Name: assaying for inorganic polyphosphate in bacteria
Uploaded: 2019-01-21T15:00:00
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이 프로젝트는 알라바 마의 대학 버밍엄과 미생물학의 시동 자금 및 NIH 부여 R35GM124590 (MJG), 및 NIH 부여 R01AI121364 (FW)에 지원 됩니다.

1. 정화 효 모 Exopolyphosphatase (ScPPX)
<ol><li>대장균 단백질 overexpression 스트레인 플라스 미드 pScPPX26 BL21(DE3)31 electroporation32 또는33화학 변환 의해 변환.</li>
	<li>Lysogeny 국물 (파운드) 100 µ g mL-1 암 피 실린 포함 하는 pScPPX2 BL21(DE3)의 단일 식민지와 2 L unbaffled 플라스 크에 포함 된의 1 L를 접종 하 고 하룻밤 없이 떨고, ...

여기에 설명 된 프로토콜 간소화 되 고 완전히 처리 약 1.5 h 복용 24 샘플의 전형적인 세트와 함께 다양 한 박테리아에서 폴립 레벨의 정량화를 가속 한다. 이 샘플의 신속한 심사 및 돌연변이 라이브러리의 분석을 허용 하 고 운동 실험 시간이 지남에 폴립의 축적을 측정을 단순화 합니다. 우리는 프로토콜 대표자 3 다른 문의에 효과적으로 작동 증명: proteobacteria firmicutes, 그리고 actinobacteria, 그들의...

