Name: extraction and analysis of taiwanese green propolis
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis at JoVE.com

Detta manuskript redigerades av Wallace akademiska redigering.

1. beredning av etanol-extraherade föreningar
<ol><li>Väg 10 g av frysta taiwanesiska grön propolis, som samlades in från bikupor i Taiwan från maj till juli, och slipa den med spice kvarnen. Bekräfta att hela bitar av taiwanesiska grön propolis mals till ett fint pulver utan några stora partiklar.</li>
	<li>Tillsätt 100 mL av olika koncentrationer av etanol (60%, 70%, 80%, 95% och 99,5%) och vatten för att separera kolvar och blanda varje koncentration med 10 g av marken propolis.</li>
	<li>Inkubera vid 25 ?...

<ol>
	<li>Zabaiou, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+properties+of+propolis+extracts:+Something+new+from+an+ancient+product.">Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product.</a> Chemistry and Physics of Lipids. 207 (Pt B), 214-222 (2017).</li><li>Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propolis:+Recent+advances+in+chemistry+and+plant+origin.">Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin.</a> Apidologie. 31 (1), 3-15 (2000).</li><li>Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Botanical+origin+and+chemical+composition+of+Brazilian+propolis.">Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (9), 2502-2506 (2002).</li><li>Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytotoxic+prenylflavanones+from+Taiwanese+propolis.">Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis.</a> Journal of Natural Products. 66 (4), 503-506 (2003).</li><li>Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+radical+scavenging+activity,+cytotoxic+effects+and+apoptosis+induction+in+human+melanoma+cells+by+Taiwanese+propolis+from+different+sources.">Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative. 1 (2), 175-185 (2004).</li><li>Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+of+human+melanoma+cells+induced+by+the+novel+compounds+propolin+A+and+propolin+B+from+Taiwanese+propolis.">Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis.</a> Cancer Letters. 24 (1-2), 218-231 (2007).</li><li>Huang, W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propolin+G,+a+prenylflavanone,+isolated+from+Taiwanese+propolis,+induces+caspase-dependent+apoptosis+in+brain+cancer+cells.">Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55 (18), 7366-7376 (2007).</li><li>Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+activity+of+propolins+from+Taiwanese+green+propolis.">Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis.</a> Journal of Food and Drug Analysis. 26 (2), 761-768 (2018).</li><li>Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+composition+and+antimicrobial+activity+of+European+propolis.">Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis.</a> Zeitschrift f&#252;r Naturforschung. 55 (1-2), 70-75 (2000).</li><li>Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seasonal+effect+on+Brazilian+propolis+antibacterial+activity.">Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity.</a> Journal of Ethnopharmacology. 73 (1-2), 243-249 (2000).</li><li>Chen, Y. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+Taiwanese+propolis+collected+from+different+locations+and+seasons.">Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons.</a> Journal of the Science of Food and Agriculture. 88 (3), 412-419 (2008).</li><li>Grange, J. M., Davey, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+properties+of+propolis+(bee+glue).">Antibacterial properties of propolis (bee glue).</a> Journal of the Royal Society of Medicine. 83 (3), 159-160 (1990).</li><li>Kujumgiev, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial,+antifungal+and+antiviral+activity+of+propolis+from+different+geographic+origins.">Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins.</a> Journal of Ethnopharmacology. 64 (3), 235-240 (1999).</li><li>Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+effect+of+ethanol+extract+of+propolis+and+antibiotics+in+the+growth+of+Staphylococcus+aureus.">Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus.</a> Drug Research. 43 (5), 607-609 (1993).</li><li>Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+and+DPPH+free+radical-scavenging+activities+of+the+ethanol+extract+of+propolis+collected+in+Taiwan.">Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan.</a> Journal of Food and Drug Analysis. 11 (4), 277-282 (2003).</li><li>Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+activity+of+some+commercial+extracts+of+propolis+prepared+with+different+solvents.">Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents.</a> Phytotherapy Research. 10 (4), 335-336 (1996).</li><li>Cunha, I. B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+that+influence+the+yield+and+composition+of+Brazilian+propolis+extracts.">Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts.</a> Journal of the Brazilian Chemical Society. 15 (6), 964-970 (2004).</li><li>Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+properties+of+propolis+with+ethanol+concentration.">Extraction properties of propolis with ethanol concentration.</a> Journal of Apicultural Research. 30 (3), 211-216 (2015).</li><li>Park, Y. K., Ikegaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+water+and+ethanolic+extracts+of+propolis+and+evaluation+of+the+preparations.">Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations.</a> Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62 (11), 2230-2232 (1998).</li><li>Ramanauskien&#279;, K., Ink&#279;nien&#279;, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propolis+oil+extract:+quality+analysis+and+evaluation+of+its+antimicrobial+activity.">Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity.</a> Natural Product Research. 25 (15), 1463-1468 (2011).</li><li>Machado, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemical+composition+and+biological+activity+of+extracts+obtained+by+supercritical+extraction+and+ethanolic+extraction+of+brown,+green+and+red+propolis+derived+from+different+geographic+regions+in+brazil.">Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil.</a> PLoS One. 11 (1), e0145954 (2016).</li><li>Monroy, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brazilian+green+propolis+extracts+obtained+by+conventional+processes+and+by+processes+at+high+pressure+with+supercritical+carbon+dioxide,+ethanol+and+water.">Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water.</a> The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).</li><li>Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+validated+spectrophotometric+method+for+quantification+of+prenylated+flavanones+in+pacific+propolis+from+Taiwan.">A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan.</a> Phytochemical Analysis. 21 (2), 186-191 (2010).</li><li>Chen, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taiwanese+green+propolis+ethanol+extract+delays+the+progression+of+type+2+diabetes+mellitus+in+rats+treated+with+streptozotocin/high-fat+diet.">Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet.</a> Nutrients. 10 (4), e503 (2018).</li></ol>

