Name: quantifying leukocyte egress via lymphatic vessels from murine skin and tumors
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantifying Leukocyte Egress via Lymphatic Vessels from Murine Skin and Tumors at JoVE.com

Författarna vill tacka Dr Marcus Bosenberg för att tillhandahålla YUMM 1.1 och YUMM 1,7 murina melanom linjer och Dr Deborah J. Fowell för att tillhandahålla B6. CG-Tg(CAG-tdKaede) 15Utr möss i samförstånd med RIKEN BRC genom nationella Bio-resursen i MEXT, Japan.

Alla djur protokoll har godkänts av den institutionella djur vård och användning kommittén på Oregon Health & Science University.
1. induktion av Inflammation och FITC målning av mus Pinna
<ol><li>I en LAF, söva en C57Bl/6 mus med förångade isofluorane (framkalla på 3-5% isofluorane och underhålla på 1-3% isofluorane; syre flöde på 0,5-1,0 L/min). Säkerställa korrekt anesthetization genom att övervaka förlusten av pedal reflexen, ofrivilliga rörelser och nedsatt andningsfr...

Även om den leukocyt avstigning från perifera, icke-lymfoida vävnader är kritiska för initiering och upplösning av immunreaktioner, är de molekylära mekanismer som reglerar avstigning dåligt känd. Denna lucka i kunskap beror till stor del på tillgången av verktyg för kvantifiering i vivo. Här, beskriver vi användningen av photoconvertible möss (Kaede-Tg) för att kvantifiera endogena leukocyt avstigning från huden och tumörer och ge en direkt head-to-head jämförelse med FITC färg i inflammat...

