Name: extraction and analysis of taiwanese green propolis
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis at JoVE.com

Dette manuskriptet ble redigert av Wallace akademiske redigering.

1. forberedelse av etanol-utpakkede forbindelser
<ol><li>Veie 10 g frosne taiwanske grønne propolis, som ble samlet inn fra bikuber i Taiwan fra mai til juli, og male det med krydder jeksel. Bekreft at hele biter av taiwanske grønne propolis er bakken til et fint pulver uten noen store partikler.</li>
	<li>Legge til 100 mL ulike konsentrasjoner av etanol (60%, 70%, 80%, 95% og 99,5%) og vann til å skille flasker og bland hver konsentrasjon med 10 g av bakken propolis.</li>
	<li>Inkuber ved 25 ° C og riste flasken 2...

<ol>
	<li>Zabaiou, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+properties+of+propolis+extracts:+Something+new+from+an+ancient+product.">Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product.</a> Chemistry and Physics of Lipids. 207 (Pt B), 214-222 (2017).</li><li>Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propolis:+Recent+advances+in+chemistry+and+plant+origin.">Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin.</a> Apidologie. 31 (1), 3-15 (2000).</li><li>Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Botanical+origin+and+chemical+composition+of+Brazilian+propolis.">Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (9), 2502-2506 (2002).</li><li>Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytotoxic+prenylflavanones+from+Taiwanese+propolis.">Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis.</a> Journal of Natural Products. 66 (4), 503-506 (2003).</li><li>Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+radical+scavenging+activity,+cytotoxic+effects+and+apoptosis+induction+in+human+melanoma+cells+by+Taiwanese+propolis+from+different+sources.">Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative. 1 (2), 175-185 (2004).</li><li>Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+of+human+melanoma+cells+induced+by+the+novel+compounds+propolin+A+and+propolin+B+from+Taiwanese+propolis.">Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis.</a> Cancer Letters. 24 (1-2), 218-231 (2007).</li><li>Huang, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propolin+G,+a+prenylflavanone,+isolated+from+Taiwanese+propolis,+induces+caspase-dependent+apoptosis+in+brain+cancer+cells.">Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55 (18), 7366-7376 (2007).</li><li>Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+activity+of+propolins+from+Taiwanese+green+propolis.">Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis.</a> Journal of Food and Drug Analysis. 26 (2), 761-768 (2018).</li><li>Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+composition+and+antimicrobial+activity+of+European+propolis.">Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis.</a> Zeitschrift f&#252;r Naturforschung. 55 (1-2), 70-75 (2000).</li><li>Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seasonal+effect+on+Brazilian+propolis+antibacterial+activity.">Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity.</a> Journal of Ethnopharmacology. 73 (1-2), 243-249 (2000).</li><li>Chen, Y. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Taiwanese+propolis+collected+from+different+locations+and+seasons.">Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons.</a> Journal of the Science of Food and Agriculture. 88 (3), 412-419 (2008).</li><li>Grange, J. M., Davey, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+properties+of+propolis+(bee+glue).">Antibacterial properties of propolis (bee glue).</a> Journal of the Royal Society of Medicine. 83 (3), 159-160 (1990).</li><li>Kujumgiev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial,+antifungal+and+antiviral+activity+of+propolis+from+different+geographic+origins.">Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins.</a> Journal of Ethnopharmacology. 64 (3), 235-240 (1999).</li><li>Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+effect+of+ethanol+extract+of+propolis+and+antibiotics+in+the+growth+of+Staphylococcus+aureus.">Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus.</a> Drug Research. 43 (5), 607-609 (1993).</li><li>Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+and+DPPH+free+radical-scavenging+activities+of+the+ethanol+extract+of+propolis+collected+in+Taiwan.">Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan.</a> Journal of Food and Drug Analysis. 11 (4), 277-282 (2003).</li><li>Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+activity+of+some+commercial+extracts+of+propolis+prepared+with+different+solvents.">Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents.</a> Phytotherapy Research. 10 (4), 335-336 (1996).</li><li>Cunha, I. B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+that+influence+the+yield+and+composition+of+Brazilian+propolis+extracts.">Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts.</a> Journal of the Brazilian Chemical Society. 15 (6), 964-970 (2004).</li><li>Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+properties+of+propolis+with+ethanol+concentration.">Extraction properties of propolis with ethanol concentration.</a> Journal of Apicultural Research. 30 (3), 211-216 (2015).</li><li>Park, Y. K., Ikegaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+water+and+ethanolic+extracts+of+propolis+and+evaluation+of+the+preparations.">Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations.</a> Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62 (11), 2230-2232 (1998).</li><li>Ramanauskien&#279;, K., Ink&#279;nien&#279;, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propolis+oil+extract:+quality+analysis+and+evaluation+of+its+antimicrobial+activity.">Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity.</a> Natural Product Research. 25 (15), 1463-1468 (2011).</li><li>Machado, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+composition+and+biological+activity+of+extracts+obtained+by+supercritical+extraction+and+ethanolic+extraction+of+brown,+green+and+red+propolis+derived+from+different+geographic+regions+in+brazil.">Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil.</a> PLoS One. 11 (1), e0145954 (2016).</li><li>Monroy, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brazilian+green+propolis+extracts+obtained+by+conventional+processes+and+by+processes+at+high+pressure+with+supercritical+carbon+dioxide,+ethanol+and+water.">Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water.</a> The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).</li><li>Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+validated+spectrophotometric+method+for+quantification+of+prenylated+flavanones+in+pacific+propolis+from+Taiwan.">A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan.</a> Phytochemical Analysis. 21 (2), 186-191 (2010).</li><li>Chen, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taiwanese+green+propolis+ethanol+extract+delays+the+progression+of+type+2+diabetes+mellitus+in+rats+treated+with+streptozotocin/high-fat+diet.">Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet.</a> Nutrients. 10 (4), e503 (2018).</li></ol>

