Name: reproductive techniques for ovarian monitoring and control in amphibians
Uploaded: 2019-05-12T12:30:00
Duration: 4 min 37 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians at JoVE.com

تود ناتالي كالاتايود أن تشكر الدكتورة باربرا دورانت على التدريب والمساعدة في مجال الموجات فوق الصوتية وعلى شركة Exploradora de Immuebles, S.A. (EISA) على منحها مساعدات مالية لموقفي المشارك في البحث في SDZG. شكرا ً للدكتورة كايلي كان على تعليقاتها على المخطوطة وكذلك على المراجعين الرسميين (أياً كانوا). بفضل جوناثان دين زميلنا الصيفي 2018، معهد حديقة الحيوان في سان دييغو لبحوث الحفظ لتوفير الصور (الشكل1A،B). تعرب مونيكا ستوبس عن تقديرها لجمعية حدائق الحيوان وصندوق الهبات لحفظ أحواض السمك وصندوق ديزني العالمي لحفظ الطبيعة على تقديم الدعم المالي لإنشاء مجموعة السكان النيكتوروس الأسيرة. وبالإضافة إلى ذلك، تلقى الدعم أيضا من خلال تبرعات خاصة من المحامية البرمائية السيدة إيريس دي لا موت. شكرا، يتم تقديم الشكر إلى السيد كريستوفر ديشانت والدكتور مارك كامبل لمساهمتهم الكبيرة في البحث.

وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.

