Name: protein kinase c-delta inhibitor peptide formulation using gold nanoparticles
Uploaded: 2019-03-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protein Kinase C-delta Inhibitor Peptide Formulation using Gold Nanoparticles at JoVE.com

Bu eser Kanada Sağlık Enstitüleri araştırma (PJT-148847), Bakanlığı araştırma ve yenilik, Ontario (RE-08-029) ve Kanada ilk araştırma mükemmellik programı, tasarım Toronto Üniversitesi Tıp araştırma hibe tarafından desteklenmektedir. Dr. Mingyao Liu James ve Mary Davie sandalye akciğer yaralanma, onarım ve yenileme olduğunu.

1. hazırlanması peptid çözümleri
<ol><li>Peptidler almak (P2: CAAAAE, P4: CAAAAW, PKCδi: CSFNSYELGSL)-20 ° C-dondurucu ve tezcan, oda sıcaklığında (RT). Not: peptidler üzerinde Yoğuşmalı nem önlemek için kapalı şişe tutmak.</li>
	<li>Her peptid 0,01 g bir microscale üzerinde tartın. Her peptid ayrı 50 mL konik tüp içine koymak.</li>
	<li>P2 tüp 18.74 mL deiyonize (DI) su ekleyin.</li>
	<li>DI su 16.93 mL P4 tüp ekleyin.</li>
	<li>PKCδi Tube DI suda seyreltilmiş % 50 Asetonitril 8.21 mL e...

