Name: analysis of shear flow-induced migration of murine marginal zone b cells in vitro
Uploaded: 2018-11-26T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Shear Flow-induced Migration of Murine Marginal Zone B Cells In Vitro at JoVE.com

Эта работа была поддержана грантов от «Deutsche Forschungsgemeinschaft» SFB 854/TP11 K.-д.ф.

Все эксперименты, связанные с использованием животных были ранее одобрены Landesverwaltungsamt Галле (Саксония-Анхальт), Германия, в соответствии с все руководящие принципы медицинского факультета OVGU Университета Магдебурга.
1. MZB клетки очистки
<ol><li>
Изолируйте лейкоцитов.</s...

<ol>
	<li>Alon, R., Ley, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cells+on+the+run:+shear-regulated+integrin+activation+in+leukocyte+rolling+and+arrest+on+endothelial+cells.">Cells on the run: shear-regulated integrin activation in leukocyte rolling and arrest on endothelial cells.</a> Current Opinions in Cell Biology. 20 (5), 525-532 (2008).</li><li>Dominguez, G. A., Anderson, N. R., Hammer, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+direction+of+migration+of+T-lymphocytes+under+flow+depends+upon+which+adhesion+receptors+are+engaged.">The direction of migration of T-lymphocytes under flow depends upon which adhesion receptors are engaged.</a> Integrative Biology (Cambridge). 7 (3), 345-355 (2015).</li><li>Steiner, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+roles+for+endothelial+ICAM-1,+ICAM-2,+and+VCAM-1+in+shear-resistant+T+cell+arrest,+polarization,+and+directed+crawling+on+blood-brain+barrier+endothelium.">Differential roles for endothelial ICAM-1, ICAM-2, and VCAM-1 in shear-resistant T cell arrest, polarization, and directed crawling on blood-brain barrier endothelium.</a> Journal of Immunology. 185 (8), 4846-4855 (2010).</li><li>Valignat, M. P., Theodoly, O., Gucciardi, A., Hogg, N., Lellouch, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+lymphocytes+orient+against+the+direction+of+fluid+flow+during+LFA-1-mediated+migration.">T lymphocytes orient against the direction of fluid flow during LFA-1-mediated migration.</a> Biophysical Journal. 104 (2), 322-331 (2013).</li><li>Woolf, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+node+chemokines+promote+sustained+T+lymphocyte+motility+without+triggering+stable+integrin+adhesiveness+in+the+absence+of+shear+forces.">Lymph node chemokines promote sustained T lymphocyte motility without triggering stable integrin adhesiveness in the absence of shear forces.</a> Nature Immunology. 8 (10), 1076-1085 (2007).</li><li>Cinamon, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sphingosine+1-phosphate+receptor+1+promotes+B+cell+localization+in+the+splenic+marginal+zone.">Sphingosine 1-phosphate receptor 1 promotes B cell localization in the splenic marginal zone.</a> Nature Immunology. 5 (7), 713-720 (2004).</li><li>Cinamon, G., Zachariah, M. A., Lam, O. M., Foss, F. W., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicular+shuttling+of+marginal+zone+B+cells+facilitates+antigen+transport.">Follicular shuttling of marginal zone B cells facilitates antigen transport.</a> Nature Immunology. 9 (1), 54-62 (2008).</li><li>Cyster, J. G., Schwab, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sphingosine-1-phosphate+and+lymphocyte+egress+from+lymphoid+organs.">Sphingosine-1-phosphate and lymphocyte egress from lymphoid organs.</a> Annual Reviews in Immunology. 30, 69-94 (2012).</li><li>Schwab, S. R., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Finding+a+way+out:+lymphocyte+egress+from+lymphoid+organs.">Finding a way out: lymphocyte egress from lymphoid organs.</a> Nature Immunology. 8 (12), 1295-1301 (2007).</li><li>Cerutti, A., Cols, M., Puga, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marginal+zone+B+cells:+virtues+of+innate-like+antibody-producing+lymphocytes.">Marginal zone B cells: virtues of innate-like antibody-producing lymphocytes.</a> Nature Reviews Immunology. 13 (2), 118-132 (2013).</li><li>Mebius, R. E., Kraal, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+function+of+the+spleen.">Structure and function of the spleen.</a> Nature Reviews Immunology. 5 (8), 606-616 (2005).</li><li>Tedford, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+opposing+forces+of+shear+flow+and+sphingosine-1-phosphate+control+marginal+zone+B+cell+shuttling.">The opposing forces of shear flow and sphingosine-1-phosphate control marginal zone B cell shuttling.</a> Nature Communications. 8 (1), 2261 (2017).</li><li>ImageJ. MTrack2 Available from: <a target="_blank" href="https://imagej.net/MTrack2">https://imagej.net/MTrack2</a> (2018)</li><li>. MTrack2 Available from: <a target="_blank" href="https://valelab4.ucsf.edu/~nstuurman/IJplugins/MTrack2.html">https://valelab4.ucsf.edu/~nstuurman/IJplugins/MTrack2.html</a> (2018)</li><li>. Chemotaxis and Migration Tool Available from: <a target="_blank" href="https://ibidi.com/chemotaxis-analysis/171-chemotaxis-and-migration-tool.html">https://ibidi.com/chemotaxis-analysis/171-chemotaxis-and-migration-tool.html</a> (2018)</li><li>Reeves, J. P., Reeves, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removal+of+lymphoid+organs.">Removal of lymphoid organs.</a> Current Protocols in Immunology. , (2001).</li><li>. Manual Tracking Available from: <a target="_blank" href="https://imagej.nih.gov/ij/plugins/manual-tracking.html">https://imagej.nih.gov/ij/plugins/manual-tracking.html</a> (2018)</li><li>. ibidi Pump System Available from: <a target="_blank" href="https://ibidi.com/perfusion-system/112-ibidi-pump-system.html">https://ibidi.com/perfusion-system/112-ibidi-pump-system.html</a> (2018)</li></ol>