وتوفر المناولة المباشرة والمراقبة البصرية والتدابير المورفومترية تقنيات غير غازية وهي أول معايير تقييم لتحديد المرحلة الإنجابية للإناث. ومع ذلك، تظهر هذه الدراسة أن المبيضين الجاذبين لا يمكن دائما أن يتم التعرف عليها بشكل موثوق عن طريق الجس. اعتمادا على الأنواع، يمكن في بعض الأحيان الكشف عن المبيضين الجاذبية بصريا من خلال شبه شفافة (الشكل13A،B) أو الجلد شفافة تماما على الجانب البطني من الحيوان (الشكل13C). الإناث التي أكملت oviposition يمكن أن تظهر تغييرات واضحة على مظهرها بالمقارنة مع الإناث gravid (على سبيل المثال، الجلد فضفاضوفقدان ما يصل إلى 30٪ من كتلة الجسم، الشكل 13D). أثناء التكاثر، سيعرض الذكور والإناث بعض السلوكيات التي توفر معلومات حول القرب من الإباضة وأوفيست. في حالة R. muscosa مؤشرات على أن أنثى قريبة من oviposition تبدأ مع دخول الإناث handstands.
تطبيق تكنولوجيا الموجات فوق الصوتية على Anurans وCaudates يسمح بتشخيص وجود أو غياب البيض وما إذا كان يرتبط oviposition مع الإفراج الكامل أو الجزئي من البيض المتقدمة. وهكذا، توفر هذه الطريقة تقييمًا أكثر اكتمالًا ودقة للحالة الإنجابية دون أن تقتصر على تحديد حالة الجاذبية/غير الجاذبة من خلال تقنية التصور التي تختلف باختلاف البشرة في البطن، أو اتساق البشرة بين الأنواع البرمائية المختلفة. يمكن إجراء الموجات فوق الصوتية بسهولة نسبية ومع القليل من الإجهاد على الحيوانات (الشكل5 والشكل 13)ويمكن استخدامها لتوصيف الدورات الإنجابية وتحديد الحالة الإنجابية4. ومن الأهمية بمكان أن تصبح على دراية بالأنواع؛ ومع ذلك، أظهرت هذه الدراسة أن Necturus و R. muscosa تشترك في علامات النمو المشتركة في أنماطالإنجاب مما يسمح لتصنيف مماثل للمرحلة الإنجابية (الشكل5). من خلال هذه التكنولوجيا هناك الآن أدلة على أن تطوير البيض عالية في النكتورو الأسير وR. muscosa وأن كلا النوعين تتبع نمط موسمي. على الرغم من أن أسباب هذه الظواهر غير معروفة وتتطلب المزيد من التحقيق، دون استخدام الموجات فوق الصوتية، فإن العديد من مجالات خلل المبيض، مثل الاحتفاظ بالبيض وoviposition الجزئي، قد ذهبت دون الكشف عنها. وسوف تستخدم التطبيقات المستقبلية لهذه التقنية لتحديد ما إذا كان ينبغي اختيار الإناث للتربية في أي سنة معينة وما إذا كان أوفيستس قد اكتمل.
بروتوكول جمع الدم، مثل تلك المقدمة في R. muscosa، وهو فعال على حد سواء ويسبب الحد الأدنى من الضائقة للحيواني ، هو الأمثل لدراسة ملامح هرمون في الميورانين الأسير والبرية اشتعلت (Calatayud ، غير منشورة). حتى الآن, لا توجد معلومات بشأن ملامح هرمون السنوي من الأسير R. muscosa, وبالتالي, لا توجد معرفة حول كيفية تأثير الهرمونات على صحتهم والإنجاب. وعلاوة على ذلك، مع وجود أدلة على أن الإناث من هذا النوع قد لا يكون مربي السنوي، والتنميط الهرموني سيكون وسيلة أخرى لتتبع دورات المبيض. جنبا إلى جنب مع الموجات فوق الصوتية, تحليل هرمون قد يؤدي إلى التنبؤ بشكل أفضل ما الإناث سوف تكون جاهزة لoviposition. وعلاوة على ذلك، تم في العام الماضي توثيق حالتين من الجنس بين الجنسين في السكان الأسيرر ر. موسكوسا. وبالإضافة إلى ذلك، لوحظ تطور منصات الإبهام على بعض الإناث المؤسسات الأكبر سنا. أسباب هذا حاليا قيد التحقيق ولكن النتائج الأولية تشير إلى أنه قد تتصل التغيرات في مستويات هرمون تستوستيرون (كالاتايود, غير منشورة). الدورات الهرمونية المميزة في الإناث من مختلف الأعمار سوف تساعدنا على فهم لماذا الإناث قد تتطور الخصائص الجنسية الثانوية المرتبطة بالذكور وما إذا كان هذا هو المتوقع في السكان المسنين.
وقد استخدم العلاج الهرموني الخارجي للتغلب على الاختلالات الإنجابية التي كثيرا ما تواجه في البرمائيات الأسيرة. ومع ذلك، بالنسبة لكل من السكان R. muscosa وNecturus في هذه الدراسة، لم يتم الكشف عن أي اختلافات كبيرة في oviposition بين الإناث المعالجة بالهرمونات والسيطرة على مدى فترة 2 و 5 سنوات من الزمن، على التوالي. وهذا قد يشير إلى أن بروتوكول إدارة هرمون, جرعات, فتيلة ومزيج هرمون المستخدمة لم تكن كافية للأنواع. تحليل أدق للتاريخ الإنجابي الفردي للإناث يشير إلى R. muscosa قد لا تواجه تربية سنوية، والتي يمكن أن تفسر أيضا عدم وجود تأثير هرموني لوحظ في الإناث المعالجة. لأن نسبة معينة من الإناث تخطي باستمرار تربية كل عام، وفهم التاريخ الطبيعي للأنواع يمكن أن تساعد في تحديد ما إذا كانت هناك حاجة للهرمونات الخارجية ومتى أنها قد تكون أكثر فعالية. ويمكن تطبيق الإجراءات المبينة في هذه المادة على عدد من الأنواع (الجدول 1) وهي للأنواع التي تتراوح بين 5 ز و 150 غرام؛ قد تتطلب الحيوانات الأكبر محاقن مختلفة ومقاييس إبرة. يختلف موقع الحقن مع بعض الهرمونات التي تتطلب داخل العضلات، داخل العضد، تحت الجلد أوالحقن داخل tradermal (الشكل 7).
الجراحة لغرض استئصال المبيض هي طريقة شائعة تستخدم في مختلف الأنواع البرمائية للحصول على البويضات للدراسات الجنينية. ويمكن أيضا أن يشار إلى استئصال المبيض للسيطرة على السكان والمسائل الطبية مثل الاحتفاظ بالبيض. في حالة استئصال المبيض الجزئي الذي يتم فيه حصاد البويضات لأغراض البحث، يجب أن تضمن الجراحة بقاء الحيوان إنجابياً. وقد أظهرت إدارة PGF2α بعض الوعد في حل الاحتفاظ البيض في الإناث R. muscosa. في العديد من الأفراد، أثار PGF2α ترسب كامل من البيض الاحتفاظ بها سابقا ولكن في حالات أخرى حدث ترسب جزئي فقط تتطلب تجريد يدوي لإزالة جميع البيض. في حين أن PGF2α قد تكون بمثابة بديل لعملية جراحية للاحتفاظ بالبيض في R. muscosa, قدرتها على علاج الظروف المرضية المماثلة في البرمائيات الأخرى سوف تتطلب التحقق من صحة الأنواع الخاصة. عندما يتم تكليف التدخل الجراحي للمريض أنوران أو Caudate، فمن الضروري لضمان مستوى كافية من التخدير قبل إجراء الشقوق. وثمة حاجة إلى مهارات مراقبة ذكية لتقييم ورصد الاستجابات المعيارية التعريفية والمتعلقة بالتعافي على النحو المبين في هذه الدراسة لكل من التدابير الضريبية. مرة واحدة على دراية التشريح محددة، ونهج جراحي مناسب، وhemostasis، والتلاعب الأنسجة لطيف وإدارة كافية بعد الجراحة، والعمليات الجراحية الإنجابية لا تشكل عقبات ساحقة.

