Name: detection of endotoxin in nano-formulations using limulus amoebocyte lysate (lal) assays
Uploaded: 2019-01-30T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate LAL Assays at JoVE.com

अध्ययन राष्ट्रीय कैंसर संस्थान, राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थानों, अनुबंध HHSN261200800001E के तहत से संघीय कोष द्वारा समर्थित किया गया । इस प्रकाशन की सामग्री जरूरी विचार या स्वास्थ्य और मानव सेवा विभाग की नीतियों को प्रतिबिंबित नहीं करता है, न ही व्यापार के नाम का उल्लेख करता है, वाणिज्यिक उत्पादों, या अमेरिकी सरकार द्वारा समर्थन मतलब संगठनों ।

1. Nanoparticle नमूनों की तैयारी
<ol><li>लाल ग्रेड के पानी में स्टडी सैंपल तैयार करें ।</li>
	<li>यदि नमूना पीएच 6-8 रेंज के बाहर है, पायरोजेन मुक्त सोडियम हीड्राकसीड या हाइड्रोक्लोरिक एसिड का उपयोग करके पीएच समायोजित करें...

<ol>
	<li>Perkins, D. J., Patel, M. C., Blanco, J. C., Vogel, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epigenetic+Mechanisms+Governing+Innate+Inflammatory+Responses.">Epigenetic Mechanisms Governing Innate Inflammatory Responses.</a> Journal of Interferon &amp; Cytokine Research. 36 (7), 454-461 (2016).</li><li>Vogel, S. N., Awomoyi, A. A., Rallabhandi, P., Medvedev, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+TLR4+signaling+that+lead+to+increased+susceptibility+to+infection+in+humans:+an+overview.">Mutations in TLR4 signaling that lead to increased susceptibility to infection in humans: an overview.</a> Journal of Endotoxin Research. 11 (6), 333-339 (2005).</li><li>Dobrovolskaia, M. A., Vogel, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll+receptors,+CD14,+and+macrophage+activation+and+deactivation+by+LPS.">Toll receptors, CD14, and macrophage activation and deactivation by LPS.</a> Microbes and Infection. 4 (9), 903-914 (2002).</li><li>US Pharmacopeia. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bacterial Endotoxins Test. , (2011).</li><li>FDA, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guidance for Industry: Pyrogen and Endotoxins Testing: Questions and Answers. , (2012).</li><li>FDA, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Endotoxin Testing Recommendations for Single-Use Intraocular Ophthalmic Devices. , (2015).</li><li>Fennrich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+than+70+years+of+pyrogen+detection:+Current+state+and+future+perspectives.">More than 70 years of pyrogen detection: Current state and future perspectives.</a> Alternatives to Laboratory Animals. 44 (3), 239-253 (2016).</li><li>Kumar, M. S., Ghosh, S., Nayak, S., Das, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+biosensor+based+diagnosis+of+urinary+tract+infection.">Recent advances in biosensor based diagnosis of urinary tract infection.</a> Biosensors and Bioelectronics. 80, 497-510 (2016).</li><li>Solano, G., Gomez, A., Leon, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+endotoxins+in+equine-derived+snake+antivenoms:+Comparison+of+the+USP+pyrogen+test+and+the+Limulus+Amoebocyte+Lysate+assay+(LAL).">Assessing endotoxins in equine-derived snake antivenoms: Comparison of the USP pyrogen test and the Limulus Amoebocyte Lysate assay (LAL).</a> Toxicon. , 13-18 (2015).</li><li>Akbar John, B., Kamaruzzaman, B. Y., Jalal, K. C. A., Zaleha, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TAL+-+a+source+of+bacterial+endotoxin+detector+in+liquid+biological+samples.">TAL - a source of bacterial endotoxin detector in liquid biological samples.</a> International Food Research Journal. 19 (2), 423-425 (2012).</li><li>Fujita, Y., Tokunaga, T., Kataoka, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saline+and+buffers+minimize+the+action+of+interfering+factors+in+the+bacterial+endotoxins+test.">Saline and buffers minimize the action of interfering factors in the bacterial endotoxins test.</a> Analytical Biochemistry. 409 (1), 46-53 (2011).</li><li>Dobrovolskaia, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-clinical+immunotoxicity+studies+of+nanotechnology-formulated+drugs:+Challenges,+considerations+and+strategy.">Pre-clinical immunotoxicity studies of nanotechnology-formulated drugs: Challenges, considerations and strategy.</a> Journal of Controlled Release. 220 (Pt B), 571-583 (2015).</li><li>Dobrovolskaia, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ambiguities+in+applying+traditional+Limulus+amebocyte+lysate+tests+to+quantify+endotoxin+in+nanoparticle+formulations.">Ambiguities in applying traditional Limulus amebocyte lysate tests to quantify endotoxin in nanoparticle formulations.</a> Nanomedicine (London). 5 (4), 555-562 (2010).</li><li>Dobrovolskaia, M. A., Neun, B. W., Clogston, J. D., Grossman, J. H., McNeil, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choice+of+method+for+endotoxin+detection+depends+on+nanoformulation.">Choice of method for endotoxin detection depends on nanoformulation.</a> Nanomedicine (London). 9 (12), 1847-1856 (2014).</li><li>Neun, B. W., Dobrovolskaia, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Considerations+and+Some+Practical+Solutions+to+Overcome+Nanoparticle+Interference+with+LAL+Assays+and+to+Avoid+Endotoxin+Contamination+in+Nanoformulations.">Considerations and Some Practical Solutions to Overcome Nanoparticle Interference with LAL Assays and to Avoid Endotoxin Contamination in Nanoformulations.</a> Methods in Molecular Biology. 1682, 23-33 (2018).