Name: assaying for inorganic polyphosphate in bacteria
Uploaded: 2019-01-21T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assaying for Inorganic Polyphosphate in Bacteria at JoVE.com

Questo progetto era sostenuto dalla University of Alabama a Birmingham dipartimento di microbiologia avvio fondi e sovvenzioni NIH R35GM124590 (per MJG) e NIH sovvenzione R01AI121364 (FW).

1. purificare il lievito Exopolyphosphatase (ScPPX)
<ol><li>Trasformare il ceppo di sovraespressione di proteina di e. coli BL21 (DE3)31 con plasmide pScPPX26 di elettroporazione32 o trasformazione chimica33.</li>
	<li>Inoculare 1 L di brodo di Lisogenesi (LB) contenente 100 µ g ampicillina di-1 mL in un pallone da 2 L unbaffled con una singola colonia di BL21 (DE3) contenente pScPPX2 e incubi durante la...

Il protocollo descritto qui semplifica e accelera la quantificazione dei livelli di polipo in diversi batteri, con un tipico insieme di 24 campioni prendendo circa 1,5 h per elaborare completamente. Questo permette di screening rapido di campioni e analisi di librerie mutante e semplifica il esperimenti cinetici misura l'accumulo di polipo nel corso del tempo. Abbiamo dimostrato che il protocollo funziona in modo efficace sui rappresentanti di tre diversi phyla: proteobacteria, firmicutes e actinobacteria, che sono noti ...

