Name: multicolor flow cytometry-based quantification of mitochondria and lysosomes in t cells
Uploaded: 2019-01-09T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Multicolor Flow Cytometry-based Quantification of Mitochondria and Lysosomes in T Cells at JoVE.com

このプロトコルの開発は、セの許に台湾省、科学および技術 (ほとんど) NSC103-2320-B-010-002-MY2 と MOST104-2628-B-010-002-MY4 からの補助金によって支えられました。C. w. 魏優秀論文賞の微生物学と免疫学、国立陽明大学の受信者であります。

ここで説明されているマウス組織収穫手順は、機関動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) 国立陽明大学によって承認されています。
1. リンパ器官からのリンパ球懸濁液の準備
<ol><li>死を確保するための頚部転位続いて透明アクリル商工会議所での CO2吸入などの承認された方法でマウスを安楽死させます。 注意: 毎分商工会議所、および 5 つの psi (1 平方インチあ?...

<ol>
	<li>Buck, M. D., O'Sullivan, D., Pearce, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+metabolism+drives+immunity.">T cell metabolism drives immunity.</a> Journal of Experimental Medicine. 212 (9), 1345-1360 (2015).</li><li>Marelli-Berg, F. M., Fu, H., Mauro, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+metabolic+reprogramming+in+proliferating+cells:+implications+for+T-cell-mediated+immunity.">Molecular mechanisms of metabolic reprogramming in proliferating cells: implications for T-cell-mediated immunity.</a> Immunology. 136 (4), 363-369 (2012).</li><li>Pua, H. H., Guo, J., Komatsu, M., He, Y. 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J., Everts, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+metabolism.">Dendritic cell metabolism.</a> Nature Reviews Immunology. 15 (1), 18-29 (2015).</li><li>Dugnani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrating+T+cell+metabolism+in+cancer+immunotherapy.">Integrating T cell metabolism in cancer immunotherapy.</a> Cancer Letters. 411, 12-18 (2017).</li><li>Yang, Z., Matteson, E. L., Goronzy, J. J., Weyand, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+metabolism+in+autoimmune+disease.">T-cell metabolism in autoimmune disease.</a> Arthritis Research &amp; Therapy. 17 (1), 29 (2015).</li></ol>

このプロトコルは細胞器官特定の染料とミトコンドリア、リソソームの異なる T 細胞集団の量を定量化する染色表面マーカーを組み合わせたものです。このメソッドは、イムノブロット分析電子顕微鏡などの従来の方法で細胞数と均質性要件の制限を克服するために開発されました。稀な細胞集団の分析と同時に同時に複数のセルの種類を調べることで特に便利です。
?...