Здесь мы описываем метод для анализа миграции клеток, которые обнаружить силы сдвига потока и реагировать, не изменяя их миграции. Анализ MZBs показал, что MZBs спонтанно мигрируют на ИКАМ-1 и в присутствии потока, будет мигрировать вверх поток. В нашей предыдущей работы мы показали, что MZBs н?...

Иммунные клетки являются наиболее подвижные клетки в организме человека и часто должны бороться с поперечной силы от крови и лимфы. Однако существует сравнительно мало исследований на сдвиг силы индуцированной миграции лейкоцитов1,2,3,,45. Мы представляем здесь надежный и количественный протокол для анализа реакции иммунной клетки потока в пробирке. Выполнение анализа не требуется изготовление компонентов, и все оборудование и расходные материалы являются коммерчески доступными. В протокол, включая анализ очищения и миграции клеток, может выполняться в один день. Наконец хотя мы описываем миграции маргинальной зоне В-клеток (MZBs), протокол может быть адаптирована для анализа миграции против потока других типов иммунных клеток. Таким образом это возможно использовать этот assay систематически анализировать широкий спектр лейкоциты с панелью всеобъемлющего условий.
MZBs являются население B-клеток, которые, в мыши, находятся только в селезенке и трансфер между интерьер фолликулов и маргинальных зонах6,,78,9. Маргинальные зоны — это слой клеток иммунных клеток примерно 5 – 10 толщиной. Слой клетки окружает фолликулов и состоит главным образом из MZBs и макрофагов, но также инвариантные естественных убийца клеток T (iNKT), дендритных клеток (DCs) и нейтрофилов, среди прочих10. Клетки в маргинальной зоне подвергаются однонаправленный кровотока, возникая от Селезеночной артерии, которые заканчиваются в маргинальных синуса, окружающих фолликула. Кровь течет из отверстия в маргинальных пазухи через краевой зоне и затем собраны в венозные синусы в красной пульпы и восстановлен в циркуляции11. Свободный поток крови моет над MZBs и подвергает их антигенов в крови. MZBs нести антигена в фолликул челночные автоматически между маргинальной зоне и внутри фолликула, который не подвергается крови. Таким образом как MZBs к фолликул, они должны перенести вверх поперечная сила в крови поток12 (Рисунок 1A).
В этом протоколе мы описываем как количественно определить, как иммунной клетки, такие, как MZBs реагировать или нет потока потока в пробирке, для того, чтобы выявить, как они запрограммированы для переноса в естественных условиях. На первом шаге MZBs очищаются от мыши селезенки, используя магнитные бусы, сочетании антитела от коммерчески доступных наборов. Свежевыделенных MZBs представил в колодец слайда потока камеры, разрешено селиться на Интегрин лигандов и воздействию потока миграции буфера с помощью насоса системы (рис. 2A). Клетки отражаются с помощью системы покадровой видео микроскопии. Затем изображения обрабатываются для анализа с бесплатный плагин ImageJ, MTrack213,14, автоматически отслеживать клетки. Треки могут быть количественно затем с бесплатный инструмент Ibidi хемотаксис15 для определения различных параметров, включая скорость прямолинейность и миграции индекс. Эти значения могут использоваться для определения воздействия миграции ингибиторы, стимуляторы клеток, chemokines и других химических веществ, влияющих на миграцию на индуцированного сдвига потока миграции для того чтобы понять силы, контролируя иммунные клетки движение в естественных условиях.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>VWR Cell Strainer, 70 &#181;m</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10199-656</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pre-Separation Filters, 30 &#181;m</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-095-823</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MZB and FOB cell isolation kit</td>
			<td>Miltenyi</td>
			<td>130-100-366</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B220 CD45R, clone RA3-6B2, FITC</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>103206</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD21 / CD 35, clone 7G6, APC</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>558658</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD23, clone B3B4, PE</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>101608</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Biochrom</td>
			<td>L2035</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-PBS 1x</td>
			<td>Gibco by Life Technologies</td>
			<td>14190-094</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA albumin fraction V, fatty acid-free</td>
			<td>Roth</td>
			<td>&#34;0052.3&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ICAM-1</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>796-IC-050</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ibidi &#181;-slides VI 0.4, hydrophobic, uncoated</td>
			<td>Ibidi</td>
			<td>80601</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusion set, white, 50 cm, 0.8 mm</td>
			<td>Ibidi</td>
			<td>10963</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ibidi Pump system</td>
			<td>Ibidi</td>
			<td>10902</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of shear flow-induced migration of murine marginal zone b cells in vitro

