Name: implantation of hipsc-derived cardiac-muscle patches after myocardial injury in a guinea pig model
Uploaded: 2019-03-18T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation of hiPSC-derived Cardiac-muscle Patches after Myocardial Injury in a Guinea Pig Model at JoVE.com

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पशु प्रयोगशाला पशु संसाधनों के संस्थान द्वारा तैयार की है, और स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों द्वारा प्रकाशित प्रयोगशालाओं जानवरों के सिद्धांतों के लिए गाइड के अनुपालन में मानवीय देखभाल प्राप्त क...

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	<li>Kirklin, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seventh+INTERMACS+annual+report:+15,000+patients+and+counting.">Seventh INTERMACS annual report: 15,000 patients and counting.</a> The Journal of heart and lung transplantation: the official publication of the International Society for Heart Transplantation. 34, 1495-1504 (2015).</li><li>Soonpaa, M. H., Field, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survey+of+studies+examining+mammalian+cardiomyocyte+DNA+synthesis.">Survey of studies examining mammalian cardiomyocyte DNA synthesis.</a> Circulation research. 83, 15-26 (1998).</li><li>Shiba, Y., Hauch, K. D., Laflamme, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+applications+for+human+pluripotent+stem+cells.">Cardiac applications for human pluripotent stem cells.</a> Current pharmaceutical design. 15, 2791-2806 (2009).</li><li>Shiba, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+ES-cell-derived+cardiomyocytes+electrically+couple+and+suppress+arrhythmias+in+injured+hearts.">Human ES-cell-derived cardiomyocytes electrically couple and suppress arrhythmias in injured hearts.</a> Nature. 489, 322-325 (2012).</li><li>Chong, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic-stem-cell-derived+cardiomyocytes+regenerate+non-human+primate+hearts.">Human embryonic-stem-cell-derived cardiomyocytes regenerate non-human primate hearts.</a> Nature. 510, 273-277 (2014).</li><li>Kattman, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stage-specific+optimization+of+activin/nodal+and+BMP+signaling+promotes+cardiac+differentiation+of+mouse+and+human+pluripotent+stem+cell+lines.">Stage-specific optimization of activin/nodal and BMP signaling promotes cardiac differentiation of mouse and human pluripotent stem cell lines.</a> Cell stem cell. 8, 228-240 (2011).</li><li>Watanabe, T., Rautaharju, P. M., McDonald, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventricular+action+potentials,+ventricular+extracellular+potentials,+and+the+ECG+of+guinea+pig.">Ventricular action potentials, ventricular extracellular potentials, and the ECG of guinea pig.</a> Circulation research. 57, 362-373 (1985).</li><li>Weinberger, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+repair+in+guinea+pigs+with+human+engineered+heart+tissue+from+induced+pluripotent+stem+cells.">Cardiac repair in guinea pigs with human engineered heart tissue from induced pluripotent stem cells.</a> Science translational medicine. 8, 363ra148 (2016).</li><li>Shiba, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+Integration+of+Human+Embryonic+Stem+Cell-Derived+Cardiomyocytes+in+a+Guinea+Pig+Chronic+Infarct+Model.">Electrical Integration of Human Embryonic Stem Cell-Derived Cardiomyocytes in a Guinea Pig Chronic Infarct Model.</a> Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapy. 19, 368-381 (2014).</li><li>van Laake, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic+stem+cell-derived+cardiomyocytes+survive+and+mature+in+the+mouse+heart+and+transiently+improve+function+after+myocardial+infarction.">Human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes survive and mature in the mouse heart and transiently improve function after myocardial infarction.</a> Stem cell research. 1, 9-24 (2007).</li><li>Zimmermann, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineered+heart+tissue+grafts+improve+systolic+and+diastolic+function+in+infarcted+rat+hearts.">Engineered heart tissue grafts improve systolic and diastolic function in infarcted rat hearts.</a> Nature medicine. 12, 452-458 (2006).</li><li>Johns, T. N., Olson, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+myocardial+infarction.+I.+A+method+of+coronary+occlusion+in+small+animals.">Experimental myocardial infarction. I. A method of coronary occlusion in small animals.</a> Annals of surgery. 140, 675-682 (1954).</li><li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+a+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: a comparison with coronary artery ligation.</a> Heart and circulatory physiology. , H1291-H1300 (2005).</li></ol>

छोटे जानवर मॉडल की एक किस्म के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए उपलब्ध हैं कि कोशिका प्रत्यारोपण घायल दिलों पर प्रबल9,10,11. हम क्योंकि सभी छोटे जानवर मॉडल अपनी (इलेक्ट्रो) श?...