活性化し、T 細胞の増殖は、正常な免疫応答をマウントするための重要なステップです。最近の進歩は、細胞の代謝がしっかりと開発と T 細胞の機能の両方に関連付けられているが示唆されました。たとえば、ナイーブ T 細胞は、酸化的リン酸化 (OXPHOS) 二次リンパ器官の中で循環の中にエネルギー需要を満たすために大きく依存しています。起動時に、ナイーブ T 細胞は、抜本的な代謝リプログラミング、ATP の生産を増加し、細胞の分化と増殖の間に途方もない代謝要求を満たす好気性解糖作用の誘導を含むを受けます。代謝の必要なフォロースルーに失敗した細胞アポトーシス1,2で死ぬ。彼らは細胞小器官、細胞のエネルギー供給への ATP の生産に対する主な責任と代謝スイッチの中に細胞のミトコンドリアの内容が変動するので、ミトコンドリアが重要な役割を果たす代謝リプログラミング中T 中セルの開発と活性化3を実行します。ただし、不要なまたは破損したミトコンドリアの蓄積は、脂質、蛋白質および DNA を損傷し、最終的に細胞死4につながることができます余分な活性酸素を作り出すことができます。
代謝変化から生じる過剰なまたは破損しているミトコンドリアは、オートファジーの5、mitophagy として知られている特殊な形式で削除されます。ミトコンドリアはオートファゴソームで包装し、劣化のためリソソームと融合し。これらはミトコンドリアの間の通信を閉じてリソソームが大きな関心6,7を生成します。例えば、酸化ストレスがミトコンドリア由来の小胞 (MDVs) ホスファターゼとテンシン相同物 (PTEN) の劣化のリソソームを対象とを形成するミトコンドリアを刺激-推定のキナーゼ 1 (PINK1) を誘発、パーキン (E3 ユビキチンリ ガーゼ)依存する方法8.また、その mitophagy はベージュがかった白色脂肪細胞転移9,10のために不可欠に分られました。もっと重要なは、リソソームは単なる低下のコンパートメントだけでなく、細胞内シグナル伝達の調節因子ではありません。酵素不足による過剰な基板の蓄積はライソゾーム膜の透過性を混乱させることによってリソソーム機能不全の結果し、11の Ca2 +の恒常性に影響を与えます。ライソゾーム酸性リパーゼ (ラル)12またはリソゾーム代謝物トランスポーター ノックアウト マウス モデル13 T 細胞の機能的な欠陥は、T 細胞の恒常性を維持するためにさらにリソソームの重要性を示した。ミトコンドリア、リソソームは、細胞の代謝調節の不可分の部分です。したがって、細胞のミトコンドリア量の測定は、T 細胞の代謝と機能の状態を評価する重要な指標をされています。
イムノブロット、電子顕微鏡、蛍光抗体 (IF) 染色および pcr 法によるミトコンドリア DNA コピー数14,15,のアッセイ一般的細胞ミトコンドリア、リソソーム内容を定量化するために使用が含まれます16. イムノブロットできますさまざまなサンプルや電子顕微鏡は17これらの細胞内小器官の形態学的特徴を可視化できるかどうかにタンパク質レベルを定量的に比較して、これらの試金は特定の技術的な欠点ご。たとえば、それは十分な数の高倍率と分解能と細胞像を取得または低スループット方法と見なされますこれらのアッセイを行うサンプルの多数の間で蛋白質の表現のレベルを比較する時間です。さらに、これらのアッセイは、混合集団から成る組織サンプルでないのに細胞などの同種細胞集団にのみ適用できます。
また、最小セルの要件が 10 から番号を特殊な集団にこれらのアッセイを適用することは困難だ6 108はお会いすること。最後に、セルが通常分離か、さらに情報を抽出する他の方法と互換性がないそれらを作るプロセス中に固定します。従来の方法と比較して、蛍光を用いたフローサイトメトリーが比較的高いスループット - すべてサンプル内のセルから成る混合細胞集団の情報を分析および同時に収集できます。さらに、同じセルに 10 以上のパラメーターを検出、さらに試金のための所望の表現型を基にセルを並べ替えできます。反応性蛍光プローブは、リソソーム、細胞内のミトコンドリアをラベルに使用されているし、流れ cytometry18,19によって検出することができます。細胞小器官のこれらのプローブは、細胞透過性、細胞小器官や細胞内の特定の場所に集中することができます物理化学的特性を持っています。便利なマルチカラー解析に応用ができ、様々 な蛍光の形式でこれらのプローブがあります。
表面マーカー ラベル リソソームにリソソームやミトコンドリア固有染料で染色を結合する方法について詳しく説明このプロトコルまたはミトコンドリアが細胞を住んでいます。これは、主な組織や臓器は、しばしば異種細胞集団から成るから生成されるサンプルのため便利です。研究者は、表面マーカー発現によって興味のセル人口を識別し、これらの細胞の特定の細胞小器官染料をライソゾームやミトコンドリアの内容を具体的に測定できます。ここでは、主要な脾 T リンパ球サブポピュレーションのライソゾームまたはミトコンドリア質量が評価されるフローサイトメトリーによる解析の詳細な手順を示します。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:763px;" width="762">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">10 cm Graefe forceps (straight and serrated)</td>
			<td style="width:179px;">Dimeda</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">11 cm Iris scissors (straight with sharp/sharp heads)</td>
			<td>Dimeda</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">15 mL centrifuge tube</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">339650</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">5 mL syringe</td>
			<td style="width:179px;">TERUMO&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">6 cm Petri dish</td>
			<td style="width:179px;">&#945;-plus</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">70 &#181;m nylon cell strainer</td>
			<td style="width:179px;">SPL Lifesciences</td>
			<td style="width:119px;">93070</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">Ammonium chloride (NH4Cl) &#160;&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td style="width:119px;">A9434</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Anti-mouse CD25</td>
			<td style="width:179px;">Biolegend</td>
			<td style="width:119px;">102007</td>
			<td style="width:167px;">Clone:PC61</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Anti-mouse CD4</td>
			<td style="width:179px;">Biolegend</td>
			<td style="width:119px;">100453</td>
			<td style="width:167px;">Clone:GK1.5</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Anti-mouse CD44</td>
			<td style="width:179px;">Biolegend</td>
			<td style="width:119px;">103029</td>
			<td style="width:167px;">Clone:IM7</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Anti-mouse CD62L</td>
			<td style="width:179px;">Biolegend</td>
			<td style="width:119px;">104407</td>
			<td style="width:167px;">Clone:MEL-14</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Anti-mouse CD8</td>
			<td style="width:179px;">Biolegend</td>
			<td style="width:119px;">100713</td>
			<td style="width:167px;">Clone:53-6.7</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Anti-mouse TCR&#946;</td>
			<td style="width:179px;">Biolegend</td>
			<td style="width:119px;">109233</td>
			<td style="width:167px;">Clone:H57-579</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">BD LSRFortessa</td>
			<td style="width:179px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td style="width:179px;">Bio basic</td>
			<td style="width:119px;">6381-92-6</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:299px;">FALCON 5ml Polystyrene Round-Bottom Tube (FACS tube)</td>
			<td style="width:179px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;">352052</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">FcRgamma II (CD32) Hybridoma (2.4G2)</td>
			<td style="width:179px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">HB-197&#12288;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td style="width:179px;">Hyclone</td>
			<td>ATD161145</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Flowjo, LLC</td>
			<td style="width:179px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Hydroxyethyl piperazineethanesulfonic acid (HEPES)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H4034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">L-glutamine (200 mM)</td>
			<td style="width:179px;">Gibco</td>
			<td>A2916801</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">LysoTracker Green DND26</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">L7526</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">MEM Non-essential amino acids (100X)</td>
			<td style="width:179px;">Gibco</td>
			<td>11140050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">MitoTracker Green FM</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">M7514</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Penicillin-Streptomycin (10,000 U/mL)</td>
			<td style="width:179px;">Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Potassium bicarbonate (KHCO3)</td>
			<td style="width:179px;">J.T.baker</td>
			<td style="width:119px;">298-14-6</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Propidium iodide solution</td>
			<td style="width:179px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">25535-16-4</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">RPMI 1640 medium (powder)</td>
			<td style="width:179px;">Gibco</td>
			<td>31800089</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sodium bicarbonate (NaHCO3)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:299px;">Sodium pyruvate (100 mM)</td>
			<td style="width:179px;">Gibco</td>
			<td>11360070</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

