Name: sperm collection of differential quality using density gradient centrifugation
Uploaded: 2018-11-29T15:00:00
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Alle hier beschriebene Methoden wurden von den institutionellen Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) von der University of Georgia genehmigt.
1. Waschen mit traditionellen Zentrifugation
<ol><li>Phosphat-Pufferlösung (PBS) vorzubereiten. 8,0 g NaCl, 0,2 g KCl, 1,44 g Na2HPO4 und 0,24 g KH2PO4 bis 800 mL destilliertem Wasser (dH2O) zugeben. Anpassen des pH-Werts 7,4 mit 0,1 N HCl und bringen die Lösung 1 L mit dH2O.</li>...

<ol>
	<li>Spargo, S. C., Hope, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+and+nomenclature+of+the+zona+pellucida+gene+family.">Evolution and nomenclature of the zona pellucida gene family.</a> Biology Reproduction. 68, 358-362 (2003).</li><li>Okamura, F., Nishiyama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+passage+of+spermatozoa+through+the+vitelline+membrane+in+the+domestic+fowl,+Gallus+gallus.">The passage of spermatozoa through the vitelline membrane in the domestic fowl, Gallus gallus.</a> Cell and Tissue Research. 188 (3), 497-508 (1978).</li><li>Henkel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+function+and+assisted+reproduction+technology.">Sperm function and assisted reproduction technology.</a> Reproductive Medicine and Biology. 4, 7-30 (2005).</li><li>Reddy, R. 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U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturational+changes+in+motility,+acrosomal+proteolytic+activity,+and+penetrability+of+the+inner+perivitelline+layer+of+fowl+sperm,+during+their+passage+through+the+male+genital+tract.">Maturational changes in motility, acrosomal proteolytic activity, and penetrability of the inner perivitelline layer of fowl sperm, during their passage through the male genital tract.</a> Theriogenology. 76 (6), 1100-1109 (2011).</li><li>Chalah, T., Brillard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+assessment+of+fowl+sperm+viability+by+eosin-nigrosin+and+dual+fluorescence.">Comparison of assessment of fowl sperm viability by eosin-nigrosin and dual fluorescence.</a> Theriogenology. 50 (3), 487-493 (1998).</li><li>Aitken, R. J., West, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+relationship+between+reactive+oxygen+species+production+and+leukocyte+infiltration+in+fractions+of+human+semen+separated+on+Percoll+gradients.">Analysis of the relationship between reactive oxygen species production and leukocyte infiltration in fractions of human semen separated on Percoll gradients.</a> International Journal of Andrology. 13, 433-451 (1990).</li><li>Mortimer, D., Mortimer, S. T., Carrell, D., Aston, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Density+Gradient+Separation+of+Sperm+for+Artificial+Insemination.">Density Gradient Separation of Sperm for Artificial Insemination.</a> Spermatogenesis. 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R., Wishart, G. J., Brillard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oviducal+sperm+selection,+transport+and+storage+in+poultry.">Oviducal sperm selection, transport and storage in poultry.</a> Poultry Science Review. 5, 117-143 (1994).</li><li>Ahammad, M. U., Okamoto, S., Kawamoto, Y., Nakada, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+regular+fluid+secretion+from+the+uterus+of+laying+hens+on+the+longevity+and+fertilization+ability+of+fowl+sperm+in+the+oviduct.">The effects of regular fluid secretion from the uterus of laying hens on the longevity and fertilization ability of fowl sperm in the oviduct.</a> Poultry Science Journal. 1 (1), 13-22 (2013).</li><li>Ahammad, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturational+changes+in+the+survivability+and+fertility+of+fowl+sperm+during+their+passage+through+the+male+reproductive+tract.">Maturational changes in the survivability and fertility of fowl sperm during their passage through the male reproductive tract.</a> Animal Reproduction Science. 128 (1-4), 129-136 (2011).</li><li>Choi, K. H., Emery, D. A., Straub, D. E., Lee, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percoll+process+can+improve+semen+quality+and+fertility+in+turkey+breeders.">Percoll process can improve semen quality and fertility in turkey breeders.</a> Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. 12 (5), 702-707 (1999).</li><li>Chen, M. J., Bongso, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+evaluation+of+two+density+gradient+preparations+for+sperm+separation+for+medically+assisted+conception.">Comparative evaluation of two density gradient preparations for sperm separation for medically assisted conception.</a> Human Reproduction. 14 (3), 759-764 (1999).</li></ol>