<ol>
	<li>Yusen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+registry+of+the+International+Society+for+Heart+and+Lung+Transplantation:+thirty-first+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report--2014;+focus+theme:+retransplantation.">The registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: thirty-first adult lung and heart-lung transplant report--2014; focus theme: retransplantation.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 33 (10), 1009-1024 (2014).</li><li>Lee, J. C., Christie, J. D., Keshavjee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+graft+dysfunction:+definition,+risk+factors,+short-+and+long-term+outcomes.">Primary graft dysfunction: definition, risk factors, short- and long-term outcomes.</a> Seminars in Respiratory and Critical. 31 (2), 161-171 (2010).</li><li>Chatterjee, S., Nieman, G. F., Christie, J. D., Fisher, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress-related+mechanosignaling+with+lung+ischemia:+lessons+from+basic+research+can+inform+lung+transplantation.">Shear stress-related mechanosignaling with lung ischemia: lessons from basic research can inform lung transplantation.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 307 (9), 668-680 (2014).</li><li>Inagaki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+delta-protein+kinase+C+protects+against+reperfusion+injury+of+the+ischemic+heart+in+vivo.">Inhibition of delta-protein kinase C protects against reperfusion injury of the ischemic heart in vivo.</a> Circulation. 108 (19), 2304-2307 (2003).</li><li>Lincoff, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+delta-protein+kinase+C+by+delcasertib+as+an+adjunct+to+primary+percutaneous+coronary+intervention+for+acute+anterior+ST-segment+elevation+myocardial+infarction:+results+of+the+PROTECTION+AMI+Randomized+Controlled+Trial.">Inhibition of delta-protein kinase C by delcasertib as an adjunct to primary percutaneous coronary intervention for acute anterior ST-segment elevation myocardial infarction: results of the PROTECTION AMI Randomized Controlled Trial.</a> European Heart Journal. 35 (37), 2516-2523 (2014).</li><li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=deltaV1-1+Reduces+Pulmonary+Ischemia+Reperfusion-Induced+Lung+Injury+by+Inhibiting+Necrosis+and+Mitochondrial+Localization+of+PKCdelta+and+p53.">deltaV1-1 Reduces Pulmonary Ischemia Reperfusion-Induced Lung Injury by Inhibiting Necrosis and Mitochondrial Localization of PKCdelta and p53.</a> American Journal of Transplantation. 16 (1), 83-98 (2016).</li><li>Lin, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Derangements+of+post-ischemic+cerebral+blood+flow+by+protein+kinase+C+delta.">Derangements of post-ischemic cerebral blood flow by protein kinase C delta.</a> Neuroscience. 171 (2), 566-576 (2010).</li><li>Lin, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+kinase+C+delta+modulates+endothelial+nitric+oxide+synthase+after+cardiac+arrest.">Protein kinase C delta modulates endothelial nitric oxide synthase after cardiac arrest.</a> Journal of Cerebral Blood Flow Metabolism. 34 (4), 613-620 (2014).</li><li>Albini, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HIV-tat+protein+is+a+heparin-binding+angiogenic+growth+factor.">HIV-tat protein is a heparin-binding angiogenic growth factor.</a> Oncogene. 12 (2), 289-297 (1996).</li><li>Kim, H., Moodley, S., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TAT+cell-penetrating+peptide+modulates+inflammatory+response+and+apoptosis+in+human+lung+epithelial+cells.">TAT cell-penetrating peptide modulates inflammatory response and apoptosis in human lung epithelial cells.</a> Drug Delivery and Translational Research. 5 (3), 275-278 (2015).</li><li>Lee, D., Pacheco, S., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+effects+of+Tat+cell-penetrating+peptide:+a+multifunctional+Trojan+horse.">Biological effects of Tat cell-penetrating peptide: a multifunctional Trojan horse.</a> Nanomedicine (Lond). 9 (1), 5-7 (2014).</li><li>Auffan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Towards+a+definition+of+inorganic+nanoparticles+from+an+environmental,+health+and+safety+perspective.">Towards a definition of inorganic nanoparticles from an environmental, health and safety perspective.</a> Nature Nanotechnology. 4 (10), 634-641 (2009).</li><li>Ghosh, P., Han, G., De, M., Kim, C. K., Rotello, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gold+nanoparticles+in+delivery+applications.">Gold nanoparticles in delivery applications.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 60 (11), 1307-1315 (2008).</li><li>Yang, H., Fung, S. Y., Liu, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Programming+the+cellular+uptake+of+physiologically+stable+peptide-gold+nanoparticle+hybrids+with+single+amino+acids.">Programming the cellular uptake of physiologically stable peptide-gold nanoparticle hybrids with single amino acids.