En studie rapportert at maserasjon, bruker ulike konsentrasjoner av etanol, kan brukes for brasilianske propolis utvinning17; prosessen var imidlertid tidkrevende17. Det tok minst 10 dager å trekke bioaktive forbindelser, for eksempel fenoliske innhold, fra brasilianske propolis17. Alternativt har etanol utvinning i kombinasjon med ved 37 ° C, 50 ° C eller 70 ° C i 30 min blitt foreslått for utpakking brasilianske propolis19</s...

Propolis er en naturlig resinous blanding produsert av bee arten APIene mellifera. Propolis har vært mye brukt siden antikken i folk medisiner. En studie nylig rapportert at propolis er gunstig for å forebygge mikrobielle infeksjoner og betennelse1. Mange studier har vist at de viktigste bioaktive forbindelsene i propolis er flavonoider, fenoliske syre estere, prenylated p-coumaric syrer og diterpenic syren2,3. Hittil har 10 prenylated flavanone derivater fra taiwanske grønne propolis identifisert gjennom høy ytelse flytende kromatografi (HPLC)4,5,6,7. Den mest tallrike blant disse er propolins C, D, F og G5,7. Betydelig biologiske effekter av taiwanske grønne propolis er korrelert med dens høye innhold av propolins8.
Konsentrasjonen av bioaktive forbindelser i propolis variere avhengig av sesong og geografisk plassering som propolis er oppnådd. Europeiske propolis inneholder hovedsakelig flavonoid aglycone og fenoliske syrer9. Store bioaktive forbindelser i propolis fra Brasil er prenylated p-coumaric syrer, for eksempel artepillin C10. En studie viste at sesongen er en kritisk faktor for å bestemme det totale propolin innholdet i taiwanske grønne propolis11. Propolin innholdet i taiwanske grønne propolis er høyest i sommer (mai - juli) og lavest i vinter11. Antibakterielle eiendom propolis har blitt kjent som en indikator på biologiske aktivitet. Vanligvis har prøver av propolis fra ulike regioner vist en lignende antibakterielle eiendom; for eksempel det er vanligvis effektiv mot nesten alle gram-positive bakteriene og utstillinger en begrenset antibakteriell effekt mot gram-negative bakterier10,12,13. Synergistisk interaksjoner mellom flavonoider i propolis ble vist for å ha en antibakteriell effekt14. Tilsvarende ble taiwanske grønne propolis rapportert å ha en antimikrobiell effekt mot gram-positive bakteriene15. Videre identifisert en studie også en antimikrobiell effekt fra samspillet av propolins i taiwanske grønne propolis8.
Karakterisering av bioaktive forbindelser i propolis er vanskelig fordi dens kjemiske sammensetning kan variere avhengig av kilden opprinnelsesland. Derfor er det nødvendig å etablere en mulig og repeterbare metode for å bestemme kvaliteten på den Taiwanske grønne propolis. Men er ingen standard prosedyre etablert for taiwanske grønne propolis utvinning og påfølgende funksjonell analyse. Flere metoder som blant annet bruker organiske og uorganiske løsemidler foreslått for propolis utvinning16,17,18,19,20. Propolis er en lipofile blanding, har studier vist at organisk utvinning er bedre enn uorganiske utvinning8,18,19. Den totale propolin konsentrasjonen i taiwanske grønne propolis og antibakterielle egenskaper er viktige indikatorer for kvaliteten på taiwanske grønne propolis. Dermed er formålet med denne studien å presentere en protokoll for bruk av etanol som et løsemiddel og prege det antibacterial eiendom av taiwanske grønne propolis.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E7023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman no. 4 filter paper</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>WHA1004125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>34860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>reverse phase RP-18 column</td>
			<td>Phenomenex Inc.</td>
			<td>00G-0234-E0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>BCRC 10780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>BCRC 10675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tryptic soy broth</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>22092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nutrient broth</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>70122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>spice grinder</td>
			<td>Waring</td>
			<td>WSG60K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microplate Reader</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>EMAX PLUS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC system</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>1200 Series</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vacuum evaporation</td>
			<td>B&#220;CHI</td>
			<td>Rotavapor R-215</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and analysis of taiwanese green propolis

