Name: fluorescent silver staining of proteins in polyacrylamide gels
Uploaded: 2019-04-21T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fluorescent Silver Staining of Proteins in Polyacrylamide Gels at JoVE.com

الكتاب يود أن يشكر باتريك تشان في مركز لاو وأي مينغ "الطب الترميمي"، ومعهد كارولينسكا، لدعمه التقني. عاشرا – س. ممتن للدعم من "مجلس البحوث السويدية" (منحة رقم 2017-06344).

1-إعداد هلام
ملاحظة: هذه المظاهرة يتبع بروتوكول قياسي تحضير الهلام لتلطيخ بعد وقت قصير من الحزب الديمقراطي الصربي-الصفحة12. وباختصار، الخطوات التالية تصف إعداد العينات وهلام التفريد.
<ol><li>أداء الحزب الديمقراطي الصربي صفحة مع 4%-12% مكررا-تريس البروتين الجل (1 مم، 1...

<ol>
	<li>Chevalier, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highlights+on+the+capacities+of+&amp;#34;Gel-based&amp;#34;+proteomics.">Highlights on the capacities of &amp;#34;Gel-based&amp;#34; proteomics.</a> Proteome Science. 8 (1), (2010).</li><li>Harris, L. R., Churchward, M. A., Butt, R. H., Coorssen, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+detection+methods+for+gel-based+proteomic+analyses.">Assessing detection methods for gel-based proteomic analyses.</a> Journal of Proteome Research. 6 (4), 1418-1425 (2007).</li><li>Gauci, V. J., Wright, E. P., Coorssen, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+proteomics:+assessing+the+spectrum+of+in-gel+protein+detection+methods.">Quantitative proteomics: assessing the spectrum of in-gel protein detection methods.</a> Journal of Chemical Biology. 4 (1), 3-29 (2011).</li><li>Candiano, G., Bruschi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blue+silver:+A+very+sensitive+colloidal+Coomassie+G-250+staining+for+proteome+analysis.">Blue silver: A very sensitive colloidal Coomassie G-250 staining for proteome analysis.</a> Electrophoresis. 25 (9), 1327-1333 (2004).</li><li>Chevallet, M., Luche, S., Rabilloud, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+staining+of+proteins+in+polyacrylamide+gels.">Silver staining of proteins in polyacrylamide gels.</a> Nature Protocols. 1 (4), 1852-1858 (2006).</li><li>Jin, L. T., Hwang, S. Y., Yoo, G. S., Choi, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitive+silver+staining+of+protein+in+sodium+dodecyl+sulfate-polyacrylamide+gels+using+an+azo+dye,+calconcarboxylic+acid,+as+a+silver-ion+sensitizer.">Sensitive silver staining of protein in sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels using an azo dye, calconcarboxylic acid, as a silver-ion sensitizer.</a> Electrophoresis. 25 (15), 2494-2500 (2004).</li><li>Celis, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cell Biology: A Laboratory Handbook. , (2006).</li><li>Bartsch, H., Arndt, C., Koristka, S., Cartellieri, M., Bachmann, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+Staining+Techniques+of+Polyacrylamide+Gels.">Silver Staining Techniques of Polyacrylamide Gels.</a> Methods in Molecular Biology. 869 (1), 481-486 (2012).</li><li>Rabilloud, T., Vuillard, L., Gilly, C., Lawrence, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver-staining+of+proteins+in+polyacrylamide+gels:+a+general+overview.">Silver-staining of proteins in polyacrylamide gels: a general overview.</a> Cellular and Molecular Biology. 40 (1), 57-75 (1994).</li><li>Zhou, M., Yu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+Analysis+by+Two-Dimensional+Polyacrylamide+Gel+Electrophoresis.">Proteomic Analysis by Two-Dimensional Polyacrylamide Gel Electrophoresis.</a> Advances in Protein Chemistry. 65 (1), 57-84 (2003).</li><li>Xie, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorogenic+Ag+-Tetrazolate+Aggregation+Enables+Efficient+Fluorescent+Biological+Silver+Staining.">Fluorogenic Ag+-Tetrazolate Aggregation Enables Efficient Fluorescent Biological Silver Staining.</a> Angewandte Chemie International Edition. 57 (20), 5750-5753 (2018).</li><li>. Protein gel electrophoresis technical handbook Available from: <a target="_blank" href="https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/global/Forms/PDF/protein-gel-electrophoresis-technical-handbook.pdf">https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/global/Forms/PDF/protein-gel-electrophoresis-technical-handbook.pdf</a> (2015)</li></ol>

