Name: probing the structure and dynamics of nucleosomes using atomic force microscopy imaging
Uploaded: 2019-01-31T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Probing The Structure And Dynamics Of Nucleosomes Using Atomic Force Microscopy Imaging at JoVE.com

作者贡献: yll 和 msd 设计了该项目;msd 组装核糖体。msd 和 zs 进行了 afm 实验和数据分析。所有作者都撰写和编辑了手稿。

1. 单核细胞的连续稀释组装
<ol><li>生成和纯化包含一个离中心的 wiom 601 核糖体定位序列的大约 400 bp dna 基板。55 注: 为了限制二核苷酸的不需要的形成, 定位序列两侧的每个 "手臂" 不应超过 ~ 150 bp。<ol>
<li>使用质粒 pgeem3z-601 与设计的引物一起, 利用 pcr 扩增底粒 dna。对于这里使用的具有122和 154 bp 臂长度的 423 bp 基板, 使用正向 (-catgattatagtatacc-3 ' ') 和反向 (5 '-acagcatgattactacattact...

上述协议相当简单, 并提供了高度可重现的结果, 尽管可以强调几个重要问题。功能化的 aps-mica 是获得可靠和可重复的结果的关键基板。aps-mica 的高稳定性是该基板的重要特性之一, 它允许用户提前准备成像基板以供使用, 可在制备后至少两周内使用。59,61然而, 如果将其用于安装在金属皮球上的云母, 表面可能会被胶的蒸汽损坏。因此, 建议按照协议中的...

