Name: sperm collection of differential quality using density gradient centrifugation
Uploaded: 2018-11-29T15:00:00
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ここで説明したすべてのメソッドは、機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) ジョージアの大学によって承認されています。
1. 伝統的なの遠心分離を用いた洗浄
<ol><li>リン酸緩衝液 (PBS) を準備します。8.0 g nacl、KCl、1.44 g Na2HPO4と KH2PO4 800 mL の蒸留水 (dH2O) 0.24 g の 0.2 g を追加します。0.1 N HCl を使用して 7.4 に pH を調整し、dH2</s...

<ol>
	<li>Spargo, S. C., Hope, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+and+nomenclature+of+the+zona+pellucida+gene+family.">Evolution and nomenclature of the zona pellucida gene family.</a> Biology Reproduction. 68, 358-362 (2003).</li><li>Okamura, F., Nishiyama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+passage+of+spermatozoa+through+the+vitelline+membrane+in+the+domestic+fowl,+Gallus+gallus.">The passage of spermatozoa through the vitelline membrane in the domestic fowl, Gallus gallus.</a> Cell and Tissue Research. 188 (3), 497-508 (1978).</li><li>Henkel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+function+and+assisted+reproduction+technology.">Sperm function and assisted reproduction technology.</a> Reproductive Medicine and Biology. 4, 7-30 (2005).</li><li>Reddy, R. P., Bakst, M. R., Wishart, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Artificial+Insemination+of+broilers:+Economic+and+management+implications.">Artificial Insemination of broilers: Economic and management implications.</a> Proceedings of 1st International Symposium on Artificial Insemination of Poultry. Poultry Science Association. , 73-89 (1995).</li><li>Howarth, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Examination+for+Sperm+Capacitation+in+the+Fowl.">An Examination for Sperm Capacitation in the Fowl.</a> Biology of Reproduction. 3, 338-341 (1971).</li><li>Menkveld, R., Holleboom, C. A. G., Rhemrev, J. P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+and+significance+of+sperm+morphology.">Measurement and significance of sperm morphology.</a> Asian Journal of Andrology. 13, 59-68 (2011).</li><li>Kumaresan, A., Johannisson, A., Al-Essawe, E. M., Morrell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+viability,+reactive+oxygen+species,+and+DNA+fragmentation+index+combined+can+discriminate+between+above-+and+below-average+fertility+bulls.">Sperm viability, reactive oxygen species, and DNA fragmentation index combined can discriminate between above- and below-average fertility bulls.</a> Journal of Dairy Science. 100, 5824-5836 (2017).</li><li>Froman, D. P., McLean, D. 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U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acrosome+reaction+of+fowl+sperm:+Evidence+for+shedding+of+acrosomal+cap+in+intact+form+to+release+acrosomal+enzyme.">Acrosome reaction of fowl sperm: Evidence for shedding of acrosomal cap in intact form to release acrosomal enzyme.</a> Poultry Science. 92 (3), 798-803 (2013).</li><li>Ahammad, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturational+changes+in+motility,+acrosomal+proteolytic+activity,+and+penetrability+of+the+inner+perivitelline+layer+of+fowl+sperm,+during+their+passage+through+the+male+genital+tract.">Maturational changes in motility, acrosomal proteolytic activity, and penetrability of the inner perivitelline layer of fowl sperm, during their passage through the male genital tract.</a> Theriogenology. 76 (6), 1100-1109 (2011).</li><li>Chalah, T., Brillard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+assessment+of+fowl+sperm+viability+by+eosin-nigrosin+and+dual+fluorescence.">Comparison of assessment of fowl sperm viability by eosin-nigrosin and dual fluorescence.</a> Theriogenology. 50 (3), 487-493 (1998).</li><li>Aitken, R. J., West, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+relationship+between+reactive+oxygen+species+production+and+leukocyte+infiltration+in+fractions+of+human+semen+separated+on+Percoll+gradients.">Analysis of the relationship between reactive oxygen species production and leukocyte infiltration in fractions of human semen separated on Percoll gradients.</a> International Journal of Andrology. 13, 433-451 (1990).</li><li>Mortimer, D., Mortimer, S. T., Carrell, D., Aston, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Density+Gradient+Separation+of+Sperm+for+Artificial+Insemination.">Density Gradient Separation of Sperm for Artificial Insemination.