Name: investigation of genetic dependencies using crispr-cas9-based competition assays
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Investigation of Genetic Dependencies Using CRISPR-Cas9-based Competition Assays at JoVE.com

pCW-Cas9 प्लाज्मिड ने एरिक लैंडर & डेविड Sabatini (Addgene प्लाज्मिड # ५०६६१) से उपहार और pKLV2-U6gRNA5 (BbsI)-PGKpuro2ABFP-डब्ल्यू प्लाज्मिड लैब (युस Addgene #67974 से प्लाज्मिड । हम प्रवाह विश्लेषण और छंटाई के साथ समय पर मदद के लिए एसबीपी चिकित्सा डिस्कवरी संस्थान में प्रवाह Cytometry कोर धंयवाद देना चाहूंगा । हम लेडी टाटा मेमोरियल फाउंडेशन के सहयोग को स्वीकार करना चाहते है ईसवी हम भी निंनलिखित धन स्रोतों के समर्थन को स्वीकार करना चाहूंगा: NIH/NCI P30 CA030199 कैंसर केंद्र प्रायोजित अनुदान, वी फाउंडेशन और सैन डिएगो NCI कैंसर केंद्रों (C3) #PTC2017to A.J.D.

1. स्थिर और सक्रिय Cas9 की उच्च अभिव्यक्ति के साथ एएमएल सेल लाइन क्लोन पैदा
<ol><li>Cas9 lentivirus का उत्पादन
	<ol>
<li>0 दिन: 10% भ्रूण गोजातीय सीरम (FBS) के साथ DMEM के 10 मिलीलीटर में प्लेट 4 x 106 293T कोशिकाओं और पेनिसिलिन और एल-glu...

<ol>
	<li>Mali, P., Esvelt, K. M., Church, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cas9+as+a+versatile+tool+for+engineering+biology.">Cas9 as a versatile tool for engineering biology.</a> Nature Method. 10 (10), 957-963 (2013).</li><li>Doudna, J. A., Charpentier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome+editing.+The+new+frontier+of+genome+engineering+with+CRISPR-Cas9.">Genome editing. The new frontier of genome engineering with CRISPR-Cas9.</a> Science. 346 (6213), 1258096 (2014).</li><li>Wang, H., La Russa, M., Qi, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR/Cas9+in+Genome+Editing+and+Beyond.">CRISPR/Cas9 in Genome Editing and Beyond.</a> Annual Review of Biochemistry. 85, 227-264 (2016).</li><li>Shi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Discovery+of+cancer+drug+targets+by+CRISPR-Cas9+screening+of+protein+domains.">Discovery of cancer drug targets by CRISPR-Cas9 screening of protein domains.</a> Nature Biotechnology. 33 (6), 661-667 (2015).</li><li>Kuhn, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+Chromatin+Regulators+Inhibits+Leukemogenic+Gene+Expression+in+NPM1+Mutant+Leukemia.">Targeting Chromatin Regulators Inhibits Leukemogenic Gene Expression in NPM1 Mutant Leukemia.</a> Cancer Discovery. 6 (10), 1166-1181 (2016).</li><li>Erb, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcription+control+by+the+ENL+YEATS+domain+in+acute+leukaemia.">Transcription control by the ENL YEATS domain in acute leukaemia.</a> Nature. 543 (7644), 270-274 (2017).</li><li>Mali, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA-guided+human+genome+engineering+via+Cas9.">RNA-guided human genome engineering via Cas9.</a> Science. 339 (6121), 823-826 (2013).</li><li>Brinkman, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Easy+quantification+of+template-directed+CRISPR/Cas9+editing.">Easy quantification of template-directed CRISPR/Cas9 editing.</a> Nucleic Acids Research. 46 (10), 58 (2018).</li><li>Nguyen, A. T., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+diverse+functions+of+Dot1+and+H3K79+methylation.">The diverse functions of Dot1 and H3K79 methylation.</a> Genes &amp; Development. 25 (13), 1345-1358 (2011).</li><li>Vlaming, H., van Leeuwen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+upstreams+and+downstreams+of+H3K79+methylation+by+DOT1L.">The upstreams and downstreams of H3K79 methylation by DOT1L.</a> Chromosoma. 125 (4), 593-605 (2016).</li><li>Bernt, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MLL-rearranged+leukemia+is+dependent+on+aberrant+H3K79+methylation+by+DOT1L.">MLL-rearranged leukemia is dependent on aberrant H3K79 methylation by DOT1L.</a> Cancer Cell. 20 (1), 66-78 (2011).</li><li>Daigle, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+killing+of+mixed+lineage+leukemia+cells+by+a+potent+small-molecule+DOT1L+inhibitor.">Selective killing of mixed lineage leukemia cells by a potent small-molecule DOT1L inhibitor.</a> Cancer Cell. 20 (1), 53-65 (2011).</li><li>Jo, S. Y., Granowicz, E. M., Maillard, I., Thomas, D., Hess, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+for+Dot1l+in+murine+postnatal+hematopoiesis+and+leukemogenesis+by+MLL+translocation.">Requirement for Dot1l in murine postnatal hematopoiesis and leukemogenesis by MLL translocation.</a> Blood. 117 (18), 4759-4768 (2011).</li><li>Nguyen, A. T., Taranova, O., He, J., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DOT1L,+the+H3K79+methyltransferase,+is+required+for+MLL-AF9-mediated+leukemogenesis.">DOT1L, the H3K79 methyltransferase, is required for MLL-AF9-mediated leukemogenesis.</a> Blood. 117 (25), 6912-6922 (2011).</li><li>Zuber, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toolkit+for+evaluating+genes+required+for+proliferation+and+survival+using+tetracycline-regulated+RNAi.">Toolkit for evaluating genes required for proliferation and survival using tetracycline-regulated RNAi.</a> Nature Biotechnology. 29 (1), 79-83 (2011).</li><li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+and+characterization+of+essential+genes+in+the+human+genome.">Identification and characterization of essential genes in the human genome.</a> Science. 350 (6264), 1096-1101 (2015).</li><li>Li, M. J., Rossi, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lentivirus+transduction+of+hematopoietic+cells.">Lentivirus transduction of hematopoietic cells.</a> CSH Protocols. 2007, (2007).</li></ol>