قدم هنا هو فضة فلورسنت رواية تلطيخ الأسلوب للبروتينات في المواد الهلامية polyacrylamide. ويدمج هذه الاستراتيجية البقع الفضية التقليدية والبقع الفلورسنت. التحقيق مآثر المصبوغة الربط الانتقائي لايون الفضة للبروتينات كما هو الحال في غيرها الفضة بقع لكنها توظف فضية فلوروجينيك حساسة للغاية TPE-...

وكانت العديد من أساليب المصبوغة المستخدمة لتصور البروتينات بعد التفريد هلام، على سبيل المثال استخدام الأصباغ اللونية مثل "أخذ الأزرق الرائعة"، والفضة وصمة عار، والأسفار، أو المشعة وسم21،، 3 , 4-تلوين الفضة يعتبر أحد الأساليب الأكثر حساسية للكشف عن البروتين التي تتطلب الكواشف بسيطة ورخيصة. فإنه يمكن تصنيفها إلى عائلتين الرئيسية: وصمة وصمة الفضي أممونياكال ونترات الفضة5،6. في أسلوب الفضي أمونياكال القلوية، أنتجت مع هيدروكسيد الصوديوم والأمونيا المجمع ديامينى الفضة وخفضت إلى الفضي المعدني أثناء تطوير استخدام حل فورمالدهايد حمضية. وصمة عار يستوعب كفاءة للبروتينات الأساسية ولكن يظهر أداء الشبهة لبروتينات حمضية ومحايد وهو، علاوة على ذلك، يقتصر على جليكاين الكلاسيكية ونظم الغرواني الكهربي والتورين. في المقابل، استغلال البقع نترات الفضة بيو-تقارب عالية من أيونات الفضة للبروتين، وأساساً سلفهيدريل والكربوكسيل مجموعات من السلاسل الجانبية، وتميل إلى وصمة عار بروتينات حمضية أكثر كفاءة7. بعد أيون الفضة ملزمة، يتم تطبيق حل النامي (عادة مصنوعة من محلول كربونات المعادن يحتوي على ثيوسولفاتي فورمالدهايد والصوديوم) للحد من أيونات الفضة للحبوب الفضي المعدني، التي بناء لون الظلام-براون تصور نطاقات البروتين.
على الرغم من تلطيخ الفضة معروفة جيدا لبراعة وحساسية عالية منذ تطورها في السبعينات8، يعتبر الأسلوب كثيرا ما صعبة كما. أساليب تلوين الفضة خطوات مقيدة بالوقت وإظهار إمكانية تكرار نتائج منخفضة. منذ لون فضي وصمة عار لا عادة موحدة وتعتمد على فترة خطوة التخفيض، مما يصعب التحكم، وصمة عار الفضة ليس أسلوب كمي، وهكذا، لا ينصح لجل مقارنة بين الدراسة والبروتين الكمي9. قد تستخدم أساليب محسنة في حساسية الألدهيدات التي يمكن أن توفر أيضا موحد أكثر تلطيخ10. ومع ذلك، وهذا على حساب إجراء مزيد من التحليل المصب بسبب كروسلينكينج للبروتينات التي الألدهيدات. بروتوكولات سريعة معظمها الجمع أو تقصير خطوات للحد من الوقت، المساس بإمكانية تكرار نتائج والتوحيد من وصمة عار5. نتيجة لذلك هناك العديد الفضة تلطيخ المتغيرات داخل جل البروتين تلطيخ، كل الأمثل لتناسب متطلبات معينة؛ على سبيل المثال، البساطة، والحساسية، أو الببتيد معدل الاسترداد لتحليل المتلقين للمعلومات. هذه السمات قد تؤثر أيضا على بعضها البعض، وتلبية جميع الاحتياجات في بروتوكول واحد يمكن أن يكون صعباً.
في هذا العمل، نحن نقدم فضية فلورسنت جديدة تلوين الأسلوب للكشف عن البروتين في جل polyacrylamide. في هذا الأسلوب، نستخدم تحقيق فلوروجينيك لأيونات الفضة، TPE-4TA (الشكل 1)، أن تصور البروتينات مشربة فضة11. تم تصميم TPE--4TA بمبدأ الانبعاثات الناجمة عن تجميع (المترشح). هو غير عندما تذوب في المحلول، ولكن شدة حضور أيونات الفضة. بالاستعاضة عن تطوير اللونية في البقع الفضية التقليدية مع فلوروجينيك وضع الخطوة، يتيح الأسلوب الفضة الفلورسنت تلطيخ قوية من مجموع البروتينات مع خلفية انخفاض.
