Name: quantification of antibody-dependent enhancement of the zika virus in primary human cells
Uploaded: 2019-01-18T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Antibody-dependent Enhancement of the Zika Virus in Primary Human Cells at JoVE.com

Dette arbejde var generøst støttet af 1R21AI129881-01 (til T.M.C.), start-up midler fra de nationale nye smitsomme sygdomme laboratorier, og Boston University School of Medicine.

Serumprøver anvendes i denne undersøgelse blev indhentet fra menneskelige deltagere af en kohorte fra Columbia. Stikprøven samling blev godkendt af interne review board (IRB) på Universidad de Pamplona (Columbia, Sydamerika) og Los Potios Hospital8. Prøverne blev anonymt leveret og efterforskerne havde ikke adgang til information af patienter. Serumprøver blev kontrolleret for DENV serotype. Prøverne blev yderligere bekræftet for at neutralisere DENV infektion in vitro-. For kontr...

<ol>
	<li>Hayes, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+virus+outside+Africa.">Zika virus outside Africa.</a> Emerging Infectious Diseases. 15, 1347-1350 (2009).</li><li>Grard, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+virus+in+Gabon+(Central+Africa)+-+2007:+a+new+threat+from+Aedes+albopictus.">Zika virus in Gabon (Central Africa) - 2007: a new threat from Aedes albopictus.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 8 (2), 2681 (2014).</li><li>Fauci, A. S., Morens, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+Virus+in+the+Americas--Yet+Another+Arbovirus+Threat.">Zika Virus in the Americas--Yet Another Arbovirus Threat.</a> New England Journal of Medicine. 374 (7), 601-604 (2016).</li><li>Hawkes, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+the+Infectivity+of+Arboviruses+by+Specific+Antisera+Produced+in+Domestic+Fowls.">Enhancement of the Infectivity of Arboviruses by Specific Antisera Produced in Domestic Fowls.</a> Australian Journal of Experimental Biology and Medical Science. 42, 465-482 (1964).</li><li>Musso, D., Gubler, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+Virus.">Zika Virus.</a> Clinical Microbiology Reviews. 29 (3), 487-524 (2016).</li><li>Vaughn, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+viremia+titer,+antibody+response+pattern,+and+virus+serotype+correlate+with+disease+severity.">Dengue viremia titer, antibody response pattern, and virus serotype correlate with disease severity.</a> The Journal of Infectious Diseases. 181 (1), 2-9 (2000).</li><li>Khandia, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+Dengue/Zika+Virus+Pathogenicity+by+Antibody-Dependent+Enhancement+and+Strategies+to+Protect+Against+Enhancement+in+Zika+Virus+Infection.">Modulation of Dengue/Zika Virus Pathogenicity by Antibody-Dependent Enhancement and Strategies to Protect Against Enhancement in Zika Virus Infection.</a> Frontiers of Immunology. 9, 597 (2018).</li><li>Londono-Renteria, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+relevant+in+vitro+human+model+for+the+study+of+Zika+virus+antibody-dependent+enhancement.">A relevant in vitro human model for the study of Zika virus antibody-dependent enhancement.</a> Journal of General Virology. 98 (7), 1702-1712 (2017).</li><li>Ganger, M. T., Dietz, G. D., Ewing, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+common+base+method+for+analysis+of+qPCR+data+and+the+application+of+simple+blocking+in+qPCR+experiments.">A common base method for analysis of qPCR data and the application of simple blocking in qPCR experiments.</a> BMC Bioinformatics. 18 (1), 534 (2017).