Name: sperm collection of differential quality using density gradient centrifugation
Uploaded: 2018-11-29T15:00:00
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सभी तरीकों यहां वर्णित संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) जॉर्जिया विश्वविद्यालय के द्वारा अनुमोदित किया गया है ।
1. पारंपरिक केंद्रापसारक का उपयोग कर धुलाई
<ol><li>फॉस्फेट बफर समाधान (पंजा?...

<ol>
	<li>Spargo, S. C., Hope, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+and+nomenclature+of+the+zona+pellucida+gene+family.">Evolution and nomenclature of the zona pellucida gene family.</a> Biology Reproduction. 68, 358-362 (2003).</li><li>Okamura, F., Nishiyama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+passage+of+spermatozoa+through+the+vitelline+membrane+in+the+domestic+fowl,+Gallus+gallus.">The passage of spermatozoa through the vitelline membrane in the domestic fowl, Gallus gallus.</a> Cell and Tissue Research. 188 (3), 497-508 (1978).</li><li>Henkel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+function+and+assisted+reproduction+technology.">Sperm function and assisted reproduction technology.</a> Reproductive Medicine and Biology. 4, 7-30 (2005).</li><li>Reddy, R. P., Bakst, M. R., Wishart, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artificial+Insemination+of+broilers:+Economic+and+management+implications.">Artificial Insemination of broilers: Economic and management implications.</a> Proceedings of 1st International Symposium on Artificial Insemination of Poultry. Poultry Science Association. , 73-89 (1995).</li><li>Howarth, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Examination+for+Sperm+Capacitation+in+the+Fowl.">An Examination for Sperm Capacitation in the Fowl.</a> Biology of Reproduction. 3, 338-341 (1971).</li><li>Menkveld, R., Holleboom, C. A. G., Rhemrev, J. P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+and+significance+of+sperm+morphology.">Measurement and significance of sperm morphology.</a> Asian Journal of Andrology. 13, 59-68 (2011).</li><li>Kumaresan, A., Johannisson, A., Al-Essawe, E. M., Morrell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+viability,+reactive+oxygen+species,+and+DNA+fragmentation+index+combined+can+discriminate+between+above-+and+below-average+fertility+bulls.">Sperm viability, reactive oxygen species, and DNA fragmentation index combined can discriminate between above- and below-average fertility bulls.</a> Journal of Dairy Science. 100, 5824-5836 (2017).</li><li>Froman, D. P., McLean, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Objective+measurement+of+sperm+motility+based+upon+sperm+penetration+of+Accudenz.">Objective measurement of sperm motility based upon sperm penetration of Accudenz.</a> Poultry Science. 75, 776-784 (1996).</li><li>Zaneveld, L. J., De Jonge, C. J., Anderson, R. A., Mack, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+sperm+capacitation+and+the+acrosome+reaction.">Human sperm capacitation and the acrosome reaction.</a> Human Reproduction. 6 (9), 1265-1274 (1991).</li><li>Ahammad, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acrosome+reaction+of+fowl+sperm:+Evidence+for+shedding+of+acrosomal+cap+in+intact+form+to+release+acrosomal+enzyme.">Acrosome reaction of fowl sperm: Evidence for shedding of acrosomal cap in intact form to release acrosomal enzyme.</a> Poultry Science. 92 (3), 798-803 (2013).</li><li>Ahammad, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturational+changes+in+motility,+acrosomal+proteolytic+activity,+and+penetrability+of+the+inner+perivitelline+layer+of+fowl+sperm,+during+their+passage+through+the+male+genital+tract.">Maturational changes in motility, acrosomal proteolytic activity, and penetrability of the inner perivitelline layer of fowl sperm, during their passage through the male genital tract.</a> Theriogenology. 76 (6), 1100-1109 (2011).</li><li>Chalah, T., Brillard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+assessment+of+fowl+sperm+viability+by+eosin-nigrosin+and+dual+fluorescence.">Comparison of assessment of fowl sperm viability by eosin-nigrosin and dual fluorescence.</a> Theriogenology. 50 (3), 487-493 (1998).</li><li>Aitken, R. J., West, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+relationship+between+reactive+oxygen+species+production+and+leukocyte+infiltration+in+fractions+of+human+semen+separated+on+Percoll+gradients.">Analysis of the relationship between reactive oxygen species production and leukocyte infiltration in fractions of human semen separated on Percoll gradients.</a> International Journal of Andrology. 13, 433-451 (1990).