وعلاوة على ذلك، أظهرت وصمة الفضة الفلورسنت مجموعة خطي دينامية جيدة لتقدير البروتين، وقابلة للمقارنة مع وصمة "روبي سيبرو" يستخدم على نطاق واسع ولا يمكن تحقيقه مع البقع الفضية التقليدية. يمكن تصويرها على أنظمة التوثيق جل استخداماً مع مصباح الأشعة فوق البنفسجية الهلام (الطول الموجي الإثارة: 302/365 نانومتر القناة؛ والانبعاثات: ~ 490-530 نانومتر) في مختبرات بيولوجية عديدة.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td> 
			LDS Sample Buffer (4X)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>NP0007</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td> 
			4-12% Bis-Tris Protein Gels, 1.0 mm, 15-well</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>NP0323BOX</td>
			<td>Precast gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sample Reducing Agent (10X)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>NP0004</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MES SDS Running Buffer (20X)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>NP0002</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Gel Tank</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A25977</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>300W Power Supply (230 VAC)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>PS0301</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Unstained Protein Ladder</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>26614</td>
			<td>Sample</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver nitrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>31630-25G-R</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Bragg and co.</td>
			<td>42520J</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>J.T. Baker</td>
			<td>103201A</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milli-Q Synthesis A10</td>
			<td>Merk</td>
			<td>-</td>
			<td>Provides 18.2 M&#937;.cm water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gel documentation system (c600 model)</td>
			<td>Azure biosystems</td>
			<td>-</td>
			<td>Equipment</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fluorescent silver staining of proteins in polyacrylamide gels

تلوين الفضة أسلوب قياس ألوان المستخدمة على نطاق واسع لتصور نطاقات البروتين في المواد الهلامية polyacrylamide عقب الصوديوم دوديسيل كبريتات-polyacrylamide هلام التفريد (الحزب الديمقراطي الصربي صفحة). وقد البقع الفضية الكلاسيكية بعض العيوب، مثل خلفية عالية تلطيخ، استرداد البروتين الفقراء، وانخفاض إمكانية تكرار نتائج، مجموعة ديناميكية خطي ضيقة للقياس الكمي، والتوافق محدودة مع الطيف الكتلي (مللي ثانية). الآن، مع استخدام مجس Ag+ فلوروجينيك، TPE 4TA، قمنا بتطوير فضية فلورسنت تلطيخ الأسلوب للتصور مجموع البروتين في المواد الهلامية بولياكريلاميدي. ويتجنب هذا وصمة عار جديدة بخطوة التخفيض الفضة مزعجة في البقع الفضية التقليدية. وعلاوة على ذلك، يوضح وصمة الفضة الفلورسنت إمكانية تكرار نتائج جيدة، وحساسية، والكمي الخطي في الكشف عن البروتين، يجعلها وصمة عار جل بروتين مفيدة وعملية.