Perifer vävnad immunsvar formas inte bara av leukocyt rekrytering till platser av inflammation, men också av mekanismer som reglerar deras efterföljande kvarhållandet. Skyddande immunitet styrs således av kumulativa cellulära och molekylära mekanismer som avgör huruvida en leukocyt träder, vistelser inom, eller snarare migrerar ut ur perifer vävnad via lymfkärl. Ännu viktigare, är benägenheten för leukocyter att avsluta vävnad genom lymfkärl (kallas avstigning) kopplad till sina specialiserade funktioner. Dendritiska celler (DC) förvärva flyttande beteende som svar till mognad signaler leder till antigen transport och presentation i dränerande lymfkörtlar (dLN), en process som är nödvändig för adaptiv immunitet1. Rensning myeloida celler, såsom makrofager och neutrofiler, tjäna till att rensa apoptotiska skräp genom fagocytos. Under bakterieinfektion, neutrofiler avstigning vävnad och slutligen genomgå apoptos i dLNs2 och en modell av DSS-inducerad kolit, data stödjer hypotesen att makrofag avstigning är nödvändigt att lösa lokal inflammation3. Om antal neutrofiler och makrofager avstigning uppstår i alla inflammatoriska sammanhang är dock okänd. Bevis för T-lymfocyter avstigning från steady state4,5,6,7, infekterade8och inflammerade4,9,10, 11,12 perifer, icke-lymfoida vävnader indikerar att återcirkulera aktivt T-celler, men de tissue-baserade signaler som kör denna avfart förblir dåligt förstådd. Flera studier har identifierat signaler behövs för riktad övergång till dränering lymfatiska kapillärer och efterföljande avstigning inklusive chemokine (C-C motiv) ligand 21 (CCL21) och dess receptor CCR74,11, 13, chemokine (C-X-C motiv) ligand 12 (CXCL12) och dess receptor CXCR42,14, och sfingosin-1-fosfat-(S1P)10,15,16. Dessa mekanismer är inte aktiva i alla sammanhang dock och huruvida de fastställa avstigning av alla celltyper förblir en öppen fråga. Ännu viktigare, ytterligare kräver insikt om de mekanismer som reglerar avstigning och dess funktionella relevans i sjukdom kvantitativa i vivo analysmetoder.
Flera metoder har använts för att kvantifiera avstigning i flera djurmodeller i vivo inklusive direkta kanylering av lymfkärl, överföring av ex vivo märkta leukocyter, transdermal applikation av fluorescerande spårämnen, injektion av märkta partiklar och i vivo photoconversion17,18. Direkta kanylering av afferenta mus lymfkärl är svårt och begränsad i små djur av volymerna av vätska som kan samlas in. Kanylering har således till stor del utförts i stora djur (t.ex., får) där sådana kirurgiska manipulationer är praktiska. Dessa studier ger direkta bevis för förekomsten av både lymfoida och myeloida celler i lymfan10,19,20. Dessutom avslöjar får modeller att akut och kronisk inflammation ökade nästan 100 gånger10,21lymfocyter närvaro i lymfan.
Överföring av märkta och genetiskt manipulerade lymfocyter har allt avslöjat att CCR7 krävs för avstigning av CD4+ T celler från akut inflammerad hud5,11, medan förbehandling av lymfocyter med små molekylen S1P-receptoragonist hämmar FTY720, endast delvis sina avstigning10. Intressant, avstigning av överförda lymfocyter från kroniskt inflammerad hud är CCR7-oberoende10, men kräva delvis CXCR49. Överföring experiment, dock leverera icke-fysiologiskt antal ex vivo aktiveras och märkta lymfocyter in vävnaden genom injektion, vilket förändrar den biomekaniska miljön av vävnader och förhöjda interstitiell vätska tryck som öppna inledande lymfatiska kapillärer och förändra deras transport boenden22. Som ett alternativ, transdermal applicering av fluorescein fluoresceinisothiocyanat (FITC) i närvaro eller frånvaro av dermal irriterande (t.ex., dibutylftalat, DBP) eller infektion23,24 möjliggör spårning av Fagocytos celler som ackumuleras tracer och migrera till dLNs. Likaså ger fluorescently märkt tumörer ett sätt att spåra Fagocytos celler som har uppslukat tumör material25. Dessa metoder har gett viktig insikt om de mekanismer som styr DC utgång13,14,17,26,27 men inte kan spåra icke-fagocytos lymfocyter och tolkning kan kompliceras av gratis lymfdränage av lösliga FITC således märkning stannfågel, LN bosatt DCs.
Alternativt, intravital mikroskopi är ett kraftfullt verktyg som möjliggör in-vivo spårning av fysiologiskt relevanta leukocyt populationer i realtid28,29. Används i kombination med reporter möss och antikroppsbaserade i vivo märkning Immunofluorescerande, intravital mikroskopi har avslöjat komplexet rumsliga och tidsmässiga dynamiken i immun cell människohandel, inklusive interstitiell migration30 , själavandring över de lymfatiska endotelet, passage inom lymfatiska lumen och migration på LN post28,31. Brett antagandet av intravital avbildningstekniker begränsas av bekostnad, nödvändig expertis för uppsättning upp, och begränsade genomströmning för att kvantifiera flera celltyper. Fortfarande, koppling kvantitativa metoder att analyserar populationsdynamik vävnader med intravital imaging kommer att ge ytterligare och viktiga mekanistisk insikt beträffande mekanismer motilitet och migration mot och inom lymfatiska kapillärer 18 , 31 , 32.