</a> Spermatogenesis. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spermatozoa+selected+by+a+discontinuous+Percoll+density+gradient+exhibit+better+motion+characteristics,+more+hyperactivation,+and+longer+survival+than+direct+swim-up.">Spermatozoa selected by a discontinuous Percoll density gradient exhibit better motion characteristics, more hyperactivation, and longer survival than direct swim-up.</a> Fertility and Sterility. 64 (1), 160-165 (1995).</li><li>Paulson, J. D., Polakoski, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+glass+wool+column+procedure+for+removing+extraneous+material+from+human+ejaculate.">A glass wool column procedure for removing extraneous material from human ejaculate.</a> Fertility and Sterility. 28, 178-181 (1977).</li><li>Ahammad, M. U., Chiaki, N., Tatemoto, H., Kawamoto, Y., Nakada, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilization+of+the+swim-up+migration+sedimentation+technique+to+separate+viable+and+progressively+motile+fowl+spermatozoa.">Utilization of the swim-up migration sedimentation technique to separate viable and progressively motile fowl spermatozoa.</a> World's Poultry Science Association Proceedings. , (2010).</li><li>Lucena, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+motile+sperm+using+the+migration-sedimentation+technique+in+an+in+vitro+fertilization-embryo+transfer+programme.">Recovery of motile sperm using the migration-sedimentation technique in an in vitro fertilization-embryo transfer programme.</a> Human Reproduction. 4 (2), 163-165 (1989).</li><li>Henkel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sperm+Processing+for+IVF.">Sperm Processing for IVF.</a> Clinical Embryology: A Practical Guide. , (2013).</li><li>Sherman, J., Paulson, D., Liu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+glass+wool+filtration+on+ultrastructure+of+human+spermatozoa.">Effect of glass wool filtration on ultrastructure of human spermatozoa.</a> Fertility and Sterility. 36, 643-647 (1981).</li><li>Freund, M., Carol, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+affecting+haemocytometer+counts+of+sperm+concentration+in+human+semen.">Factors affecting haemocytometer counts of sperm concentration in human semen.</a> Journal of Reproduction and Fertility. 8, 149-155 (1964).</li><li>Bakst, M. R., Wishart, G. J., Brillard, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oviducal+sperm+selection,+transport+and+storage+in+poultry.">Oviducal sperm selection, transport and storage in poultry.</a> Poultry Science Review. 5, 117-143 (1994).</li><li>Ahammad, M. U., Okamoto, S., Kawamoto, Y., Nakada, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+regular+fluid+secretion+from+the+uterus+of+laying+hens+on+the+longevity+and+fertilization+ability+of+fowl+sperm+in+the+oviduct.">The effects of regular fluid secretion from the uterus of laying hens on the longevity and fertilization ability of fowl sperm in the oviduct.</a> Poultry Science Journal. 1 (1), 13-22 (2013).</li><li>Ahammad, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturational+changes+in+the+survivability+and+fertility+of+fowl+sperm+during+their+passage+through+the+male+reproductive+tract.">Maturational changes in the survivability and fertility of fowl sperm during their passage through the male reproductive tract.</a> Animal Reproduction Science. 128 (1-4), 129-136 (2011).</li><li>Choi, K. H., Emery, D. A., Straub, D. E., Lee, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percoll+process+can+improve+semen+quality+and+fertility+in+turkey+breeders.">Percoll process can improve semen quality and fertility in turkey breeders.</a> Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. 12 (5), 702-707 (1999).</li><li>Chen, M. J., Bongso, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+evaluation+of+two+density+gradient+preparations+for+sperm+separation+for+medically+assisted+conception.">Comparative evaluation of two density gradient preparations for sperm separation for medically assisted conception.</a> Human Reproduction. 14 (3), 759-764 (1999).</li></ol>

不妊治療は、動物生産の収益性を決定するだけでなく、存在のための種の自然淘汰の手段としても機能します。精子細胞の究極の機能は、卵子を受精することです。女性の卵管は卵子23,24の受精を保障するためにそれらの適者生存精子のみを選択します。生体外研究も質的な精子と受精成功4,11,...