multicolor flow cytometry-based quantification of mitochondria and lysosomes in t cells

T 細胞は、分化と増殖中に機能的なニーズに合わせて、さまざまな代謝プログラムを利用します。ミトコンドリアは細胞エネルギーの供給を行う重要な細胞成分です。ただし、過剰なミトコンドリアも細胞死を引き起こすことができる活性酸素種 (ROS) を生成します。したがって、ミトコンドリアの数は、細胞のニーズに合わせて常に調整する必要があります。このダイナミック制御は、一部剰余金/破損した細胞内小器官と高分子削除リソソームの機能によって実現されます。したがって、細胞のミトコンドリア、リソソーム内容は、細胞の代謝の調整を評価する重要な指標です。細胞内小器官のためのプローブの開発と、よ特徴付けられたリソソームやミトコンドリア固有染料細胞リソソーム、ミトコンドリアのラベルに様々 なフォーマットで利用可能になっています。フローサイトメトリー マルチ カラー プロファイル細胞の表現型に共通のツール、他の試金と統合する機能です。ここでは、流れの cytometer でリソソームと異なる T 細胞集団におけるミトコンドリアの量を測定する染色表面マーカーと細胞小器官特定の染料を結合する方法の詳細なプロトコルを提案する.

脾臓と胸腺における主要な T 細胞サブセットの同定
簡単に言えば、脾臓と胸腺から単一細胞懸濁液された赤い血球の分離、2.4G2 上清を添加して、続いて細胞小器官特定の色素と蛍光色素標識された抗体 (表 1) 染色表面マーカー。発達進行胸腺細胞の共受容体に抗体を用いた記述できます CD4 と CD8?...

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Multicolor Flow Cytometry-based Quantification of Mitochondria and Lysosomes in T Cells

この記事は、ミトコンドリアや細胞内のリソソームを定量化する強力な方法を示しています。リソソームやミトコンドリア固有染料表面マーカー蛍光に活用された抗体との組み合わせにより、初代培養細胞を用いた組織サンプルから収穫のような混合細胞集団におけるこれらのオルガネラの定量化フローサイトメトリー マルチ カラー。

ミトコンドリア、リソソーム T 細胞のマルチカラー フロー フローサイトメトリーを用いた定量化

T cells utilize different metabolic programs to match their functional needs during differentiation and proliferation. Mitochondria are crucial cellular ...