En studie rapporterade att maceration, använder olika koncentrationer av etanol, skulle kunna användas för brasilianska propolis utvinning17; processen var dock tidskrävande17. Det tog minst 10 dagar för att extrahera de bioaktiva föreningarna, såsom fenolföreningar innehåll, från brasilianska propolis17. Alternativt, etanol utvinning i kombination med värme vid 37 ° C, 50 ° C eller 70 ° C i 30 min har föreslagits för att extrahera br...

Propolis är en naturligt hartsartade blandning som produceras av bee arten Apis mellifera. Propolis har använts sedan urminnes tider i diverse läkemedel. En studie rapporterade nyligen att propolis är fördelaktigt för förebygga mikrobiella infektioner och inflammation1. Ett flertal studier har visat att de viktigaste bioaktiva föreningarna i propolis är flavonoider, fenol syra estrar, prenylated p-coumaric syror och diterpenic syror2,3. Hittills har har 10 prenylated flavanon derivat från taiwanesiska grön propolis identifierats genom högpresterande vätskekromatografi (HPLC)4,5,6,7. Den vanligast förekommande bland dessa är propolins C, D, F och G5,7. De betydande biologiska effekterna av taiwanesiska grön propolis är korrelerade med dess höga innehåll av propolins8.
Koncentrationerna av bioaktiva föreningar i propolis varierar kraftigt beroende på säsong och geografisk plats som propolis är framställda. Europeiska propolis innehåller huvudsakligen flavonoid aglycone och fenol syror9. De stora bioaktiva föreningarna i propolis från Brasilien är prenylated p-coumaric syror, artepillin C10. En studie visade att säsongen är en kritisk faktor för bestämning av totala propolin innehållet i taiwanesiska grön propolis11. Propolin innehållet i taiwanesiska grön propolis är högst på sommaren (maj - juli) och lägst i vinter11. Egenskapen antibakteriella propolis har varit allmänt anses vara en indikator för biologisk aktivitet. Allmänhet, proverna av propolis som samlats in från olika regioner har ställt en liknande antibakteriella egendom; till exempel det är generellt effektivt mot nästan alla grampositiva bakterier och uppvisar en begränsad antibakteriell effekt mot gramnegativa bakterier10,12,13. Synergistiska interaktioner mellan flavonoider i propolis visades ha en antibakteriell effekt14. Dessutom rapporterades taiwanesiska grön propolis har en antimikrobiell effekt mot grampositiva bakterier15. Dessutom identifierat en studie också en antimikrobiell effekt från växelverkan mellan propolins i taiwanesiska grön propolis8.
Karakterisering av de bioaktiva föreningarna i propolis är svårt eftersom dess kemiska sammansättning kan variera beroende på dess källa ursprung. Det är därför nödvändigt att fastställa en genomförbar och upprepningsbar metod för kvalitetsbestämning av den taiwanesiska grön propolis. Dock har inget standard förfarande fastställts för taiwanesiska grön propolis utvinning och efterföljande funktionell analys. Flera metoder som omväxlande gäller organiska och oorganiska lösningsmedel har föreslagits för propolis utvinning16,17,18,19,20. Eftersom propolis är en lipofila blandning, har studier visat att ekologiska utvinning är bättre än oorganiska utvinning8,18,19. Totala propolin koncentrationen i taiwanesiska grön propolis och dess antibakteriella egenskaper är viktiga indikatorer för kvaliteten på taiwanesiska grön propolis. Således, syftet med denna studie är att presentera ett protokoll för att extrahera och karaktärisera den antibakteriella egenskaper av taiwanesiska grön propolis med etanol som lösningsmedel.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>ethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E7023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman no. 4 filter paper</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>WHA1004125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>34860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>reverse phase RP-18 column</td>
			<td>Phenomenex Inc.</td>
			<td>00G-0234-E0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staphylococcus aureus</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>BCRC 10780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>BCRC 10675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tryptic soy broth</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>22092</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nutrient broth</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>70122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>spice grinder</td>
			<td>Waring</td>
			<td>WSG60K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microplate Reader</td>
			<td>Molecular Devices</td>
			<td>EMAX PLUS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC system</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>1200 Series</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vacuum evaporation</td>
			<td>B&#220;CHI</td>
			<td>Rotavapor R-215</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and analysis of taiwanese green propolis

