा सुरक्षात्मक दस्ताने, चश्मे और एक प्रयोगशाला कोट पहनना याद रखें।

Research

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