</li><li>Mortimer, D., Mortimer, S. T., Carrell, D., Aston, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Density+Gradient+Separation+of+Sperm+for+Artificial+Insemination.">Density Gradient Separation of Sperm for Artificial Insemination.</a> Spermatogenesis. Methods in Molecular Biology (Methods and Protocols. , 927 (2013).</li><li>Qingling, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Processing+of+semen+by+density+gradient+centrifugation+selects+spermatozoa+with+longer+telomeres+for+assisted+reproduction+techniques.">Processing of semen by density gradient centrifugation selects spermatozoa with longer telomeres for assisted reproduction techniques.</a> Reproductive BioMedicine Online. 31, 44-50 (2015).</li><li>Moohan, J. M., Lindsay, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spermatozoa+selected+by+a+discontinuous+Percoll+density+gradient+exhibit+better+motion+characteristics,+more+hyperactivation,+and+longer+survival+than+direct+swim-up.">Spermatozoa selected by a discontinuous Percoll density gradient exhibit better motion characteristics, more hyperactivation, and longer survival than direct swim-up.</a> Fertility and Sterility. 64 (1), 160-165 (1995).</li><li>Paulson, J. D., Polakoski, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+glass+wool+column+procedure+for+removing+extraneous+material+from+human+ejaculate.">A glass wool column procedure for removing extraneous material from human ejaculate.</a> Fertility and Sterility. 28, 178-181 (1977).</li><li>Ahammad, M. U., Chiaki, N., Tatemoto, H., Kawamoto, Y., Nakada, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilization+of+the+swim-up+migration+sedimentation+technique+to+separate+viable+and+progressively+motile+fowl+spermatozoa.">Utilization of the swim-up migration sedimentation technique to separate viable and progressively motile fowl spermatozoa.</a> World's Poultry Science Association Proceedings. , (2010).</li><li>Lucena, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+motile+sperm+using+the+migration-sedimentation+technique+in+an+in+vitro+fertilization-embryo+transfer+programme.">Recovery of motile sperm using the migration-sedimentation technique in an in vitro fertilization-embryo transfer programme.</a> Human Reproduction. 4 (2), 163-165 (1989).</li><li>Henkel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+Processing+for+IVF.">Sperm Processing for IVF.</a> Clinical Embryology: A Practical Guide. , (2013).</li><li>Sherman, J., Paulson, D., Liu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+glass+wool+filtration+on+ultrastructure+of+human+spermatozoa.">Effect of glass wool filtration on ultrastructure of human spermatozoa.</a> Fertility and Sterility. 36, 643-647 (1981).</li><li>Freund, M., Carol, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+haemocytometer+counts+of+sperm+concentration+in+human+semen.">Factors affecting haemocytometer counts of sperm concentration in human semen.</a> Journal of Reproduction and Fertility. 8, 149-155 (1964).</li><li>Bakst, M. R., Wishart, G. J., Brillard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oviducal+sperm+selection,+transport+and+storage+in+poultry.">Oviducal sperm selection, transport and storage in poultry.</a> Poultry Science Review. 5, 117-143 (1994).</li><li>Ahammad, M. U., Okamoto, S., Kawamoto, Y., Nakada, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+regular+fluid+secretion+from+the+uterus+of+laying+hens+on+the+longevity+and+fertilization+ability+of+fowl+sperm+in+the+oviduct.">The effects of regular fluid secretion from the uterus of laying hens on the longevity and fertilization ability of fowl sperm in the oviduct.</a> Poultry Science Journal. 1 (1), 13-22 (2013).</li><li>Ahammad, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturational+changes+in+the+survivability+and+fertility+of+fowl+sperm+during+their+passage+through+the+male+reproductive+tract.">Maturational changes in the survivability and fertility of fowl sperm during their passage through the male reproductive tract.</a> Animal Reproduction Science. 128 (1-4), 129-136 (2011).</li><li>Choi, K. H., Emery, D. A., Straub, D. E., Lee, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percoll+process+can+improve+semen+quality+and+fertility+in+turkey+breeders.">Percoll process can improve semen quality and fertility in turkey breeders.</a> Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. 12 (5), 702-707 (1999).</li><li>Chen, M. J., Bongso, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+evaluation+of+two+density+gradient+preparations+for+sperm+separation+for+medically+assisted+conception.">Comparative evaluation of two density gradient preparations for sperm separation for medically assisted conception.</a> Human Reproduction. 14 (3), 759-764 (1999).</li></ol>