</li><li>Boratynski, J., Szermer-Olearnik, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endotoxin+Removal+from+Escherichia+coli+Bacterial+Lysate+Using+a+Biphasic+Liquid+System.">Endotoxin Removal from Escherichia coli Bacterial Lysate Using a Biphasic Liquid System.</a> Methods in Molecular Biology. 1600, 107-112 (2017).</li><li>Li, H., Hitchins, V. M., Wickramasekara, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+detection+of+bacterial+endotoxins+in+ophthalmic+viscosurgical+device+materials+by+direct+analysis+in+real+time+mass+spectrometry.">Rapid detection of bacterial endotoxins in ophthalmic viscosurgical device materials by direct analysis in real time mass spectrometry.</a> Analytica Chimica Acta. 943, 98-105 (2016).</li><li>Uhlig, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Profiling+of+3-hydroxy+fatty+acids+as+environmental+markers+of+endotoxin+using+liquid+chromatography+coupled+to+tandem+mass+spectrometry.">Profiling of 3-hydroxy fatty acids as environmental markers of endotoxin using liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry.</a> Journal of Chromatography A. 1434, 119-126 (2016).</li><li>Smulders, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contamination+of+nanoparticles+by+endotoxin:+evaluation+of+different+test+methods.">Contamination of nanoparticles by endotoxin: evaluation of different test methods.</a> Particle and Fibre Toxicology. 9, 41 (2012).</li><li>. NCL assay cascade Available from: <a target="_blank" href="https://ncl.cancer.gov/resources/assay-cascade-protocols">https://ncl.cancer.gov/resources/assay-cascade-protocols</a> (2015)</li><li>Dobrovolskaia, M. A., Germolec, D. R., Weaver, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+nanoparticle+immunotoxicity.">Evaluation of nanoparticle immunotoxicity.</a> Nature Nanotechnology. 4 (7), 411-414 (2009).</li><li>Borton, L. K., Coleman, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Material-mediated+pyrogens+in+medical+devices:+Applicability+of+the+in+vitro+Monocyte+Activation+Test.">Material-mediated pyrogens in medical devices: Applicability of the in vitro Monocyte Activation Test.</a> Altex. , (2018).</li><li>Stoppelkamp, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Speeding+up+pyrogenicity+testing:+Identification+of+suitable+cell+components+and+readout+parameters+for+an+accelerated+monocyte+activation+test+(MAT).">Speeding up pyrogenicity testing: Identification of suitable cell components and readout parameters for an accelerated monocyte activation test (MAT).</a> Drug Testing and Analysis. 9 (2), 260-273 (2017).</li><li>Vipond, C., Findlay, L., Feavers, I., Care, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Limitations+of+the+rabbit+pyrogen+test+for+assessing+meningococcal+OMV+based+vaccines.">Limitations of the rabbit pyrogen test for assessing meningococcal OMV based vaccines.</a> Altex. 33 (1), 47-53 (2016).</li><li>Barenholz, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxil(R)--the+first+FDA-approved+nano-drug:+lessons+learned.">Doxil(R)--the first FDA-approved nano-drug: lessons learned.</a> Journal of Controlled Release. 160 (2), 117-134 (2012).</li><li>Neun, B. W., Dobrovolskaia, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+and+quantitative+evaluation+of+endotoxin+contamination+in+nanoparticle+formulations+by+LAL-based+assays.">Detection and quantitative evaluation of endotoxin contamination in nanoparticle formulations by LAL-based assays.</a> Methods in Molecular Biology. 697, 121-130 (2011).</li><li>FDA, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guidance for Industry: Estimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers. , (2005).</li><li>Mohan, P., Rapoport, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin+as+a+molecular+nanotheranostic+agent:+effect+of+doxorubicin+encapsulation+in+micelles+or+nanoemulsions+on+the+ultrasound-mediated+intracellular+delivery+and+nuclear+trafficking.">Doxorubicin as a molecular nanotheranostic agent: effect of doxorubicin encapsulation in micelles or nanoemulsions on the ultrasound-mediated intracellular delivery and nuclear trafficking.</a> Molecular Pharmaceutics. 7 (6), 1959-1973 (2010).</li><li>Dabbagh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-melting-point+polymeric+nanoshells+for+thermal-triggered+drug+release+under+hyperthermia+condition.">Low-melting-point polymeric nanoshells for thermal-triggered drug release under hyperthermia condition.</a> International Journal of Hyperthermia. 31 (8), 920-929 (2015).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimising+the+use+of+commercial+LAL+assays+for+the+analysis+of+endotoxin+contamination+in+metal+colloids+and+metal+oxide+nanoparticles.">Optimising the use of commercial LAL assays for the analysis of endotoxin contamination in metal colloids and metal oxide nanoparticles.</a> Nanotoxicology. 9 (4), 462-473 (2015).</li><li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bacterial+endotoxin+(lipopolysaccharide)+binds+to+the+surface+of+gold+nanoparticles,+interferes+with+biocorona+formation+and+induces+human+monocyte+inflammatory+activation.">Bacterial endotoxin (lipopolysaccharide) binds to the surface of gold nanoparticles, interferes with biocorona formation and induces human monocyte inflammatory activation.</a> Nanotoxicology. 11 (9-10), 1157-1175 (2017).</li></ol>