</a> Angewandte Chemie International Edition. 50 (41), 9643-9646 (2011).</li><li>Lee, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effective+delivery+of+a+rationally+designed+intracellular+peptide+drug+with+gold+nanoparticle-peptide+hybrids.">Effective delivery of a rationally designed intracellular peptide drug with gold nanoparticle-peptide hybrids.</a> Nanoscale. 7 (29), 12356-12360 (2015).</li><li>Cheng, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotechnologies+for+biomolecular+detection+and+medical+diagnostics.">Nanotechnologies for biomolecular detection and medical diagnostics.</a> Current Opinion in Chemical Biology. 10 (1), 11-19 (2006).</li><li>Rosi, N. L., Mirkin, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanostructures+in+biodiagnostics.">Nanostructures in biodiagnostics.</a> Chemical Reviews. 105 (4), 1547-1562 (2005).</li><li>Saha, K., Agasti, S. S., Kim, C., Li, X., Rotello, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gold+nanoparticles+in+chemical+and+biological+sensing.">Gold nanoparticles in chemical and biological sensing.</a> Chemical Reviews. 112 (5), 2739-2779 (2012).</li><li>Boisselier, E., Astruc, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gold+nanoparticles+in+nanomedicine:+preparations,+imaging,+diagnostics,+therapies+and+toxicity.">Gold nanoparticles in nanomedicine: preparations, imaging, diagnostics, therapies and toxicity.</a> Chemical Society Reviews. 38 (6), 1759-1782 (2009).</li><li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amino+Acid-Dependent+Attenuation+of+Toll-like+Receptor+Signaling+by+Peptide-Gold+Nanoparticle+Hybrids.">Amino Acid-Dependent Attenuation of Toll-like Receptor Signaling by Peptide-Gold Nanoparticle Hybrids.</a> ACS Nano. 9 (7), 6774-6784 (2015).</li><li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endosomal+pH+modulation+by+peptide-gold+nanoparticle+hybrids+enables+potent+anti-inflammatory+activity+in+phagocytic+immune+cells.">Endosomal pH modulation by peptide-gold nanoparticle hybrids enables potent anti-inflammatory activity in phagocytic immune cells.</a> Biomaterials. 111, 90-102 (2016).</li><li>Yang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amino+Acid+Structure+Determines+the+Immune+Responses+Generated+by+Peptide-Gold+Nanoparticle+Hybrids.">Amino Acid Structure Determines the Immune Responses Generated by Peptide-Gold Nanoparticle Hybrids.</a> Particle &amp; Particle Systems Characterization. 30 (12), 1039-1043 (2013).</li><li>Pamies, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aggregation+behaviour+of+gold+nanoparticles+in+saline+aqueous+media.">Aggregation behaviour of gold nanoparticles in saline aqueous media.</a> Journal of Nanoparticle Research. 16 (4), (2014).</li><li>Perrault, S. D., Walkey, C., Jennings, T., Fischer, H. C., Chan, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mediating+tumor+targeting+efficiency+of+nanoparticles+through+design.">Mediating tumor targeting efficiency of nanoparticles through design.</a> Nano Letters. 9 (5), 1909-1915 (2009).</li><li>Connor, E. E., Mwamuka, J., Gole, A., Murphy, C. J., Wyatt, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gold+nanoparticles+are+taken+up+by+human+cells+but+do+not+cause+acute+cytotoxicity.">Gold nanoparticles are taken up by human cells but do not cause acute cytotoxicity.</a> Small. 1 (3), 325-327 (2005).</li><li>Kim, C. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Entrapment+of+Hydrophobic+Drugs+in+Nanoparticle+Monolayers+with+Efficient+Release+into+Cancer+Cells.">Entrapment of Hydrophobic Drugs in Nanoparticle Monolayers with Efficient Release into Cancer Cells.</a> Journal of the American Chemical Society. 131 (4), 1360 (2009).</li><li>Sonavane, G., Tomoda, K., Makino, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodistribution+of+colloidal+gold+nanoparticles+after+intravenous+administration:+Effect+of+particle+size.">Biodistribution of colloidal gold nanoparticles after intravenous administration: Effect of particle size.</a> Colloids and Surfaces B-Biointerfaces. 66 (2), 274-280 (2008).</li><li>Balasubramanian, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodistribution+of+gold+nanoparticles+and+gene+expression+changes+in+the+liver+and+spleen+after+intravenous+administration+in+rats.">Biodistribution of gold nanoparticles and gene expression changes in the liver and spleen after intravenous administration in rats.</a> Biomaterials. 31 (8), 2034-2042 (2010).</li><li>Lipka, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodistribution+of+PEG-modified+gold+nanoparticles+following+intratracheal+instillation+and+intravenous+injection.">Biodistribution of PEG-modified gold nanoparticles following intratracheal instillation and intravenous injection.</a> Biomaterials. 31 (25), 6574-6581 (2010).</li></ol>