Fruchtbarkeit die Rentabilität der tierischen Erzeugung bestimmt nicht nur, sondern dient auch als ein Mittel der natürlichen Selektion Arten für die Existenz. Die ultimative Funktion einer Samenzelle ist um eine Eizelle zu befruchten. Die Eileiter einer Frau wählt nur die fittesten Spermien zur Befruchtung der Eizelle23,24zu gewährleisten. In-vitro- Untersuchungen ergaben auch eine enge Korrelation zwischen qualitativen Sperma Züge und Befruchtung...

Bei Wirbeltieren männlichen Gameten intensiven Selektionsdruck zu unterziehen; von einem männlichen reproduktiven Fitness ist daher ausschlaggebend für eine erfolgreiche Befruchtung zu erreichen. Männer bestimmten Wirbeltierarten muss Samenzellen in großen Mengen und von ausreichender Qualität zu produzieren, um den Bedürfnissen der Befruchtung. Spermien haben eine Spermien-Kopf und eine Geissel, sind die meisten polarisierten Zellen im Körper. Sie sind auch in der Qualität der Spermien sehr heterogen (Leben und tot, morphologisch normal und abnormal und unbeweglich, niedrigen mobile und hohe mobile), die offenbart sich durch die breite Vielfalt in reproduktive Effizienz der Männchen. Je größer der Anteil der qualitativ hochwertigen Spermien, desto weniger die Anzahl der Paarungen erforderlich, um erfolgreich die Eizelle zu befruchten. Um Fruchtbarkeit zu erreichen, setzen morphologisch normale Spermien jedoch auf treibenden Kräfte von ihren Flagellen, den Ort der Befruchtung sowie hinsichtlich der Zona Pellucida1 eindringen erreichen (ZP; bei Säugetieren) oder innere Perivitelline Layer2 (IPVL; bei Vögel und Reptilien) der Eizelle nach natürliche Paarung oder künstliche Befruchtung (AI). Bestimmung der Spermien Qualität ist notwendig für den Einsatz in Techniken der assistierten Reproduktion3 (Kunst) und Auswahl der Zuchtrüden in AI zu verwendenden Programme4. Auf der anderen Seite stützt sich der Erfolg der Kunst einzig und allein auf die genaue Bewertung der Spermienqualität. Eine Reihe von Labortests wurden entwickelt, um die funktionellen Eigenschaften der Samenzellen zu bestimmen. Die wichtigsten Parameter sind Spermien Morphologie, Rentabilität, Mobilität, Rechtsfähigkeit (aviäre Spermien erfordern keine Rechtsfähigkeit5), Akrosom Reaktion (AR; Exozytose und Freisetzung von einem proteolytischen Enzym aus dem Akrosom der Spermien-Kopf), Sperma Eindringen von ZP oder IPVL und Düngung6,7,8,9,10,11. Maßnahmen der Fruchtbarkeit allein bieten keine genaue Bewertung der befruchtende Fähigkeit der Spermien Bevölkerung11. Maßnahmen der Befruchtung einer Eizelle im Vorfeld mehrere Ereignisse ermöglichen eine angemessene Vertretung der Leistung des einzelnen Spermatozyten7.
Die Methodik zur Messung der Spermienfunktion ist in erster Linie artspezifisch. Beispielsweise sind in Vogelgrippe Spermien, Nachhaltigkeit, Mobilität und Eindringen von IPVL die am häufigsten verwendeten Parameter zur Beurteilung der Spermien Qualität8,11,12. Die Anzahl der Leben Spermien im Ejakulat spielt eine entscheidende Rolle für das Überleben der Spermien, da die Anwesenheit einer großen Anzahl von Toten Spermien in der Samenflüssigkeit die Qualität des Spermas beeinflusst. Dies fördert die Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies in der Samenflüssigkeit und verursacht oxidativen Schäden an live Sperma13. Sperma Mobilität, die Fähigkeit zur flagellar Beweglichkeit der Vogelgrippe Spermien gegen Widerstand bei Körpertemperatur, ist bekanntermaßen eine direkte Rolle bei der Befruchtung8herbeizuführen. Es ist allgemein bekannt, dass Mobilität positiv mit der Fruchtbarkeit korreliert ist und daher eine primäre Determinante der Fruchtbarkeit8 ist. Eine mobile Spermien müssen jedoch auch die Fähigkeit zu unterziehen ein AR und dringen in die IPVL11. IPVL Penetration Tests berücksichtigen für jeden Samenzellen, die in den Prozess der Befruchtung11beteiligt ist.
Bei der Anwendung der Kunst Ejakulat wird in der Regel verarbeitet, um die Konzentration von qualitativ hochwertigen Spermien maximieren und minimieren Konzentration von minderwertige Spermien. Nach der Entnahme des Samens kann der Anteil an qualitativ hochwertigen Spermien durch Spermien Trennverfahren in Industrie und Forschung Praxis gebräuchliche angereichert werden. Viele dieser Verfahren wurden entwickelt, alle mit jeweiligen vor- und Nachteile, aber alle nutzen die Heterogenität der Spermien nur die Spermien mit hohen befruchtende Fähigkeit zu sammeln. Diese Verfahren umfassen Sperma Migrationsmethoden, Einhaltung der Spalte Filtration und Dichte Gradienten Zentrifugation (DGC)14,15,16,17,18,19 , 20. unter den verfügbaren Techniken, DGC hat sich als sehr einfache, wiederholbare, kostengünstige und effiziente isolieren die maximale Menge an qualitativ hochwertigen Spermien für den Einsatz in der Kunst mit dem Ziel der Maximierung der Wahrscheinlichkeit der Befruchtung14 , 15. Darüber hinaus DGC ist nicht schädlich für die Spermien Zellmembran. Im Gegensatz dazu Sperma Migrationsmethoden sammeln nur schrittweise mobile Spermien18,19, aber die Menge der Spermien gesammelt ist sehr niedrig, so dass es ineffizient sammeln große Mengen an Sperma18, 20. Einhaltung der Spalte Filtration ist sehr effizient bei der Filterung hochmobile Sperma Sperma17; Allerdings ist es eher schädlich für Spermien Membranen20,21.