Taiwanesiska grön propolis är rik på prenylated flavonoider och uppvisar ett brett spektrum av biologiska aktiviteter, såsom antioxidant, antibakteriell, och mot cancer. De bioaktiva föreningarna av taiwanesiska grön propolis är propolins, nämligen C, D, F och G. Koncentrationen av propolins i taiwanesiska grön propolis varierar beroende på säsong och geografisk plats. Därför är det viktigt att upprätta en standard och repeterbar rutin för kvalitetsbestämning av taiwanesiska grön propolis. Här presenterar vi ett protokoll som använder etanol-baserat extraktion, högpresterande vätskekromatografi och en antibakteriell aktivitet analys för att karakterisera taiwanesiska grön propolis kvalitet. Denna metod visar att 95% och 99,5% etanol extraktioner uppnå maximala torrsubstans avkastningen från taiwanesiska grön propolis, vilket därmed ger de högsta koncentrationerna av propolins som har antibakteriella egenskaper. Enligt dessa resultat anses detta protokoll pålitliga och repeterbara för kvalitetsbestämning av taiwanesiska grön propolis.

Positiv representativa uppgifter för etanol utvinning presenteras i tabell 1. Torrsubstans avkastningen från taiwanesiska grön propolis var positivt associerade med koncentrationen av etanol. 95% och 99,5% etanol extrakt hade den högsta torrsubstansen avkastning från taiwanesiska grön propolis. Lägsta torrsubstans avkastningen från taiwanesiska grön propolis uppstod när vatten användes som av extraktionsmedel. Dessa resultat indikerar att ett organiskt lösning...

Watch this Scientific Journal Video about Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis at JoVE.com

Extraction and Analysis of Taiwanese Green Propolis

Extraktion och analys av taiwanesiska grön Propolis

Vi presenterar ett protokoll för att extrahera och karakterisera taiwanesiska grön propolis som uppvisar antibakteriella aktiviteten med etanol som lösningsmedel.

Taiwanese green propolis is rich in prenylated flavonoids and exhibits a broad range of biological activities, such as antioxidant, antibacterial, and ...