在真核细胞中, dna 高度凝聚并组织成染色体。1染色体中 dna 组织的第一级是核糖体的组合, 其中 147 bp 的 dna 紧紧地包裹在一个组蛋白八分体核上。2,3核糖体颗粒聚集在一个长的 dna 分子上, 形成一个染色质阵列, 然后组织起来, 直到形成一个高度紧凑的染色体单元。4染色质的分解提供了基因转录和基因组复制等关键细胞过程所需的免费 dna, 这表明染色质是一个高度动态的系统。5,6,7了解 dna 在不同染色质水平上的动态特性对于阐明分子水平上的遗传过程至关重要, 因为在分子水平上, 错误可能导致细胞死亡或癌症等疾病的发展。8非常重要的染色质性质是核糖体的动力学。9,10,11,12这些粒子的高稳定性使其能够通过晶体学技术进行结构表征。2这些研究缺乏的是核糖体的动态细节, 如 dna 从组蛋白核解包的机制;转录和复制过程所需的动态路径。7.,9,13,14,15,16此外, 被称为重塑因子的特殊蛋白质已被证明有助于核糖体颗粒的分解17;然而, 核糖体的内在动力学是这一过程中的关键因素, 有助于整个拆卸过程。14,16,18,19
单分子荧光技术, 如单分子荧光19、20、21、光学捕获 (推子)13、18、22、23和 afm10,14,15,16,24,25,26在了解核糖体动力学方面发挥了重要作用。在这些方法中, afm 受益于几个独特而有吸引力的功能。afm 允许人们对单个核糖体以及较长的阵列27进行可视化和表征.从 afm 图像中可以测量到组蛋白核周围的 dna 长度等核糖体结构的重要特征; 一个参数, 是核成体解包动力学的表征的核心。过去的 afm 研究表明, 核糖体是高度动态的系统, dna 可以自发地从组蛋白核14中展开。当成像在水溶液14、26、29中进行时, afm 在延时模式下操作, 直接将 dna 从核糖体中解包出来。
高速延时 afm (hs-afm) 仪器的出现使得在毫秒时间尺度14、15、24的时间尺度上可视化核糖体展开过程成为可能。最近 hs-afm 16,30研究的丝粒特异性核糖体揭示了几个新的特点的核糖体相比, 规范类型。中心核细胞组成的丝粒, 染色体的一小部分对染色体分离至关重要 31。与块状染色质中的典型核糖体不同, 丝粒核糖体的组蛋白核心包含 cenp-a组蛋白, 而不是组蛋白 h332,33。由于这种组蛋白取代, dna 包裹在丝粒核糖体中的是 ~ 120 bp, 而不是规范核糖体的 ~ 147 bp;这种差异可能导致着丝粒和规范核糖体数组34的不同形态, 这表明与块状染色体相比, 丝粒染色质经历了更高的动力学。在 hs-afm16中,30项研究所显示的新动力学说明了这种单分子技术为直接可视化其结构和动态特性提供了独特的机会。核糖体。本文最后将简要讨论和说明这些特点的例子。这一进展是由于开发了新的核糖体 afm 成像方案以及对现有方法的修改。这里描述的协议的目标是使这些令人兴奋的进展, 在单分子 afm 核糖体研究的任何人谁想要利用这些技术, 在他们的染色质调查。所描述的许多技术适用于核糖体研究以外的问题, 可用于研究其他感兴趣的蛋白质和 dna 系统。这些应用的几个例子可以在出版物35、36、37、38、39、40、41、 42、43、44、45、46、47、48、49 和 afm研究的前景各种生物分子系统在评论29,50,51, 53,54给出了。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1229px;" width="1229">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Plasmid pGEM3Z-601</td>
			<td style="width:327px;">Addgene, Cambridge, MA</td>
			<td style="width:119px;">26656</td>
			<td style="width:449px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">PCR Primers</td>
			<td style="width:327px;">IDT, Coralville, IA</td>
			<td style="width:119px;">Custom Order</td>
			<td>(FP) 5&#39;- CAGTGAATTGTAATACGACTC-3&#39; (RP) 5&#39;-ACAGCTATGACCATGATTAC-3&#39;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">DreamTaq polymerase</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFischer Scientific, Waltham, MA</td>
			<td style="width:119px;">EP0701</td>
			<td>Catalog number for 200 units</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">PCR purification kit</td>
			<td style="width:327px;">Qiagen, Hilden, Germany&#160;</td>
			<td style="width:119px;">28104</td>
			<td>Catalog number for 50 units</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Tris base</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:119px;">10708976001</td>
			<td>Catalog number for 250 g</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:335px;">EDTA</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFischer Scientific, Waltham, MA</td>
			<td>15576028</td>
			<td>Catalog number for 500 g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">(CENP-A/H4)2, recombinant human</td>
			<td style="width:327px;">EpiCypher, Durham, NC</td>
			<td style="width:119px;">16-0010</td>
			<td>Catalog number for 50 ug</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">H2A/H2B, recombinant human</td>
			<td style="width:327px;">EpiCypher, Durham, NC</td>
			<td style="width:119px;">15-0311</td>
			<td>Catalog number for 50 ug</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">H3 Octamer, recombinant human</td>
			<td style="width:327px;">EpiCypher, Durham, NC</td>
			<td style="width:119px;">16-0001</td>
			<td>Catalog number for 50 ug</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:335px;">Slide-A-Lyzer MINI Dialysis Device Kit, 10K MWCO, 0.1 mL</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFischer Scientific, Waltham, MA</td>
			<td style="width:119px;">69574</td>
			<td>Catalog number for 10 devices</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Sodium Chloride</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:119px;">S9888-500G</td>
			<td>Catalog number for 500 mg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Amicon Ultra-0.5&#160;mL Centrifugal Filters&#160;</td>
			<td style="width:327px;">Millipore-sigma, Burlington, MO</td>
			<td style="width:119px;">UFC501008</td>
			<td>Catalog number for 8 devices</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">HCl</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td>258148-25ML</td>
			<td>Catalog number for 25 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Tricine</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td>T0377-25G</td>
			<td>Catalog number for 25 g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">SDS</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:119px;">11667289001</td>
			<td>Catalog number for 1 kg</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Ammonium Persulfate (AmmPS)&#160;</td>
			<td style="width:327px;">Bio-Rad, Hercules, CA</td>
			<td style="width:119px;">1610700</td>
			<td>Catalog number for 10 g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">30% Acrylamide/Bis Solution, 37.5:1</td>
			<td style="width:327px;">Bio-Rad, Hercules, CA</td>
			<td style="width:119px;">1610158</td>
			<td>Catalog number for 500 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">TEMED</td>
			<td style="width:327px;">Bio-Rad, Hercules, CA</td>
			<td style="width:119px;">1610800</td>
			<td>Catalog number for 5 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">4x Laemmli protein sample buffer for SDS-PAGE</td>
			<td style="width:327px;">Bio-Rad, Hercules, CA</td>
			<td style="width:119px;">1610747</td>
			<td>Catalog number for 10 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">2-ME</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:119px;">M6250-10ML</td>
			<td>Catalog number for 10 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">ageRuler Prestained Protein Ladder&#160;</td>
			<td style="width:327px;">ThermoFischer Scientific, Waltham, MA</td>
			<td style="width:119px;">26616</td>
			<td>Catalog number for 500 uL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Bio-Safe&#8482; Coomassie Stain</td>
			<td style="width:327px;">Bio-Rad, Hercules, CA</td>
			<td style="width:119px;">1610786</td>
			<td>Catalog number for 1 L</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Nonwoven cleanroom wipes: TX604 TechniCloth&#160;</td>
			<td style="width:327px;">TexWipe, Kernersvile, NC</td>
			<td style="width:119px;">TX604</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Muscovite Block Mica</td>
			<td style="width:327px;">AshevilleMica, Newport News, VA</td>
			<td style="width:119px;">Grade-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Aminopropyl silatrane (APS)</td>
			<td style="width:327px;">Synthesized as described in 22</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">HEPES</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:119px;">H4034-25G</td>
			<td>Catalog number for 25 g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Scotch Tape</td>
			<td style="width:327px;">Scotch-3M, St. Paul, MN</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">TESPA-V2 afm probe (for static imaging)</td>
			<td style="width:327px;">Bruker AFM Probes, Camarillo, CA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:335px;">MSNL-10 afm probe (for standard time-lapse imaing)</td>
			<td style="width:327px;">Bruker AFM Probes, Camarillo, CA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Aron Alpha Industrial Krazy Glue</td>
			<td style="width:327px;">Toagosei America, West Jefferson, OH</td>
			<td style="width:119px;">AA480</td>
			<td>Catalog number for 2 g tube</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">MgCl2</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:119px;">M8266-100G</td>
			<td>Catalog number for 100 g</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">Millex-GP Filter, 0.22&#160;&#181;m</td>
			<td style="width:327px;">Sigma-Aldrich, St. Louis, MO</td>
			<td style="width:119px;">SLGP05010</td>
			<td>Catalog number for 10 devices</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">BL-AC10DS-A2 afm probe (for HS-AFM)</td>
			<td style="width:327px;">Olympus, Japan</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:335px;">Compound FG-3020C-20&#160;</td>
			<td style="width:327px;">FluoroTechnology Co., Ltd., Kagiya, Kasugai, Aichi, Japan&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:335px;">Compound FS-1010S135-0.5&#160;</td>
			<td style="width:327px;">FluoroTechnology Co., Ltd., Kagiya, Kasugai, Aichi, Japan&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:335px;">MultiMode Atomic Force Microscope</td>
			<td style="width:327px;">Bruker-Nano/Veeco, Santa Barbara, CA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:335px;">High-Speed Time-Lapse Atomic Force Microsocopy</td>
			<td style="width:327px;">Toshio Ando, Nano-Life Science Institute, Kanazawa University, Kakuma-machi, Kanazawa, Japan</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