وقد تم الاعتراف البرمائيات منذ فترة طويلة كنماذج بيولوجية وطبية هامة من قبل مجموعة واسعة من التخصصات البحثية. وقد تم تطبيق البيانات التي تم الحصول عليها من خلال دراسة أنواع معينة مثل Xenopus laevis وX. tropicalis، وضفدع ليوبارد (Lithobates (سابقا رنا) pipiens) وaxolotl (Ambystomamexicanum)إلى عدد من الأنواع الفقارية الأخرى، بما في ذلك البشر. توفر تقنيات الطب البيطري وتربية الأفراد والتقنيات الإنجابية المساعدة التي انبثقت عن دراسة هذه البرمائيات وغيرها من البرمائيات المساعدة لأولئك المكلفين بتطوير الرعاية الناجحة للسكان النادرين في الأسر وإعالتهم واستدامتهم 1 , 2 , 3 , 4.
ويكتسب الاهتمام بالاستخدام المتزامن للنُهج القائمة على الحفظ في الموقع وخارجه لعكس اتجاه موجة الانقراض بالنسبة للعديد من الأنواع البرمائية المعرضة للخطر1و2. توفر هذه المقالة المنهجيات المتاحة حاليا لرصد ومراقبة وظيفة المبيض البرمائي في الأنواع النموذجية من أنوران وCaudates. بالإضافة إلى ذلك، يتم عرض التقنيات القائمة لمعالجة الأمراض الإنجابية الشائعة للاحتفاظ بالبويضات.
كما هو الحال في العديد من المجموعات التصنيفية، ينطوي التحكم في المبيض البرمائي على سلسلة من التفاعلات المتزامنة بإحكام بين البيئة وعلم وظائف الأعضاء. يتم فك شفرة درجة الحرارة والفترة الضوئية (المعروفة باسم الإشارات القريبة) من قبل العين والدماغ حيث يتم تحويلها بسرعة إلى العمليات الوراثية والهرمونية وcircadian (إشارات في نهاية المطاف)3،4. وتشمل أساليب رصد ومراقبة وظيفة المبيض المشمولة في هذه المقالة تقنيات الغازية وغير الغازية. اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (IACUC) متطلبات البحث والتدريس تعريف التقنيات غير الغازية مثل تلك التي من شأنها أن تسبب الحد الأدنى من أي ألم بدني أو ضائقة عقلية ولا تتطلب أي أدوية تخفيف الألم5. هنا، وتشمل التقنيات غير الغازية الفحص البصري والجس، والملاحظات السلوكية، والتقييمات المورفولومترية والموجات فوق الصوتية. على العكس من ذلك، تصنف تقنيات جمع الدم، وإدارة الهرمونات والجراحة (استئصال المبيض وإزالة البيض المحتفظ به) على أنها الغازية لأنها قد تؤدي إلى بعض الألم أو عدم الراحة وتتطلب التخدير أو العلاج بالعقاقير بعد الإجراءات.
يمكن دمج تقنيات مراقبة المبيض غير الغازية بسهولة في روتين الرعاية اليومية لمعظم البرمائيات الأسيرة. اعتمادا على الأنواع، يمكن في كثير من الأحيان تحديد جاذبية المبيض عن طريق التفتيش البصري البسيط (الضفدع الزجاجي). في حالات أخرى، قد يشير الجس إلى ما إذا كانت الأنثى مناهية. مؤشرات حالة الجسم المختلفة (BCI) مثل الوزن، طول خطم urostyle (SUL)، طول تنفيس خطم (SVL) ومؤشر الكتلة القياسية (SMI) متاحة للتنبؤ بوجود أو غياب البيض4،6،7، 8،9. ومع ذلك، ينبغي توخي الحذر مع تفسير النتائج لأن معظم لا تنظر في العمر، شكل الجسم أو تكوين (على سبيل المثال، الماء الاحتفاظ مقابل كتلة المبيض أو الدهون)6. يمكن تحقيق التشخيصات الإنجابية النهائية عن طريق الموجات فوق الصوتية مع مزيد من المعرفة المتعمقة المكتسبة فيما يتعلق بتطوير البيض وتنظيم دورة المبيض4،7. كما يوفر الموجات فوق الصوتية وسيلة لتأكيد ورصد الأمراض التناسلية والظروف الفسيولوجية المرتبطةبها 4،8.
بالإضافة إلى تقديم المعلومات المتعلقة بالحالة الصحية، يمكن استخدام عينات الدم لقياس الهرمونات الإنجابية. إذا كان التنميط هرمون هو الهدف النهائي, من المهم تجنب التأثيرات المتعلقة بالإجهاد التي قد تشوش بيانات الستيرويد النظامية. في حين أن أداة رصد قوية محتملة, لا يزال هناك دراسة تبين استجابات الغدد الصماء الفطرية لإدارة هرمون الخارجية في أي أنواع البرمائيات. يمكن أخذ الدم بأمان من عدة مواقع; في الضفادع وهذا يشمل الوريد البطني البطني، الضفيرةاللسانية، الوريد الفخذي والقلب 9،10. في Caudates، يتم جمع الدم من الوريد الذيل البطني. درجة التوغل، وكمية ضبط النفس المطلوبة، والحاجة إلى التخدير، وحساسية الجهاز المستهدف، وحجم الحيوان هي العوامل التي يجب أخذها في الاعتبار عند اختيار تقنية جمع للمريض البرمائي. سوف تقدم هذه المقالة تقنية جمع الدم من الفك العلوي للوجه أو الوريد العضلي الجلدي من الضفادع كما هو موضح في الأصل من قبل فورزان وآخرون9.