</li><li>Renn, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+quantitative+real-time+RT-PCR+assay+for+determining+expression+profiles+of+types+I+and+III+interferon+subtypes.">High-throughput quantitative real-time RT-PCR assay for determining expression profiles of types I and III interferon subtypes.</a> Journal of Visualized Experiments. (97), e52650 (2015).</li><li>McArthur, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+vaccines:+recent+developments,+ongoing+challenges+and+current+candidates.">Dengue vaccines: recent developments, ongoing challenges and current candidates.</a> Expert Review of Vaccines. 12 (8), 933-953 (2013).</li><li>Priyamvada, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humoral+cross-reactivity+between+Zika+and+dengue+viruses:+implications+for+protection+and+pathology.">Humoral cross-reactivity between Zika and dengue viruses: implications for protection and pathology.</a> Emerging Microbes and Infections. 6 (5), 33 (2017).</li><li>Dai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+basis+of+antibody-mediated+neutralization+and+protection+against+flavivirus.">Molecular basis of antibody-mediated neutralization and protection against flavivirus.</a> IUBMB Life. 68 (10), 783-791 (2016).</li><li>Dai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structures+of+the+Zika+Virus+Envelope+Protein+and+Its+Complex+with+a+Flavivirus+Broadly+Protective+Antibody.">Structures of the Zika Virus Envelope Protein and Its Complex with a Flavivirus Broadly Protective Antibody.</a> Cell Host &amp; Microbe. 19 (5), 696-704 (2016).</li><li>Sirohi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+3.8+A+resolution+cryo-EM+structure+of+Zika+virus.">The 3.8 A resolution cryo-EM structure of Zika virus.</a> Science. 352 (6284), 467-470 (2016).</li><li>George, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prior+Exposure+to+Zika+Virus+Significantly+Enhances+Peak+Dengue-2+Viremia+in+Rhesus+Macaques.">Prior Exposure to Zika Virus Significantly Enhances Peak Dengue-2 Viremia in Rhesus Macaques.</a> Scientific Reports. 7 (1), 10498 (2017).</li><li>Morens, D. M., Halstead, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+antibody-dependent+infection+enhancement+of+four+dengue+virus+serotypes+by+monoclonal+and+polyclonal+antibodies.">Measurement of antibody-dependent infection enhancement of four dengue virus serotypes by monoclonal and polyclonal antibodies.</a> Journal of General Virology. 71, 2909-2914 (1990).</li><li>Dejnirattisai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-reacting+antibodies+enhance+dengue+virus+infection+in+humans.">Cross-reacting antibodies enhance dengue virus infection in humans.</a> Science. 328 (5979), 745-748 (2010).</li><li>Priyamvada, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+antibody+responses+after+dengue+virus+infection+are+highly+cross-reactive+to+Zika+virus.">Human antibody responses after dengue virus infection are highly cross-reactive to Zika virus.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (28), 7852-7857 (2016).</li><li>Charles, A. S., Christofferson, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+a+Dengue-Derived+Monoclonal+Antibody+to+Enhance+Zika+Infection+In+Vitro.">Utility of a Dengue-Derived Monoclonal Antibody to Enhance Zika Infection In Vitro.</a> PLoS Currents. 8, (2016).</li><li>Swanstrom, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+Virus+Envelope+Dimer+Epitope+Monoclonal+Antibodies+Isolated+from+Dengue+Patients+Are+Protective+against+Zika+Virus.">Dengue Virus Envelope Dimer Epitope Monoclonal Antibodies Isolated from Dengue Patients Are Protective against Zika Virus.</a> MBio. 7 (4), (2016).</li></ol>