무기 polyphosphate (폴립)은 인생1,2,3의 모든 도메인에 있는 phosphoanhydride 연결 인산 염 단위의 선형 biopolymer 이다. 다양 한 박테리아에서 폴립 스트레스 반응, 운동 성, biofilm 형성, 세포 주기 제어, 항생제 내성, 및 독성4,,56,7,8이 필수적입니다. ,9,,1011. 박테리아 물질 대사 폴립의 연구는 따라서 질병의 원인이 다양 한 환경에서 번 창 하는 박테리아의 기능에 대 한 근본적인 통찰력을 얻을 수가 있다. 그러나 많은 경우에,, 세균성 세포 측정 폴립에 대 한 사용할 수 있는 방법 이러한 연구에 제한 요인이 있습니다.
현재 생물학 물자에서 폴립 수준을 측정 하는 데 사용 하는 여러 방법이 있다. 이러한 메서드는 일반적으로 두 가지 단계를 포함: 폴립을 추출 하 고는 폴립 측정 그 추출 물에 존재. Bru와 동료12, DNA 및 RNA 페 놀을 사용 하 여 추출 폴립 효 모 Saccharomyces cerevisiae 에 대 한 개발 현재 골드 표준 방법 및 클로 프롬, 에탄올 강수량, 치료 뒤 deoxyribonuclease (DNase) 및 ribonuclease (RNase), 그리고는 S. cerevisiae 폴립 저하 효소 exopolyphosphatase (ScPPX)13 를 사용 하 여 계량 다음은 자유로운 인산 염, 결과 순화 된 폴립의 소화는 말라 카이트 그린 기반 색도계 분석 결과입니다. 이 절차는 매우 양적 하지만 단일 실험에서 처리할 수 있는 세균성 샘플에 대 한 최적화 되지 않은 샘플의 수를 제한 하는 노동 집약. 다른 다양 한 세포와 실리 카 비즈 (이 하 "glassmilk") 또는 실리 카 막 열6,14,15,,1617를 사용 하 여 조직에서에서 폴립을 추출 보고 있다 18. 이 방법을 할 효율적으로 추출 하지 짧은 체인 폴립 (60 인산 염 단위)12,,1415, 비록이 일반적으로 생각 되 고 주로 합성 박테리아에 대 한 더 적은 관심 긴 체인 용 종3. 강한 산19,20 를 사용 하 여 폴립 추출의 이전 방법 더 이상 널리 사용 폴립12산 성 조건 안정 되어 있기 때문.
또한 측정 폴립에 대 한 보고 방법의 다양 한이 있다. 가장 일반적인 가운데 4, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), 더 일반적으로 DNA를 얼룩 사용 형광 성 염료 이다. DAPI 폴립 단지 DAPI DNA 단지21,22, 보다 다른 형광 여기 및 방출 맥시 마 하지만 상당한 간섭 RNA, 뉴클레오티드, 이노 시 톨 등 다른 세포질 분 대에서 인산 염12,15,,1623, 특이성 및이 메서드를 사용 하 여 만든 폴립 측정의 감도 감소. 폴립과 아데노신 diphosphate (ADP)를 아데노신 3 인산 염 (ATP) 사용 하 여 순화 된 대장균 으로 변환할 수 또는 폴립 키 (ppk 모델)와 luciferase14,17 사용 하 여 계량 결과 ATP ,18. 이 매우 적은 양의 폴립, 탐지를 허용 하지만 두 효소 반응 단계와 소와 매우 순수한 ADP, 비싼 시 약입니다. ScPPX로 특별히 다이제스트 폴립 무료 인산 염6,12,13,24, 간단 방법, 하지만 ScPPX을 사용 하 여 감지 될 수 있는 DNA와 RNA12, 저해 포함 하는 폴립의 필요로 DNase 및 RNase 처리를 추출합니다. Ppk 모델도 ScPPX 상업적으로 사용할 수 있으며 ppk 권총 정화는 상대적으로 복잡 한25,26.
있으 나 세포 lysates 또는 추출에 폴립 DAPI 부정적인 얼룩27,,2829,30, 체인 길이의 평가 허용지 않습니다 하지만 하는 방법에 의해 polyacrylamide 젤에도 구상 될 수 있다 낮은 처리량 그리고 저조한 양적.
우리는 이제 다양 한 세균성 종의 수준 폴립의 급속 한 정량화를 허용 하는 빠르고, 저렴 한, 중간 처리량 폴립 분석 결과 보고 합니다. 이 메서드는 셀룰러 가수분해, 여러 샘플의 신속한 처리를 위해 최적화 된 실리 카 막 열 추출 다음 비활성화를 4m guanidine isothiocyanate (GITC)14 에서 95 ° C에서 세균성 세포를 lysing 여 시작 합니다. 결과 폴립 포함 된 추출 다음 DNase 및 RNase 처리를 위한 필요를 제거 하는 ScPPX의 큰 과잉을 가진 소화 된다. 우리는 ScPPX 밀리 그램 양의 간단 니켈 친 화력 정화에 대 한 프로토콜을 포함합니다. 마지막으로, 무료 인산 폴립 파생 된 간단 하 고, 민감한, ascorbic 산 기반 색도계 분석 결과24 정량 이며 총 세포질 단백질에 정규화. 이 메서드 세균성 세포에 폴립의 측정을 간소화 하 고 우리 그람 음성 세균, 그람 양성 세균 및 mycobacteria의 대표 종으로 그것의 사용을 보여 줍니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>E. coli BL21(DE3)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>69450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plasmid pScPPX2</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>112877</td>
			<td>available to academic and other non-profit institutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB broth</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1427-2</td>
			<td>E. coli growth medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ampicillin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP176025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isopropyl &#946;-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG)</td>
			<td>Gold Biotechnology</td>
			<td>I2481C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES buffer</td>
			<td>Gold Biotechnology</td>
			<td>H-400-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>potassium hydroxide (KOH)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P250500</td>
			<td>for adjusting the pH of HEPES-buffered solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride (NaCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S27110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>imidazole</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>O3196500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lysozyme</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAJ6070106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>magnesium chloride (MgCl2)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP214-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pierce Universal Nuclease</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>PI88700</td>
			<td>Benzonase (Sigma-Aldrich cat. # E1014) is an acceptable substitute</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Model 120 Sonic Dismembrator</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB-120</td>
			<td>other cell lysis methods (e.g. French Press) can also be effective</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL HiTrap chelating HP column</td>
			<td>GE Life Sciences</td>
			<td>17040901</td>
			<td>any nickel-affinity chromatography column or resin could be substituted</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>nickel(II) sulfate hexahydrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC415611000</td>
			<td>for charging HiTrap column</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.8 &#181;m pore size cellulose acetate syringe filters</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-302-168</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bradford reagent</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>5000205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris buffer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1525</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrum&#160;Spectra/Por 4 RC Dialysis Membrane Tubing 12,000 to 14,000 Dalton MWCO</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>08-667B</td>
			<td>other dialysis membranes with MWCO &#60; 30,000 Da should also work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hydrochloric acid (HCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A144-212</td>
			<td>for adjusting the pH of Tris-buffered solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>potassium chloride (KCl)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>P217500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glycerol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2294</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10x MOPS medium mixture</td>
			<td>Teknova</td>
			<td>M2101</td>
			<td>E. coli growth medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glucose</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>D161</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>monobasic potassium phosphate (KH2PO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP362-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dibasic potassium phosphate (K2HPO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP363-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dehydrated yeast extract</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>DF0886-17-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tryptone</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1421-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>magnesium sulfate heptahydrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M63-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>manganese sulfate monohydrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M113-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>guanidine isothiocyanate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP221-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bovine serum albumin (protease-free)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP9703100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clear flat bottom 96-well plates</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M0812-100EA</td>
			<td>any clear 96-well plate will work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tecan M1000 Infinite plate reader</td>
			<td>Tecan, Inc.</td>
			<td>not applicable</td>
			<td>any plate reader capable of measuring absorbance at 595 and 882 nm will work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ethanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>04-355-451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silica membrane spin columns</td>
			<td>Epoch Life Science</td>
			<td>1910-050/250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP120500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL microfuge tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC9580154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonium acetate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A637-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>antimony potassium tartrate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAA1088922</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4 N sulfuric acid (H2SO4)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SA818-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ammonium heptamolybdate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAA1376630</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ascorbic acid</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AC401471000</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assaying for inorganic polyphosphate in bacteria