हमारे बुढ़ापे की आबादी में दिल की विफलता के साथ रोगियों की संख्या बढ़ रही है । अंत चरण दिल की विफलता के लिए, orthotopic हृदय प्रत्यारोपण केवल उपचारात्मक उपचार विकल्प है । हालांकि, विशेष रूप से यूरोपीय देशों में, वहां एक बढ़ती अंग दाता की कमी है । इसलिए, वैकल्पिक उपचार के विकल्प आवश्यक हैं । यांत्रिक संचार समर्थन में हाल की उपलब्धियों का वादा कर रहे हैं, लेकिन विशेष रूप से लंबे समय तक चलने में, खून बह रहा है, पंप घनास्त्रता और संक्रामक जटिलताओं1की तरह इसके दुष्प्रभाव द्वारा सीमित ।
वयस्क मानव हृदय की अंतर्जात उत्थान क्षमता अत्यंत सीमित है. इसलिए, हृदय पुनर्जनन चिकित्सा अंत चरण दिल की विफलता के रोगियों के लिए एक वैकल्पिक उपचार विकल्प बन सकता है2,3। स्टेम सेल आधारित सेल इंजेक्शन या ऊतक इंजीनियरिंग दृष्टिकोण सहित विभिंन तकनीकों3,4,5वर्णित किया गया है ।
मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (hipsc), के रूप में के रूप में अच्छी तरह से मानव भ्रूण स्टेम सेल (hesc) प्रभावी ढंग से अनायास मानव cardiomyocytes पिटाई6, जो हृदय पुनर्योजी के क्षेत्र में एक बड़ी उपलब्धि रहा है विभेदित जा सकता है चिकित्सा.
एक रोधगलन के बाद मायोकार्डियम की जगह और एक असफल दिल के समारोह में सुधार करने के लिए, cardiomyocytes के एक उपयुक्त संख्या के अस्तित्व और देशी दिल के साथ उनके यांत्रिक और विद्युत युग्मन आवश्यक है. मानव आईपीएस कोशिका व्युत्पंन cardiomyocytes के साथ कार्डिएक पुनर्योजी चिकित्सा की क्षमता की जांच करने के लिए, एक उपयुक्त अनुसंधान मॉडल की जरूरत है । आदर्श मॉडल लागत प्रभावी होना चाहिए और एक मानव की तरह शरीर विज्ञान और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी है । सूअर की तरह बड़े जानवर मॉडल देखने के उस बिंदु से आदर्श होगा, तथापि, उन प्रयोगों बहुत महंगा है और cardiomyocytes की बड़ी मात्रा में आदेश बाईं वेंट्रिकुलर पर प्रभाव देखने के लिए cardiomyocytes के एक प्रासंगिक संख्या को प्रतिस्थापित करने के लिए आवश्यक हो जाएगा एक सुअर रोधगलन मॉडल में समारोह ।
मानव कोशिका आधारित हृदय उत्थान के प्रति प्राथमिक जैविक प्रश्नों का उत्तर देने के लिए, जैसे, कोशिका उत्तरजीविता, वैस्कुराइजेशन, और विद्युत युग्मन, छोटे पशु मॉडल अधिक उपयुक्त हैं. उपलब्ध छोटे जानवर मॉडल से, गिनी पिग सबसे उपयोगी प्रजातियों, चूहों और चूहों की तुलना में है, के रूप में उनके इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी अधिक बारीकी से मनुष्यों में स्थिति7जैसा दिखता है । इस गिनी पिग मॉडल में, हम बाईं वेंट्रिकले के एक transmural cryoinjury प्रेरित । एक तीन आयामी के मायोकार्डियल रोधगलन आरोपण के प्रेरण के बाद एक सप्ताह, अनायास हिप्स-कोशिका व्युत्पंन cardiomyocyte पैच प्रदर्शन किया गया था । cardiomyocyte कोशिका अस्तित्व का मूल्यांकन किया गया था 28 दिन ऊतकीय परीक्षा द्वारा आरोपण के बाद ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:969px;" width="968">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Ventilator (VetFlo Dual Mode)</td>
			<td style="width:343px;">Kent Scientific</td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Forene</td>
			<td style="width:343px;">abbvie</td>
			<td style="width:159px;">1000009819</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Carprofen</td>
			<td style="width:343px;">Zoetis</td>
			<td style="width:159px;">256692</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Atropin</td>
			<td style="width:343px;">Braun</td>
			<td style="width:159px;">PZN 00648037</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Buprenorphin</td>
			<td style="width:343px;">Sigma</td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Metal stamp</td>
			<td style="width:343px;"></td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Electric soldering iron</td>
			<td style="width:343px;">Claytools</td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">3-0 prolene suture</td>
			<td style="width:343px;">Ethicon</td>
			<td style="width:159px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">4-0 prolene suture</td>
			<td style="width:343px;">Ethicon</td>
			<td style="width:159px;">662SLH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">5-0 prolene suture</td>
			<td style="width:343px;">Ethicon</td>
			<td style="width:159px;">8710H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">8-0 prolene suture</td>
			<td style="width:343px;">Ethicon</td>
			<td style="width:159px;">8841H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tungsten Carbide Scissor&#160;</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 14568-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Stainless sterilization Container</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 20890-51</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Graefe Forceps</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No.11652-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Extra fine Graefe Forceps</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No.11150-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 11022-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Halsted- Mosquito</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 13009-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Forceps</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No.13003-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Baby Mixter</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 13013-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Needle holder (Castroviejo with Tungsten Casbide Jaws)&#160;</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 12565-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Needle Holder (Halsey)</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 12501-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alm Retractor with Blumt Teeth</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 17008-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Spring Scissor</td>
			<td style="width:343px;">FST</td>
			<td>No. 15000-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Compress 5x5</td>
			<td style="width:343px;">Fink + Walter</td>
			<td style="width:159px;">PZN 08821417</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Venflon Pro Safety</td>
			<td style="width:343px;">Becton Dickinson</td>
			<td style="width:159px;">PZN11123964</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:301px;">Cautery High Temp 2&#34;</td>
			<td style="width:343px;">Bovie Medical Corporation</td>
			<td style="width:159px;">0100607151011055</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation of hipsc-derived cardiac-muscle patches after myocardial injury in a guinea pig model