Uygun formülasyon emin olmak için δPKCi çözüm 1,6 olarak özetlenen sonication adım geçer önemlidir. ΔPKCi peptid sıra hidrofobik moieties, içeriyor, bu nedenle bir sonicator PKCi % 50 Asetonitril çözümde çözülmesinde yardımcı olur. Buna ek olarak, solvent titizlikle 2.7. adımda açıklandığı şekilde karıştırmak çok önemlidir.  Eğer aşağıdaki adımları düzgün, δPKCi peptid23toplama nedeniyle bitmiş değil GNP/PKCi hibrid de formüle edilecektir değil. 
?...

Akciğer nakli hastaların son aşama akciğer hastalığı1ile kaydeder. Ancak, akciğer nakli sonrası ciddi komplikasyonlar bir engel olarak kalır. Akciğer nakli takip erken aşamalarında birincil greft disfonksiyon en zararlı komplikasyon1ise onun birincil neden iskemi-reperfüzyon (IR)-Akut akciğer yaralanma2indüklenen.
Soğuk koruma altında bir donör akciğer metabolizmasında çok düşük bir düzeye sınırlıdır. Ancak, Reaktif oksijen türleri ve nitrik oksit sentezi kan akışı3kesilmesi nedeniyle aktif hale gelir. Ekimi sonra kan dolaşımını geri yüklenir ve Reaktif oksijen türlerine ve nitrik oksit soğuk iskemi sırasında oluşturulan doku yaralanma sonucu inflamasyon ve hücre ölüm artırır.
IR yaralanma önlemek için bir protein kinaz Cδ inhibitörü (PKCδi) kalp, beyin ve akciğer4,5,6,7,8' kullanılmıştır. Bu çalışmalar PKCδi reperfüzyon sırasında inflamasyon ve Apoptozis azalma gösterdi. Ayrıca akciğer IR yaralanma fareler ve akciğer nakli modeli6engelledi. PKCδi genellikle bir hücre Penetran peptid, TAT, hücre içi teslimat için ile Birleşik. Ancak, yalnız TAT peptid anjiogenezi, Apoptozis ve inhibisyon birden çok sitokinler9,10,11dahil non-spesifik biyolojik etkileri vardır gösterilmiştir. Nano tanecikleri, 1'den 100'e kadar küçük parçacıklar ilaç teslim13kolaylaştırma aday olarak keşfedilmeyi çapı12' nm. Özellikle, altın nano tanecikleri (GNPs) kadar noninvaziv ve toksik olmayan kabul edilir. Bu nedenle, uyuşturucu teslim taşıyıcıları peptid bazlı ilaçlara14,15olarak GNPs geliştirdik.
GNPs yüzeyinin Moleküler tanıma16,17, kimyasal algılama18, görüntüleme19ve ilaç dağıtım gibi belirli uygulamalar için manipüle edilebilir. 20 nm GNPs ve iki kısa peptidler içeren bir GNP/peptid hibrid sistemi geliştirilmiştir (P2: CAAAAE ve P4: CAAAAW) 95:5 oranında, GNPs yüzey özelliklerini değiştirmek için. P2 peptid, sonunda, olumsuz ücret glutamik asit (E) ile GNPs sulu bir çözüm stabilize ve P4 peptid, sonunda, hidrofobik triptofan (W) ile GNPs yardımcı olur giriş hücreleri14içine. Bu peptidler N terminus de sistein (C) kalıntı için altın yüzeyler14eşlenik thiol grubunu içerir. Bu peptid/GNP hibrid daha fazla PKCδi (CSFNSYELGSL) teslim etmek için kullanıldı. P2:P4 PKCδi için en iyi duruma getirilmiş molar oranını 47.5:2.5:50 var. PKCδi (GNP/PKCi) ile Birleşik GNPs distile su, % 0,9 NaCl ve sığır albümin veya fetal sığır serum14içeren PBS istikrarlı vardır. İntravenöz enjeksiyon GNP/PKCi akciğer15iskemi-reperfüzyon hasarı önlemek için gösterilmiştir. Bu makalede GNP/PKCi formüle etmek bir yöntem özetliyor ve GNP/PKCi fizikokimyasal özellikleri değerlendirmek açıklar. Diğer peptid bazlı ilaçlara GNP20,21,22' ye Birleşik formüle için benzer yöntemler kullandık. Umarız bu makale bu roman formülasyonu hücre içi ilaç dağıtım için daha fazla dikkat çekecek.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:603px;" width="603">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;width:216px;">negatively charged glutamic acid peptide (P2)</td>
			<td style="width:189px;">CanPeptide</td>
			<td></td>
			<td style="width:197px;">Sequence: CAAAAE-NH2 
			Length: 6aa 
			Modification: C-terminal amidation 
			Quantity: 50mg 
			Purity: &#62;95%</td>
		</tr>
		<tr height="126">
			<td height="126" style="height:126px;width:216px;">hydrophobic tryptophan peptide (P4)</td>
			<td>CanPeptide</td>
			<td></td>
			<td style="width:197px;">Sequence: CAAAAW-NH2 
			Length: 6aa 
			Modification: C-terminal amidation 
			Quantity: 50mg 
			Purity: &#62;95%</td>
		</tr>
		<tr height="147">
			<td height="147" style="height:147px;width:216px;">&#948;PKCi peptide</td>
			<td>CanPeptide</td>
			<td></td>
			<td style="width:197px;">Seqeuence: CSFNSYELGSL-NH2 
			Length: 11aa 
			Modification: C-terminal amidation 
			Quantity: 50mg 
			Purity: &#62;95%</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Conical tube(50ml)</td>
			<td>Corning Life Sciences</td>
			<td align="right" style="width:119px;">3582070</td>
			<td style="width:197px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Conical tube(15ml)</td>
			<td>Corning Life Sciences</td>
			<td align="right" style="width:119px;">3582096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Acetonitrile</td>
			<td style="width:71px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">271004-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Sonicator</td>
			<td style="width:71px;">Branson Ultrasonics Corp.</td>
			<td style="width:119px;">Branson 2510MTH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microtube</td>
			<td>Diamed.ca</td>
			<td style="width:119px;">AD 150-N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Gold nanoparticle solution</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td style="width:119px;">15705-5</td>
			<td>A particle size is 20nm</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Rocking Platform shaker</td>
			<td style="width:71px;">VWR international</td>
			<td style="width:119px;">40000-304&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Microcentrifuge</td>
			<td style="width:71px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">5417R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Acryl cuvette</td>
			<td style="width:71px;">SARSREDT</td>
			<td align="right" style="width:119px;">67.758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">UV-Vis spectrophotometer</td>
			<td style="width:71px;">Agilent</td>
			<td style="width:119px;">Caty 60 UV-Vis</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protein kinase c-delta inhibitor peptide formulation using gold nanoparticles