السيطرة على المبيض هو الأنواع الخاصة، وعلى هذا النحو، ينبغي اختبار بروتوكولات هرمون وتحسينها. بخلاف الموسمية وما يرتبط بها من بيئة هرمون تعميم, السيطرة المبيض قد تكون أيضا مرتبطة ارتباطا وثيقا إلى العمر, الوقت الذي يقضيه في الأسر والتعرض لإدارة هرمون المتكررة, التي لا توجد معلومات قليلة في الأدب11 , 12 , 13.أصبح تنفيذ العلاجات الهرمونية للحصول على السلوكيات الإنجابية، وإنتاج الجاميت، والنضج وoviposition نهجا أبلغ على نطاق واسع لحل المشاكل الإنجابية الشائعة المرتبطة الأسر4، 8،14،15،16. لأن آليات التحكم في التكاثر في الفقاريات يتم الحفاظ عليها بشكل كبير، وهناك عدد من الهرمونات، الببتيدات العصبية والأدوية المتاحة تجاريا المستخدمة علاجيا في المجموعات التصنيفية الأخرى التي يمكن أيضا أن تستخدم بشكل موثوق في عدد من الأنواع البرمائية(الجدول 1). Gonadotropin الإفراج عن هرمون (GnRH) وgonadotropin القرنية البشرية (hCG) (أو الاختلافات منها، أي PMSG وeCG)17،18، إما بشكل فردي أو في تركيبة ، وقد استخدمت على نطاق واسع في البرمائيات الأسير برامج تربية بما في ذلك: جبل روكي الجنوبي بوريال(Anaxyrus boreas boreas)4,19,20; العلجوم, [دسكي] [غوفر] ضفدع, [رنا] [سفوسا] ([لنغهورن] [إت ل.], [أونبوبّد])7; ال [غلف كوست] [وتردوغ], [نكتوروس] [ويري]20; وايومنغ العلجوم, Anaxyrus باكستري18; ال [بولّفروغ], [رنا] [كتّسبينا]21; العلجوم الأمريكي, Anaxyrus أمريكانوس22; ضفدع العشب, [لمنوديستر] [تسمنينس]23; [كوكي], [إلووثيرودلس] [كوكي]24; [إكسنبوس], [إكسنبوس] [لفيس]25; [غنثر] [لوادلت], [بسّدووبرين] [غينثري]26; ال [ليوبارد] شماليّة ضفدع, [ليثوبيتس] [ببينس]; الأرجنتيني القرن الضفدع ، سيراتوفاريس المزخرفة ، و ضفدع كرانويل القرن ، C. كرانويلى ، و والضفدع الأرضي الأمريكي، أودونوسفيرينوس أمريكانوس27؛ وسلامندر النار (سالاماندرا)228. هرمونات الستيرويد, مثل البروجسترون (P4), يتم الإبلاغ عنها أقل شيوعا ولكن أظهرت فعالية جيدة في الحصول على الإباضة وoviposition في بعض الأنواع من anurans16,18,29. البروستاجلاندين (وخاصة البروستاجلاندين 2-ألفا (PGF2α))تشارك في الإباضة جنبا إلى جنب مع الكورتيكوستيرويدات30،31،32،34 وتصل إلى مستويات عالية خلال المرحلة التمهيدية31.
في الدراسات المختبرية، PGF2α هو محفز قوي للإباضة31، بينما في الجسم الحي يمكن أن تحفز oviposition من البيض المحتجز في رنا muscosa4،30،32. مقتطفات الغدة النخامية هي أيضا محفزات فعالة من الإباضة15,16,34; ومع ذلك، فإن المخاوف المحيطة بالأمن البيولوجي وإمكانية انتقال الأمراض غالبا ً ما تكون رادعاً لمستعمرات تربية الأسرى عند النظر في هذا النهج35.
الجزء الأخير من هذه المقالة تفاصيل الإجراءات الجراحية ويوفر نهج بديلة لتوسيع دراسات المبيض أو المساعدة في حل الأمراض التناسلية. يتم إجراء استئصال المبيضات الأكثر شيوعا في البرمائيات للحصول على البويضات للبحوث الجنينية. ومع ذلك، فإنه يمكن أيضا أن توفر علاجا للبيض الاحتفاظ بها عندما تفشل خيارات أخرى. على الرغم من أن هذا الإجراء هو الغازية، والتي تتطلب التخدير الكامل والشقوق لفضح كتل البيض، فإنه لا يتطلب القتل الرحيم. وعلاوة على ذلك، بعد استئصال المبيض الجزئي، يمكن للالحيوانات جعل الشفاءالكامل والاستمرار في أن تكون نشطة الإنجابية بعد الجراحة 8،36.
البروتوكولات المذكورة أدناه الخطوط العريضة للأساليب الغازية وغير الغازية لمراقبة المبيض والرصد في أنورانو وCaudates. وتشمل الأنواع المحددة التي تم اختيارها لتوضيح التقنيات في Anurans R. الغشاء المخاطي وX. laevis. Necturus maculosus, N. beyeri, N. alabamensis, و A. mexicanum تشمل الأنواع المستخدمة لوصف تقنيات مماثلة في Caudates.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>GE logiq Book XP and 8C-RS probe 4e10 MHz GE Medical Systems</td>
			<td>GE medical systems</td>
			<td>GE logiq Book XP</td>
			<td>Ultrasound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aloka 500 7.5mHz linear or IBEX multi-frequency (10-6mHz) micro-convex</td>
			<td>GE medical systems</td>
			<td>8C-RS (10 MHz)</td>
			<td>Ultrasound probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD disposable U-100 insulin syringe (28-29 G needle)</td>
			<td>Mettler Electronics Corp CA</td>
			<td>Sonigel</td>
			<td>Ultrasound gel (water soluble, salt-free)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hormone</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gonadotropin releasing hormone</td>
			<td>BACHEM</td>
			<td>4012028</td>
			<td>synonym: [Des-Gly10, D-Ala6, Pro-NHEt9]-GnRH acetate 