वयस्क स्तनधारियों में दिल की सीमित उत्थान क्षमता के कारण, मायोकार्डियल रोधगलन के परिणामस्वरूप cardiomyocytes के एक अपरिवर्तनीय नुकसान में । दिल की मांसपेशियों की प्रासंगिक मात्रा का यह नुकसान दिल की विफलता के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । हृदय प्रत्यारोपण के अलावा, अंत चरण दिल की विफलता के लिए कोई रोगनाशक उपचार विकल्प नहीं है । अंग दाता की कमी के समय में अंग स्वतंत्र उपचार के तौर तरीकों की जरूरत होती है । वाम वेंट्रिकुलर असिस्ट डिवाइस एक होनहार थेरेपी विकल्प हैं, हालांकि, विशेष रूप से गंतव्य चिकित्सा के रूप में, स्ट्रोक की तरह अपने पक्ष प्रभाव, संक्रमण और bleedings द्वारा सीमित. हाल के वर्षों में, स्टेम सेल इंजेक्शन सहित कई कार्डिएक मरंमत रणनीतियों, कार्डियक progenitors या मायोकार्डियल ऊतक इंजीनियरिंग की जांच की गई है । सेल बायोलॉजी में हाल ही में सुधार मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल (iPSC) से व्युत्पंन cardiomyocytes की बड़ी मात्रा के भेदभाव के लिए अनुमति देते हैं । हृदय की मरंमत रणनीतियों में से एक वर्तमान में मूल्यांकन के तहत कृत्रिम हृदय ऊतक प्रत्यारोपण है । इंजीनियर दिल के ऊतकों (EHT) एक तीन आयामी विट्रो में cardiomyocyte नेटवर्क बनाया, मूल दिल के ऊतकों के कार्यात्मक गुणों के साथ है । हम EHT-hiPSC व्युत्पंन cardiomyocytes से पैच बनाया है । यहां हम एक गिनी पिग में बाईं वेंट्रिकुलर मायोकार्डीयल cryoinjury के प्रेरण के लिए एक प्रोटोकॉल मौजूद है, hiPSC के आरोपण के बाद बाईं वेंट्रिकुलर दीवार पर EHT व्युत्पंन ।

यह गिनी पिग मॉडल hiPSC व्युत्पंन EHT-पैच के आरोपण के बाद हृदय उत्थान की जांच करने के लिए एक उपयुक्त मॉडल है । यह पुनर्प्राप्य बड़ी transmural मायोकार्डियल चोटों की ओर जाता है । निशान आकार प्रोटोकॉल cryoinjury के बाद चार सप...