Protein kinaz C-delta inhibitörü (PKCδi) iskemi reperfüzyon bağlı organ yaralanması önlemek için umut verici bir ilaçtır. Genellikle bir hücre Penetran peptid, TAT, hücre içi teslimat için için Birleşik. Bununla birlikte, TAT non-spesifik biyolojik faaliyetleri göstermektedir. Altın nano tanecikleri (GNPs) olarak tanınan toksisite olmadan ilaç teslim taşıyıcılar kullanılabilir. Bu nedenle, PKCδi teslim etmek için bir GNP/peptid melez kullandık. İki kısa peptidler (P2: CAAAAE ve P4: CAAAAW), bir 95:5 oranında GNP yüzey özelliklerini değiştirmek için kullanıldı. PKCδi (GNP/PKCi) ile Birleşik GNPs distile su içinde kararlı %0.9 NaCl ve fosfat tamponlu tuz (PBS) sığır serum albümin veya fetal sığır serum içeren. İntravenöz enjeksiyon GNP-PKCi daha önce akciğerin iskemi-reperfüzyon hasarı önlemek için gösterildi. Bu makalede GNP/PKCi formüle ve GNP/PKCi physiochemical özelliklerini değerlendirmek için bir protokol özetlenmektedir. GNP peptid tabanlı diğer ilaçlarla formüle için benzer yöntemler kullandık. Bu makalede Umarım bu roman hücre içi uyuşturucu teslim teknoloji ve uygulamaları içinde vivo daha fazla dikkat çekecek.

Bakım alınmalıdır GNP/PKCi Hybrid biyofiziksel özellikleri değerlendirmek için olarak GNP eğilimi solvent toplamak. GNP toplanır, belgili tanımlık eriyik rengini pembe mor (Şekil 1a) değişir. UV-VIS Spektrofotometre daha hassas değişiklikleri tespit edebilmektedir. Eğer GNP/PKCi değil toplanan emilme doruk-meli var olmak 525 nm (Şekil 1b). Eğer GNP toplanır, emme zirvesine sağa değiştirilecektir. Ne zaman ...

Watch this Scientific Journal Video about Protein Kinase C-delta Inhibitor Peptide Formulation using Gold Nanoparticles at JoVE.com

Protein Kinase C-delta Inhibitor Peptide Formulation using Gold Nanoparticles

Daha önce bir sentetik peptid, akut akciğer iskemi reperfüzyon bağlı yaralanma azaltılmış protein kinaz C-delta inhibitörü intravenöz sunmak için bir altın nanopartikül peptid melez kullandık. İşte detaylı iletişim kuralı uyuşturucu formülasyon göstermektedir. Hücre içi diğer peptidler benzer şekilde formüle edilebilir.

Protein kinaz C-delta inhibitör peptid formülasyonu altın nano tanecikleri kullanarak

Protein kinase C-delta inhibitor (PKC&#948;i) is a promising drug to prevent ischemia-reperfusion-induced organ injury. It is usually conjugated to a ...