			abbreviation: GnRH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lutenizing hormone releasing hormone</td>
			<td>BACHEM, Sigma-Aldrich</td>
			<td>4033013;&#160;&#160;&#160;&#160; L1898</td>
			<td>synonym: Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 acetate salt; 
			[D-Ala6}-LHRH acetate salt hydrate 
			abbreviation: LHRH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human chorionic gonadotropin</td>
			<td>BACHEM, Sigma-Aldrich</td>
			<td>4030270, 4018894; C1063, CG5, CG10</td>
			<td>synonym: Chorionic gonadotropin-&#946; (109-145)(109-119); Choriogonin, HCG (2,500IU, 5,000IU, 10,000IU) 
			abbreviation: hCG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prostaglandin 2&#945;</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P40424;</td>
			<td>synonym: (5Z,9&#945;,11&#945;,13E,15S)-9,11,15-Trihydroxyprosta-5,13-dienoic acid tris salt, PGF2&#945;&#8722;Tris; 
			abbreviation: PGF2&#945;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Follicle-stimulating hormone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F4021, F8174</td>
			<td>synonym: porcine, sheep 
			abbreviation: FSH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesterone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>46665;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; P7556</td>
			<td>synonym: Vetranal; P4 water soluble 
			abbreviation: P4</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pituitary extract</td>
			<td>na</td>
			<td></td>
			<td>synonym: Check papers for amphibian species derivation 
			abbreviation: PE</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pregnant Mare Serum Gonadotropin</td>
			<td>Prospec;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; Lee Biosolutions; Sigma-Aldrich</td>
			<td>HOR-272;&#160;&#160;&#160; 493-10; 9002-70-4</td>
			<td>synonym: Pregnant Mare Serum Gonadotropin 
			abbreviation: PMSG</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metaclopromide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M0763</td>
			<td>synonym: 4-Amino-5-chloro-N-[2-(diethylamino)ethyl]-2-methoxybenzamide, Methoxychloroprocainamide 
			abbreviation: MET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lucrin</td>
			<td>BACHEM; Sigma-Aldrich</td>
			<td>4033014;&#160;&#160; L0399</td>
			<td>synonym: Leuprorelin acetate 
			abbreviation: Lucrin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lutalyse</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td></td>
			<td>synonym: PGF2&#945; - Dinoprost tromethamine 
			abbreviation: Lut</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pimozide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P1793</td>
			<td>synonym: 1-[1-[4,4-bis(4-Fluorophenyl)butyl]-4-piperidinyl]-1,3-dihydro-2H-benzimidazol-2-one 
			abbreviation: PZ</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphiplex</td>
			<td>see above</td>
			<td></td>
			<td>synonym: Gonadotropin releasing hormone + metoclopramide 
			abbreviation: GnRH + MET</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ovopel</td>
			<td>Ovopel</td>
			<td>na</td>
			<td>synonym: GnRHa + dopamine receptor antagonist (administered 1 pellet/ kg) 
			abbreviation: Ovo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ovaprim</td>
			<td>Pentair aquatic eco-systems</td>
			<td>Ova10</td>
			<td>synonym: Salmon gonadotropin + domperidone 
			abbreviation: Ova</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Domperidone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D122</td>
			<td>synonym: 4-(5-Chloro-2-oxo-1-benzimidazolinyl)-1-[3-(2-oxobenzimidazolinyl)propyl]piperidine 
			abbreviation: DOM</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reproductive techniques for ovarian monitoring and control in amphibians