इस पांडुलिपि में, हम एक विस्तृत प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए एक CRISPR-Cas9 आधारित प्रतिस्पर्धी विकास परख के लिए एएमएल सेल लाइनों में उंमीदवार जीन की भूमिका की जांच प्रवाह का उपयोग कर मानव में cytometry/murine एएमएल क?...

पिछले कुछ दशकों में कई अनुसंधान तीव्र माइलॉयड ल्यूकेमिया (एएमएल) रोगजनन में प्रमुख आणविक रास्ते के योगदान की पहचान पर ध्यान केंद्रित प्रयासों को देखा है । परंपरागत रूप से, एएमएल कोशिकाओं में जीन व्यवधान सशर्त नॉकआउट चूहों या लघु hairpin आरएनए (shRNA) का उपयोग किया गया है । जबकि नॉकआउट चूहों जीन-विलोपन के spatio-लौकिक नियंत्रण के लिए एक परिष्कृत प्रणाली की पेशकश, जीन नॉकआउट चूहों पैदा श्रम गहन, समय लेने वाली और महंगी है । इसके अलावा, जीन-नॉकआउट पुनर्संयोजन रणनीतियों का उपयोग आसानी से स्केलेबल नहीं है; इन रणनीतियों खुद को अच्छी तरह से समानांतर में कई जीन की पूछताछ के लिए उधार नहीं है । छोटे हस्तक्षेप आरएनए (सिरना) या shRNA का उपयोग mRNAs अंतर्जात नीचे दस्तक करने के लिए आरएनए हस्तक्षेप विधियों की खोज के बाद, कई समूहों एएमएल में विशिष्ट जीन की भूमिका की जांच करने के लिए आरएनए हस्तक्षेप तकनीक का उपयोग शुरू कर दिया. दोनों murine और मानव एएमएल कोशिकाओं के बाद से पारंपरिक लिपिड आधारित अभिकर्मक तरीकों का उपयोग कर transfect के लिए बेहद मुश्किल है, सबसे अध्ययन lentivirally कोशिकाओं में जीन समारोह का अध्ययन करने के लिए retrovirally या shRNA इनकोडिंग एएमएल कार्यरत हैं । संकुल की हाल ही की खोज नियमित रूप से अंतराल लघु palindromic दोहराता (CRISPR) और संबद्ध कैस nucleases (CRISPR-Cas9) जीन लक्ष्यीकरण प्रौद्योगिकियों1,2,3में क्रांति ला दिया है । CRISPR-Cas9, विशिष्ट जीन या जीनोमिक क्षेत्रों का उपयोग कर हटाया, संपादित किया जा सकता है या दक्षता और आसानी के साथ टैग । CRISPR-Cas9 आधारित जीन-संपादन अब सादगी, प्रभावशीलता, और इस तकनीक की व्यापक प्रयोज्यता के कारण विविध कोशिका प्रकार में जीनोटाइप-phenotype संबंधों की जांच के लिए पसंद की विधि के रूप में उभर रहा है । CRISPR-Cas9 आधारित तरीकों को भी एएमएल में पसंद की विधि बन रहे हैं, न केवल व्यक्तिगत जीन पूछताछ के लिए, लेकिन यह भी एक तरीका है सरणी या परित आनुवंशिक में कई जीन लक्ष्य के रूप में समानांतर में अनेक जीन की जांच के उद्देश्य से स्क्रीन क्षमता एएमएल-निर्भरताएं4,5,6।
इस पांडुलिपि में, हम एएमएल कोशिकाओं के विकास पर जीन-व्यवधान के प्रभाव को मापने के लिए एक सरल प्रतिस्पर्धी विकास परख का वर्णन करते हैं, जो स्थिर CRISPR-Cas9-मध्यस्थता जीन-संपादन के बाद उच्च-प्रवाह प्रवाह cytometry के आधार पर किया जाता है । इस विधि एएमएल कोशिकाओं में समानांतर में कई जीनों की भूमिका की जांच के लिए मध्यम प्रवाह प्रयोगों के लिए सरल, कुशल, और स्केलेबल है.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>FLAG-M2 Antibody</td>
			<td>sigma-aldrich</td>
			<td>F3165, lot # SLBS3530V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-mouse Antibody</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>31446, lot # TA2514341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperSignal West Femto Maximum Sensitivity Substrate</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>34095</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ChemiDoc Imaging System</td>
			<td>BIO RAD</td>
			<td>17001401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sorvall Legend RT centrifuge</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blasticidin</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>R21001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYTOX Red</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>S34859</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opti-MEM</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>31985062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>11965-092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>11875-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine (200 mM)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>25030081</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>SAFC</td>
			<td>12303C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>single gRNA vector</td>
			<td>Addgene #67974</td>
			<td>pKLV2-U6gRNA5(BbsI)-PGKpuro2ABFP-W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CelLytic Nuclear extraction kit</td>
			<td>sigma-alorich</td>
			<td>NXTRACT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XtremeGENE 9</td>
			<td>sigma-alorich</td>
			<td>6365787001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retronectin</td>
			<td>Takara</td>