Маргинальные зоны B клетки (MZBs) являются население B-клетки, которые находятся в мыши селезеночной маргинальных зонах, которые окутывают фолликулов. Чтобы достичь фолликулов, MZBs необходимо перенести вверх поперечной силы потока крови. Мы представляем здесь метод для анализа этого потока индуцированной MZB миграции в пробирке. Во-первых MZBs изолированы от Хандра мыши. Во-вторых MZBs поселились на Интегрин лигандов в поток камеры слайды, подвергается сдвига потока и образ под микроскопом во время миграции. В-третьих изображения перенос MZBs обрабатываются с помощью MTrack2 автоматическая ячейки отслеживания плагинов ImageJ, и результирующий треков ячейки являются количественно с помощью инструмента хемотаксис Ibidi. Миграции данных показывают, как быстро переместить ячейки, как часто они изменить направление, ли вектор сдвига потока влияет на их направление миграции и какие Интегрин лигандов участвуют. Хотя мы используем MZBs, метод может быть легко адаптирована для анализа миграции лейкоцитов, который реагирует на силы сдвига потока.

Мы использовали протокол, описанные выше для сравнения миграции MZBs на слайдах ИКАМ-1-покрытием без потока (0 Дин/см2) и подвергается сдвига потока (4 Дин/см2). Клетки были автоматически отслеживаются с MTrack2 и в результате трек, что файлы были обложил на фильмы ми...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Shear Flow-induced Migration of Murine Marginal Zone B Cells In Vitro at JoVE.com

Analysis of Shear Flow-induced Migration of Murine Marginal Zone B Cells In Vitro

Маргинальные зоны B клеток (MZBs) реагировать силы сдвига потока путем переориентации их миграции путь вверх поток. Этот протокол показано, как записывать и анализировать миграции с помощью fluidics блока, насоса, Микроскоп съемочной системы и свободного программного обеспечения.

Анализ миграционных потока индуцированного сдвига мышиных маргинальные зоны B клеток In Vitro

Marginal zone B cells (MZBs) are a population of B cells that reside in the mouse splenic marginal zones that envelop follicles. To reach the follicles, ...

