Name: left atrial stenosis induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension in rat
Uploaded: 2018-11-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat at JoVE.com

作者感谢米塔克斯-日本科学促进会 (jsps) 暑期课程。在 Mitacs-JSPS 暑期项目的资助下, ping yu xiong 参观了 jikei 大学医学院。minamisawa 博士得到了日本教育、文化、体育、科学和技术部 (s. m.) 的部分支持, 该部是由教育部支持的私立大学战略研究基金会项目, 即汽车赛车纪念基金会 (s. m.) 和 jikei 大学研究生研究基金 (s. m.), 为该项目提供财政支助。archer 博士得到美国国立卫生研究院 (nih) 的部分支持, 这些机构授予 nih 1r01hl1113001-01a1 (s. l. a.) 和 nih 2r01hl071115-08 (s. l. a.), 加拿大创新基金会, 一级加拿大线粒体动力学和转化学主席医学 (s. l. a.)、威廉·亨德森基金会、加拿大血管网络和女王心肺单位 (qcpu)。
提交人感谢吉基大学医学院学术信息中心摄影服务主任 tadashi kokubo 先生拍摄了这段视频。

las 实验协议已获得吉基大学医学院动物护理委员会和大学研究与伦理委员会的批准 (议定书 #2015-118)。
1. 术前准备
<ol><li>到达动物设施后, 提供5周大的雄性 sprague dawley 大鼠150至200克, 1周前适应新家。</li>
	<li>在手术前通过高压灭菌准备以下设备: 1) 小动物呼吸器, (2) 麻醉机, 3) 插管套件 (由一对止血钳、舌头去压器和18g 血管测量仪组成), 4) 手术器械 (其中包括一对弯曲的钳子?...

<ol>
	<li>McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cor+Triatriatum+as+a+Problem+of+Adult+Heart+Disease.">Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease.</a> Circulation. 31, 263-272 (1965).</li><li>Strange, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hypertension:+prevalence+and+mortality+in+the+Armadale+echocardiography+cohort.">Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort.</a> Heart. 98 (24), 1805-1811 (2012).</li><li>Moreira, E. 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C., Shi, Y., Dupuis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bosentan+does+not+improve+pulmonary+hypertension+and+lung+remodeling+in+heart+failure.">Bosentan does not improve pulmonary hypertension and lung remodeling in heart failure.</a> European Respiratory Society. 37 (3), 578-586 (2011).</li><li>Dayeh, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Echocardiographic+validation+of+pulmonary+hypertension+due+to+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction+in+mice.">Echocardiographic validation of pulmonary hypertension due to heart failure with reduced ejection fraction in mice.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li><li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure.">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li><li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Effects+and+Mechanism+of+Atorvastatin+on+Pulmonary+Hypertension+Due+to+Left+Heart+Disease.">The Effects and Mechanism of Atorvastatin on Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease.</a> PLoS ONE. 11 (7), e0157171-e0157171 (2016).</li><li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease.">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), L725-L736 (2013).</li><li>Fujimoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+causes+intrapulmonary+venous+arterialization+in+rats.">Pulmonary hypertension due to left heart disease causes intrapulmonary venous arterialization in rats.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 154 (5), 1742-1753 (2017).</li><li>Katz, M. G., Fargnoli, A. S., Hajjar, R. 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las 大鼠是一种新的第2组 ph 模型, 已经受到了该领域 12、13 的研究人员的极大兴趣。与现有的两组2型模型相比, 即肺静脉狭窄 (pvs) 模型14, 使用仔猪, 和冠状动脉上带 (sab) 大鼠模型8,9, 10, las 大鼠模型有几个优势。与 pvs 仔猪模型相比, las 大鼠模型的生成成本较低, 大?...