Polifosfato inorganico (polipo) è un biopolimero lineare delle unità di fosfato phosphoanhydride-collegato che si trova in tutti i domini di vita1,2,3. In diversi batteri, polipo è essenziale per la risposta allo stress, motilità, formazione di biofilm, controllo del ciclo cellulare, antibiotico-resistenza e virulenza4,5,6,7,8 ,9,10,11. Studi del metabolismo di polipo in batteri quindi hanno il potenziale per produrre intuizioni fondamentali la capacità dei batteri di causare malattia e prosperano in ambienti diversi. In molti casi, tuttavia, i metodi disponibili per quantificare polipo in cellule batteriche sono un fattore limitante in questi studi.
Ci sono diversi metodi attualmente utilizzati per misurare i livelli di polipo in materiali biologici. Questi metodi implicano in genere due fasi distinte: estrazione di polipo e quantificare il polipo presente in tali estratti. L'attuale metodo gold standard, sviluppato per il lievito Saccharomyces cerevisiae da Bru e colleghi12, polipo estratti insieme a DNA e RNA usando fenolo e cloroformio, seguita dalla precipitazione dell'etanolo, il trattamento con desossiribonucleasi (DNasi) e ribonucleasi (RNasi) e la digestione del polyP purificato risultante con lo S. cerevisiae polipo-degradanti enzima exopolyphosphatase (ScPPX)13 a cedere gratis fosfato, che è poi quantificato utilizzando un analisi colorimetrica base verde di malachite. Questa procedura è altamente quantitativa ma alta intensità di lavoro, limitando il numero di campioni che possono essere elaborati in un singolo esperimento e non è ottimizzato per campioni batterici. Altri hanno segnalato estrazione polipo da una varietà di cellule e tessuti utilizzando perline ("glassmilk") di silice o silice membrana colonne6,14,15,16,17, 18. Questi metodi non estrarre in modo efficiente catena corta polipo (meno di 60 unità di fosfato)12,14,15, anche se questo è di meno preoccupazione per i batteri, che sono pensati generalmente per sintetizzare principalmente Polipo della lungo-catena3. Vecchi metodi di estrazione di polipo con acidi forti19,20 non più ampiamente sono usati, poiché il polyP è instabile in condizioni acide12.
Ci sono anche una varietà di metodi segnalati per quantificare il polyP. Tra i più comuni è 4 ′, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), una tintura fluorescente più tipicamente usata per macchiare il DNA. Complessi di DAPI-polipo hanno maxima di eccitazione e di emissione di fluorescenza diversi oltre DAPI-DNA complessi21,22, ma c'è una notevole interferenza da altri componenti cellulari, tra cui RNA, nucleotidi e inositolo fosfati12,15,16,23, riducendo la specificità e la sensibilità delle misurazioni di polipo effettuate utilizzando questo metodo. In alternativa, il polipo e adenosina difosfato (ADP) può essere convertiti in adenosina trifosfato (ATP) usando purificato Escherichia coli chinasi polipo (PPK) e l'ATP risultante quantificati tramite luciferasi14,17 ,18. Questo permette la rilevazione di piccole quantità di polipo, ma richiede due fasi di reazione enzimatica e luciferina e ADP molto puro, che sono i reagenti costosi. In particolare il digest polipo in fosfato libero6,12,13,24, che può essere rilevato utilizzando metodi più semplici, ma ScPPX è inibita da DNA e RNA12, ScPPX trattamento della dnasi e RNasi che necessita di polipo-contenenti estratti. PPK, né ScPPX sono disponibili in commercio, e purificazione di PPK è relativamente complesso25,26.
Polipo in lisati cellulari o estratti possa anche essere visualizzato su gel di poliacrilammide di DAPI27,28,29,30, un metodo che permette la valutazione della lunghezza della catena, ma è la macchiatura negativa scarsamente quantitativa e bassa velocità.
Ora segnaliamo un saggio di polipo veloce, poco costoso, media-velocità di trasmissione che permette la rapida quantificazione del polyP livelli in diverse specie batteriche. Questo metodo inizia con la lisi delle cellule batteriche a 95 ° C in 4m guanidina isotiocianato (GITC)14 per inattivare cellulare fosfatasi, seguite da un'estrazione della colonna membrana silice ottimizzata per un'elaborazione rapida di campioni multipli. Il polipo-contenere l'Estratto risultante viene poi digerito con un grande eccesso di ScPPX, eliminando la necessità per il trattamento della dnasi e RNasi. Includiamo un protocollo per la purificazione di affinità nichel semplice di quantità di mg di ScPPX. Infine, fosfato libero polipo-derivato è quantificato con un saggio colorimetrico semplice, sensibile, basati su acido ascorbico24 e normalizzato a proteine cellulari totali. Questo metodo semplifica la misurazione del polipo in cellule batteriche, e dimostriamo l'utilizzo con specie rappresentative di batteri gram-negativi, batteri Gram-positivi e micobatteri.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>E. coli BL21(DE3)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>69450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plasmid pScPPX2</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>112877</td>
			<td>available to academic and other non-profit institutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB broth</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1427-2</td>
			<td>E. coli growth medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ampicillin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP176025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isopropyl &#946;-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG)</td>
			<td>Gold Biotechnology</td>
			<td>I2481C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES buffer</td>
			<td>Gold Biotechnology</td>
			<td>H-400-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>potassium hydroxide (KOH)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P250500</td>
			<td>for adjusting the pH of HEPES-buffered solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S27110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>imidazole</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>O3196500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lysozyme</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAJ6070106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>magnesium chloride (MgCl2)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP214-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pierce Universal Nuclease</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>PI88700</td>
			<td>Benzonase (Sigma-Aldrich cat. # E1014) is an acceptable substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Model 120 Sonic Dismembrator</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB-120</td>
			<td>other cell lysis methods (e.g. French Press) can also be effective</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL HiTrap chelating HP column</td>
			<td>GE Life Sciences</td>
			<td>17040901</td>
			<td>any nickel-affinity chromatography column or resin could be substituted</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nickel(II) sulfate hexahydrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC415611000</td>
			<td>for charging HiTrap column</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.8 &#181;m pore size cellulose acetate syringe filters</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-302-168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bradford reagent</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>5000205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris buffer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrum&#160;Spectra/Por 4 RC Dialysis Membrane Tubing 12,000 to 14,000 Dalton MWCO</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>08-667B</td>
			<td>other dialysis membranes with MWCO &#60; 30,000 Da should also work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hydrochloric acid (HCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A144-212</td>
			<td>for adjusting the pH of Tris-buffered solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>potassium chloride (KCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P217500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glycerol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x MOPS medium mixture</td>
			<td>Teknova</td>
			<td>M2101</td>
			<td>E. coli growth medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glucose</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>D161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>monobasic potassium phosphate (KH2PO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP362-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dibasic potassium phosphate (K2HPO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP363-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dehydrated yeast extract</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>DF0886-17-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tryptone</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1421-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>magnesium sulfate heptahydrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M63-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>manganese sulfate monohydrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M113-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>guanidine isothiocyanate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP221-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bovine serum albumin (protease-free)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP9703100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear flat bottom 96-well plates</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M0812-100EA</td>
			<td>any clear 96-well plate will work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tecan M1000 Infinite plate reader</td>
			<td>Tecan, Inc.</td>
			<td>not applicable</td>
			<td>any plate reader capable of measuring absorbance at 595 and 882 nm will work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>04-355-451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silica membrane spin columns</td>
			<td>Epoch Life Science</td>
			<td>1910-050/250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP120500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL microfuge tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9580154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonium acetate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A637-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>antimony potassium tartrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAA1088922</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4 N sulfuric acid (H2SO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SA818-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonium heptamolybdate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAA1376630</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ascorbic acid</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC401471000</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assaying for inorganic polyphosphate in bacteria