脊椎動物、雄性配偶子を受ける強烈な選択圧;したがって男性の生殖のフィットネス、成功受精を達成するために極めて重要です。すべての脊椎動物種の男性は、受精のニーズを満たすために十分な品質と大量に精子細胞を生成できる必要があります。精子細胞、精子頭部と、鞭毛を持つは、体内で最も偏光セルです。また、精子の質の非常に異質です (ライブと死んで、形態学的正常と異常、および不動、低モバイル、高モバイル)、男性の生殖効率の変動幅を明らかには。なるほどの正常に卵子を受精に必要な交配の数は減りますが、質の高い精子の割合。しかし、不妊治療を達成するために形態学的に正常精子細胞はオスミウム酸1を浸透するも受精のサイトに到達する彼らの鞭毛によって生成された推進力に頼る (ZP 哺乳類の場合) または内部囲レイヤー2 (IPVL の鳥類と爬虫類の場合) 次の自然交配または人工授精 (AI) 卵子の。精子を決定する品質は生殖補助医療技術3 (アート) で使用するために必要な AI で使用される繁殖の男性の選択プログラム4。その一方で、アートの成功はもっぱら精子の質の正確な評価に依存します。多くの検査は精子の機能の特性を決定する開発されています。最も重要なパラメーターは、精子形態、生存率、モビリティ、精子 (鳥精子受精5は必要ありません)、精子、精子先体反応 (AR; エキソサイトーシスと精子頭部の先体からの蛋白分解酵素の放出)ZP や IPVL、受精6,7,8,9,10,11の浸透。不妊治療だけでの対策では、精子人口11の受精能力の正確な評価は提供しません。受精卵が受精に至るまでいくつかのイベントの対策個別精母細胞7のパフォーマンスの適切な表現を可能にします。
精子機能を測定するために開発された方法論は、主に種特異的です。たとえば、鳥の精子の生存率、移動性および IPVL の浸透、精子品質8,11,12を評価するために使用される最も一般的なパラメーター。射精のライブ精子の数は、死者の精子精液中の多数の存在が精子の質に影響するので精子の生存のための重要な役割を果たしています。これは、精液における活性酸素種の生産を高め、ライブ精子13に酸化的損傷を引き起こします。精子移動、体の温度、抵抗に対して鳥精子の鞭毛運動のための能力は、受精8について持って来ることで直接的な役割を再生する知られています。モビリティが不妊とは正の相関し、は、したがって、不妊治療8の主要な決定要因は、定着します。ただし、モバイルの精子には AR を受けると IPVL11を貫通する能力も必要です。IPVL 浸透アッセイ受精11の過程で関与するすべての精子を考慮に入れます。
アートのアプリケーションで射精は通常質の高い精子の濃度を最大化し、低品質の精子の濃度を最小限にするために処理されます。精液の採取後、業界と研究実践でよく使用される精子分離手順高品質精子の割合を濃縮することができます。これらの手順の多くが開発されているすべてをそれぞれの利点と制限事項が、すべては異種精子受精能力の高い精子だけを収集する性質を利用します。精子の移行方法、遵守列ろ過密度勾配遠心法 (DGC)14,15,16,17,18,19などの手順,20します利用可能な技術の中で DGC 非常にシンプルでコスト効果の高い、反復可能で受精14のチャンスを最大化することを目標にアート用高品質精子の最大の量を分離することで効率的に発見されました。,15します。 さらに、DGC は精子細胞膜に有害ではないです。対照的に、精子の移行方法収集だけ徐々 にモバイル精子18,19, が収集した精子の量が非常に低く、大量の精子18,の収集に非効率的なこと20. 付着列ろ過は精液17から機動性の高い精子をフィルタ リングで非常に効率的ただし、精子膜20,21に害がある傾向にあります。
密度勾配を生成するための最も一般的に使用される基板は、DGC 技術 Percoll polyvinylpryrolidone でコーティングしたコロイド状シリカ粒子から成っています。連続または不連続パーコール密度勾配遠心法 (PDGC) を指定できますが、不連続勾配は機動性の高い精子13,16,20の高収率分離でよく使用されます。不連続勾配の低い密度メディアに浮かんで高密度メディア、円錐管の底に上から密度が増加するグラデーションを作成します。これは異なる密度の 2 つのメディア間のインターフェイスに境界を作成します。PDGC の効率は 2 つの要因から派生した: 1) 個々 の精子細胞と 2) 密度が増加する構造的整合性が高い精子細胞の傾向の推進能力。高いモビリティと精子、低密度メディアからクロスし、高密度メディアに浸透することができます。低い機動性精子は異なる密度の媒体間のインターフェイスによって作成された境界に閉じ込めになるより可能性があります。高い構造健全性とモビリティの精子細胞は死んで、異常または低のモバイル精子細胞より高い密度を持っている傾向があります。PDGC で遠心力を適用すると、グラデーションの各場所に密度の異なる精子の動きこれ容易になります。
一般的な実習で PDGC を実行すると後は、円錐管の下部に潜在的な高い出生に精子の柔らかいペレットを収集すると、し、残りの部分は破棄されます。しかし、この手法の活用の利点は品質の違いに基づいていくつかのグループに精子細胞を分けるその機能です。研究用 PDGC 技術を活用した品質の程度によって精子の分離それは生理学的、メタボローム、プロテオームの違いに関係、精子の質の研究できます。モビリティ、および精子 IPVL 以前に確立されたエオシン nigrosin 生存率、生体染色、Accudenz の試金を使用して品質のこれらの違いを示すと同様、別の精子の品質によって、この手法を使用する方法の詳細をここでは、目指す透過性の相互作用アッセイ。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:824px;" width="825">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Accudenz</td>
			<td style="width:323px;">Accurate Chemical and Scientific Corporation, Westbury, NY, USA</td>
			<td style="width:119px;">AN7050</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Percoll&#160;</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">P7828</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Schiff&#8217;s reagent</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">3952016</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">TES</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">T1375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Eosin Y</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td style="width:119px;">E4009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nigrosin</td>
			<td style="width:323px;">Sigma-Aldrich, Corp., St. Louis, MO, USA</td>
			<td align="right" style="width:119px;">198285</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ST 40R Centrifuge&#160;</td>
			<td style="width:323px;">Thermo Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td align="right" style="width:119px;">75004524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">DU 530 Life Sciences UV/Vis Spectrophotometer</td>
			<td style="width:323px;">Beckman Coulter, Brea, CA, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>No catalogue is found</td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Olympus IX 71 Inverted Fluorescence and Phase Contrast Microscope</td>
			<td style="width:323px;">Olympus America Inc., PA, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>No catalogue is found</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