			<td>T100B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flow cytometer</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 PNK</td>
			<td>NEBioLabs</td>
			<td>M0201S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 DNA ligation buffer</td>
			<td>NEBioLabs</td>
			<td>B0202S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 DNA Ligase enzyme</td>
			<td>NEBioLabs</td>
			<td>M0202S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>BP1760-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB agar</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>BP9724-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Broth</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>BP9731-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiagen mini-prep kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>27104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop Spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>NanoDrop One</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Murine IL-3</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>213-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Murine IL-6</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>216-16</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Murine M-CSF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>315-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stable competent cells</td>
			<td>NEBiolabs</td>
			<td>C3040I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 cm Tissue Culture dishes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>353003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell lysis solution</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>158906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protein precipitation solution</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>158910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNA hydration solution</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>158914</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAquick Gel Extraction Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>28704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BbSI</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>R0539S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APEX 2.0 X Taq Red Master Mix Kit</td>
			<td>Genessee Scientific</td>
			<td>42-138</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Puromycin</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>BP2956100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL polypropylene conical tubes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>1495949A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL polypropylene conical tubes</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>1495970C</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

investigation of genetic dependencies using crispr-cas9-based competition assays

जीन गड़बड़ी अध्ययनों को एएमएल रोगजनन में व्यक्तिगत जीन की भूमिका की जांच के लिए बड़े पैमाने पर किया गया है. पूरा जीन व्यवधान प्राप्त करने के लिए, इन अध्ययनों के कई जटिल जीन नॉकआउट मॉडल का उपयोग किया है । हालांकि नॉकआउट चूहों के साथ ये अध्ययन जीनोटाइप-टू-phenotype संबंधों की जांच के लिए एक सुरुचिपूर्ण और समय-परीक्षण प्रणाली की पेशकश करते हैं, जो उंमीदवार जीन का आकलन करने के लिए एक तीव्र और स्केलेबल विधि है, जो एएमएल मॉडल में एएमएल सेल प्रसार या अस्तित्व में भूमिका निभाते हैं एकाधिक उंमीदवार जीन के समानांतर पूछताछ में तेजी लाने में मदद मिलेगी । जीनोम में हाल ही में अग्रिम-संपादन प्रौद्योगिकियों नाटकीय रूप से हमारे एक अभूतपूर्व पैमाने पर आनुवंशिक perturbations प्रदर्शन करने की क्षमता को बढ़ाया है । एक जीनोम संपादन की ऐसी प्रणाली CRISPR-Cas9 आधारित विधि है कि लक्ष्य सेल जीनोम में तेजी से और प्रभावोत्पादक परिवर्तन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है । CRISPR/Cas9 की सहजता और दरिद्रता-मध्यस्थता जीन-विलोपन यह phenotypic परख में जीन की एक बड़ी संख्या के पूछताछ के लिए सबसे आकर्षक तकनीकों में से एक बनाता है । यहां, हम एक सरल CRISPR/Cas9 मध्यस्थता जीन-व्यवधान उच्च प्रवाह प्रवाह के साथ संयुक्त-cytometry-आधारित प्रतियोगिता परख के लिए जीन की भूमिका की जांच है कि प्रसार या मानव के अस्तित्व में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभा सकता है और murine एएमएल कक्ष रेखाएं ।