Följaktligen i vivo photoconversion har vuxit fram som en metod som möjliggör i situ märkning, oberoende av fagocytiska aktiviteten, och för kvantifiering av fysiologiska leukocyt avstigning (när den kombineras med flödescytometri) i den avsaknaden eller förekomsten av utmaning. Kaede-Tg möss express konstitutivt ett protein som isolerats från stenig korallrev som uppvisar grön fluorescens (Kaede grön) tills utsätts för ultraviolett ljus, varefter det irreversibelt konverterar till röd fluorescens (Kaede röd)33. Photoconverted celler kan spåras som de avstigning från perifer vävnad webbplatser och ackumuleras i dLNs. Detta och andra liknande photoconvertible mus modeller34,35 har avslöjat viktig biologi inklusive konstituerande avstigning av regulatoriska T-celler från huden36, CXCR4-beroende B cell avstigning från Peyers37 , mobilisering av resident T minnesceller vid peptid rechallenge38och bred leukocyt avstigning från tumör mikromiljö39. Häri, utför vi en head-to-head jämförelse av photoconversion med transdermal FITC ansökan i samband med kutan inflammation och infektion som möjliggör direkt jämförelse av befintliga data med metoden photoconvertible. Dessutom vi demonstrera photoconversion i implanterade tumörer och beskriva verkningsgraden och selektiv avstigning från tumör mikromiljö. Som sådan, hävdar vi att ytterligare tillämpning av dessa metoder krävs att belysa leukocyt avstigning från tumörer, som kommer att ha betydande konsekvenser för att tolka intratumoral leukocyt komplexitet, anti-tumor immunitet, kritiska biologi och behandlingssvaret.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Collagenase D</td>
			<td>Roche</td>
			<td>11088866001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNase</td>
			<td>Roche</td>
			<td>4536282001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver-LED-405B light source with optical fiber and collimtor</td>
			<td>Prizmatix Ltd</td>
			<td>V8144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescein isothiocyanate isomer I</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F4274</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dibutyl phthalate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>524980</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>acetone</td>
			<td>Macron Fine Chemicals</td>
			<td>2440-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>29-guage syringes</td>
			<td>Exel International</td>
			<td>26029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evans Blue</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E2129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70 um cell strainers</td>
			<td>VWR</td>
			<td>732-2758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Caisson</td>
			<td>HBL06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIVE/DEAD Fixable Aqua Dead Cell Stain Kit</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>L34966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Purified Anti-mouse CD16/CD32</td>
			<td>Tonbo Biosciences</td>
			<td>70-0161-M001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV605 CD11c (clone N418)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>117334</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PerCP-Cy5.5 MHCII (clone M5/114.15.2)</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>562363</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV421 CD3e (clone 145-2C11)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>100341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC CD8a (clone 53-6.7)</td>
			<td>TonBo Biosciences</td>
			<td>20-0081-u100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC-Cy7 CD45 (clone 30-F11)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>103116</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV650 CD19 (clone 6D5)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>115541</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PercCP-Cy5.5 Ly6C (clone HK1.4)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>128011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 647 F4/80 (clone BM8)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>123121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APC-Cy7 Ly6G (clone 1A8)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>127623</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV711 CD11b (clone M1/70)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>101241</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV605 CD45 (clone 30-F11)</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>103155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV711 CD4 (clone RM4-5)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>563726</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (Fraction V)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1600-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anit-Rat and Anti-Hamster Igk / Negative Control Compensation Particle Set</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>552845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fortessa Flow Cytometer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FlowJo v10 Software</td>
			<td>FlowJo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantifying leukocyte egress via lymphatic vessels from murine skin and tumors