probing the structure and dynamics of nucleosomes using atomic force microscopy imaging

染色质是一个长链核糖体亚基, 是一个动态系统, 允许 dna 复制和转录等关键过程发生在真核细胞中。核糖体的动力学提供了通过复制和转录机制获得 dna 的机会, 并对染色质功能背后的分子机制做出了重要贡献。单分子研究, 如原子力显微镜 (afm) 成像, 极大地促进了我们目前对核糖体结构和动力学作用的理解。目前的协议描述了使高分辨率 afm 成像技术能够研究核糖体的结构和动态特性的步骤。该协议由获得的 fom 数据说明了集中核细胞的 h3 组蛋白被对应的丝粒蛋白 a (cenp-a) 所取代。该协议从使用连续稀释方法组装单核苷酸体开始。用氨基丙基硅膜 (aps-mica) 功能化制备云母基板, 用于核糖体成像, 对于所描述的核糖体的原子力显微镜可视化至关重要, 并提供了制备底物的程序。沉积在 aps-mica 表面的核细胞首先使用静态 afm 进行成像, 该原子力法捕获核糖体群的快照。通过对这些图像的分析, 可以测量包裹在核糖体上的 dna 大小等参数, 这一过程也是详细的。描述了液体中的延时 afm 成像过程, 描述了高速延时 afm, 它可以捕获每秒多个核糖体动力学帧。最后, 描述和说明了核糖体动力学的分析, 使动态过程的定量表征。

首次为原子力显微镜成像实验使用连续稀释组装方法制备了单核细胞 (图 1)。然后使用不连续的 sds-page 检查制备的核糖体 (图 2)。云母表面是使用 aps 进行功能化的, 它在表面捕获核糖体, 同时保持光滑的背景, 以实现高分辨率成像 (图 3)。核细胞沉积在 aps-mica 上, 并随后使用静态 afm 成像进行了成像。作为对组装和沉积的控制, 利用...