इस प्रोटोकॉल में दी गई जानकारी15,26 से पहले बताई गई है और अमेरिकी खाद्य एवं औषधि प्रशासन (अमेरिका एफडीए या एफडीए) और संयुक्त राज्य अमेरिका फार्माकोपिया (खासियत)4 द्वारा प्रक...

एक endotoxin ग्राम के एक इमारत ब्लॉक नकारात्मक बैक्टीरियल सेल दीवार1,2है । यह बहुत कम (picogram) सांद्रता1,2पर प्रतिरक्षा कोशिकाओं को सक्रिय कर सकते हैं । भड़काऊ मध्यस्थों (साइटोकिंस, leukotrienes, eicosanoids, आदि) एक endotoxin के जवाब में कोशिकाओं द्वारा उत्पादित बुखार, हाइपरटेंशन, उच्च रक्तचाप, और कई अंग विफलता सहित अधिक गंभीर स्वास्थ्य समस्याओं के लिए जिम्मेदार हैं 1 , 2 , 3. endotoxin द्वारा ट्रिगर प्रतिरक्षा मध्यस्थता पक्ष प्रभाव की गंभीरता endotoxin संरचना और संरचना द्वारा निर्धारित अपनी शक्ति पर निर्भर करता है और अंतरराष्ट्रीय endotoxin इकाइयों में मापा (IUs या EUs)3. शरीर के वजन के प्रति किलोग्राम इन इकाइयों की संख्या endotoxin की दहलीज pyrogenic खुराक सेट करने के लिए प्रयोग किया जाता है । इस खुराक सभी मार्गों लेकिन intrathecal मार्ग के माध्यम से प्रशासित दवा उत्पादों के लिए 5 यूरोपीय संघ/ दवाओं शरीर की सतह के प्रति वर्ग मीटर की खुराक, intraocular तरल पदार्थ, radiopharmaceuticals, और intrathecal मार्ग के माध्यम से प्रशासित उत्पादों एक अलग दहलीज pyrogenic खुराक है, जो है १०० यूरोपीय संघ/एम2, ०.२ यूरोपीय संघ/एमएल, १७५ यूरोपीय संघ/ व्यवस्थापन के लिए लक्षित उत्पाद की मात्रा), और ०.२ EU/किग्रा, क्रमशः4. विभिंन दवा उत्पादों और उपकरणों के लिए दहलीज pyrogenic खुराक के बारे में अधिक जानकारी प्रदान की और कहीं पर चर्चा कर रहे है4,5,6।
जानवरों endotoxin-मध्यस्थता प्रतिक्रियाओं के लिए उनकी संवेदनशीलता में व्यापक रूप से बदलती हैं । मनुष्यों, गैर-मानव रहनुमाओं, और खरगोशों endotoxins3के लिए सबसे अत्यंत संवेदनशील प्रजातियों में से हैं । रोगियों में endotoxin मध्यस्थता दुष्प्रभावों से बचने और नैदानिक विषाक्तता और प्रभावकारिता अध्ययन के गलत निष्कर्ष को रोकने के लिए, यह सही का पता लगाने और दोनों नैदानिक और पूर्व नैदानिक ग्रेड योगों में endotoxins यों तो आवश्यक है. वर्तमान में उपलब्ध कई विधियाँ इस कार्य को प्राप्त कर सकती हैं. उनमें से एक है Limulus Amoebocyte Lysate (लाल) परख, जो सामांयतः दुनिया भर में इस्तेमाल के लिए संभावित endotoxin संदूषण के लिए जैव चिकित्सा उत्पादों स्क्रीन के रूप में अच्छी तरह के रूप में जीवाणु संक्रमण का पता लगाने के लिए7,8,9। lysate amoebocytes से तैयार है, घोड़े की नाल केकड़े के रक्त में मौजूद कोशिकाओं Limulus polyphemus उत्तर अमेरिका के महाद्वीप के पूर्वी किनारे में रहने वाले7। दिलचस्प है, वहां घोड़े की नाल केकड़ों की कुछ अलग प्रजातियों (Tachypleus गीगा और Tachypleus tridentatus) एशिया में10रहे हैं । Tachypleus Amoebocyte Lysate (ताल) के लिए कई एशियाई देशों में प्रयोग किया जाता है इसी तरह endotoxin का पता लगाने के लिए कैसे लाल अंय cuntries10में प्रयोग किया जाता है । lysates (लाल और ताल) प्रोटीन का एक समूह है कि सक्रियकरण पर सक्रियता प्रदान गतिविधि शामिल हैं । इन प्रोटीन में से एक, तथाकथित कारक सी endotoxin के साथ संपर्क करने पर सक्रिय है । सक्रिय कारक सी सट फैक्टर बी, जो बारी में भी एक को चिढ़ाने के लिए हो जाता है और एक थक्के एंजाइम का उत्पादन करने के लिए एक प्रो थक्के एंजाइम सट । प्रतिक्रियाओं की इस श्रृंखला का परिणाम एक जेल के गठन, नमूना turbidity में वृद्धि और, एक chromogenic सब्सट्रेट की उपस्थिति में, एक रंगीन उत्पाद है, जो जेल के लिए एक नींव के रूप में सेवा की उपस्थिति-थक्का, turbidity, और chromogenic परख, क्रमशः. हालांकि कोई अनिवार्य लाल स्वरूप है, अमेरिका के खाद्य एवं औषधि प्रशासन (एफडीए) उद्योग दस्तावेज के लिए मार्गदर्शन में बताते हैं, कि अलग लाल स्वरूपों के बीच परीक्षा परिणामों में विसंगति के मामले में, निर्णय जेल-थक्का परख 5 के आधार पर किया जाता है .
कई सामांयतः प्रयोगशाला रसायनों का इस्तेमाल किया (जैसे, EDTA) और ज्ञात दवा उत्पादों (जैसे, पेनिसिलिन) लाल परख11के साथ हस्तक्षेप । हस्तक्षेप आमतौर पर एक परीक्षण सामग्री युक्त समाधान में एक ज्ञात एकाग्रता पर नुकीला endotoxin मानक की वसूली का आकलन करके पहचाना जाता है । यदि स्पाइक वसूली से कम ५०% या २००% से अधिक है, तो दिया परीक्षण सामग्री के लिए लाल परख का परिणाम निषेध या वृद्धि के कारण अवैध है, क्रमशः4। नैनो-आधारित योगों अक्सर जटिल और तंत्र की एक किस्म के माध्यम से लाल के साथ हस्तक्षेप कर रहे हैं12,13,14. कई दृष्टिकोण के हस्तक्षेप को दूर करने के लिए वर्णित किया गया है: विशिष्ट बफ़र और सर्फेक्टेंट में नमूना पुनर्गठन, हीटिंग द्वारा प्रोटीन निष्क्रियण, लिपिड आधारित खोखले सामग्री के विनाश हीटिंग द्वारा और अतिरिक्त के साथ नमूने का सप्लीमेंट divalent cations५,१२,१३,१४,१५. लाल हस्तक्षेप को दूर नहीं किया जा सकता है जब स्थितियों के लिए वैकल्पिक तरीकों भी वर्णित किया गया है: एलिसा, एक HEK-TLR4 रिपोर्टर सेल लाइन परख, और मास स्पेक्ट्रोमेट्री16,17,18, 19. शी.