نطاقات البروتين الملون بوصمة الفضة الفلورسنت يحمل فلورية خضراء مكثفة تحت مصباح الأشعة فوق البنفسجية 365 نانومتر. جميع نطاقات البروتين 14 (10-200 كاتشين)، من أعلى إلى أسفل، كانت واضحة للعيان، ربط جيدا مع 14 منها حمراء اللون الملون ب صبغ (الشكل 2) "روبي سيبرو"<sup class=...

Watch this Scientific Journal Video about Fluorescent Silver Staining of Proteins in Polyacrylamide Gels at JoVE.com

Fluorescent Silver Staining of Proteins in Polyacrylamide Gels

هنا، يمكننا وصف بروتوكول مفصلة تبين نيون جديدة صبغة تقنية للكشف عن البروتين الكلي في الهلام بولياكريلاميدي. يستخدم البروتوكول تحقيق دورة على الأسفار الخاصة بايون فضة، الذي يكشف Ag+-البروتين المجمعات، ويزيل بعض القيود التقليدية البقع الفضية اللونية.

تلوين الفضة الفلورسنت من البروتينات في المواد الهلامية Polyacrylamide

Silver staining is a colorimetric technique widely used to visualize protein bands in polyacrylamide gels following sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide ...

هذا هو أسلوب رواية هلام تلطيخ التي تستخدم مسابير الفضة الفلوروجينية لتحويل تلطيخ الفضة التقليدية إلى تلطيخ الفضة الفلورسنت. وأظهرت هذه الطريقة تحسن الأداء مقارنة مع تلطيخ نترات الفضة التقليدية و SYPRO روبي تلطيخ أثناء استخدام بروتوكول بسيط ومباشر دون الألدهيدات. إثبات الإجراء سيكون أليكس وونغ، مساعد باحث من مختبري.لبدء هذا الإجراء، تمييع عينات البروتين مع محلول يحتوي على الماء المقطر، عازلة LDS، وعامل تقليل العينة. إعداد خزان هلام صغير مملوءة المخزن المؤقت MES لتنفيذ SDS-PAGE مع 4-12٪ البيس تريس هلام البروتين. قم بتحميل الآبار مع عينة البروتين المعدة، ثم قم بتشغيل الجل بجهد ثابت يبلغ 200 فولت لمدة 30 دقيقة.بعد الكهرباء، غمر الجل في محلول 100 ملليلتر يحتوي على الإيثانول وحمض الخليك على شاكر مداري واحتضان مرتين لمدة 30 دقيقة لكل من درجة حرارة الغرفة بينما تهتز عند 50 دورة في الدقيقة. بعد ذلك، اغسل الجل ثلاث مرات بالماء فائق الخطورة في وعاء نظيف مع كل غسل يدوم 10 دقائق. أولا، حل 0.01 غرام من نترات الفضة في 10 ملليلتر من المياه فائقة الpure لإعداد محلول الأسهم مع تركيز 0.1٪ إضافة 100 ميكرولترات من محلول الأسهم إلى 100 ملليلتر من المياه فائقة الpure لجعل حل النترات الفضة العمل.في غطاء الدخان، غمر الجل في 100 ملليلتر من محلول عمل نترات الفضة في غرفة زجاجية مختومة. استخدام رقائق الألومنيوم لحماية هلام من الضوء أثناء التشريب واحتضان لمدة ساعة واحدة في حين تهتز في 50 دورة في الدقيقة على شاكر المدارية. بعد ذلك، يغسل الجل مرتين بالماء فائق الخطورة في وعاء نظيف، مع كل غسل باستخدام ما يقرب من 100 ملليلتر من الماء وتستمر 60 ثانية.من المهم استخدام المياه فائقة السخ لتنظيف هلام بعد خطوة التشريب الفضة لتقليل تلطيخ الخلفية. أولا، إضافة 50 ملليلتر من الماء فائقة الpure إلى ثلاثة ملليغرام من صبغة TPE-4TA. سونيكات الحل لمدة ثلاث دقائق وإضافة خمس ميكروليترات من محلول هيدروكسيد الصوديوم واحد المولار في ما بين كل جلسة sonication للمساعدة في حل الصبغة، وعادة ما تصل إلى ثلاث مرات.