Leukocyt avstigning från perifera vävnader till dränerande lymfkörtlar är inte bara avgörande för immun övervakning och initiering utan bidrar även till resolution av perifer vävnad svaren. Medan en mängd metoder används för att kvantifiera leukocyt avstigning från icke-lymfoida, perifera vävnader, förblir de cellulära och molekylära mekanismer som reglerar innehållsberoende avstigning dåligt förstådd. Här, beskriver vi användningen av i situ photoconversion för kvantitativ analys av leukocyt avstigning från murina hud och tumörer. Photoconversion möjliggör direkt märkning av leukocyter bosatta inom kutan tissue. Om huden utsätts för ultraviolett ljus inducerar lokala kännetecknas inflammatoriska svar av leukocyt infiltrat och vaskulära leakiness, i en head-to-head jämförelse med transdermal applikation av fluorescerande spårämnen, photoconversion specifikt märkt flyttande dendritiska cellpopulationer och samtidigt aktiverade kvantifiering av myeloiska och lymfoida avstigning från kutana mikromiljö och tumörer. Mekanismer för egress leukocyt förbli en komponent som saknas i vår förståelse av intratumoral leukocyt komplexitet och således tillämpningen av verktygen som beskrivs häri ger unik insikt i dynamiken i tumör immun mikromiljö båda vid steady state och som svar på behandling.