تتطلب السيطرة على المبيض والرصد في البرمائيات نهجا متعدد الأوجه. هناك العديد من التطبيقات التي يمكن أن تحفز بنجاح السلوكيات الإنجابية والحصول على الجيمتس والأجنة للبحوث الفسيولوجية أو الجزيئية. وتسهم البرمائيات في ربع إلى ثلث البحوث الفقارية، ومن المهم في هذا السياق إسهامها في معرفة الأوساط العلمية بالعمليات الإنجابية والتطور الجنيني. ومع ذلك، فإن معظم هذه المعارف مستمدة من عدد صغير من الأنواع. وفي الآونة الأخيرة، تطلب تدمير البرمائيات في جميع أنحاء العالم تدخلا متزايدا من جانب القائمين على حفظ الطبيعة. فمستعمرات التعافي والضمان الأسيرة التي لا تزال تظهر استجابة لخطر الانقراض تجعل البحوث والتطبيقات السريرية القائمة لا تقدر بثمن لبقاء وتكاثر البرمائيات المحتجزة تحت الرعاية البشرية. ويستند نجاح أي مجموعة من الأسرى على صحتها وتكاثرها والقدرة على تطوير ذرية قابلة للحياة تحمل إلى الأمام التمثيل الجيني الأكثر تنوعا من أنواعها. بالنسبة للباحثين والأطباء البيطريين، فإن القدرة على رصد ومراقبة نمو المبيض والصحة أمر حتمي. يركز هذا المقال على تسليط الضوء على مختلف تقنيات الإنجاب المساعدة التي يمكن استخدامها لرصد، والسيطرة، حيثما كان ذلك مناسبا أو ضروريا، وظيفة المبيض في البرمائيات. ومن الناحية المثالية، ينبغي الحد من أي مسائل تتعلق بالإنجاب والصحة من خلال تربية الأسرى على النحو المناسب، ولكن، كما هو الحال مع أي حيواني، لا مفر من قضايا الصحة والأمراض الإنجابية. وتشمل التقنيات غير الغازية التقييمات السلوكية، والتفتيش البصري والجس والقياسات المورفولومترية لحساب مؤشرات حالة الجسم والموجات فوق الصوتية. وتشمل التقنيات الغازية الحقن الهرمونية، وأخذ عينات الدم، والجراحة. يمكن ممارسة السيطرة على المبيض في عدد من الطرق اعتمادا على التطبيق المطلوب والأنواع ذات الأهمية.

