Name: quantification of antibody-dependent enhancement of the zika virus in primary human cells
Uploaded: 2019-01-18T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Antibody-dependent Enhancement of the Zika Virus in Primary Human Cells at JoVE.com

Dette arbeidet ble sjenerøst støttet av 1R21AI129881-01 (til T.M.C.), oppstart midler fra nasjonale nye smittsomme sykdommer laboratorier og Boston University School of Medicine.

Serumprøver brukt i denne studien ble innhentet fra menneskelige deltakere på en kohort fra Columbia. Prøvetaking ble godkjent av intern gjennomgang board (IRB) på Universidad de Pamplona (Columbia, Sør-Amerika) og Los Potios Hospital8. Prøvene er anonymt levert og etterforskere har ikke tilgang til pasientinformasjon. Serumprøver ble sjekket for DENV serotype. Prøvene ble ytterligere bekreftet for å nøytralisere DENV infeksjon i vitro. For kontrollen ble serumprøver fra friske...

<ol>
	<li>Hayes, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+virus+outside+Africa.">Zika virus outside Africa.</a> Emerging Infectious Diseases. 15, 1347-1350 (2009).</li><li>Grard, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+virus+in+Gabon+(Central+Africa)+-+2007:+a+new+threat+from+Aedes+albopictus.">Zika virus in Gabon (Central Africa) - 2007: a new threat from Aedes albopictus.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 8 (2), 2681 (2014).</li><li>Fauci, A. S., Morens, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+Virus+in+the+Americas--Yet+Another+Arbovirus+Threat.">Zika Virus in the Americas--Yet Another Arbovirus Threat.</a> New England Journal of Medicine. 374 (7), 601-604 (2016).</li><li>Hawkes, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+the+Infectivity+of+Arboviruses+by+Specific+Antisera+Produced+in+Domestic+Fowls.">Enhancement of the Infectivity of Arboviruses by Specific Antisera Produced in Domestic Fowls.</a> Australian Journal of Experimental Biology and Medical Science. 42, 465-482 (1964).</li><li>Musso, D., Gubler, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+Virus.">Zika Virus.</a> Clinical Microbiology Reviews. 29 (3), 487-524 (2016).</li><li>Vaughn, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+viremia+titer,+antibody+response+pattern,+and+virus+serotype+correlate+with+disease+severity.">Dengue viremia titer, antibody response pattern, and virus serotype correlate with disease severity.</a> The Journal of Infectious Diseases. 181 (1), 2-9 (2000).</li><li>Khandia, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modulation+of+Dengue/Zika+Virus+Pathogenicity+by+Antibody-Dependent+Enhancement+and+Strategies+to+Protect+Against+Enhancement+in+Zika+Virus+Infection.">Modulation of Dengue/Zika Virus Pathogenicity by Antibody-Dependent Enhancement and Strategies to Protect Against Enhancement in Zika Virus Infection.</a> Frontiers of Immunology. 9, 597 (2018).</li><li>Londono-Renteria, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+relevant+in+vitro+human+model+for+the+study+of+Zika+virus+antibody-dependent+enhancement.">A relevant in vitro human model for the study of Zika virus antibody-dependent enhancement.</a> Journal of General Virology. 98 (7), 1702-1712 (2017).</li><li>Ganger, M. T., Dietz, G. D., Ewing, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+common+base+method+for+analysis+of+qPCR+data+and+the+application+of+simple+blocking+in+qPCR+experiments.">A common base method for analysis of qPCR data and the application of simple blocking in qPCR experiments.</a> BMC Bioinformatics. 18 (1), 534 (2017).