जेल-थक्का, turbidity, और chromogenic लाल परख के आयोजन के लिए प्रायोगिक प्रक्रियाएं बताई गई हैं । इन परख नैनो लक्षण लैब (एनसीएल) वेबसाइट20 प्रोटोकॉल में भी उपलब्ध है एसटी में 1.2 (turbidity लाल), ए. ए. 1.3 (जेल-थक्का लाल) और एसटी के 1.4 (chromogenic लाल) । यह एक ही नैनो-निर्माण की विशेषताएं करने के लिए दो अलग स्वरूपों का संचालन करने के लिए सिफारिश की है । जब turbidity और chromogenic लाल असहमत के परिणाम, जेल-थक्का परिणाम5माना जाता है । जब दो लाल स्वरूपों के परिणाम असहमत हैं, अतिरिक्त अध्ययन लाल निष्कर्षों की पुष्टि करने के लिए या तो monocyte सक्रियण परीक्षण (चटाई) या खरगोश पायरोजेन परीक्षण (RPT) का उपयोग21आयोजित कर रहे हैं । यह नोट करना महत्वपूर्ण है कि प्रत्येक विधि endotoxin डिटेक्शन और pyrogenicity असेसमेंट के लिए उपयोग किए गए लाभ और सीमाएँ21,22,23,24है । किसी दिए गए नैनो निर्माण को चिह्नित करने के लिए उपयोग की गई कार्यविधि की सीमाएं पहचानने के लिए उस नैनो-निर्माण के लिए इष्टतम प्रक्रिया के उपयोग के लिए वैज्ञानिक औचित्य प्राप्त करने के लिए आवश्यक है ।
इस अध् ययन में PEGylated liposomal डॉक्सोरूबिसिन को मॉडल nanoparticle योगों के रूप में इस् तेमाल किया गया । यह निर्माण १९९५ में अमेरिका एफडीए द्वारा अनुमोदित किया गया है और कैंसर रोगियों का इलाज दुनिया भर में25के लिए इस्तेमाल किया ।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Turbidity LAL Assay</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2770</td>
			<td>When needed, it is used to adjust sample pH to be between 6-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9892</td>
			<td>When needed, it is used to adjust sample pH to be between 6-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAL Reagent</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>T0051</td>
			<td>This reagent can be used with turbidity assay only</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Control Endotoxin Standard</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>E0005</td>
			<td>This reagent can be used with turbidity and gel-clot assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAL grade water</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>WP0501</td>
			<td>This reagent can be used with any LAL format</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucashield Buffer</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>GB051-25</td>
			<td>Used to prevent false-positive response from beta-glucans</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable endotoxin-free glass dilution tubes 12 x 75 mm</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>TB240</td>
			<td>These tubes can be used with all three assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable endotoxin-free glass reaction tubes 8 x 75 mm</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>TK100</td>
			<td>These tubes can be used with turbidity and chromogenic assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-free tips with volumes 0.25 and 1.0 mL</td>
			<td>RAININ</td>
			<td>PPT25, PPT10</td>
			<td>Tips and pipettes may adsorb endotoxin and release leachables which interfere with LAL assay. These RAININ tips are used because their optimal performance in the LAL assay was verified and confirmed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-free microcentrifuge tubes, 2.0 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22600044</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-fee combitips, 5mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30089669</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Repeat pipettor</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>4982000020</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcetrifuge</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator, 2-8 C</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer, -20 C</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyros Kinetix or Pyros Kinetix Flex reader</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>PKF96</td>
			<td>Other instruments can be used. However, LAL reagents and endotoxin standards used in this assay may require optimization. When other instrumentation is used, please refer to the instrument and LAL kit manufacturers for instructions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chromogenic LAL Assay</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrochrome LAL Reagent</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>CG1500-5</td>
			<td>This reagent is specific to the Chromogenic Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Control Endotoxin Standard</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>EC010</td>
			<td>This standard is different than that used for turbidity and gel-clot LALs; it is optimized for optimal performance in the chromogenic assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2770</td>
			<td>When needed, it is used to adjust sample pH to be between 6-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9892</td>
			<td>When needed, it is used to adjust sample pH to be between 6-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAL grade water</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>WP0501</td>
			<td>This reagent can be used with any LAL format</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucashield Buffer</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>GB051-25</td>