Watch this Scientific Journal Video about Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians at JoVE.com

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

توفر دراسة البيولوجيا البرمائية معلومات قيمة عن العمليات الإنجابية والفسيولوجية والجنينية والتنموية التي تدفع الكائنات الحية في العديد من المجموعات التصنيفية. هنا، نقدم دليلا شاملا على المنهجيات المختلفة التي يمكن استخدامها لدراسة مراقبة المبيض والرصد في البرمائيات.

التقنيات الإنجابية لرصد المبيض والسيطرة عليه في البرمائيات

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...

تستخدم تقنية استئصال الأوفاريت هذه إجراء جراحي قابل للاسترداد للحصول على بويضات البرمائيات لأبحاثنا الطبية أو تطبيق آخر للتغلب على الحالة المرضية للبويضات المحتجزة. لا يتطلب القتل الرحيم للحصول على البويضات البرمائيات لأغراض البحث. في الواقع، بعد استئصال جزئي للبرمائيات يمكن أن يكون موضوع البرمائيات نشطًا في مرحلة ما بعد التعافي.بعد التأكد من عدم الاستجابة لقرصة أطراف الحوض ، ضع الشرج الأنثوي المُجَنَّر في موضع إعادة حشوم الظهر ، واستخدم شاشًا رطبًا ومعقمًا لمسح الحقل الجراحي بمحلول بوديوني اليود لمدة 10 إلى 15 ثانية. ضع ستارة بلاستيكية واضحة ومعقمة فوق المنطقة الجراحية وقلل من التبخر عن طريق الحفاظ على البشرة المحيطة رطبة ، قبل استخدام شفرة مشرط رقم 15 أو 11 لجعل شق بشرة محيطية 3 ملليمتر في منتصف النخاع بين الكتفين والأوكلاكا. استخدم أجهزة تطبيقية ذات رؤوس قطنية لتطبيق ضغط موضعي على أي أوعية صغيرة حول الشق عند الضرورة، ورفع غشاء البطن لشق غشاء متتالي.استخدام مراوض الجفن لسحب شقوق مفكير، ومكوس جزء من كتلة البيض دون ربط أي الأوعية الدموية. لاستئصال كامل من خيط، الكي الأوعية الدموية المحيطة بها، واستخدام خياطة أحادية خيوط لإغلاق شق سفليومي مع نمط خياطة everting توقف. أنواع البرمائيات المختلفة، مثل هذه Necturus والضفدع الزجاجي، تظهر درجات متفاوتة من شفافية الجلد، مما يؤثر على القدرة على تصور وضعهم الإنجابي عبر الجلد.في بعض الأنواع، يمكن الكشف عن الاختلافات المورفولوجية بين الإناث التي هي الجرافيد، مقابل الحيوانات oviposited مؤخرا. في هذا المثال، يمكن تمييز أنثى رنا موسوسا التي تم طرحها مؤخرًا عن أنثى جرافيد من قبل تترنح بشرتها ومظهرها الأرق. المراحل السلوكية من oviposition في رنا muscosa تشمل التودد، الذي يسعى فيه الذكور بنشاط أنثى ووابل، خلالها يتصاعد الذكور رنا موسكوسا وشبكات بحزم على ظهر الأنثى.خلال amplexus، يعصر الذكر الأنثى بطريقة ضخ ناعمة. أنثى رنا موسوسا تتحرك في جميع أنحاء وعرض السلوكيات الوقوف اليد المتقطعة، يميل في نهاية المطاف ضد الأسطح التي يمكن أن تكون عالقة على البيض، في حين أن الذكور مضخات بطنها بقوة. مباشرة بعد oviposition, المبيضين الإناث العودة إلى مرحلة واحدة فئة.خلال هذا الوقت، من الصعب تصور بصيلات عند إجراء الموجات فوق الصوتية. المرحلة الثانية هي التي تتمثل في ظهور نقاط صدى منتشرة في جميع أنحاء المبيض. يتم تحديد المرحلة الثالثة من خلال وجود نقاط أكبر، صدى مستدير مع مراكز مظلمة، مما يدل على بصيلات صفار، ناضجة.في هذا التقييم تمثيل أربع سنوات من النيقات الإناث الأسير، وكان تطوير البيض عالية، ولكن لم يتم ضمان oviposition. بعض الإناث مع الاحتفاظ البيض المصاحبة مع اكتساب السوائل في تجويف الجسم، وأظهرت محيط مفرط وتورم، جنبا إلى جنب مع بعض علامات انفجار الأوعية الدموية، مثل تلك التي تظهر في هذه المتضررة رنا و Necturus. على الرغم من أن النهج الجراحي يمكن استخدامه لإدارة أمراض المبيض ، فقد تشارك هذه التقنية أيضًا في أبحاث الرامومات والزُرَة.بعد الجراحة، يمكن للممارس العودة إلى البروتوكول الأول المبين في هذه المخطوطة لرصد الصحة العامة المستمرة للموضوع البرمائي.