फर्टिलिटी न केवल पशु उत्पादन की लाभप्रदता को निर्धारित करता है बल्कि अस्तित्व के लिए प्रजातियों के प्राकृतिक चयन के साधन के रूप में भी कार्य करता है । एक शुक्राणु कोशिका के अंतिम समारोह के लिए एक डिंब ?...

रीढ़ में, पुरुष gametes गहन चयनात्मक दबाव से गुजरना; इसलिए एक पुरुष के प्रजनन स्वास्थ्य सफल निषेचन प्राप्त करने के लिए निर्णायक है । किसी भी हड्डीवाला प्रजातियों के पुरुषों के लिए बड़ी मात्रा में शुक्राणु कोशिकाओं का उत्पादन और पर्याप्त गुणवत्ता के क्रम में निषेचन की जरूरतों को पूरा करने में सक्षम होना चाहिए । शुक्राणु कोशिकाओं, दोनों एक शुक्राणु सिर और एक flagellum, शरीर में सबसे ध्रुवीय कोशिकाओं रहे हैं । वे भी शुक्राणु की गुणवत्ता में बहुत विषम है (रहते है और मृत, आकृति विज्ञान सामांय और असामांय, और मोबाइल, कम मोबाइल और उच्च मोबाइल), जो पुरुषों की प्रजनन क्षमता में व्यापक भिंनता के माध्यम से पता चला है । बड़े उच्च गुणवत्ता वाले शुक्राणु के अनुपात, कम करने के लिए सफलतापूर्वक डिंब निषेचन के लिए आवश्यक संभोग की संख्या । हालांकि, प्रजनन क्षमता को प्राप्त करने के लिए, आकृति विज्ञान सामांय शुक्राणु कोशिकाओं उनके कशाभिका द्वारा उत्पंन करने के लिए निषेचन के स्थल तक पहुंचने के रूप में अच्छी तरह के रूप में zona pellucida1 (जिला परिषद; स्तनधारियों के मामले में) या भीतरी perivitelline में घुसना बलों पर भरोसा परत2 (IPVL; पक्षियों और सरीसृप के मामले में) के डिंब के बाद प्राकृतिक संभोग या कृत्रिम गर्भाधान (ऐ) । शुक्राणु की गुणवत्ता का निर्धारण सहायता प्राप्त प्रजनन प्रौद्योगिकियों में उपयोग के लिए आवश्यक है3 (कला) और प्रजनन पुरुषों के चयन ऐ कार्यक्रम4में इस्तेमाल किया जाएगा । दूसरी ओर, कला की सफलता केवल शुक्राणु की गुणवत्ता का सही मूल्यांकन पर निर्भर करता है । प्रयोगशाला परीक्षणों के एक नंबर शुक्राणु के कार्यात्मक विशेषताओं का निर्धारण करने के लिए विकसित किया गया है. सबसे महत्वपूर्ण मापदंडों शुक्राणु आकृति विज्ञान, व्यवहार्यता, गतिशीलता, समाई (एवियन शुक्राणु समाई5की आवश्यकता नहीं है), acrosome प्रतिक्रिया (AR; exocytosis और शुक्राणु सिर के acrosome से एक proteolytic एंजाइम की रिहाई), शुक्राणु जिला परिषद या IPVL के प्रवेश, और निषेचन6,7,8,9,10,11। अकेले प्रजनन के उपाय एक शुक्राणु जनसंख्या11के निषेचन की क्षमता का एक सटीक मूल्यांकन प्रदान नहीं करते । कई एक अंडा के निषेचन के लिए अग्रणी घटनाओं के उपाय व्यक्तिगत spermatocytes7के प्रदर्शन की एक उपयुक्त प्रतिनिधित्व के लिए अनुमति देते हैं ।
पद्धति शुक्राणु समारोह को मापने के लिए विकसित मुख्य रूप से प्रजातियों विशेष है । उदाहरण के लिए, एवियन शुक्राणु में, व्यवहार्यता, गतिशीलता और IPVL के प्रवेश सबसे आम मानकों शुक्राणु गुणवत्ता8,11,12का आकलन करने के लिए उपयोग किया जाता है । बोल पड़ना में जीने शुक्राणु की संख्या शुक्राणु के अस्तित्व के लिए एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है क्योंकि वीर्य में मृत शुक्राणु की एक बड़ी संख्या की उपस्थिति शुक्राणु की गुणवत्ता को प्रभावित करता है । इस वीर्य में प्रतिक्रियाशील ऑक्सीजन प्रजातियों के उत्पादन को बढ़ाता है और जीना शुक्राणु13के लिए ऑक्सीडेटिव क्षति का कारण बनता