In der DGC-Technik ist das am häufigsten verwendete Substrat für die Generierung der Dichtegradient Percoll, bestehend aus kolloidale Silica-Partikel in Polyvinylpryrolidone beschichtet. Percoll Dichte-Gradienten-Zentrifugierung (PDGC) kann entweder kontinuierlich oder diskontinuierlich, sondern ein diskontinuierlicher Verlauf wird am häufigsten für die high-Yield Isolierung von hochmobile Sperma13,16,20. Bei einem unterbrochenen Farbverlauf schwebt niedrigerere Dichte Medien über höhere Dichte Medien, erstellen einen Farbverlauf, der in der Dichte von oben nach unten aus einem konischen Rohr erhöht. Dies schafft Grenzen an der Schnittstelle zwischen den beiden Medien unterschiedlicher Dichte. Die Effizienz der PDGC ergibt sich aus zwei Faktoren: (1) die treibenden Fähigkeit der einzelnen Samenzellen und (2) die Tendenz der Spermien mit hoher Standsicherheit, haben eine erhöhte Dichte. Spermien mit höherer Mobilität können besser zu überqueren, von geringer Dichte Medien und dringen in eine höhere Dichte Medien. Geringere Mobilität Spermien sind eher an der Grenze erstellt durch die Schnittstelle zwischen Medien unterschiedlicher Dichte eingeklemmt werden. Spermien mit hohen Strukturintegrität und Mobilität haben tendenziell eine höhere Dichte als tot, abnorme oder niedrigen mobile Spermien. Wenn Fliehkraft in PDGC angewendet wird, erleichtert dies die Beweglichkeit der Spermien mit unterschiedlicher Dichte an ihren jeweiligen Platz im Verlauf.
In der allgemeinen Praxis nachdem PDGC durchgeführt wurde, das weiche Pellet der Spermien mit potenziellen am unteren Rand das konische Rohr hohe Fruchtbarkeit gesammelt und der Rest wird verworfen. Ein nicht ausgelasteter Vorteil dieser Technik ist jedoch seine Fähigkeit, Spermien in mehrere Gruppen auf die Qualitätsunterschiede zu trennen. Für Forschungszwecke ermöglicht die Trennung von Spermien durch Maß an Qualität unter Verwendung der PDGC-Technik für die Untersuchung der Spermienqualität physiologische, Metabolomic und Proteomic Unterschiede betrifft. Hier wollen wir ausführlich, wie diese Technik verwendet werden kann, trennen Sie Spermien durch Qualität, als auch zeigen diese Unterschiede in der Qualität, unter Verwendung der zuvor festgelegten Eosin-Nigrosin lebenswichtigen Färbung für Rentabilität, Accudenz Assay für Mobilität und Sperma-IPVL Interaktion-Assay für Durchlässigkeit.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:824px;" width="825">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Accudenz</td>
			<td style="width:323px;">Accurate Chemical and Scientific Corporation, Westbury, NY, USA</td>
			<td style="width:119px;">AN7050</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Percoll&#160;</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">P7828</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Schiff&#8217;s reagent</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">3952016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">TES</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">T1375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Eosin Y</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">E4009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nigrosin</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td align="right" style="width:119px;">198285</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ST 40R Centrifuge&#160;</td>
			<td style="width:323px;">Thermo Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td align="right" style="width:119px;">75004524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">DU 530 Life Sciences UV/Vis Spectrophotometer</td>
			<td style="width:323px;">Beckman Coulter, Brea, CA, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>No catalogue is found</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Olympus IX 71 Inverted Fluorescence and Phase Contrast Microscope</td>
			<td style="width:323px;">Olympus America Inc., PA, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>No catalogue is found</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sperm collection of differential quality using density gradient centrifugation