</li><li>Renn, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-throughput+quantitative+real-time+RT-PCR+assay+for+determining+expression+profiles+of+types+I+and+III+interferon+subtypes.">High-throughput quantitative real-time RT-PCR assay for determining expression profiles of types I and III interferon subtypes.</a> Journal of Visualized Experiments. (97), e52650 (2015).</li><li>McArthur, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+vaccines:+recent+developments,+ongoing+challenges+and+current+candidates.">Dengue vaccines: recent developments, ongoing challenges and current candidates.</a> Expert Review of Vaccines. 12 (8), 933-953 (2013).</li><li>Priyamvada, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humoral+cross-reactivity+between+Zika+and+dengue+viruses:+implications+for+protection+and+pathology.">Humoral cross-reactivity between Zika and dengue viruses: implications for protection and pathology.</a> Emerging Microbes and Infections. 6 (5), 33 (2017).</li><li>Dai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+basis+of+antibody-mediated+neutralization+and+protection+against+flavivirus.">Molecular basis of antibody-mediated neutralization and protection against flavivirus.</a> IUBMB Life. 68 (10), 783-791 (2016).</li><li>Dai, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structures+of+the+Zika+Virus+Envelope+Protein+and+Its+Complex+with+a+Flavivirus+Broadly+Protective+Antibody.">Structures of the Zika Virus Envelope Protein and Its Complex with a Flavivirus Broadly Protective Antibody.</a> Cell Host &amp; Microbe. 19 (5), 696-704 (2016).</li><li>Sirohi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+3.8+A+resolution+cryo-EM+structure+of+Zika+virus.">The 3.8 A resolution cryo-EM structure of Zika virus.</a> Science. 352 (6284), 467-470 (2016).</li><li>George, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prior+Exposure+to+Zika+Virus+Significantly+Enhances+Peak+Dengue-2+Viremia+in+Rhesus+Macaques.">Prior Exposure to Zika Virus Significantly Enhances Peak Dengue-2 Viremia in Rhesus Macaques.</a> Scientific Reports. 7 (1), 10498 (2017).</li><li>Morens, D. M., Halstead, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+antibody-dependent+infection+enhancement+of+four+dengue+virus+serotypes+by+monoclonal+and+polyclonal+antibodies.">Measurement of antibody-dependent infection enhancement of four dengue virus serotypes by monoclonal and polyclonal antibodies.</a> Journal of General Virology. 71, 2909-2914 (1990).</li><li>Dejnirattisai, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-reacting+antibodies+enhance+dengue+virus+infection+in+humans.">Cross-reacting antibodies enhance dengue virus infection in humans.</a> Science. 328 (5979), 745-748 (2010).</li><li>Priyamvada, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+antibody+responses+after+dengue+virus+infection+are+highly+cross-reactive+to+Zika+virus.">Human antibody responses after dengue virus infection are highly cross-reactive to Zika virus.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (28), 7852-7857 (2016).</li><li>Charles, A. S., Christofferson, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+a+Dengue-Derived+Monoclonal+Antibody+to+Enhance+Zika+Infection+In+Vitro.">Utility of a Dengue-Derived Monoclonal Antibody to Enhance Zika Infection In Vitro.</a> PLoS Currents. 8, (2016).</li><li>Swanstrom, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+Virus+Envelope+Dimer+Epitope+Monoclonal+Antibodies+Isolated+from+Dengue+Patients+Are+Protective+against+Zika+Virus.">Dengue Virus Envelope Dimer Epitope Monoclonal Antibodies Isolated from Dengue Patients Are Protective against Zika Virus.</a> MBio. 7 (4), (2016).</li></ol>