है । शुक्राणु गतिशीलता, शरीर के तापमान पर प्रतिरोध के खिलाफ एवियन शुक्राणु के flagellar आंदोलन के लिए क्षमता, निषेचन8के बारे में लाने में एक प्रत्यक्ष भूमिका निभाने के लिए जाना जाता है । यह अच्छी तरह से स्थापित है कि गतिशीलता सकारात्मक प्रजनन के साथ संबद्ध है और इसलिए,8प्रजनन क्षमता का एक प्राथमिक निर्धारक है । हालांकि, एक मोबाइल शुक्राणु भी एक एआर से गुजरना करने के लिए और IPVL11घुसना करने की क्षमता होनी चाहिए । IPVL प्रवेश परख हर शुक्राणु है कि11निषेचन की प्रक्रिया में भाग लेने के लिए खाते में ले लो ।
कला के आवेदन में, बोल पड़ना आमतौर पर उच्च गुणवत्ता वाले शुक्राणु की एकाग्रता को अधिकतम करने के लिए और कम गुणवत्ता वाले शुक्राणु की एकाग्रता को कम करने के क्रम में संसाधित है. वीर्य के संग्रह के बाद, उच्च गुणवत्ता वाले शुक्राणु के अनुपात के माध्यम से समृद्ध किया जा सकता शुक्राणु जुदाई प्रक्रियाओं आमतौर पर दोनों उद्योग और अनुसंधान प्रथाओं में इस्तेमाल किया. इन प्रक्रियाओं के कई विकसित किया गया है, सभी संबंधित लाभों और सीमाओं के साथ, लेकिन सभी शुक्राणु की विषम प्रकृति का उपयोग करने के लिए केवल उच्च निषेचन की क्षमता के साथ शुक्राणु इकट्ठा । इन प्रक्रियाओं में शामिल हैं शुक्राणु माइग्रेशन विधि, पालन स्तंभ निस्पंदन और घनत्व ग्रैडिएंट केंद्रापसारक (क्लब)14,15,16,17,18,19 , 20. उपलब्ध तकनीकों के अलावा, क्लब के लिए बहुत आसान हो पाया गया है, दोहराया, लागत प्रभावी और उच्च गुणवत्ता शुक्राणु की अधिकतम राशि अलग करने में कुशल के लक्ष्य के साथ कला में निषेचन की अधिकतम संभावना14 , 15. इसके अलावा, क्लब शुक्राणु कोशिका झिल्ली को हानिकारक नहीं है । इसके विपरीत, शुक्राणु प्रवास के तरीके केवल उत्तरोत्तर मोबाइल शुक्राणु18,19, एकत्र, लेकिन शुक्राणु की मात्रा बहुत कम है, यह18शुक्राणु की बड़ी मात्रा में इकट्ठा करने में अक्षम बना रही है, 20. पालन कॉलम निस्पंदन वीर्य17से अत्यधिक मोबाइल शुक्राणु छानने में बहुत कुशल है; हालांकि, यह शुक्राणु झिल्ली20,21के लिए हानिकारक हो जाता है ।
क्लब तकनीक में, घनत्व ढाल पैदा करने के लिए सबसे अधिक इस्तेमाल सब्सट्रेट Percoll है, जो कोलाइडयन सिलिका polyvinylpryrolidone में लेपित कणों के होते हैं । Percoll घनत्व ढाल केंद्रापसारक (PDGC) या तो सतत या निरंतर हो सकता है, लेकिन एक सतत ढाल सबसे अधिक उच्च उपज अलगाव के लिए अत्यधिक मोबाइल शुक्राणु13,16,20के लिए इस्तेमाल किया जाता है । एक सतत ढाल में, कम घनत्व मीडिया उच्च घनत्व मीडिया के ऊपर तैरता है, एक ढाल है कि एक शंकु ट्यूब के नीचे करने के लिए ऊपर से घनत्व में बढ़ जाती है बनाने । यह अलग घनत्व के दो मीडिया के बीच इंटरफेस पर सीमाएं बनाता है । PDGC की दक्षता दो कारकों से ली गई है: 1) व्यक्तिगत शुक्राणु कोशिकाओं और 2) के उच्च संरचनात्मक अखंडता के साथ शुक्राणु कोशिकाओं की प्रवृत्ति के लिए एक वृद्धि हुई घनत्व की आवेगी क्षमता । उच्च गतिशीलता के साथ शुक्राणु बेहतर कम घनत्व मीडिया से पार और एक उच्च घनत्व मीडिया में घुसना करने में सक्षम हैं । कम गतिशीलता शुक्राणु और अलग घनत्व के मीडिया के बीच इंटरफेस के द्वारा बनाई गई सीमा पर फंस बनने की संभावना है । उच्च संरचनात्मक अखंडता और गतिशीलता के साथ शुक्राणु कोशिकाओं को मृत, असामान्य या कम मोबाइल शुक्राणु कोशिकाओं की तुलना में एक उच्च घनत्व है करते हैं । जब केंद्रापसारक बल PDGC में लागू किया जाता है, इस ढाल में अपने संबंधित जगह के लिए विभिंन घनत्व के साथ शुक्राणु की आवाजाही की सुविधा ।