sperm collection of differential quality using density gradient centrifugation

有性生殖、雄性配偶子または精子細胞は、受精させる雌性配偶子の融合します。ただし、受精を保障する雌性配偶子と対話する能力を肥やすことで精子の数が多いが必要。など、個々 の精子の受精能力は、正常な再生のため重要です。密度勾配遠心法は、生殖補助医療に使用される質の高い精子だけを収集する再現性の高い、高速、効率的、効果的な非常に適応可能である方法として数十年間利用されています。我々 はここに記載されているプロトコルはその品質によってオンドリの精子の 3 つの異なる集団を隔離する不連続パーコール密度勾配遠心法 (PDGC) 技術の活用に焦点を当てます。低、中、高品質の精子を収集することができました。生存率、モビリティ、および透過性を評価することにより精子の決定の不妊の可能性を伴う再現性のあるプロトコルについて述べる。PDGC 技術を使用してその品質によって精子のコレクションは正確に有用であるし、徹底的に差分不妊治療の可能性と精子を特徴付けます。

PDGC 技術は、すべてのパラメーターの間で品質の程度によって精子の 3 つの層をはっきりと分離で起因しました。精子は高密度ソリューションより高いと低密度ソリューションと上記の低密度ソリューション低品質層間媒体品質層高品質レイヤーに分離します。これらの品質に違いは生存率 (図 4)、移動 (図 5) および浸透 (<...

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Sperm Collection of Differential Quality Using Density Gradient Centrifugation

本稿では、密度勾配遠心法と精子の生理学的研究への応用のパフォーマンスについて説明を目指します。

密度勾配遠心法を用いた差動品質の精液採取

In sexual reproduction, a male gamete or sperm cell fuses with a female gamete to bring about fertilization. However, a large number of sperm cells with ...