ثم تحقق من الفلوريسين من الحل تحت مصباح الأشعة فوق البنفسجية 365 نانومتر للتأكد من أن يتم حل صبغة تماما. فقط الحلول الضعيفة أو غير المُفَيِّة تشير إلى الإنحلال الكامل. لإعداد محلول تطوير الفلوروجينيك، أضف 10 ملليلترات من محلول الأسهم TPE-4TA إلى 90 ملليلتر من الماء فائق السخاء.استخدم مقياسًا للرُحَرِحِيّة لفحصِ مَحَرَقِلِ الحل. ضبط الحل إلى الأس هيدروكسيد الحموضة بين 7 و 9، وذلك باستخدام محلول هيدروكسيد الصوديوم المخفف أو حمض الخليك إذا كان الأس هيدروكسيد الحموضة خارج النطاق. بعد ذلك نقل الجل إلى وعاء نظيف وقابل للتسرب مع 100 ملليلتر من محلول تطوير الفلوروجيني وضمان أن الجل مغمور تمامًا.ختم الحاوية وتغطية لحمايتها من الضوء. هز الحاوية بين عشية وضحاها على شاكر المدارية في 50 دورة في الدقيقة وفي درجة حرارة الغرفة. نقل هلام إلى وعاء نظيف وdestain في 100 ملليلتر من 10٪ الإيثانول لمدة 30 دقيقة.ثم شطف الجل في الماء فائق الخطورة لمدة خمس دقائق. يمكن تصور الجل على مهاتر على مقاعد البدلاء أو صورة على آلة وثائق هلام في قناة 365 نانومتر أو قناة 302 نانومتر. في هذه الدراسة، يتم استخدام طريقة تلطيخ الفضة الفلورسنت رواية لطخة البروتينات في المواد الهلامية بوليكل.تظهر أشرطة البروتين الملطخة ببقعة الفضة الفلورسنت خضراء شديدة تحت مصباح الأشعة فوق البنفسجية 365 نانومتر. جميع 14 نطاقات البروتين واضحة للعيان وترتبط بشكل جيد مع العصابات ذات اللون الأحمر الملطخة بصبغة روبي SYPRO. ويبدو أن هذا الأسلوب تلطيخ الفضة الفلورسنت لديها دقة عالية.بالنسبة لبعض نطاقات البروتين، فإن حساسية البقعة الفضية الفلورية هي أيضا أفضل قليلا من تلك التي في وصمة عار الفلورسنت SYPRO روبي. على وجه الخصوص تحسين أداء هذه البقعة لنطاقات البروتين بين 10 و 40 كيلودالتون، مما يدل على أن الطريقة الجديدة مفيدة بشكل خاص للكشف عن البروتينات ذات الوزن الجزيئي المنخفض. وكما يمكن أن نرى، تشير البيانات أيضا إلى أن وصمة الفضة الفلورسنت يعطي خطية جيدة وموحدة لجميع البروتينات 14 على مدى نطاق واسع نسبيا من كمية البروتين.في حين أن بقعة نترات الفضة أعطت مستوى عال من إشارة الخلفية والقمم المشوهة ، اكتشفت البقعة الفضية الفلورية النطاقات ذات التباين الجيد والتوزيع الموحد للكثافة مقارنة بصبغة SYPRO روبي عبر جميع البروتينات الـ 14. خطوات الغسيل مهمة لأنها تحد من حل التثبيت المتبقي من تعطيل التشريب الفضي أو التنمية الفلورية. عند استخدام نترات الفضة، تجنب ملامسة الجلد.تنظيف أي انسكابات على الفور. ارتداء الملابس الواقية والقفازات والتخلص من النفايات الكيميائية.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Characterization of Multi-subunit Protein Complexes of Human MxA Using Non-denaturing Polyacrylamide Gel-electrophoresis