Bei der sexuellen Fortpflanzung eines männlichen Gameten oder Samenzelle verschmilzt mit einer weiblichen Gameten Befruchtung herbeizuführen. Jedoch müssen eine große Anzahl von Spermien mit Düngung Fähigkeit zur Interaktion mit einem weiblichen Gameten zur Befruchtung zu gewährleisten. Als solche ist die befruchtende Fähigkeit der einzelnen Spermien entscheidend für die erfolgreiche Reproduktion. Dichte-Gradienten-Zentrifugierung ist seit mehreren Jahrzehnten als reproduzierbare, schnell, effizient, effektiv und extrem anpassungsfähig Methode, nur qualitativ hochwertige Spermien in assistierten Reproduktionstechnik zu verwendenden sammeln verwendet worden. Die Protokolle, die wir hier beschriebenen konzentrieren sich auf die Nutzung der diskontinuierlichen Percoll Dichte Gradienten Zentrifugation (PDGC) Technik, drei verschiedene Populationen von Hahn Spermien durch ihre Qualität zu isolieren. Wir waren in der Lage, nieder-, Mittel- und qualitativ hochwertige Spermien zu sammeln. Wir beschreiben auch reproduzierbare Protokolle, die bestimmende Fruchtbarkeit Potenzial der Spermien zur Folge haben, durch die Bewertung ihrer Lebensfähigkeit, Mobilität und Durchlässigkeit. Sammlung von Spermien durch ihre Qualität mit PDGC Technik würde nützlich sein, um präzise und gründlich charakterisieren Spermien mit potenziellen differenzielle Fruchtbarkeit.