Этот метод может помочь понять ключевые вопросы в области миграции иммунных клеток, такие как, как цитоскелет посылает силы стрижки и как интегрин лиганды и хемокины влияют на поток индуцированной миграции лейкоцитов. Основным преимуществом этой техники является то, что это новый тип миграции анализ, который легко для начинающих для выполнения. Он использует только коммерчески доступное оборудование и реагенты, а также свободные программы.Хотя этот метод может дать представление о маргинальных клетках зоны В, он также может быть применен к другим иммунным клеткам, таким как активированные Т-клетки. За день до эксперимента оттаивать алицит ICAM-1 и разбавлять его в PBS до конечной концентрации в пять микрограмм на миллилитр. Затем добавьте 30 микролитров ICAM-1 в нужные камеры слайда потока.Поместите слайд во влажную камеру, и установить его на четыре градуса по Цельсию, чтобы инкубировать на ночь. На следующий день, мыть камеру, добавив 100 микролитров PBS к одному хорошо, а затем снятия 100 микролитров из другой колодец камеры. Затем добавьте 100 микролитров блокирующего буфера в камеру и инкубировать горку во влажной камере при комнатной температуре в течение 90 минут.Затем вымойте камеру, добавив 100 микролитров PBS к одной колодец, вытесив ее из другой хорошо, а затем добавить 100 микролитров буфера миграции в камеру. Слайд теперь готов к использованию. Храните его во влажной камере при комнатной температуре до начала эксперимента.Во-первых, подключите жидкий насос и прикрепите блок жидкости. Затем включите программное обеспечение насоса. Затем вымойте трубку один раз с помощью 5-10 миллилитров буфера миграции.Это займет около одной минуты. Затем добавьте 11,7 миллилитров буфера миграции в равной степени к обоим резервуарам и удалите пузырьки воздуха. Теперь зажимать трубки около 10 сантиметров от разъема кусок, и место жидкостного блока в нагретой инкубационой камеры на микроскоп.В программном обеспечении установите выбор слайда для микроскользя VI 0.4 и опцию трубки до белого цвета. Кроме того, установить желаемый стресс снора около четырех динов на квадратный сантиметр и время изображения до 30 минут. Затем установите желаемую скорость потока и нагрузку на стрижку, введя значения в программное обеспечение насоса.Далее, предварительно разогреть инкубационую камеру микроскопа, блок жидкости и буфер миграции aliquots до 37 градусов по Цельсию. После нагрева, проверить жидкий насос, гарантируя, что буфер миграции течет вперед и назад в резервуарах и что Есть нет пузырьков воздуха в системе. Во-первых, изолировать лейкоциты и очистить маргинальные клетки зоны В, как описано в сопроводительном текстовом протоколе.Затем очистите дно горки этанолом. Добавьте 30 микролитров подвески ячейки в один колодец камеры и вывяйте 30 микролитров сохраненного буфера миграции из другой системы. Обложка слайд, и инкубировать его в течение 30 минут, чтобы клетки, чтобы прикрепить.Затем медленно добавляйте предварительно разогретый буфер миграции к каждому колодецу слайда до тех пор, пока положительный мениск не поднимется из колодеца. Удалите любые пузырьки воздуха кончиком пипетки. Важно поддерживать согласованность с факторами, влияющими на адгезию клеток, поэтому держите буферы и ячейки на 37 градусов, и избегайте использования чрезмерной силы при трубопроводе буфера в камеру.Зажим слайд на стадии микроскопа, и удалить немаркированные стороны жидкостных труб из разъема кусок. Затем заполните конец трубки миграционным буфером до тех пор, пока положительный мениск без пузырьков воздуха не поднимется из конца. Переверните конец трубки, и вставьте его в верхней хорошо потока камеры.Сохраняя зажатые трубки, повторите процедуру для отмеченного конца трубки. Теперь переключитесь систему визуализации в режим Live и выберите поле зрения, на которое находится середина слайда. Здесь, установить акцент на клетки, а затем слегка де-фокус для повышения черного контура клеток и производить белый интерьер.Черный фон и белый центр будет проще в использовании в автоматизированной программе слежения. Настройка программы последовательности изображений для записи одного изображения каждые пять секунд в течение 30 минут с использованием 10x сухой цели. Затем начните запись.Снимите зажим с трубки и включите насос. Это приведет к тому, что клетки, не являющиеся адептами, смываются, а клетки-адепты начинают мигрировать. В конце программы визуализации отклеить и сохранить фильм.При использовании ингибитора или модификатора миграции клеток его можно добавить либо к клеткам в клеточной подвеске, прежде чем положить их на слайд, либо к буферу миграции в блоке жидкости. Чтобы начать автоматический анализ пути миграции, откройте программу ImageJ. Скопировать MTrack2_kt Java в папку ImageJ Plugins.В меню Plugins выберите компиляцию и запуск. Затем перезапустите ImageJ, и плагин должен появиться в меню Plugins. Откройте стек изображений из фильма миграции ячеек в ImageJ и обработать изображения, показанные здесь, чтобы преобразовать видео из цветных кадров в высококонтрастные изображения, показывающие ячейки как черные объекты на белом фоне.Затем заточить изображения в два раза, despeckle изображения, а затем преобразовать изображения в восемь бит. В меню Изображения перейдите в подменю Adjust Brightness/Contrast и поместите слайдер Contrast на максимальный контраст. Это сделает клетки отображаться в качестве белых объектов на черном фоне.Затем вернитесь к подмене порога регулировки, чтобы убедиться, что ячейки отображаются в качестве черных объектов на белом фоне. Теперь запустите автоматический плагин отслеживания ячеек MTrack2 kt. На экране опций установите минимальный размер частицы до одного пикселя и максимальный размер частицы до 30 пикселей.Установите значение скорости до 10 пикселей, хотя маргинальные ячейки зоны В, как правило, не превышают двух пикселей на последовательных кадрах, которые находятся на пять секунд друг от друга. Сотовые треки теперь готовы к анализу с помощью инструмента ibidi Chemotaxis. Эти два поля показывают пути миграции маргинальных ячеек зоны В, которые были посеяны на слайдах с покрытием ICAM-1.Клетки отслеживались автоматически с помощью MTrack2 с использованием методов, описанных в этой статье. Слева клетки были изображены в статических условиях, а на правых клетках были подвержены потоку слайра из четырех гинов на квадратный сантиметр. Отдельные клеточные треки могут быть импортированы в инструмент ibidi Chemotaxis для создания трековых сюжетов каждого фильма.Здесь отдельные клеточные треки окрашены в красный цвет, чтобы указать, что они закончили вниз по течению от точки их происхождения или черный, если они оказались вверх по течению. Здесь показан анализ клеточных треков из четырех отдельных фильмов как для потока, так и для условий потока. Это включает в себя средний индекс направленной миграции, скорость ячейки, прямоту пути и окончательное расстояние прямой линии для обоих условий.После просмотра этого видео, вы должны иметь хорошее понимание того, как изображение направленной миграции маргинальных ячеек зоны B к потоку сала и как автоматически отслеживать клетки. Во время этой процедуры, другие методы, такие как микроскопия TIRF могут быть выполнены, чтобы ответить на дополнительные вопросы, такие как, как цитоскелет и интегрины реагировать на стресс стрижки?