İki özel kısa peptidde 20 nanometre altın parçacıklar kullanan benzersiz ilaç dağıtım sistemimiz, fizyolojik çözeltide altın nano parçacıkları stabilize edebilir ve hücresel alımını artırabilir ve böylece peptid bazlı veya diğer ilaçları hücrelere etkin bir şekilde ulaştırabilir. Bizim GNP peptit hibrid sentezlemek kolay ve istikrarlı. Altın nanopartikül peptid hibridi ilaç taşıyıcıları olarak kullanarak peptid ilaçlarını etkin ve bol miktarda hücrelere aktarabiliriz.Akciğerlerdeki iskemi-reperfüzyon yarasını GNP/PKCi melezi mizle tedavi ettik. GNP sitoplazmaiçine PKC inhibitör peptidler getiriyor. Bu doğum yöntemi diğer doğum yöntemlerine göre PKCi daha düşük bir doz kullanarak daha ciddi akciğer hasarı azaltmak başardı.Bu prosedüre başlamak için, eksi 20 santigrat derecede bir dondurucudan peptidler almak ve oda sıcaklığında onları eritin. Her çözülmüş peptid 0,01 gram tartmak için bir mikro ölçek kullanın ve ayrı bir 50 mililitre konik tüp içine her peptid transfer. P2 tüpüne 18,74 mililitre deiyonize su ve P4 tüpüne 16,93 mililitre deiyonize su ekleyin.PKC delta inhibitör tüpüne deiyonize suda seyreltilmiş %50 asetonnitit 8.21 mililitre ekleyin. Vortex peptit çözeltileri kısaca. Sonra tüpleri 40 megahertz'de bir sonicator'a beş dakika lığına yerleştirin.Bundan sonra, bir biyogüvenlik kabine çözümleri aktarın. 50 mL konik tüpü beş dakika süreyle bir sonicator'a koymak çok önemlidir. Bu adım atlanırsa, GNP/PKCi toplamalar oluşturur.Her peptit çözeltisinin bir mililitresini kendi yeni 50 mililitrelik konik tüpüne aktarın. P2 ve P4 içeren tüplere 19 mililitre deiyonize su ekleyin. Ve PKC delta inhibitörü içeren tüpe 19 mililitre %50 asetonitil ekleyin. 15 mililitrelik bir tüpe 475 mililitre P2 çözeltisi, 25 mikrolitre P4 çözeltisi, 500 mikrolitre PKC delta inhibitörü çözeltisi ekleyin.Daha sonra aynı tüpe 20 nanometrelik bir GNP çözeltisinin dokuz mililitresini ekleyin. Kombine solüsyonu biyogüvenlik kabininden çıkarın ve tüpü alüminyum folyoya sarın. Tüpü bir gecede çalkalayın.Ertesi gün, örnekleri biyogüvenlik kabinesine geri ver. 1,5 mililitrelik mikro tüpler içine GNP / PKCi çözeltisi bir mililitre aliquots aktarın. Mikro tüpleri 15294 kez g'de mikro santrifüj ve 4 santigrat derecede 30 dakika santrifüj edin.Mikro tüpleri biyogüvenlik kabinesine geri aktarın ve GNP peletinin rahatsız olmamasını sağlarken her tüpten süpernatenti çıkarın. Istenilen çözücüde her pelet istenilen konsantrasyona göre yeniden askıya alın. GNP/PKCi hibrid çözünürlüğünü değerlendirmek için, 0,5 mililitre GNP/PKCi çözeltisini tahakkuk cuvette'e dökün.Bir UV-Vis spektrofotometre üzerine cuvette yerleştirin ve pik emilimini test edin. Bu çalışmada, protein kiazcın C-delta inhibitörü altın nano tanecikleri ile bir GNP / PKCi hibrid oluşturmak için konjuge edilir. Altın nano tanecikleri bir çözücüde biraraya gelmekeğilimindedir gibi bakım, melez biyofiziksel özellikleri değerlendirilmesi ile alınmalıdır.Nano tanecikleri biraraya geldiğinde, çözeltinin rengi pembeden mora dönüşür. Numuneler, yüksek hassasiyetle tespit edebilen UV-Vis spektrofotometresi ile analiz edilir. Melez toplanmış değilse, bir emme pik olmalıdır 525 nanometre.GNP toplanırsa, emilimin zirvesi sağa kaydırılır. Görüldüğü gibi, agregalar oluştuğunda delta optik yoğunluğu azalır. GNP peptid melezleri formüle edilirken, peptidlerin GNP çözeltisine oranının 1-9 arasında olması gerektiğini hatırlamak önemlidir.Bu GNP/PKCi formülü akciğer dışındaki organ sistemlerinde iskemi-reperfüzyon yaralanması için kullanılabilir. Bu peptidler N-terminus bir sistein kalıntısı varsa herhangi bir peptidler GNP ekleyebilirsiniz. Bu GNP peptit hibrid hücreiçine diğer peptit ilaçları taşımak için kullanılabilir anlamına gelir.Rasyonel olarak tasarlanmış peptidler bu hücrelerin içinde spesifik protein-protein etkileşimi getirebilir yeni teknoloji vardır. Burada geliştirilen bu teknik, yeni peptit ilaçların teslimi veya mevcut ilaçların değiştirilmiş versiyonları için kullanılabilir.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Formulation of Diblock Polymeric Nanoparticles through Nanoprecipitation Technique