Krydsreaktivitet af DENV antistoffer fører til ADE af andre DENV serotyper har hindret udviklingen af en effektiv vaccine11. ZIKV tilhører den samme familie, Flaviviridae, og har en betydelig homologi med andre flavivira, især DENV12. Det vigtigste mål for neutraliserende antistoffer for både ZIKV og DENV er kuvert protein, som deler en meget høj strukturel og kvaternære sekvens homologi mellem to vira13,14<s...

Blandt de myg-bårne virussygdomme er Zika infektion en af de mest klinisk vigtige1. Infektionen er forårsaget af flavivirus ZIKV, som i de fleste tilfælde bruger Aedes aegypti som sin primære vektor1,2. Men der er undersøgelser, der har rapporteret Aedes albopictus som en primær vektor i nogle ZIKV udbrud3. Selv om infektion er asymptomatisk i mange tilfælde, er de mest almindelige symptomer feber, hovedpine og muskel smerter2. Der er ingen kur eller vaccine tilgængelig for ZIKV infektion og den behandling, der er mest støttende. De seneste udbrud af ZIKV i Sydamerika førte til alvorlige tilfælde af sygdommen og en ca 20-fold stigning i den neurologiske udvikling lidelse i fostre opkaldt mikrocefali2. Som Sydamerika er et område, der er endemiske for flere arboviruses som DENV og West Nile virus, er det vigtigt at undersøge, om forudgående immunitet over for andre flavivirus(es) spiller en rolle i sværhedsgraden af ZIKV infektioner og sygdomme.
Gennem tiderne, har virus udviklet forskellige strategier til at øge deres chance for infektivitet for at overtage vært celle maskiner og undertrykke den antivirale svar. Et af de mest fascinerende af alt er brug af vært pre immunsystemet antistoffer af virus til at forbedre deres replikering med fænomenet ADE4. ADE på tværs af alle fire serotyper af DENV er blevet godt undersøgt og dokumenteret at øge viral titers og sygdom resultatet5,6,7. I en tidligere in vitro-undersøgelse, har vi vist betydelig forøgelse af ZIKV replikering på grund af eksisterende DENV immunitet i primære menneskelige immunceller8. Vi viste også et relevante in vitro-metode for at kvantificere kapacitet af DENV allerede eksisterende antistoffer til at forbedre ZIKV replikering i primærelementer.
Den protokol, som vi har udviklet bruger menneskelige serumprøver, der er testet for DENV neutralisering i TCID-50 eller plaque reduktion neutralisationstest (PRNT) undersøgelser, sammen med ZIKV i biologisk relevante celler eller celler, der stammer fra væv, der ZIKV kan inficere.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:773px;" width="773">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Fetal Bovine Serum&#160;</td>
			<td style="width:119px;">GEMINI</td>
			<td style="width:119px;">100-106</td>
			<td style="width:277px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">iCycler&#160;</td>
			<td style="width:119px;">BioRad</td>
			<td style="width:119px;">785BR02188</td>
			<td>Model No. CFX96 Optics Module</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Microfuge 18 Centrifuge</td>
			<td style="width:119px;">Beckman Coulter&#160;</td>
			<td style="width:119px;">367160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Nanodrop-1000</td>
			<td style="width:119px;">Thermoscientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">1072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Quantifast SYBR-One step RT-PCR kit&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Qiagen&#160;</td>
			<td style="width:119px;">204154</td>
			<td>Used for 1 step RT-qPCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">RNeasy RNA Isolation Kit&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Qiagen&#160;</td>
			<td style="width:119px;">74106</td>
			<td>Used for RNA extraction</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">RPMI-medium&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">11875093</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of antibody-dependent enhancement of the zika virus in primary human cells

Den nylige fremkomst af flavivirus Zika og neurologiske komplikationer, såsom Guillain-Barrés syndrom og microcephalus i spædbørn, har medført alvorlige offentlige sikkerhed bekymringer. Blandt risikofaktorerne udgør antistof-afhængige enhancement (ADE) den største trussel, som den seneste re-fremkomsten af Zika virus (ZIKV) er primært i områder, hvor befolkningen har været udsat og er i en tilstand af pre immunitet til andre nært beslægtede flavivira, specielt dengue virus (DENV). Her, beskriver vi en protokol for kvantificere effekten af humant serumantistoffer mod DENV på ZIKV infektion i primære humane celler eller cellelinjer.

I figur 1er der en trinvis skematisk illustration af alle trin involveret til at udføre ADE-protokollen. Det er en skematisk diagram viser hele proceduren af ADE af ZIKV på grund af allerede eksisterende immunitet til DENV. Figur 2 viser, hvordan human serum prøver blev kategoriseret i tre forskellige grupper: DENV infektion-bekræftet prøver er benævnt gruppen DENV-inficerede, DENV antistof-bekræftet prøver er benævnt DE...

Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Antibody-dependent Enhancement of the Zika Virus in Primary Human Cells at JoVE.com

Quantification of Antibody-dependent Enhancement of the Zika Virus in Primary Human Cells

Vi beskriver en metode til at vurdere effekten af allerede eksisterende immunitet mod dengue virus på Zika virusinfektion ved hjælp af humant serum, primære menneskeceller og infektion kvantificering af kvantitative real-time polymerase kæde reaktion.

Kvantificeringen af antistof-afhængige Enhancement Zika virus i primære humane celler

The recent emergence of the flavivirus Zika and neurological complications, such as Guillain-Barr&#233; syndrome and microcephaly in infants, has brought ...