Taiwanske grønne propolis er rik på prenylated flavonoider og utstillinger et bredt spekter av biologiske aktiviteter, for eksempel antioksidant, antibakterielle, og anticancer seg. Bioaktive forbindelser av taiwanske grønne propolis er propolins, nemlig C, D, F og G. Konsentrasjonen av propolins i taiwanske grønne propolis varierer avhengig av sesong og geografisk plassering. Derfor er det viktig å etablere en standard og repeterbare prosedyre for å bestemme kvaliteten på taiwanske grønne propolis. Her presenterer vi en protokoll som bruker etanol-baserte utvinning, høy ytelse flytende kromatografi og en antibakteriell aktivitetsanalyse for å karakterisere taiwanske grønne propolis kvalitet. Denne metoden angir at 95% og 99,5% etanol utdrag oppnå maksimal tørr saken avkastningen fra taiwanske grønne propolis, og dermed gir de høyeste konsentrasjonene av propolins som har antibakterielle egenskaper. Ifølge disse funnene som nåværende protokollen pålitelig og repeterbare for å bestemme kvaliteten på taiwanske grønne propolis.

Positiv representant dataene for etanol utvinning er presentert i tabell 1. Tørket avkastningen fra taiwanske grønne propolis var positivt assosiert med konsentrasjonen av etanol. 95% og 99,5% etanol ekstrakter hadde høyest tørr saken gi fra taiwanske grønne propolis. Laveste tørrstoff avkastningen fra taiwanske grønne propolis oppstod under vann ble brukt som utvinning løsemiddelet. Disse resultatene indikerer at en organisk løsemiddel, som etanol, fungerer best...

Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis at JoVE.com

Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis

Utvinning og analyse av taiwanske grønne Propolis

Vi presenterer en protokoll for bruk av etanol som et løsemiddel og karakterisere taiwanske grønne propolis som viser antibakteriell aktivitet.

Taiwanese green propolis is rich in prenylated flavonoids and exhibits a broad range of biological activities, such as antioxidant, antibacterial, and ...