			<td>Used to prevent false-positive response from beta-glucans</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable endotoxin-free glass dilution tubes 12 x 75 mm</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>TB240</td>
			<td>These tubes can be used with all three assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable endotoxin-free glass reaction tubes 8 x 75 mm</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>TK100</td>
			<td>These tubes can be used with turbidity and chromogenic assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-free tips with volumes 0.25 and 1.0 ml</td>
			<td>RAININ</td>
			<td>PPT25, PPT10</td>
			<td>Tips and pipettes may adsorb endotoxin and release leachables which interfere with LAL assay. These RAININ tips are used because their optimal performance in the LAL assay was verified and confirmed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-free microcentrifuge tubes, 2.0 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22600044</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-fee combitips, 5mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30089669</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Repeat pipettor</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>4982000020</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcetrifuge</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator, 2-8 C</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer, -20 C</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyros Kinetix or Pyros Kinetix Flex reader</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>PKF96</td>
			<td>Other instruments can be used. However, LAL reagents and endotoxin standards used in this assay may require optimization. When other instrumentation is used, please refer to the instrument and LAL kit manufacturers for instructions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gel-Clot LAL Assay</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAL Reagent</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>G5003</td>
			<td>This reagent is specific to the gel-clot assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Control Endotoxin Standard</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>E0005</td>
			<td>This reagent can be used with turbidity and gel-clot assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2770</td>
			<td>When needed, it is used to adjust sample pH to be between 6-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9892</td>
			<td>When needed, it is used to adjust sample pH to be between 6-8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LAL grade water</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>WP0501</td>
			<td>This reagent can be used with any LAL format</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucashield Buffer</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>GB051-25</td>
			<td>Used to prevent false-positive response from beta-glucans</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable endotoxin-free glass dilution tubes 12 x 75 mm</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>TB240</td>
			<td>These tubes can be used with all three assays</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable endotoxin-free glass reaction tubes 10 x 75 mm</td>
			<td>Associates of Cape Cod</td>
			<td>TS050</td>
			<td>These tubes are for use with the gel-clot assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-free tips with volumes 0.25 and 1 mL</td>
			<td>RAININ</td>
			<td>PPT25, PPT10</td>
			<td>Tips and pipettes may adsorb endotoxin and release leachables which interfere with LAL assay. These RAININ tips are used because their optimal performance in the LAL assay was verified and confirmed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-free microcentrifuge tubes, 2.0 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22600044</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrogen-fee combitips, 5mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30089669</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Repeat pipettor</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>4982000020</td>
			<td>Other equivalent supplies can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcetrifuge</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator, 2-8 C</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer, -20 C</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath, 37 C</td>
			<td>any brand</td>
			<td></td>
			<td>Any brand can be used, however, it is important either to switch off water circulation or use non-circualting water bath because water flow will affect clot formation and lead to false-negative results</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detection of endotoxin in nano-formulations using limulus amoebocyte lysate (lal) assays