Nanoprecipitation Tekniği Diblock Polimerik Nanopartiküller formülasyonu

Nanotechnology is a relatively new branch of science that involves harnessing the unique properties of particles that are nanometers in scale ...

Synthesis, Assembly, and Characterization of Monolayer Protected Gold Nanoparticle Films for Protein Monolayer Electrochemistry

Monolayer sentezi, Montaj ve Karakterizasyonu Protein Monolayer Elektrokimya Korumalı Altın Nanopartikül Filmler

Colloidal gold nanoparticles protected with alkanethiolate ligands called monolayer protected gold clusters (MPCs) are synthesized and subsequently ...

Analysis of Targeted Viral Protein Nanoparticles Delivered to HER2+ Tumors

Hedefli Viral Protein analizi HER2 + tümörler için teslim Nanopartiküller

The HER2+ tumor-targeted nanoparticle, HerDox, exhibits tumor-preferential accumulation and tumor-growth ablation in an animal model of HER2+ cancer. ...

Microfabrication of Nanoporous Gold Patterns for Cell-material Interaction Studies

Hücre-malzeme Etkileşim Araştırmalar Nanogözenekli Altın Patterns mikroimalat

Nanostructured materials with feature sizes in tens of nanometers have enhanced the performance of several technologies, including fuel cells, biosensors, ...

Programming Stem Cells for Therapeutic Angiogenesis Using Biodegradable Polymeric Nanoparticles

Biyobozunur polimerik nano partiküllerin kullanılması Tedavi Angiogenezis Programlama Kök Hücreler

Controlled vascular growth is critical for successful tissue regeneration and wound healing, as well as for treating ischemic diseases such as stroke, ...

Harmonic Nanoparticles for Regenerative Research

Rejeneratif Araştırma harmonik nanopartiküller

In this visualized experiment, protocol details are provided for in vitro labeling of human embryonic stem cells (hESC) with second harmonic generation ...

Correlative Light- and Electron Microscopy Using Quantum Dot Nanoparticles

Kuantum Nokta Nanopartiküller kullanma Korelatif Işık- ve Elektron Mikroskobu

A method is described whereby quantum dot (QD) nanoparticles can be used for correlative immunocytochemical studies of human pathology tissue using ...

Surface Functionalization of Hepatitis E Virus Nanoparticles Using Chemical Conjugation Methods

Hepatit E virüs nano tanecikleri kimyasal konjugasyon yöntemlerle yüzey Functionalization

Virus-like particles (VLPs) have been used as nanocarriers to display foreign epitopes and/or deliver small molecules in the detection and treatment of ...

In Vesiculo Synthesis of Peptide Membrane Precursors for Autonomous Vesicle Growth

Vesiculo 'da otonom vezikül büyümesi için peptid membran öncülerinin sentezini

Compartmentalization of biochemical reactions is a central aspect of synthetic cells. For this purpose, peptide-based reaction compartments serve as an ...

Production of E. coli-expressed Self-Assembling Protein Nanoparticles for Vaccines Requiring Trimeric Epitope Presentation

Production of E. coli-expressed Self-Assembling Protein Nanoparticles for Vaccines Requiring Trimeric Epitope Presentation

Trimerik Epitop Sunumu Gerektiren Aşılar için E. coli-expressed Self-Assembling Protein Nano tanecikleri Üretimi

Self-assembling protein nanoparticles (SAPNs) function as repetitive antigen displays and can be used to develop a wide range of vaccines for different ...