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Murine Model of CD40-activation of B cells

Мышиной модели CD40-активации В-клеток

Research on B cells has shown that CD40 activation improves their antigen presentation capacity. When stimulated with interleukin-4 and CD40 ligand ...

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Human T Lymphocyte Isolation, Culture and Analysis of Migration In Vitro

Человеческий Т-лимфоцитов изоляции, культуры и анализ миграции In Vitro</em

The migration of T lymphocytes involves the adhesive interaction of cell surface integrins with ligands expressed on other cells or with extracellular ...

Induction and Assessment of Class Switch Recombination in Purified Murine B Cells

Индукция и оценка класса Рекомбинация коммутатор в Очищенная мышиные клетки B

Humoral immunity is the branch of the immune system maintained by B cells and mediated through the secretion of antibodies. Upon B cell activation, the ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cells Within Murine Aortas

Проточной цитометрии анализа иммунных клеток мышей В аорты

Atherosclerosis is a chronic inflammatory process of medium and large size vessels that is characterized by the formation of plaques consisting of foam ...

In vitro Uncoating of HIV-1 Cores

In vitro Uncoating of HIV-1 Cores

В пробирке раздевания ВИЧ-1 сердечников

The genome of the retroviruses is encased in a capsid surrounded by a lipid envelope. For lentiviruses, such as HIV-1, the conical capsid shell is ...

Isolation, Processing and Analysis of Murine Gingival Cells

Изоляция, обработки и анализа мышиного десен Клетки

We have developed a technique to precisely isolate and process murine gingival tissue for flow cytometry and molecular studies. The gingiva is a unique ...

Rapid Analysis of Chromosome Aberrations in Mouse B Lymphocytes by PNA-FISH

Быстрое Анализ хромосомных аберраций в Mouse-лимфоцитов на PNA-FISH

Defective DNA repair leads to increased genomic instability, which is the root cause of mutations that lead to tumorigenesis. Analysis of the frequency ...

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

Мышиной модели группы B<em&gt; Streptococcus</em&gt; Вагинальный Колонизация

Streptococcus agalactiae (group B Streptococcus, GBS), is a Gram-positive, asymptomatic colonizer of the human gastrointestinal tract and vaginal tract of ...

Detection and Enrichment of Rare Antigen-specific B Cells for Analysis of Phenotype and Function

Обнаружение и обогащение редких антиген-специфических B Клетки для анализа фенотипа и функции

B cells reactive with a specific antigen usually occur at a frequency of &lt;0.05% of lymphocytes. For decades researchers have sought methods to isolate ...

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

A Novel In Vitro Wound Healing Assay to Evaluate Cell Migration

Роман в Vitro раны исцеления Assay для оценки миграции клеток

The aim of this work is to show a novel method to evaluate the ability of some immunomodulatory molecules, such as antimicrobial peptides (AMPs), to ...