जब दवा उत्पादों में मौजूद, एक ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरियल कोशिका दीवार घटक endotoxin (अक्सर भी lipopolysaccharide कहा जाता है) सूजन, बुखार, hypo या उच्च रक्तचाप पैदा कर सकता है, और, चरम मामलों में, ऊतक और अंग क्षति के लिए नेतृत्व कर सकते है कि घातक हो जाते हैं । दवा उत्पादों में endotoxin की मात्रा, इसलिए, कड़ाई से विनियमित रहे हैं । endotoxin डिटेक्शन और ठहराव के लिए उपलब्ध तरीकों के बीच, Limulus Amoebocyte Lysate (लाल) परख सामांयतः दुनिया भर में इस्तेमाल किया जाता है । जबकि किसी भी दवा उत्पाद लाल परख के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं, नैनो-योगों उनकी जटिलता के कारण एक विशेष चुनौती का प्रतिनिधित्व करते हैं । इस पेपर का उद्देश्य इंजीनियर मैटीरियल्स और nanoparticle-तैयार की गई दवाओं में endotoxins का आकलन करने में अनुभवहीन शोधकर्ताओं को प्रैक्टिकल गाइड उपलब्ध कराना है । साथ ही, turbidity, chromogenic और जेल-थक्का परख सहित तीन लाल स्वरूपों प्रदर्शन के लिए व्यावहारिक सिफारिशों पर चर्चा कर रहे हैं । इन परख नैनो में endotoxin संदूषण का निर्धारण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है आधारित दवा उत्पादों, टीके, और adjuvants ।