Die PDGC-Technik führte zu deutliche Trennung der drei Schichten der Spermien durch Maß an Qualität über alle Parameter. Sperma trennt in eine qualitativ hochwertige Schicht unterhalb der höheren Dichte Lösung, ein mittlerer Qualität Schicht zwischen der höheren und niedrigeren Dichte Lösung und eine minderwertige Schicht über der niedrigeren Dichte Lösung. Diese Unterschiede in der Qualität sind deutliche Unterschiede in der Lebensfähigkeit (Abbildung 4<...

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Sperm Collection of Differential Quality Using Density Gradient Centrifugation

In diesem Beitrag wollen wir die Leistung der Dichte-Gradienten-Zentrifugierung-Technik und deren Anwendung in Sperma-Physiologie-Forschung beschreiben.

Spermiengewinnung differenzielle Qualität mit Dichte-Gradienten-Zentrifugierung

In sexual reproduction, a male gamete or sperm cell fuses with a female gamete to bring about fertilization. However, a large number of sperm cells with ...

Diese Methode kann helfen, wichtige Fragen auf dem Gebiet der Spermienphysiologie zu beantworten, wie die chemischen Determinen der Spermienqualität. Der Hauptvorteil dieser Technik ist die Fähigkeit, große Mengen von Proben nach Qualität zu trennen, sowie Anpassungsfähigkeit im Vergleich zu alternativen Methoden. Obwohl diese Methode Einen Einblick in die Unterschiede in der Spermienqualität bieten kann, kann sie auch auf andere Proben wie gemischte Zelltypen oder subzelluläre Komponenten mit unterschiedlicher Dichte angewendet werden.Zu Beginn zwei 3 Milliliter Percoll-Verdünnungen in zwei separaten Röhren machen. In einem sauberen Reagenzglas 1 Milliliter Samenprobe mit 2 Milliliter PBS verdünnen. Pfeifen Sie es sanft, um die Lösung zu mischen.Fügen Sie 3 Milliliter der unteren Dichte Percoll sollution zu einem sterilen konischen Rohr. Dann, sorgfältig Pipette 3 Milliliter der höheren Dichte Percoll Lösung unter der unteren Dichte Percoll-Lösung. Beim Kippen des konischen Rohres in einem 45-Grad-Winkel, Pipette 3 Milliliter der verdünnten Samenprobe auf dem Percoll-Dichtegradienten.Nach der Vorbereitung eines Rohrohres zentrieren Sie beide Rohre bei 1500 Gs für 20 Minuten. Stellen Sie sicher, dass sich nach der Zentrifugation drei verschiedene Samenschichten in der Wanne gebildet haben. Mit einer Pipette sammeln Sie die drei Schichten Sperma, beginnend mit der oberen Schicht, gefolgt von der mittleren Schicht, und endet mit dem harten Pellet an der Unterseite des Rohres.Jede der Schichten in ein steriles Mikrozentrifugenrohr übertragen. Verdünnen Sie jede der Samenproben mit 1,5 Milliliter PBS und zentrifugieren Sie die Proben bei 1500 Gs für zehn Minuten. Schließlich den Überstand abgießen und die Pellets mit Motilitätspuffer rekonstituieren.In diesem Protokoll wurde die Percoll-Dichtegradientenzentrifugationstechnik (PDGC) verwendet, um eine Samenprobe in drei verschiedene Schichten zu unterteilen. Sperma trennt sich in eine hochwertige Schicht unterhalb der Lösung mit höherer Dichte, eine schicht mittlerer Und-Dichte zwischen den Lösungen mit höherer und niedrigerer Dichte und eine Schicht niedriger Qualität über der Lösung mit niedrigerer Dichte. Diese Unterschiede in der Spermienqualität werden durch Unterschiede in der Lebensfähigkeit, Mobilität und Durchlässigkeit belegt.Beim Versuch dieses Verfahrens ist es wichtig, sich daran zu erinnern, dass Proben auf Raumtemperatur gebracht werden müssen. Der Erfolg von PDGC ist auf eine sorgfältige Vorbereitung des Gradienten sowie eine sorgfältige Erfassung der isolierten Schichten angewiesen. Nach seiner Entwicklung ebnete diese Technik den Weg für unsere Forschung auf dem Gebiet der Spermienperdiomik, um Bio-Marker der Fruchtbarkeit bei Vogelarten zu erforschen.