सामान्य व्यवहार में, PDGC के बाद किया जाता है, शंकु ट्यूब के नीचे उच्च प्रजनन क्षमता के साथ शुक्राणु की नरम गोली एकत्र की है, और शेष छोड़ दिया जाता है । हालांकि, इस तकनीक का एक आरसीएच लाभ अपने शुक्राणु कोशिकाओं को कई समूहों में गुणवत्ता अंतर के आधार पर अलग करने की क्षमता है । अनुसंधान प्रयोजनों के लिए, PDGC तकनीक का उपयोग गुणवत्ता की डिग्री से शुक्राणु की जुदाई शुक्राणु की गुणवत्ता के अध्ययन के लिए अनुमति देता है के रूप में यह शारीरिक, metabolomic और proteomic मतभेदों से संबंधित है । यहां, हम विस्तार के उद्देश्य कैसे इस तकनीक को गुणवत्ता से शुक्राणु अलग इस्तेमाल किया जा सकता है, साथ ही साथ गुणवत्ता में इन मतभेदों का प्रदर्शन, पहले से स्थापित eosin-nigrosin व्यवहार्यता के लिए महत्वपूर्ण धुंधला, गतिशीलता के लिए Accudenz परख, और शुक्राणु-IPVL का उपयोग penetrability के लिए बातचीत परख ।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:824px;" width="825">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Accudenz</td>
			<td style="width:323px;">Accurate Chemical and Scientific Corporation, Westbury, NY, USA</td>
			<td style="width:119px;">AN7050</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Percoll&#160;</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">P7828</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Schiff&#8217;s reagent</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">3952016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">TES</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">T1375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Eosin Y</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">E4009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nigrosin</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td align="right" style="width:119px;">198285</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ST 40R Centrifuge&#160;</td>
			<td style="width:323px;">Thermo Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td align="right" style="width:119px;">75004524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">DU 530 Life Sciences UV/Vis Spectrophotometer</td>
			<td style="width:323px;">Beckman Coulter, Brea, CA, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>No catalogue is found</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Olympus IX 71 Inverted Fluorescence and Phase Contrast Microscope</td>
			<td style="width:323px;">Olympus America Inc., PA, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>No catalogue is found</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sperm collection of differential quality using density gradient centrifugation