توصيف مجمعات متعدد فرعية البروتين من MXA الإنسان عن طريق عدم تغيير طبيعة بولي أكريلاميد هلام الكهربائي

The formation of oligomeric complexes is a crucial prerequisite for the proper structure and function of many proteins. The interferon-induced antiviral ...

Voltage-clamp Fluorometry in Xenopus Oocytes Using Fluorescent Unnatural Amino Acids

Voltage-clamp Fluorometry in Xenopus Oocytes Using Fluorescent Unnatural Amino Acids

الجهد المشبك فلوروميتري في<em&gt; القيطم</em&gt; البويضات باستخدام الفلورسنت الأحماض الأمينية غير طبيعية

Voltage-Clamp Fluorometry (VCF) has been the technique of choice to investigate the structure and function of electrogenic membrane proteins where ...

Isolation of Glomeruli and In Vivo Labeling of Glomerular Cell Surface Proteins

Isolation of Glomeruli and In Vivo Labeling of Glomerular Cell Surface Proteins

عزل جلوميرولي و في فيفو وسم البروتينات السطحية خلية الكبيبي

Proteinuria results from the disruption of the glomerular filter that is composed of the fenestrated endothelium, glomerular basement membrane, and ...

How to Quantify the Fraction of Photoactivated Fluorescent Proteins in Bulk and in Live Cells

كيفية تحديد جزء صغير البروتينات الفلورية فوتواكتيفاتيد بكميات كبيرة وفي الخلايا الحية

Photoactivatable and -convertible fluorescent proteins (PA-FPs) have been used in fluorescence live-cell microscopy for analyzing the dynamics of cells ...

Structure Solution of the Fluorescent Protein Cerulean Using MeshAndCollect

بنية حل أزرق نيون البروتين باستخدام ميشاندكوليكت

X-ray crystallography is the major technique used to obtain high resolution information concerning the 3-dimensional structures of biological ...

Use of Recombinant Fusion Proteins in a Fluorescent Protease Assay Platform and Their In-gel Renaturation

استخدام البروتينات الانصهار المؤتلف في منصة فحص حوزتي فلورسنت وما ريناتوريشن في جل

Proteases are intensively studied enzymes due to their essential roles in several biological pathways of living organisms and in pathogenesis; therefore, ...

Fluorescent Visualization of Mango-tagged RNA in Polyacrylamide Gels via a Poststaining Method

التصور الفلورسنت من الحمض النووي الريبي المانجو الموسومة في المواد الهلامية البولي أكريلاميد عن طريق طريقة بوستينينغ

Native and denaturing polyacrylamide gels are routinely used to characterize ribonucleoprotein (RNP) complex mobility and to measure RNA size, ...

Localization of SUMO-modified Proteins Using Fluorescent Sumo-trapping Proteins

توطين البروتينات المعدلة السومو باستخدام السومو الفلورسنت-البروتينات الملائمة

Here we are presenting a novel method to study the sumoylation of proteins and their sub-cellular localization in mammalian cells and nematode oocytes. ...

Characterizing Cellular Proteins with In-cell Fast Photochemical Oxidation of Proteins

توصيف البروتينات الخلوية مع الأكسدة الضوئية السريعة في الخلية من البروتينات

Fast photochemical oxidation of proteins (FPOP) is a hydroxyl radical protein footprinting method used to characterize protein structure and interactions. ...

Transverse Sectioning of Mature Rice (Oryza sativa L.) Kernels for Scanning Electron Microscopy Imaging Using Pipette Tips as Immobilization Support