Polifosfato inorganico (polipo) è un polimero biologico trovato in cellule da tutti i domini della vita ed è necessaria per la virulenza e la risposta allo stress in molti batteri. Ci sono una varietà di metodi per quantificare polyP nei materiali biologici, molti dei quali sono laboriosi o insensibile, limitando la loro utilità. Presentiamo qui un metodo semplificato per la quantificazione del polipo nei batteri, usando un'estrazione della colonna membrana silice ottimizzata per un'elaborazione rapida di più campioni, digestione del polipo con il polipo specifiche exopolyphosphatase ScPPX e rilevamento della risultante fosfato libero con un saggio colorimetrico basato su acido ascorbico sensibile. Questa procedura è semplice, poco costoso e permette la quantificazione affidabile polipo in diverse specie batteriche. Vi presentiamo la quantificazione di polipo rappresentativo dal batterio gram-negativo (Escherichia coli), il batterio gram-positivo dell'acido lattico (Lactobacillus reuteri) e la specie micobatterica (Mycobacterium smegmatis). Abbiamo anche un semplice protocollo per purificazione di affinità del nichel di quantità di mg di ScPPX, che non è attualmente disponibile in commercio.

I passaggi chiave del protocollo sono diagrammed in forma semplificata nella Figura 1.
Per illustrare l'utilizzo di questo protocollo con i batteri gram-negativi, il selvaggio-tipo e. coli MG165539 era cresciuto fino a Mid-registro fase nel terreno ricco di LB a 37 ° C con agitazione (200 giri), quindi sciacquati e incubati per altre 2 h in morpholinopropanesulfonat...

Watch this Scientific Journal Video about Assaying for Inorganic Polyphosphate in Bacteria at JoVE.com

Assaying for Inorganic Polyphosphate in Bacteria

Descriviamo un metodo semplice per rapida quantificazione di polifosfato inorganico in diversi batteri, tra cui specie micobatteriche, Gram-positivi e Gram-negative.

Analizzando per polifosfato inorganico nei batteri

Inorganic polyphosphate (polyP) is a biological polymer found in cells from all domains of life, and is required for virulence and stress response in many ...