Vi försökte först replikera photoconversion resultat publicerade i litteraturen att utvärdera effektiviteten och bestämma den associerade inflammationen i mus huden. Den öra pinna utsattes för 100 mW violett ljus (405 nm) för 3 min som tidigare beskrivs33. Enstaka cellsuspensioner genereras från örat hud eller cervikal dLNs omedelbart efter exponeringen visade en 78% verkningsgrad för alla CD45+ leukocyter i huden med inga konverterade celler ...

Watch this Scientific Journal Video about Quantifying Leukocyte Egress via Lymphatic Vessels from Murine Skin and Tumors at JoVE.com

Quantifying Leukocyte Egress via Lymphatic Vessels from Murine Skin and Tumors

Här visar vi metoderna för in-vivo kvantifiering av leukocyt avstigning från naiva, inflammerad, och maligna murina hud. Vi utför en head-to-head jämförelse av två modeller: transdermal FITC ansökan och i situ photoconversion. Vi visar dessutom nyttan av photoconversion för att spåra leukocyt avstigning från kutana tumörer.

Kvantifiera leukocyt avstigning via lymfkärl från murina hud och tumörer

Leukocyte egress from peripheral tissues to draining lymph nodes is not only critical for immune surveillance and initiation but also contributes to the ...

Photoconversion ger en spårbar in vivo metod för kvantitativ analys av leukocyte egress för en mekanistisk inblick i leukocyte bostad och exit dynamik från flera vävnad platser i sjuka stater. Tja, här visar vi nyttan av leukocyte spårning från testning tumörer. Tillämpningen av denna analys på andra vävnader och sjukdomar begränsas endast av förmågan att administrera ljus.Den största fördelen med denna teknik är att för att göra det möjligt att kvantifiering av endogena, snarare än överfört immuncellpopulationer som en uttrappning från inflammerade vävnader in vivo. För att framkalla inflammation, efter att ha bekräftat en brist på svar på tå nypa, använd en mikropipette att administrera 20 mikroliter av dibutylftalat eller DBP, till den ventrala sidan av örat pinna av en sövd Kaede transgena mus. Efter att DBP att torka, dra örat genom en slits i en bit aluminiumfolie och använda dubbelsidig tejp för att säkra örat platt till folien med ryggsidan uppåt.Placera sedan att du är direkt under en 405 nanometer ljuskälla och fotokonvertera i tre minuter vid 100 milliwatt effekt. För vaccinia infektion, använd en micropipette att administrera 5 gånger 10 till 6: e plack bildar enheter av vaccinia virus i 10 microliters av PBS på örat pinna av en sövd Kaede transgena mus och peta pinna 25 gånger. 24 timmar senare, fotokonvertera pinna som just visat.Vid lämplig experimentell tidpunkt, skörda pinnae och livmoderhalscancer och inguinal lymfkörtlar och använda två par pincett för att skala isär ventrala och dorsala sidan av varje pinna. Placera sedan lymfkörtlarna och pinnabitarna, med insidan av örat nedåt, i enskilda brunnar av en 24-brunnsplatta som innehåller 1 milligram per milliliter Collagenas D och 80 enheter per milliliter dnas som späds ut i HBSS som innehåller kalcium och magnesium. Använd två 29 gauge nålar för att retas öppna varje lymfkörtel kapsel och placera plattan på 37 grader Celsius i 30 minuter.I slutet av inkubationen, tryck de smälta pinna och lymfkörtel vävnader genom separata 70 Micron nylon cell silar för att få encell suspensioner av varje vävnad. När tumörerna har vuxit till lämplig experimentell storlek, raka någon nyutvecklad päls runt tumörplatsen och dra tumören genom ett cirkulärt hål skuren i en bit aluminiumfolie. Placera tumören direkt under 405 nanometer ljuskälla och photoconvert i 5 minuter vid 200 milliwatt av makt.24 timmar efter fotokonverteringen, skörda tumörer och brachial och inguinal lymfkörtlar från varje djur och använda sax för att finhacka tumörer inom enskilda brunnar av en 24-väl platta som innehåller Kollagenas D och DNase i HBSS. Placera lymfkörtlarna i separata brunnar och retas öppna kapslarna som bara visat. Efter inkubering av tumörer i en timme och lymfkörtlarna i en halvtimme vid 37 grader Celsius, tryck de smälta vävnaderna genom separata 70 Micron silar för att få encells suspensioner av varje vävnad.För att analysera de encelliga suspensionerna genom flödescytometri, först samla in mjälten eller blodet från en Kaede transgen mus och lysa de röda blodkropparna med ammoniumklorid kaliumbuffert. Dela cellerna i en okonverterad Kaede FITC och en konverterade Kaede PE befolkningen och återanvänd den enda färgen Kaede PE celler i en milliliter av PBS i en brunn av en 24-brunns platta, sedan photokonvert cellerna i 5 minuter under en 405 nanometer ljuskälla på 100 milliwatt av makt. Nästa använda den photoconverted Kaede PE celler och de icke konverterade Kaede FITC celler för att ställa in photomultiplier spänningar till 70 till 80%av det totala intervallet för varje fluorescerande kanal.När spänningarna för Kaede proteinerna har ställts in, kompensera för alla de andra primära antikroppar fläckar med hjälp av enda fluorophore märkt ersättning pärlor, enligt tillverkarens instruktioner. Kör sedan proverna på flödescytometern enligt standardflödescytometriska analysprotokoll. Enda cell suspensioner som genereras från örat huden eller livmoderhalscancer dränerande lymfkörtlar omedelbart efter fotokonversion exponering avslöja en 78%konvertering effektivitet av alla CD45 positiva leukocyter i huden, med inga konverterade celler observeras i den dränerande lymfkörtlar.Kvantifiering av antalet infiltrera CD45 positiva leukocyter i foto omvandlas öron noll och 24 timmar efter konvertering, avslöjar att violett ljus exponering orsakar en statistiskt signifikant ökning av leukocyte infiltration. Denna ökning av CD45 positiva leukocyte infiltration dock är liten i förhållande till infiltration framkallas av en potent inflammatorisk stimulans såsom vaccinia virus. Fotokonvertering ökar också vaskulär permeabilitet i öronpinnaet mätt med Miles-analys, tillsammans vilket indikerar att effekter av violett ljus på vävnadsinflammation bör beaktas vid optimering av dos, exponeringstid och datatolkning.Flow cytometric analys av dissociated tumörceller från foto konverterade djur avslöjar en betydande omvandling av intratumoral CD45 positiva celler från Kaede FITC positiva till Kaede PE positiva, medan dränerande lymfkörtelceller förblir oomvända. Fotokonversion effektivitet CD45 positiva leukocyter varierade avsevärt mellan tumörtyper och storlekar, med CD45 positiva leukocyter inom små melanom tumörer visar den mest effektiva photoconversion. Som tumörvolymerna ökar, minskar omvandlingen effektivitet till cirka 50%Noterbart, melanin har en slående inverkan på fotokonversion effektivitet med en maximal fotokonversion av CD45 positiva celler observeras inom melanin-producerande tumörer på endast cirka 30%i mindre tumörer, som sjunker till 10%som tumörvolymerna närmar sig 400 kubikmillimeter.Undersökningen av tumör dränera lymfknutor 24 timmar efter photoconversion avslöjar förekomsten av Kaede röda positiva immunceller av olika fenotyper, vilket visar leukocyte utvandring från foto omvandlas tumör. Efter dess utveckling banade denna teknik vägen för forskare inom immunologi att avslöja kinetik steady state och inflammerad leukocyt omsättning i perifervävnad. Medan du försöker detta förfarande, Det är viktigt att se till att endast vävnad av intresse är photoconverted, som oavsiktlig fotokonversion av den omgivande vävnaden kommer att äventyra dina resultat.Individer nya till denna metod bör optimera exponeringstiden för omvandling av deras vävnad, liksom varaktighet av tiderna innan vävnadssamlingen sker baserat på dynamiken i leukocyt av intresse.