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Harvesting Sperm and Artificial Insemination of Mice

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Rodents of the genus Peromyscus (deer mice) are the most prevalent native North American mammals.  Peromyscus species are used in a wide range of research ...

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DNA Extraction from 0.22 &mu;M Sterivex Filters and Cesium Chloride Density Gradient Centrifugation

DNA Extraction from 0.22 ÃƒÅ½Ã‚Â¼M Sterivex Filters and Cesium Chloride Density Gradient Centrifugation

DNA-Extraktion von 0,22 pM Sterivex Filter und Cäsiumchlorid-Dichtegradientenzentrifugation

This method is used to extract high molecular weight genomic DNA from planktonic biomass concentrated on 0.22 &mu;M Sterivex filters that have been ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo-Zentrifugation von Drosophila Embryonen

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Preparation of Quality Inositol Pyrophosphates

Erstellung von Qualitäts-Inositol Pyrophosphate

Myo-inositol is present in nature either unmodified or in more complex phosphorylated derivates. Of the latest, the two most abundant in eukaryotic cells ...

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the I&middot;Cryo Kit

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the IÃƒâ€šÃ‚Â·Cryo Kit

Maus Sperma Kryokonservierung und Recovery mit der I · Cryo-Kit

Thousands of new genetically modified (GM) strains of mice have been created since the advent of transgenesis and knockout technologies.  Many of these ...

Determination of Protein-ligand Interactions Using Differential Scanning Fluorimetry

Bestimmung der Protein-Ligand-Wechselwirkungen mit Differential Scanning Fluorimetrie

A wide range of methods are currently available for determining the dissociation constant between a protein and interacting small molecules. However, most ...

Isolation of Intact Mitochondria from Skeletal Muscle by Differential Centrifugation for High-resolution Respirometry Measurements

Isolation of Intact Mitochondria von Skeletal Muscle durch differentielle Zentrifugation für hochauflösende Messungen Respirationstest

Mitochondria are involved in cellular energy metabolism and use oxygen to produce energy in the form of adenosine triphosphate (ATP). Differential ...

Avian Semen Collection by Cloacal Massage and Isolation of DNA from Sperm

Vogelgrippe Samengewinnung von Blasenekstrophie Massage und Isolierung von DNA aus Spermien

Collection of semen may be useful for a wide range of applications including studies involving sperm quality, sperm telomere dynamics, and epigenetics. ...

Fish Sperm Assessment Using Software and Cooling Devices

Fisch Sperma Bewertung mit Software und Kühlgeräte

For gamete quality evaluation, there are innovative, rapid, and quantitative techniques that can provide useful data for aquaculture. Computerized systems ...

Field Identification of Matricaria chamomilla using a Portable qPCR System

Field Identification of Matricaria chamomilla using a Portable qPCR System

Feldidentifikation von Matricaria chamomilla mit einem tragbaren qPCR-System

Quality control in botanical products begins with the raw material supply. Traditionally, botanical identification is performed through morphological ...