Denne metode kan anvendes til at vurdere virkningerne af allerede eksisterende immunitet mod denguevirus på Zika virus infektion, ved hjælp af faktiske menneskelige patient serum og primære menneskelige immunceller. Brugen af faktiske humane patient serumprøver og menneskelige primære celler giver dybere indsigt i antistofafhængig forbedring af Zika virus ved præ-immun sera og antistoffer. Denne metode giver indsigt i antistoffers evne i en patients blod til at forbedre en virusinfektion i andre humane celler.Det er vigtigt at sikre, at virusinfektionsniveauet er højt nok til påvisning, men lavt nok til ikke at overvælde cellerne eller forstyrre datafortolkningen. Begynd med at så tre gange ti til de fjerde celler i 100 mikroliter af cellekulturmedium pr. brønd i en steril, flad bund 96-brøndplade. Når alle cellerne er blevet belagt, skal pladen i en 37 grader Celsius og 5% kuldioxid inkubator og gøre 10 gange serielle fortyndinger af optøede menneskelige serumprøver i serumfrit medium.Sørg for at holde serumfortyndings- og fortyndingsfaktoren konstant for alle præ immune sera, før du tilsætter fortyndingerne til virusopløsningerne og cellerne. Dernæst tø Zika virus stammer bestand løsning i en 37 grader Celsius vandbad i et til to minutter, før hurtigt at overføre bestanden til is. Der tilsættes en 0,1 multiplikation af infektionsækvivalentvolumen zikavirus til serum aliquots og læg pladen i cellekulturskuvøsen i en time for at tillade, at denguevirusantistoffer danner komplekser med Zika-virionerne.Ved slutningen af inkubationen vaskes cellerne med 100 mikroliter PBS pr. brønd, og der tilsættes 50 mikroliter immunkompleks til hver brønd. Efter to timers inkubation fjernes mediet og vaskes brøndene to gange med 100 mikroliter PBS pr. brønd for helt at fjerne immunkomplekserne og eventuelle uopsatte virioner. Derefter fodres cellerne med 100 mikroliter pr. brønd af cellekulturmedium suppleret med 10 % føtalt kvægserum.Vend derefter cellerne tilbage til cellekulturskuvøsen i 48 timer. To dage efter infektionen vaskes cellerne to gange med 100 mikroliter steril PBS pr. brønd, før der tilsættes 250 mikroliter cellelysisbuffer med 10% beta mercaptoethanol til hver brønd. Pipette op og ned mindst fem gange med ridser for at fremskynde lysisprocessen og overføre cellelysater til sterile mærkede 1,5 milliliterrør.Der tilsættes et tilsvarende volumen på 70% ethanol til hvert rør, og lysatopløsningen pipetters op og ned fire til fem gange. Når lysatsuspensionerne er tydelige, overføres hver opløsning til mærkede silicabaserede søjler i to millilitersamlingsrør til centrifugering. Kassér flow-through holde kolonnerne i samme samling rør og tilsæt 700 mikroliter af Vask Buffer 1 til hver kolonne for en anden centrifugering.Efter at gennemstrømningen er kasseret, skylles kolonnerne to gange mere med 500 mikroliter vaskepude to pr. vask. Efter den anden vask overføres kolonnerne til nye to milliliteropsamlingsrør til endnu en centrifugering. Tilføj 30 mikroliter på 42 grader Celsius RNase-Frit vand til midten af hver kolonne for centrifugering og genvinde den eluterede RNA.For kvantitative real-time polymerase kædereaktion eller QRTPCR analyse tilføje en mikroliter af genspecifikke fremad og omvendt primere fra 10 mikromolar bestande sammen med 0,25 mikroliter af omvendt transskription mix per reaktion. Bemærk, at primere, der genkender Zika virus genetisk materiale vil opdage virale gener og give mulighed for infektion kvantificering. Dernæst tilsættes 12,5 mikroliter SYBR Green Mix efterfulgt af 25 mikroliter vand til hver reaktion tilføje 15 mikroliter Af Master Mix i hver brønd af 96-godt QPCR plade.Når du bruger en Master Mix, tilsættes 100 nanogram af RNA-prøven til blandingen og pipette Master Mix i individuelle brønde af QRTPCR plade. Bemærk, at prøverne skal køres i tre eksemplarer på samme QRTPCR plade. Kør derefter prøverne på en kvantitativ PCR-maskine i henhold til de parametre, der er beskrevet i tabellen.Ved at klikke på fanen smeltekurve i systemsoftwaren for at overvåge smeltekurven. Smeltekurven vil vise enkelt top i alle prøverne for et bestemt gen for at bekræfte tilstedeværelsen af kun én amplicon. For optimale resultater skal du bruge 0,5 grader Celsius temperaturstigninger mellem trin og en minimumsholdningstid på 10 sekunder i smeltekurveprotokollen.Klik derefter på fanen kvantificeringsdata for at få en kvantitativ cyklus for hver stikprøve, og eksportér dataene til et regneark for yderligere kvantificeringsanalyse. Human serum prøver kan kategoriseres i tre forskellige grupper: dengue virus infektion bekræftede prøver, dengue virus antistof bekræftede prøver, og sund sera uden dengue virus neutraliserende antistoffer eller RNA. Efter 48 timers infektion, QRTPCR analyse viser, at de fleste sera indeholder dengue virus serotype en til fire antistoffer er i stand til at forbedre Zika virus replikation på forskellige niveauer.Den største stigning i zikavirustitre findes i makrofager behandlet med seraholdige denguevirus serotype to og fire antistoffer sammenlignet med serotype et og tre, som viser en relativt lavere induktion af Zika-virus. Det er vigtigt at opretholde et sterilt miljø, at bære det korrekte personlige beskyttelsesudstyr og altid at opbevare de optøede virusserumprøver og QPCR-reagenser på is. Denne protokol kan nemt ændres til at studere antistof-afhængige forbedring af andre flavivirus såsom gul feber virus, dengue virus, eller West Nile virus ved hjælp af et panel af patient serum.Denne teknik vil være meget nyttig til at udføre fremtidige antistof-afhængige ekstraudstyr undersøgelser i arbovirus eller virologi områder. Korrekt biosikkerhedsniveau to personlige beskyttelsesudstyr bør anvendes til enhver tid, og alt viralt affald bør dekontamineres i 10 %blegemiddel i 30 minutter før bortskaffelse.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Ændring af primære humane T-celler