लाल परख में इस निर्माण का परीक्षण करने के बाद उत्पन्न डेटा का उदाहरण तालिका 1में दिखाया गया है । PEGylated liposomal डॉक्सोरूबिसिन ने chromogenic लाल के साथ दखल 5. हालांकि, इस व्यवधान को अधिक से अधिक कमजोर ...

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Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate LAL Assays

इंजीनियर मैटीरियल्स में endotoxins का पता लगाने nanomedicine के क्षेत्र में भव्य चुनौतियों में से एक का प्रतिनिधित्व करता है । यहाँ, हम एक मामले का अध्ययन है कि नैनोकणों में संभावित endotoxin संदूषण का अनुमान करने के लिए तीन अलग लाल स्वरूपों से बना ढांचे का वर्णन प्रस्तुत करते हैं ।

नैनो में Endotoxin का पता लगाने-योगों Limulus Amoebocyte Lysate (लाल) परख का उपयोग

When present in pharmaceutical products, a Gram-negative bacterial cell wall component endotoxin (often also called lipopolysaccharide) can cause ...

इस विधि नैनो दवाओं की सुरक्षा के बारे में चिकित्सा क्षेत्र में जवाब देने में मदद कर सकते हैं। इस तकनीक के फायदे यह है कि यह मानक है, और उत्पादों के मूल्यांकन के लिए दुनिया भर में प्रयोग किया जाता है, नैनो दवाओं के लिए । प्रक्रिया का प्रदर्शन, नैनो प्रौद्योगिकी लक्षण वर्णन प्रयोगशाला में बैरी Neun होगा ।अंशांकन मानक तैयारी के लिए, लिमुलस अमेबोसाइट लाइसेट, या लाल ग्रेड पानी के 900 माइक्रोलीटर का उपयोग करें। और नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन के 100 माइक्रोलीटर, आवश्यकतानुसार कई मध्यवर्ती कमजोर पड़ने तैयार करने के लिए, प्रति मिलीलीटर एक एंडोटॉक्सिन इकाई की एकाग्रता के साथ अंशांकन मानक की तैयारी को सक्षम करने के लिए। फिर लाल ग्रेड पानी के 900 माइक्रोलीटर का उपयोग करना, और मिलीलीटर अंशांकन मानक प्रति एक एंडोटॉक्सिन इकाई के 100 माइक्रोलीटर, प्रति मिलीलीटर 0.1 एंडोटॉक्सिन इकाई की एकाग्रता पर एक दूसरा कैलिब्रेशन मानक तैयार करें।फिर दो निचले अंशांकन मानकों को तैयार करने के लिए धारावाहिक दस गुना कमजोर पड़ने दोहराएं। कुल चार अंशांकन मानकों को प्राप्त करना, 0001 से लेकर एक एंडोटॉक्सिन इकाई प्रति मिलीलीटर तक। मिलीलीटर गुणवत्ता नियंत्रण प्रति 05 एंडोटॉक्सिन इकाई तैयार करने के लिए, लाल ग्रेड पानी के 950 माइक्रोलीटर के साथ नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन समाधान के मिलीलीटर प्रति एंडोटॉक्सिन इकाई के 50 माइक्रोलीटर को जोड़ती है।सॉफ्टवेयर में अगला इंस्ट्रूमेंट सेटिंग्स का चयन करें, और टेम्पलेट बनाएं। डेटा एकत्र करने का चयन करें, और सामान्य टैब में परीक्षण आईडी और डेटा समूह दर्ज करें। हार्डवेयर टैब के तहत, इंस्ट्रूमेंट टाइप और लाल विधि का चयन करें, और सत्यापित करें कि एक सीरियल नंबर, सिस्टम आईडी और सीरियल पोर्ट की जानकारी स्क्रीन पर दिखाई देती है।उपकरण चयन की पुष्टि करने के लिए ठीक दो बार क्लिक करें, और साधन के साथ संचार, और नमूना आईडी उसी क्रम में दर्ज करें कि नमूनों का परीक्षण किया जाएगा। फिर नकारात्मक नियंत्रण मानक वक्र दर्ज करने के लिए डिफ़ॉल्ट बटन का उपयोग करें, और नमूनों का परीक्षण करें। नकारात्मक नियंत्रण अंशांकन मानकों की उचित मात्रा जोड़ें, और डुप्लिकेट पूर्व लेबल ग्लास ट्यूबों में गुणवत्ता नियंत्रण।और पहले परीक्षण नीच करने के लिए लाल की उचित मात्रा जोड़ें। भंवर नीच संक्षेप में, और साधन हिंडोला में उपयुक्त परीक्षण स्लॉट में शीशी जगह है। नमूनों को लोड करने से पहले, प्रदर्शन के रूप में अधिकतम वैध कमजोर पड़ने के भीतर परीक्षण नैनो सामग्री के कई कमजोर पड़ने प्रदर्शन करते हैं।अवरोध वृद्धि नियंत्रण के मिलीलीटर प्रति 05 एंडोटॉक्सिन इकाई तैयार करने के लिए, नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन समाधान के मिलीलीटर प्रति एक एंडोटॉक्सिन इकाई के 25 माइक्रोलीटर को मिलाएं, जिसमें परीक्षण नैनो सामग्री के 475 माइक्रोलीटर दिए गए कमजोर पड़ने पर। भंवर के बाद, उपयुक्त नवाचार वृद्धि नियंत्रण लोड करें, और उपकरण में अस्पिक अध्ययन नमूने। फिर पूर्व लेबल ट्यूबों में एक विशिष्ट कमजोर पड़ने पर अस्पिटिक और नुकीला नैनो सामग्री को अलीकोटित करें।भंवर से पहले, और साधन हिंडोला में लोड हो रहा है। जेल-क्लॉट लाल प्रदर्शन करने के लिए, चार लैम्ब्डा की अंतिम एकाग्रता के लिए नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन तैयार करें, और मानक के 100 माइक्रोलीटर को जोड़ें, 100 माइक्रोलीटर पानी के साथ, या नियंत्रण मानक एंडोटॉक्सिन दो लैम्ब्डा की अंतिम एकाग्रता प्राप्त करने के लिए परीक्षण नमूना। प्रत्येक लैम्ब्डा कमजोर पड़ने के लिए Lysine के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें।भंवर ट्यूबों संक्षेप में, और एक घंटे के लिए एक ३७ डिग्री सेल्सियस पानी स्नान में ट्यूबों के रैक जगह है । इनक्यूबेशन के अंत में, ट्यूबों को चिकनी गति के साथ उलटा करें, और मैन्युअल रूप से एक फर्म के थक्के के लिए प्लस का उपयोग करके परिणामों को रिकॉर्ड करें, और कोई थक्का, या ढीला थक्का के लिए शून्य से। इस प्रतिनिधि विश्लेषण में, पेग्यालेटेड लिपोसोमल डॉक्सोरुबिसिन ने पांच को कमजोर पड़ने पर क्रोमोजेनिक लाल के साथ हस्तक्षेप किया, हालांकि इस हस्तक्षेप को उच्च कमजोर पड़ने पर दूर किया गया था।स्पाइक रिकवरी 50 से 200% के बीच थी जब टर्बिडिटी और क्रोमोजेनिक लाल में 50 और 500 के साथ-साथ टर्बिडिटी लाल में कमजोर पड़ने के साथ-साथ कमजोर पड़ने पर निर्माण का परीक्षण किया गया था। जब कमजोर पड़ने कारक द्वारा समायोजित, परिणाम दोनों निबंध में भ्रम के बीच संगत थे । इसके अलावा, परिणाम तीन निबंध प्रारूपों के बीच संगत थे ।याद रखें कि प्रत्येक नमूने में कमजोर करने की अपनी सीमा होती है, प्रत्येक लाल प्रारूप डॉक्सिन और lysate में अपने नियंत्रण मानक का उपयोग करता है, और यह कि ट्यूब कमजोर करने को तैयार करने के लिए उपयोग किए जाते हैं, और प्रत्येक लाल निबंध के लिए अलग-अलग प्रतिक्रिया करते हैं। इस प्रक्रिया के लिए अन्य तरीकों जैसे कि इसके विकास के बाद सामग्री के बारे में अतिरिक्त सवालों के जवाब देने के लिए किया जा सकता है, इस तकनीक ने मनुष्यों में तैयार नैनो प्रौद्योगिकी के चिकित्सा अनुप्रयोगों का पता लगाने के लिए, और नैदानिक मॉडल सहित गैर मानव वानरों, खरगोशों, कुत्तों और चूहों तक सीमित नहीं है। यह न भूलें कि डॉक्सिन के साथ काम करना बेहद खतरनाक हो सकता है और इस प्रक्रिया को निष्पादित करते समय व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण पहनने जैसी सावधानियां हमेशा ली जानी चाहिए।