Research

JoVE Journal

Biology

Murine Skin Transplantation

Murina hudtransplantation

As one of the most stringent and least technically challenging models, skin transplantation is a standard method to assay host T cell responses to ...

Analysis of Physiologic E-Selectin-Mediated Leukocyte Rolling on Microvascular Endothelium

Analys av Fysiologiska E-selektin-medierad Leukocyt rullar på Microvascular endotelet

E-selectin is a type-1 membrane protein on microvascular endothelial cells that helps initiate recruitment of circulating leukocytes to cutaneous, bone ...

Isolation and Culture of Adult Epithelial Stem Cells from Human Skin

Isolering och odling av vuxna Epithelial stamceller från mänskliga Skin

The homeostasis of all self-renewing tissues is dependent on adult stem cells. As undifferentiated stem cells undergo asymmetric divisions, they generate ...

Isolation of Immune Cells from Primary Tumors

Isolering av immunceller från primära tumörer

Tumors create a unique immunosuppressive microenvironment (tumor microenvironment, TME) whereby leukocytes are recruited into the tumor by various ...

gDNA Enrichment by a Transposase-based Technology for NGS Analysis of the Whole Sequence of BRCA1, BRCA2, and 9 Genes Involved in DNA Damage Repair

gDNA Enrichment by a Transposase-based Technology for NGS Analysis of the Whole Sequence of BRCA1, BRCA2, and 9 Genes Involved in DNA Damage Repair

gDNA Anrikning av ett transposas baserad teknik för NGS Analys av hela sekvensen av<em&gt; BRCA1</em&gt;,<em&gt; BRCA2</em&gt;, och nio gener involverade i DNA-skador Repair

The widespread use of Next Generation Sequencing has opened up new avenues for cancer research and diagnosis. NGS will bring huge amounts of new data on ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

Isolering och kultur av primära muskeratinocyter från neonatal och vuxen mushud

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Expression of Fluorescent Fusion Proteins in Murine Bone Marrow-derived Dendritic Cells and Macrophages

Uttryck för fluorescerande fusionsproteinerna i murina benmärg-derived dendritiska celler och makrofager

Dendritic cells and macrophages are crucial cells that form the first line of defense against pathogens. They also play important roles in the initiation ...

Y-27632 Enriches the Yield of Human Melanocytes from Adult Skin Tissues

Y-27632 Berikar avkastningen av mänskliga melanocyter från vuxna hudvävnader

The isolation and culture of primary melanocytes from skin tissues is very important for biological research and has been widely used for clinical ...

A Murine Model of a Burn Wound Reconstructed with an Allogeneic Skin Graft

En Murine modell av en brännskada rekonstrueras med en allogen hud Graft

Trivial superficial wounds heal without complications by primary intention. Deep wounds, such as full thickness burns, heal by secondary intention and ...

Inhibition of Wound Epidermis Formation via Full Skin Flap Surgery During Axolotl Limb Regeneration

Hämning av sår epidermisbildning via full hudklaffkirurgi under Axolotl Lem Regeneration

Classical experiments in salamander regenerative biology over the last century have long established that the wound epidermis is a crucial signaling ...