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Probing The Structure And Dynamics Of Nucleosomes Using Atomic Force Microscopy Imaging

在这里, 我们提出了一个协议, 以表征核糖体粒子在单分子水平上使用静态和延时原子力显微镜 (afm) 成像技术。所描述的表面功能化方法允许在纳米尺度上以高分辨率捕获核糖体的结构和动力学。

原子力显微镜成像在核细胞结构和动力学研究中的应用

Chromatin, which is a long chain of nucleosome subunits, is a dynamic system that allows for such critical processes as DNA replication and transcription ...

该协议利用AFM的所有主要特性，不具有其他单分子技术。因此，我们能够在纳米尺度上解析核体结构。重要的是，在生理条件下直接对核糖体进行可视化。使用我们的AFM技术，我们最近揭示了中分核体的独特特性，这些特性可以在整个百分位体的功能上发挥作用。显示的方法目前在我们的实验室中应用，以研究与淀粉样体聚合体形成相关的蛋白质的自组装。这些蛋白质聚集物引发阿尔茨海默氏和帕金森氏症等破坏性疾病的发展。简单的制备方法也适用于其他蛋白质-DNA复合物，包括大型系统，如DNA复制机制。虽然需要一些修改。为了使用静态和延时原子力显微镜来描述单个分子水平的核体粒子，首先进行纯化、组装和验证原子体，如随附的文本协议所述。接下来，为静态 AFM 成像准备云母表面。为此，首先在去维化水中准备一个五十毫摩尔的 APS 库存溶液。将溶液的一毫升等分在摄氏四度，直到需要。从库存溶液中，通过溶解 15 毫升蒸馏脱压水中 50 微摩尔 APS 库存中的 50 微升来准备用于云母改性的工作 APS 解决方案。混合溶液，然后用溶液填充一个蛋黄酱。接下来，从高品质的云母片中切一个三厘米的云母条。检查该件在对角线放置在 cuvette 中时是否适合合。然后，云母的切割层，直到两侧都新鲜切割，片薄至0.1毫米。立即将云母片放入 APS 填充的 cuvette 中，并孵育云母 30 分钟。将云母片转移到装满蒸馏去维水的水杯中，浸泡30秒。然后，使用 argon 完全干燥 APS 云母条的两侧。将双面胶带涂抹在几个磁性球上，并将其放在侧面。然后，将 APS 云母基板切割为一厘米一厘米的正方形，然后用干净的培养皿盖住它们。接下来，使用含有10毫摩尔血脂和4毫摩尔氯化镁的0.22微米过滤缓冲液，在PH为7.5的PH下，对组装的核糖体进行三次稀释。为了限制核糖体的损失，在低最终浓度时，在 APS 云母沉积之前，应一次进行一次稀释。将每个核糖体样本的5至10微升放在一个PS云母片的中心，让它们孵育两分钟。然后，用两到三毫升的蒸馏去维化水轻轻冲洗样品，以去除缓冲液分量。在浅流下干燥沉积的样品。首先，在 AFM 设置的尖端支架上安装一个尖端。然后，将第一个样品安装在 AFM 阶段，小心不要接触样品表面。将激光定位在悬臂上，直到其总和达到最大值，并调整垂直和横向偏转值以接近零。然后，调整 AFM 探头以查找其谐振频率，调整驱动器振幅，将图像大小设置为 100 x 100 纳米。设置后，单击接合按钮开始使用方法。方法完成后，逐渐优化振幅设定点，直到样品表面清晰可见。然后，将扫描大小增加 1 微米 1 微米，将分辨率提高至 512 微米（512 像素）。最后，单击捕获按钮开始图像采集。使用玻璃棒扫描仪胶水将玻璃棒连接到 AFM 扫描仪阶段。让其干燥至少 10 分钟。同时，通过从较大的云母片中冲压0.1毫米厚、直径为1.5毫米的圆形云母片。使用高速 AFM 云母玻璃棒胶将这种云母片连接到高速 AFM 上的玻璃棒上，并允许它在干燥时至少保持 10 分钟不变。然后，使用压力敏感胶带从云母上切割层，直到在胶带上看到良好的切割层。接下来，在99微升蒸馏脱水中稀释一个微升50毫摩尔的 APS 库存，以制造 500 微摩尔 APS 溶液。将溶液的2.5微升沉积在刚切割的云母表面，使表面功能化30分钟。孵育后，使用蒸馏的去维水冲洗云母几次，使用三微升冲洗。将无纺布抹布放在云母边缘，在每次冲洗后完全清除水。最后冲洗后，将三升微升蒸馏除臭水放在表面上，让它至少坐五分钟，以去除任何非具体装订的 APS。接下来，将探头放在高速 AFM 支架中，将支架定位在 AFM 舞台上，尖端朝上。使用 100 微升蒸馏脱压水冲洗支架，然后冲洗两个 100 微升的 0.22 微米过滤核体成像缓冲液。冲洗完成后，在腔室中填充 100 微升的核体成像缓冲液，将尖端淹没。调整悬臂位置，直到被激光击中。然后，使用过滤的核体成像缓冲液冲洗 APS 云母五次，每次冲洗使用四微升。将核糖体组装存量的一微升稀释成250微升的过滤核体成像缓冲液，最终核糖体浓度为一纳米摩尔。将这种稀释剂的2.5微升沉积在表面上，让它坐两分钟。用四微升核体成像缓冲液冲洗表面两次，以避免过度拥挤。最后冲洗后，将表面覆盖在成像缓冲液中。将扫描仪和样品放在尖端支架的顶部，使样品朝下。要开始该方法，请使用自动接近函数，其设定点振幅接近自由振荡振幅。调整设定点，直到表面被很好地跟踪。然后，将图像区域设置为 150 到 150 纳米到 200 微克 200 纳米，每个成像帧的数据采集速率约为 300 毫秒。作为装配和沉积的控制，使用静态AFM准备和成像H3单核体。此图像提供了核糖体群的快照，因为它在沉积前的片刻存在，证实核糖体已成功组装。随着H3控制组装的成功，提出了方法，其次应用于CENP-A核糖体的研究。该样品的静态 AFM 成像显示其组装是成功的。从静态AFM图像中可以描述单核体的高度和转弯数。自由DNA臂和自由DNA臂的长度之间的角度都用于确定单个核糖体中DNA转数。相比之下，核子体的时间推移AFM成像可用于可视化核子体的整体自发解包行为。随着核体转数的减少，也观察到核体核心体积的相应减少。除了常规时间推移成像外，高速时差 AFM 还可用于探测使用标准时差成像错过的更复杂的核体动力学。这种技术能够长期捕获动力学，对于在1200帧中捕获的CENP-A核体核心的远距离迁移的可视化至关重要。这项技术对于捕获CENP-A核细胞核从一个DNA基质到另一个基质的罕见转移也至关重要。快速的图像捕获速率使此动态事件的可视化成为可能，因为它只需要几个帧完成。在广泛的染色质领域有一组重要问题，涉及胶质组蛋白的作用和色谱动力学的组蛋白放大。所有这些问题都可以使用我们的技术来回答。