Her presenterer vi protokollen for bruk av etanol som et løsningsmiddel for å trekke ut og karakterisere taiwansk grønn propolis som hemmer antibakteriell aktivitet. Denne protokollen er en pålitelig og repeterbar metode for å bestemme kvaliteten på taiwansk grønn propolis. Å demonstrere prosedyren vil være Chun'Ting Chen og Yi'Hsuan Chien, ph.d.-studenter fra laboratoriet mitt.Til å begynne, veie ut 100 gram taiwansk grønn propolis. Bruk en krydderkvern til å male propolisen og sørge for at bitene er malt til et fint pulver uten store partikler. Sett ut fem flasker og tilsett 100 milliliter av ulike konsentrasjoner av etanol i vann til hver.Bland 10 gram malt propolis i etanoloppløsningen i hver kolbe, og inkuber ved 25 grader Celsius med risting ved 250 RPM i 48 timer. Etter dette bruker du filterpapir med en 25 mikrometer porestørrelse for å filtrere etanolekstraktene. Ved hjelp av en volumetrisk kolbe, rekonstituer filtratene til sitt opprinnelige volum på 100 milliliter med 95% etanol.Oppbevar de rekonstituerte ekstraktene ved minus 20 grader Celsius til de er klare til bruk. Når du er klar til å klargjøre ekstraktene for HPLC, bruk vakuumfordampning til å konsentrere 10 milliliter av hvert ekstrakt ved 40 grader Celsius i 10 minutter. Stek det tørre 10 000 kr i 24 timer.Deretter rekonstituer hver prøve av tørt materiale med 10 milliliter på 95% etanol. Bruk et sprøytefilter med en porstørrelse på 0,22 mikrometer, refiltrer hvert ekstrakt og samle filtratet for direkte analyse med HPLC. For å begynne å etablere en standardkurve, klargjør en liter av den mobile fasen metanol til vannløsning i forholdet 88,8 til 11,2.Ved hjelp av den mobile faseløsningen som løsningsmiddel, klargjør seriell fortynning av propolinstandardkonsentrasjonene som beskrevet i tekstprotokollen. Injiser 20 mikroliter av hver standardkonsentrasjon i omvendt fase kolonner sekvensielt fra den laveste konsentrasjonen til den høyeste. Deretter setter du HPLC-kolonnen til 30 grader Celsius, setter frafallslengden på UV-detektoren til 280 nanometer, og strømningshastigheten til en milliliter per minutt, og opptakertiden til 20 minutter.Analyser standardene minst tre ganger. Etter dette bruker du programvare for beregningsark til å koble måleresponsen mot konsentrasjonen, noe som resulterer i en standardkurve med en bestemt ligning og R-kvadrert verdi. For å begynne å analysere ekstraktene, injiser 20 mikroliter av hvert ekstrakt i omvendt fasekolonne.Sett HPLC-kolonnen til en temperatur på 30 grader Celsius, og en strømningshastighet på én milliliter per minutt. Sett frafallslengden på UV-detektoren til 280 nanometer, og opptakertiden til 20 minutter. Analyser ekstraktene minst tre ganger.Deretter bruker du standardkurven til å bestemme konsentrasjonen av propolin i hvert etanolekstrakt. Etter å ha forberedt testorganismer og etanolekstrakter, tilsett 10 mikroliter fortynnet etanolekstrakt, alt fra 0,156 til 640 mikrogram per milliliter i brønnene på en 96 brønnplate. Bruk kjøttkraft til å justere volumet i hver brønn til 100 mikroliter, og sørg for å opprettholde 5% DMSO i alle fortynninger.Deretter inokulerer 100 mikroliter bakteriell kultur i hver brønn av 96-brønnplaten. Kultur ved 37 grader Celsius i 48 timer. Bruk en mikroplateleser ved 590 nanometer for å analysere bakterieveksten i henhold til turbiditet og for å bestemme den minste hemmende konsentrasjonen.Etter dette inokulerer 10 mikroliter flytende kultur fra hver brønn som viste seg å vekst på en agarplate. Inkuber ved 37 grader Celsius i 24 timer. Identifiser den laveste konsentrasjonen som ikke viste noen synlig bakteriell vekst for å bestemme bakterieaktiviteten.Konsentrasjonen som fullstendig eliminert cellevekst anses å være den minste bakterielle konsentrasjonen. I denne studien ekstraheres taiwansk grønn propolis med etanol. Tørrmært utbyttet ser ut til å være høyest når en høy konsentrasjon av etanol brukes, og lavest når vann brukes.Disse resultatene indikerer at et organisk løsningsmiddel fungerer best under denne ekstraksjonen, og at utbyttet er positivt forbundet med etanolkonsentrasjonen. På samme måte er konsentrasjonen av propoliner syntes å være positivt forbundet med etanolkonsentrasjonen under ekstraksjon, med det høyeste utbyttet av propoliner oppnådd i 95%og 99,5% etanolekstrakter. De antibakterielle påvirkningene av etanolekstraktene mot S aureus og E coli undersøkes deretter.Den gjennomsnittlige minste hemmende konsentrasjonen for S aureus syntes å være mellom 10 og 20 mikrogram per milliliter og gjennomsnittlig bakteriell konsentrasjon syntes å være 20 mikrogram per milliliter. Vannekstrakter hadde imidlertid ingen antibakteriell påvirkning mot S aureus. Ingen antibakteriell påvirkning observeres for E coli ved bruk av enten vann- eller etanolekstrakter.En av de viktigste eksperimentelle prosedyren er eschewing ensartethet av taiwanske grønne propolis under sliping.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Thermostabilization, Expression, Rensing, og Krystallisering av Human Serotonin Transporter Bound til<em&gt; S</em&gt; -citalopram