Kryssreaktivitet av DENV antistoffer fører til ADE av andre DENV serotyper har hindret utviklingen av en effektiv vaksine11. ZIKV tilhører samme familie, Flaviviridae, og har en betydelig homologi med andre flaviviruses, spesielt DENV12. Hovedmålet for nøytralisere antistoffer for både ZIKV og DENV er konvolutt protein, som deler en svært høy strukturelle og kvartær sekvens homologi mellom de to virus13,14<s...

Blant de mygg-borne virale sykdommene er Zika infeksjon en av de mest klinisk viktige1. Infeksjonen forårsakes av flavivirus ZIKV som oftest bruker Aedes aegypti som sin primære vektor1,2. Men finnes det studier som har rapportert Aedes albopictus som en primær vektor i noen ZIKV utbrudd3. Men infeksjonen er asymptomatisk i mange tilfeller, er de vanligste symptomene feber, hodepine og muskel smerter2. Det er ingen kur eller vaksine tilgjengelig for ZIKV infeksjon og behandling tilgjengelig er mest støttende. Nylige utbrudd av ZIKV i Sør-Amerika førte til alvorlige tilfeller av sykdommen og en ca 20-fold økning i neurodevelopmental uorden i fostre kalt microcephaly2. Sør-Amerika er et område som er endemisk til flere arboviruses som DENV og West Nile virus, er det avgjørende å undersøke om tidligere immunitet mot andre flavivirus(es) spiller en rolle i alvorlighetsgraden av ZIKV infeksjoner og sykdom.
Gjennom tidene har virus utviklet seg ulike strategier for å øke sjansen infectivity for å overta verten celle maskiner og undertrykke antiviral svaret. En av de mest fascinerende av alt er bruk av vert pre immun antistoffer av virus å forbedre deres replikering med fenomenet ADE4. ADE over alle fire serotyper av DENV har vært godt studert og bevist å øke viral titers og sykdom utfallet5,6,7. I en tidligere i vitro studie, har vi vist betydelig forbedring av ZIKV replikering på grunn av eksisterende DENV immunitet i primære menneskelige immunceller8. Vi også demonstrert en relevant i vitro metode for å kvantifisere evnen til å DENV eksisterende antistoffer til å forbedre ZIKV replikering i primære celler.
Protokollen som vi har utviklet bruker koagulasjon som testes for DENV nøytralisering i TCID-50 eller plakk reduksjon nøytralisering test (PRNT) søk, sammen med ZIKV i biologisk relevante celler eller celler avledet fra vev som ZIKV kan infisere.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:773px;" width="773">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Fetal Bovine Serum&#160;</td>
			<td style="width:119px;">GEMINI</td>
			<td style="width:119px;">100-106</td>
			<td style="width:277px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">iCycler&#160;</td>
			<td style="width:119px;">BioRad</td>
			<td style="width:119px;">785BR02188</td>
			<td>Model No. CFX96 Optics Module</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Microfuge 18 Centrifuge</td>
			<td style="width:119px;">Beckman Coulter&#160;</td>
			<td style="width:119px;">367160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Nanodrop-1000</td>
			<td style="width:119px;">Thermoscientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">1072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">Quantifast SYBR-One step RT-PCR kit&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Qiagen&#160;</td>
			<td style="width:119px;">204154</td>
			<td>Used for 1 step RT-qPCR</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">RNeasy RNA Isolation Kit&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Qiagen&#160;</td>
			<td style="width:119px;">74106</td>
			<td>Used for RNA extraction</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:259px;">RPMI-medium&#160;</td>
			<td style="width:119px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">11875093</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of antibody-dependent enhancement of the zika virus in primary human cells

Den nylige framveksten av flavivirus Zika og nevrologiske komplikasjoner, som Guillain-Barrés syndrom og microcephaly hos spedbarn, har brakt alvorlige offentlig sikkerhet bekymringer. Blant risikofaktorer utgjør antistoff avhengige ekstrautstyr (ADE) den viktigste trusselen, siste nytt fremveksten av Zika viruset (ZIKV) er primært i områder der befolkningen har blitt utsatt, og er i en tilstand av pre immunitet til andre nært beslektede flaviviruses, spesielt dengue virus (DENV). Her beskriver vi en protokoll for å kvantifisere effekten av humant serum antistoffer mot DENV på ZIKV infeksjon i primære menneskelige celler eller linjer.

I figur 1er det en trinnvis diagrammatisk illustrasjon av alle trinnene involveredd utføre ADE protokollen. Det er en skjematisk diagram viser hele prosedyren av ADE av ZIKV på grunn av eksisterende immunitet til DENV. Figur 2 viser hvordan humant serum prøver ble kategorisert i tre ulike grupper: DENV infeksjon bekreftet prøver kalles DENV-infisert gruppen, DENV antistoff-bekreftet prøvene er referert til som DENV-eksponert...

Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Antibody-dependent Enhancement of the Zika Virus in Primary Human Cells at JoVE.com

Quantification of Antibody-dependent Enhancement of the Zika Virus in Primary Human Cells

Vi beskriver en metode for å vurdere effekten av eksisterende immunitet mot dengue virus på Zika virusinfeksjon med humant serum, primære menneskelige celler, og infeksjon kvantifisering av kvantitative sanntid polymerasekjedereaksjons.

Kvantifisering av antistoff avhengige forsterkning av Zika viruset i primære menneskelige celler

The recent emergence of the flavivirus Zika and neurological complications, such as Guillain-Barr&#233; syndrome and microcephaly in infants, has brought ...