Il polifosfato inorganico è un elemento chiave nella risposta allo stress batterico. Ma i metodi più vecchi per estrarre e misurare la poliP nei batteri sono complessi e ad alta intensità di lavoro. Il vantaggio principale di questa tecnica è che consente una quantificazione rapida, sensibile ed economica dei livelli di poliP in una varietà di diverse specie batteriche.La procedura sarà dimostrata da Arya Pokhrel, studentessa universitaria del mio laboratorio. Per iniziare, far crescere i batteri lactobacillus reuteri nel mezzo di induzione enzimatico malico senza cistina a 37 gradi celsius durante la notte senza tremare. Centrifugare un millilitri di questa coltura notturna in un tubo di microcentrifugo da 1,5 millilitri per raccogliere abbastanza cellule da produrre un totale di 50-100 microgrammi di proteine cellulari.Rimuovere completamente il supernatante dal pellet cellulare, quindi aggiungere 250 microlitri GITC lysis buffer e resuspend mediante vortice. Incubare a 95 gradi celsius per 10 minuti per liscire le cellule. Conservare il lysate a 80 gradi celsius.In primo luogo, preparare gli standard BSA contenenti zero, 1, 2 e 4 milligrammi per millilitro di BSA nel buffer di lisi GITC. Aliquota cinque microlitri di lysati a celle scongelate e ben miscelati e cinque microlitri di standard BSA per separare i pozzi in una piastra chiara da 96 pozza. Aggiungere 195 microlitri di reagente di Bradford ad ogni pozzo e misurare l'assorbanza a 595 nanometri in un lettore di lastre.Calcola la quantità di proteine in ogni pozzo rispetto alla curva standard BSA come delineato nel manoscritto. Per determinare la quantità totale di proteine in ogni campione, moltiplicare il valore risultante per 05. Per iniziare l'estrazione di polifosfati, aggiungere 250 microlitri di etanolo al 95% a ciascun campione di GITC e vortice da mescolare.Pipettare questa miscela in una colonna di spin a membrana di silice posta in un tubo di centrifuga da 1,5 millilitri. Centrifuga a 16.100 g per 30 secondi. Scartare il flusso attraverso e aggiungere 750 microlitri della miscela tris-cloridrato, cloruro di sodio, EDTA ed etanolo.Centrifuga a 16.100 g per 30 secondi. Scartare il flusso attraverso e centrifugare la colonna di spin a 16, 100 g per due minuti. Posizionare la colonna in un tubo di microfugo pulito da 1,5 millilitri.Aggiungere 150 microlitri di pH 50 millimolare otto triscloridrato e incubare a temperatura ambiente per cinque minuti. Elute polyP centrifugando a 8.000 g per due minuti. Iniziare preparando standard contenenti zero, cinque, 50 o 200 fosfato di potassio micromolare in 50 pH millimolare otto triscloridrato.Aliquota 100 microlitri di ogni norma fosfato e 100 microlitri di campioni di poliP estratti in pozzi separati di una piastra chiara da 96 pozza. Preparare una miscela master contenente, per campione, 30 microlitri di tampone di reazione ScPPX 5X, 19 microlitri d'acqua e un microlitri di ScPPX purificato. Aggiungere 50 microlitri del mix principale a ciascun pozzo della piastra del pozzo 96.E incubare per 15 minuti a 37 gradi celsius. Il giorno del rilevamento, preparare un nuovo stock di soluzione di rilevamento mescolando a 9,12 millilitri di base della soluzione di rilevamento con 88 millilitri di un acido ascorbico molare e lasciare che venga a temperatura ambiente prima dell'uso. Aggiungere 50 microlitri di soluzione di rilevamento a ciascun campione e standard nella piastra del pozzo 96.Per consentire lo sviluppo del colore, incubare la piastra a temperatura ambiente per circa due minuti. Utilizzare un lettore di lastre per misurare l'assorbanza a 882 nanometri e calcolare la concentrazione fosfato di ciascun campione rispetto alla curva standard del fosfato di potassio. Quindi convertire le concentrazioni di fosfati in nanomoli di fosfato derivato dal poliP in ogni lisato cellulare e normalizzare il contenuto di poliP cellulare in proteine cellulari totali, come descritto nel manoscritto.Il tipo selvatico E.coli, un batterio gram-negativo, coltivato in LB non produceva poliP. Ma se coltivato in MOPS, ha prodotto circa 192 nanomoli poliP per milligrammo di proteine totali. Un mutante delta ppk E.coli, privo di poliP chinasi, non produceva poliP in entrambi i mezzi.Un mutante delta ppx, che manca di esopolifosfatasi, produceva approssimativamente la stessa quantità di poliP del tipo selvaggio. E il mutante delta phoB, difettoso nel trasporto dei fosfati, produceva molto meno poliP rispetto al tipo selvaggio. L.reuteri di tipo selvatico, un batterio gram-positivo coltivato durante la notte nel mezzo MEIC, ha accumulato circa 51 nanomoli poliP per milligrammo di proteine totali.Un mutante nullo L.reuteri ppk1 privo di poliP chinasi conteneva meno della metà di questa quantità. Questa presenza di poliP nel mutante nullo ppk1 è probabilmente dovuta al fatto che L.reuteri contiene una seconda poliP chinasi. Mycobacterium smegmatis strain SMR five, coltivato nel mezzo Hartmans-de Bont in assenza di etanolo accumulato circa 141 nanomoli poliP per milligrammo di proteine totali.Mentre il trattamento con etanolo ha comportato un triplice aumento. Seguendo questa procedura, l'elettroforesi del gel di acrilammide può essere eseguita per valutare le differenze nella lunghezza della catena poliP. Durante il tentativo di questa procedura, evitare errori comuni.Ricordarsi di evitare di ottenere bolle nei pozzi della piastra del microtitoro e fare attenzione a trasferire i campioni nel tubo appropriato quando si passa dalla colonna al tubo di microfugo. Non dimenticare che lavorare con GITC e acidi forti può essere pericoloso e che durante l'esecuzione di questa procedura dovrebbero sempre essere indossati dispositivi di protezione adeguati.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Multiplex Detection of Bacteria in Complex Clinical and Environmental Samples using Oligonucleotide-coupled Fluorescent Microspheres