この方法は、精子の質の化学的確定などの精子生理学の分野で重要な質問に答えることができます。この手法の主な利点は、サンプルを品質で大量に分離する能力と、代替方法と比較した場合の適応性です。この方法は、精子の質の違いに関する洞察を提供することができますが、混合細胞タイプや異なる密度を持つ細胞内成分などの他のサンプルにも適用できます。まず、2つの別々のチューブに2つの3ミリリットルパーコール希釈液を作ります。きれいな試験管で、2ミリリットルのPBSで1ミリリットルの精液サンプルを希釈する。そっとパイプで溶液を混ぜます。滅菌の円錐管に低密度パーコールソリルションの3ミリリットルを加えます。次いで、より低密度のパーコール溶液の下に3ミリリットルの高密度パーコール溶液を慎重にピペット化する。45度の角度で円錐管を傾けながら、パーコール密度勾配の上に希釈精液サンプルのピペット3ミリリットル。ブランクチューブを調製した後、20分間1500 Gsで両方のチューブを遠心分離する。遠心分離後に、3つの異なる層の精液が浴槽に形成されていることを確認します。ピペットを使用すると、最上層から始まり、中央層で始まり、チューブの下部にある硬質ペレットで終わる3層の精液を収集します。各層を無菌マイクロ遠心管に移します。1.5ミリリットルのPBSで各精液サンプルを希釈し、サンプルを1500 Gsで1500 Gsで遠心分離します。最後に、上清を注ぎ、運動バッファーでペレットを再構成します。このプロトコルでは、パーコール密度勾配遠心分離技術(PDGC)を用いて、精液サンプルを3つの異なる層に分離した。精子は、高密度溶液より下の高品質の層、高密度溶液と低密度溶液の中間品質層、および低密度溶液の上の低品質層に分離する。精子の質のこれらの違いは、生存率の違いによって証明されます, 移動性, 浸透性.この手順を試みる際には、サンプルを室温にする必要があることを覚えておくことが重要です。PDGCの成功は、勾配の慎重な準備だけでなく、分離された層の慎重な収集に依存しています。開発後、この技術は、鳥類種の生殖能力のバイオマーカーを探求するために精子ペルディオミクスの分野での研究への道を開きました。

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Harvesting Sperm and Artificial Insemination of Mice

収穫精子とマウスの人工授精

Rodents of the genus Peromyscus (deer mice) are the most prevalent native North American mammals.  Peromyscus species are used in a wide range of research ...

DNA Extraction from 0.22 &mu;M Sterivex Filters and Cesium Chloride Density Gradient Centrifugation

DNA Extraction from 0.22 ÃƒÅ½Ã‚Â¼M Sterivex Filters and Cesium Chloride Density Gradient Centrifugation

0.22μmのSterivexフィルタおよび塩化セシウム密度勾配遠心分離からのDNA抽出

This method is used to extract high molecular weight genomic DNA from planktonic biomass concentrated on 0.22 &mu;M Sterivex filters that have been ...

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

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Preparation of Quality Inositol Pyrophosphates

品質イノシトールピロリン酸塩の調製

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Thousands of new genetically modified (GM) strains of mice have been created since the advent of transgenesis and knockout technologies.  Many of these ...

Determination of Protein-ligand Interactions Using Differential Scanning Fluorimetry

示差走査蛍光光度を用いたタンパク質 - リガンド相互作用の定量

A wide range of methods are currently available for determining the dissociation constant between a protein and interacting small molecules. However, most ...

Isolation of Intact Mitochondria from Skeletal Muscle by Differential Centrifugation for High-resolution Respirometry Measurements

高解像度の呼吸計測測定のための差動遠心分離することにより骨格筋から無傷ミトコンドリアの単離

Mitochondria are involved in cellular energy metabolism and use oxygen to produce energy in the form of adenosine triphosphate (ATP). Differential ...

Avian Semen Collection by Cloacal Massage and Isolation of DNA from Sperm

排せつマッサージと精子から DNA の隔離による鳥の精液採取

Collection of semen may be useful for a wide range of applications including studies involving sperm quality, sperm telomere dynamics, and epigenetics. ...

Fish Sperm Assessment Using Software and Cooling Devices

魚の精子の評価ソフトウェアを使用して、冷却装置

For gamete quality evaluation, there are innovative, rapid, and quantitative techniques that can provide useful data for aquaculture. Computerized systems ...

Field Identification of Matricaria chamomilla using a Portable qPCR System

Field Identification of Matricaria chamomilla using a Portable qPCR System

ポータブルqPCRシステムを用いた マトリカリアシャモミラ のフィールド同定

Quality control in botanical products begins with the raw material supply. Traditionally, botanical identification is performed through morphological ...