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Implantation of hiPSC-derived Cardiac-muscle Patches after Myocardial Injury in a Guinea Pig Model

यहां हम बाईं वेंट्रिकुलर cryoinjury के प्रेरण के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत एक कार्डिएक मांसपेशी पैच के आरोपण के बाद, एक गिनी पिग मॉडल में मानव आईपी सेल cardiomyocytes से व्युत्पंन ।

hiPSC के आरोपण-एक गिनी पिग मॉडल में मायोकार्डियल चोट के बाद हृदय-मांसपेशी पैच व्युत्पन्न

Due to the limited regeneration capacity of the heart in adult mammals, myocardial infarction results in an irreversible loss of cardiomyocytes. This loss ...

विधि का उद्देश्य एक छोटे से पशु क्रायोनफार्क्शन मॉडल में इंजीनियर दिल ऊतक प्रत्यारोपण के कार्यात्मक परिणामों का मूल्यांकन करना है। इस विधि का लाभ यह है कि यह स्थिर इंफेक्शन आकारों के साथ अपेक्षाकृत प्रजनन योग्य मायोकार्डियल इंफार्क्शन को शामिल करने की अनुमति देता है। अंगुली चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करने के बाद, एक ४० से ४२ डिग्री सेल्सियस वार्मिंग मंच पर रीढ़ की स्थिति में एनेस्थेटाइज्ड गिनी सुअर जगह है ।आंखों का मरहम लगाएं और शेव करें और छाती को डिपिलेट करें। उजागर त्वचा के लिए 25 डिग्री सेल्सियस अल्ट्रासाउंड ट्रांसड्यूसर जेल लागू करें और पूर्व-ऑपरेटिव बाएं वेंट्रिकुलर फ़ंक्शन की जांच करने के लिए बाएं वेंट्रिकल शीर्ष के समवर्ती दृश्य के साथ महाधमनी वाल्व के विमान में दाएं पैर से दाएं पैर की ओर दाएं गर्दन से बी मोड में दो आयामी पैरास्टेरल लंबी धुरी विचार प्राप्त करने के लिए छाती पर एक इकोकार्डियोग्राफी प्रणाली से ट्रांसड्यूसर रखें। फिर मध्य पेपिलरी स्तर पर एक छोटी धुरी बी मोड दृश्य प्राप्त करने के लिए ट्रांसड्यूसर 90 डिग्री चालू करें।अंतिम छवि प्राप्त होने के बाद, गिनी पिग को सर्जिकल टेबल पर स्थानांतरित करें और अंगों को एक प्रसार ईगल स्थिति में टेप करें। दो अनुक्रमिक आयोडीन आधारित और 80% इथेनॉल स्क्रब के साथ उजागर त्वचा को कीटाणुरहित करें और श्वासनली क्षेत्र में 1.5 सेंटीमीटर ऊर्ध्वाधर चीरा बनाएं। श्वासनली को कवर करने वाली मांसपेशियों को स्पष्ट रूप से विच्छेदन करें।जब श्वासनली देखा जा सकता है, तो 18 गेज IV कैनुला के साथ एयर ट्यूब को पंचर करें और कैनुला के लचीले हिस्से को श्वास नली के रूप में डालें। प्रक्रिया के दौरान निरंतर वेंटिलेशन के लिए श्वास नली को एक पशु श्वसन यंत्र से कनेक्ट करें और पांचवें इंटरकोस्टल अंतरिक्ष का पता लगाने के लिए पहले इंटरकोस्टल स्पेस से शुरू होने वाले रिब रिक्त स्थान को गिनें। गिनी पिग के बाईं ओर पांचवें इंटरकोस्टल स्पेस पर दो सेंटीमीटर क्षैतिज चीरा बनाएं और इंटरकोस्टल मांसपेशियों तक पहुंचने तक एक इलेक्ट्रोकोटेरी के साथ मांसपेशियों को विच्छेदन करने से पहले चमड़े के नीचे के ऊतकों को हटा दें।चिमटी और छोटी कैंची के साथ इंटरकोस्टल मांसपेशियों को धीरे-धीरे विच्छेदन करें जब तक कि प्ल्युरल स्पेस तक नहीं पहुंच जाता और बाएं फेफड़े की कल्पना की जा सकती है। पसलियों के बीच एक रिट्रैक्टर डालें और दिल का एक अच्छा दृश्य प्राप्त होने तक रिट्रैक्टर को ध्यान से खोलें। पूर्वकाल बाएं वेंट्रिकुलर दीवार के क्षेत्र में पेरिकार्डियम लगभग एक सेंटीमीटर खोलें और बाएं वेंट्रिकल की क्रायोइंजरी को प्रेरित करते समय फेफड़ों को नुकसान से बचाने के लिए बाएं फेफड़ों पर एक सेक रखें।इसके बाद, 30 सेकंड के लिए दिल की बाईं पूर्वकाल की दीवार पर जांच दबाने से पहले तीन मिनट के लिए तरल नाइट्रोजन में ०.