무기 polyphosphate (폴립) 셀 생활의 모든 도메인에 있는 생물학 고분자 이며 독성 및 많은 박테리아에 스트레스 반응. 많은 노동 집약 하거나 구분 하지 않습니다, 그들의 유용성을 제한 하는 생물 자료에 측량 용 종에 대 한 방법의 다양 한이 있다. 선물이 여기 박테리아, 부 량 폴립에 대 한 효율적인된 방안을 여러 샘플, 폴립 전용 exopolyphosphatase ScPPX와 폴립의 소화 및 감지의 신속한 처리를 위해 최적화 된 실리 카 막 열 추출 사용 하는 결과 민감한 ascorbic 산 기반 색도계 분석 결과 함께 무료 인산 염. 이 절차 간단, 저렴, 이며 다양 한 세균성 종에 신뢰할 수 있는 폴립 정량화를 수 있습니다. 그램 음성 박테리아 (대장균), 그람 양성 젖 산 박테리아 (유산 균 reuteri), 및 mycobacterial 종 (진 균 smegmatis)에서 대표적인 폴립 정량화 선물이. 우리는 또한 어떤은 현재 상업적으로 사용할 수 밀리 그램 양의 ScPPX, 니켈 친 화력 정화에 대 한 간단한 프로토콜 포함.

프로토콜의 주요 단계는 diagrammed 그림 1에서 단순화 된 형태에서.
그램 음성 박테리아, 야생-타입 E. 콜라 이 프로토콜의 사용을 MG165539 파운드에서 37 ° C (200 rpm) 떨고 풍부한 매체에 중간 로그 단계로 성장, 다음 씻어 서 되었고에 추가 2 h에 대 한 인 큐베이 팅 morpholinopropanesulfonate ...

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Assaying for Inorganic Polyphosphate in Bacteria

그람 양성, 그람 음성, mycobacterial 종 등 다양 한 박테리아에 무기 polyphosphate의 급속 한 정량화를 위한 간단한 방법을 설명 합니다.

무기 Polyphosphate 박테리아에 대 한 시 금

Inorganic polyphosphate (polyP) is a biological polymer found in cells from all domains of life, and is required for virulence and stress response in many ...