Rilevazione multiplex di batteri in campioni clinici complessi ed Ambientali con oligonucleotidi accoppiati microsfere fluorescenti

Bacterial vaginosis (BV) is a recurring polymicrobial syndrome that is characterized by a change in the "normal" microbiota from Lactobacillus-dominated ...

Ricerca

Immunologia e infezioni

Detection of Bacteria Using Fluorogenic DNAzymes

Rilevazione di batteri utilizzando DNAzimi fluorogenici

Outbreaks linked to food-borne and hospital-acquired pathogens account for millions of deaths and hospitalizations as well as colossal economic losses ...

Tractable Mammalian Cell Infections with Protozoan-primed Bacteria

Trattabili infezioni cellula di mammifero con protozoo-innescate batteri

Many intracellular bacterial pathogens use freshwater protozoans as a natural reservoir for proliferation in the environment. Legionella pneumophila, the ...

Measuring Growth and Gene Expression Dynamics of Tumor-Targeted S. Typhimurium Bacteria

Measuring Growth and Gene Expression Dynamics of Tumor-Targeted S. Typhimurium Bacteria

Crescita di misura e di espressione genica Dinamica di tumore-mirata<em&gt; S. Typhimurium</em&gt; Batteri

The goal of these experiments is to generate quantitative time-course data on the growth and gene expression dynamics of attenuated S. typhimurium ...

Fluorescence Microscopy Methods for Determining the Viability of Bacteria in Association with Mammalian Cells

Microscopia a fluorescenza metodi per determinare la vitalità di batteri in associazione con cellule di mammifero

Central to the field of bacterial pathogenesis is the ability to define if and how microbes survive after exposure to eukaryotic cells. Current protocols ...

Fluorescence in situ Hybridizations (FISH) for the Localization of Viruses and Endosymbiotic Bacteria in Plant and Insect Tissues

Fluorescence in situ Hybridizations FISH for the Localization of Viruses and Endosymbiotic Bacteria in Plant and Insect Tissues

Fluorescenza<em&gt; In situ</em&gt; Ibridazioni (FISH) per la localizzazione di virus e batteri endosimbiontica a Plant e Insetti tessuti

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a name given to a variety of techniques commonly used for visualizing gene transcripts in eukaryotic cells ...

Following in Real Time the Impact of Pneumococcal Virulence Factors in an Acute Mouse Pneumonia Model Using Bioluminescent Bacteria

A seguito in tempo reale l&#39;impatto dei fattori di virulenza pneumococco in un acuto mouse Polmonite modello tramite batteri bioluminescenti

Pneumonia is one of the major health care problems in developing and industrialized countries and is associated with considerable morbidity and mortality. ...

Rapid Identification of Gram Negative Bacteria from Blood Culture Broth Using MALDI-TOF Mass Spectrometry

Rapida identificazione dei batteri Gram-negativi dal sangue brodo di coltura Uso MALDI-TOF

An important role of the clinical microbiology laboratory is to provide rapid identification of bacteria causing bloodstream infection. Traditional ...

A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically

A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically

Un riferimento brodo di microdiluizione per Dalbavancina<em&gt; In Vitro</em&gt; Test della Sensibilità di batteri che crescono aerobico

Antimicrobial susceptibility testing (AST) is performed to assess the in vitro activity of antimicrobial agents against various bacteria. The AST results, ...

Biomimetic Materials to Characterize Bacteria-host Interactions

I materiali biomimetici per caratterizzare le interazioni batteri-ospite

Bacterial attachment to host cells is one of the earliest events during bacterial colonization of host tissues and thus a key step during infection. The ...