५ सेंटीमीटर के क्रॉस-सेक्शनल व्यास के साथ एक क्षीण धातु स्टैंप की नोक को ठंडा करें । इसके बाद स्टांप को गर्म करने के लिए स्टांप के अंदर 200 डिग्री सेल्सियस इलेक्ट्रिक सोल्डरिंग आयरन रखें ताकि टिश्यू से मेटल को हटाया जा सके। तीसरे स्टांप आवेदन के बाद, इंटरकोस्टल स्पेस से रिट्रैक्टर को हटा दें और फेफड़ों के atelectasis से बचने के लिए अधिकतम दबाव के साथ फेफड़ों को फुलाने के लिए दो सेकंड के लिए वेंटिलेटर की बहिर्वाह ट्यूब को दबाएं।फिर दो 4-0 टांके के साथ पसलियों को बंद करें, पसलियों पर मांसपेशियों को 5-0 रनिंग सीवन और त्वचा के साथ 5-0 सीवन एकल टांके के साथ। श्वास नली को हटाने के बाद, एक 8-0 का उपयोग करें सीवन श्वासनली में पंचर साइट को बंद करने के लिए और तीन एकल सिलाई 5-0 टांके के साथ घाव को बंद करने के लिए। क्रायोइंजुरी के सात दिन बाद, टांके को हटा दें और बाएं पार्श्व पक्ष के निशान क्षेत्र में दो सेंटीमीटर क्षैतिज त्वचा चीरा बनाएं और अतिरिक्त प्ल्युरल आसंजन को धीरे-धीरे विच्छेदन करने के लिए इलेक्ट्रोक्यूटरी का उपयोग करें।ध्यान से कैंची के साथ प्ल्युरल स्पेस खोलें और दिल को बेनकाब करने के लिए रिब स्प्रेडर डालें। नेत्रहीन स्वस्थ आसपास के मायोकार्डियम की तुलना में अपने हल्के रंग से इंफार्क्शन के क्षेत्र की पहचान करें और इंफार्क्शन क्षेत्र पर एक इंजीनियर दिल ऊतक पैच रखें। दो 8-0 के साथ पैच सुरक्षित दिल के गैर-इनफार्टेड क्षेत्र में दोनों किनारों पर टांके और फेफड़ों के atelectasis से बचने के लिए दबाव के साथ फेफड़ों फुलाने।फिर इंटरकोस्टल अंतरिक्ष से रिट्रैक्टर को हटा दें और जानवर को प्रदर्शन के रूप में बंद करें। चार सप्ताह के बाद इंजीनियर दिल ऊतक प्रत्यारोपण, ट्रांसथोरेसिक इकोकार्डियोग्राफी प्रदर्शन के रूप में छोड़ दिया वेंट्रिकल समारोह ओवरटाइम में परिवर्तन का मूल्यांकन करने के लिए प्रदर्शन किया । क्रायोइंजी के चार सप्ताह बाद मेसन ट्राइक्रोम धुंधला औसतन बाएं वेंट्रिकुलर मायोकार्डियम के 25% से अधिक बड़े ट्रांसम्यूरल निशान का पता चलता है।डिस्ट्रोफिन स्टेनिंग बड़े मायोकार्डियल ग्राफ्ट को दर्शाता है जो मानव कु80 के लिए आंशिक रूप से फिर से मस्कुलर और धुंधला हो जाता है जो नवगठित मायोकार्डियम की मानव उत्पत्ति की पुष्टि करता है। प्रत्यारोपित इंजीनियर हृदय ऊतक की ट्रांसथोरेसिक इकोकार्डियोग्राफी निगरानी बाएं वेंट्रिकल रिजेक्शन अंश, आंशिक क्षेत्र छोटा करने, और बाएं वेंट्रिकुलर और डायस्टोलिक व्यास में कमी में सुधार का पता चलता है। इस तरह के पुनः ऑपरेशन में प्ल्युरल गुहा को सावधानीपूर्वक खोलना आवश्यक है क्योंकि छाती की दीवार और बाएं वेंट्रिकल के बीच आसंजन मौजूद हो सकता है और बाएं वेंट्रिकुलर मायोकार्डियम को घायल करने के लिए एक निश्चित जोखिम है।मानव इंजीनियर हृदय ऊतक के प्रत्यारोपण के बाद, बाएं वेंट्रिकुलर रिजेक्शन अंश में परिवर्तन के लिए निगरानी करने के लिए कई तरीकों का उपयोग किया जा सकता है। इकोकार्डियोग्राफी के अलावा, उन परिवर्तनों की निगरानी के लिए दबाव मात्रा छोरों का एक आक्रामक माप का उपयोग किया जा सकता है। यह विधि मानव इंजीनियर ऊतक प्रत्यारोपण के सभी पहलुओं की जांच करने की अनुमति देता है।कार्यात्मक परिणामों के साथ-साथ अतालता जैसे संभावित जोखिमों का मूल्यांकन इस छोटे पशु मॉडल में किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessment of Right Ventricular Structure and Function in Mouse Model of Pulmonary Artery Constriction by Transthoracic Echocardiography