무기 성포염은 세균성 스트레스 반응의 핵심 요소입니다. 그러나 박테리아에서 폴리P를 추출하고 측정하는 오래된 방법은 복잡하고 노동 집약적입니다. 이 기술의 주요 장점은 다양한 다른 세균성 종에서 폴리P 수준의 빠르고 민감하며 저렴한 정량화를 허용한다는 것입니다.절차는 아리아 Pokhrel에 의해 입증될 것입니다, 내 실험실에서 학부 학생. 시작하려면, 동요없이 하룻밤 37섭씨에서 cystine없이 영양 효소 유도 매체에서 유산 균 재자궁 을 성장. 원심분리기 1밀리리터는 1.5 밀리리터 미세원심분리기 튜브에서 이 야간 배양의 밀리리터로, 세포 단백질의 총 50~100마이크로그램을 산출하기에 충분한 세포를 수확합니다.셀 펠릿에서 상체를 완전히 제거한 다음 250개의 마이크로리터 GITC 리시스 버퍼를 추가하고 소용돌이에 의해 다시 중단합니다. 세포를 lyse 하는 10 분 동안 섭씨 95도에서 배양. lysate를 섭씨 80도에 보관하십시오.먼저 GITC 리시스 버퍼에서 BSA 밀리리터당 0, 1, 2 및 4 밀리그램을 포함하는 BSA 표준을 준비합니다. Aliquot 5 마이크로 리터의 해동, 잘 혼합 된 세포 lysates 및 BSA 표준의 5 마이크로 리터 는 명확한 96 웰 플레이트에 우물을 분리합니다. 각 웰에 브래드포드 시약 195 마이크로리터를 추가하고 플레이트 리더의 595 나노미터에서 흡광도를 측정합니다.원고에 설명된 바와 같이 BSA 표준 곡선과 비교하여 각 우물의 단백질 양을 계산합니다. 각 샘플에서 단백질의 총 양을 결정하기 위해 결과 값을 05로 곱합니다. 폴리인산염 추출을 시작하려면 각 GITC 용해 시료에 95%에탄올의 250마이크로리터를 추가하고 소용돌이를 혼합합니다.파이펫이 혼합물은 1.5 밀리리터 원심분리기 튜브에 배치된 실리카 멤브레인 스핀 컬럼에 배치됩니다. 원심분리기 는 16, 30초 동안 100g. 흐름을 버리고 삼염산염, 염화나트륨, EDTA 및 에탄올 혼합물의 750 마이크로리터를 추가합니다.원심분리기는 16, 100 gs에서 30초 동안. 흐름을 버리고 스핀 컬럼을 16, 100 gs에서 2분 동안 원심분리합니다. 깨끗한 1.5 밀리리터 마이크로퍼지 튜브에 컬럼을 놓습니다.50 밀리머 pH 8 개의 트리스 염산염의 150 마이크로 리터를 추가하고 실온에서 5 분 동안 배양하십시오. Elute 폴리P는 2 분 동안 8, 000g에서 원심 분리에 의해. 먼저 50 밀리머 pH 8 개의 트리스 염산염에서 0, 5, 50 또는 200 마이크로 몰러 칼륨 칼륨을 포함하는 표준을 준비하여 시작합니다.각 인산염 표준의 100 마이크로리터와 추출된 폴리P 샘플 100마이크로리터를 투명한 96웰 플레이트의 별도 우물로 추출했습니다. 샘플당 5X ScPPX 반응 버퍼 30마이크로리터, 19마이크로리터 물, 정제된 ScPPX의 마이크로리터 1개를 함유한 마스터 믹스를 준비합니다.그리고 섭씨 37도에서 15 분 동안 배양하십시오. 검출 당일, 검출 용액 의 9.12 밀리리터에 1개의 어금니 아스코르브산 88밀리리터를 혼합하여 검출 용액의 신선한 작업 재고를 준비하고 사용하기 전에 실온에 도달할 수 있도록 합니다. 96 웰 플레이트의 각 샘플 및 표준에 50 마이크로리터의 검출 솔루션을 추가합니다.색상 개발을 허용하려면 실온에서 플레이트를 약 2분 동안 배양합니다. 플레이트 판독기를 사용하여 882 나노미터에서 흡광도를 측정하고 칼륨 인산염 표준 곡선에 비해 각 시료의 인산염 농도를 계산합니다. 그런 다음 각 세포에서 폴리P 유래 인산염의 나노몰로 인산염 농도를 변환하고 원고에 설명된 바와 같이 세포 폴리P 함량을 총 세포 단백질로 정상화한다.LB에서 자란 그람 음성 박테리아인 야생형 대장균은 폴리P를 생산하지 않았습니다. 그러나 MOPS에서 재배 될 때, 총 단백질의 밀리그램 당 약 192 나노 몰 폴리P를 생산. 폴리P 키나아제가 부족한 대장균 델타 ppk 돌연변이는 어느 매체에서도 폴리P를 생산하지 않았다.외후포인파아제가 부족한 델타 ppx 돌연변이체는 야생형과 거의 동일한 양의 폴리P를 생산했습니다. 그리고 인산염 수송에 결함이 있는 델타 포B 돌연변이체는 야생형보다 훨씬 적은 폴리P를 생산했다. 야생형 L.reuteri는 MEIC 배지에서 하룻밤 사이에 재배된 그램 양성 박테리아로, 총 단백질의 밀리그램당 약 51나노몰 폴리P를 축적하였다.폴리P 키나아제가 부족한 L.reuteri ppk1 null 돌연변이에는 이 금액의 절반 미만이 포함되어 있습니다. ppk1 null 돌연변이체에서 폴리P의 이러한 존재는 아마도 두 번째 폴리P 키나아제를 포함하는 L.reuteri 때문일 것이다. 진균 세균염 균주 SMR 5, 총 단백질의 밀리그램 당 약 141 나노몰폴리P 축적에 에탄올의 부재에 하트만드 본트 배지에서 재배.에탄올 치료는 세 배 증가를 초래했다. 이 절차에 따라 아크릴아미드 젤 전기포광은 폴리P 사슬 길이의 차이를 평가하기 위해 수행될 수 있다. 이 절차를 시도하는 동안 일반적인 실수를 피하십시오.마이크로티터 플레이트 우물에서 거품이 발생하지 않도록 하고 컬럼에서 미세후포 튜브로 전환할 때 샘플을 적절한 튜브로 옮기는 것을 피하십시오. GITC와 강한 산으로 작업하는 것은 위험할 수 있으며, 적절한 보호 장비는 항상 이 절차를 수행하는 동안 착용해야 한다는 것을 잊지 마십시오.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Multiplex Detection of Bacteria in Complex Clinical and Environmental Samples using Oligonucleotide-coupled Fluorescent Microspheres