Denne metoden kan brukes til å evaluere effekten av eksisterende immunitet mot denguevirus på Zika-virusinfeksjon, ved hjelp av faktisk humant pasientserum og primære humane immunceller. Bruken av faktiske humane pasientserumprøver og humane primærceller gir dypere innsikt i antistoffavhengig forbedring av Zika-virus ved pre-immun sera og antistoffer. Denne metoden gir innsikt i evnen til antistoffer i pasientens blod for å forbedre en virusinfeksjon i andre menneskelige celler.Det er viktig å sikre at virusinfeksjonsnivåene er høye nok til deteksjon, men lav nok til ikke å overvelde cellene eller forstyrre datatolkningen. Begynn med å så tre ganger ti til de fjerde cellene i 100 mikroliter cellekulturmedium per brønn i en steril, flat bunn 96-brønnplate. Når alle cellene er belagt, plasser platen i en 37 graders Celsius og 5% karbondioksidinkubator og lag 10 ganger seriell fortynning av tinte humane serumprøver i serumfritt medium.Sørg for å holde serumfortynninger og fortynningsfaktor konstant for alle pre-immun serum før du legger fortynninger til virusløsninger og cellene. Deretter tiner Zika-virus lagerløsning i et 37 graders Celsius vannbad i ett til to minutter før den raskt overføres bestanden til is. Legg til en 0,1 multiplisitet av infeksjonsekvivalent volum av Zika-virus til serum aliquots og plasser platen i cellekulturinkubatoren i en time for å tillate denguevirusantistoffene å danne komplekser med Zika-virions.På slutten av inkubasjonen vask cellene med 100 mikroliter PBS per brønn og tilsett 50 mikroliter immunkompleks til hver brønn. Etter to timers inkubasjon, fjern mediet og vask brønnene to ganger med 100 mikroliter PBS per brønn for å fjerne immunkompleksene og eventuelle ufestede virions. Deretter mate cellene med 100 mikroliter per brønn av cellekultur medium supplert med 10% fosterbovin serum.Deretter returnerer cellene til cellekulturinkubatoren i 48 timer. To dager etter infeksjonen, vask cellene to ganger med 100 mikroliter sterile PBS per brønn før du legger til 250 mikroliter cellelysbuffer med 10% betamercaptoetanol til hver brønn. Pipetten opp og ned minst fem ganger med riper for å øke hastigheten på lysisprosessen og overføre cellelysater til sterile merkede 1,5 milliliter rør.Tilsett et likt volum på 70% etanol til hvert rør og pipette lysateløsningen opp og ned fire til fem ganger. Når lysate suspensjoner er klare, overføre hver løsning til merkede silika-baserte kolonner i to milliliter oppsamlingsrør for sentrifugering. Kast gjennomstrømnings-gjennomføringen som holder kolonnene i de samme oppsamlingsrørene, og legg til 700 mikroliter vaskebuffer 1 i hver kolonne for en ny sentrifugering.Etter å ha kastet gjennomstrømningen, skyll kolonnene to ganger til med 500 mikroliter vaskebuffer to per vask. Etter den andre vasken, overfør kolonnene til nye to milliliter oppsamlingsrør for en annen sentrifugering. Tilsett 30 mikroliter på 42 grader Celsius RNase-Free vann til midten av hver kolonne for sentrifugering og gjenopprette den eluted RNA.For kvantitativ sanntid polymerase kjedereaksjon eller QRTPCR analyse legge til en mikroliter av genspesifikke fremover og omvendt primere fra 10 mikromose aksjer sammen med 0,25 mikroliter av omvendt transkripsjon blanding per reaksjon. Legg merke til at primere som gjenkjenner Zika virusgenetisk materiale, vil oppdage virusgener og tillate infeksjonskvantifisering. Deretter legger du til 12,5 mikroliter SYBR Green Mix etterfulgt av 25 mikroliter vann til hver reaksjon som legger til 15 mikroliter Master Mix i hver brønn på 96-brønn QPCR-plate.Når du bruker en Master Mix, tilsett 100 nanogrammer av RNA-prøven til blandingen og pipetten Master Mix i individuelle brønner av QRTPCR-platen. Vær oppmerksom på at prøver skal kjøres i triplikate på samme QRTPCR-plate. Kjør deretter prøvene på en kvantitativ PCR-maskin i henhold til parameterne som er beskrevet i tabellen.Ved å klikke på smeltekurvefanen i systemprogramvaren for å overvåke smeltekurven. Smeltekurven vil vise en topp i alle prøvene for et bestemt gen for å bekrefte tilstedeværelsen av bare en amplicon. For optimale resultater, bruk 0,5 grader Celsius temperaturtrinn mellom trinn og en minimum holdetid på 10 sekunder i smeltekurveprotokollen.Klikk deretter kategorien kvantifiseringsdata for å få en kvantitativ syklus for hvert utvalg og eksportere dataene til et regneark for ytterligere kvantifiseringsanalyse. De menneskelige serumprøvene kan kategoriseres i tre forskjellige grupper: dengue virusinfeksjon bekreftet prøver, dengue virus antistoff bekreftet prøver, og sunn sera uten dengue virus nøytraliserende antistoffer eller RNA. Etter 48 timers infeksjon viser QRTPCR-analysen at de fleste sera som inneholder denguevirus serotype en til fire antistoffer, er i stand til å forbedre Zika-virusreplikasjon på forskjellige nivåer.Den høyeste økningen i Zika-virustitre finnes i makrofager behandlet med seraholdig denguevirus serotype to og fire antistoffer sammenlignet med serotype en og tre som viser en relativt lavere induksjon av Zika-virus. Det er viktig å opprettholde et sterilt miljø, å bruke riktig personlig beskyttelsesutstyr, og å alltid holde de tinte virusserumprøvene og QPCR-reagensene på is. Denne protokollen kan enkelt endres for å studere antistoffavhengig forbedring av andre flavivirus som gulfebervirus, denguevirus eller West Nile-virus ved hjelp av et panel av pasientserum.Denne teknikken vil være svært nyttig for å utføre fremtidige antistoffavhengige forbedringsstudier i arbovirus- eller virologifeltene. Riktig biosikkerhet nivå to personlig verneutstyr bør brukes til enhver tid, og alt virusavfall bør dekontamineres i 10% blekemiddel i 30 minutter før avhending.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac transposon System Endring av primære humane T celler