本文的目的是演示如何在大鼠中执行 las 手术的分步过程。手术诱导的 las 在人类中密切模仿 ms 和 cortriatrium, 这涉及到在左心房1产生机械阻塞。左心室 (lv) 流入的阻塞往往导致肺静脉循环充血, 患者逐渐发展为 ph 值。世界卫生组织将左心脏病引起的 ph 分为第2组, 这是最普遍的 ph2、3、4组。左心脏病患者的 ph 值诊断与1年标准化死亡率4的七倍以上的增长有关.目前, 除了治疗潜在的左心疾病 (例如, 手术更换狭窄的二尖瓣) 外, 第2 ph 组还没有经过批准的治疗方法。然而, 即使是有效的二尖瓣置换术, 也不能完全解决mitral患者中 ph 值的问题。这种持续的 ph 值是由于不利的肺血管重塑, 这是很不清楚的。因此, 动物模型对于提高我们对2例 ph 值不利肺血管重塑的潜在分子机制的认识是非常重要的。
2之二一组有几种动物模型, 冠状动脉结扎6、7 和横向主动脉带8,9, 10 是最常用的2之二组 ph 动物模型。这些模型的主要缺点是 lv 的参与, 这使得第2组 ph 研究的结果难以解释。相比之下, lv 在 las 模型中保持不变。此外, las 模型在临床上具有相关性, 因为它导致 ph 值在10周期间的缓慢和逐步发展, 为期10周。在人类中, 如果经二尖瓣多普勒流速大于 2.0mms11,ms 被认为是显著的, 我们也使用这个数字作为一个截止点, 以确定 las 手术是否产生了明显的狭窄。此外, 虽然 las 模型产生轻度或中度 ph 值, 但它表现出典型的组织学变化, 类似于人类患者, 即肺内静脉动脉化11的发展。las 大鼠模型是一种新的临床相关的2组 ph 模型, 具有保留 lv 功能。它适用于研究持续性肺血管重构的病理生理学, 确定分子靶点, 并测试2例 ph 的新疗法。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:635px;" width="634">
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:159px;">5-0 Prolene Suture</td>
			<td style="width:132px;">Johnson &#38; Johnson - Ethicon</td>
			<td style="width:123px;">8725H</td>
			<td style="width:222px;">Polypropylene suture with HEMO-SEAL Technology</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:159px;">Anaesthesia Machine</td>
			<td style="width:132px;">Wakenyaku Co., Ltd.</td>
			<td style="width:123px;">BRTK-100A</td>
			<td>Air pump and anaethesia machine</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:159px;">Angiocatheter guidewire</td>
			<td style="width:132px;">Self-made</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>10 cm guidewire glued to a 1 cc syringe&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:159px;">Chest retractor</td>
			<td style="width:132px;">Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td>
			<td style="width:123px;">F-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:159px;">Chest tube 23G</td>
			<td style="width:132px;">Self-made</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>10 cc syringe attached to a 23G needle plus plastic tube</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:159px;">Curved forceps</td>
			<td style="width:132px;">Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td>
			<td style="width:123px;">A-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:159px;">Heating pad</td>
			<td style="width:132px;">Vivaria</td>
			<td style="width:123px;">MP-916-NV</td>
			<td>Keep body temperature at 37 degree celsius</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon Ligating Clips</td>
			<td style="width:132px;">Teleflex</td>
			<td style="width:123px;">REF 003200</td>
			<td>Size Medium-Large</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Horizon Manual-Load Ligating Clip Applier For Medium-Large Size Horizon</td>
			<td style="width:132px;">Teleflex</td>
			<td>REF 337085</td>
			<td>Ligation Clips Angled Jaw, (20cm)</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:159px;">Needle holder</td>
			<td style="width:132px;">Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td>
			<td style="width:123px;">MC-40</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:159px;">Rodent Respirator</td>
			<td style="width:132px;">CWE Inc</td>
			<td style="width:123px;">SAR-830/P</td>
			<td>Small animal ventilator</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:159px;">Scissors</td>
			<td style="width:132px;">Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td>
			<td style="width:123px;">B-12</td>
			<td>Straight scissors ideally with round tips</td>
		</tr>
		<tr height="62">
			<td height="62" style="height:63px;width:159px;">Straight forceps</td>
			<td style="width:132px;">Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td>
			<td style="width:123px;">A-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:159px;">Tongue depressor</td>
			<td style="width:132px;">Uchida Yoko Co., Ltd.</td>
			<td style="width:123px;">8-615-2417</td>
			<td>Use the wide end</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

left atrial stenosis induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension in rat

二尖瓣狭窄引起的肺静脉动脉化和2组肺动脉高压 (ph) 的发病机制尚不清楚。由于二尖瓣狭窄 (ms), 2 组 ph 没有啮齿类动物模型, 有助于疾病机制和潜在治疗策略的研究。本文提出了一种新的大鼠肺静脉充血致肺静脉动脉化和2组 ph 值由左心房狭窄 (las) 引起的模型。las 是通过使用半封闭的钛夹收缩左心房来实现的。las 手术后, 超声心动图中经二尖瓣流入速度大于或等于 2.0 mx 的大鼠模型在8至10周的时间内逐渐形成肺静脉动脉化和第2组 ph 值。在本协议中, 我们提供了如何执行 las 手术的分步过程。提出的 las 大鼠模型类似于人类的 ms, 可用于研究肺静脉动脉化的潜在分子机制和临床前评估2例 ph 的治疗方法。

las 的有效性是确认使用超声心动图, 2周的术后。lv 流入速度大于 2.0 m2 的大鼠, 用四室视图测量, 被认为出现了明显的狭窄 (图 1), 并可靠地发展为中度 ph 和肺静脉动脉化8-10周后 las 手术后。
las 手术后十周, las 组的大鼠表现为左心房增大 (图 2E)、肺充血 (图 2e)?...