यौन प्रजनन में, एक महिला gamete के साथ एक पुरुष gamete या शुक्राणु कोशिका फ़्यूज़ निषेचन के बारे में लाने के लिए । हालांकि, निषेचन की क्षमता के साथ शुक्राणु कोशिकाओं की एक बड़ी संख्या में एक महिला gamete के साथ बातचीत करने के लिए निषेचन सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक हैं । जैसे, व्यक्तिगत शुक्राणु कोशिकाओं के निषेचन की क्षमता सफल प्रजनन के लिए महत्वपूर्ण है । घनत्व ढाल केंद्रापसारक एक reproducible के रूप में कई दशकों के लिए उपयोग किया गया है, तेज, कुशल, प्रभावी और अत्यंत अनुकूलनीय केवल उच्च गुणवत्ता वाले शुक्राणु एकत्र करने के लिए मदद की प्रजनन प्रौद्योगिकी में इस्तेमाल किया जाएगा । प्रोटोकॉल हम वर्णित सतत Percoll घनत्व ढाल केंद्रापसारक (PDGC) तकनीक के उपयोग पर ध्यान केंद्रित करने के लिए उनकी गुणवत्ता से मुर्गा शुक्राणु के तीन अलग आबादी अलग । हम कम, मध्यम और उच्च गुणवत्ता वाले शुक्राणु एकत्र करने में सक्षम थे । हम भी reproducible प्रोटोकॉल का वर्णन है कि उनकी व्यवहार्यता, गतिशीलता और penetrability का आकलन करके शुक्राणु की प्रजनन क्षमता का निर्धारण करना आवश्यक । उनकी गुणवत्ता PDGC तकनीक का उपयोग करके शुक्राणु का संग्रह सही और अच्छी तरह से विभेदक प्रजनन क्षमता के साथ शुक्राणु की विशेषता के लिए उपयोगी होगा ।