この方法は、免疫代謝分野における重要な質問に答える手助けとなります。この技術の利点は、異なる細胞タイプの複雑な混合物中で、個々の生細胞におけるミトコンドリアまたはリソソームの定量化を可能にすることである。T細胞およびB細胞を研究するためのこの方法は、マクロファージ、樹状細胞、または組織サンプルから採取された任意の一次細胞のような他の多くの細胞タイプにも適用することができる。この手順は、私の研究室の大学院生であるチンウェン・ウェイによって実証されます。定量のためにオルガネラにラベルを付けるには、まず、6番目のマウスT細胞に10回10回、マーカーごとに1つの丸い底のファックスチューブに1回追加します。遠心分離により細胞をペレット化する。37°Cに摂氏血清フリー培養培地に予め温め、オルガネラ特異的プローブストック溶液を培地中の最終的な作業濃度に希釈する。そして、チューブ当たり100マイクロリットルのプローブ染料で細胞を再懸濁する。次に、細胞培養インキュベーター内で適切な染色期間をインキュベートし、チューブ当たり1ミリリットルの氷冷ファックスバッファーでインキュベーション終了時の反応を停止する。次いで、別の遠心分離で細胞を収集し、氷上で前滴定された24G2ハイブリドーマ上清の100マイクロリットルでペレットを再懸濁する。10分後、チューブあたり1ミリリットルのファックスバッファを追加します。遠心分離によって細胞を収集し、対象の事前滴定蛍光結合抗体カクテルの50マイクロリットルで細胞にラベルを付けます。表に従って適切な濃度を加えます。そして、光から保護された氷の上で20分間ファックスバッファ。インキュベーションの終わりに、チューブあたり1ミリリットルのファックスバッファーを追加します。遠心分離によって細胞を収集します。そして、ヨウ化プロピジウム1ミリリットル当たり1マイクログラムで補ったファックスバッファーの300マイクロリットルで細胞を再懸濁する。核および染色体カウンターステインを添加した直後に、フローサイトメーター分析コンピュータ、フローサイトメーター、ファクス取得ソフトウェア、および機械プラットフォームに応じて他のアクセサリデバイスをオンにします。システムを通して約1分間PBSを実行し、フローラインがPBSとシーザバッファで満たされていることを確認します。新しい実験を開き、メーカーの指示に従ってサイトメーターのパラメータを設定します。70マイクロメートルの細胞のストレーナーを通して細胞をフィルターします。そして、各サンプルの取得前に渦は、塊やダブレット形成を避けるために。[自動補正]設定を開き、各蛍光パラメータにドットプロットを作成します。すべての電圧を設定した後、補正を調整し、サンプルに補正を適用します。前方散布図対側面散布図を作成し、対象セルがプロット内に表示されるように電圧を最適化します。前方散布図と前方散乱高さプロットを作成し、単一セルにゲートを付けます。前方散乱領域対側面散乱領域プロットを作成し、リンパ球をゲートします。ヨウ化プロピジウムプロットとの前方散乱領域を作成し、生きた細胞をゲートします。すべての電圧を設定した後、補正を調整し、サンプルに補正を適用します。次に、最初のサンプルチューブをロードし、適切なセル表面マーカープロットを作成し、対象の母集団の少なくとも1,000個のイベントを収集します。すべてのサンプルが実行されたら、後続の分析のためにフローデータをエクスポートします。そして、将来的に同様の実験のためにサイトメーターの設定とパラメータを保存するためのテンプレートとして実験を保存します。最終部位のミトコンドリア内容物は、二重陰性1T細胞において最も低く、二重陰性ステージ2および3でピークを迎え、二重陰性ステージ4でわずかに減少する。二重陽性胸腺細胞はCD4およびCD8単一陽性胸腺細胞よりも多くのミトコンドリアを示し、ミトコンドリアの内容物が発達中に変動することを示唆している。CD4およびCD8単一陽性胸腺細胞は、脾臓CD4またはCD8 T細胞よりも高いミトコンドリア平均蛍光強度を示し、酸素が豊富な血液環境で再循環するナイーブT細胞は、胸腺細胞よりもさらに低いミトコンドリア質量を有することを示唆している。興味深いことに、このミトコンドリア内容物の減少はCD8においてCD4T細胞系統よりも顕著であり、そしてT細胞活性化はこれらのオルガネラの存在をさらに減少させる。比較的低いが検出可能なリソソーム内容物は、すべての胸腺細胞集団において観察され、二重陰性の1つの胸腺細胞においてより顕著な存在である。周辺では、比較的多くのリソソームがメモリおよびエフェクターCD8陽性T細胞で検出される。細胞質特異的な色素と表面マーカーをフローサイトメトリーと組み合わせることは、複雑な混合物中の細胞の代謝状態を特徴付ける強力な方法です。追加のオルガネラ特異的な色素は、小胞体、オートファジー性空胞体、または他の細胞内の関心のある区画を検出するために使用することができる。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Multicolor Flow Cytometry Analyses of Cellular Immune Response in Rhesus Macaques