Transthoracic इकोकार्डियोग्राफी द्वारा पल्मोनरी धमनी कसना के माउस मॉडल में सही निलय संरचना और समारोह का आकलन

Emerging clinical data support the notion that RV dysfunction is critical to the pathogenesis of cardiovascular disease and heart failure1-3. Moreover, ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

वाम पूर्वकाल अवरोही धमनी की ligation के माध्यम से myocardial ischemia-reperfusion चोट के एक murine मॉडल

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

एक perivascular दवा वितरण पैच का आरोपण के साथ और्विक धमनी वायर चोट की murine मॉडल

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

दवा प्रेरित गुर्दे रक्तसंचारप्रकरण रोग का जल्दी पता लगाने चूहे में Sonographic प्रौद्योगिकी का उपयोग

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

A Guide to Generating and Using hiPSC Derived NPCs for the Study of Neurological Diseases

मस्तिष्क संबंधी बीमारियों के अध्ययन के लिए उत्पन्न और का प्रयोग hiPSC व्युत्पन्न NPCs के लिए एक गाइड

Post-mortem studies of neurological diseases are not ideal for identifying the underlying causes of disease initiation, as many diseases include a long ...

Ultrasound Based Assessment of Coronary Artery Flow and Coronary Flow Reserve Using the Pressure Overload Model in Mice

चूहे में दबाव अधिभार मॉडल का उपयोग कर कोरोनरी धमनी फ्लो और कोरोनरी फ्लो रिजर्व के अल्ट्रासाउंड आधारित मूल्यांकन

Transthoracic Doppler echocardiography (TTDE) is a clinically useful, noninvasive tool for studying coronary artery flow velocity and coronary flow ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

तीव्र रोधगलन के एक सुअर के मॉडल में प्राथमिक परिणाम मूल्यांकन

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Cochlear Implantation in the Guinea Pig

गिनी पिग में कॉकलियर आरोपण

Cochlear implants are highly efficient devices that can restore hearing in subjects with profound hearing loss. Due to improved speech perception ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

चूहों में मायोकार्डियल इस्कीमिया रिपरफ्यूजन के बाद कोरोनरी फ्लो रिजर्व का मूल्यांकन

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...