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Exosomes and other extracellular vesicles (EVs) are molecular complexes consisting of a lipid membrane vesicle, its surface decoration by membrane ...

Visualizing Surface T-Cell Receptor Dynamics Four-Dimensionally Using Lattice Light-Sheet Microscopy

使用莱迪思光片显微镜可视化表面 T-Cell 受体动力学四维

The signaling and function of a cell are dictated by the dynamic structures and interactions of its surface receptors. To truly understand the ...

Characterizing Individual Protein Aggregates by Infrared Nanospectroscopy and Atomic Force Microscopy

通过红外纳米光谱和原子力显微镜对单个蛋白质聚合进行特征化

The phenomenon of protein misfolding and aggregation results in the formation of highly heterogeneous protein aggregates, which are associated with ...

Production of Dynein and Kinesin Motor Ensembles on DNA Origami Nanostructures for Single Molecule Observation

生产用于单分子观察的DNA折纸纳米结构的Dynein和Kinesin电机组合

Cytoskeletal motors are responsible for a wide variety of functions in eukaryotic cells, including mitosis, cargo transport, cellular motility, and ...

Visualizing Diffusional Dynamics of Gold Nanorods on Cell Membrane using Single Nanoparticle Darkfield Microscopy

使用单纳米粒子暗场显微镜可视化细胞膜上金纳米棒的扩散动力学

Analyzing the diffusional dynamics of nanoparticles on cell membrane plays a significant role in better understanding the cellular uptake process and ...