Här presenterar vi protokollet för att använda etanol som lösningsmedel för att extrahera och karakterisera taiwanesisk grön propolis som hämmar antibakteriell aktivitet. Detta protokoll är en tillförlitlig och repeterbar metod för att bestämma kvaliteten på taiwanesisk grön propolis. Demonstrera förfarande kommer att Chun'Ting Chen och Yi'Hsuan Chien, doktorander från mitt laboratorium.Till att börja, väga ut 100 gram taiwanesiska gröna propolis. Med hjälp av en kryddkvarn, slipa propolis se till att bitarna mals till ett fint pulver utan några stora partiklar. Ställ ut fem kolvar och tillsätt 100 milliliter olika koncentrationer av etanol i vatten till varje.Blanda 10 gram markpropolis i etanollösningen i varje kolv, och inkubera i 25 grader Celsius med skakningar vid 250 RPM i 48 timmar. Efter detta, använd filterpapper med en 25 mikrometer porstorlek för att filtrera etanolextrakten. Med hjälp av en volymetrisk kolv, rekonstituera filtrates till sin ursprungliga volym på 100 milliliter med 95%etanol.Förvara de rekonstituerade extrakten vid minus 20 grader Celsius tills de är färdiga att använda. När du är redo att förbereda extrakten för HPLC, använd vakuumförångning för att koncentrera 10 milliliter av varje extrakt vid 40 grader Celsius i 10 minuter. Grädda torrsubstansen vid 45 grader Celsius i 24 timmar.Sedan, rekonstruera varje prov av torrsubstans med 10 milliliter 95%etanol. Med hjälp av ett sprutfilter med en 0,22 mikrometer porstorlek, omfiltrera varje extrakt och samla filtratet för direkt analys med HPLC. För att börja etablera en standardkurva, förbereda en liter av den mobila fas metanol till vattenlösning vid ett förhållande av 88,8 till 11,2.Med hjälp av den mobila faslösningen som lösningsmedel, bered serieutspädningar av propolinstandardkoncentrationerna enligt textprotokollet. Injicera 20 mikroliter av varje standardkoncentration i de omvända faskolonnerna sekventiellt från den lägsta koncentrationen till den högsta. Ställ sedan in HPLC-kolumnen på 30 grader Celsius, ställ in AVKÄNNINGSLÄNGDEN FÖR UV-detektorn till 280 nanometer och flödeshastigheten till en milliliter per minut, och inspelarens tid till 20 minuter.Analysera standarderna minst tre gånger. Efter detta använder beräkningsblad programvara för att ansluta mätsvaret mot koncentrationen vilket resulterar i en standardkurva med en bestämd ekvation och R-kvadratvärde. För att börja analysera extrakten, injicera 20 mikroliter av varje extrakt i den omvända faskolonnen.Ställ in HPLC-kolumnen på en temperatur på 30 grader Celsius, och en flödeshastighet på en milliliter per minut. Ställ in avkall på längden på UV-detektorn på 280 nanometer, och inspelaren tid till 20 minuter. Analysera extrakten minst tre gånger.Sedan, använd standardkurvan för att bestämma koncentrationen av propolin i varje etanolextrakt. När du har förberett testorganismerna och etanolextrakten, tillsätt 10 mikroliter av utspädd etanolextrakt, från 0,156 till 640 mikrogram per milliliter i brunnarna i en 96 brunnsplatta. Använd buljong för att justera volymen i varje brunn till 100 mikroliter se till att behålla 5%DMSO i alla utspädningar.Därefter inokulera 100 mikroliter av bakteriekultur i varje brunn av 96 väl plattan. Kultur vid 37 grader Celsius i 48 timmar. Använd en mikroplattläsare vid 590 nanometer för att analysera bakterietillväxten enligt grumlighet och för att bestämma den minsta hämmande koncentrationen.Efter detta, inokulera 10 mikroliter av flytande kultur från varje brunn som uppvisade till tillväxt på en agar platta. Inkubera vid 37 grader Celsius i 24 timmar. Identifiera den lägsta koncentrationen som visade ingen synlig bakterietillväxt för att bestämma bakterieaktiviteten.Den koncentration som helt elimineras celltillväxt anses vara den minsta bakteriell koncentration. I denna studie, Taiwanesiska gröna propolis utvinns med etanol. Torrsubstansavkastningen verkar vara högst när en hög koncentration av etanol används, och lägst när vatten används.Dessa resultat indikerar att ett organiskt lösningsmedel presterar bäst under denna extraktion, och att utbytet är positivt förknippat med etanolkoncentrationen. Likaså, koncentrationen av propoliner verkar vara positivt förknippad med etanol koncentrationen under extraktion, med den högsta avkastningen av propolins erhålls i 95%och 99,5%etanol extrakt. De antibakteriella påverkar av etanolextrakten mot S aureus och E coli undersöks sedan.Den genomsnittliga minsta hämmande koncentrationen för S aureus verkar vara mellan 10 och 20 mikrogram per milliliter och den genomsnittliga bakteriekoncentrationen verkar vara 20 mikrogram per milliliter. Vatten extrakt, dock inte hade någon antibakteriell inverkan mot S aureus. Ingen antibakteriell påverkan observeras för E coli vid användning av antingen vatten- eller etanolextrakten.En av de viktigaste experimentella förfarandet är att undvika enhetlighet taiwanesiska gröna propolis under slipning.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram

Thermostabilization, Expression, rening och kristallisation av den mänskliga Serotonin Transporter Bound till<em&gt; S</em&gt; -citalopram

The serotonin transporter is a sodium and chloride-coupled transporter that &#34;pumps&#34; extracellular serotonin into cells. S-citalopram is a drug ...

A Simple Fractionated Extraction Method for the Comprehensive Analysis of Metabolites, Lipids, and Proteins from a Single Sample

En enkel fraktionerad extraktionsmetod för den omfattande analysen av metaboliter, lipider och proteiner från en enda prov

Understanding of complex biological systems requires the measurement, analysis and integration of multiple compound classes of the living cell, usually ...

Characterization of Membrane Transporters by Heterologous Expression in E. coli and Production of Membrane Vesicles

Characterization of Membrane Transporters by Heterologous Expression in E. coli and Production of Membrane Vesicles

Karakterisering av membran transportörer genom heterologt uttryck i E. coli och produktion av membran blåsor

Several methods have been developed to functionally characterize novel membrane transporters. Polyamines are ubiquitous in all organisms, but polyamine ...

Assessment of Cellular Oxidation using a Subcellular Compartment-Specific Redox-Sensitive Green Fluorescent Protein

Bedömning av cellulär oxidation med hjälp av ett subcellulärt fackspecifikt Redox-sensitive green fluorescerande protein

Measuring the intracellular oxidation/reduction balance provides an overview of the physiological and/or pathophysiological redox status of an organism. ...

Rapid and Cost-Effective RNA Extraction of Rat Pancreatic Tissue

Snabb och kostnadseffektiv RNA-utvinning av råtta bukspottskörteln vävnad

Regardless of the extraction method, optimized RNA extraction of tissues and cell lines are carried out in four stages: 1) homogenization, 2) effective ...

Ganglioside Extraction, Purification and Profiling

Utvinning, rening och profilering av gangliosid

Gangliosides are glycosphingolipids that contain one or more sialic acid residues. They are found on all vertebrate cells and tissues but are especially ...

The Extraction of Liver Glycogen Molecules for Glycogen Structure Determination

Liver glycogen is a hyperbranched glucose polymer that is involved in the maintenance of blood sugar levels in animals. The properties of glycogen are ...

Extraction and Purification of FAHD1 Protein from Swine Kidney and Mouse Liver

Extraktion och rening av FAHD1-protein från svinnjure och muslever

Fumarylacetoacetate hydrolase domain-containing protein 1 (FAHD1) is the first identified member of the FAH superfamily in eukaryotes, acting as ...

Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

Rutinmässig insamling av högupplösta kryo-EM-dataset med 200 KV transmissionselektronmikroskop

Cryo-electron microscopy (cryo-EM) has been established as a routine method for protein structure determination during the past decade, taking an ...

A Nanobar-Supported Lipid Bilayer System for the Study of Membrane Curvature Sensing Proteins in vitro

A Nanobar-Supported Lipid Bilayer System for the Study of Membrane Curvature Sensing Proteins in vitro

Ett nanobar-stött lipid-dubbelskiktssystem för studier av membrankrökningsavkännande proteiner in vitro

Membrane curvature plays important roles&#160;in various essential processes of cells, such as cell migration, cell division, and vesicle trafficking. It ...