The serotonin transporter is a sodium and chloride-coupled transporter that &#34;pumps&#34; extracellular serotonin into cells. S-citalopram is a drug ...

A Simple Fractionated Extraction Method for the Comprehensive Analysis of Metabolites, Lipids, and Proteins from a Single Sample

En enkel fraksjonert ekstraksjonsmetode for den omfattende analysen av metabolitter, lipider og proteiner fra en enkelt prøve

Understanding of complex biological systems requires the measurement, analysis and integration of multiple compound classes of the living cell, usually ...

Characterization of Membrane Transporters by Heterologous Expression in E. coli and Production of Membrane Vesicles

Characterization of Membrane Transporters by Heterologous Expression in E. coli and Production of Membrane Vesicles

Karakterisering av membran transportører av Heterologous uttrykk i E. coli og produksjon av membran blemmer

Several methods have been developed to functionally characterize novel membrane transporters. Polyamines are ubiquitous in all organisms, but polyamine ...

Assessment of Cellular Oxidation using a Subcellular Compartment-Specific Redox-Sensitive Green Fluorescent Protein

Vurdering av cellulær oksidasjon ved hjelp av et subcellulært romspesifikt Redox-Sensitive Green Fluorescerende protein

Measuring the intracellular oxidation/reduction balance provides an overview of the physiological and/or pathophysiological redox status of an organism. ...

Rapid and Cost-Effective RNA Extraction of Rat Pancreatic Tissue

Rask og kostnadseffektiv RNA-ekstraksjon av rottepanasittvev

Regardless of the extraction method, optimized RNA extraction of tissues and cell lines are carried out in four stages: 1) homogenization, 2) effective ...

Ganglioside Extraction, Purification and Profiling

Ganglioside utvinning, rensing og profilering

Gangliosides are glycosphingolipids that contain one or more sialic acid residues. They are found on all vertebrate cells and tissues but are especially ...

The Extraction of Liver Glycogen Molecules for Glycogen Structure Determination

Liver glycogen is a hyperbranched glucose polymer that is involved in the maintenance of blood sugar levels in animals. The properties of glycogen are ...

Extraction and Purification of FAHD1 Protein from Swine Kidney and Mouse Liver

Ekstraksjon og rensing av FAHD1 Protein fra svin nyre og mus lever

Fumarylacetoacetate hydrolase domain-containing protein 1 (FAHD1) is the first identified member of the FAH superfamily in eukaryotes, acting as ...

Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop

Cryo-electron microscopy (cryo-EM) has been established as a routine method for protein structure determination during the past decade, taking an ...

A Nanobar-Supported Lipid Bilayer System for the Study of Membrane Curvature Sensing Proteins in vitro

A Nanobar-Supported Lipid Bilayer System for the Study of Membrane Curvature Sensing Proteins in vitro

Et nanobar-støttet lipid dobbeltlagssystem for studier av membrankrumningsfølende proteiner in vitro

Membrane curvature plays important roles&#160;in various essential processes of cells, such as cell migration, cell division, and vesicle trafficking. It ...