PDGC तकनीक सभी मापदंडों भर में गुणवत्ता की डिग्री से शुक्राणु के तीन परतों की अलग जुदाई में हुई । शुक्राणु उच्च घनत्व समाधान, उच्च और कम घनत्व समाधान और कम घनत्व समाधान के ऊपर एक कम गुणवत्ता की...

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Sperm Collection of Differential Quality Using Density Gradient Centrifugation

इस पत्र में, हम घनत्व ढाल केंद्रापसारक तकनीक और शुक्राणु फिजियोलॉजी अनुसंधान में अपने आवेदन के प्रदर्शन का वर्णन करने के लिए लक्ष्य ।

शुक्राणु का संग्रह विभेदक गुणवत्ता घनत्व ढाल केंद्रापसारक का उपयोग

In sexual reproduction, a male gamete or sperm cell fuses with a female gamete to bring about fertilization. However, a large number of sperm cells with ...

इस विधि से शुक्राणु शरीर विज्ञान के क्षेत्र में महत्वपूर्ण प्रश्नों के उत्तर देने में मदद मिल सकती है, जैसे शुक्राणु की गुणवत्ता के रासायनिक निर्धारक। इस तकनीक का मुख्य लाभ यह है कि वैकल्पिक तरीकों की तुलना में बड़ी मात्रा में नमूने को गुणवत्ता से अलग करने की क्षमता है, साथ ही अनुकूलनशीलता भी है। हालांकि यह विधि शुक्राणु की गुणवत्ता में अंतर में अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकती है, लेकिन इसे अन्य नमूनों जैसे मिश्रित सेल प्रकार या विभिन्न घनत्व वाले उपकोशिकीय घटकों पर भी लागू किया जा सकता है।शुरू करने के लिए, दो अलग-अलग ट्यूबों में दो 3 मिलीलीटर परकोल कमजोर पड़ने का काम करें। एक साफ टेस्ट ट्यूब में, पीबीएस के 2 मिलीलीटर के साथ वीर्य के नमूने के 1 मिलीलीटर को पतला करें। समाधान को मिलाने के लिए इसे धीरे-धीरे पाइप करें।एक बाँझ शंकु नली में कम घनत्व Percoll sollution के 3 मिलीलीटर जोड़ें। फिर, कम घनत्व परकोल समाधान के नीचे उच्च घनत्व परकोल समाधान के 3 मिलीलीटर सावधानी से पिपेट करें। शंकु नली को 45 डिग्री कोण पर झुकाते समय, परकोल घनत्व ढाल के शीर्ष पर पतला वीर्य के नमूने के 3 मिलीलीटर पिपेट करें।एक खाली ट्यूब तैयार करने के बाद, 20 मिनट के लिए 1500 जीएस पर दोनों ट्यूबों को अपकेंद्रित्र करें। बीमा करें कि अपकेंद्रण के बाद टब में वीर्य की तीन अलग-अलग परतें बन गई हैं। एक पिपेट का उपयोग वीर्य की तीन परतों को इकट्ठा करता है, जो शीर्ष परत से शुरू होता है, इसके बाद मध्य परत होती है, और ट्यूब के नीचे कठोर गोली के साथ समाप्त होती है।परतों में से प्रत्येक को बाँझ माइक्रो सेंट्रलाइज ट्यूब में स्थानांतरित करें। प्रत्येक वीर्य के नमूनों को पीबीएस के १.५ मिलीलीटर के साथ पतला करें और दस मिनट के लिए १५०० जीएस पर नमूनों को अपकेंद्रित्र करें । अंत में, सुपरनेट को बंद करें और पैलेटिटी बफर के साथ छर्रों का पुनर्गठन करें।इस प्रोटोकॉल में, परकोल घनत्व ढाल अपकेंद्रित्र तकनीक, या पीडीजीसी का उपयोग वीर्य के नमूने को तीन अलग-अलग परतों में अलग करने के लिए किया गया था। शुक्राणु उच्च घनत्व समाधान के नीचे एक उच्च गुणवत्ता वाली परत, उच्च और निम्न घनत्व समाधानों के बीच एक मध्यम गुणवत्ता वाली परत और कम घनत्व समाधान के ऊपर कम गुणवत्ता वाली परत में अलग होता है। शुक्राणु की गुणवत्ता में ये अंतर व्यवहार्यता, गतिशीलता और दंडीयता में अंतर से सबूत हैं।इस प्रक्रिया का प्रयास करते समय, यह याद रखना महत्वपूर्ण है कि नमूनों को कमरे के तापमान पर लाने की आवश्यकता है। पीडीजीसी की सफलता ढाल की सावधानीपूर्वक तैयारी के साथ-साथ अलग परतों के सावधानीपूर्वक संग्रह पर निर्भर है। इसके विकास के बाद, इस तकनीक ने एवियन प्रजातियों में प्रजनन क्षमता के जैव मार्कर का पता लगाने के लिए शुक्राणु perdiomics के क्षेत्र में हमारे शोध का मार्ग प्रशस्त किया।