हमारे अध्ययन में, हम पहले transduced MOLM13 मानव एएमएल सेल लाइन है कि उच्च AF9 वायरस एंकोडिंग के साथ MLL-translocation titer भालू Cas9-blasticidin lentiviral प्लाज्मिड । हमारे हाथ में, थोक unsort-Cas9 कोशिकाओं पश्चिमी सोख्ता द्वारा उच्च स्तर C...

Watch this Scientific Journal Video about Investigation of Genetic Dependencies Using CRISPR-Cas9-based Competition Assays at JoVE.com

Investigation of Genetic Dependencies Using CRISPR-Cas9-based Competition Assays

इस पांडुलिपि का वर्णन एक संकुल नियमित रूप से अंतराल लघु Palindromic दोहराता (CRISPR) CRISPR-Cas9-आधारित विधि तीव्र माइलॉयड ल्यूकेमिया (एएमएल) सेल प्रसार में कई उंमीदवार जीन की भूमिका की सरल और शीघ्र जांच के लिए समानांतर. इस तकनीक स्केलेबल है और अंय कैंसर सेल लाइनों में लागू किया जा सकता है के रूप में अच्छी तरह से ।

आनुवंशिक निर्भरता की जांच CRISPR-Cas9-आधारित प्रतियोगिता परख का उपयोग

Gene perturbation studies have been extensively used to investigate the role of individual genes in AML pathogenesis. For achieving complete gene ...

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Coculture Assays अध्ययन करने के लिए ग्लयोब्लास्टोमा आक्रमण की बृहतभक्षककोशिका और Microglia उत्तेजना

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

विकास और एक Preclinical रोगी व्युत्पन्न ट्यूमर उपन्यास विरोधी कैंसर उपचार की जांच के लिए Xenograft मॉडल का रखरखाव

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; Imaginal डिस्क ट्यूमर आदर्श: दृश्य और जीन अभिव्यक्ति और ट्यूमर invasiveness की मात्रा जेनेटिक मोज़ाइक का प्रयोग

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Live-Cell Imaging Assays to Study Glioblastoma Brain Tumor Stem Cell Migration and Invasion

लाइव सेल इमेजिंग परख ग्लियोब्लास्टोमा ब्रेन ट्यूमर स्टेम सेल प्रवासन और आक्रमण का अध्ययन करने के लिए

Glioblastoma (GBM) is an aggressive brain tumor that is poorly controlled with the currently available treatment options. Key features of GBMs include ...

Digital Polymerase Chain Reaction Assay for the Genetic Variation in a Sporadic Familial Adenomatous Polyposis Patient Using the Chip-in-a-tube Format

डिजिटल पोलीमरेज़ एक छिटपुट पारिवारिक एडिनोमेटस पोलीपोसिस रोगी में आनुवंशिक भिंनता के लिए श्रृंखला प्रतिक्रिया परख चिप का उपयोग कर-a-ट्यूब प्रारूप

The quantitative analysis of human genetic variation is crucial for understanding the molecular characteristics of serious medical conditions, such as ...

Assessment of the Metabolic Profile of Primary Leukemia Cells

प्राथमिक ल्यूकेमिया कोशिकाओं के चयापचय प्रोफ़ाइल का आकलन

The metabolic requirement of cancer cells can negatively influence survival and treatment efficacy. Nowadays, pharmaceutical targeting of metabolic ...

Yeast As a Chassis for Developing Functional Assays to Study Human P53

अध्ययन मानव P53 करने के लिए कार्यात्मक परख के विकास के लिए एक चेसिस के रूप में खमीर

The finding that the well-known mammalian P53 protein can act as a transcription factor (TF) in the yeast S. cerevisiae has allowed for the development of ...

Patient-derived Heterogeneous Xenograft Model of Pancreatic Cancer Using Zebrafish Larvae as Hosts for Comparative Drug Assessment

रोगी व्युत्पन्न विषम लैंगिक Xenograft मॉडल अग्नाशय के कैंसर के तुलनात्मक दवा आकलन के लिए मेजबान के रूप में ज़ेब्राफ़िश लार्वा का उपयोग

Patient-derived tumor xenograft (PDX) and cell-derived tumor xenograft (CDX) are important techniques for preclinical assessment, medication guidance and ...