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Detection of Endotoxin in Nano-formulations Using Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) Assays

Developing Custom Chinese Hamster Ovary-host Cell Protein Assays using Acoustic Membrane Microparticle Technology

विकासशील कस्टम चीनी हैम्स्टर अंडाशय मेजबान सेल प्रोटीन ध्वनिक झिल्ली microparticle प्रौद्योगिकी का उपयोग कर Assays

Custom assays for unique proteins are often limited to time consuming manual detection and quantitation techniques such as ELISA or Western blots due to ...

Fabrication of Electrochemical-DNA Biosensors for the Reagentless Detection of Nucleic Acids, Proteins and Small Molecules

विद्युत रासायनिक डीएनए Biosensors के न्यूक्लिक एसिड, प्रोटीन और छोटे अणुओं के Reagentless पता लगाने के लिए निर्माण कार्य

As medicine is currently practiced, doctors send specimens to a central laboratory for testing and thus must wait hours or days to 
receive the results. ...

Detection and Isolation of Circulating Melanoma Cells using Photoacoustic Flowmetry

और परिसंचारी मेलेनोमा कोशिकाओं का उपयोग Photoacoustic Flowmetry की जांच अलगाव

Circulating tumor cells (CTCs) are those cells that have separated from a macroscopic tumor and spread through the blood and lymph systems to seed ...

Bacterial Detection &amp; Identification Using Electrochemical Sensors

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विद्युत सेंसर का उपयोग बैक्टीरिया का पता लगाने और पहचान

Electrochemical  sensors are widely used for rapid and accurate measurement of blood glucose and  can be adapted for detection of a wide variety of ...

Flexural Rigidity Measurements of Biopolymers Using Gliding Assays

ग्लाइडिंग assays का उपयोग Biopolymers की flexural कठोरता माप

Microtubules are cytoskeletal polymers which  play a role in cell division, cell mechanics, and intracellular transport. Each of these functions requires ...

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इसके विपरीत गणना छिड़काव तय नमूने के टोमोग्राफी का उपयोग करते हुए मानव कार्डिएक शिरापरक प्रणाली के संरचनात्मक पुनर्निर्माण

A detailed  understanding of the complexity and relative variability within the human  cardiac venous system is crucial for the development of cardiac ...

Bead Aggregation Assays for the Characterization of Putative Cell Adhesion Molecules

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Cell-cell adhesion is fundamental to multicellular life and is mediated by a diverse array of cell surface proteins. However, the adhesive interactions ...

Eye Irritation Test (EIT) for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial (RhCE) Tissue Model

Eye Irritation Test EIT for Hazard Identification of Eye Irritating Chemicals using Reconstructed Human Cornea-like Epithelial RhCE Tissue Model

खंगाला मानव कॉर्निया की तरह उपकला (RHCE) ऊतक मॉडल का उपयोग नेत्र परेशान रसायन का खतरा पहचान के लिए आंखों में जलन टेस्ट (ईआईटी)

To comply with the Seventh Amendment to the EU Cosmetics Directive and EU REACH legislation, validated non-animal alternative methods for reliable and ...

Label-free Single Molecule Detection Using Microtoroid Optical Resonators

Microtoroid ऑप्टिकल Resonators का उपयोग लेबल मुक्त एकल अणु का पता लगाने

Detecting small concentrations of molecules down to the single molecule limit has impact on areas such as early detection of disease, and fundamental ...

Multicolor Fluorescence Detection for Droplet Microfluidics Using Optical Fibers

बूंद Microfluidics के लिए बहुरंगा प्रतिदीप्ति पता लगाने ऑप्टिकल फाइबर का उपयोग

Fluorescence assays are the most common readouts used in droplet microfluidics due to their bright signals and fast time response. Applications such as ...