Research

JoVE Journal

Biology

Microinjection Techniques for Studying Mitosis in the Drosophila melanogaster Syncytial Embryo

Microinjection Techniques for Studying Mitosis in the Drosophila melanogaster Syncytial Embryo

تقنيات Microinjection لدراسة الانقسام الميتوزي في ذبابة الفاكهة السوداء البطن الأجنة المخلوي

This protocol describes the use of the Drosophila melanogaster syncytial embryo  for studying mitosis1.  Drosophila has useful genetics with a sequenced ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

تقنيات التصوير كاليفورنيا 2 + في اشارة الى الحيوانات المنوية البشرية

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes

أعربت المشبك التصحيح وتقنيات الإرواء لدراسة في قنوات ايون القيطم البويضات

The protocol presented here is designed to study the activation of the large conductance, voltage- and Ca2+-activated K+ (BK) channels. The protocol may ...

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

Long-term Lethal Toxicity Test with the Crustacean Artemia franciscana

على المدى الطويل اختبار السمية المهلكة مع القشريات الأرتيميا franciscana</em

Our research activities target the use of biological methods for the evaluation of environmental quality, with particular reference to saltwater/brackish ...

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

In Vivo Microinjection and Electroporation of Mouse Testis

في فيفو حقن مكروي و Electroporation ماوس الخصية

This video and article contribution gives a comprehensive description of microinjection and electroporation of mouse testis in vivo. This particular ...

Dried Blood Spots - Preparing and Processing for Use in Immunoassays and in Molecular Techniques

بقع الدم المجفف-إعداد وتجهيز لاستخدامها في تحديدكم والتقنيات الجزيئية

The idea of collecting blood on a paper card and subsequently using the dried blood spots (DBS) for diagnostic purposes originated a century ago. Since ...

Techniques for Imaging Prometaphase and Metaphase of Meiosis I in Fixed Drosophila Oocytes

Techniques for Imaging Prometaphase and Metaphase of Meiosis I in Fixed Drosophila Oocytes

تقنيات التصوير طليعة الطور والطورية من الانقسام الاختزالي الأول في مجال الاتصالات الأرضية<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; البويضات

Chromosome segregation in human oocytes is error prone, resulting in aneuploidy, which is the leading genetic cause of miscarriage and birth defects. The ...

Simple and Effective Administration and Visualization of Microparticles in the Circulatory System of Small Fishes Using Kidney Injection

إدارة بسيطة وفعالة والتصور من المجهرية الدقيقة في الدورة الدموية للأسماك الصغيرة باستخدام الحقن الكلي

The systemic administration of micro-size particles into a living organism can be applied for vasculature visualization, drug and vaccine delivery, ...

Micron-scale Phenotyping Techniques of Maize Vascular Bundles Based on X-ray Microcomputed Tomography

تقنيات Phenotyping ميكرون-مقياس الذرة حزم وعائية استناداً إلى التصوير المقطعي بالأشعة السينية ميكروكومبوتيد

It is necessary to accurately quantify the anatomical structures of maize materials based on high-throughput image analysis techniques. Here, we provide a ...

Single Cell Collection of Trophoblast Cells in Peri-implantation Stage Human Embryos

مجموعة خلايا واحدة من الخلايا الأرومية الترونفوبلاست في مرحلة زرع الأجنة البشرية

Human implantation, the apposition and adhesion to the uterine surface epithelia and subsequent invasion of the blastocyst into the maternal decidua, is a ...