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Harvesting Sperm and Artificial Insemination of Mice

फसल काटने वाले शुक्राणु और चूहे के कृत्रिम गर्भाधान

Rodents of the genus Peromyscus (deer mice) are the most prevalent native North American mammals.  Peromyscus species are used in a wide range of research ...

DNA Extraction from 0.22 &mu;M Sterivex Filters and Cesium Chloride Density Gradient Centrifugation

DNA Extraction from 0.22 ÃƒÅ½Ã‚Â¼M Sterivex Filters and Cesium Chloride Density Gradient Centrifugation

0.22 सुक्ष्ममापी Sterivex फ़िल्टर और सीज़ियम क्लोराइड घनत्व ढाल centrifugation से डीएनए निष्कर्षण

This method is used to extract high molecular weight genomic DNA from planktonic biomass concentrated on 0.22 &mu;M Sterivex filters that have been ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

ड्रोसोफिला भ्रूण में vivo centrifugation

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

Preparation of Quality Inositol Pyrophosphates

गुणवत्ता Inositol Pyrophosphates की तैयारी

Myo-inositol is present in nature either unmodified or in more complex phosphorylated derivates. Of the latest, the two most abundant in eukaryotic cells ...

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the I&middot;Cryo Kit

Mouse Sperm Cryopreservation and Recovery using the IÃƒâ€šÃ‚Â·Cryo Kit

माउस शुक्राणु cryopreservation और रिकवरी मैं · क्रायो किट का उपयोग

Thousands of new genetically modified (GM) strains of mice have been created since the advent of transgenesis and knockout technologies.  Many of these ...

Determination of Protein-ligand Interactions Using Differential Scanning Fluorimetry

अंतर स्कैनिंग fluorimetry का प्रयोग प्रोटीन ligand सहभागिता का निर्धारण

A wide range of methods are currently available for determining the dissociation constant between a protein and interacting small molecules. However, most ...

Isolation of Intact Mitochondria from Skeletal Muscle by Differential Centrifugation for High-resolution Respirometry Measurements

उच्च संकल्प Respirometry माप के लिए अंतर centrifugation द्वारा कंकाल की मांसपेशी से बरकरार माइटोकॉन्ड्रिया के अलगाव

Mitochondria are involved in cellular energy metabolism and use oxygen to produce energy in the form of adenosine triphosphate (ATP). Differential ...

Avian Semen Collection by Cloacal Massage and Isolation of DNA from Sperm

Cloacal मालिश और शुक्राणु से डीएनए के अलगाव द्वारा एवियन वीर्य संग्रह

Collection of semen may be useful for a wide range of applications including studies involving sperm quality, sperm telomere dynamics, and epigenetics. ...

Fish Sperm Assessment Using Software and Cooling Devices

मछली शुक्राणु मूल्यांकन सॉफ्टवेयर और शीतलक उपकरणों का उपयोग

For gamete quality evaluation, there are innovative, rapid, and quantitative techniques that can provide useful data for aquaculture. Computerized systems ...

Field Identification of Matricaria chamomilla using a Portable qPCR System

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पोर्टेबल क्यूपीसीआर सिस्टम का उपयोग करके मैट्रिकिया चामोमिला की फील्ड पहचान

Quality control in botanical products begins with the raw material supply. Traditionally, botanical identification is performed through morphological ...