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

Neutrofil Isolering og analyse for at fastslå deres rolle i lymfom Cell Følsomhed til terapeutiske midler

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika Virus Infektiøs Cell Culture System og<em&gt; In vitro</em&gt; Profylaktiske virkning af interferoner

Zika Virus (ZIKV) is an emerging pathogen that is linked to fetal developmental abnormalities such as microcephaly, eye defects, and impaired growth. ZIKV ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dextran effektiviserer Lentiviral transduktion af Murine og menneskelige primære NK-celler

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

Rescue and Characterization of Recombinant Virus from a New World Zika Virus Infectious Clone

Redning og karakterisering af rekombinant virus fra en ny verden Zika Virus infektiøs klon

Infectious cDNA clones allow for genetic manipulation of a virus, thus facilitating work on vaccines, pathogenesis, replication, transmission and viral ...

Zika Virus Specific Diagnostic Epitope Discovery

Zika Virus specifikke diagnostiske epitop opdagelse

High-density peptide microarrays allow screening of more than six thousand peptides on a single standard microscopy slide. This method can be applied for ...

A Simple Flow Cytometry Based Assay to Determine In Vitro Antibody Dependent Enhancement of Dengue Virus Using Zika Virus Convalescent Serum

A Simple Flow Cytometry Based Assay to Determine In Vitro Antibody Dependent Enhancement of Dengue Virus Using Zika Virus Convalescent Serum

En simpel flowcytometri baseret analyse for at bestemme In Vitro antistof afhængig af forbedring af Dengue Virus ved hjælp af Zika Virus rekreationshjem Serum

Antibody dependent enhancement of infection has been shown to play a major role in Dengue viral pathogenesis. Traditional assays that measure the capacity ...

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluering af Zika Virus-specifikke T-celle respons i Immunoprivileged organer af inficerede Ifnar1- / - mus

The Zika virus (ZIKV) can induce inflammation in immunoprivileged organs (e.g., the brain and testis), leading to the Guillain-Barr&#233; syndrome and ...

Quantification of Efferocytosis by Single-cell Fluorescence Microscopy

Kvantificering af Efferocytosis af encellede Fluorescens mikroskopi

Studying the regulation of efferocytosis requires methods that are able to accurately quantify the uptake of apoptotic cells and to probe the signaling ...

Isolation and Quantification of Zika Virus from Multiple Organs in a Mouse

Isolering og kvantificering af Zikavirus fra flere organer i en mus

The methods being presented demonstrate laboratory procedures for the isolation of organs from Zika virus infected animals and the quantification of viral ...