アカゲザルの細胞性免疫応答のマルチカラーフローサイトメトリー解析

The rhesus macaque model is currently the best available model for HIV-AIDS with respect to understanding the pathogenesis as well as for the development ...

Retroviral Transduction of T-cell Receptors in Mouse T-cells

マウスT細胞におけるT細胞受容体のレトロウイルス導入

T-cell receptors (TCRs) play a central role in the immune system. TCRs on T-cell surfaces can specifically recognize peptide antigens presented by antigen ...

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

piggyBac Transposon System Modification of Primary Human T Cells

プライマリーヒトT細胞のpiggyBacトランスポゾンシステムの変更

The piggyBac transposon system is naturally active, originally derived from the cabbage looper moth1,2. This non-viral system is plasmid based, most ...

The Use of Flow Cytometry to Assess the State of Chromatin in T Cells

T細胞におけるクロマチンの状態を評価するためにフローサイトメトリーの使用

During a proper immune response, quiescent T cells become activated upon antigen presentation to their antigen-specific T cell receptor. This leads to ...

Flow Cytometry-based Assay for the Monitoring of NK Cell Functions

NK細胞の機能を監視するためのサイトメトリーに基づくアッセイを流します

Natural killer (NK) cells are an important part of the human tumor immune surveillance system. NK cells are able to distinguish between healthy and ...

Assessing Retinal Microglial Phagocytic Function In Vivo Using a Flow Cytometry-based Assay

Assessing Retinal Microglial Phagocytic Function In Vivo Using a Flow Cytometry-based Assay

網膜ミクログリアの貪食機能を評価します<em&gt;インビボ</em&gt;フローサイトメトリーベースのアッセイを使用しました

Microglia are the tissue resident macrophages of the central nervous system (CNS) and they perform a variety of functions that support CNS homeostasis, ...

Isolation and Flow Cytometric Analysis of Human Endocervical Gamma Delta T Cells

ヒト子宮頸管ガンマ・デルタT細胞の単離およびフローサイトメトリー分析

The female reproductive tract (FRT) mucosal immune system serves as the first line of defense. Better knowledge of the genital mucosa is therefore ...

A Flow Cytometry-Based Cytotoxicity Assay for the Assessment of Human NK Cell Activity

ヒト NK 細胞活性の評価の流れのフローサイトメトリーを用いた細胞毒性の試金

Within the innate immune system, effector lymphocytes known as natural killer (NK) cells play an essential role in host defense against aberrant cells, ...

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

カルボキシフルオレスチンスクシニミジルエステルを用いたヒト抗原特異的CD4+T細胞の増殖の定量化

Described is a simple, in vitro, dye dilution-based method for measuring antigen-specific CD4+ T cell proliferation in human peripheral blood mononuclear ...

Isolation of Mouse Kidney-Resident CD8+ T cells for Flow Cytometry Analysis

Isolation of Mouse Kidney-Resident CD8+ T cells for Flow Cytometry Analysis

フローサイトメトリー解析のためのマウス腎臓レジデントCD8+T 細胞の分離

Tissue-resident memory T cell (TRM) is a rapidly expanding field of immunology research. Isolating T cells from various non-lymphoid tissues is one of the ...

ミトコンドリア、リソソーム T 細胞のマルチカラー フロー フローサイトメトリーを用いた定量化

ミトコンドリア、リソソーム T 細胞のマルチカラーフローフローサイトメトリーを用いた定量化