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

Nøytrofile Isolering og analyse for å fastslå deres rolle i lymfom Cell Følsomhet for Terapeutiske midler

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika Virus Infeksiøs Cell Culture System og<em&gt; In Vitro</em&gt; Profylaktisk Effekt av Interferon

Zika Virus (ZIKV) is an emerging pathogen that is linked to fetal developmental abnormalities such as microcephaly, eye defects, and impaired growth. ZIKV ...

Dextran Enhances the Lentiviral Transduction Efficiency of Murine and Human Primary NK Cells

Dekstran forbedrer Lentiviral signaltransduksjon effektiviteten av Murine og menneskelig primære NK celler

The efficient transduction of specific genes into natural killer (NK) cells has been a major challenge. Successful transductions are critical to defining ...

Rescue and Characterization of Recombinant Virus from a New World Zika Virus Infectious Clone

Redning og karakterisering av rekombinant virus fra en ny verden Zika Virus smittsom klon

Infectious cDNA clones allow for genetic manipulation of a virus, thus facilitating work on vaccines, pathogenesis, replication, transmission and viral ...

Zika Virus Specific Diagnostic Epitope Discovery

Zika Virus spesifikke diagnostiske Epitope oppdagelsen

High-density peptide microarrays allow screening of more than six thousand peptides on a single standard microscopy slide. This method can be applied for ...

A Simple Flow Cytometry Based Assay to Determine In Vitro Antibody Dependent Enhancement of Dengue Virus Using Zika Virus Convalescent Serum

A Simple Flow Cytometry Based Assay to Determine In Vitro Antibody Dependent Enhancement of Dengue Virus Using Zika Virus Convalescent Serum

En enkel flowcytometri basert analyse for å fastslå In Vitro antistoff avhengige forbedring av Dengue Virus benytter Zika Virus rekonvalesent Serum

Antibody dependent enhancement of infection has been shown to play a major role in Dengue viral pathogenesis. Traditional assays that measure the capacity ...

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluering av Zika Virus-spesifikke T-celle svar i Immunoprivileged organer av infiserte Ifnar1- / - mus

The Zika virus (ZIKV) can induce inflammation in immunoprivileged organs (e.g., the brain and testis), leading to the Guillain-Barr&#233; syndrome and ...

Quantification of Efferocytosis by Single-cell Fluorescence Microscopy

Kvantifisering av Efferocytosis av encellede fluorescens mikroskopi

Studying the regulation of efferocytosis requires methods that are able to accurately quantify the uptake of apoptotic cells and to probe the signaling ...

Isolation and Quantification of Zika Virus from Multiple Organs in a Mouse

Isolering og kvantifisering av Zika virus fra flere organer i en mus

The methods being presented demonstrate laboratory procedures for the isolation of organs from Zika virus infected animals and the quantification of viral ...