Oligonucleotide - 결합 형광등 Microspheres를 사용하여 복잡한 임상 및 환경 샘플에서 박테리아의 멀티 플렉스 감지

Bacterial vaginosis (BV) is a recurring polymicrobial syndrome that is characterized by a change in the "normal" microbiota from Lactobacillus-dominated ...

연구

면역학 및 감염병학

Detection of Bacteria Using Fluorogenic DNAzymes

형광 DNAzymes을 사용하여 박테리아의 탐지

Outbreaks linked to food-borne and hospital-acquired pathogens account for millions of deaths and hospitalizations as well as colossal economic losses ...

Tractable Mammalian Cell Infections with Protozoan-primed Bacteria

Protozoan - 중이오 박테리아와 취급하기 쉬운 포유류의 세포 감염

Many intracellular bacterial pathogens use freshwater protozoans as a natural reservoir for proliferation in the environment. Legionella pneumophila, the ...

Measuring Growth and Gene Expression Dynamics of Tumor-Targeted S. Typhimurium Bacteria

Measuring Growth and Gene Expression Dynamics of Tumor-Targeted S. Typhimurium Bacteria

종양 표적의 측정 성장과 유전자 발현 역학<em&gt; S. 티피 뮤 리움</em&gt; 박테리아

The goal of these experiments is to generate quantitative time-course data on the growth and gene expression dynamics of attenuated S. typhimurium ...

Fluorescence Microscopy Methods for Determining the Viability of Bacteria in Association with Mammalian Cells

포유 동물 세포와 관련있는 박테리아의 생존을 확인하는 방법에 대한 형광 현미경 방법

Central to the field of bacterial pathogenesis is the ability to define if and how microbes survive after exposure to eukaryotic cells. Current protocols ...

Fluorescence in situ Hybridizations (FISH) for the Localization of Viruses and Endosymbiotic Bacteria in Plant and Insect Tissues

Fluorescence in situ Hybridizations FISH for the Localization of Viruses and Endosymbiotic Bacteria in Plant and Insect Tissues

형광<em&gt; 현장에서</em바이러스 및 식물과 곤충 조직에서 Endosymbiotic 박테리아의 지역화를위한&gt; 혼성화 (FISH)

Fluorescence in situ hybridization (FISH) is a name given to a variety of techniques commonly used for visualizing gene transcripts in eukaryotic cells ...

Following in Real Time the Impact of Pneumococcal Virulence Factors in an Acute Mouse Pneumonia Model Using Bioluminescent Bacteria

생물 발광 박테리아를 사용하여 실시간으로 급성 폐렴 마우스 모델에서 폐렴 구균 독성 요인의 영향에 따라

Pneumonia is one of the major health care problems in developing and industrialized countries and is associated with considerable morbidity and mortality. ...

Rapid Identification of Gram Negative Bacteria from Blood Culture Broth Using MALDI-TOF Mass Spectrometry

MALDI-TOF 질량 분석기를 사용하여 혈액 배양액에서 그람 음성 박테리아의 빠른 확인

An important role of the clinical microbiology laboratory is to provide rapid identification of bacteria causing bloodstream infection. Traditional ...

A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically

A Reference Broth Microdilution Method for Dalbavancin In Vitro Susceptibility Testing of Bacteria that Grow Aerobically

Dalbavancin에 대한 참조 국물 Microdilution 방법<em&gt; 체외</em호기성 박테리아의 성장&gt; 감수성 테스트

Antimicrobial susceptibility testing (AST) is performed to assess the in vitro activity of antimicrobial agents against various bacteria. The AST results, ...

Biomimetic Materials to Characterize Bacteria-host Interactions

박테리아 - 호스트 상호 작용의 특성을 생체 모방 재료

Bacterial attachment to host cells is one of the earliest events during bacterial colonization of host tissues and thus a key step during infection. The ...