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Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

左心房狭窄 (las) 是一种新的外科技术, 用于研究2组肺动脉高压 (ph) 和肺静脉动脉化的机制。在这里, 我们提出了一个协议, 以限制左心房使用钛夹, 导致肺静脉动脉化和中度 ph 在大鼠。

左心房狭窄致大鼠肺静脉动脉化及第2组肺动脉高压

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

感谢您观看我们的视频。我是日本东京济基大学医学院的苏木美美泽。我们关于动物肺高血压的机会，由于大鼠心脏病，这被归类为第二类肺高血压。世界卫生组织将肺高血压分为五类。左心房狭窄大鼠是动物模型组二肺高血压，是肺高血压最普遍的形式，目前没有批准治疗这一组肺高血压。在这个视频中，我们将演示如何执行大鼠左心房狭窄手术的分步程序。手术创造的右心房狭窄模仿人类的分部狭窄。当我们用它来研究第二组肺高血压的可能性和下。让我们开始吧。手术前准备以下设备、小型动物呼吸器和麻醉机。一个孵化包由一对半钳子、一个舌头抑制剂和一个18个量表血管导管组成。手术器械包括一对弯曲钳子、一对直钳、一个针头驱动器、一个胸部缩回器、一把剪刀、一个5-0单丝缝合线、一个夹子施用器、一个中等大夹子和一个23个量表的胸管。在感应室中对大鼠进行麻醉，用百分之五的异氟与每分钟两米的房间空气混合。插管前剃胸毛。涂抹脱毛霜，去除剃须刀未去除的细毛。用绳子钩住门牙，将琴弦固定到针脚上。固定后，用下部钳口张开，并将舌头抑制剂插入口腔。提起舌压器以可视化声带。将 18 表血管导管作为气管内管插入气管，然后快速将导管连接到呼吸器。将潮汐量设置为每克 10 微升，呼吸速率为每分钟 100 次。保持麻醉与2%异氟与每分钟2米的房间空气混合。用氯己丁和酒精交替擦洗对手术地点进行消毒。每公斤给予丁丙诺啡01毫克皮。用无菌的窗帘盖住老鼠。检查踏板反射，确认手术前麻醉成功。标记切口部位，在窝窝下方两厘米处。用一把剪刀做一个两厘米左的胸壁切口。使用直和弯曲的钳子小心地分离第四排和第五肋骨之间的腹腔间肌肉，直到进入胸腔。将胸缩回器插入胸腔。使用一些力打开胸部缩回器，将第四和第五根肋骨分开约一厘米。用一对直钳提起胸腺。小心地用一把剪刀取出覆盖心脏的胸腺。小心地通过左心室表面的左心室右下方的左心室下 5-0 单丝缝合线。应注意避免通过主冠状动脉的针头。缝合到位后，没有明显出血绑一个松散的结。向上和向前拉缝合线，将心脏从胸部中抬起。一旦心脏在胸部外抬起，快速将一个中等大的夹子涂抹到胸腔瓣上方的左中庭上。小心地拆下用于抬起心脏的缝合线。使用简单的中断图案，用 5-0 单丝缝合线开始关闭胸部。将连接到 10cc 注射器的 23 量胸管插入胸腔。然后继续关闭胸部。使用随附的 10cc 注射器，在插入的胸管附近抽出任何空气、血液和胸腔。然后在什么都出来的时候拉管子。使用简单的中断图案用 5-0 单丝缝合线关闭皮肤区域。取下手术窗帘。每公斤给予丁丙诺啡01毫克皮。关闭异氟。当老鼠开始醒来时，它开始挖掘它。手术后两周使用回声心动图确认左心房狭窄手术的成功。手术后两周的回声心动图确认左心房狭窄的有效性。左心室流入速度大于两米的大鼠在四室视图上测量，被认为已出现严重的狭窄。左心房狭窄手术后10周，LAS组的大鼠左心房扩大，肺充血，右心室压力过载，肺静脉流量增加，与假手术组的大鼠相比。此外，左心房狭窄组的右心室收缩压与假手术组相比显著增加。然而，左心室收缩压在两组保持不变。组织学检查长横截面染色弹性范吉森显示增加肺动脉和肺静脉中等疾病。左心房狭窄组与假手术组相比，肺静脉尺寸增加，在染色中作用的肌肉更平滑，表明肺动脉平滑肌细胞数量增加，左心房狭窄组与对照组的肺静脉数量增加。我希望你喜欢看这个视频。虽然手术是相对简单的护理时，应采取缝合到左心室，以避免击中主要冠状动脉。当抬起心脏将缝合线向上拉向大鼠头部时，使左中庭的运行结构可以清晰地可视化。通过将夹子应用于左中庭，夹子的紧绷应足以引起严重的左心房狭窄，但不太紧，以诱发急性肺水肿和右心力衰竭。感谢您观看此视频。祝你的实验好运

Research

JoVE Journal

Medicine

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